CN112043759A - 一种栀子多种成分的提取分离纯化方法及其药物组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种栀子多种成分的提取分离纯化方法及其药物组合物，涉及制药技术领域，本发明所述栀子多种成分的提取分离纯化方法，首先将栀子粉与水混合进行充分搅拌提取，合并提取得到的粗滤液，再进行错流过滤得到精滤液；取精滤液过大孔吸附树脂柱将栀子黄与栀子苷、栀子成群分离；再取含栀子苷和栀子成分群的溶液过大孔吸附树脂柱进行吸附和梯度洗脱，得到第一洗脱液和第二洗脱液，将二者分别用大孔树脂富集后干燥，即得栀子苷和栀子成分群。本发明所述栀子多种有效成分的提取分离纯化方法采用搅拌提取、大孔吸附树脂纯化与富集，关键步骤都不加热或极少加热，最有效的节能减排，同时还能缩短生产周期，显著降低了生产成本。

Description

一种栀子多种成分的提取分离纯化方法及其药物组合物
技术领域
本发明涉及制药技术领域，尤其涉及一种栀子多种成分的提取分离纯化方法，及其包括由所述提取分离纯化方法得到的栀子苷成分群的药物组合物。
背景技术
栀子是茜草科植物栀子GardeniajasminoidesEllis干燥成熟的果实，别名：黄栀子、山栀、白蟾，始载于《神农本草经》，列为中品，并在《伤寒论》、《闽东本草》、《普济方》、《圣济总录》中均有记载，是卫生部公布的首批药食两用的药材之一。具有泻火除烦、凉血解毒、清热利尿的作用，可以用于治疗热病心烦、黄疸尿赤、血淋涩痛、血热出衄、目赤肿痛、火毒疮伤、外伤扭伤等，在多种中药配伍中应用。现代药理研究表明：栀子苷具有降血糖作用显著，护肝、利胆、降压调脂、镇静、止血、抗炎消肿、抗氧化、抗肿瘤、营养和保护神经等作用.在中医临床常用于治疗黄疸型肝炎、扭挫伤、高血压、糖尿病、促胰腺分泌、抗疲劳、抗血栓等，也可用于治疗心脑血管病。栀子中含有环烯醚萜类、二萜类、三萜类、黄酮类、多糖类、有机酸类、挥发油类等百余种化学成分。栀子苷(Geniposide)为环烯醚萜苷类化合物，是从栀子的果实中提取.是其中主要成分之一，也是含量最高活性最强的成分。栀子苷分子式为C17H24O10，分子量为388.37，密度为1.49g/cm3，沸点为622.2℃，蒸气压(25℃)为4.37×10～ 18mmHg，浅黄色结晶，对光敏感，含结晶水，易溶于热水，甲醇、氯仿和稀碱溶液，难溶于冷水、乙醚、和苯等。现有技术中报道栀子的化学成分及其提取分离纯化与药理活性的文献较多，仅制备栀子苷的相关专利多达18个以上，但多限于实验室小试研究，有的有纯度没有收率，有的有收率没有得量，多数都在克级，提取的溶剂多用乙醇、甲醇、乙酸乙酯、丙酮等低沸点有机溶剂及其水溶液，提取方法多为热回流提取、热浓缩蒸干，也有用水煮醇沉，亦或醇煮水沉，提取次数为2～4次，提取时间为1～3h；过滤多为粗滤；分离纯化有大孔吸附树脂、聚酰胺、硅胶、炭吸附等，洗涤洗脱，浓缩至干，然后用有机溶剂萃取、重结晶、双水相体系或多级双水相体系分离，也有用30根色谱柱连续色谱分离。方式方法多样，多有美中不足：高耗能大排放是中药制药的一大问题；药材质量多变影响产品质量不稳定，没有数字化标准，影响临床的有效性和安全性；生产周期冗长，生产效率低；使用有机溶剂较多，存在安全风险等。
发明内容
本发明为了克服现有栀子有效成分提取方法的各种缺陷，提供了一种栀子多种成分的提取分离纯化方法，是一种绿色化、智能化、数字化的制备工艺，操作简便快捷，产品质量稳定可控，节能减排，循环经济，高收率，高质量，低成本，适合中药工业化生产。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案(技术路线图见图5)：
本发明提供了一种栀子多种有效成分的提取分离纯化方法，包括以下步骤：
(1)将栀子粉与水混合，25～50℃下搅拌提取3次，离心甩滤，合并3次提取的粗滤液，进行错流过滤，得到精滤液；
所述搅拌提取中，第一次搅拌提取的时间为8～12min，第二次搅拌提取和第三次搅拌提取的时间为4～6min；
(2)取精滤液过大孔吸附树脂柱进行吸附，收集流出液，再以纯化水洗脱吸附后的大孔吸附树脂柱至新流出的洗脱液中无栀子苷和栀子成分群，收集洗脱液，合并流出液和洗脱液得到含栀子苷和栀子成分群的溶液；
(3)以有机溶液洗脱步骤(2)洗脱后的大孔吸附树脂柱，收集得到栀子黄洗脱液，干燥，得到栀子黄；
(4)取含栀子苷和栀子成分群的溶液过大孔吸附树脂柱进行吸附，以1～3BV纯化水洗涤，再以有机溶剂的水溶液进行梯度洗脱，收集第一洗脱液，直至新流出的洗脱液中栀子苷纯度达到为96％止；继续收集栀子苷纯度≥96％的目标区间洗脱液，得到第二洗脱液；再继续洗脱并收集洗脱液至洗脱液中无栀子成分群止，得第三洗脱液，合并第一和第三洗脱液，得到栀子成分群洗脱液；
(5)以大孔吸附树脂柱富集栀子成分群洗脱液，得到栀子成分群浓溶液，干燥，得到栀子成分群；以大孔吸附树脂富集第二洗脱液，得到栀子苷浓溶液，干燥，得到栀子苷。
优选的，步骤(1)中，第一次提取的料液质量比为1∶6～10，第二次提取、第三次提取是的料液质量比独立的为1∶4～6。
优选的，步骤(2)～(5)中，所述大孔吸附树脂独立地选自D101型大孔吸附树脂、D301型大孔吸附树脂、FL-2型大孔吸附树脂、SP-3型大孔吸附树脂或SP-7型大孔吸附树脂。
优选的，步骤(2)、步骤(3)以及步骤(5)所述大孔吸附树脂为FL-2型大孔吸附树脂，步骤(4)所述大孔吸附树脂为SP-3型或FL-2型大孔吸附树脂。
优选的，步骤(3)～(4)中，所述有机溶剂独立地选自乙醇、甲醇、有机酸酯类或卤代烃类。
优选的，步骤(3)、(5)中，所述干燥为负压喷雾干燥或冷冻干燥。
优选的，所述负压喷雾干燥的条件包括：进风温度95～105℃，喷头转速250～300Hz，进料速度15～30rp/min。
本发明提供了一种按照上述技术方案所述方法制备得到的栀子成分群。
本发明还提供了一种药物组合物，包括上述技术方案所述的栀子成分群。
优选的，所述药物组合物的剂型包括片剂、胶囊剂、溶液剂、颗粒剂、软胶囊剂、微丸剂和注射用冻干粉剂。临床应用包括但不限于各剂型及其规格在糖尿病、心脑血管病、保肝护肝等的预防和治疗。
与现有技术相比，本发明的有益效果：
本发明所述栀子多种成分的提取分离纯化方法，首先将栀子粉与水混合进行充分搅拌提取，合并提取得到的粗滤液，再进行错流过滤得到精滤液；取精滤液过大孔吸附树脂柱将栀子黄与栀子苷、栀子成群分离；再取含栀子苷和栀子成分群的溶液过大孔吸附树脂柱进行吸附和梯度洗脱，得到栀子成分群洗脱液和第二洗脱液，将二者分别用大孔树脂富集后干燥，即得栀子成分群和栀子苷。本发明所述方法相对于现有技术至少存在以下优点：
1)关键步骤不加热或极少加热：本发明提供的栀子多种成分的提取分离纯化方法采用充分搅拌提取、大孔吸附树脂纯化与富集，关键步骤不加热或极少加热，有效减少能源消耗，相对于常规制备工艺节省95％以上的能源，减少了大量二氧化碳和酸性气体的排放，同时还能缩短生产周期，显著降低了生产成本，革除了中药制药的“煤老虎”。
2)本发明提供的提取分离纯化方法可以同时实现栀子黄、栀子苷以及栀子成分群等多目标成分的分离纯化，获得产物纯度高、产率高。本发明所述方法适于智能化在线控制生产，精确控制洗涤终点和洗脱收集目标产品区间，可规避药材质量参差不一对目标产品的影响，产品质量稳定可控。
3)本发明可以同时制备得到了高纯度的栀子黄、栀子成分群以及栀子苷，栀子黄是可食用的黄色素，可用作食品添加剂；栀子成分群可做口服制剂，栀子苷可做注射剂，两者都可用于防治糖尿病、心脑血管病以及保肝护肝等，综合利用药材的各成分或成分群。
4)本发明还提供了上述提取分离纯化方法制备得到的栀子成分群，经计算，本发明制备的栀子成分群与栀子原药材的指纹图谱高度相似，可制备成各种制剂供临床应用，保证了产品的“功能与主治”与原药材的“功能与主治”一致，改变自古以来人们的用药习惯和计量方式，以固定成分群的重量作为计量单位，而不是以有效成分不定的药材重量做计量单位，保证临床用药的安全性和有效性，大大提高患者的顺应性，这将是一种颠覆性的里程碑式的改变。
附图说明
图1为实施例1中精滤液的HPLC图；
图2为实施例1制备得到的栀子成分群的HPLC图；
图3为实施例1制备得到的栀子苷的HPLC图；
图4为栀子苷对照品的HPLC图；
图5为本发明提取分离纯化方法的技术路线图。
具体实施方式
本发明提供了一种栀子多种有效成分的提取分离纯化方法，包括以下步骤：
(1)将栀子粉与水混合，25～50℃下搅拌提取3次，离心甩滤，合并3次提取的粗滤液，进行错流过滤，得到精滤液；
所述搅拌提取中，第一次搅拌提取的时间为8～12min，第二次搅拌提取和第三次搅拌提取的时间为4～6min；
(2)取精滤液过大孔吸附树脂柱进行吸附，收集流出液，再以纯化水洗脱吸附后的大孔吸附树脂柱至新流出的洗脱液中无栀子苷和栀子成分群，收集洗脱液，合并流出液和洗脱液得到含栀子苷和栀子成分群的溶液；
(3)以有机溶液洗脱步骤(2)洗脱后的大孔吸附树脂柱，收集得到栀子黄洗脱液，干燥，得到栀子黄；
(4)取含栀子苷和栀子成分群的溶液过大孔吸附树脂柱进行吸附，以1～3BV纯化水洗涤，再以有机溶剂的水溶液进行梯度洗脱，收集第一洗脱液，直至新流出的洗脱液中栀子苷纯度达到为96％止；继续收集栀子苷纯度≥96％的目标区间洗脱液，得到第二洗脱液；再继续洗脱并收集洗脱液至洗脱液中无栀子成分群止，得第三洗脱液，合并第一和第三洗脱液，得到栀子成分群洗脱液；
(5)以大孔吸附树脂柱富集栀子成分群洗脱液，得到栀子成分群浓溶液，干燥，得到栀子成分群；以大孔吸附树脂富集第二洗脱液，得到栀子苷浓溶液，干燥，得到栀子苷。
本发明将栀子粉与水混合，25～50℃下搅拌提取3次，离心甩滤，合并3次提取的粗滤液，进行错流过滤，得到精滤液。本发明采用多次低温充分搅拌提取的方式，在满足尽可能提取有效物质的基础上降低能源消耗，减少加热步骤，节能减排。
本发明之所以采用栀子粉与水混合，是因为栀子坚果难以充分快速提取，将栀子粉碎后进行搅拌提取才能实现如本发明所述方法的快速、充分提取。在本发明中，所述栀子在与水混合前优选的进行粉碎成细粉或中粉。
在本发明中，所述栀子粉与水混合的质量比优选为1∶6～10，25～50℃下进行第一次搅拌提取，离心甩滤，得到滤渣1和滤液1。在本发明中，所述质量比优选为1∶7～8。在本发明中，所述第一次搅拌提取的时间为10min；第一次搅拌提取的搅拌速率优选为50～70rpm，更优选为60rpm。在本发明中，离心甩滤是指趁热离心甩滤，趁热离心甩滤的目的是为了提高过滤速度；所述离心甩滤的转速为正常离心机转速，无特别要求。
在本发明中，第二次搅拌提取时，优选的将滤渣1与水按照质量比1∶5混合，25～50℃下进行第二充分搅拌提取，离心甩滤，得到滤渣2和滤液2。在本发明中，所述第二次搅拌提取的时间优选为5min；第二次搅拌提取应充分搅拌，在本发明中，离心甩滤是指趁热离心甩滤，所述离心甩滤的转速优选为50～70rpm，更优选为60rpm。在本发明中，第三次搅拌提取的操作与第二次搅拌提取相同，在此不再赘述。在本发明中，将得到的滤液1、滤液2和滤液3合并，即得粗滤液。
本发明通过连续搅拌提取尽可能的从原料药中获得峰数最多、收率最高纯度最好的成分群。按照本发明限定的第1～3次充分搅拌提取时纯化水的用量以及提取时间等进行提取，能够有效稳定最终产品的提取质量，适于智能化、数字化、现代化中药制药生产。
本发明采用错流过滤的方式进行精滤，可充分确保过滤质量，有利于进一步纯化。在本发明中，所述错流过滤是0.1～0.2μm级过滤。在本发明中，所述粗滤液进行错流过滤前，优选的将粗滤液静置沉淀至室温，有利于过滤。
得到精滤液后，本发明取精滤液过大孔吸附树脂柱进行吸附，收集流出液，再以纯化水洗脱吸附后的大孔吸附树脂柱至新流出的洗脱液中无栀子苷和栀子成分群，收集洗脱液，合并流出液和洗脱液得到含栀子苷和栀子成分群的溶液。
具体的，本发明将精滤液过大孔吸附树脂柱，其溶液中的栀子黄被吸附在大孔吸附树脂柱上，流出液中含有栀子苷以及其他栀子成分群；收集流出液后，本发明以纯化水对大孔吸附树脂柱进行洗脱，收集洗脱液，直至新流出的洗脱液中无栀子成分群为止；将洗脱液与流出液合并，得到含栀子苷和栀子成分群的溶液。
在本发明中，为了更充分的洗涤，优选的在纯化水洗脱后再用体积浓度30％以上的乙醇水溶液洗脱，收集乙醇洗脱液至新流出的乙醇洗脱液中无栀子成分群为止，将乙醇洗脱液、纯化水洗脱的洗脱液和流出液合并，得到栀子成分群溶液。
得到含栀子苷和栀子成分群的溶液后，本发明再用有机溶剂将吸附在大孔树脂上的栀子黄洗脱下来，收集得到栀子黄洗脱液，干燥，得到栀子黄。
在本发明中，所述干燥的方法包括但不限于旋转蒸发、喷雾干燥，冷冻干燥，负压喷雾干燥；更优选为负压喷雾干燥，简便快捷，闪干。
在本发明中，所述大孔吸附树脂包括但不限于D101型大孔吸附树脂、D301型大孔吸附树脂、FL-2型大孔吸附树脂、SP-3型大孔吸附树脂或SP-7型大孔吸附树脂；在本步骤中，更优选为FL-2型大孔吸附树脂和SP-3型大孔吸附树脂，该两型大孔吸附树脂的吸附效率更高、流速适中、分离纯化效果也较好。
在本发明中，用于洗脱栀子黄的有机溶剂包括但不限于乙醇、甲醇、有机酸酯类或卤代烃类；更优选为乙醇溶液，进一步优选为体积浓度为15～95％的乙醇溶液洗脱栀子黄。
得到含栀子苷和栀子成分群的溶液后，本发明取含栀子苷和栀子成分群的溶液过大孔吸附树脂柱进行吸附，以1～3BV纯化水洗涤，再以有机溶剂的水溶液进行梯度洗脱，收集第一洗脱液，直至新流出的洗脱液中栀子苷纯度达到为96％止；继续收集栀子苷纯度≥96％的目标区间洗脱液，得到第二洗脱液；再继续洗脱并收集洗脱液至洗脱液中无栀子成分群止，得第三洗脱液，合并第一和第三洗脱液，得到栀子成分群洗脱液。本发明仅需一次性过大孔树脂柱即可完成纯化。
在本发明中，所述大孔吸附树脂包括但不限于D101型大孔吸附树脂、D301型大孔吸附树脂、FL-2型大孔吸附树脂、SP-3型大孔吸附树脂或SP-7型大孔吸附树脂；在本步骤中，更优选为SP-3型或FL-2型大孔吸附树脂，该型大孔吸附树脂对栀子苷与成分群的分离纯化综合效果较佳。
在本发明中，所述有机溶剂包括但不限于乙醇、甲醇、有机酸酯类或卤代烃类；更优选为乙醇溶液，进一步优选为体积浓度0～10％的乙醇水溶液进行梯度洗涤或洗脱。
得到栀子成分群洗脱液和第二洗脱液后，本发明以大孔吸附树脂富集栀子成分群洗脱液，得到栀子成分群浓溶液，干燥，得到栀子成分群；以大孔吸附树脂富集第二洗脱液，得到栀子苷提取浓溶液，干燥，得到栀子苷。
在本发明中，所述干燥优选的采用负压喷雾干燥；所述负压喷雾干燥的进风温度优选为95～105℃，喷头转速优选为250～300Hz，进料速度优选为15～30rp/min。
在本发明中，优选的采用HPLC对洗涤液和洗脱液进行检测，以评价研究结果。在本发明所述的栀子中多成分提取分离纯化方法中，优选的对生产过程进行智能化控制，尤其是智能化控制大孔吸附树脂柱的洗涤终点和洗脱收集目标单体或成分群的区间，能够确保其批内均一性和批间可重复性，规避药材产地、采收季节、药材批次等对产物质量的影响。
本发明还提供了一种按照上述技术方案所述方法制备得到的栀子成分群。所述栀子成分群中的主要成分栀子苷含量≥45％，栀子成分群指纹图谱与栀子药材指纹图谱的相似度≥90％。
按照本发明所述方法分离得到的栀子黄收率在55％，纯度为85.38％；栀子苷的收率为0.81％，纯度≥99.11％；栀子成分群的收率在0.74％，纯度≥90.75％。本发明所述方法可以同时分离提取纯化栀子黄、栀子苷和栀子成分群，使药材得到综合利用，效率高，生产周期短，高度节能减排，产品质量稳定可控。
本发明还提供了一种药物组合物，包括上述技术方案所述的栀子成分群。所述药物组合物中，栀子成分群的质量浓度优选为0.1～99％。在本发明中，所述药物组合物中还可以包括栀子苷；所述栀子苷的质量浓度优选为0.1～99％。
在本发明中，所述药物组合物优选的还包括药学上可接受的载体。在本发明中，所述药物组合物的剂型包括片剂、胶囊剂、软胶囊剂、溶液剂、颗粒剂、微丸剂、缓释微丸剂和注射用栀子苷等。主要用于防治糖尿病、心脑血管病和保肝护肝等。
下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1栀子苷、栀子成分群、栀子黄的制备
提取：取栀子中粉500g，加50℃纯化水4000ml，搅拌10min，趁热离心甩滤粗滤，得滤液1，滤渣1再加50℃纯化水2500ml，搅拌5mm，趁热离心甩滤粗滤，得滤液2，滤渣2再加50℃纯化水2500ml，搅拌5min，趁热离心甩滤粗滤，得滤液3，滤渣3可供制备沼气和绿肥，合并滤液1、2、3，放置冷却至室温，用错流过滤精滤，得精滤液，供分离纯化。以HPLC检测所得精滤液，结果如图1所示，精滤液中栀子苷的纯度为49.08％(归一化)。
分离：取上述精滤液，过FL-2大孔吸附树脂柱(径高比＝3cm∶38cm)，栀子黄被吸附，收集含栀子成分群和栀子苷的流出液，再用纯化水洗脱大孔树脂柱至流出液中无栀子成分群，必要时用20％乙醇洗涤使栀子成分群洗尽，合并含栀子成分群和栀子苷的流出液和洗脱液，待纯化；再用体积浓度30％的乙醇液洗脱栀子黄至尽，收集栀子黄洗脱液，回收溶剂至干或喷雾干燥，得粉末状栀子黄
纯化：取含栀子成分群和栀子苷的溶液，过SP-3大孔吸附树脂柱(径高比＝3cm∶110cm)，用1～2BV纯化水洗涤，用0～3％乙醇液洗脱，收集有栀子成分群的洗脱液，直至洗脱液中的栀子苷的纯度为98％，所得洗脱液为“栀子成分群稀溶液”，即为第一洗脱液；继续用体积浓度0～3％的乙醇水溶液梯度洗脱，收集新流出洗脱液中栀子苷纯度≥98％(归一化)的洗脱液为“栀子苷稀溶液”，即为第二洗脱液；再用体积浓度5～15％的乙醇水溶液洗脱并收集至无栀子成分群止，即为第三洗脱液；将第三洗脱液与第一洗脱液合并，得到第一洗脱液。富集：取第二洗脱液过FL-2大孔树脂柱，用体积浓度50％乙醇洗脱得栀子苷浓溶液，待干燥；取第一洗脱液过FL-2大孔树脂柱，用体积浓度30～50％乙醇洗脱得栀子成分群浓溶液，待干燥。
干燥：取上述栀子苷浓溶液用负压喷雾干燥，喷雾干燥参数设计：进风温度95℃～105℃，喷头转速250～300Hz，进料速度15～30rp/min，得类白色至淡黄色粉末状栀子苷，重5.87g，收率为62.85％，纯度为99.13％(归一化)，如图3所示；
取上述栀子成分群浓溶液用负压喷雾干燥，喷雾干燥参数设计：进风温度95℃-105℃，喷头转速250～300Hz，进料速度15～30rp/min，得类白色至淡黄色粉末状栀子成分群，重2.83g，收率为86.01％，含栀子苷为72.00％，HPLC色谱图如图2所示。
取市售的栀子苷纯品作为对照品，以相同的HPLC条件检测栀子苷纯品，得到栀子苷对照品的HPLC图谱，如图4所示，对照品中的栀子苷纯度为93.67％。
实施例2栀子苷、栀子成分群、栀子黄的制备
提取：取栀子中粉40kg，加85℃纯化水320L，搅拌10min，趁热离心甩滤粗滤，得滤液1，滤渣1再加85℃纯化水200L，搅拌5min，趁热离心甩滤粗滤，得滤液2，滤渣2再加85℃纯化水200L，搅拌5min，趁热离心甩滤粗滤，得滤液3，滤渣3可供制备沼气和绿肥，合并滤液1、2、3，放置冷却至室温，用错流过滤精滤，得精滤液，供分离。
分离：取上述精滤液，过FL-2大孔吸附树脂柱(径高比＝3cm∶38cm)，栀子黄被吸附，收集含栀子成分群和栀子苷的流出液，再用纯化水洗脱大孔树脂柱至流出液中无栀子成分群，必要时用20％乙醇洗涤使栀子成分群洗尽，合并含栀子成分群和栀子苷的流出液和洗脱液，待纯化；再用体积浓度30％的乙醇液洗脱栀子黄至尽，收集栀子黄洗脱液，回收溶剂至干或喷雾干燥，得粉末状栀子黄
纯化：取含栀子成分群和栀子苷的溶液，过SP-3大孔吸附树脂柱(径高比＝3cm∶110cm)，用1～2BV纯化水洗涤，再用纯化水洗脱，收集第一洗脱液，直至洗涤液中的栀子苷的纯度为98％，所得洗脱液为“栀子成分群稀溶液”；继续用体积浓度50％的乙醇水溶液洗脱，收集栀子苷纯度≥98％(归一化)的洗脱液，为“栀子苷稀溶液”，即为第二洗脱液。
富集：取第二洗脱液过FL-2大孔树脂柱，用体积浓度50％的乙醇水溶液洗脱得栀子苷浓溶液，待干燥；取第一洗脱液过FL-2大孔树脂柱，用体积浓度50％的乙醇水溶液洗脱得栀子成分群浓溶液，待干燥
干燥：取上述栀子苷浓溶液用负压喷雾干燥，喷雾干燥参数设计：进风温度95℃～105℃，喷头转速250～300Hz，进料速度15～30rp/min，得类白色粉末状栀子苷，重493.8g，收率为65.82％，纯度为99.27％(归一化)；取上述栀子成分群浓溶液用负压喷雾干燥，喷雾干燥参数设计：进风温度95℃～105℃，喷头转速250～300Hz，进料速度15～30rp/min，得淡黄色粉末状栀子成分群，重305.8g，收率为85.42％，纯度为71.12％。
实施例3栀子成分群片的制备
丸心处方：
Figure BSA0000185054930000111
包衣液处方：
Figure BSA0000185054930000112
工艺过程：
预处理分别取栀子成分群、微晶纤维素、羧甲淀粉钠过80目筛。
制软材：将栀子成分群、微晶纤维素、羧甲淀粉钠按等量递增的原则，将原辅料混合均匀，加入纯化水，反复搓揉制成软材。
挤压与滚圆：将软材通过挤压机挤压成条，再经过切割滚圆机切割滚圆，即成湿微丸。
干燥：将湿微丸置真空干燥箱中于40℃以下真空干燥，去除细粉，即得微丸。
包衣：取微丸包胃溶薄膜衣，增重2.63％。
全检取样按临床研究用质量标准全检，各检测指标应均符合规定。
实施例4栀子苷微丸的制备
丸心处方：
Figure BSA0000185054930000121
包衣液处方：
Figure BSA0000185054930000122
工艺过程：
预处理分别取栀子苷、微晶纤维素、羧甲淀粉钠过80目筛。
制软材：将栀子苷、微晶纤维素、羧甲淀粉钠按等量递增的原则，将原辅料混合均匀，加入纯化水，反复搓揉制成软材。
挤压与滚圆：将软材通过挤压机挤压成条，再经过切割滚圆机切割滚圆，即成湿微丸。
干燥：将湿微丸置真空干燥箱中于40℃以下真空干燥，去除细粉，即得微丸。
包衣：取微丸包胃溶薄膜衣，增重2.49％。
全检取样按临床研究用质量标准全检，各检测指标应均符合规定。
实施例5注射用栀子苷的制备
处方：
Figure BSA0000185054930000123
工艺过程：
配制：取栀子苷和PVPK12置研钵中，边加50℃新鲜制备的注射用水边搅拌，直至溶解，加新鲜制备的注射用水至2800ml，慢慢加入甘露醇搅拌使溶解，再加新鲜制备的注射用水至3000ml，加2.0g针用活性炭搅拌10min，脱碳，再用错流过滤精滤，得精滤液。
精滤液分装与干燥：用0.1μm微孔膜过滤，分装于10ml西林瓶中，每瓶3ml，冷冻干燥36h。
印字、分装、包装、全检、入库。
栀子苷与栀子成分群各剂型与规格的临床应用包括但不限于各剂型及其规格在糖尿病、心脑血管病、保肝护肝等的预防和治疗。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种栀子多种有效成分的提取分离纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将栀子粉与水混合，25～50℃下搅拌提取3次，离心甩滤，合并3次提取的粗滤液，进行错流过滤，得到精滤液；
所述搅拌提取中，第一次搅拌提取的时间为8～12min，第二次搅拌提取和第三次搅拌提取的时间为4～6min；
(2)取精滤液过大孔吸附树脂柱进行吸附，收集流出液，再以纯化水洗脱吸附后的大孔吸附树脂柱至新流出的洗脱液中无栀子苷和栀子成分群，收集洗脱液，合并流出液和洗脱液得到含栀子苷和栀子成分群的溶液；
(3)以有机溶液洗脱步骤(2)洗脱后的大孔吸附树脂柱，收集得到栀子黄洗脱液，干燥，得到栀子黄；
(4)取含栀子苷和栀子成分群的溶液过大孔吸附树脂柱进行吸附，以1～3BV纯化水洗涤，再以有机溶剂的水溶液进行梯度洗脱，收集第一洗脱液，直至新流出的洗脱液中栀子苷纯度达到为96％止；继续收集栀子苷纯度≥96％的目标区间洗脱液，得到第二洗脱液；再继续洗脱并收集洗脱液至洗脱液中无栀子成分群止，得第三洗脱液，合并第一和第三洗脱液，得到栀子成分群洗脱液；
(5)以大孔吸附树脂柱富集栀子成分群洗脱液，得到栀子成分群浓溶液，干燥，得到栀子成分群；以大孔吸附树脂富集第二洗脱液，得到栀子苷浓溶液，干燥，得到栀子苷。
2.根据权利要求1所述的提取分离纯化方法，其特征在于，步骤(1)中，第一次提取的料液质量比为1∶6～10，第二次提取、第三次提取是的料液质量比独立的为1∶4～6。
3.根据权利要求1所述的提取分离纯化方法，其特征在于，步骤(2)～(5)中，所述大孔吸附树脂独立地选自D101型大孔吸附树脂、D301型大孔吸附树脂、FL-2型大孔吸附树脂、SP-3型大孔吸附树脂或SP-7型大孔吸附树脂。
4.根据权利要求3所述的提取分离纯化方法，其特征在于，步骤(2)、步骤(3)以及步骤(5)所述大孔吸附树脂为FL-2型大孔吸附树脂，步骤(4)所述大孔吸附树脂为SP-3型或FL-2型大孔吸附树脂。
5.根据权利要求1或3所述的提取分离纯化方法，其特征在于，步骤(3)～(4)中，所述有机溶剂独立地选自乙醇、甲醇、有机酸酯类或卤代烃类。
6.根据权利要求1所述的提取分离纯化方法，其特征在于，步骤(3)、(5)中，所述干燥为负压喷雾干燥或冷冻干燥。
7.根据权利要求6所述的提取分离纯化方法，其特征在于，所述负压喷雾干燥的条件包括：进风温度95～105℃，喷头转速250～300Hz，进料速度15～30rp/min。
8.一种按照权利要求1～7任意一项所述方法制备得到的栀子成分群。
9.一种药物组合物，包括权利要求8所述的栀子成分群。
10.根据权利要求9所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物的剂型包括片剂、胶囊剂、溶液剂、颗粒剂、软胶囊剂、微丸剂和注射用冻干粉剂。
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