CN112022904A - 连翘在治疗与肠道菌群紊乱相关疾病中的用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种连翘或包含连翘的组合物在制备药物中的用途，或者，连翘或包含连翘的组合物在调节肠道微生物中的用途，所述的药物为治疗与肠道微生物紊乱相关疾病的药物。

Description

连翘在治疗与肠道菌群紊乱相关疾病中的用途

技术领域

本发明涉及医药保健技术领域，具体涉及连翘或包含连翘的组合物在制备药物中的用途，或者，连翘或包含连翘的组合物在调节肠道微生物中的用途，所述的药物为治疗与肠道微生物紊乱相关疾病的药物。

背景技术

人的胃肠道内寄居着种类繁多的微生物，即肠道菌群。肠道菌群按照一定的比例组合，各菌间相互制约，相互依存，在质和量上形成一种生态平衡。正常菌群对人体有益无害，而且是必须的，正常菌群是由相当固定的细菌组成，有规律地定居于身体一些特定部位，成为身体的一个组成部分。正常菌群不仅在消化、免疫和抗病毒方面发挥着不可替代的作用，而且肠道微生物的改变与机体健康或疾病特别是一些慢性疾病的发生具有极为密切的关系。

研究证实，人体的多种疾病如长期腹泻、便秘、肥胖、食物过敏、胰腺炎、肝损伤、肠道炎症、肠易激综合征、消化道溃疡、糖尿病、克罗恩病(Crohn’s disease)、心血管疾病、肿瘤等的发病都与肠道微生物密切相关。虽然目前还不清楚究竟是肠道微生物菌群的变化引起了代谢类疾病的发生，还是代谢类疾病的发生导致了肠道微生物菌群的变化，但是有一点可以肯定：通过改变肠道微生物菌群的构成，对人体的健康产生影响，同时也可能对某些疾病的治疗提供帮助。目前，肠道微生物已被认为是多种疾病的可能治疗靶标。

专利文献CN108289917A公开了一种治疗患有微生态失衡的个体的方法，包括确定患有微生态失衡的个体的肠道微生物组的第一代谢谱，通过向个体施用粪便细菌群落来将个体的肠道微生物组的第一代谢谱改变为第二代谢谱。

专利文献CN106620189A提供了一种改善肠道微生物结构的方法，及其在制备药物、营养品、保健品、食品、饮料等过程中的应用。此发明采用基于高通量测序技术以及多变量统计学方法找出了与宿主代谢密切相关的肠道细菌类群，如肠道中产短链脂肪酸的细菌大多为有益菌，其可以通过增加肠道中短链脂肪酸的含量起到抗炎、保护肠屏障功能、调节人体代谢与免疫等作用。短链脂肪酸产生菌包括布劳特氏菌属、Allobaculum、普氏菌属、拟杆菌属或Butyricimonas。肠道中产内毒素的细菌大多为有害菌，其可以通过增加肠道中内毒素含量引起炎症、损害肠屏障功能、引起人体代谢与免疫失调等作用。产生内毒素的细菌包括变形菌门的细菌。

研究表明，中药及一些药食同源的食品可能与调节人体或动物的肠道微生物有关。连翘(Forsythia suspensa)苦、平、无毒，性凉味苦、气味俱薄、轻清而浮、升也阳也，寒热鼠瘰、痈肿恶疮瘿瘤、结热蛊毒，通利五淋、小便不通、除心家客热，泻心火、除脾胃湿热、治中部血证、以为使。连翘主要含苯乙醇苷类、木脂体及其苷类、五环三萜类、挥发油。例如：连翘酚(Forsythol)；连翘甙(Phillyrin)、连翘甙元(Phillygenin)；齐墩果酸(Oleanolicacid)、白桦脂酸(Betulinicacid)、熊果酸(Ursolicacid)、松脂素(Pinoresinol)、甾醇化合物C49H70-80O6.马苔树脂醇甙(Matairesinoside)。还含有多种烃类、醛酮类、醇酯醚类挥发性成分：α-蒎烯(α-Pinene)、莰烯(Camphene)、β-蒎烯(β-Pinene)、对聚伞花烯(p-Cymene)、柠檬烯(Limonene)、γ-松油烯(γ-Terpinene)、β-水芹烯(β-Phellandrene)、香叶烯(Myrcene)、β-罗勒烯(β-Ocimene)；樟脑(Camphor)、香叶醛(Geranial)；龙脑(Borneol)、α-萜品醇(α-Terpineol)、黄樟醚(Safrole)、芳樟醇(Linalool)、松油烯醇-4(Terpinen-4-ol)、去甲拉帕醇(Norlapa-chol)以及香豆素、芦丁等。连翘，具有抗菌作用，可抑制金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎双球菌、绿脓杆菌、伤寒杆菌及真菌和病毒等。并对急性肾炎、肺结核、视网膜黄斑区出血、呃逆、便秘等都具有一定的作用。

现有技术中，对于连翘能否调节肠道微生物有了一定的进展，例如：

专利CN101658236A公开了一种生物饲料的制备方法，所述的生物饲料用包含灌叶连翘在内的中草药作为培养基，培养菌种作为生物饲料，其中，主要利用中草药对病原微生物的抑杀、抗菌、保健、无耐药性，促进生长的功效。

专利CN106038870A公开了一种调节肠道微生物菌群的组合物，包括双歧杆菌、乳酸菌、糖类及包含连翘在内的中草药，该组合物可以调节肠道菌群，促进益生菌繁殖，抑制有害菌繁殖，达到调节肠道菌群的效果。

专利CN107484919A公开了一种能增强鱼类免疫力的微生物饲料添加剂，包括连翘、陈皮及枯草芽孢杆菌、植物乳酸菌等，该添加剂能促进宿主分泌抗体，提高宿主免疫细胞的活性，提高机体免疫力和抵抗力；保持肠道微生态平衡和最佳免疫状态，提高营养物质的消化吸收率。

但是以上现有技术均未对连翘调节微生物的具体菌种进行披露，为弥补此缺陷，本发明中，发明人对连翘调节肠道微生物的具体菌种做了相关研究。

发明内容

本发明人研究发现，连翘能显著提高肠道内有益微生物的数量，同时抑制有害微生物的数量，调节肠道微生物平衡。

具体地，本发明的第一方面，提供了连翘在制备药物中的用途，所述的药物为治疗与肠道菌群紊乱相关疾病的药物。

优选的，所述的连翘(Forsythia suspensa)苦、平、无毒，性凉味苦、气味俱薄、轻清而浮、升也阳也，寒热鼠瘰、痈肿恶疮瘿瘤、结热蛊毒，通利五淋、小便不通、除心家客热，泻心火、除脾胃湿热、治中部血证、以为使。连翘主要含苯乙醇苷类、木脂体及其苷类、五环三萜类、挥发油。例如：连翘酚(Forsythol)；连翘甙(Phillyrin)、连翘甙元(Phillygenin)；齐墩果酸(Oleanolicacid)、白桦脂酸(Betulinicacid)、熊果酸(Ursolicacid)、松脂素(Pinoresinol)、甾醇化合物C49H70-80O6.马苔树脂醇甙(Matairesinoside)。还含有多种烃类、醛酮类、醇酯醚类挥发性成分：α-蒎烯(α-Pinene)、莰烯(Camphene)、β-蒎烯(β-Pinene)、对聚伞花烯(p-Cymene)、柠檬烯(Limonene)、γ-松油烯(γ-Terpinene)、β-水芹烯(β-Phellandrene)、香叶烯(Myrcene)、β-罗勒烯(β-Ocimene)；樟脑(Camphor)、香叶醛(Geranial)；龙脑(Borneol)、α-萜品醇(α-Terpineol)、黄樟醚(Safrole)、芳樟醇(Linalool)、松油烯醇-4(Terpinen-4-ol)、去甲拉帕醇(Norlapa-chol)以及香豆素、芦丁等。连翘，具有抗菌作用，可抑制金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎双球菌、绿脓杆菌、伤寒杆菌及真菌和病毒等。并对急性肾炎、肺结核、视网膜黄斑区出血、呃逆、便秘等都具有一定的作用。

优选的，所述的肠道菌群选自细菌、古细菌、原生动物、真菌或病毒中的一种或两种以上的组合。

优选的，所述的与肠道菌群紊乱相关疾病选自长期腹泻、便秘、肥胖、食物过敏、胰腺炎、肝损伤、肠道炎症、肠易激综合征、消化道溃疡、肾结石、糖尿病、类风湿性关节炎、白塞病、心血管疾病、脑血管疾病、肿瘤、瘫痪、眼病、多发性硬化症、强直性脊柱炎、帕金森症、焦虑、自闭症、抑郁症或慢性疲劳症中的一种或两种以上的组合。

本发明的第二方面，提供了包含连翘的组合物在制备药物中的用途，所述的药物为治疗与肠道菌群紊乱相关疾病的药物。

优选的，所述的连翘(Forsythia suspensa)苦、平、无毒，性凉味苦、气味俱薄、轻清而浮、升也阳也，寒热鼠瘰、痈肿恶疮瘿瘤、结热蛊毒，通利五淋、小便不通、除心家客热，泻心火、除脾胃湿热、治中部血证、以为使。连翘主要含苯乙醇苷类、木脂体及其苷类、五环三萜类、挥发油。例如：连翘酚(Forsythol)；连翘甙(Phillyrin)、连翘甙元(Phillygenin)；齐墩果酸(Oleanolicacid)、白桦脂酸(Betulinicacid)、熊果酸(Ursolicacid)、松脂素(Pinoresinol)、甾醇化合物C49H70-80O6.马苔树脂醇甙(Matairesinoside)。还含有多种烃类、醛酮类、醇酯醚类挥发性成分：α-蒎烯(α-Pinene)、莰烯(Camphene)、β-蒎烯(β-Pinene)、对聚伞花烯(p-Cymene)、柠檬烯(Limonene)、γ-松油烯(γ-Terpinene)、β-水芹烯(β-Phellandrene)、香叶烯(Myrcene)、β-罗勒烯(β-Ocimene)；樟脑(Camphor)、香叶醛(Geranial)；龙脑(Borneol)、α-萜品醇(α-Terpineol)、黄樟醚(Safrole)、芳樟醇(Linalool)、松油烯醇-4(Terpinen-4-ol)、去甲拉帕醇(Norlapa-chol)以及香豆素、芦丁等。连翘，具有抗菌作用，可抑制金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎双球菌、绿脓杆菌、伤寒杆菌及真菌和病毒等。并对急性肾炎、肺结核、视网膜黄斑区出血、呃逆、便秘等都具有一定的作用。

优选的，所述的肠道菌群选自细菌、古细菌、原生动物、真菌或病毒中的一种或两种以上的组合。

优选的，所述的与肠道菌群紊乱相关疾病选自长期腹泻、便秘、肥胖、食物过敏、胰腺炎、肝损伤、肠道炎症、肠易激综合征、消化道溃疡、肾结石、糖尿病、类风湿性关节炎、白塞病、心血管疾病、脑血管疾病、肿瘤、瘫痪、眼病、多发性硬化症、强直性脊柱炎、帕金森症、焦虑、自闭症、抑郁症或慢性疲劳症中的一种或两种以上的组合。

优选的，所述的包含连翘的组合物为连翘与选自补气药、补血药、补阴药、温化寒痰药、凉血止血药、化瘀止血药、利水消肿药、清热凉血药或肠道菌中的一种或两种以上的组合。

其中，所述的补气药选自：人参、西洋参、党参、太子参、黄芪、白术、山药、白扁豆、甘草、大枣、刺五加、绞股蓝、红景天、沙棘、饴糖或蜂蜜中的一种或两种以上的组合；所述补血药选自：当归、熟地黄、阿胶、何首乌、龙眼肉或楮实子中的一种或两种以上的组合；所述补阴药选自：北沙参、南沙参、百合、麦冬、天冬、石斛、玉竹、黄精、明党参、枸杞子、墨旱莲、女贞子、桑椹、黑芝麻、龟甲、鳖甲、银耳、燕窝或鱼鰾胶中的一种或两种以上的组合；所述温化寒痰药选自：半夏、天南星、白芥子、皂荚、旋覆花、川贝母、瓜蒌、竹茹、竹沥、天竺黄、前胡、桔梗或胖大海中的一种或两种以上的组合；所述凉血止血药选自：小蓟、大蓟、地榆、槐花、侧柏叶、白茅根、郁金或苎麻根中的一种或两种以上的组合；所述化瘀止血药选自：三七、茜草、蒲黄、花蕊石、降香或血余炭中的一种或两种以上的组合；所述利水消肿药选自：茯苓、薏仁、猪苓、泽泻、冬瓜皮、玉米须、葫芦、香加皮、枳椇子、泽漆、蝼蛄或荠菜中的一种或两种以上的组合；所述清热凉血药选自：生地黄、大黄炭、玄参、牡丹皮、赤芍、紫草、水牛角或溪黄草中的一种或两种以上的组合；所述的肠道菌选自乳酸杆菌属(Lactobacillus)、巨球型菌属(Megasphaera)、链球菌属(Streptococcus)、毛螺菌科(Lachnospiraceae)、小杆菌属(Dialister)、普雷沃菌属(Prevotella)、真杆菌属([Eubacterium])、嗜血杆菌(Haemophilus)、巴斯德菌科(Pasteurellaceae)中的一种或两种以上的组合。

优选的，所述的包含连翘的组合物为连翘与选自补气药、补血药、补阴药、温化寒痰药、凉血止血药、化瘀止血药、利水消肿、清热凉血药或肠道菌中的一种或两种以上的组合的份数比为1-99:99-1。

优选的，所述包含连翘的组合物中还包括药剂学上可接受的辅料，所述辅料选自：载体、稀释剂、粘合剂、润滑剂、润湿剂。

优选的，所述包含连翘的组合物的剂型选自：片剂、胶囊、丸剂、注射剂、吸入剂、含片、栓剂、乳剂、微乳剂、亚微乳剂、纳米颗粒、凝胶剂、粉剂、悬乳液、乳膏剂、胶冻剂、喷雾剂等。

优选的，所述包含连翘的组合物可采取的给药方式选自：口服、肠给药、皮下注射、肌肉注射、静脉注射、鼻腔给药、透皮给药、结膜下给药、眼球内给药、眼眶给药、眼球后给药、视网膜给药、脉络膜给药、鞘内注射等。

本发明的第三方面，提供了连翘在调节肠道微生物中的用途。

优选的，所述的连翘(Forsythia suspensa)苦、平、无毒，性凉味苦、气味俱薄、轻清而浮、升也阳也，寒热鼠瘰、痈肿恶疮瘿瘤、结热蛊毒，通利五淋、小便不通、除心家客热，泻心火、除脾胃湿热、治中部血证、以为使。连翘主要含苯乙醇苷类、木脂体及其苷类、五环三萜类、挥发油。例如：连翘酚(Forsythol)；连翘甙(Phillyrin)、连翘甙元(Phillygenin)；齐墩果酸(Oleanolicacid)、白桦脂酸(Betulinicacid)、熊果酸(Ursolicacid)、松脂素(Pinoresinol)、甾醇化合物C49H70-80O6.马苔树脂醇甙(Matairesinoside)。还含有多种烃类、醛酮类、醇酯醚类挥发性成分：α-蒎烯(α-Pinene)、莰烯(Camphene)、β-蒎烯(β-Pinene)、对聚伞花烯(p-Cymene)、柠檬烯(Limonene)、γ-松油烯(γ-Terpinene)、β-水芹烯(β-Phellandrene)、香叶烯(Myrcene)、β-罗勒烯(β-Ocimene)；樟脑(Camphor)、香叶醛(Geranial)；龙脑(Borneol)、α-萜品醇(α-Terpineol)、黄樟醚(Safrole)、芳樟醇(Linalool)、松油烯醇-4(Terpinen-4-ol)、去甲拉帕醇(Norlapa-chol)以及香豆素、芦丁等。连翘，具有抗菌作用，可抑制金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎双球菌、绿脓杆菌、伤寒杆菌及真菌和病毒等。并对急性肾炎、肺结核、视网膜黄斑区出血、呃逆、便秘等都具有一定的作用。

优选的，所述的肠道微生物选自细菌、古细菌、原生动物、真菌或病毒中的一种或两种以上的组合。

进一步优选的，所述的调节肠道微生物为选择性的增加肠道中细菌的数量，所述的细菌选自乳酸杆菌属(Lactobacillus)、巨球型菌属(Megasphaera)、链球菌属(Streptococcus)、毛螺菌科(Lachnospiraceae)、小杆菌属(Dialister)、普雷沃菌属(Prevotella)、真杆菌属([Eubacterium])、嗜血杆菌(Haemophilus)、巴斯德菌科(Pasteurellaceae)中的一种或两种以上的组合。

更进一步优选的，所述的调节肠道微生物为选择性的增加肠道中细菌的数量，所述的细菌选自乳酸杆菌属(Lactobacillus)、巨球型菌属(Megasphaera)、链球菌属(Streptococcus)、普雷沃菌属(Prevotella)中的一种或两种以上的组合。

在本发明的一个具体实施方式中，所述的调节肠道微生物为选择性的增加肠道中细菌的数量，所述的细菌选自Lactobacillus johnsonii、Lactobacillus reuteri、Lactobacillus murinus、Megasphaera elsdenii、Lactobacillus mucosae、Lactobacillus amylovorus、Streptococcus lutetiensis、Streptococcus infantarius、Lachnospiraceae bacterium GAM79、Dialister sp.Marseille-P5638、Prevotellamelaninogenica、Prevotella scopos、Lactobacillus agilis、Streptococcusgallolyticus、Prevotella jejuni、Prevotella fusca、[Eubacterium]eligens、Lactobacillus fermentum、Prevotella bryantii、Prevotella sp.Sc00026、Lactobacillus acidophilus、Haemophilus parainfluenzae、Lactobacillussalivarius、Streptococcus pasteurianus、Pasteurellaceae bacterium NI1060、Streptococcus macedonicus、Prevotella buccae、Prevotella ruminicola或Lactobacillus gasseri中的一种或两种以上的组合。

进一步优选的，所述的调节肠道微生物为选择性的抑制肠道中细菌的数量，所述的细菌选自沼杆菌属(Paludibacter)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、中华根瘤菌属(Sinorhizobium)、产黄菌属(Flavobacterium)、钩端螺旋体属(Leptospira)、拟杆菌目(Bacteroidales)、变杆菌属(Variibacter)、脱硫弧菌属(Desulfovibrio)、动性球菌属(Planococcus)、假单胞菌属(Pseudomonas)、慢生根瘤菌属(Bradyrhizobium)、贪铜菌属(Cupriavidus)、食物谷菌目(Victivallales)、螺杆菌属(Helicobacter)、弯曲菌属(Campylobacter)或密螺旋体属(Treponema)中的一种或两种以上的组合。

更进一步优选的，所述的调节肠道微生物为选择性的抑制肠道中细菌的数量，所述的细菌选自食物谷菌目(Victivallales)、螺杆菌属(Helicobacter)、弯曲菌属(Campylobacter)或密螺旋体属(Treponema)中的一种或两种以上的组合。

在本发明的一个具体实施方式中，优选的，所述的调节肠道微生物为选择性的抑制肠道中细菌的数量，所述的细菌选自Paludibacter propionicigenes、Staphylococcusaureus、Sinorhizobium sp.RAC02、Flavobacterium sp.HYN0049、Leptospirasantarosai、Bacteroidales bacterium CF、Variibacter gotjawalensis、Desulfovibriopiger、Planococcus maritimus、Pseudomonas sp.LG1E9、Bradyrhizobium sp.、Cupriavidus sp.USMAA2-4、uncultured bacterium Lq_025_E06、Victivallalesbacterium CCUG 44730、Helicobacter bilis、Campylobacter coli或Treponemasuccinifaciens中的一种或两种以上的组合。

进一步优选的，所述的调节肠道微生物为选择性的抑制肠道中古细菌的数量，所述的古细菌为甲烷短杆菌属(Methanobrevibacter)。

在本发明的一个具体实施方式中，所述的调节肠道微生物为选择性的抑制肠道中古细菌的数量，所述的古细菌为Methanobrevibacter smithii。

进一步优选的，所述的调节肠道微生物为选择性的抑制肠道中原生动物的数量，所述的原生动物为芽囊原虫(Blastocystis)。

在本发明的一个具体实施方式中，所述的调节肠道微生物为选择性的抑制肠道中原生动物的数量，所述的原生动物选自Blastocystis hominis、Blastocystis sp.subtype1、Blastocystis sp.subtype 3或Blastocystis sp.subtype 2中的一种或两种以上的组合。

进一步优选的，所述的调节肠道微生物为选择性的抑制肠道中真菌的数量，所述的真菌为Kalmanozyma brasiliensis。

在本发明的一个具体实施方式中，所述的调节肠道微生物为选择性的抑制肠道中真菌的数量，所述的真菌为Kalmanozyma brasiliensis。

进一步优选的，所述的调节肠道微生物为选择性的增加肠道中病毒的数量，所述的病毒为粪杆菌属噬菌体(Faecalibacterium)。

在本发明的一个具体实施方式中，所述的调节肠道微生物为选择性的增加肠道中病毒的数量，所述的病毒为Faecalibacterium phage FP_Brigit。

本发明的第四方面，提供了包含连翘的组合物在调节肠道微生物中的用途。

优选的，所述的连翘(Forsythia suspensa)苦、平、无毒，性凉味苦、气味俱薄、轻清而浮、升也阳也，寒热鼠瘰、痈肿恶疮瘿瘤、结热蛊毒，通利五淋、小便不通、除心家客热，泻心火、除脾胃湿热、治中部血证、以为使。连翘主要含苯乙醇苷类、木脂体及其苷类、五环三萜类、挥发油。例如：连翘酚(Forsythol)；连翘甙(Phillyrin)、连翘甙元(Phillygenin)；齐墩果酸(Oleanolicacid)、白桦脂酸(Betulinicacid)、熊果酸(Ursolicacid)、松脂素(Pinoresinol)、甾醇化合物C49H70-80O6.马苔树脂醇甙(Matairesinoside)。还含有多种烃类、醛酮类、醇酯醚类挥发性成分：α-蒎烯(α-Pinene)、莰烯(Camphene)、β-蒎烯(β-Pinene)、对聚伞花烯(p-Cymene)、柠檬烯(Limonene)、γ-松油烯(γ-Terpinene)、β-水芹烯(β-Phellandrene)、香叶烯(Myrcene)、β-罗勒烯(β-Ocimene)；樟脑(Camphor)、香叶醛(Geranial)；龙脑(Borneol)、α-萜品醇(α-Terpineol)、黄樟醚(Safrole)、芳樟醇(Linalool)、松油烯醇-4(Terpinen-4-ol)、去甲拉帕醇(Norlapa-chol)以及香豆素、芦丁等。连翘，具有抗菌作用，可抑制金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎双球菌、绿脓杆菌、伤寒杆菌及真菌和病毒等。并对急性肾炎、肺结核、视网膜黄斑区出血、呃逆、便秘等都具有一定的作用。

优选的，所述的肠道微生物选自细菌、古细菌、原生动物、真菌或病毒中的一种或两种以上的组合。

进一步优选的，所述的调节肠道微生物为选择性的增加肠道中细菌的数量，所述的细菌选自乳酸杆菌属(Lactobacillus)、巨球型菌属(Megasphaera)、链球菌属(Streptococcus)、毛螺菌科(Lachnospiraceae)、小杆菌属(Dialister)、普雷沃菌属(Prevotella)、真杆菌属([Eubacterium])、嗜血杆菌(Haemophilus)、巴斯德菌科(Pasteurellaceae)中的一种或两种以上的组合。

更进一步优选的，所述的调节肠道微生物为选择性的增加肠道中细菌的数量，所述的细菌选自乳酸杆菌属(Lactobacillus)、巨球型菌属(Megasphaera)、链球菌属(Streptococcus)、普雷沃菌属(Prevotella)中的一种或两种以上的组合。

在本发明的一个具体实施方式中，所述的调节肠道微生物为选择性的增加肠道中细菌的数量，所述的细菌选自Lactobacillus johnsonii、Lactobacillus reuteri、Lactobacillus murinus、Megasphaera elsdenii、Lactobacillus mucosae、Lactobacillus amylovorus、Streptococcus lutetiensis、Streptococcus infantarius、Lachnospiraceae bacterium GAM79、Dialister sp.Marseille-P5638、Prevotellamelaninogenica、Prevotella scopos、Lactobacillus agilis、Streptococcusgallolyticus、Prevotella jejuni、Prevotella fusca、[Eubacterium]eligens、Lactobacillus fermentum、Prevotella bryantii、Prevotella sp.Sc00026、Lactobacillus acidophilus、Haemophilus parainfluenzae、Lactobacillussalivarius、Streptococcus pasteurianus、Pasteurellaceae bacterium NI1060、Streptococcus macedonicus、Prevotella buccae、Prevotella ruminicola或Lactobacillus gasseri中的一种或两种以上的组合。

进一步优选的，所述的调节肠道微生物为选择性的抑制肠道中细菌的数量，所述的细菌选自沼杆菌属(Paludibacter)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、中华根瘤菌属(Sinorhizobium)、产黄菌属(Flavobacterium)、钩端螺旋体属(Leptospira)、拟杆菌目(Bacteroidales)、变杆菌属(Variibacter)、脱硫弧菌属(Desulfovibrio)、动性球菌属(Planococcus)、假单胞菌属(Pseudomonas)、慢生根瘤菌属(Bradyrhizobium)、贪铜菌属(Cupriavidus)、食物谷菌目(Victivallales)、螺杆菌属(Helicobacter)、弯曲菌属(Campylobacter)或密螺旋体属(Treponema)中的一种或两种以上的组合。

更进一步优选的，所述的调节肠道微生物为选择性的抑制肠道中细菌的数量，所述的细菌选自食物谷菌目(Victivallales)、螺杆菌属(Helicobacter)、弯曲菌属(Campylobacter)或密螺旋体属(Treponema)中的一种或两种以上的组合。

在本发明的一个具体实施方式中，优选的，所述的调节肠道微生物为选择性的抑制肠道中细菌的数量，所述的细菌选自Paludibacter propionicigenes、Staphylococcusaureus、Sinorhizobium sp.RAC02、Flavobacterium sp.HYN0049、Leptospirasantarosai、Bacteroidales bacterium CF、Variibacter gotjawalensis、Desulfovibriopiger、Planococcus maritimus、Pseudomonas sp.LG1E9、Bradyrhizobium sp.、Cupriavidus sp.USMAA2-4、uncultured bacterium Lq_025_E06、Victivallalesbacterium CCUG 44730、Helicobacter bilis、Campylobacter coli或Treponemasuccinifaciens中的一种或两种以上的组合。

进一步优选的，所述的调节肠道微生物为选择性的抑制肠道中古细菌的数量，所述的古细菌为甲烷短杆菌属(Methanobrevibacter)。

在本发明的一个具体实施方式中，所述的调节肠道微生物为选择性的抑制肠道中古细菌的数量，所述的古细菌为Methanobrevibacter smithii。

进一步优选的，所述的调节肠道微生物为选择性的抑制肠道中原生动物的数量，所述的原生动物为芽囊原虫(Blastocystis)。

在本发明的一个具体实施方式中，所述的调节肠道微生物为选择性的抑制肠道中原生动物的数量，所述的原生动物选自Blastocystis hominis、Blastocystis sp.subtype1、Blastocystis sp.subtype 3或Blastocystis sp.subtype 2中的一种或两种以上的组合。

进一步优选的，所述的调节肠道微生物为选择性的抑制肠道中真菌的数量，所述的真菌为Kalmanozyma brasiliensis。

在本发明的一个具体实施方式中，所述的调节肠道微生物为选择性的抑制肠道中真菌的数量，所述的真菌为Kalmanozyma brasiliensis。

进一步优选的，所述的调节肠道微生物为选择性的增加肠道中病毒的数量，所述的病毒为粪杆菌属噬菌体(Faecalibacterium)。

在本发明的一个具体实施方式中，所述的调节肠道微生物为选择性的增加肠道中病毒的数量，所述的病毒为Faecalibacterium phage FP_Brigit。

优选的，所述的包含连翘的组合物为连翘与选自补气药、补血药、补阴药、温化寒痰药、凉血止血药、化瘀止血药、利水消肿药、清热凉血药或肠道菌中的一种或两种以上的组合。

其中，所述的补气药选自：人参、西洋参、党参、太子参、黄芪、白术、山药、白扁豆、甘草、大枣、刺五加、绞股蓝、红景天、沙棘、饴糖或蜂蜜中的一种或两种以上的组合；所述补血药选自：当归、熟地黄、阿胶、何首乌、龙眼肉或楮实子中的一种或两种以上的组合；所述补阴药选自：北沙参、南沙参、百合、麦冬、天冬、石斛、玉竹、黄精、明党参、枸杞子、墨旱莲、女贞子、桑椹、黑芝麻、龟甲、鳖甲、银耳、燕窝或鱼鰾胶中的一种或两种以上的组合；所述温化寒痰药选自：半夏、天南星、白芥子、皂荚、旋覆花、川贝母、瓜蒌、竹茹、竹沥、天竺黄、前胡、桔梗或胖大海中的一种或两种以上的组合；所述凉血止血药选自：小蓟、大蓟、地榆、槐花、侧柏叶、白茅根、郁金或苎麻根中的一种或两种以上的组合；所述化瘀止血药选自：三七、茜草、蒲黄、花蕊石、降香或血余炭中的一种或两种以上的组合；所述利水消肿药选自：茯苓、薏仁、猪苓、泽泻、冬瓜皮、玉米须、葫芦、香加皮、枳椇子、泽漆、蝼蛄或荠菜中的一种或两种以上的组合；所述清热凉血药选自：生地黄、大黄炭、玄参、牡丹皮、赤芍、紫草、水牛角或溪黄草中的一种或两种以上的组合；所述的肠道菌选自乳酸杆菌属(Lactobacillus)、巨球型菌属(Megasphaera)、链球菌属(Streptococcus)、毛螺菌科(Lachnospiraceae)、小杆菌属(Dialister)、普雷沃菌属(Prevotella)、真杆菌属([Eubacterium])、嗜血杆菌(Haemophilus)、巴斯德菌科(Pasteurellaceae)中的一种或两种以上的组合。

优选的，所述的包含连翘的组合物为连翘与选自补气药、补血药、补阴药、温化寒痰药、凉血止血药、化瘀止血药、利水消肿、清热凉血药或肠道菌中的一种或两种以上的组合的份数比为1-99:99-1。

优选的，所述包含连翘的组合物中还包括药剂学上可接受的辅料，所述辅料选自：载体、稀释剂、粘合剂、润滑剂、润湿剂。

优选的，所述包含连翘的组合物的剂型选自：片剂、胶囊、丸剂、注射剂、吸入剂、含片、栓剂、乳剂、微乳剂、亚微乳剂、纳米颗粒、凝胶剂、粉剂、悬乳液、乳膏剂、胶冻剂、喷雾剂等。

优选的，所述包含连翘的组合物可采取的给药方式选自：口服、肠给药、皮下注射、肌肉注射、静脉注射、鼻腔给药、透皮给药、结膜下给药、眼球内给药、眼眶给药、眼球后给药、视网膜给药、脉络膜给药、鞘内注射等。

本发明所述的连翘为连翘粉或连翘提取物。

所述的连翘为连翘粉。优选的，所述的连翘粉为将连翘粉碎至30-1200目。进一步优选的，所述的连翘粉为将连翘粉碎至150-800目。

在本发明的一个具体实施方式中，所述的连翘粉为将连翘粉碎至200-500目。

本发明还提供了一种连翘粉的制备方法，包括：

1)采连翘，除去杂质，蒸熟，干燥；

2)洗净，切片；

3)干燥，粉碎，获得连翘粉。

优选的，所述的步骤2)中切片为将连翘切成1-3mm的薄片。

优选的，所述的步骤3)中的干燥方式选自晒干、烘干、阴干、低温干燥，使得连翘表面的水分≤0.5％。

优选的，所述的步骤3)中的连翘粉为30-1200目。进一步优选的，所述的连翘粉为150-800目。更进一步优选的，所述的连翘粉为200-500目。

所述的连翘为连翘提取物。优选的，所述的连翘提取物的提取方法选自：溶剂浸提法、渗漉法、煎煮法、回流法、连续回流法、超声提取法、超临界流体萃取法、水蒸气蒸馏法、升华法、树脂吸附分离法或凝胶色谱分离法。

在本发明的一个具体实施方式中，所述的连翘提取物的提取方法为煎煮法或溶剂浸提法。

本发明还提供了一种连翘提取物的制备方法，包括如下步骤：

(1)采连翘，去除杂质，烘干，粉碎为粗粉；

(2)加入溶剂提取，过滤后进行减压浓缩得浓缩液；

(3)将浓缩液过吸附柱进行洗脱，先用纯化水洗涤，去除杂质，用乙醇洗脱得洗脱液；

(4)减压浓缩洗脱液，脱色，精制，减压浓缩至浸膏，干燥后得连翘提取物；

优选的，所述的步骤(1)中粗粉为将连翘粉碎至30-500目。

优选的，所述步骤(1)中烘干温度为20-80℃。

在本发明的一个具体实施方式中，所述步骤(1)中烘干温度为40-60℃。

优选的，所述步骤(2)中溶剂选自：N,N-二甲基甲酰胺、乙酸、二氯甲烷、甲醇、乙醇、异丙醇、叔丁醇、乙腈或丙酮；更优选的，所述溶剂为30％-90％乙醇水溶液。

优选的，所述步骤(3)中的吸附柱填料选自：HPD系列、ADS系列、HZ系列、XAD系列和D系列大孔树脂填料中的一种或一种以上的组合。进一步优选的，所述吸附柱填料选自：HPD100、HZ18和D101中的一种或一种以上的组合。

优选的，所述步骤(4)中干燥方式选自：喷雾干燥、真空干燥、冷冻干燥、近红外干燥和微波干燥中的一种或一种以上的组合。进一步优选为真空干燥，干燥温度为30-50℃。

本发明所述的连翘包括大翘、小翘、青翘、老翘等。优选的，所述的连翘为木犀科植物连翘Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl的干燥果实，秋季果实初熟尚带绿色时采收。

附图说明

以下，结合附图来详细说明本发明的实施例，其中：

图1：连翘改变的肠道微生物物种。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明的部分实施例，而不是全部。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1连翘粉的制备

选用药用价值较高的干燥连翘进行制备，在冷水中清洗干净，切成2mm的薄片，放入低温干燥箱中进行干燥，干燥温度为50℃，湿度为10-20％RH，直至连翘薄片表面水分≤0.5％，即可将干燥的连翘薄片趁热输入粉碎机进行粉碎，粉碎至250目，即获得连翘粉。

实施例2乙醇浸提法制备连翘提取物

选用药用价值较高的干燥连翘进行提取，将干燥连翘在60℃烘干、粉碎为50目的粗粉，用干燥连翘10倍体积的75％的乙醇水溶液提取3次，过滤后进行减压浓缩得浓缩液，将浓缩液过填料为HPD100的吸附柱，先用纯化水洗涤，去杂质，再用65％乙醇水溶液洗脱，获得的洗脱液减压浓缩，脱色，精制成浸膏，经真空干燥获得连翘提取物。

实施例3水煎煮法制备连翘提取物

选用药用价值较高的干燥连翘进行提取，称取100g干燥连翘，洗净，置适宜容积的煎器中，加水约600mL浸没药材1h，煮沸后加热0.5h。分离煎出液，药渣进行二次煎煮，煎出液与第一次煎出液混合，用量筒量取体积，若体积超过600mL则将煎出液进一步煮沸浓缩至约600mL，达到相应体积后将煎出液进行真空包装，装至7-8个小袋中，放入4℃保存待用。

实施例4连翘对肠道微生物的影响

本实验以实验用猴子为实验对象，实验药物为按照实施例3制备的连翘提取物，给药方式为经鼻灌胃给药，灌胃为每天一次，连续14天。采集灌胃14天中每天、灌胃前后各1天的粪便。实验标准如下：猴子饲养按照非灵长类实验动物饲养标准执行，每天早上8点对动物笼底进行冲洗，将一不锈钢网放入动物笼底，之后等待猴子自行排便，排便后核对猴子ID，对粪便进行拍照，使用采便管采集粪便，注意采集过程中避开与网面接触的粪便，之后放入-80℃冰箱保存。

DNA的提取采用强力粪便DNA提取试剂盒(Qiagen，USA)进行提取，每个样品提取100ng DNA，用非接触式超声波破碎仪制成300-400bp的DNA片段，使用高通量测序平台文库构建定向优化试剂盒VAHTS Nano DNA Library Prep Kit for Illumina(Vazyme，中国)进行测序，测序深度达3千万-5千万每个样品，对每个测序读数进行质量控制，对于非人源序列采用Kraken及Bracken进行分析，以自定义的数据库作为参考，此数据库包括在2017年12月22日前RefSeq中所有的细菌、古细菌、病毒、真菌和原生动物的基因组。

实验结果见图1及表1所示，对实验结果进行统计后发现，连翘提取物对肠道微生物的影响包括选择性的增加肠道中一些细菌的数量，同时抑制肠道中另外一些细菌、古细菌、原生动物、真菌及病毒的数量来发挥作用。

表1连翘改变的肠道微生物物种

以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。

另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。

Claims (15)

1.连翘在制备药物中的用途，其特征在于，所述的药物为治疗与肠道菌群紊乱相关疾病的药物。

2.包含连翘的组合物在制备药物中的用途，其特征在于，所述的药物为治疗与肠道菌群紊乱相关疾病的药物。

3.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述的肠道菌群选自细菌、古细菌、原生动物、真菌或病毒中的一种或两种以上的组合。

4.连翘在调节肠道微生物中的用途。

5.根据权利要求4所述的连翘在调节肠道微生物中的用途，其特征在于，所述的肠道微生物选自细菌、古细菌、原生动物、真菌或病毒中的一种或两种以上的组合。

6.根据权利要求5所述的连翘在调节肠道微生物中的用途，其特征在于，所述的调节肠道微生物为选择性的增加肠道中细菌的数量，所述的细菌选自乳酸杆菌属(Lactobacillus)、巨球型菌属(Megasphaera)、链球菌属(Streptococcus)、毛螺菌科(Lachnospiraceae)、小杆菌属(Dialister)、普雷沃菌属(Prevotella)、真杆菌属([Eubacterium])、嗜血杆菌(Haemophilus)、巴斯德菌科(Pasteurellaceae)中的一种或两种以上的组合。

7.根据权利要求5所述的连翘在调节肠道微生物中的用途，其特征在于，所述的调节肠道微生物为选择性的抑制肠道中细菌的数量，所述的细菌选自沼杆菌属(Paludibacter)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、中华根瘤菌属(Sinorhizobium)、产黄菌属(Flavobacterium)、钩端螺旋体属(Leptospira)、拟杆菌目(Bacteroidales)、变杆菌属(Variibacter)、脱硫弧菌属(Desulfovibrio)、动性球菌属(Planococcus)、假单胞菌属(Pseudomonas)、慢生根瘤菌属(Bradyrhizobium)、贪铜菌属(Cupriavidus)、食物谷菌目(Victivallales)、螺杆菌属(Helicobacter)、弯曲菌属(Campylobacter)或密螺旋体属(Treponema)中的一种或两种以上的组合。

8.根据权利要求5所述的连翘在调节肠道微生物中的用途，其特征在于，所述的调节肠道微生物为选择性的抑制肠道中古细菌的数量，所述的古细菌为甲烷短杆菌属(Methanobrevibacter)。

9.根据权利要求5所述的连翘在调节肠道微生物中的用途，其特征在于，所述的调节肠道微生物为选择性的抑制肠道中原生动物的数量，所述的原生动物为芽囊原虫(Blastocystis)。

10.根据权利要求5所述的连翘在调节肠道微生物中的用途，其特征在于，所述的调节肠道微生物为选择性的抑制肠道中真菌的数量，所述的真菌为Kalmanozymabrasiliensis。

11.包含连翘的组合物在调节肠道微生物中的用途。

12.根据权利要求11所述的包含连翘的组合物在调节肠道微生物中的用途，其特征在于，所述的包含连翘的组合物为连翘与选自补气药、补血药、补阴药、温化寒痰药、凉血止血药、化瘀止血药、利水消肿药、清热凉血药或肠道菌中的一种或两种以上的组合。

13.根据权利要求1-12任一所述的用途，其特征在于，所述的连翘为连翘粉或连翘提取物。

14.根据权利要求13所述的用途，其特征在于，所述的连翘粉为将连翘粉碎至30-1200目。

15.根据权利要求13所述的用途，其特征在于，所述的连翘提取物的提取方法选自：溶剂浸提法、渗漉法、煎煮法、回流法、连续回流法、超声提取法、超临界流体萃取法、水蒸气蒸馏法、升华法、树脂吸附分离法或凝胶色谱分离法。

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