CN112028959A - 无柄灵芝中具有抗糖尿病活性的三萜化合物的制备方法及应用 - Google Patents

无柄灵芝中具有抗糖尿病活性的三萜化合物的制备方法及应用 Download PDF

Info

Publication number
CN112028959A
CN112028959A CN202011068560.2A CN202011068560A CN112028959A CN 112028959 A CN112028959 A CN 112028959A CN 202011068560 A CN202011068560 A CN 202011068560A CN 112028959 A CN112028959 A CN 112028959A
Authority
CN
China
Prior art keywords
extract
triterpene compound
methanol
silica gel
compound according
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202011068560.2A
Other languages
English (en)
Inventor
刘文星
周敏
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Yunnan Minzu University
Original Assignee
Yunnan Minzu University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Yunnan Minzu University filed Critical Yunnan Minzu University
Priority to CN202011068560.2A priority Critical patent/CN112028959A/zh
Publication of CN112028959A publication Critical patent/CN112028959A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J9/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of more than two carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, coprostane
    • C07J9/005—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of more than two carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, coprostane containing a carboxylic function directly attached or attached by a chain containing only carbon atoms to the cyclopenta[a]hydrophenanthrene skeleton
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L31/00—Edible extracts or preparations of fungi; Preparation or treatment thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明公开了无柄灵芝中具有抗糖尿病活性的三萜化合物的制备方法及应用，所述三萜化合物为灵芝酸γa，结构式为I所示：
Figure DDA0002712347880000011
所述三萜化合物的制备方法为：以灵芝属的大型真菌无柄灵芝的子实体作为原料，用溶剂提取、萃取，再用正相柱色谱初步分离，经过MCI色谱脱色，然后用半制备HPLC分离即得目标物；所述三萜化合物的应用为在制备抗糖尿病药物或保健食品中的用途。本发明首次从无柄灵芝中分离得到三萜化合物即灵芝酸γa，为灵芝酸γa的制备提供了新的制备途径，本制备方法简单，产率高，其中灵芝酸γa的产率高达1.72％，纯度达94％～97％；另外，本发明首次发现灵芝酸γa具有较好的α葡萄糖苷酶抑制活性，在抗糖尿病药物或保健食品的开发有很好的应用前景。

Description

无柄灵芝中具有抗糖尿病活性的三萜化合物的制备方法及 应用
技术领域
本发明属于天然产物化学技术领域，具体涉及无柄灵芝中具有抗糖尿病活性的三萜化合物的制备方法及应用。
背景技术
α葡萄糖苷酶抑制剂能竞争性的和α葡萄糖苷酶结合，从而抑制这种酶的活性，导致糖类水解为葡萄糖的速度降低，减缓人体对葡萄糖的吸收，从而降低餐后血糖。α葡萄糖苷酶抑制剂仅仅延缓，但不阻断人体对糖类的消化吸收，所以，该过程不会导致热量丢失。α葡萄糖苷酶抑制剂不会抑制人体吸收蛋白质和脂肪，所以也不会影响其他营养物质的吸收。α葡萄糖苷酶抑制剂对1型和2型糖尿病均有很好的疗效。
灵芝是一类木质降解菌，其子实体坚硬。隶属于担子菌亚门、层菌纲、多孔菌目、多孔菌科、灵芝属，灵芝的子实体是著名的中药，在我国有近两千年的药用历史，常用于治疗各种人类疾病，有延年益寿的功效。
无柄灵芝Ganoderma resinaceum Boud又名树芝、扁灵芝、圆孔灵芝、三秀灵芝，作为灵芝属真菌中的1个种，长期被用于预防和治疗各类疾病，主要含有三萜、杂萜、甾体、多糖、黄酮等成分。本发明旨在从无柄灵芝中分离获得具有高α葡萄糖苷酶抑制活性的化合物，为抗糖尿病药物的开发提供新的思路。
发明内容
本发明的第一目的是提供一种无柄灵芝中具有抗糖尿病活性的三萜化合物，本发明的第二目的是提供所述三萜化合物的制备方法，本发明的第三目的是提供所述三萜化合物的应用。
本发明的第一目的是这样实现的，无柄灵芝中具有抗糖尿病活性的三萜化合物，所述三萜化合物的分子式为C30H46O7，即灵芝酸γa，结构式为I所示：
Figure BDA0002712347860000021
本发明的第二目的是这样实现的，所述三萜化合物的制备方法，以灵芝属的大型真菌无柄灵芝的子实体作为原料，用溶剂提取、萃取，再用正相柱色谱初步分离，经过MCI色谱脱色，然后用半制备HPLC分离即得目标物；具体步骤如下：
1)回流提取：将无柄灵芝子实体晒干，粉碎到40～100目，用第一有机溶剂加热回流提取3次，每次3小时，合并所有溶剂，再减压蒸馏浓缩，得到无柄灵芝的浸膏a；
2)萃取：在分液漏斗中加入浸膏重量1.5-3倍的水与浸膏a搅拌均匀，再加入1-1.2倍体积水的第二有机溶剂摇动，充分静置分层后取出有机溶剂，反复3次后合并有机溶剂，减压蒸馏除去溶剂后得到无柄灵芝浸膏b；
3)初步分离：将浸膏b与80-100目的硅胶拌样后装柱进行正相柱色谱分离，以1:0，70:1，40:1，8:1，5:1和0:1的二氯甲烷/甲醇作为洗脱剂进行梯度洗脱，经TLC和荧光检测后合并相似组分，得到A-F6个组分；
4)二次分离：将步骤3中组分C与80-100目的硅胶搅拌后装柱进行正相色谱法分离，以1:0，40:1，20:1，10:1，5:1和0:1二氯甲烷/甲醇作为洗脱剂进行梯度洗脱，经TLC和荧光检测后浓缩合并相似组分，得到C1-C66个组分；
5)MCI柱层析脱色：将步骤4中组分20:1洗脱浓缩得到的C3部分用MCI柱层析脱色，洗脱剂为45％-95％甲醇/水溶液，经薄层色谱、紫外光谱法检测，合并相同组分，收集64％的甲醇/水溶液洗脱部分，蒸干后得到组分C3a；
6)半制备HPLC纯化：将步骤5中所述组分C3a经半制备HPLC分离纯化，即得所述三萜化合物，纯度为94％～97％。
本发明的第三目的是这样实现的，所述的三萜化合物在制备抗糖尿病药物或保健食品中的应用。
本发明的有益效果为：本发明首次从无柄灵芝中分离得到三萜化合物即灵芝酸γa，为灵芝酸γa的制备提供了新的制备途径，本制备方法简单，产率高，其中灵芝酸γa的产率高达1.72％，纯度为94％～97％。另外，本发明首次发现灵芝酸γa具有较好的α葡萄糖苷酶抑制活性，经实验证实，该化合物对α葡萄糖苷酶IC50值为7.895μM，远高于阳性对照阿卡波糖的IC50值2.742μM；本发明揭露了灵芝酸γa可作为抗糖尿病药物的先导性化合物的用途，在抗糖尿病药物或保健食品的开发有很好的应用前景，也为此类三萜类物质的提取以及药用研究提供了基础及新思路。
附图说明
图1为本发明实施例1中三萜化合物的1H NMR谱图；
图2为本发明实施例1中三萜化合物的DEPT谱图。
具体实施方式
下面结合实施例和附图对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或替换，均属于本发明的保护范围。
本发明无柄灵芝中具有抗糖尿病活性的三萜化合物，所述三萜化合物的分子式为C30H46O7，即灵芝酸γa，结构式为I所示：
Figure BDA0002712347860000031
本发明所述的三萜化合物的制备方法，以灵芝属的大型真菌无柄灵芝的子实体作为原料，用溶剂提取、萃取，再用正相柱色谱初步分离，经过MCI色谱脱色，然后用半制备HPLC分离即得目标物，具体步骤如下：
1)回流提取：将无柄灵芝子实体晒干，粉碎到40～100目，用第一有机溶剂加热回流提取3次，每次3小时，合并所有溶剂，再减压蒸馏浓缩，得到无柄灵芝的浸膏a；
2)萃取：在分液漏斗中加入浸膏重量1.5-3倍的水与浸膏a搅拌均匀，再加入1-1.2倍体积水的第二有机溶剂摇动，充分静置分层后取出有机溶剂，反复3次后合并有机溶剂，减压蒸馏除去溶剂后得到无柄灵芝浸膏b；
3)初步分离：将浸膏b与80-100目的硅胶拌样后装柱进行正相柱色谱分离，以1:0，70:1，40:1，8:1，5:1和0:1的二氯甲烷/甲醇作为洗脱剂进行梯度洗脱，经TLC和荧光检测后合并相似组分，得到A-F6个组分；
4)二次分离：将步骤3中组分C与80-100目的硅胶搅拌后装柱进行正相色谱法分离，以1:0，40:1，20:1，10:1，5:1和0:1二氯甲烷/甲醇作为洗脱剂进行梯度洗脱，经TLC和荧光检测后浓缩合并相似组分，得到C1-C66个组分；
5)MCI柱层析脱色：将步骤4中组分20:1洗脱浓缩得到的C3部分用MCI柱层析脱色，洗脱剂为45％-95％甲醇/水溶液，经薄层色谱、紫外光谱法检测，合并相同组分，收集64％的甲醇/水溶液洗脱部分，蒸干后得到组分C3a；
6)半制备HPLC纯化：将步骤5中所述组分C3a经半制备HPLC分离纯化，即得所述三萜化合物，纯度为94％～97％。
所述步骤6中HPLC分离纯化所用的流动相是43％～92％的甲醇/水溶液或34％～83％的乙腈/水溶液，流速为1-5mL/min，半制备柱是以9.4×250mm，10μm的Zorbax SB-C18，HPLC使用的DAD检测器波长为204nm、210nm、254nm和306nm，每次进样量为15～1000μL，收集13～31min范围内的色谱信号峰，重复多次本步骤，合并相同的洗脱剂溶液后，把14.8min得到的流动相用旋转蒸发仪蒸干，得到所述三萜化合物。
所述步骤1中，所述第一有机溶剂为81％～99％的乙醇或81％～99％的甲醇。
所述步骤2中，所述第二有机溶剂为81％～99％的二氯甲烷或81％～99％的乙酸乙酯。
所述步骤3中，装柱硅胶为100-200目，所用硅胶的重量为10-40倍浸膏b重量。
所述步骤4中，装柱硅胶为100-200目，所用硅胶的重量为10-40倍组分C重量。
所述步骤3及步骤4中，拌样硅胶的重量分别为浸膏b及组分C重量的1-3倍。
所述的三萜化合物在制备抗糖尿病药物或保健食品中的应用。
以下结合实施例对本发明作进一步说明。
实施例1
本实施例中无柄灵芝产自云南大理。
取14Kg晒干后粉碎到40目，用86％的工业乙醇在52℃的温度下回流提取3次，每次3小时，合并乙醇溶液，浓缩得到浸膏0.7Kg。
把浸膏转入分液漏斗，再加入1.4L的水，搅拌均匀，然后加入1.4L乙酸乙酯振摇，充分静置，分层后取出乙酸乙酯，反复3次，合并所有的乙酸乙酯溶液，减压蒸馏后得到无柄灵芝浸膏0.4Kg。浸膏用0.8Kg的80目硅胶加入乙酸乙酯溶解后搅拌均匀，干燥后用14Kg的100-200目硅胶的正相硅胶柱色谱初步分离，用体积比为1:0，70:1，40:1，8:1，5:1和0:1的二氯甲烷/甲醇为洗脱剂进行梯度洗脱，得到A-F一共6个组分。组分C(95g)用190g的80目硅胶加入乙酸乙酯溶解后搅拌均匀，干燥后用1.9Kg的100目硅胶的正相硅胶柱色谱分离，用体积比为1:0，40:1，20:1，10:1，5:1和0:1的二氯甲烷/甲醇为洗脱剂进行梯度洗脱，得到C1-C6一共6个组分。组分C3(13g)用45％-95％甲醇/水做为洗脱剂，MCI柱色谱脱色，经紫外光谱、薄层色谱法检测，收集64％甲醇/水溶液洗脱部分，蒸干后得到组分C3a(4.5g)。用半制备高效液相色谱进一步分离纯化组分C3a，用61％的甲醇/水溶液作为流动相，流速为4mL/min，半制备柱是Zorbax SB-C18(10μm，9.4×250mm)，使用波长为204nm、210nm、254nm和306nm的DAD检测器，每次进样量为700μL，收集每次进样后色谱峰保留时间为16.8min时所对应的洗脱液，将洗脱剂溶液蒸干，得到灵芝酸γa纯品230mg。
实施例2
本实施例中的无柄灵芝产自吉林延边。
将22Kg无柄灵芝晒干后粉碎到100目，用93％的工业甲醇在52℃的温度下回流提取3次，每次3小时，合并甲醇溶液，用旋转蒸发仪浓缩得到浸膏1.0Kg。
把浸膏转入分液漏斗，加入2L水，搅拌均匀后加入2L的二氯甲烷振摇，充分静置，分层后取出二氯甲烷溶液，反复3次，合并二氯甲烷，减压蒸馏后得到无柄灵芝浸膏0.9Kg。浸膏用1.8Kg的100目硅胶加入二氯甲烷溶解后搅拌均匀，干燥后用21Kg的200目硅胶的正相硅胶柱色谱分离，用体积比分别为1:0，70:1，40:1，10:1，5:1和0:1的二氯甲烷/甲醇为洗脱剂进行梯度洗脱，得到A-F一共6个组分。组分C(120g)用240g的100目硅胶加入二氯甲烷溶解后搅拌均匀，干燥后用2.6Kg的200目硅胶的正相硅胶柱色谱分离，用体积比分别为1:0，40:1，20:1，10:1，5:1和0:1的二氯甲烷/甲醇为洗脱剂进行梯度洗脱，得到C1-C6一共6个组分。组分C3(23g)用45％-95％甲醇/水溶液梯度洗脱，MCI柱层析脱色，经紫外光谱、薄层色谱法检测，收集64％甲醇/水溶液洗脱部分，蒸干后得到组分C3a(8.0g)。用半制备高效液相色谱进一步分离纯化组分C3a，半制备高效液相色谱的流动相是50％的乙腈/水溶液，流速为4mL/min，半制备柱是Zorbax SB-C18(10μm，9.4×250mm)，使用波长为204nm、210nm、254nm和306nm的DAD检测器，每次进样量为550μL，收集每次进样后色谱峰保留时间为14.8min时所对应的洗脱液，把得到的洗脱剂溶液蒸干，得到灵芝酸γa纯品378mg。
实施例3
实施例1制备的灵芝酸γa，为白色粉末，用核磁共振技术鉴定其结构，具体数据为：
1H-NMR(CD3OD,400MHz)δ:3.28(1H,br.s,H-1a),1.13(1H,m,H-1b),1.76(2H,m,H-2),3.48(1H,dd-like,J＝12.0,4.7Hz,H-3),1.32(1H,m,H-5),1.80(1H,m,H-6a),2.67(1H,m,H-6b),4.70(1H,m,H-7),2.37(1H,d,J＝15.2Hz,H-12a),2.83(1H,d,J＝15.2Hz,H-12b),4.50(1H,m,H-15),1.53-1.79(1H,m,H-16a),2.08(1H,dd,J＝7.4,12.6Hz,H-16b),1.52-1.80(1H,m,H-17),0.81(3H,s,H-18),0.95(3H,s,H-19),1.52-1.80(1H,m,H-20),1.21(3H,d,J＝4.5Hz,H-21),1.52-1.80(2H,m,H-22),4.70(1H,m,H-23),6.55(1H,d,J＝8.7Hz,H-24),1.84(3H,s,H-27),0.93(3H,s,H-28),0.89(3H,s,H-29),0.98(3H,s,H-30)；13C-NMR(CD3OD,100MHz)δ:35.89(C-1),28.98(C-2),78.93(C-3),39.68(C-4),50.40(C-5),28.37(C-6),70.16(C-7),161.28(C-8),143.09(C-9),39.67(C-10),202.36(C-11),53.19(C-12),48.31(C-13),55.28(C-14),73.19(C-15),37.44(C-16),50.09(C-17),16.37(C-18),19.95(C-19),34.77(C-20),20.08(C-21),44.51(C-22),67.36(C-23),144.66(C-24),129.52(C-25),170.39(C-26),13.22(C-27),28.69(C-28),17.43(C-29),19.82(C-30)，鉴定为灵芝酸γa(ganolucidic acidγa)。
实施例4
把实施例1制备的灵芝酸γa按照实施例3的方法进行结构测定，对得到的灵芝酸γa进行α葡萄糖苷酶抑制活性筛选，试验情况如下：
用阿卡波糖为阳性对照，PNPG为底物，测定灵芝酸γa的α葡萄糖苷酶抑制活性抑制活性。实验分为样品组、空白组、阳性对照组和背景组，背景组不加入α葡萄糖苷酶溶液，空白组不加入灵芝酸γa，其余组分别加入PBS缓冲液、灵芝酸γa和α葡萄糖苷酶溶液，在37℃的温度下，在培养箱中培养15分钟，然后加入PNPG溶液培养20分钟。在培养液中加入0.2mol/L的碳酸钠溶液终止反应。在405nm波长的紫外光下测定处吸光度值(A)。灵芝酸γa对α葡萄糖苷酶抑制率计算公式为：抑制率＝[空白组A值－(样品组A值－背景组A值)]/空白组A值。经过活性筛选实验证实，阳性对照阿卡波糖对α葡萄糖苷酶IC50值为2.742μM，灵芝酸γa对α葡萄糖苷酶抑制率IC50值为7.895μM，说明本发明制备的灵芝酸γa对α葡萄糖苷酶具有很好的抑制活性。

Claims (10)

1.无柄灵芝中具有抗糖尿病活性的三萜化合物，其特征在于，所述三萜化合物的分子式为C30H46O7，结构式为I所示：
Figure FDA0002712347850000011
2.权利要求1所述的三萜化合物的制备方法，其特征在于，所述方法为以灵芝属的大型真菌无柄灵芝的子实体作为原料，用溶剂提取、萃取，再用正相柱色谱初步分离，经过MCI色谱脱色，然后用半制备HPLC分离即得目标物。
3.根据权利要求1所述的三萜化合物的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：
1)回流提取：将无柄灵芝子实体晒干，粉碎到40～100目，用第一有机溶剂加热回流提取3次，每次3小时，合并所有溶剂，再减压蒸馏浓缩，得到无柄灵芝的浸膏a；
2)萃取：在分液漏斗中加入浸膏重量1.5-3倍的水与浸膏a搅拌均匀，再加入1-1.2倍体积水的第二有机溶剂摇动，充分静置分层后取出有机溶剂，反复3次后合并有机溶剂，减压蒸馏除去溶剂后得到无柄灵芝浸膏b；
3)初步分离：将浸膏b与80-100目的硅胶拌样后装柱进行正相柱色谱分离，以1:0，70:1，40:1，8:1，5:1和0:1的二氯甲烷/甲醇作为洗脱剂进行梯度洗脱，经TLC和荧光检测后合并相似组分，得到A-F6个组分；
4)二次分离：将步骤3中组分C与80-100目的硅胶搅拌后装柱进行正相色谱法分离，以1:0，40:1，20:1，10:1，5:1和0:1二氯甲烷/甲醇作为洗脱剂进行梯度洗脱，经TLC和荧光检测后浓缩合并相似组分，得到C1-C66个组分；
5)MCI柱层析脱色：将步骤4中组分20:1洗脱浓缩得到的C3部分用MCI柱层析脱色，洗脱剂为45％-95％甲醇/水溶液，经薄层色谱、紫外光谱法检测，合并相同组分，收集64％的甲醇/水溶液洗脱部分，蒸干后得到组分C3a；
6)半制备HPLC纯化：将步骤5中所述组分C3a经半制备HPLC分离纯化，即得所述三萜化合物，纯度为94％～97％。
4.根据权利要求3所述的三萜化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤6中HPLC分离纯化所用的流动相是43％～92％的甲醇/水溶液或34％～83％的乙腈/水溶液，流速为1-5mL/min，半制备柱是9.4×250mm，10μm的Zorbax SB-C18，HPLC使用的DAD检测器波长为204nm、210nm、254nm和306nm，每次进样量为15～1000μL。
5.根据权利要求3所述的三萜化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤1中，所述第一有机溶剂为81％～99％的乙醇或81％～99％的甲醇。
6.根据权利要求3所述的三萜化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤2中，所述第二有机溶剂为81％～99％的二氯甲烷或81％～99％的乙酸乙酯。
7.根据权利要求3所述的三萜化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤3中，装柱硅胶为100-200目，所用硅胶的重量为10-40倍浸膏b重量。
8.根据权利要求3所述的三萜化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤4中，装柱硅胶为100-200目，所用硅胶的重量为10-40倍组分C重量。
9.根据权利要求3所述的三萜化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤3及步骤4中，拌样硅胶的重量分别为浸膏b及组分C重量的1-3倍。
10.权利要求1所述的三萜化合物在制备抗糖尿病药物或保健食品中的应用。
CN202011068560.2A 2020-09-30 2020-09-30 无柄灵芝中具有抗糖尿病活性的三萜化合物的制备方法及应用 Pending CN112028959A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011068560.2A CN112028959A (zh) 2020-09-30 2020-09-30 无柄灵芝中具有抗糖尿病活性的三萜化合物的制备方法及应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011068560.2A CN112028959A (zh) 2020-09-30 2020-09-30 无柄灵芝中具有抗糖尿病活性的三萜化合物的制备方法及应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN112028959A true CN112028959A (zh) 2020-12-04

Family

ID=73573042

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202011068560.2A Pending CN112028959A (zh) 2020-09-30 2020-09-30 无柄灵芝中具有抗糖尿病活性的三萜化合物的制备方法及应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN112028959A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115463137A (zh) * 2022-09-02 2022-12-13 浙江寿仙谷植物药研究院有限公司 一种新型pd-1/pd-l1小分子抑制剂及其应用
CN115894592A (zh) * 2022-11-09 2023-04-04 中国科学院沈阳应用生态研究所 窄孢灵芝中三萜类化合物及其制备方法和应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104873520A (zh) * 2014-02-27 2015-09-02 天津药物研究院 一种11β-羟基类固醇脱氢酶抑制剂、药用组合物及其用途
CN107056867A (zh) * 2017-04-27 2017-08-18 峨眉山国芝堂生物科技有限公司 灵芝三萜化合物、其药用组合物及其应用
CN107141330A (zh) * 2017-04-01 2017-09-08 赵静 一组α‑葡萄糖苷酶抑制剂及其应用

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104873520A (zh) * 2014-02-27 2015-09-02 天津药物研究院 一种11β-羟基类固醇脱氢酶抑制剂、药用组合物及其用途
CN107141330A (zh) * 2017-04-01 2017-09-08 赵静 一组α‑葡萄糖苷酶抑制剂及其应用
CN107056867A (zh) * 2017-04-27 2017-08-18 峨眉山国芝堂生物科技有限公司 灵芝三萜化合物、其药用组合物及其应用

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BAOSONG CHEN ET AL.: "Triterpenes and meroterpenes from Ganoderma lucidum with inhibitory activity against HMGs reductase, aldose reductase and α-glucosidase", 《FITOTERAPIA》 *
XIAN-QIANG CHEN ET AL.: "Lanostane triterpenes from the mushroom Ganoderma resinaceum and their inhibitory activities against a-glucosidase", 《PHYTOCHEMISTRY》 *
刘文星等: "无柄灵芝子实体中的灵芝酸类化合物", 《云南大学学报(自然科学版)》 *
陈康林: "《野生灵芝 国药之王》", 31 August 2005, 中国科学技术出版社 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115463137A (zh) * 2022-09-02 2022-12-13 浙江寿仙谷植物药研究院有限公司 一种新型pd-1/pd-l1小分子抑制剂及其应用
CN115894592A (zh) * 2022-11-09 2023-04-04 中国科学院沈阳应用生态研究所 窄孢灵芝中三萜类化合物及其制备方法和应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105585471B (zh) 一种王枣子活性成分的提取方法
CN112028959A (zh) 无柄灵芝中具有抗糖尿病活性的三萜化合物的制备方法及应用
CN115232187A (zh) 一种从龙脑樟中提取7β-羟基白桦脂酸的方法及应用
CN112125944A (zh) 无柄灵芝中具有α葡萄糖苷酶抑制活性的三萜化合物的制备方法及应用
CN109400665B (zh) 从毛冬青中制备四种三萜类化合物对照品的方法
CN112079895B (zh) 赤芝中两种具有保肝活性的三萜化合物的制备方法和应用
CN110981931B (zh) 槟榔种子化学成分的提取方法
CN107216365B (zh) 一种从中药猪苓中分离麦角甾醇和星鱼甾醇对照品的方法
CN102286064B (zh) 具有胰岛素增敏活性的化合物及其制备方法和用途
CN105061150B (zh) 一种新型二萜醇、其制备方法及应用
CN115160396B (zh) 从中华雪胆中提取的具有抗肠炎活性的葫芦烷型四环三萜类化合物及其制备方法与应用
CN115724900B (zh) 达玛烷型三萜皂苷类化合物及其制备方法和在制备降血糖药物中的应用
Gao et al. Gracillosides A–F, six new 8, 14-seco-pregnane glycosides from Adelostemma gracillimum
CN114133424B (zh) 三萜类化合物及其制备方法和应用
CN113372407B (zh) 甾体皂苷类化合物及其制备方法和应用
CN112121053B (zh) 三叶木通降三萜化合物在制备糖苷酶抑制剂药物中的应用
CN114349808B (zh) 一种大萼香茶菜皂苷a和b单体的分离纯化方法及其应用
CN112480203B (zh) 一种醉茄内酯类化合物及其制备方法和应用
CN108191945B (zh) 日本毛连菜提取物在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂药物中的应用
CN112521439B (zh) 桦褐孔菌醇F及其在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂药物的应用
CN115286682B (zh) 一种3-o-阿拉伯糖基美商陆酸皂苷及其制备方法与应用
CN112979740B (zh) 一种睡茄交酯ⅰ类化合物及其提取方法和应用
CN112979741B (zh) 一种睡茄交酯ii类化合物及其提取方法和应用
CN111518149B (zh) 一种生物碱类化合物、制备方法及应用
CN113004365B (zh) 一种睡茄交酯iii类化合物及其提取方法和应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20201204