CN112341512A - 由海豹胆酸制备鹅去氧胆酸的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种以海豹胆酸为原料制备鹅去氧胆酸CDCA的方法，一方面为海豹胆酸找到了一种应用，另一方面也为鹅去氧胆酸提供了一种新的原材料来源，可部分缓解鹅去氧胆酸原料药的供应紧缺问题，同时也避免相应的生物废弃物污染问题，而且很好的解决了工业化生产的问题，具有非常好的经济价值和应用前景。

Description

由海豹胆酸制备鹅去氧胆酸的方法

技术领域

本发明涉及一种鹅去氧胆酸方法，具体涉及一种利用海豹胆酸制备鹅去氧胆酸的方法。

背景技术

胆甾酸是一种从生物胆膏中提取的多羟基甾体羧酸化合物，其中比较重要的有熊去氧胆酸(UDCA)和鹅去氧胆酸(CDCA)。该类化合物具有很强的药理性能，对胆结石等肝胆疾病有很好的疗效，是世界上用量最大的治疗胆结石药物之一。目前CDCA又是人工制备UDCA和其他甾体类药物的重要原料，需求量很大，一直处于供应紧缺状态，迫切需要解决产品供应量来源的问题。

鸭胆汁是CDCA目前国内很重要的来源之一。龙康侯等研究了鸭胆汁中的胆甾酸成分表明(龙康侯等人，中山大学学报(自然科学版)，33(2),86-90)，鸭蛋汁主要含有2个胆甾酸：3a,7a-二羟基-5b-胆甾酸-24-酸(Chenodeoxycholic acid，CDCA)；另一个是3a,7a,23-三羟基-5b-胆甾酸-24-酸(海豹胆酸，phocaecholic acid，PCA)。二者在鸭胆汁中比例接近，含量均约占1％左右。

目前鸭胆汁主要用于提取CDCA，但一般将PCA留在的残余胆膏废弃物中，后续一般当做饲料添加剂或者固体废弃物，从而造成了很大的浪费，开发出合适的方法进行工业化生产十分必要。

发明内容

本发明就扩展鹅去氧胆酸来源和促进鸭胆汁中海豹胆酸这一重要生物资源的利用，提供了一种从海豹胆酸转化制备鹅去氧胆酸的方法，从而缓解鹅去氧胆酸原料药的供应量不足问题，同时也避免相应的生物废弃物污染问题，而且很好的解决了工业化生产的问题，具有非常好的经济价值和应用前景。

本发明提供了一种由海豹胆酸制备鹅去氧胆酸的方法，其反应路线如下：

其中LG为离去基团，X为卤素。

优选地，所述LG为烷基磺酰基或芳基磺酰基，如甲磺酰基、对甲基苯磺酰等。

优选地，所述X为Br。

进一步地，本发明提供了各反应步骤的一些实施方案：

(1)α-羟基保护：将海豹胆酸与离去基团试剂在弱碱性条件下反应制得化合物ii，反应式如下：

其中LG的定义如前。

优选地，反应中使用有机碱，如DBU、二异丙基乙胺、三乙胺等。

优选地，反应在低温环境下进行，如0～5℃。

作为步骤(1)的一种优选的实施方案，包括：将PCA、溶剂、有机碱加入反应釜内，控制低温，滴加甲基磺酰氯，反应结束后，淬灭、分液、洗涤、浓缩后得到化合物ii。其中，所述溶剂优选为四氢呋喃和二氯甲烷，有机碱优选为二氮杂二环(DBU)、二异丙基乙胺或三乙胺，所述温度控制为0～5℃，PCA：甲基磺酰氯摩尔比优选为1：1.0～1.1。

(2)卤代反应：将化合物ii的进行卤代得到化合物iii，反应式如下：

其中LG、X的定义如前。

作为步骤(2)的一种优选的实施方案，包括：将化合物ii和卤代试剂加入丙酮中回流反应，反应结束后，脱溶，水洗后浓缩得到化合物iii；所述卤代试剂可以为溴化锂、溴化钠等。

(3)消去反应：将化合物iii在碱性条件下消除成烯得到化合物iv，反应式如下：

其中X定义如前。

优选地，所述碱为有机碱，如六甲基膦酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N,N-二甲基甲酰胺等。

作为步骤(3)的一种优选的实施方案，包括：将化合物iii加入到有机碱中加热消去成烯，水沉淀、过滤、浆洗后得到化合物iv。

(4)氢化反应：将化合物iv氢化还原制得鹅去氧胆酸，反应式如下：

本发明还提供了一类中间体化合物ii：

其中LG为离去基团。

优选地，所述LG为烷基磺酰基或芳基磺酰基，如甲磺酰基、对甲基苯磺酰基等。

本发明还提供了一类中间体化合物iii：

其中X为卤素。

优选地，所述X为Br。

本发明提供了一种以海豹胆酸为原料制备鹅去氧胆酸CDCA的方法，一方面为海豹胆酸找到了一种应用，另一方面也为鹅去氧胆酸CDCA提供了一种新的来源，可部分缓解鹅去氧胆酸原料药的供应紧缺问题，同时也避免相应的生物废弃物污染问题，而且很好的解决了工业化生产的问题，具有非常好的经济价值和应用前景。

具体实施方式

为了使本领域技术人员可以更好地理解本发明，以下通过具体实施例对本发明技术方案进行进一步说明。需要理解的是，下属实施例只为更好地说明本发明而给出，并不是对本发明内容的限制。

实施例1：

(1)化合物ii的制备

N₂保护下，开启搅拌将PCA(600g，1.47mol)和N，N-二异丙基乙胺(341.6g，2.64mol)加入12L二氯甲烷中。降温至0～5℃，滴加甲基磺酰氯(185g，1.61mol))。滴加完毕后，继续保温搅拌8h。加入2L水搅拌后分液，有机相再用饱和氯化铵水溶液3.1L洗涤一次后，加入无水硫酸钠干燥，浓缩得764.7g化合物ii。

¹HNMR(400MHz，DMSO)δ12.61(s，1H)，5.42(m，1H)，4.34(d，1H)，4.16(d，1H),3.60(m，1H)，3.17(m，1H)，3.10(s，3H),1.15-1.8(m，24H)1.09(d，3H)，0.99(s，3H)，0.59(s，3H)

(2)化合物iii的制备

将上步骤所得化合物ii(764.7g，1.47mol)和一水合溴化锂(462.4g，4.41mol)加入7.7L丙酮中加入回流22h。减压浓缩脱溶，然后加入10L二氯甲烷和1.5L水，搅拌分液后，无水硫酸钠干燥、减压浓缩得574.67g化合物iii。

¹HNMR(400MHz，DMSO)δ12.39(s，1H)，4.30(d，1H)，4.21(m，1H),4.16(d，1H),3.59(m，1H)，3.15(m，1H)，0.94-2.1(m，24H)0.92(d，3H)，0.84(s，3H)，0.59(s，3H)

(3)化合物iv的制备

N₂保护下，将上步骤所得574.67g化合物iii加入4.7L六甲基膦酰胺中，100℃搅拌11h后，降温至室温，缓慢加入5.7L纯化水析出灰白色固体。过滤，滤饼用2.2升2M的稀盐酸浆洗后过滤。滤饼干燥，再用石油醚浆洗一次，过滤干燥得408g化合物iv，HPLC＝96.3％，收率＝85.7％。

¹HNMR(400MHz，CD3OD)δ6.92(dd，1H)，5.83(d，1H)，3.89(s，1H)，3.42-3.50(m，1H)，2.33-2.42(m，3H)，1.34-2.14(m，22H)1.25(d，3H)，1.02(s，3H)，0.83(s，3H)

(4)化合物CDCA的制备

10L氢化釜中加入6.12L甲醇和化合物iv(408g，1.04mol)，然后再加入20g湿钯炭。室温0.4MPa H₂下搅拌8h后，终止反应。反应液用硅藻土过滤，1L乙醇洗涤硅藻土2次后合并到滤液。滤液减压浓缩至约480g。加入2L石油醚打浆后过滤，将滤饼鼓风干燥烘干得385.5g鹅去氧胆酸粗品，收率94.0％，HPLC＝92.6％。

将鹅去氧胆酸粗品加入887ml乙酸乙酯和3.4L二氯甲烷加热回流后，降温重结晶得高纯度鹅去氧胆酸327.1g，HPLC＝97.3％。

¹HNMR(400MHz，DMSO)δ11.95(s，1H)，4.32(d，1H)，4.11(d，1H)，3.62(m，1H)，3.18(m，1H)，0.9-2.2(m，25H)0.89(d，3H)，0.84(s，3H)，0.61(s，3H)

实施例2：

(1)化合物ii的制备

N₂保护下，开启搅拌将PCA(0.97kg，2.37mol)和二氮杂二环(722g，4.74mol)加入15L四氢呋喃和中。降温至0～5℃，对甲基苯磺酰氯(472.81g，2.48mol)。滴加完毕后，继续保温搅拌10h。加入2L乙酸乙酯和5L水萃取分液。有机相再用饱和氯化铵水溶液5L洗涤一次后，加入无水硫酸钠干燥后浓缩得1.41kg化合物ii。

¹HNMR(400MHz，DMSO)δ12.84(s，1H)，7.89(d，2H)，7.38(d，2H)，5.44(m，1H)，4.36(d，1H)，4.17(d，1H),3.65(m，1H)，3.21(m，1H)，2.43(s，3H),0.9-1.9(m，24H)1.12(d，3H)，0.98(s，3H)，0.59(s，3H)

(2)化合物iii的制备

将化合物ii(1.41kg，2.37mol)和溴化钠(610.1g，5.93mol)加入10L丙酮中加入回流24h。减压浓缩脱溶后加入16.8L二氯甲烷和2.4L水。搅拌分液后，无水硫酸钠干燥、减压浓缩得0.91kg化合物iii。

¹HNMR(400MHz，DMSO)δ12.39(s，1H)，4.30(d，1H)，4.21(m，1H),4.16(d，1H),3.59(m，1H)，3.14(m，1H)，0.94-2.1(m，24H)0.93(d，3H)，0.84(s，3H)，0.59(s，3H)

(3)化合物iv的制备

N₂保护下，将上步骤所得0.91kg化合物iii加入7.5LN，N-二甲基乙酰胺中。100℃搅拌10h后，降温至室温，缓慢加入9L水析出灰白色固体。过滤，滤饼用3升2M的稀盐酸浆洗一次后过滤。滤饼干燥后，再用石油醚浆洗一次，过滤干燥得648g化合物iv，HPLC＝95.4％，收率＝85.7％。

¹HNMR(400MHz，CD3OD)：δ6.92(dd，1H)，5.83(d，1H)，3.88(s，1H)，3.42-3.50(m，1H)，2.33-2.42(m，3H)，1.34-2.14(m，22H)1.26(d，3H)，1.02(s，3H)，0.83(s，3H)

(4)化合物CDCA的制备

将化合物iv(640g，1.64mol)溶解在10.8L的乙醇的氢化反应釜中，加入20g钯炭。室温下0.3MPa H₂下搅拌10h后，终止反应。将反应液用硅藻土过滤，用1L乙醇洗涤硅藻土2次后合并到滤液，减压浓缩至约740g。加入3.5L石油醚打浆后过滤，将产品鼓风干燥烘干得586.87g鹅去氧胆酸粗品，收率91.0％，HPLC＝93.2％。

将鹅去氧胆酸粗品加入1.54L乙酸乙酯和4.52L二氯甲烷加热回流后，降温重结晶得高纯度鹅去氧胆酸486.32g，HPLC＝99.0％。

¹HNMR(400MHz，DMSO)δ11.95(s，1H)，4.32(d，1H)，4.11(d，1H)，3.62(m，1H)，3.16(m，1H)，0.9-2.2(m，25H)0.89(d，3H)，0.84(s，3H)，0.61(s，3H)

综上，本发明的制备方法利用生物资源海豹胆酸制备得到的鹅去氧胆酸具有稳定的收率和很高的纯度，提高了海豹胆酸的利用价值，并扩大了鹅去氧胆酸的供应来源。

这里描述的具体实施例仅仅为本发明的较佳的实施方式。所属本领域的技术人员应当理解，在本发明的精神和原则内，所做的任何等同替换、修改、改进均属于本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种由海豹胆酸制备鹅去氧胆酸的方法，其反应路线如下：

其中LG为离去基团，X为卤素。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述LG为烷基磺酰基或芳基磺酰基，优选为甲磺酰基或对甲基苯磺酰；所述X为Br。

3.一种化合物ii的制备方法，包括将海豹胆酸与离去基团试剂在弱碱性条件下反应制得化合物ii，反应式如下：

其中LG为离去基团。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，反应中使用有机碱，如DBU、二异丙基乙胺、三乙胺等；PCA：离去基团试剂的摩尔比为1：1.0～1.1。

5.一种化合物iii的制备方法，包括将化合物ii的进行卤代得到化合物iii，反应式如下：

其中LG为离去基团，X为卤素。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，将化合物ii和卤代试剂加入丙酮中回流反应，反应结束后，脱溶，水洗后浓缩得到化合物iii；所述卤代试剂为溴化锂或溴化钠。

7.一种化合物iv的制备方法，包括将化合物iii在碱性条件下消除成烯得到化合物iv，反应式如下：

其中X为卤素。

8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述碱为有机碱，优选为六甲基膦酰胺、N,N-二甲基乙酰胺或N,N-二甲基甲酰胺。

9.式ii的化合物：

其中LG为离去基团；优选地，所述LG为烷基磺酰基或芳基磺酰基，如甲磺酰基、对甲基苯磺酰等。

10.式iii的化合物：

其中X为卤素；优选地，所述X为Br。