CN112533935B

CN112533935B - 一种铂类化合物磷酸盐及其制备方法

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Publication number: CN112533935B
Application number: CN201980051809.8A
Authority: CN
Inventors: 高泽军
Original assignee: Beijing Showby Pharmaceutical Co ltd
Current assignee: Beijing Showby Pharmaceutical Co ltd
Priority date: 2018-09-01
Filing date: 2019-08-28
Publication date: 2023-01-13
Anticipated expiration: 2039-08-28
Also published as: EP3845544B1; EP3845544A4; JP2021535166A; EP3845544C0; CN112533935A; US20210253619A1; KR102645496B1; CA3110611A1; US11661434B2; EP3845544A1; KR20210044832A; WO2020043144A1; AU2019326814B2; JP7180923B2; AU2019326814A1

Abstract

提供2‑(4‑二乙胺基)丁基丙二酸‑(1R,2R)‑(‑)‑1,2‑环己二胺合铂(II)磷酸盐，其溶解度高、吸湿性较低、稳定性好，适用于制备成各种抗肿瘤药物制剂。还提供无定型的2‑(4‑二乙胺基)丁基丙二酸‑(1R,2R)‑(‑)‑1,2‑环己二胺合铂(II)磷酸盐的制备方法，其操作简单，便于产业化实现。

Description

一种铂类化合物磷酸盐及其制备方法

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及4-(二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)磷酸盐、其制备方法，及其药物组合物。

背景技术

癌症(恶性肿瘤)是目前威胁人类生命的最主要的疾病之一。铂类抗肿瘤药是最重要的一类抗肿瘤药物，现已相继成功开发了顺铂(Cisplatin)、卡铂(Carboplatin)、奥沙利铂(Oxaliplatin)等，有统计数据表明，现在所有的化疗方案中有70％～80％用铂类药物参与配伍。

为减少铂类化疗药物的毒副作用、提高疗效、减少肿瘤复发和避免抗药性的产生，以及提高铂类化合物的水溶性，人们进行了大量的研究。例如顺铂的溶解度为2.65mg/ml，奥沙利铂的溶解度为7.9mg/ml，卡铂的溶解度为17.8mg/ml，而且奥沙利铂和卡铂等的毒副作用与顺铂比较有所降低，不足的是以上所谓水溶性铂类化合物的溶解度仍然处于微溶或略溶之间,而且抗肿瘤活性远低于顺铂。Murray A.Plan等制备了铂类化合物的醇钠盐,体外有效地提高了溶解度(US4322362A)，但其化合物必须在pH10以上的条件下才能溶解，而且毒性问题也未得到有效解决。Giulia C等也制备了一系列铂化合物，然而这些化合物的溶解度还是未能得到明显改善(Chem Med Chem，2009，4(10),1677-1685)。WO2006091790A1也公开了具有特定结构的一系列铂化合物，但同样未能成功解决溶解度和毒性问题。

WO2013007172A1、WO2013041014A1、WO2013083058A1、WO2014075391A1、WO2014114183A1等公开了一系列水溶性铂类化合物，其在水中具有50mg/ml以上的溶解度，部分优选化合物的溶解度可达到100mg/ml甚至300mg/ml以上。

WO2014075391A1实施例3公开了化合物4-(二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)、其对甲苯磺酸盐、硫酸盐、甲磺酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、乙酸盐、枸橼酸盐等，及其制备方法。但该化合物在水等溶剂中几乎不溶，在甲醇中微溶，且pH值大于10，不适于制备成为可临床使用的药物制剂；与上述酸成盐后，溶解度大为改善，pH值为3-5，但在空气中引湿性极强，容易潮解，在现有的GMP生产条件下，难以控制水分含量而生产出质量可靠的原料药。令人意想不到的是磷酸盐水中溶解度大于500mg/ml，但在空气中的吸湿速度低于其它盐类，因而制备过程能确保质量可控，例如在空气低相对湿度(RH44％)和较高相对湿度(RH69％)的条件下1h内，其它盐的吸湿大都超过3％甚至5％，超出了质量标准含水量的限度；磷酸盐吸湿后性状稳定是生产合格原料的重要条件，而其它盐吸湿后很容易产生性状变化。另外，在制备中间体4-(二乙胺基)丁基丙二酸二盐时，原文献未对产物进行分离，直接将反应液用于下步反应，易造成投料量不准确，产生杂质，本发明通过改变溶剂，能得到4-(二乙胺基)丁基丙二酸盐纯品，为下一步反应质量控制提供了良好的基础；在制备(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺二水合铂(Ⅱ)时使用硫酸银，由于硫酸银在水或其它溶剂中溶解度较小，进行化学反应时需要较大反应体积，难于放大生产，从而限制了该产品的生产规模。通过使用改进后的方法，反应体积缩小为原来体积的40％，所得2-(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)的纯度达到99.5％以上。

本发明还对4-(二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)及其多种盐类的晶型进行了测定，结果显示游离碱与各种盐类的X-粉末衍射图谱差异显著，各种盐的粉末衍射图谱亦有显著差异。该化合物磷酸盐在使用不同溶剂结晶时，所得晶型不同(衍射峰位置不同)，最后选用冻干方法制备该化合物，大批量制备时显示其晶型稳定。选用磷酸盐的稳定晶型制备了药物制剂，其X-粉末衍射图谱与原料一致。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种式(1)化合物，即4-(二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)磷酸盐：

式(1)化合物不仅水中溶解度大于500mg/ml，且在空气中吸湿性较低，容易保存并有利于制备成为临床上使用的药物制剂。

式(1)化合物在不同溶剂条件下结晶，所得晶型不同，优选具有附图6所示的X-粉末衍射图谱特征峰的晶型，该晶型稳定，重现性好。

本发明的另一目的提供式(1)化合物的制备方法，所述方法包括如下步骤：

(1)根据国际公布号WO2014075391A1公开的方法制备得到4-二乙胺基丁基丙二酸二盐溶液，加入溶剂结晶得到4-二乙胺基丁基丙二酸二盐；溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇、乙腈、丙酮、二甲亚砜(DMSO)等或其混合物，优选乙醇。

(2)根据国际公布号WO2014075391A1公开的方法使用4-二乙胺基丁基丙二酸二盐(I)制备得到(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺二碘合铂(Ⅱ)，(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺二碘合铂(Ⅱ)与硝酸银在溶剂中反应制得(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺二水合铂(Ⅱ)盐；(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺二碘合铂(Ⅱ)与硝酸银的摩尔比为1-3:1，优选为1:1；溶剂选自水、甲醇、乙醇、异丙醇等，优选水；反应温度范围0-60℃，优选40-50℃，反应时间2-10小时，优选5-6小时。

(3)根据国际公布号WO2014075391A1公开的方法使用(4-二乙胺基)丁基丙二酸二盐与(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺二水合铂(Ⅱ)盐制备得到式(1)化合物。

(4)式(1)化合物溶于水中，冷冻干燥得结晶终产物。

本发明的又一目的是提供含有式(1)的药物组合物。

本发明的药物组合物制剂包括但不限于冻干粉、原料药分装制剂和注射液；冻干粉、原料药分装制剂使用时加入5％葡萄糖或甘露醇输液中静脉滴注。

本发明进一步提供了一种含有的式(1)化合物结晶态固体的注射用药物制剂。该注射用药物制剂含0.002％-100％，优选5％-100％，最优选25％-100％(重量)的式(1)化合物，其余部分由合适的药物载体和/或赋形剂组成。可通过本领域中熟知的方法，使用合适的载体和/或赋形剂与式(1)化合物制备成注射用药物制剂，合适的赋形剂的实例包括但不限于乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、磷酸盐缓冲液等。处方研究结果显示各种载体和/或赋形剂，如葡萄糖，磷酸盐缓冲液等对产品外观性状和有关物质无明显影响，因此制剂工艺优选不加任何载体和/或赋形剂。

单位剂量制剂中式(1)化合物的量可以在10mg至1000mg之间，优选50mg至1000mg之间，最优选100mg至500mg之间变化。

可重复给予含式(1)化合物的注射用药物制剂，例如至少2、3、4、5、6、7、8或更多次，或可通过连续输注给予该注射用药物制剂。制剂可采用无菌注射液和无菌包装粉末形式。优选，在pH4.0-7.5中配制注射液。

无菌注射液形式的本发明药物制剂可按本领域中已知技术，用合适的稀释剂或溶剂的无菌注射溶液，可使用的可接受的溶媒和溶剂包括水、葡萄糖溶液、甘露醇溶液等去离子溶液，也可提供冻干形式的本发明药物制剂。

以上药物制剂中还可以进一步包括其他治疗或辅助治疗增殖性疾病的活性成份，或者与其他治疗或辅助治疗增殖性疾病的药物组合使用。例如，本发明之外的抗增生剂、免疫调节剂、抗癌药、细胞毒剂、抗肿瘤辅助用药组合使用。

附图说明

图1：(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)的X-射线粉末衍射谱图

图2：(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)对甲苯磺酸盐的X-射线粉末衍射谱图

图3：(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)甲磺酸盐(的X-射线粉末衍射谱图

图4：(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)L(+)酒石酸盐的X-射线粉末衍射谱图

图5：(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)磷酸盐(A1)的X-射线粉末衍射谱图

图6：(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)磷酸盐(A2)的X-射线粉末衍射谱图

图7：(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)磷酸盐(B)的X-射线粉末衍射谱图。

图8：(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)磷酸盐(C)的X-射线粉末衍射谱图

图9 4-二乙胺基丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)磷酸(D)的X粉末衍射图谱

图10注射用4-二乙胺基丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)磷酸的X粉末衍射图谱

具体实施方式

下面结合实施例和附图对本发明作进一步详细的描述，但发明的实施方式不以任何方式限制本发明的范围。

实施例各化合物的结晶形式测定均用粉末X射线衍射分析仪(Bruker D8advance)进行分析，该仪器配备了LynxEye检测器。样品的2θ扫描角度是从3°到40°，扫描步长是0.02°，光管电压和电流分别为40kV和40mA。样品使用零背景样品架进行检测。本领域普通熟练技术人员应当理解X-射线粉末衍射图具有一定的测量误差，依据所取的测量条件，X-射线粉末衍射图中各谱线强度随条件而波动，相对强度也会随条件而改变，因此不用考虑强度的精确数量级，此外对于常规的X-射线粉末衍射图，典型衍射角的测量误差小于5％，因此本发明晶形不局限于本发明公开于附图中完全一致的晶形，也包括X-射线粉末衍射图基本等同于附图中所示的任何晶形。

¹HNM采用全数字化超导核磁共振谱仪AVANCEⅢ测定，MS采用傅立叶变换回旋共振质谱仪Bruker APEXⅣ测定，C,H,N采用Vario MICRO CUBE元素分析仪测定。

实施例1：(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)

(a)制备4-溴丁基丙二酸二乙酯

取丙二酸二乙酯480.516g(3mol)、1,4-二溴丁烷2290.20g(10.5mol)和二甲基亚砜720ml置于5L三口烧瓶中，冰浴下搅拌，内温8-12℃下分批加入氢氧化钠125.004g(3mol)(约25g/次，2.5h加毕)，在此温度下反应1h。保持12℃以下，滴加600mL冰水。移入分液漏斗中(用少许二氯甲烷洗涤反应器残留)，分出水层。有机层用水(600mL×3次)洗涤，有机层用无水硫酸镁干燥过夜。

滤除干燥剂。先用水泵减压蒸馏，收集50-55mmHg，≤115℃组分(主要为丙二酸二乙酯和1,4-二溴丁烷的混和物)，再用油泵减压蒸除6-8mmHg，≤128℃组分。所余油状物即为4-溴丁基丙二酸二乙酯，共459.46g，收率51.9％。¹H-NMR(CDCl₃)(ppm)4.201(m，4H)，3.404(t，2H，J＝6.7Hz)，3.323(t，1H，J＝7.45Hz)，1.901(m，4H，J＝7Hz)，1.495(m，2H)，1.272(t，6H，J＝7.1Hz)；MS(m/z)333.01,317.04,295.05,281.04.

(b)制备(4-二乙胺基)丁基丙二酸二乙酯

取无水碳酸钾213.02g(1.525mol)和940ml乙腈置于3L三口瓶中搅拌，再加入4-溴丁基丙二酸二乙酯450.00g(1.525mol)、二乙胺213.02g(1.525mol)和1L乙腈。油浴55-60℃反应5h。TLC检测显示反应结束。将反应液移到2L茄瓶中，水泵减压旋蒸除去溶剂。加入异丙醚915ml，外用冰浴冷却下搅拌，10-15℃加入冰水915ml。移入分液漏斗中分出有机层，水层用异丙醚提取(610ml×3次)。合并有机层置于三口瓶中，外用冰盐浴冷却搅拌，保持反应液温度在5-10℃滴加3050ml 0.5mol/LHCl。将液体移入分液漏斗中分出异丙醚层，水层用异丙醚(915ml×4次)洗涤。

取水层置于10L三口瓶中加入1830ml乙酸乙酯外用冰盐浴冷却搅拌，保持反应液温度在5-10℃滴加3659ml 0.5mol/LNaOH。移入分液漏斗中分出有机层，水层再用乙酸乙酯(915ml×3次)提取，合并乙酸乙酯层，用无水硫酸镁干燥过夜。滤除干燥剂，水泵减压(42℃，-0.095MPa)抽尽溶剂得目标产物为油状物309.45g，收率70.6％。¹H-NMR(CDCl₃)(ppm)4.193(m，4H),3.317(t，1H，J＝7.55Hz),2.526(q，4H，J＝7.15Hz),2.404(m，2H),2.040(s),1.912(m，2H),1.477(m，2H),1.326(m，2H),1.265(t，6H，J＝7.15Hz),1.006(t，6H，J＝7.15Hz).MS(m/z)288.22.

(c)制备(4-二乙胺基)丁基丙二酸二钠盐

在10L的反应三口瓶中，加入(4-二乙胺基)丁基丙二酸二乙酯500.00g(1.7397mmol)油状物，磁力搅拌，然后在内温25±5℃滴加2mol/L氢氧化钠的90％乙醇水溶液2175.0mL，滴加过程中有白色固体析出，滴完碱液后，升温回流反应2h后，TLC监控反应终点。

达到反应终点后，在回流状态下，加入无水乙醇3250mL，然后冰水浴冷却至内温0～5℃搅拌析晶1h,然后减压过滤出固体，再用无水乙醇淋洗500mL×3次，再将固体放入55±5℃鼓风烘箱中干燥4h左右，最后得到类白色固体449.7g，收率：93.9％。HPLC检测纯度99.1％，¹H-NMR(D₂O)(ppm)3.15(t,1H),2.40-2.36(m,6H),1.79(m,2H),1.39(m,2H),1.29(m,2H),1.02(t,6H).

(d)制备(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺二碘合铂(Ⅱ)

将氯亚铂酸钾498.096g(1.2mol)和9L纯化水加入50L反应釜中，通N₂、避光，20-25℃搅拌溶解。加入含碘化钾1593.60g(9.6mol)的9L水溶液，50-55℃反应20min。加入含(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺137.04g(1.2mol)的6L水溶液，继续在此温度下反应30min，降温到20-25℃。抽滤，用纯化水1350ml分多次淋洗，再用无水乙醇1350ml分多次淋洗，最后用异丙醚1350ml分多次淋洗，将产物于40℃鼓风干燥。得淡黄色固体666.56g，收率98.6％。¹HNMR(DMSO-d₆)(ppm)6.5-5.5(m,4H),2.5-1.0(m,10H).MS(m/z)601.85,580.92.

(e)制备(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺二水合铂(Ⅱ)硝酸盐水溶液

取纯化水10L和硝酸银180.81g(1.05mol)置于50L反应釜中，加入(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺二碘合铂(Ⅱ)和5L纯化水，通N₂保护并避光下搅拌，40-45℃反应6h。降至室温后静置10分钟，过滤。用纯化水2917ml分多次淋洗，合并得无色透明溶液，即直接用于下步反应。

(f)制备(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(II)

取(4-二乙胺基)丁基丙二酸二钠盐289.01g(1.05mol)和(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺二水合铂(Ⅱ)硝酸盐水溶液(1.05mol)置于50L反应釜中，通N₂保护并避光下搅拌，40-45℃反应6h，室温静置过夜。将反应液在40-45℃下，水泵减压旋蒸浓缩至约剩余9279ml。取内径235mm抽滤漏斗中填入柱层析硅胶(100-200目)292.62g，厚度1.5cm，用纯化水浸湿后抽滤，并用纯化水2336ml分多次淋洗，合并得浅蓝色透明滤液。

将滤液移入50L反应釜中，在避光下搅拌冷却，4-8℃下滴加5％NaOH水溶液2054.27g(2.573mol)，10min滴加完毕，有大量白色固体生成。保持4-8℃搅拌30min。抽滤，并用纯化水1.5L分多次洗涤，产物40℃鼓风干燥过夜，研碎过80目筛。得白色粉末443.22g，收率78.4％。实施例1化合物在水中不溶。

¹H-NMR(DMSO-d₆)(ppm)5.911(m，2H),5.225(m，2H),3.492(t，1H，J＝6.7Hz),2.415(q，4H),2.315(t，2H),1.793(m，4H),1.357(m，2H),0.929(t，6H，J＝7.1Hz).MS(m/z)539.21866.元素分析C 55.27％,H5.08％,N3.03。

X粉末衍射测定采用Bruker GADDS，将粉末样品放入1mm薄壁毛细管中，数据采集期间旋转毛细管，样品与检测器距离为17cm，辐射线为CuKα(45Kv,110mA,

)，数据从3°<2θ<50°收集，样品暴露时间为70秒。

图1为2-(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)的X粉末衍射图谱，该图显示大量的衍射峰。

XRPD代表性峰如表1

表1

实施例1化合物结晶特征为X粉末衍射图(

在约25℃)，还可通过下列数据进行表征；包括选自下面的2θ值：4.3±0.2，8.7±0.2，12.2±0.2，13.2±0.2，17.0±0.2，17.6±0.2，20.4±0.2，21.7±0.2，22.8±0.2，25.3±0.2，26.5±0.2。

实施例2

2-(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)对甲苯磺酸盐

取2-(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)游离碱3.50g(6.51mmol)悬浮于100mL甲醇中，室温搅拌，滴加20mL含对甲苯磺酸1.311g(7.62mmol)的甲醇溶液，加毕，继续搅拌反应1小时，溶液呈无色透明。加活性炭脱色，过滤，减压除去部分溶剂甲醇，加乙酸乙酯冷却结晶，用布氏漏斗滤集固体，减压真空干燥得白色粉末状目标产物4.62g，收率97.6％。

图2为2-(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)对甲苯磺酸盐的X粉末衍射图谱，该图显示该化合物无衍射峰。

实施例3

2-(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)甲磺酸盐

取2-(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)游离碱2.50g(4.64mmol)悬浮于50mL甲醇中，室温搅拌，滴加50mL含甲磺酸0.47g(4.87mmol)的甲醇溶液，加毕，继续搅拌反应1小时，溶液呈无色透明。加活性炭脱色，过滤，减压除去部分溶剂甲醇，加乙酸乙酯冷却结晶，用布氏漏斗滤集固体，减压真空干燥得白色粉末状目标产物2.95g，收率99.5％。

图3为2-(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)甲磺酸盐的X粉末衍射图谱，该图显示该化合物无明显的衍射峰。

实施例4

2-(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)L-(+)酒石酸盐

取2-(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)游离碱1.20g(2.23mmol)悬浮于30mL甲醇中，室温搅拌，滴加20mL含L-(+)酒石酸0.35g(2.39mmol)的甲醇溶液，加毕，继续搅拌反应1小时，溶液呈无色透明。加活性炭脱色，过滤，减压除去甲醇，加乙醇溶解，冷却结晶，用布氏漏斗滤集固体，减压真空干燥得白色粉末状目标产物1.15g，收率74.9％。

图4为2-(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)L-(+)酒石酸盐的X粉末衍射图谱，该图显示该化合物无明显的衍射峰。

实施例5 2-(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)磷酸盐

取磷酸224.04g(644.937mmol)和4.5L甲醇置于10L三口烧瓶中，冰盐浴冷却搅拌至-5～0℃，加入2-(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)，并用预冷至-10～-5℃的甲醇1.3L洗涤残留。-5～0℃反应30min。取内径235mm抽滤漏斗中填入柱层析硅胶(100-200目)292.62g，厚度1.5cm，用异丙醚23.773L浸湿后抽滤，并用预冷至-5～0℃的甲醇1.9L分3次洗涤，合并得无色透明滤液。

将滤液置于50L反应釜中，搅拌下加入预冷至0～5℃的异丙醚15.39L，5-10min加毕，有大量白色固体生成，搅拌40min后抽滤，用预冷至-5～0℃的异丙醚1.5L反复洗涤。

取异丙醚6L置于50L反应釜中，冷却至-5～0℃，搅拌下加入滤饼，并用预冷至-5～0℃的异丙醚2.4L分多次洗涤残留。-5～0℃下搅拌10min。抽滤并用异丙醚洗涤，固体于40℃下鼓风干燥过夜，研碎过80目筛，真空干燥(-0.095MPa，室温，内置P₂O₅)6h。得产物2-(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)磷酸盐白色固体360.07g，收率87.7％。

用此方法制备的结晶定义为结晶A1。

图5为(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)磷酸盐(结晶A1)的X粉末衍射图谱。谱图数据见表2：

表2

式(1)化合物结晶(A1)特征为X粉末衍射图(

在约25℃)，还可通过下列数据进行表征；包括选自下面的2θ值：4.0±0.2，6.7±0.2，6.9±0.2。

将上述所得的2-(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)磷酸盐结晶(A1)溶于500mL无菌水中，过滤，冷冻干燥，得产品342.7克，收率95.2％。

此方法制得产品结晶定义为结晶A2共对三批产品进行X粉末衍射图检测，三批检测结果均与图6一致，说明用本方法制备(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)磷酸盐能保证质量可控。¹H-NMR(DMSO-d₆)(ppm)6.75(宽峰),5.90-5.96(m，2H)，5.27-5.29(m，2H)，3.51-3.55(t,1H)，2.82-2.85(q，4H)，2.69-2.73(t，2H)，2.08(m，2H)，1.79-1.83(m，2H)，1.79-1.83(m，2H)，1.53-1.59(m,2H)，1.44-1.15(m，2H)，1.22-1.29(m，2H)，1.22-1.29(m，2H)，1.09-1.13(t，6H)，0.97-1.04(m，2H)。

图6为(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)磷酸盐(结晶A2)的X粉末衍射图谱。结果见表3：

表3

式(1)化合物结晶(A2)特征为X粉末衍射图(

在约25℃)，还可通过下列数据进行表征；包括选自下面的2θ值：4.0±0.2，8.0±0.2。

实施例6：

在100ml反应三口瓶中，加入20ml异丙醇水溶液(95:5)，然后冰浴冷却至内温0～5℃，加入2-(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)(游离碱)化合物1.08g(2.0mmol)，使固体完全悬浮于溶液中，保持在0～5℃搅拌15min，然后在内温0～5℃滴加入含磷酸0.235g(2.40mmol)异丙醇水溶液5mL，滴完异丙醇后保持在内温0～5℃搅拌析晶40min，溶液完全变为透明，反应终止。减压除去部分异丙醇，冷冻结晶，滤集固体，减压干燥得2-(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)磷酸盐1.01g,收率79.4％。

用此方法制备的结晶定义为结晶B。用X粉末衍射测定其晶型。图7为2-(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)磷酸盐(B)的X粉末衍射图谱，该图显示该化合物有衍射峰。

表4

式(1)化合物结晶特(B)征为X粉末衍射图(

在约25℃)，还可通过下列数据进行表征；包括选自下面的2θ值：4.5±0.2，8.83±0.2，20.4±0.2。

实施例7：

在100ml反应三口瓶中，加入15mL异丙醇水溶液(90:10)，然后冰浴冷却至内温0～5℃，加入2-(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)(游离碱)化合物1.08g(2.0mmol)，使固体完全悬浮于溶液中，保持在0～5℃搅拌15min，然后在内温0～5℃滴加入含磷酸0.235g(2.40mmol)异丙醇水(90:10)溶液3mL，滴完异丙醇后保持在内温0～5℃搅拌析晶30min，溶液完全变为透明，反应终止。向溶液中滴加10mL异丙醇，冷冻结晶，滤集固体，减压干燥得2-(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)磷酸盐1.12g,收率88.1％。

用此方法制备的结晶定义为结晶C。

用X粉末衍射测定其晶型，图8为2-(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)磷酸盐(C)的X粉末衍射图谱，该图显示该化合物衍射峰。

表5

式(1)化合物结晶(C)特征以X粉末衍射图(

在约25℃)，还可通过下列数据进行表征；包括选自下面的2θ值：3.8±0.2，4.4±0.2，7.5±0.2，19.9±0.2，20.4±0.2，20.8±0.2。

实施例8：

在100ml反应三口瓶中，加入22ml无水甲醇，盐冰浴冷却至内温-10～-5℃，再加入2-(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)(游离碱)1.08g(2.0mmol)，使固体完全溶于无水甲醇中，保持在-10～-5℃搅拌30min，然后在内温-5～0℃滴加入含磷酸0.235g(2.40mmol)异丙醇溶液15ml，滴完异丙醇后保持在内温-5～0℃搅拌析晶10min，减压过滤得2-(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)磷酸盐0.89g，收率69.9％。

图9为2-(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)磷酸盐的X粉末衍射图谱，该图显示该化合物有衍射峰。用此方法制备的结晶定义为结晶D。

表6

式(1)化合物结晶(D)特征为X粉末衍射图(

在约25℃)，还可通过下列数据进行表征；包括选自下面的2θ值：3.9±0.2，6.8±0.2，7.1±0.2.

制剂实施例1

式(1)化合物(A2)型结晶 20g

甘露醇 50g

注射用水加至 1000ml

制成1000支

工艺：将低结晶度的式(1)化合物20g和甘露醇50g，加入1000ml玻璃器皿中，在低温下(2-8℃)加入注射用水1000ml使溶解，加入药用活性炭2.0，搅拌10min后，静置吸附20min。用0.22μm微孔滤膜过滤后，分装入2ml西林瓶中，每瓶灌装1ml溶液，冷冻干燥，即得，规格为20mg/瓶。产品为白色疏松块状物，pH值为4.10。

制剂例2：

式(1)化合物(A2)型结晶 100g

注射用水加至 1000ml

工艺：将低结晶度的式(1)化合物50g，加入1000ml玻璃器皿中，在低温下(2-8℃)加入注射用水1000ml使溶解，加入药用活性炭2.0克，搅拌10min后，静置吸附20min。用0.22μm微孔滤膜过滤后，分装入2ml西林瓶中，每瓶灌装1ml溶液，冷冻干燥，即得，规格为100mg/瓶。

产品为白色疏松块状物，pH值4.20。

X粉末衍射图谱如图10，其晶型的衍射图与原料相同，表现为峰形较钝，峰形宽，表明结晶存在缺陷，或是粒径或晶癖等影响了峰形；主要的衍射峰的2θ角与原料一致，这说明用水作溶剂时多次冷冻干燥对晶型不会产生影响。在动物模型上，该药的药效学和毒理学证明此种晶型在实用中安全有效。

表7

式(1)化合物冻干制剂结晶特征为X粉末衍射图(

在约25℃)，还可通过下列数据进行表征；包括选自下面的2θ值：4.1±0.2，8.0±0.2。

制剂例3：

式(1)化合物(A2)型结晶 20g

磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液加至 100ml

工艺：将低结晶度的式(1)化合物20g，加入200ml玻璃器皿中，在低温下(2-8℃)加入磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液(pH6.0)100ml使溶解，加入药用活性炭0.5克，搅拌10min后，静置吸附20min。用0.22μm微孔滤膜过滤后，分装入2ml西林瓶中，每瓶灌装1ml溶液，冷冻干燥，即得，规格为200mg/瓶。

产品为白色疏松块状物，pH值4.67。

实验例：2-(4-二乙胺基)丁基丙二酸-(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)的各种盐类溶解度和引湿性实验

Claims

1.一种结晶型的式(1)结构所示的铂类化合物：

其特征在于，在X-粉末衍射图中，在2θ值为4.0±0.2和8.0±0.2处具有衍射峰。

2.根据权利要求1所述的铂类化合物，其特征在于，其使用Cu/Kα测得的X-粉末衍射图谱的衍射峰情况为：

3.根据权利要求1所述的铂类化合物，其特征在于，具有附图6所示的X-粉末衍射图谱特征峰。

4.一种结晶型的式(1)结构所示的铂类化合物：

其特征在于，在X-粉末衍射图中，在2θ值为4.0±0.2、6.7±0.2和6.9±0.2处具有衍射峰。

5.根据权利要求4所述的铂类化合物，其特征在于，其使用Cu/Kα测得的X-粉末衍射图谱的衍射峰情况为：

6.根据权利要求4所述的铂类化合物，其特征在于，具有附图5所示的X-粉末衍射图谱特征峰。

7.一种结晶型的式(1)结构所示的铂类化合物：

其特征在于，在X-粉末衍射图中，在2θ值为4.5±0.2、8.83±0.2和20.4±0.2处具有衍射峰。

8.根据权利要求7所述的铂类化合物，其特征在于，其使用Cu/Kα测得的X-粉末衍射图谱的衍射峰情况为：

9.根据权利要求7所述的铂类化合物，其特征在于，具有附图7所示的X-粉末衍射图谱特征峰。

10.一种结晶型的式(1)结构所示的铂类化合物：

其特征在于，在X-粉末衍射图中，在2θ值为3.8±0.2、4.4±0.2、7.5±0.2、19.9±0.2、20.4±0.2和20.8±0.2处具有衍射峰。

11.根据权利要求10所述的铂类化合物，其特征在于，其使用Cu/Kα测得的X-粉末衍射图谱的衍射峰情况为：

12.根据权利要求10所述的铂类化合物，其特征在于，具有附图8所示的X-粉末衍射图谱特征峰。

13.一种结晶型的式(1)结构所示的铂类化合物：

其特征在于，在X-粉末衍射图中，在2θ值为3.9±0.2、6.8±0.2和7.1±0.2处具有衍射峰。

14.根据权利要求13所述的铂类化合物，其特征在于，其使用Cu/Kα测得的X-粉末衍射图谱的衍射峰情况为：

15.根据权利要求13所述的铂类化合物，其特征在于，具有附图9所示的X-粉末衍射图谱特征峰。

16.根据权利要求1至3中任一项所述的铂类化合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)根据国际公布号WO2014075391A1公开的方法制备得到4-二乙胺基丁基丙二酸二盐溶液，加入溶剂结晶得到4-二乙胺基丁基丙二酸二盐；溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇、乙腈、丙酮、DMSO或其混合物；

(2)根据国际公布号WO2014075391A1公开的方法使用4-二乙胺基丁基丙二酸二盐制备得到(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺二碘合铂(Ⅱ)，(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺二碘合铂(Ⅱ)与硝酸银在溶剂中反应制得(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺二水合铂(Ⅱ)盐；(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺二碘合铂(Ⅱ)与硝酸银的摩尔比为1-3:1；溶剂选自水、甲醇、乙醇、异丙醇；反应温度范围0-60℃；反应时间2-10小时；

(3)根据国际公布号WO2014075391A1公开的方法使用(4-二乙胺基)丁基丙二酸二盐与(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺二水合铂(Ⅱ)盐制备得到式(1)化合物；

(4)式(1)化合物溶于水中，冷冻干燥得结晶终产物。

17.根据权利要求16所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述溶剂为乙醇。

18.根据权利要求16所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中(1R,2R)-(-)-1,2-环己二胺二碘合铂(Ⅱ)与硝酸银的摩尔比为1:1。

19.根据权利要求16所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述溶剂为水。

20.根据权利要求16所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)的反应温度为40-50℃。

21.根据权利要求16所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)的反应时间为5-6小时。

22.一种药物组合物，其特征在于，包含权利要求1至15中任一项所述的铂类化合物。