CN112375074B - 作为磷脂酰肌醇3-激酶δ抑制剂的取代嘧啶类化合物及其应用 - Google Patents

作为磷脂酰肌醇3-激酶δ抑制剂的取代嘧啶类化合物及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN112375074B
CN112375074B CN202011120786.2A CN202011120786A CN112375074B CN 112375074 B CN112375074 B CN 112375074B CN 202011120786 A CN202011120786 A CN 202011120786A CN 112375074 B CN112375074 B CN 112375074B
Authority
CN
China
Prior art keywords
formula
alkyl
compound
radical
reaction
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202011120786.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN112375074A (zh
Inventor
王勇
刘晓蓉
黄丹丹
张雁
开玉美
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Nanjing Sanhome Pharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
Nanjing Sanhome Pharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nanjing Sanhome Pharmaceutical Co Ltd filed Critical Nanjing Sanhome Pharmaceutical Co Ltd
Publication of CN112375074A publication Critical patent/CN112375074A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN112375074B publication Critical patent/CN112375074B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Abstract

本发明属于医药化学领域，涉及一类作为磷脂酰肌醇3‑激酶(PI3K)δ抑制剂的取代嘧啶类化合物及其应用，具体地，本发明提供式I所示的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，它们的制备方法以及含有这些化合物的药物组合物和这些化合物或组合物用于治疗癌症、组织增生类疾病或者炎性疾病的用途。本发明的化合物对PI3Kδ具有良好的抑制活性，选择性高，非常有希望成为癌症、组织增生类疾病及炎性疾病的治疗剂。

Description

作为磷脂酰肌醇3-激酶δ抑制剂的取代嘧啶类化合物及其 应用
本申请是申请日为2016年3月4日、发明名称为“作为磷脂酰肌醇3-激酶δ抑制剂的取代嘧啶类化合物及其应用”的中国专利申请CN201680003821.8的分案申请。
技术领域
本发明属于医药化学领域，具体涉及一类作为磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)δ抑制剂的取代嘧啶类化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，它们的制备方法以及含有这些化合物的药物组合物和这些化合物或组合物用于治疗癌症、组织增生类疾病或者炎性疾病的用途。
背景技术
PI3K(磷脂酰肌醇3-激酶)是独特和保守的细胞内脂质激酶家族的成员，其磷酸化磷脂酰肌醇上的3’-OH基团。根据结构和磷酸化底物的不同，PI3K可分为I、II、III三种类型，其中I型PI3K是目前研究的热点，其在调节具有PI3K活性、有助于炎症细胞促肿瘤生成效应的免疫细胞中起重要作用(Coussens和Werb，Nature，2002，420，860-867)，具有治疗各种形式的癌症疾病的治疗价值，包括实体瘤(例如癌和肉瘤)、白血病和淋巴恶性肿瘤。I型PI3K由p110单位和p85单位组成，目前已知的p110亚单位有四种，即p110α、p110β、p110γ和p110δ，其中p110δ主要在脾和造血细胞包括白细胞如T细胞、树突细胞、嗜中性粒细胞、肥大细胞、B细胞和巨噬细胞中表达。PI3Kδ完整地参与了哺乳动物免疫系统功能如T细胞功能、树突细胞功能、嗜中性粒细胞活性、肥大细胞活化、B细胞活化。因此，PI3Kδ也参与多种与异常免疫相关的疾病，例如变态反应、炎性疾病、炎症介导的血管生成、类风湿性关节炎、自身性免疫性疾病如红斑性狼疮、哮喘、肺气肿和其他呼吸道疾病。
对于靶向PI3K途径的药物研究已进行了多年，临床上取得了一些成功，特别是近来发现选择性的PI3Kδ抑制剂在癌症等疾病的治疗中有明显的疗效。不过，仍然需要开发更优异的PI3K抑制剂，尤其是选择性PI3Kδ抑制剂，以便特异性地调控和/或调解PI3K和相关蛋白激酶的转导，从而用于治疗与PI3K激酶介导的事件相关的疾病。
发明内容
本发明的一个目的是提供通式I的一类具有PI3K抑制活性的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，
Figure BDA0002731958400000021
其中，
Y选自O和N(Rb)，其中Rb选自氢、烷基、卤代烷基和环烷基；
R1选自氢、羟基、卤素、烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基、硝基、羧基、氰基、氨基、单烷基氨基和双烷基氨基，m选自1、2、3和4；
R2选自亚烷基、亚烯基、亚炔基和亚环烷基，所述亚烷基、亚烯基、亚炔基和亚环烷基可被一个或多个烷基、卤代烷基、羟基、羟基烷基、卤素、氧代基团、烷氧基、羧基、氰基、氨基、单烷基氨基或双烷基氨基取代；
Cy1选自芳基和杂芳基，所述芳基和杂芳基可被一个或多个卤素、羟基、氧代基团、氨基、羧基、氰基、硝基、烷基、环烷基、杂环烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基烷基、氨基烷基、羧基烷基、氰基烷基、硝基烷基、环烷基烷基、杂环烷基烷基、烷氧基烷基、单烷基氨基、单烷基氨基烷基、双烷基氨基、双烷基氨基烷基、烷基酰基、烷基酰基烷基、烷氧基酰基、烷氧基酰基烷基、烷基酰基氧基、烷基酰基氧基烷基、氨基酰基、氨基酰基烷基、单烷基氨基酰基、单烷基氨基酰基烷基、双烷基氨基酰基、双烷基氨基酰基烷基、烷基酰基氨基或烷基酰基氨基烷基取代；
Ra选自H和烷基；和
R3、R4、R5分别独立地选自氢、卤素、羟基、氧代基团、氨基、羧基、氰基、硝基、烷基、环烷基、杂环烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基烷基、氨基烷基、羧基烷基、氰基烷基、硝基烷基、环烷基烷基、杂环烷基烷基、烷氧基烷基、单烷基氨基、单烷基氨基烷基、双烷基氨基、双烷基氨基烷基、烷基酰基、烷基酰基烷基、烷氧基酰基、烷氧基酰基烷基、烷基酰基氧基、烷基酰基氧基烷基、氨基酰基、氨基酰基烷基、单烷基氨基酰基、单烷基氨基酰基烷基、双烷基氨基酰基、双烷基氨基酰基烷基、烷基酰基氨基和烷基酰基氨基烷基。
本发明的另一个目的是提供制备本发明的通式I的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药的方法。
本发明的再一个目的是提供包含本发明的通式I的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药和药学可接受的载体的组合物，以及包含本发明的通式I的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药和另一种或多种PI3K抑制剂的组合物。
本发明的还一个目的是提供本发明的通式I的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药治疗和/或预防肿瘤、组织增生类疾病或炎性疾病的方法，以及本发明的通式I的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药在制备用于治疗和/或预防肿瘤、组织增生类疾病或炎性疾病的药物中的应用。
针对上述目的，本发明提供以下技术方案：
第一方面，本发明提供通式I的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，
Figure BDA0002731958400000031
其中，
Y选自O和N(Rb)，其中Rb选自氢、烷基、卤代烷基和环烷基；
R1选自氢、羟基、卤素、烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基、硝基、羧基、氰基、氨基、单烷基氨基和双烷基氨基，m选自1、2、3和4；
R2选自亚烷基、亚烯基、亚炔基和亚环烷基，所述亚烷基、亚烯基、亚炔基和亚环烷基可被一个或多个烷基、卤代烷基、羟基、羟基烷基、卤素、氧代基团、烷氧基、羧基、氰基、氨基、单烷基氨基或双烷基氨基取代；
Cy1选自芳基和杂芳基，所述芳基和杂芳基可被一个或多个卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、烷基、环烷基、杂环烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基烷基、氨基烷基、羧基烷基、氰基烷基、硝基烷基、环烷基烷基、杂环烷基烷基、烷氧基烷基、单烷基氨基、单烷基氨基烷基、双烷基氨基、双烷基氨基烷基、烷基酰基、烷基酰基烷基、烷氧基酰基、烷氧基酰基烷基、烷基酰基氧基、烷基酰基氧基烷基、氨基酰基、氨基酰基烷基、单烷基氨基酰基、单烷基氨基酰基烷基、双烷基氨基酰基、双烷基氨基酰基烷基、烷基酰基氨基或烷基酰基氨基烷基取代；
Ra选自H和烷基；和
R3、R4、R5分别独立地选自氢、卤素、羟基、氧代基团、氨基、羧基、氰基、硝基、烷基、环烷基、杂环烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基烷基、氨基烷基、羧基烷基、氰基烷基、硝基烷基、环烷基烷基、杂环烷基烷基、烷氧基烷基、单烷基氨基、单烷基氨基烷基、双烷基氨基、双烷基氨基烷基、烷基酰基、烷基酰基烷基、烷氧基酰基、烷氧基酰基烷基、烷基酰基氧基、烷基酰基氧基烷基、氨基酰基、氨基酰基烷基、单烷基氨基酰基、单烷基氨基酰基烷基、双烷基氨基酰基、双烷基氨基酰基烷基、烷基酰基氨基和烷基酰基氨基烷基。
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式I的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，其中：
Y选自O和N(Rb)，其中Rb选自氢、C1-6烷基、卤代C1-6烷基和C3-6环烷基；
进一步优选地，Y选自O和N(Rb)，其中Rb选自氢、C1-3烷基、卤代C1-3烷基和C3-6环烷基；
更进一步优选地，Y选自O和N(Rb)，其中Rb选自氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、环丙基、环丁基、环戊基和环己基。
在一些具体的实施方案中，本发明的化合物为通式I的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，其中Y为O。
在另一些具体的实施方案中，本发明的化合物为通式I的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，其中Y为N(Rb)，其中Rb选自氢、甲基、乙基和环丙基。
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式I的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，其中：
R1选自氢、羟基、卤素、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基、硝基、羧基、氰基、氨基、单C1-6烷基氨基和双C1-6烷基氨基；
进一步优选地，R1选自氢、羟基、卤素、C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、C1-3烷氧基、硝基、羧基、氰基、氨基、单C1-3烷基氨基和双C1-3烷基氨基；
更进一步优选地，R1选自氢、羟基、卤素、甲基、乙基、丙基、异丙基、三氟甲基、羟基甲基、甲氧基、硝基、羧基、氰基、氨基、甲氨基和二甲氨基。
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式I的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，其中：
R2选自亚C1-10烷基、亚C3-10环烷基、亚C2-10烯基和亚C2-10炔基，所述亚C1-10烷基、亚C3-10环烷基、亚C2-10烯基和亚C2-10炔基可被一个或多个C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基、羟基C1-6烷基、卤素、氧代基团、C1-6烷氧基、羧基、氰基、氨基、单C1-6烷基氨基或双C1-6烷基氨基取代；
进一步优选地，R2选自亚C1-6烷基、亚C3-6环烷基、亚C2-6烯基和亚C2-6炔基，所述的亚C1-6烷基、亚C3-6环烷基、亚C2-6烯基和亚C2-6炔基可被一个或多个C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基、羟基C1-3烷基、卤素、氧代基团、C1-3烷氧基、羧基、氰基、氨基、单C1-3烷基氨基或双C1-3烷基氨基取代；
更进一步优选地，R2为亚C1-3烷基，所述亚C1-3烷基可被一个或多个C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基、羟基C1-3烷基、卤素、氧代基团、C1-3烷氧基、羧基、氰基、氨基、单C1-3烷基氨基或双C1-3烷基氨基取代。
在一些具体的实施方案中，本发明的化合物为通式I的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，其中：
R2选自亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚环丙基、亚环丁基、亚环戊基、亚环己基、亚乙烯基、亚丙烯基、亚丁烯基、亚戊烯基、亚己烯基、亚乙炔基、亚丙炔基、亚丁炔基、亚戊炔基和亚己炔基，所述的亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚环丙基、亚环丁基、亚环戊基、亚环己基、亚乙烯基、亚丙烯基、亚丁烯基、亚戊烯基、亚己烯基、亚丙炔基、亚丁炔基、亚戊炔基和亚己炔基可以被一个或多个甲基、乙基、丙基、异丙基、氧代基团取代。
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式I的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，其中：
Cy1选自芳基和杂芳基，所述芳基和杂芳基可被一个或多个卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C1-6烷基、C3-8环烷基、C3-8杂环烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、羧基C1-6烷基、氰基C1-6烷基、硝基C1-6烷基、环烷基C1-6烷基、C3-8杂环烷基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、单C1-6烷基氨基、单C1-6烷基氨基C1-6烷基、双C1-6烷基氨基、双C1-6烷基氨基C1-6烷基、C1-6烷基酰基、C1-6烷基酰基C1-6烷基、C1-6烷氧基酰基、C1-6烷氧基酰基C1-6烷基、C1-6烷基酰基氧基、C1-6烷基酰基氧基C1-6烷基、氨基酰基、氨基酰基C1-6烷基、单C1-6烷基氨基酰基、单C1-6烷基氨基酰基C1-6烷基、双C1-6烷基氨基酰基、双C1-6烷基氨基酰基C1-6烷基、C1-6烷基酰基氨基或C1-6烷基酰基氨基C1-6烷基取代；
进一步优选地，Cy1选自苯基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、噻吩基、呋喃基、吲哚基、异吲哚基和喹啉基，所述苯基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、噻吩基、呋喃基、吲哚基、异吲哚基和喹啉基可被一个或多个卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C1-6烷基、C3-8环烷基、C3-8杂环烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、羧基C1-6烷基、氰基C1-6烷基、硝基C1-6烷基、C3-8环烷基C1-6烷基、C3-8杂环烷基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、单C1-6烷基氨基、单C1-6烷基氨基C1-6烷基、双C1-6烷基氨基、双C1-6烷基氨基C1-6烷基、C1-6烷基酰基、C1-6烷基酰基C1-6烷基、C1-6烷氧基酰基、C1-6烷氧基酰基C1-6烷基、C1-6烷基酰基氧基、C1-6烷基酰基氧基C1-6烷基、氨基酰基、氨基酰基C1-6烷基、单C1-6烷基氨基酰基、单C1-6烷基氨基酰基C1-6烷基、双C1-6烷基氨基酰基、双C1-6烷基氨基酰基C1-6烷基、C1-6烷基酰基氨基或C1-6烷基酰基氨基C1-6烷基取代；
更进一步优选地，Cy1选自苯基、吡啶基和嘧啶基，所述苯基、吡啶基和嘧啶基可被一个或多个卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C1-3烷基、C3-6环烷基、C3-6杂环烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、氨基C1-3烷基、羧基C1-3烷基、氰基C1-3烷基、硝基C1-3烷基、C3-6环烷基C1-3烷基、C3-6杂环烷基C1-3烷基、C1-3烷氧基C1-3烷基、单C1-3烷基氨基、单C1-3烷基氨基C1-3烷基、双C1-3烷基氨基、双C1-3烷基氨基C1-3烷基、C1-3烷基酰基、C1-3烷基酰基C1-3烷基、C1-3烷氧基酰基、C1-3烷氧基酰基C1-3烷基、C1-3烷基酰基氧基、C1-3烷基酰基氧基C1-3烷基、氨基酰基、氨基酰基C1-3烷基、单C1-3烷基氨基酰基、单C1-3烷基氨基酰基C1-3烷基、双C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基酰基C1-3烷基、C1-3烷基酰基氨基或C1-3烷基酰基氨基C1-3烷基取代。
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式I的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，其中Ra选自氢和C1-6烷基，进一步优选地，Ra选自氢和C1-3烷基，更进一步优选地，Ra选自H、甲基、乙基和丙基。
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式I的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，其中：
R3、R4、R5分别独立地选自氢、卤素、羟基、氧代基团、氨基、羧基、氰基、硝基、C1-6烷基、C3-6环烷基、C3-6杂环烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、羧基C1-6烷基、氰基C1-6烷基、硝基C1-6烷基、C3-6环烷基C1-6烷基、C3-6杂环烷基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、单C1-6烷基氨基、单C1-6烷基氨基C1-6烷基、双C1-6烷基氨基、双C1-6烷基氨基C1-6烷基、C1-6烷基酰基、C1-6烷基酰基C1-6烷基、C1-6烷氧基酰基、C1-6烷氧基酰基C1-6烷基、C1-6烷基酰基氧基、C1-6烷基酰基氧基C1-6烷基、氨基酰基、氨基酰基C1-6烷基、单C1-6烷基氨基酰基、单C1-6烷基氨基酰基C1-6烷基、双C1-6烷基氨基酰基、双C1-6烷基氨基酰基C1-6烷基、C1-6烷基酰基氨基和C1-6烷基酰基氨基C1-6烷基；
进一步优选地，R3、R4、R5分别独立地选自氢、卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C1-3烷基、C3-6环烷基、C3-6杂环烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、氨基C1-3烷基、羧基C1-3烷基、氰基C1-3烷基、硝基C1-3烷基、C3-6环烷基C1-3烷基、C3-6杂环烷基C1-3烷基、C1-3烷氧基C1-3烷基、单C1-3烷基氨基、单C1-3烷基氨基C1-3烷基、双C1-3烷基氨基、双C1-3烷基氨基C1-3烷基、C1-3烷基酰基、C1-3烷基酰基C1-3烷基、C1-3烷氧基酰基、C1-3烷氧基酰基C1-3烷基、C1-3烷基酰基氧基、C1-3烷基酰基氧基C1-3烷基、氨基酰基、氨基酰基C1-3烷基、单C1-3烷基氨基酰基、单C1-3烷基氨基酰基C1-3烷基、双C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基酰基C1-3烷基、C1-3烷基酰基氨基和C1-3烷基酰基氨基C1-3烷基。
在一些具体的实施方案中，本发明的化合物为通式I的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，其中：
Y选自O和N(Rb)，其中Rb选自氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、环丙基、环丁基、环戊基和环己基；
R1选自氢、羟基、卤素、C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、C1-3烷氧基、硝基、羧基、氰基、氨基、单C1-3烷基氨基和双C1-3烷基氨基，m选自1、2、3和4；
R2选自亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚环丙基、亚环丁基、亚环戊基、亚环己基、亚乙烯基、亚丙烯基、亚丁烯基、亚戊烯基、亚己烯基、亚乙炔基、亚丙炔基、亚丁炔基、亚戊炔基和亚己炔基，所述的亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚环丙基、亚环丁基、亚环戊基、亚环己基、亚乙烯基、亚丙烯基、亚丁烯基、亚戊烯基、亚己烯基、亚丙炔基、亚丁炔基、亚戊炔基和亚己炔基可以被一个或多个甲基、乙基、丙基、异丙基、氧代基团取代；
Cy1选自苯基、吡啶基和嘧啶基，所述苯基、吡啶基和嘧啶基可被一个或多个卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C1-3烷基、C3-6环烷基、C3-6杂环烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、氨基C1-3烷基、羧基C1-3烷基、氰基C1-3烷基、硝基C1-3烷基、C3-6环烷基C1-3烷基、C3-6杂环烷基C1-3烷基、C1-3烷氧基C1-3烷基、单C1-3烷基氨基、单C1-3烷基氨基C1-3烷基、双C1-3烷基氨基、双C1-3烷基氨基C1-3烷基、C1-3烷基酰基、C1-3烷基酰基C1-3烷基、C1-3烷氧基酰基、C1-3烷氧基酰基C1-3烷基、C1-3烷基酰基氧基、C1-3烷基酰基氧基C1-3烷基、氨基酰基、氨基酰基C1-3烷基、单C1-3烷基氨基酰基、单C1-3烷基氨基酰基C1-3烷基、双C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基酰基C1-3烷基、C1-3烷基酰基氨基或C1-3烷基酰基氨基C1-3烷基取代；
Ra选自H、甲基、乙基和丙基；和
R3、R4、R5分别独立地选自氢、卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C1-3烷基、C3-6环烷基、C3-6杂环烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、氨基C1-3烷基、羧基C1-3烷基、氰基C1-3烷基、硝基C1-3烷基、C3-6环烷基C1-3烷基、C3-6杂环烷基C1-3烷基、C1-3烷氧基C1-3烷基、单C1-3烷基氨基、单C1-3烷基氨基C1-3烷基、双C1-3烷基氨基、双C1-3烷基氨基C1-3烷基、C1-3烷基酰基、C1-3烷基酰基C1-3烷基、C1-3烷氧基酰基、C1-3烷氧基酰基C1-3烷基、C1-3烷基酰基氧基、C1-3烷基酰基氧基C1-3烷基、氨基酰基、氨基酰基C1-3烷基、单C1-3烷基氨基酰基、单C1-3烷基氨基酰基C1-3烷基、双C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基酰基C1-3烷基、C1-3烷基酰基氨基和C1-3烷基酰基氨基C1-3烷基。
在另一些具体的实施方案中，本发明的化合物为通式I的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，其中：
Y选自O和N(Rb)，其中Rb选自氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、环丙基；
R1选自氢、羟基、氟、氯、甲基、乙基、丙基、异丙基、三氟甲基、羟甲基、甲氧基、乙氧基、硝基、羧基、氰基、氨基、甲氨基和二甲氨基，m选自1、2、3和4；
R2选自亚甲基和亚乙基，所述的亚甲基和亚乙基可以被一个或多个甲基、乙基、丙基、异丙基、氧代基团取代；
Cy1为苯基，所述苯基可被一个或多个卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C1-3烷基、C3-6环烷基、C3-6杂环烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、氨基C1-3烷基、羧基C1-3烷基、氰基C1-3烷基、硝基C1-3烷基、C3-6环烷基C1-3烷基、C3-6杂环烷基C1-3烷基、C1-3烷氧基C1-3烷基、单C1-3烷基氨基、单C1-3烷基氨基C1-3烷基、双C1-3烷基氨基、双C1-3烷基氨基C1-3烷基、C1-3烷基酰基、C1-3烷基酰基C1-3烷基、C1-3烷氧基酰基、C1-3烷氧基酰基C1-3烷基、C1-3烷基酰基氧基、C1-3烷基酰基氧基C1-3烷基、氨基酰基、氨基酰基C1-3烷基、单C1-3烷基氨基酰基、单C1-3烷基氨基酰基C1-3烷基、双C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基酰基C1-3烷基、C1-3烷基酰基氨基或C1-3烷基酰基氨基C1-3烷基取代；
Ra为H；和
R3、R4、R5分别独立地选自氢、卤素、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、C1-3烷基、C3-6环烷基、C3-6杂环烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、氨基C1-3烷基、羧基C1-3烷基、氰基C1-3烷基、硝基C1-3烷基、C3-6环烷基C1-3烷基、C3-6杂环烷基C1-3烷基、C1-3烷氧基C1-3烷基、单C1-3烷基氨基、单C1-3烷基氨基C1-3烷基、双C1-3烷基氨基、双C1-3烷基氨基C1-3烷基、C1-3烷基酰基、C1-3烷基酰基C1-3烷基、C1-3烷氧基酰基、C1-3烷氧基酰基C1-3烷基、C1-3烷基酰基氧基、C1-3烷基酰基氧基C1-3烷基、氨基酰基、氨基酰基C1-3烷基、单C1-3烷基氨基酰基、单C1-3烷基氨基酰基C1-3烷基、双C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基酰基C1-3烷基、C1-3烷基酰基氨基和C1-3烷基酰基氨基C1-3烷基。
本发明提供了以下具体化合物：
Figure BDA0002731958400000081
Figure BDA0002731958400000091
Figure BDA0002731958400000101
或其药学上可接受的盐。
另一方面，本发明提供本发明的通式化合物的制备方法，包括：1、Y为O的通式I化合物的制备：
Figure BDA0002731958400000102
a)式(1)的化合物与式(2)的化合物酯化反应得到式(3)的中间体；
b)式(3)的中间体与强碱(如钠氢)反应得到式(4)的中间体；
c)式(4)的中间体在酸性条件下环合得到式(5)的中间体；
d)式(5)的中间体经卤代反应得到式(6)的中间体；
e)式(6)的中间体经常规反应得到通式(I)的化合物。
其中，步骤e)的常规反应包括但不限于如下的反应，如将式(6)的中间体氨化后与Y-Rb进行亲核反应得到通式(I)的化合物；或将式(6)的中间体经过成酯、水解、氧化后与叔丁基亚磺酰胺反应得到中间体
Figure BDA0002731958400000111
再将此中间体与烷基试剂后，进一步与Y-Rb进行亲核反应得到通式(I)的化合物；或将式(6)的中间体经氰基化、再水解后与NH2-Rb缩合得到通式(I)的化合物等。
其中，Cy1、R2、R3、R4、R5、m具有通式I中的含义；Ra表示氢；M表示烷基，优选为C1-6烷基，进一步优选为C1-3烷基；M’表示M的一个H被X取代后的亚烷基；M”表示M去掉一个碳原子后的剩余基团，当M为甲基时，M”表示H；X、Y表示卤素，优选为氯、溴、碘。
2、Y为N(Rb)的通式I化合物的制备：
Figure BDA0002731958400000112
a’)式(11)的化合物与三光气反应得到式(12)的中间体；
b’)式(12)的中间体与式(13)的化合物反应得到式(14)的中间体；
c’)式(14)的中间体经还原反应得到式(15)的中间体；
d’)式(15)的中间体经氧化反应得到式(16)的中间体；
e’)式(16)的中间体与烷基化试剂加成反应得到式(17)的中间体；
f’)式(17)的中间体经氧化反应得到式(18)的中间体；
g’)式(18)的中间体与羟胺反应得到式(19)的中间体；
h’)式(19)的中间体经还原反应得到式(20)的中间体；
i’)式(20)的中间体与氨基保护基反应得到式(21)的中间体；
j’)式(21)的中间体与Rb-X亲核反应得到式(22)的中间体；
k’)式(22)的中间体脱氨基保护基，经常规的亲核反应得到通式I的化合物。
其中，Cy1、R2、R3、R4、R5、m和Rb具有通式I中的含义；Ra表示H；R2表示亚烷基，可进一步被烷基取代，当R2表示亚甲基时，式(16)的中间体直接与羟胺反应，再经步骤h’)、i’)、j’)和k’)的方法得到通式I的化合物；T表示烷基，优选为C1-6烷基，进一步优选为C1-3烷基；X表示卤素，优选为氯、溴、碘。
第三方面，本发明提供药物组合物，其包含本发明的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药。
在一些实施方案中，本发明提供药物组合物，其包含本发明的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，还包含选自下列组成的一种或多种：酪氨酸蛋白酶抑制剂、EGFR抑制剂、VEGFR抑制剂、Bcr-Abl抑制剂、c-kit抑制剂、c-Met抑制剂、Raf抑制剂、MEK抑制剂、组蛋白去乙酰酶抑制剂、VEGF抗体、EGF抗体、HIV蛋白激酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂等。
在一些实施方案中，本发明提供本发明的化合物或其或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药及包含本发明的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药的药物组合物，所述化合物或药物组合物用于治疗和/或预防癌症、组织增生类疾病或者炎性疾病。
可以将本发明的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药与药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂混合制备成药物制剂，以适合于经口或胃肠外给药。给药方法包括，但不限于皮内、肌内、腹膜内、静脉内、皮下、鼻内和经口途径。所述制剂可以通过任何途径施用，例如通过输注或推注，通过经上皮或皮肤粘膜(例如口腔粘膜或直肠等)吸收的途径施用。给药可以是全身的或局部的。经口施用制剂的实例包括固体或液体剂型，具体而言，包括片剂、丸剂、粒剂、粉剂、胶囊剂、糖浆、乳剂、混悬剂等。所述制剂可通过本领域已知的方法制备，且包含药物制剂领域常规使用的载体、稀释剂或赋形剂。
第四方面，本发明提供本发明通式(I)所示的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，或包含其的药物组合物在制备治疗和/或预防癌症、组织增生类疾病或者炎性疾病的药物中的用途，其中所述的癌症选自黑素瘤、乳头状甲状腺肿瘤、胆管癌、结肠癌、卵巢癌、肺癌、恶性淋巴肿瘤，肝、肾、膀胱、前列腺、乳腺和胰腺的癌和肉瘤，以及皮肤、结肠、甲状腺、肺和卵巢的原发和复发性实体瘤或者白血病，所述的炎性疾病选自过敏、哮喘、类风湿性关节炎、骨关节炎、过敏性结膜炎、过敏性角膜炎、干眼症、慢性阻塞性疾病(COPD)、红斑狼疮、牛皮癣、多发性硬化和晚期肾病等。
在一些实施方案中，本发明涉及一种治疗癌症、组织增生类疾病或炎性疾病的方法，其包括给予所需患者治疗有效量的通式(I)所示的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，或包含其的药物组合物，其中所述的癌症选自黑素瘤、乳头状甲状腺肿瘤、胆管癌、结肠癌、卵巢癌、肺癌、恶性淋巴肿瘤，肝、肾、膀胱、前列腺、乳腺和胰腺的癌和肉瘤，以及皮肤、结肠、甲状腺、肺和卵巢的原发和复发性实体瘤或者白血病，所述的炎性疾病选自过敏、哮喘、类风湿性关节炎、骨关节炎、过敏性结膜炎、过敏性角膜炎、干眼症、慢性阻塞性疾病(COPD)、红斑狼疮、牛皮癣、多发性硬化和晚期肾病等。
术语说明
除非有相反陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。
本发明“卤素”是指氟、氯、溴、碘。
本发明“烷基”指直链或支链的饱和脂肪烃基团，优选含1至6个碳原子的直链或支链基团，进一步优选含有1至3个碳原子的直链或支链基团，非限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基等。烷基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上。
本发明的“卤代烷基”是指至少被一个卤素取代的烷基。
本发明的“亚烷基”是指烷基从形式上去掉一个氢原子所剩下的基团，如亚甲基(-CH2-)，亚乙基(-CH2-CH2-)，亚丙基(-CH2-CH2-CH2-)等，在本文中，所述的“亚C1-10烷基”是指C1-10烷基从形式上去掉一个氢原子所剩下的基团，所述的“亚C1-6烷基”是指C1-6烷基从形式上去掉一个氢原子所剩下的基团。
本发明的“亚烯基”是指烯基从形式上去掉一个氢原子所剩下的基团，如亚乙烯基(-CH＝CH-)，亚丙烯基(-CH＝CH-CH2-或-CH2-CH＝CH-)等，在本文中，所述的“亚C2-10烯基”是指C2-10烯基从形式上去掉一个氢原子所剩下的基团，所述的“亚C2-6烯基”是指C2-6烯基从形式上去掉一个氢原子所剩下的基团。
本发明的“亚炔基”是指炔基从形式上去掉一个氢原子所剩下的基团，如亚乙炔基(-C≡C-)，亚丙炔基(-C≡C-CH2-或-CH2-C≡C-)等，在本文中，所述的“亚C2-10炔基”是指C2-10炔基从形式上去掉一个氢原子所剩下的基团，所述的“亚C2-6炔基”是指C2-6炔基从形式上去掉一个氢原子所剩下的基团。
本发明的“环烷基”是指环状的饱和烃基。合适的环烷基可以为取代或未取代的具有3-10个碳原子的单环、二环或三环饱和烃基，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基。
本发明的“杂环烷基”是指含有杂原子的环状的饱和烃基。
本发明的“亚环烷基”是指环烷基从形式上去掉一个氢原子所剩下的基团，如亚环丙基
Figure BDA0002731958400000141
亚环丁基
Figure BDA0002731958400000142
等，在本文中，所述的“亚C3-10环烷基”是指C3-10环烷基从形式上去掉一个氢原子所剩下的基团，所述的“亚C3-6环烷基”是指C3-6环烷基从形式上去掉一个氢原子所剩下的基团。
本发明“烷氧基”是指-O-烷基。烷氧基的非限制性实例包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基、正丙氧基、异丙氧基、异丁氧基、仲丁氧基等。烷氧基可以是任选取代的或未取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上。
本发明的“芳基”是指可以包含单环或稠合多环的芳香体系，优选包含单环或稠合双环的芳香体系，其含有6个至18个碳原子，优选含有约6至约14个碳原子。合适的芳基包括但不限于苯基、萘基、蒽基、四氢萘基、芴基、茚满基。
本发明的“杂芳基”是指至少有一个碳原子被杂原子替代的芳基，所述的杂原子为O、S、N。合适的杂芳基包括但不限于咪唑基、苯并咪唑基、咪唑并吡啶基、喹唑啉酮基、吡咯基、咪唑酮基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、噁唑基、噻唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、三唑基等。其中，本发明的“六元至十二元杂芳基”是指由6-12个原子构成，且至少有一个原子为杂原子的杂芳基。合适的六元至十二元杂芳基包括但不限于嘧啶基、吡啶基、吡嗪基、哒嗪基、嘧啶并吡唑基、嘧啶并咪唑基等。
本发明“溶剂化物”在常规意义上是指溶质(如活性化合物、活性化合物的盐)和溶剂(如水)组合形成的复合物。溶剂是指本领域的技术人员所知的或容易确定的溶剂。如果是水，则溶剂化物通常被称作水合物，例如一水合物、二水合物、三水合物等。
本发明的“前药”是指在生物体中的生理条件下，由于与酶、胃酸等反应而转化成式(Ⅰ)的化合物的化合物，即通过酶的氧化、还原、水解等转化成式(Ⅰ)的化合物的化合物和/或通过胃酸等的水解反应等转化成式(Ⅰ)的化合物的化合物等。
本发明“药物组合物”是指包含任何一种本文所述的化合物，包括对应的异构体、前药、溶剂化物、药学上可接受的盐或其化学的保护形式，和一种或多种药学上可接受载体的混合物。药用组合物的目的是促进化合物对生物体的给药。所述组合物通常用于制备治疗和/或预防由一种或多种激酶介导的疾病的药物。
本发明“药学上可接受的载体”是指对有机体不引起明显刺激性和不干扰所给予化合物的生物活性和性质的载体，包含所有的溶剂、稀释剂或其它赋形剂、分散剂、表面活性剂等渗剂、增稠剂或乳化剂、防腐剂、固体粘合剂、润滑剂等。除非任何常规载体介质与本发明化合物不相容。可以作为药学上可接受的载体的一些实例包括，但不限于糖类，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、以及纤维素和乙酸纤维素；麦芽、明胶等。
本发明“赋形剂”指加入到药用组合物中以进一步促进给予化合物的惰性物质。赋形剂可以包括碳酸钙、磷酸钙、多种糖类和多种类型的淀粉、纤维素衍生物、明胶、植物油、聚乙二醇。
本发明“治疗和/或预防癌症、组织增生类疾病或炎性疾病的药物中的用途”是指可以使癌症、组织增生类疾病或炎性疾病得到改善，抑制癌症的生长、发展和/或转移，或降低患癌症、组织增生类疾病或炎性疾病的风险，主要向所需要的人或动物给予治疗和/或预防有效量的本发明的化合物以抑制、减慢或逆转受治疗者中癌症的生长、发展或扩散，使癌症、组织增生类疾病或炎性疾病得到改善，或降低患病风险，所述的肿瘤包括癌，例如包括膀胱癌、乳腺癌、肾癌、肝癌、肺癌(包括小细胞肺癌)、食道癌、胆囊癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、宫颈癌、甲状腺癌、前列腺癌和皮肤癌(包括鳞状细胞癌)；淋巴系的造血肿瘤，例如包括白血病、急性淋巴细胞白血病、急性淋巴母细胞白血病、B细胞淋巴瘤、T-细胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、毛细胞淋巴瘤和伯基特淋巴瘤；间充质细胞来源的肿瘤，例如包括纤维肉瘤、横纹肌肉瘤；髓系的造血肿瘤，例如包括急慢性骨髓性白血病、骨髓增生异常综合征和前髓细胞白血病；中枢和周围神经系统肿瘤，例如包括星形细胞瘤、成神经细胞瘤、神经胶质瘤和神经鞘瘤；和其它肿瘤，例如包括黑素瘤、精原细胞瘤、畸胎癌、骨肉瘤、色性干皮病、角化棘皮瘤、甲状腺滤泡癌和卡波济氏肉瘤。所述的炎性疾病选自过敏、哮喘、类风湿性关节炎、骨关节炎、过敏性结膜炎、过敏性角膜炎、干眼症、慢性阻塞性疾病(COPD)、红斑狼疮、牛皮癣、多发性硬化和晚期肾病等。
本发明“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的盐，这类盐用于哺乳动物体内时具有安全性和有效性，且具有应有的生物活性。
具体实施方式
下面代表性的实施例是为了更好地说明本发明，而非用于限制本发明的保护范围。
实施例1 4-氨基-5-氰基-6-(4-氧代-2-苯基-4H-色烯-3-基)甲氨基嘧啶
Figure BDA0002731958400000161
步骤1 2-苯甲酰氧基苯丙酮的制备
Figure BDA0002731958400000162
将2-羟基苯丙酮(5g,33.33mmol)、苯甲酰氯(11.7g，83.33mmol)和碳酸钾(23g，166.6mmol)加入120ml丙酮中，油浴加热至回流反应过夜，TLC检测至反应结束。反应结束后，将溶剂旋干；加入水，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，浓缩得油状物6.5g，收率76.7％。
步骤2 3-甲基-2-苯基-4H-色烯-4-酮的制备
Figure BDA0002731958400000163
将2-苯甲酰氧基苯丙酮(6.5g，25.6mmol)溶于80ml DMSO中，置冰水浴中降温，分批次加入钠氢(3.1g，76.7mmol)。室温搅拌约2h，TLC跟踪监测，反应结束，向反应液中加入水，稀盐酸调pH值到弱酸性，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，浓缩得油状物，得到中间体1-(2-氰基苯基)-2-甲基-3-苯基-1,3-二丙酮。向油状物中加入80ml乙酸和几滴浓盐酸，回流反应约3h，TLC跟踪反应结束。将反应液旋干，加入水，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，浓缩制砂，柱层析纯化，得白色固体5g，收率：82.7％。
步骤3 3-溴甲基-2-苯基-4H-色烯-4-酮的制备
Figure BDA0002731958400000164
将3-甲基-2-苯基-4H-色烯-4-酮(300mg，1.27mmol)、N-溴代琥珀酰亚胺(NBS，225mg，1.27mmol)和过氧化苯甲酰(BPO，30mg，0.12mmol)溶于15ml四氯化碳中，置油浴中加热回流过夜，TLC跟踪监测，反应结束。反应液加入水，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，浓缩制砂，柱层析纯化，得白色固体157mg，收率：39.4％。
步骤4 3-氨甲基-2-苯基-4H-色烯-4-酮盐酸盐的制备
Figure BDA0002731958400000171
将3-溴甲基-2-苯基-4H-色烯-4-酮(157mg，0.5mmol)溶于5ml DMF中，加入2ml氨水，室温搅拌过夜。TLC监测，反应结束。反应液加入水，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，将有机层浓缩至约5ml，加入饱和的乙酸乙酯氯化氢溶液，逐渐有灰白色固体析出，抽滤，干燥，得82mg产品，收率：57.1％。
步骤5 4-氨基-5-氰基-6-(4-氧代-2-苯基-4H-色烯-3-基)甲氨基嘧啶的制备
Figure BDA0002731958400000172
将3-氨甲基-2-苯基-4H-色烯-4-酮盐酸盐(80mg，0.28mmol)、4-氨基-5-氰基-6-氯嘧啶(47mg，0.30mmol)和碳酸钾(116mg，0.84mmol)溶于3ml DMF中，室温反应过夜，TLC跟踪监测反应结束。加入水，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，浓缩制砂，制备HPLC纯化，得白色固体12mg，收率：11.6％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:8.13-8.12(d,1H,J＝4.23Hz),7.94(s,1H),7.85-7.82(t,1H,J＝4.27Hz),7.74-7.72(d,2H,J＝3.54Hz),7.69-7.67(d,1H,J＝4.95Hz),7.57-7.52(m,4H),7.23(s,1H),7.18(s,2H),4.40(s,2H).ES:m/z 370.1[M+H]+。
实施例2 2,4-二氨基-5-氰基-6-(4-氧代-2-苯基-4H-色烯-3-基)甲氨基嘧啶
Figure BDA0002731958400000173
将实施例1步骤4中制得的3-氨甲基-2-苯基-4H-色烯-4-酮盐酸盐(100mg，0.34mmol)、2,4-二氨基-5-氰基-6-氯嘧啶(70mg，0.38mmol)和碳酸钾(140mg，1mmol)溶于3mlDMF中，油浴加热至100℃反应过夜，TLC跟踪监测反应结束。加入水，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，浓缩制砂，制备HPLC纯化，得白色固体15mg，收率：11.5％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:8.14-8.11(d,1H,J＝7.86Hz),7.86-7.82(t,1H,J＝7.03Hz),7.76-7.73(t,2H,J＝3.66Hz),7.69-7.67(d,1H,J＝8.46Hz),7.59-7.51(m,4H),6.65(s,1H),6.49(s,2H),6.22(s,2H),4.32-4.30(d,2H,J＝3.69Hz).ES:m/z 385.0[M+H]+。
实施例3 4-氨基-5-氰基-6-(1-(4-氧代-2-苯基-4H-色烯-3-基)乙胺基)嘧啶的制备
Figure BDA0002731958400000181
步骤1 3-乙酰氧甲基-2-苯基-4H-色烯-4-酮的制备
Figure BDA0002731958400000182
将实施例1步骤3中制得的3-溴甲基-2-苯基-4H-色烯-4-酮(33.1g，0.105mol)和乙酸钠(43g，0.527mol)溶于700ml DMF中，置油浴中加热至75℃，反应4h，TLC跟踪监测，反应结束。将反应液缓慢倾倒入水中，析出固体，抽滤，湿品直接投下一步。
步骤2 3-羟甲基-2-苯基-4H-色烯-4-酮的制备
Figure BDA0002731958400000183
将步骤1得到的湿品加入530mlTHF和200ml水中，加入氢氧化钠(12.65g，0.315mol)，室温反应过夜，TLC跟踪监测反应结束。将大部分THF旋蒸除去，逐渐析出黄色固体，抽滤，干燥得22.1g固体，两步收率83.5％。
步骤3 3-甲酰基-2-苯基-4H-色烯-4-酮的制备
Figure BDA0002731958400000184
将3-羟甲基-2-苯基-4H-色烯-4-酮(22.1g，87.7mmol)和邻碘酰苯甲酸(IBX，27g，96.4mmol)溶于500ml DMSO中，室温反应过夜，TLC跟踪监测反应结束。将反应液倒入大量水中，析出白色固体。固体加入水中，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，旋干得黄白色固体15.2g，收率68.7％。
步骤4 2-甲基-N-((4-氧代-2-苯基-4H-色烯-3-基)亚甲基)丙烷-2-亚磺酰胺的制备
Figure BDA0002731958400000185
将3-甲酰基-2-苯基-4H-色烯-4-酮(1g，4mmol)、叔丁基亚磺酰胺(0.53g，4.4mmol)和碳酸铯(1.95g，6mmol)溶于25ml DCM中，室温反应过夜，TLC跟踪监测反应结束。将反应液旋干，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，旋干得黄白色固体0.8g，收率56.6％。
步骤5 3-(1-氨乙基)-2-苯基-4H-色烯-4-酮盐酸盐的制备
Figure BDA0002731958400000191
将2-甲基-N-((4-氧代-2-苯基-4H-色烯-3-基)亚甲基)丙烷-2-亚磺酰胺(5.3g，15mmol)溶于60ml THF中，氩气置换三次，-20℃冷阱中冷却，缓慢加入甲基氯化镁的THF溶液(10ml，30mmol)，冷阱中反应2h，TLC跟踪监测反应结束。饱和氯化铵水溶液淬灭反应液，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，旋干的油状物用少量乙酸乙酯溶解，滴加氯化氢的乙酸乙酯溶液，逐渐有灰色固体析出，搅拌片刻后，抽滤，干燥得固体3.8g，两步收率84.2％。
步骤6 4-氨基-5-氰基-6-(1-(4-氧代-2-苯基-4H-色烯-3-基)乙胺基)嘧啶的制备
Figure BDA0002731958400000192
将3-(1-氨乙基)-2-苯基-4H-色烯-4-酮盐酸盐(700mg,3.32mmol)、4-氨基-5-氰基-6-氯嘧啶(716mg,4.65mmol)和碳酸钾(1.6g,11.62mmol)溶于20ml DMF中，油浴100℃反应24h，TLC跟踪监测反应结束。反应液加入水，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，旋干制砂，柱层析分离得白色固体200mg，收率52.2％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:8.18-8.15(d,1H,J＝7.5Hz),7.91(s,1H),7.87-7.82(t,1H,J＝7.6Hz),7.71-7.67(m,2H),7.63(s,4H),7.57-7.52(t,1H,J＝7.9Hz),7.30(s,3H),5.39-5.35(t,1H,J＝6.9Hz),1.50-1.48(d,3H,J＝6.6Hz).ES:m/z 383.9[M+H]+。
实施例4 2,4-二氨基-5-氰基-6-(1-(4-氧代-2-苯基-4H-色烯-3-基)乙胺基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000193
将实施例3步骤5中制得的3-(1-氨乙基)-2-苯基-4H-色烯-4-酮盐酸盐(700mg,3.32mmol)、2,4-二氨基-5-氰基-6-氯嘧啶(716mg,4.65mmol)和碳酸钾(1.6g,11.62mmol)溶于20ml DMF中，油浴100℃反应24h，TLC跟踪监测反应结束。反应液加入水，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，旋干制砂，柱层析分离得白色固体20mg，收率5.2％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:8.16-8.15(d,1H,J＝4.2Hz),7.86-7.83(t,1H,J＝4.6Hz),7.73-7.72(m,2H),7.66-7.63(m,4H),7.56-7.53(t,1H,J＝4.5Hz),6.92-6.90(d,1H,J＝5.5Hz),6.57(s,2H),6.00(br,2H),5.40-5.34(m,1H),1.44-1.43(d,3H,J＝4.1Hz).ES:m/z 399.0[M+H]+。
实施例5 4-氨基-5-氰基-6-(1-(8-氯-4-氧代-2-苯基-4H-色烯-3-基)乙胺基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000201
步骤1 3-溴甲基-8-氯-2-苯基-4H-色烯-4-酮的制备
Figure BDA0002731958400000202
制备方法同实施例1步骤1-3中制得的3-溴甲基-2-苯基-4H-色烯-4-酮的制备方法，不同的是将原料2-羟基苯丙酮替换为2-羟基-3-氯苯丙酮。
步骤2 3-(1-氨乙基)-8-氯-2-苯基-4H-色烯-4-酮盐酸盐的制备
Figure BDA0002731958400000203
制备方法同实施例3步骤1-5制得的3-(1-氨乙基)-2-苯基-4H-色烯-4-酮盐酸盐的制备方法，不同的将原料3-溴甲基-2-苯基-4H-色烯-4-酮替换为3-溴甲基-8-氯-2-苯基-4H-色烯-4-酮。
步骤3 4-氨基-5-氰基-6-(1-(8-氯-4-氧代-2-苯基-4H-色烯-3-基)乙胺基)嘧啶的制备
将3-(1-氨乙基)-8-氯-2-苯基-4H-色烯-4-酮盐酸盐(200mg,0.59mmol)、4-氨基-5-氰基-6-氯嘧啶(101mg,0.65mmol)和碳酸钾(244mg,1.77mmol)溶于20ml DMF中，油浴100℃反应24h，TLC跟踪监测反应结束。反应液加入水，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，旋干制砂，柱层析分离得白色固体35mg，收率14.2％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:8.12-8.10(d,1H,J＝7.8Hz),8.03-8.00(d,1H,J＝7.8Hz),7.92(s,1H),7.76-7.74(m,2H),7.65(s,3H),7.56-7.51(t,1H,J＝7.9Hz),7.30(s,2H),7.20-7.17(d,1H,J＝8.6Hz),5.44-5.36(m,1H),1.52-1.50(d,3H,J＝6.8Hz).ES:m/z418.1[M+H]+。
实施例6 2,4-二氨基-5-氰基-6-(1-(8-氯-4-氧代-2-苯基-4H-色烯-3-基)乙胺基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000211
将实施例5步骤2中制得的3-(1-氨乙基)-8-氯-2-苯基-4H-色烯-4-酮盐酸盐(200mg,0.59mmol)、2,4-二氨基-5-氰基-6-氯嘧啶(101mg,0.65mmol)和碳酸钾(244mg,1.77mmol)溶于20ml DMF中，油浴100℃反应24h，TLC跟踪监测反应结束。反应液加入水，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，旋干制砂，柱层析分离得白色固体23mg，收率9.0％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:8.12-8.09(d,1H,J＝7.2Hz),8.03-8.01(d,1H,J＝7.6Hz),7.76-7.75(d,2H,J＝2.8Hz),7.67-7.66(d,3H,J＝2.3Hz),7.56-7.50(t,1H,J＝7.9Hz),6.84-6.81(d,1H,J＝9.0Hz),6.60(s,2H),6.12(br,2H),5.47-5.39(m,1H),1.45-1.43(d,3H,J＝6.8Hz).ES:m/z433.2[M+H]+。
实施例7 4-氨基-5-氰基-6-(1-(8-氟-4-氧代-2-苯基-4H-色烯-3-基)乙胺基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000212
步骤1 3-(1-氨乙基)-8-氟-2-苯基-4H-色烯-4-酮盐酸盐的制备
Figure BDA0002731958400000213
制备方法同实施例5步骤1-2的3-(1-氨乙基)-8-氯-2-苯基-4H-色烯-4-酮盐酸盐的制备方法，不同的将原料2-羟基-3-氯苯丙酮替换为2-羟基-3-氟苯丙酮。
步骤2 4-氨基-5-氰基-6-(1-(8-氟-4-氧代-2-苯基-4H-色烯-3-基)乙胺基)嘧啶的制备
将3-(1-氨乙基)-8-氟-2-苯基-4H-色烯-4-酮盐酸盐(200mg,0.59mmol)、4-氨基-5-氰基-6-氯嘧啶(101mg,0.65mmol)和碳酸钾(244mg,1.77mmol)溶于20ml DMF中，油浴100℃反应24h，TLC跟踪监测反应结束。反应液加入水，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，旋干制砂，柱层析分离得白色固体51mg，收率21.5％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:7.97-7.92(m,2H),7.85-7.78(t,1H,J＝9.5Hz),7.74-7.72(m,2H),7.64-7.63(m,3H),7.55-7.51(m,1H),7.32(s,2H),7.20-7.17(d,1H,J＝8.3Hz),5.43-5.35(m,1H),1.52-1.49(d,3H,J＝6.8Hz).ES:m/z 402.1[M+H]+。
实施例8 2,4-二氨基-5-氰基-6-(1-(8-氟-4-氧代-2-苯基-4H-色烯-3-基)乙胺基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000221
将实施例7步骤1中制得的3-(1-氨乙基)-8-氟-2-苯基-4H-色烯-4-酮盐酸盐(190mg,0.59mmol)、2,4-二氨基-5-氰基-6-氯嘧啶(101mg,0.65mmol)和碳酸钾(244mg,1.77mmol)溶于20ml DMF中，油浴100℃反应24h，TLC跟踪监测反应结束。反应液加入水，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，旋干制砂，柱层析分离得白色固体32mg，收率13.0％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:7.92-7.88(m,2H),7.85-7.75(m,2H),7.70-7.65(m,2H),7.61-7.56(m,3H),7.50-7.46(m,1H),7.27(s,2H),7.17-7.13(d,1H,J＝8.0Hz),5.40-5.32(m,1H),1.55-1.50(d,3H,J＝6.6Hz).ES:m/z 417.1[M+H]+。
实施例9 4-氨基-5-氰基-6-((1-(8-氯-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)乙基)氨基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000222
步骤1 3-氯靛红酸酐的制备
Figure BDA0002731958400000223
在500ml三颈瓶中加入2-氨基-3-氯苯甲酸(34.2g，0.2mol)和175ml乙腈，加热至55℃,然后滴加三光气的二氯甲烷溶液(三光气(29.6g，0.1mol)溶于150ml二氯甲烷中)，同时滴加吡啶(50ml，0.6mol)，30min左右滴加完毕，反应5h，TLC跟踪反应至反应完全。将反应液趁热抽滤，滤饼用100ml乙酸乙酯洗涤，滤液脱溶，得黑色油状物，加入冰水混合物，有大量固体析出,抽滤，烘干，乙酸乙酯石油醚体系重结晶，抽滤，烘干后得灰色固体30.8g，收率78.2％。
步骤2 8-氯-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-甲酸乙酯的制备
Figure BDA0002731958400000231
在250ml三颈瓶中加入苯甲酰乙酸乙酯(19.2g，0.1mol)和50ml DMF，降温至-20℃,然后分批加入60％NaH(4.0g，0.1mol)，有大量气泡冒出，保持温度不超过0℃，30min左右完毕，继续搅拌15min，升温至室温，搅拌待用。将3-氯靛红酸酐(19.7g，0.1mol)溶于100ml DMF中,通过恒压滴液漏斗滴加到上述反应液中，保持反应体系无水无氧，30min后，滴加完毕，将反应液升温至150℃，搅拌，TLC跟踪反应至反应完全。将反应液减压脱溶，黑色油状物，加入冰水混合物，用乙酸乙酯萃取，合并有机层，干燥脱溶制砂，柱层析分离后得淡黄色固体18.3g，收率55.9％。
步骤3 8-氯-3-羟甲基-2-苯基喹啉-4-(1H)-酮的制备
Figure BDA0002731958400000232
在250ml三颈瓶中加入8-氯-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-甲酸乙酯(16.4g，0.05mol)和100ml THF，搅拌溶解，降温至-20℃，分批加入四氢锂铝(3.8g，0.1mol)，有气泡冒出，控制加入速度，维持温度不超过0℃，15min左右加毕，然后升温至室温，搅拌2h，TLC跟踪至反应完全。停止反应，分批加入3.8g十水硫酸钠，有气泡放出，控制加入速度，防止冲料。加完后,室温搅拌反应0.5h，抽滤，固体用四氢呋喃洗涤3次，滤液脱溶，旋干后得固体12.7g，收率88.6％。
步骤4 8-氯-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-甲醛的制备
Figure BDA0002731958400000233
在250ml三颈瓶中加入8-氯-3-羟甲基-2-苯基喹啉-4-(1H)-酮(11.4g，0.04mol)和100ml DMSO，搅拌溶解，然后加入IBX(14g，0.05mol)，升温至35℃，搅拌5h，TLC跟踪反应至反应完全。停止反应，加入300ml乙酸乙酯，升温至回流15min，趁热抽滤，固体用热乙酸乙酯洗涤3次，合并滤液，加入200ml水，分层，水层用乙酸乙酯萃取，合并有机层，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，得淡黄色固体9.9g，收率87.5％。
步骤5 8-氯-3-(1-羟乙基)-2-苯基喹啉-4(1H)-酮的制备
Figure BDA0002731958400000241
在100ml两颈瓶中加入8-氯-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(8.5g，0.03mol)和50ml无水四氢呋喃，搅拌溶解，降温至-35℃，氩气保护，然后用注射器加入甲基氯化镁四氢呋喃溶液(浓度为3M)(3ml，0.09mol),加完升温至0℃，搅拌2h，TLC跟踪反应至反应完全。停止反应，加入5ml乙醇淬灭反应，减压蒸除溶剂，加入200ml水和100ml乙酸乙酯，分层，水层用乙酸乙酯萃取，合并有机层，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得淡黄色固体8.2g，收率91.2％。
步骤6 3-乙酰基-8-氯-2-苯基喹啉-4(1H)-酮的制备
Figure BDA0002731958400000242
在100ml三颈瓶中加入8-氯-3-(1-羟乙基)-2-苯基喹啉-4(1H)-酮(6g，0.02mol)和60ml DMSO，搅拌溶解，然后加入IBX(8.4g，0.03mol)，升温至35℃，搅拌5h，TLC跟踪反应至反应完全。停止反应，加入300ml乙酸乙酯，升温至回流15min，热抽滤，固体用热乙酸乙酯洗涤3次，合并滤液，加入200ml水，分层，水层用乙酸乙酯萃取，合并有机层，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，得淡黄色固体5.4g，收率90.2％。
步骤7 8-氯-3-(1-(羟基亚氨基)乙基)-2-苯基喹啉-4(1H)-酮的制备
Figure BDA0002731958400000243
在100ml三颈瓶中加入3-乙酰基-8-氯-2-苯基喹啉-4(1H)-酮(4.5g，0.015mol)和50ml无水甲醇,搅拌溶解,然后加入盐酸羟胺(6.3g，0.09mol)和醋酸钠(9.8g，0.12mol)，升温至45℃，搅拌5h，TLC跟踪反应至反应完全。停止反应，减压脱除溶剂，残留物加入100ml水，有大量淡黄色固体析出，抽滤，水洗，滤饼烘干后得米色固体4.8g，收率87.1％。
步骤8 3-(1-氨基乙基)-8-氯-2-苯基喹啉-4(1H)-酮的制备
Figure BDA0002731958400000244
在100ml三颈瓶中加入8-氯-3-(1-(羟基亚氨基)乙基)-2-苯基喹啉-4(1H)-酮(3.1g，0.01mol)和50ml乙酸，搅拌溶解，然后加入活化锌粉(3.3g，0.05mol)和10ml甲醇，升温至45℃，搅拌5h，TLC跟踪反应至反应完全。停止反应，抽滤，滤饼用大量乙酸乙酯洗涤，减压脱除溶剂，残留物加入50ml水和100ml乙酸乙酯，除去有机层，水层用5M氢氧化钠调节pH值为12，有大量淡黄色固体析出，抽滤，水洗，滤饼烘干后得淡黄色固体1.7g，收率58.1％。
步骤9 4-氨基-5-氰基-6-((1-(8-氯-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)乙基)氨基)嘧啶的制备
Figure BDA0002731958400000251
在100ml三颈瓶中加入3-(1-氨基乙基)-8-氯-2-苯基喹啉-4(1H)-酮(1.5g，0.005mol)和50ml异丙醇，搅拌溶解，然后加入4-氨基-5-氰基-6-氯嘧啶(0.93g，0.006mol)和碳酸钾(2.1g，0.015mol)，升温至80℃，搅拌回流5h，TLC跟踪反应至化合物9反应完全。停止反应，抽滤，滤饼用大量乙酸乙酯洗涤，减压脱除溶剂，残留物加入甲醇和硅胶制砂，柱层析分离，得白色固体1.3g，收率62.2％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:11.06(s,1H),8.23-8.21(d,1H,J＝10.0Hz),8.01-7.99(d,1H,J＝10.0Hz),7.90(s,1H),7.88(s,1H),7.59-7.52(m,5H),7.40-7.43(t,1H,J＝7.5Hz),7.24(s,2H),5.14-5.17(m,1H),1.39-1.37(d,3H,J＝10.0Hz).ES:m/z 416.9[M+H]+。
实施例10 4-氨基-5-氰基-6-((1-(4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)乙基)氨基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000252
制备方法同实施例9的制备方法，不同的是将原料2-氨基-3-氯苯甲酸替换为2-氨基苯甲酸，制得目标化合物，收率66.6％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:11.06(s,1H),8.36-8.35(d,1H,J＝5.0Hz),8.21-8.20(d,1H,J＝5.0Hz),7.87(s,1H),7.81-7.82(m,2H),7.62-7.63(m,3H),7.44-7.51(m,3H),7.17(s,2H),4.90-4.87(m,1H),1.29-1.31(d,3H,J＝10.0Hz).ES:m/z 383.1[M+H]+。
实施例11 4-氨基-5-氰基-6-((1-(5-氯-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)乙基)氨基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000261
制备方法同实施例9的制备方法，不同的是将原料2-氨基-3-氯苯甲酸替换为2-氨基-6-氯苯甲酸，制得目标化合物，收率58.6％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:11.05(s,1H),8.24-8.22(d,1H,J＝10.0Hz),8.02-8.00(d,1H,J＝10.0Hz),7.91(s,1H),7.86(s,1H),7.55-7.51(m,5H),7.41-7.44(t,1H,J＝7.5Hz),7.24(s,2H),5.14-5.17(m,1H),1.38-1.36(d,3H,J＝10.0Hz).ES:m/z 416.9[M+H]+。
实施例12 4-氨基-5-氰基-6-((1-(8-氟-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)乙基)氨基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000262
制备方法同实施例9的制备方法，不同的是将原料2-氨基-3-氯苯甲酸替换为2-氨基-3-氟苯甲酸，制得目标化合物，收率62.1％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:11.06(s,1H),8.22-8.20(d,1H,J＝10.0Hz),8.02-8.00(d,1H,J＝10.0Hz),7.91(s,1H),7.88(s,1H),7.59-7.53(m,5H),7.40-7.43(t,1H,J＝7.5Hz),7.24(s,2H),5.14-5.16(m,1H),1.39-1.37(d,3H,J＝10.0Hz).ES:m/z 400.9[M+H]+。
实施例13 4-氨基-5-氰基-6-((1-(4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)丙基)氨基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000263
制备方法同实施例9的制备方法，不同的是将原料2-氨基-3-氯苯甲酸替换为2-氨基苯甲酸，且将甲基氯化镁替换为乙基氯化镁，制得目标化合物，收率52.6％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:11.06(s,1H),8.34-8.35(d,1H,J＝5.0Hz),8.21-8.22(d,1H,J＝5.0Hz),7.88(s,1H),7.80-7.81(m,2H),7.62-7.63(m,3H),7.44-7.51(m,3H),7.17(s,2H),5.09-5.12(m,1H),1.80-1.84(m,2H),0.59-0.62(m,3H).ES:m/z 397.2[M+H]+。
实施例14 4-氨基-5-氰基-6-(((8-氯-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基)氨基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000271
步骤1 8-氯-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-甲醛肟的制备
Figure BDA0002731958400000272
在100ml三颈瓶中加入实施例9步骤1-4制得的8-氯-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(4.3g，0.015mol)和50ml无水甲醇，搅拌溶解，然后加入盐酸羟胺(6.3g，0.09mol)和醋酸钠(9.8g，0.12mol)，升温至45℃，搅拌5h，TLC跟踪反应至反应完全。停止反应，减压脱除溶剂，残留物加入100ml水，有大量淡黄色固体析出，抽滤，水洗，滤饼烘干后得米色固体4.0g，收率88.9％。
步骤2 3-氨甲基-8-氯-2-苯基喹啉-4(1H)-酮的制备
Figure BDA0002731958400000273
在100ml三颈瓶中加入8-氯-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-甲醛肟(3.0g，0.01mol)和50ml乙酸，搅拌溶解，然后加入活化锌粉(3.3g，0.05mol)和10ml甲醇，升温至45℃，搅拌5h，TLC跟踪反应至反应完全。停止反应，抽滤，滤饼用大量乙酸乙酯洗涤，减压脱除溶剂，残留物加入50ml水和100ml乙酸乙酯，除去有机层，水层用5M氢氧化钠调节pH值为12，有大量淡黄色固体析出，抽滤，水洗，滤饼烘干后得淡黄色固体1.56g，收率55.2％.
步骤3 4-氨基-5-氰基-6-(((8-氯-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基)氨基)嘧啶的制备
Figure BDA0002731958400000274
在100ml三颈瓶中加入3-氨甲基-8-氯-2-苯基喹啉-4(1H)-酮(1.42g，0.005mol)和50ml异丙醇，搅拌溶解，然后加入4-氨基-5-氰基-6-氯嘧啶(0.93g,0.006mol)和碳酸钾(2.1g，0.015mol)，升温至80℃，搅拌回流5h，TLC跟踪反应至化合物9反应完全。停止反应，抽滤，滤饼用大量乙酸乙酯洗涤，减压脱除溶剂，残留物加入甲醇和硅胶制砂，柱层析分离，得白色固体1.37g，收率68.1％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:10.78(s,1H),8.18-8.17(d,1H,J＝5.0Hz),7.86-7.85(d,1H,J＝5.0Hz),7.57-7.53(m,4H),7.33-7.38(t,1H,J＝7.5Hz),6.36-6.43(m,3H),6.14(s,2H),4.21(s,2H).ES:m/z 403.1[M+H]+。
实施例15 4-氨基-5-氰基-6-(((8-氯-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基)氨基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000281
步骤1 4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-甲醛的制备
Figure BDA0002731958400000282
制备方法同实施例9步骤1-4的8-氯-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-甲醛的制备方法，不同的是将原料2-氨基-3-氯苯甲酸替换为2-氨基苯甲酸，制得目标化合物。
步骤2 3-氨甲基-2-苯基喹啉-4(1H)-酮的制备
Figure BDA0002731958400000283
制备方法同实施例14步骤1-2制得的3-氨甲基-8-氯-2-苯基喹啉-4(1H)-酮的制备方法，不同的是将原料8-氯-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-甲醛替换为以上步骤中制得的4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-甲醛，制得目标化合物。
步骤3 4-氨基-5-氰基-6-(((8-氯-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基)氨基)嘧啶的制备
Figure BDA0002731958400000284
在100ml三颈瓶中加入3-氨甲基-2-苯基喹啉-4(1H)-酮(1.25g，0.005mol)和50ml异丙醇，搅拌溶解，然后加入4-氨基-5-氰基-6-氯嘧啶(0.93g，0.006mol)和碳酸钾(2.1g，0.015mol)，升温至80℃，搅拌回流5h，TLC跟踪反应至反应完全。停止反应，抽滤，滤饼用大量乙酸乙酯洗涤，减压脱除溶剂，残留物加入甲醇和硅胶制砂，柱层析分离，得白色固体1.37g，收率68.1％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:10.80(s,1H),8.18-8.17(d,1H,J＝5.0Hz),7.88-7.87(d,1H,J＝5.0Hz),7.56-7.54(m,5H),7.36-7.39(t,1H,J＝7.5Hz),6.43(s,3H),6.10(s,2H),4.23(s,2H).ES:m/z 368.9[M+H]+。
实施例16 4-氨基-5-氰基-6-(((8-氟-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基)氨基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000291
步骤1 3-氨甲基-8-氟-2-苯基喹啉-4(1H)-酮的制备
Figure BDA0002731958400000292
制备方法同实施例14步骤1-2制得的3-氨甲基-8-氯-2-苯基喹啉-4(1H)-酮的制备方法，不同的是将原料2-氨基-3-氯苯甲酸替换为2-氨基-3-氟苯甲酸，制得目标化合物。
步骤2 4-氨基-5-氰基-6-(((8-氟-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基)氨基)嘧啶的制备
在100ml三颈瓶中加入3-氨甲基-8-氟-2-苯基喹啉-4(1H)-酮(1.34g，0.005mol)和50ml异丙醇，搅拌溶解，然后加入4-氨基-5-氰基-6-氯嘧啶(0.93g，0.006mol)和碳酸钾(2.1g，0.015mol)，升温至80℃，搅拌回流5h，TLC跟踪反应至反应完全。停止反应，抽滤，滤饼用大量乙酸乙酯洗涤，减压脱除溶剂，残留物加入甲醇和硅胶制砂，柱层析分离，得白色固体1.23g，收率63.8％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:10.78(s,1H),8.18-8.17(d,1H,J＝5.0Hz),7.86-7.85(d,1H,J＝5.0Hz),7.57-7.53(m,4H),7.33-7.38(t,1H,J＝7.5Hz),6.36-6.43(m,3H),6.14(s,2H),4.21(s,2H).ES:m/z 387.1[M+H]+。
实施例17 2,4-二氨基-5-氰基-6-(((2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基)氨基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000293
在100ml三颈瓶中加入实施例15步骤2中制得的3-氨甲基-2-苯基喹啉-4(1H)-酮(1.25g，0.005mol)和50ml异丙醇，搅拌溶解，然后加入2，4-二氨基-5-氰基-6-氯嘧啶(1.01g，0.006mol)和DBU(2.1g，0.015mol)，升温至80℃，搅拌回流5h，TLC跟踪反应至反应完全。停止反应，减压脱除溶剂，残留物加入甲醇和硅胶制砂，柱层析分离，得白色固体0.70g，收率36.3％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:10.81(s,1H),8.18-8.17(d,1H,J＝5.0Hz),7.89-7.88(d,1H,J＝5.0Hz),7.56-7.54(m,4H),7.36-7.39(t,1H,J＝7.5Hz),6.43(s,3H),6.10(s,2H),6.02(s,2H),4.23(s,2H).ES:m/z 384.1[M+H]+。
实施例18 2,4-二氨基-5-氰基-6-((8-氯-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基)氨基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000301
在100ml三颈瓶中加入实施例14步骤2中制得的3-氨基甲基-8-氯-2-苯基喹啉-4(1H)-酮(1.42g，0.005mol)和50ml异丙醇，搅拌溶解，然后加入2,4-二氨基-5-氰基-6-氯嘧啶(1.01g，0.006mol)和碳酸钾(2.1g，0.015mol)，升温至80℃，搅拌回流5h，TLC跟踪至反应完全。停止反应，抽滤，滤饼用大量乙酸乙酯洗涤，减压脱除溶剂，残留物加入甲醇和硅胶制砂，柱层析分离，得白色固体0.62g，收率29.6％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:10.78(s,1H),8.17-8.18(d,1H,J＝5.0Hz),7.85-7.86(d,1H,J＝5.0Hz),7.51-7.54(m,3H),7.33-7.38(t,1H,J＝7.5Hz),6.36-6.43(m,3H),6.16(s,2H),6.08(s,2H),4.21(s,2H).ES:m/z 418.1[M+H]+。
实施例19 4-氨基-5-氰基-6-((1-(8-氯-1-甲基-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)乙基)氨基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000302
步骤1 1-(8-氯-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)乙氨基甲酸叔丁酯的制备
Figure BDA0002731958400000303
在100ml三颈瓶中加入实施例9步骤8中制得的3-(1-氨基乙基)-8-氯-2-苯基喹啉-4(1H)-酮(1.5g，0.005mol)和20ml THF，搅拌溶解，然后加入10ml 1M的氢氧化钠溶液，降温至0℃，然后滴加二碳酸二叔丁酯(1.38g，0.006mol)的5ml四氢呋喃溶液，室温搅拌1h，TLC跟踪反应至反应完全。停止反应，旋蒸，除去四氢呋喃，残留物加入50ml水和50ml乙酸乙酯，水层再用25ml×2乙酸乙酯萃取，合并有机层，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，柱层析得白色固体1.65g，收率82.8％。
步骤2 1-(8-氯-1-甲基-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)乙氨基甲酸叔丁酯的制备
Figure BDA0002731958400000311
在100ml三颈瓶中加入1-(8-氯-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)乙氨基甲酸叔丁酯(1.59g，0.004mol)、碳酸钾(1.69g，0.012mol)、碘甲烷(2.84g，0.020mol)和25mlDMF，升温到45℃，搅拌2h，TLC跟踪至反应完全，停止反应，抽滤，滤饼用乙酸乙酯洗涤，滤液减压脱除溶剂，加入50ml乙酸乙酯和50ml水萃取，水层用25ml×2乙酸乙酯洗涤，合并有机层，饱和氯化钠水溶液洗涤，干燥，脱溶后的白色固体1.53g，收率92.6％。
步骤3 3-(1-氨基乙基)-8-氯-1-甲基-2-苯基喹啉-4(1H)-酮盐酸盐的制备
Figure BDA0002731958400000312
在100ml三颈瓶中加入1-(8-氯-1-甲基-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)乙氨基甲酸叔丁酯(1.24g，0.003mol)和20ml氯化氢的乙醇溶液(HCl浓度为6.2M)，室温搅拌1h，TLC跟踪反应至反应完全。停止反应，旋蒸除去溶剂，残留物加入50ml无水乙醇，再次旋蒸脱除溶剂，得粗品1.21g，直接投入下一步反应。.
步骤4 4-氨基-5-氰基-6-((1-(8-氯-1-甲基-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)乙基)氨基)嘧啶的制备
Figure BDA0002731958400000313
在100ml三颈瓶中加入3-(1-氨基乙基)-8-氯-1-甲基-2-苯基喹啉-4(1H)-酮盐酸盐粗品(1.21g)和50ml异丙醇，搅拌溶解，然后加入4-氨基-5-氰基-6-氯嘧啶(0.36g，0.036mol)和碳酸钾(1.25g，0.09mol)，升温至80℃，搅拌回流5h，TLC跟踪反应至化合物9反应完全。停止反应，抽滤，滤饼用大量乙酸乙酯洗涤，减压脱除溶剂，残留物加入甲醇和硅胶制砂，柱层析分离，得白色固体0.93g，收率72.1％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.36-8.35(d,1H,J＝5.0Hz),8.21-8.20(d,1H,J＝5.0Hz),7.87(s,1H),7.81-7.82(m,2H),7.62-7.63(m,2H),7.44-7.51(m,3H),7.17(s,2H),4.90-4.87(m,1H),3.42(s,3H),1.29-1.31(d,3H,J＝10.0Hz).ES:m/z 430.9[M+H]+。
实施例20 4-氨基-5-氰基-6-((1-(8-氟-1-甲基-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)乙基)氨基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000321
步骤1 3-(1-氨基乙基)-8-氟-2-苯基喹啉-4(1H)-酮的制备
Figure BDA0002731958400000322
制备方法同实施例9步骤1-8中制得的3-(1-氨基乙基)-8-氯-2-苯基喹啉-4(1H)-酮的制备方法，不同的是将原料2-氨基-3-氯苯甲酸替换为2-氨基-3-氟苯甲酸，制得目标化合物。
步骤2 3-(1-氨基乙基)-8-氟-1-甲基-2-苯基喹啉-4(1H)-酮盐酸盐的制备
Figure BDA0002731958400000323
制备方法同实施例19步骤1-3中制得的3-(1-氨基乙基)-8-氯-1-甲基-2-苯基喹啉-4(1H)-酮盐酸盐的制备方法，不同的是将原料3-(1-氨基乙基)-8-氯-2-苯基喹啉-4(1H)-酮替换为以上步骤中制得的3-(1-氨基乙基)-8-氟-2-苯基喹啉-4(1H)-酮，制得目标化合物。
步骤2 4-氨基-5-氰基-6-((1-(8-氟-1-甲基-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)乙基)氨基)嘧啶的制备
在100ml三颈瓶中加入3-(1-氨基乙基)-8-氟-1-甲基-2-苯基喹啉-4(1H)-酮盐酸盐粗品(1.18g)和50ml异丙醇，搅拌溶解，然后加入4-氨基-5-氰基-6-氯嘧啶(0.36g，0.036mol)和碳酸钾(1.25g，0.09mol)，升温至80℃，搅拌回流5h，TLC跟踪反应至化合物9反应完全。停止反应，抽滤，滤饼用大量乙酸乙酯洗涤，减压脱除溶剂，残留物加入甲醇和硅胶制砂，柱层析分离，得白色固体0.93g，收率72.1％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.38-8.37(d,1H,J＝5.0Hz),8.20-8.19(d,1H,J＝5.0Hz),7.87(s,1H),7.81-7.83(m,2H),7.61-7.63(m,2H),7.44-7.50(m,3H),7.16(s,2H),4.90-4.86(m,1H),3.41(s,3H),1.29-1.31(d,3H,J＝10.0Hz).ES:m/z 415.2[M+H]+。
实施例21 4-氨基-5-氰基-6-((1-(1-甲基-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基)氨基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000331
步骤1 3-(1-氨基甲基)-1-甲基-2-苯基喹啉-4(1H)-酮盐酸盐的制备
Figure BDA0002731958400000332
制备方法同实施例19步骤1-3中制得的3-(1-氨基乙基)-8-氯-1-甲基-2-苯基喹啉-4(1H)-酮盐酸盐的制备方法，不同的是将原料3-(1-氨基乙基)-8-氯-2-苯基喹啉-4(1H)-酮替换为实施例15步骤2中制得的3-氨甲基-2-苯基喹啉-4(1H)-酮，制得目标化合物。
步骤2 4-氨基-5-氰基-6-((1-(1-甲基-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基)氨基)嘧啶的制备
在100ml三颈瓶中加入3-(1-氨基甲基)-1-甲基-2-苯基喹啉-4(1H)-酮盐酸盐粗品(1.12g)和50ml异丙醇，搅拌溶解，然后加入4-氨基-5-氰基-6-氯嘧啶(0.36g，0.036mol)和碳酸钾(1.25g，0.09mol)，升温至80℃，搅拌回流5h，TLC跟踪反应至反应完全。停止反应，抽滤，滤饼用大量乙酸乙酯洗涤，减压脱除溶剂，残留物加入甲醇和硅胶制砂，柱层析分离，得白色固体0.79g，收率68.5％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.17-8.18(d,1H,J＝5.0Hz),7.86-7.87(d,1H,J＝5.0Hz),7.48-7.53(m,5H),7.36-7.39(t,1H,J＝7.5Hz),6.43(s,3H),6.10(s,2H),4.23(s,2H),3.41(s,3H).ES:m/z 383.2[M+H]+。
实施例22 2,4-二氨基-5-氰基-6-((1-(4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)乙基)氨基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000333
制备方法同实施例9的制备方法，不同的是将原料2-氨基-3-氯苯甲酸替换为2-氨基苯甲酸，且将原料4-氨基-5-氰基-6-氯嘧啶替换为2,4-二氨基-5-氰基-6-氯嘧啶，制得目标化合物，收率45.1％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:11.05(s,1H),8.35-8.34(d,1H,J＝5.0Hz),8.22-8.21(d,1H,J＝5.0Hz),7.81-7.82(m,2H),7.61-7.62(m,3H),7.45-7.52(m,3H),6.11(s,2H),6.03(s,2H),4.90-4.87(m,1H),1.29-1.31(d,3H,J＝10.0Hz).ES:m/z 398.2[M+H]+。
实施例23 2,4-二氨基-5-氰基-6-((1-(8-氯-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)乙基)氨基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000341
制备方法同实施例9的制备方法，不同的是将原料4-氨基-5-氰基-6-氯嘧啶替换为2,4-二氨基-5-氰基-6-氯嘧啶，制得目标化合物，收率32.1％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:11.05(s,1H),8.20-8.22(d,1H,J＝10.0Hz),8.00-8.02(d,1H,J＝10.0Hz),7.91(s,1H),7.53-7.58(m,5H),7.40-7.43(t,1H,J＝7.5Hz),6.12(s,2H),6.04(s,2H),5.14-5.17(m,1H),1.35-1.37(d,3H,J＝10.0Hz).ES:m/z 432.1[M+H]+。
实施例24 4-氨基-5-氰基-6-((1-(1-甲基-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)乙基)氨基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000342
制备方法同实施例20的制备方法，不同的是将原料2-氨基-3-氟苯甲酸替换为2-氨基苯甲酸，制得目标化合物，收率81.1％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.36-8.35(d,1H,J＝5.0Hz),8.21-8.20(d,1H,J＝5.0Hz),7.87(s,1H),7.81-7.82(m,2H),7.62-7.63(m,2H),7.44-7.51(m,4H),7.17(s,2H),4.90-4.87(m,1H),3.42(s,3H),1.29-1.31(d,3H,J＝10.0Hz).ES:m/z 397.2[M+H]+。
实施例25 2,4-二氨基-5-氰基-6-((1-(1-甲基-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)乙基)氨基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000343
制备方法同实施例20的制备方法，不同的是将原料2-氨基-3-氟苯甲酸替换为2-氨基苯甲酸，且将原料4-氨基-5-氰基-6-氯嘧啶替换为2,4-二氨基-5-氰基-6-氯嘧啶，制得目标化合物，收率81.1％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.36-8.35(d,1H,J＝5.0Hz),8.22-8.21(d,1H,J＝5.0Hz),7.81-7.83(m,2H),7.62-7.64(m,2H),7.44-7.50(m,4H),6.12(s,2H),6.04(s,2H),4.87-4.90(m,1H),3.42(s,3H),1.29-1.31(d,3H,J＝10.0Hz).ES:m/z 412.2[M+H]+ 。
实施例26 4-氨基-5-氰基-6-((1-(1-甲基-4-氧代-2-(3-氟苯基)-1,4-二氢喹啉-3-基)乙基)氨基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000351
制备方法同实施例20的制备方法，不同的是将原料2-氨基-3-氟苯甲酸替换为2-氨基苯甲酸，且将原料苯甲酰乙酯替换为3-氟苯甲酰乙酯，制得目标化合物，收率32.8％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.33-8.32(d,1H,J＝5.0Hz),8.18-8.19(d,1H,J＝5.0Hz),7.87(s,1H),7.83-7.84(m,3H),7.55-7.58(m,1H),7.49-7.53(m,3H),7.19(s,2H),4.88-4.91(m,1H),3.43(s,3H),1.31-1.33(d,3H,J＝10.0Hz).ES:m/z 415.2[M+H]+。
实施例27 2,4-二氨基-5-氰基-6-((1-(8-氯-1-甲基-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)乙基)氨基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000352
制备方法同实施例20的制备方法，不同的是将原料2-氨基-3-氟苯甲酸替换为2-氨基-3-氯苯甲酸，且将原料4-氨基-5-氰基-6-氯嘧啶替换为2,4-二氨基-5-氰基-6-氯嘧啶，制得目标化合物，收率33.5％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.21-8.23(d,1H,J＝10.0Hz),8.00-8.03(d,1H,J＝10.0Hz),7.92(s,1H),7.53-7.55(m,5H),7.40-7.43(t,1H,J＝7.5Hz),6.15(s,2H),6.01(s,2H),5.14-5.17(m,1H),3.43(s,3H),1.35-1.37(d,3H,J＝10.0Hz).ES:m/z 446.1[M+H]+。
实施例28 2,4-二氨基-5-氰基-6-((8-氟-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基)氨基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000361
制备方法同实施例15的制备方法，不同的是将原料2-氨基苯甲酸替换为2-氨基-3-氟苯甲酸，制得目标化合物，收率22.8％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:10.78(s,1H),8.17-8.18(d,1H,J＝5.0Hz),7.86-7.87(d,1H,J＝5.0Hz),7.52-7.55(m,3H),7.35-7.39(t,1H,J＝7.5Hz),6.36-6.43(m,2H),6.16(s,2H),6.08(s,2H),4.21(s,2H).ES:m/z 387.1[M+H]+。
实施例29 4-氨基-5-氰基-6-(((5-氯-4-氧代-2-苯基-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基)氨基)嘧啶的制备
Figure BDA0002731958400000362
制备方法同实施例15的制备方法，不同的是将原料2-氨基苯甲酸替换为2-氨基-6-氯苯甲酸，制得目标化合物，收率88.1％。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:10.78(s,1H),8.18-8.17(d,1H,J＝5.0Hz),7.82-7.85(d,1H,J＝5.0Hz),7.52-7.56(m,4H),7.33-7.38(t,1H,J＝7.5Hz),6.36-6.41(m,3H),6.11(s,2H),4.20(s,2H).ES:m/z 403.1[M+H]+。
实施例30 2,4-二氨基-5-氰基-6-(1-(2-(3-氟苯基)-4-氧代-4H-色烯-3-基)乙胺基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000363
步骤1 3-溴甲基-2-(3-氟苯基)-4H-色烯-4-酮的制备
Figure BDA0002731958400000364
制备方法同实施例1步骤1-3中制得的3-溴甲基-2-苯基-4H-色烯-4-酮的制备方法，不同的将原料苯甲酰氯替换为3-氟苯甲酰氯，制得目标化合物。
步骤2 2,4-二氨基-5-氰基-6-(1-(2-(3-氟苯基)-4-氧代-4H-色烯-3-基)乙胺基)嘧啶的制备
制备方法同实施例3的制备方法，不同的是将3-溴甲基-2-苯基-4H-色烯-4-酮替换为以上步骤中制得的3-溴甲基-2-(3-氟苯基)-4H-色烯-4-酮，且将4-氨基-5-氰基-6-氯嘧啶替换为2,4-二氨基-5-氰基-6-氯嘧啶，制得目标化合物，收率3.1％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:8.17-8.14(d,1H,J＝7.8Hz),7.88-7.83(t,1H,J＝7.5Hz),7.72-7.46(m,6H),6.87-6.84(d,1H,J＝9.0Hz),6.50(s,2H),6.07(br,2H),5.37-5.30(t,1H,J＝6.9Hz),1.44-1.42(d,3H,J＝6.6Hz).ES:m/z 417.1[M+H]+。
实施例31 2,4-二氨基-5-氰基-6-(1-(2-(3,5-二氟苯基)-4-氧代-4H-色烯-3-基)乙胺基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000371
制备方法同实施例30的制备方法，不同的将原料3-氟苯甲酰氯替换为3,5-二氟苯甲酰氯，制得目标化合物，收率7.9％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:8.17-8.14(d,1H,J＝7.9Hz),7.89-7.83(t,1H,J＝7.7Hz),7.68-7.65(d,1H,J＝8.5Hz),7.58-7.52(m,4H),6.81-6.78(d,1H,J＝8.8Hz),6.60(s,2H),6.08(br,2H),5.37-5.27(m,1H),1.45-1.43(d,3H,J＝6.7Hz).ES:m/z 435.1[M+H]+。
实施例32 2,4-二氨基-5-氰基-6-(1-(4-氧代-2-苯基-4H-色烯-3-基)丙胺基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000372
制备方法同实施例30的制备方法，不同的将原料3-氟苯甲酰氯替换为苯甲酰氯，且将原料甲基氯化镁替换为乙基氯化镁，制得目标化合物，收率5.7％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:8.17-8.14(d,1H,J＝7.8Hz),7.89-7.86(t,1H,J＝7.7Hz),7.77-7.53(m,7H),7.09-7.04(s,1H),6.77(s,2H),6.21(br,2H)，5.31-5.23(m,1H),1.85-1.83(m,2H),0.67-0.62(t,3H,J＝7.0Hz).ES:m/z 413.1[M+H]+。
比较例1 4-氨基-5-腈基-6-(1-(3-(3,5-二氟苯基)-6-氟-1-甲基-4-氧代-1,4二氢喹啉-2-基)乙胺基)嘧啶
Figure BDA0002731958400000381
根据WO2010/151735实施例17中公开的方法制备题述化合物，并通过氢谱和质谱鉴定。使用以下实验例1的方法测定该化合物的体外激酶活性，结果显示该化合物对PI3Kδ的IC50值为20nM，且选择性差。
实验例1化合物体外激酶活性评价
1实验材料
化合物：以上实施例制备的本发明的化合物，每个化合物用DMSO配制成10mM后，依次稀释至1μM、100nM、10nM、1nM、0.1nM、0.01nM。
试剂：PI3Kα(p110α/p85a)，购自于Invitrogen公司,Cat.No.PV4788；PIK3Cδ(p110δ/p85a),购自于Millipore公司,Cat.No.14-604-K；PIK3Cβ(p110β)，购自于Millipore公司,Cat.No.14-603-K)；PIK3Cγ(pp110γ)，购自于Invitrogen公司,Cat.No.PR8641C；二甲基亚砜(DMSO)，购自于美国Sigma公司；EDTA，购自于美国Sigma公司；1×激酶缓冲液(50mMHEPES,pH7.5,0.0015％Brij-35,10mM MgCl2,2mM DTT)，临用前配制；终止液(100mMHEPES,pH 7.5,0.015％Brij-35,0.2％Coating Reagent#3，50mM EDTA)，临用前配制。
仪器：LabChip EZ Reader，购自于美国Caliper公司。
2实验方法
2.1取每个浓度的化合物溶液10μl至96孔板中，加入90μl 1×激酶缓冲液；同时设立DMSO对照组和无酶活对照组，均仅含10μl DMSO和90μl 1×激酶缓冲液。将各组溶液在室温下混匀10min，然后分别转移5μl至384孔板中；
2.2将激酶溶于1×激酶缓冲液，配制成2.5×激酶溶液，然后转移10μl 2.5×激酶溶液至上述含各浓度化合物的384孔板中；DMSO对照组加入10μl 2.5×激酶溶液；无酶活对照组加入10μl不含激酶的1×激酶缓冲液。室温下孵育10min；
2.3将FAM标记的多肽和ATP溶于1×激酶缓冲液，配制成2.5×底物溶液，然后转移10μl 2.5×底物溶液至上述384孔板中，28℃孵育1hr；
2.4各孔中加入25μl终止液终止反应；
2.5置于LabChip EZ Reader上读取转化率数据，并计算抑制率I％，计算公式为I％＝(Max-Com)/(Max-Min)×100，其中Max为DMSO对照组的转化率，Min为无酶活对照组的转化率，Com为化合物处理组的转化率。数据经XLfit处理，拟合得IC50。IC50值表示与未加化合物处理组相比，化合物抑制50％酶活力时对应的化合物浓度。部分IC50结果见表1。
表1
Figure BDA0002731958400000391
“-”表示未检测。
从以上实验结果可以看出，本发明的化合物对PI3Kδ具有好的抑制活性，同时对PI3Kα、PI3Kβ和PI3Kγ具有低的抑制作用，选择性高，非常有希望成为疗效更高、副作用更小的癌症治疗剂、组织增生类疾病治疗剂或者炎性疾病治疗剂。
实验例2化合物体外细胞活性评价
1.实验材料
化合物：以上实施例制备的本发明的化合物，每个化合物用DMSO配制成10mM，然后依次3倍稀释为20000.00nM、6666.67nM、2222.22nM、740.74nM、246.91nM、27.43nM、9.14nM、3.05nM。
淋巴瘤细胞株SU-DHL-5和SU-DHL-6购于美国典型培养物保藏中心(ATCC)。
试剂：RPMI-1640，购自于美国Invitrogen公司；FBS，购自于美国Invitrogen公司；EDTA，购自于美国Sigma公司；
Figure BDA0002731958400000401
Luminescent Cell Viability Assay Kit，购自于美国Progema公司；Backseal膜，购自于美国Perkin Elmer公司。
2.实验方法
细胞复苏：将细胞置于37度水浴中溶解，然后转移到15ml已预热的培养基中，1000rpm离心5分钟，弃去培养基，用15ml新鲜培养基重悬细胞，转移至T75培养瓶中，置于37℃，5％CO2的培养箱中培养，24小时后细胞更换新鲜培养基。
细胞传代：将上述复苏的细胞转移到50ml无菌离心管中，1000rpm离心5分钟，弃去培养基，取分散均匀的细胞计数，调整合适的细胞浓度到15ml新鲜培养基，加入到T75培养瓶中，置于37度，5％CO2的培养箱中培养。
T75细胞培养瓶中细胞长至1×105-1×106个细胞/ml后，使用新鲜培养基(RPMI1640+20％FBS)重悬，并计数。将重悬的细胞调整细胞浓度至以下8个浓度梯度：1×104个细胞/ml，2×104个细胞/ml，3×104个细胞/ml，5×104个细胞/ml，8×104个细胞/ml，1×105个细胞/ml，1.5×105个细胞/ml和2×105个细胞/ml。将上述浓度的细胞悬液加入96孔细胞培养板中，每孔加入100μl(分别为1×103细胞/well，2×103个细胞/well,3×103个细胞/well,5×103个细胞/well,8×103个细胞/well,1×104个细胞/well,1.5×104个细胞/well和2×104个细胞/well)。每种浓度两复孔，铺三块板。72h后向待测孔加入100μl
Figure BDA0002731958400000402
Luminescent Cell Viability Assay buffer。轻轻摇匀。10分钟后，在Assay板底部贴上Backseal膜，置于Envison上读取荧光读数，并计算细胞存活率(cell survive(％))，计算公式为cell survive(％)＝(Com-Min)/(Max-Min)，其中Max为溶媒对照组的读数，Min为无细胞对照组的读数，Com为化合物处理组的读数，数据经XLfit处理，拟合得IC50，实验结果见表2。
表2
Figure BDA0002731958400000411
“-”表示未检测。
从以上实验可以看出，本发明的化合物对SU-DHL-5和SU-DHL-6淋巴瘤细胞均表现出了良好的抑制活性，非常有希望成为淋巴瘤治疗剂。
本发明的发明人发现，本发明的化合物对PI3K激酶具有非常高的亚型选择性。此外，本发明的化合物具有非常好的生物利用度和长的半衰期，成药性好。
尽管以上已经对本发明作了详细描述，但是本领域技术人员理解，在不偏离本发明的精神和范围的前提下可以对本发明进行各种修改和改变。本发明的权利范围并不限于上文所作的详细描述，而应归属于权利要求书。

Claims (5)

1.通式I的化合物或其药学上可接受的盐，
Figure FDA0003496619720000011
其中：
Y选自O、NH和NCH3；
R1选自氢、Cl和F，m为1；
R2选自亚甲基、被甲基取代的亚甲基和被乙基取代的亚甲基；
Cy1为苯基，其可被卤素取代；
Ra为H；
R3选自氢和NH2；
R4为CN；
R5为NH2。
2.权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐的制备方法，所述方法包括：
(1).当Y为O时通式I化合物的制备：
Figure FDA0003496619720000012
a)式(1)的化合物与式(2)的化合物酯化反应得到式(3)的中间体；
b)式(3)的中间体与强碱反应得到式(4)的中间体；
c)式(4)的中间体在酸性条件下环合得到式(5)的中间体；
d)式(5)的中间体经卤代反应得到式(6)的中间体；
e)式(6)的中间体经反应得到通式(I)的化合物；
其中，Cy1、R1、R2、Ra、R3、R4、R5、m具有权利要求1中所述的通式I中的含义；M表示甲基；M’表示M的一个H被X取代后的亚甲基；X表示卤素；
(2).当Y为NH或NCH3时的通式I化合物的制备：
Figure FDA0003496619720000021
a’)式(11)的化合物与三光气反应得到式(12)的中间体；
b’)式(12)的中间体与式(13)的化合物反应得到式(14)的中间体；
c’)式(14)的中间体经还原反应得到式(15)的中间体；
d’)式(15)的中间体经氧化反应得到式(16)的中间体；
e’)式(16)的中间体与烷基化试剂加成反应得到式(17)的中间体；
f’)式(17)的中间体经氧化反应得到式(18)的中间体；
g’)式(18)的中间体与羟胺反应得到式(19)的中间体；
h’)式(19)的中间体经还原反应得到式(20)的中间体；
i’)式(20)的中间体与氨基保护基Q反应得到式(21)的中间体；
j’)式(21)的中间体与Rb-X亲核反应得到式(22)的中间体；
k’)式(22)的中间体脱氨基保护基，经常规的亲核反应得到通式I的化合物；
其中，Cy1、R1、R2、Ra、R3、R4、R5、m和Rb具有权利要求1中所述的通式I中的含义；当R2表示亚甲基时，式(16)的中间体直接与羟胺反应，再经步骤h’)、i’)、j’)和k’)的方法得到通式I的化合物；T表示甲基或乙基；X表示卤素。
3.一种药物组合物，其包含权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐和可药用载体。
4.一种药物组合物，其包含权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐和选自下列组成中的一种或多种：酪氨酸蛋白酶抑制剂、EGFR抑制剂、VEGFR抑制剂、Bcr-Abl抑制剂、c-kit抑制剂、c-Met抑制剂、Raf抑制剂、MEK抑制剂、组蛋白去乙酰酶抑制剂、VEGF抗体、EGF抗体、HIV蛋白激酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂。
5.权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐或权利要求3或4所述的药物组合物在制备用于治疗和/或预防癌症、组织增生或炎性疾病的药物中的应用。
CN202011120786.2A 2015-03-06 2016-03-04 作为磷脂酰肌醇3-激酶δ抑制剂的取代嘧啶类化合物及其应用 Active CN112375074B (zh)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510101229.9A CN106008479B (zh) 2015-03-06 2015-03-06 作为磷脂酰肌醇3-激酶δ抑制剂的取代嘧啶类化合物及其应用
CN2015101012299 2015-03-06
CN201680003821.8A CN107207479B (zh) 2015-03-06 2016-03-04 作为磷脂酰肌醇3-激酶δ抑制剂的取代嘧啶类化合物及其应用
PCT/CN2016/075618 WO2016141855A1 (zh) 2015-03-06 2016-03-04 作为磷脂酰肌醇3-激酶δ抑制剂的取代嘧啶类化合物及其应用

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201680003821.8A Division CN107207479B (zh) 2015-03-06 2016-03-04 作为磷脂酰肌醇3-激酶δ抑制剂的取代嘧啶类化合物及其应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN112375074A CN112375074A (zh) 2021-02-19
CN112375074B true CN112375074B (zh) 2022-04-26

Family

ID=56879859

Family Applications (5)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510101229.9A Active CN106008479B (zh) 2015-03-06 2015-03-06 作为磷脂酰肌醇3-激酶δ抑制剂的取代嘧啶类化合物及其应用
CN202011119587.XA Active CN112370453B (zh) 2015-03-06 2016-03-04 作为磷脂酰肌醇3-激酶δ抑制剂的取代嘧啶类化合物及其应用
CN202011120784.3A Active CN112321573B (zh) 2015-03-06 2016-03-04 作为磷脂酰肌醇3-激酶δ抑制剂的取代嘧啶类化合物及其应用
CN202011120786.2A Active CN112375074B (zh) 2015-03-06 2016-03-04 作为磷脂酰肌醇3-激酶δ抑制剂的取代嘧啶类化合物及其应用
CN201680003821.8A Active CN107207479B (zh) 2015-03-06 2016-03-04 作为磷脂酰肌醇3-激酶δ抑制剂的取代嘧啶类化合物及其应用

Family Applications Before (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510101229.9A Active CN106008479B (zh) 2015-03-06 2015-03-06 作为磷脂酰肌醇3-激酶δ抑制剂的取代嘧啶类化合物及其应用
CN202011119587.XA Active CN112370453B (zh) 2015-03-06 2016-03-04 作为磷脂酰肌醇3-激酶δ抑制剂的取代嘧啶类化合物及其应用
CN202011120784.3A Active CN112321573B (zh) 2015-03-06 2016-03-04 作为磷脂酰肌醇3-激酶δ抑制剂的取代嘧啶类化合物及其应用

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201680003821.8A Active CN107207479B (zh) 2015-03-06 2016-03-04 作为磷脂酰肌醇3-激酶δ抑制剂的取代嘧啶类化合物及其应用

Country Status (9)

Country Link
US (1) US10077258B2 (zh)
EP (1) EP3266774B1 (zh)
JP (1) JP6475854B2 (zh)
KR (1) KR101975323B1 (zh)
CN (5) CN106008479B (zh)
AU (1) AU2016228634B2 (zh)
CA (1) CA2977626C (zh)
TW (1) TWI699360B (zh)
WO (1) WO2016141855A1 (zh)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107793397B (zh) * 2016-09-06 2022-04-26 南京圣和药业股份有限公司 取代的嘧啶类pi3k抑制剂的光学异构体及其应用
CN109516975B (zh) * 2017-09-19 2022-05-27 南京圣和药业股份有限公司 取代嘧啶类pi3k抑制剂的可药用盐及其制备方法
CN109516974B (zh) * 2017-09-19 2022-05-27 南京圣和药业股份有限公司 取代嘧啶类pi3k抑制剂的制备方法
CN109512823B (zh) * 2017-09-19 2023-03-03 南京圣和药业股份有限公司 一种包含取代嘧啶类pi3k抑制剂的组合物及其用途
US10751339B2 (en) 2018-01-20 2020-08-25 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Substituted aminopyrimidine compounds and methods of use
AR121719A1 (es) * 2020-04-03 2022-06-29 Petra Pharma Corp Inhibidores alostéricos de cromenona del fosfoinosítido 3-quinasa (pi3k) para el tratamiento de enfermedades
CN115028648A (zh) * 2021-03-03 2022-09-09 武汉誉祥医药科技有限公司 三并环化合物及其药物组合物和应用
CA3237199A1 (en) 2021-11-02 2023-05-11 Flare Therapeutics Inc. Pparg inverse agonists and uses thereof

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0245518A1 (en) * 1985-11-18 1987-11-19 Yamanouchi Pharmaceutical Co. Ltd. Isoflavone derivatives, salts thereof, and oncostatic and immunosuppressive agents
WO2010151735A2 (en) * 2009-06-25 2010-12-29 Amgen Inc. Heterocyclic compounds and their uses
WO2011055215A2 (en) * 2009-11-05 2011-05-12 Incozen Therapeutics Pvt. Ltd. Novel kinase modulators
WO2012151525A1 (en) * 2011-05-04 2012-11-08 Rhizen Pharmaceuticals Sa Novel compounds as modulators of protein kinases
CN103237797A (zh) * 2010-12-01 2013-08-07 都灵大学 作为磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂的喹啉-4(1h)-酮衍生物

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3410851A (en) 1963-09-03 1968-11-12 Miles Lab Derivatives of flavone
ES2446417T3 (es) * 2007-03-23 2014-03-07 Amgen Inc. Derivados de quinolina o quinoxalina sustituidos en 3 y su uso como inhibidores de fosfatidilinositol 3-cinasa (PI3K)
MX2009009968A (es) 2007-03-23 2009-10-08 Amgen Inc Compuestos heterociclicos y sus usos.
WO2009015917A2 (en) 2007-05-14 2009-02-05 F. Hoffmann-La Roche Ag Dihydroquinone and dihydronaphthridine inhibitors of jnk
BR112012000660A2 (pt) 2009-06-25 2016-11-16 Amgen Inc compostos heterociclos e seus usos
WO2010151740A2 (en) * 2009-06-25 2010-12-29 Amgen Inc. Heterocyclic compounds and their uses
EP2445902A2 (en) 2009-06-25 2012-05-02 Amgen, Inc Heterocyclic compounds and their uses as inhibitors of pi3k activity
JP5677425B2 (ja) * 2009-06-29 2015-02-25 インサイト・コーポレイションＩｎｃｙｔｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ Ｐｉ３ｋ阻害剤としてのピリミジノン
EP2588467A1 (en) * 2010-07-01 2013-05-08 Amgen Inc. Heterocyclic compounds and their use as inhibitors of pi3k activity
CA2839395A1 (en) 2011-07-12 2013-01-17 F. Hoffmann-La Roche Ag Aminomethyl quinolone compounds
JP6207100B2 (ja) * 2012-12-21 2017-10-04 ギリアード カリストガ エルエルシー イソキノリノンまたはキナゾリノンホスファチジルイノシトール３−キナーゼ阻害剤

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0245518A1 (en) * 1985-11-18 1987-11-19 Yamanouchi Pharmaceutical Co. Ltd. Isoflavone derivatives, salts thereof, and oncostatic and immunosuppressive agents
WO2010151735A2 (en) * 2009-06-25 2010-12-29 Amgen Inc. Heterocyclic compounds and their uses
WO2011055215A2 (en) * 2009-11-05 2011-05-12 Incozen Therapeutics Pvt. Ltd. Novel kinase modulators
CN103237797A (zh) * 2010-12-01 2013-08-07 都灵大学 作为磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂的喹啉-4(1h)-酮衍生物
WO2012151525A1 (en) * 2011-05-04 2012-11-08 Rhizen Pharmaceuticals Sa Novel compounds as modulators of protein kinases
CN103702989A (zh) * 2011-05-04 2014-04-02 理森制药股份公司 作为蛋白激酶调节剂的新颖化合物

Also Published As

Publication number Publication date
TWI699360B (zh) 2020-07-21
CA2977626C (en) 2019-07-09
CN112321573B (zh) 2022-05-27
CN112375074A (zh) 2021-02-19
CN112370453B (zh) 2022-03-11
CA2977626A1 (en) 2016-09-15
EP3266774A1 (en) 2018-01-10
JP6475854B2 (ja) 2019-02-27
KR101975323B1 (ko) 2019-05-07
CN107207479B (zh) 2020-11-20
CN106008479A (zh) 2016-10-12
AU2016228634B2 (en) 2018-10-18
US20180037576A1 (en) 2018-02-08
CN112321573A (zh) 2021-02-05
AU2016228634A1 (en) 2017-08-24
TW201636339A (zh) 2016-10-16
US10077258B2 (en) 2018-09-18
CN112370453A (zh) 2021-02-19
EP3266774A4 (en) 2018-08-08
JP2018507222A (ja) 2018-03-15
EP3266774B1 (en) 2019-09-04
KR20170113630A (ko) 2017-10-12
CN107207479A (zh) 2017-09-26
CN106008479B (zh) 2020-01-10
WO2016141855A1 (zh) 2016-09-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN112375074B (zh) 作为磷脂酰肌醇3-激酶δ抑制剂的取代嘧啶类化合物及其应用
JP6856543B2 (ja) ブロモドメイン阻害剤
CN105936635B (zh) 作为磷脂酰肌醇3-激酶δ抑制剂的化合物及其应用
CN107530556B (zh) Dna烷化剂
TWI644909B (zh) 磷脂酸肌醇３－激酶抑制劑
WO2020259432A1 (zh) Kras-g12c抑制剂
TWI547494B (zh) 作為激酶抑制劑之胺基喹唑啉類
EP3013815B1 (en) Carbazole carboxamide compounds useful as kinase inhibitors
JP6218848B2 (ja) プロテインキナーゼ阻害剤としてのチオエーテル誘導体
JP2005521698A (ja) 新規な三環式化合物
EP2662357B1 (en) Bicyclic compounds or salts thereof for use in the treatment of cancer
EP3626718A1 (en) Five- and six-membered aza-aromatic compound, preparation method therefor, pharmaceutical composition, and application
WO2013013614A1 (zh) 4-(3-杂芳基芳基氨基)喹唑啉和1-(3-杂芳基芳基氨基)异喹啉作为Hedgehog通路抑制剂及其应用
EP2099789A1 (en) Inhibitors of hiv replication
TW201917129A (zh) 含吡唑基的三并環類衍生物、其製備方法和應用
WO2014080241A1 (en) Imidazopyridine compounds and uses thereof
WO2014017802A1 (ko) 퓨란-함유 융합 고리 화합물 또는 그의 염 및 이를 포함하는 약학 조성물
TWI707853B (zh) 1,2-二氫-1,6-萘啶類衍生物、其製備方法、其藥物組合物及其在醫藥上的用途
WO2022089219A1 (zh) 芳基酰胺化合物、包含其的药物组合物及其制备方法和用途

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant