CN111821353A - 枸杞在调节肠道微生物中的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种枸杞在调节肠道微生物中的用途，所述用途为选择性的增加肠道中细菌的数量，或选择性的抑制肠道中细菌的数量，或选择性的增加肠道中病毒、真菌和原生动物的数量。本发明还提供枸杞和包含枸杞的组合物在制备药物中的应用，所述药物为预防和/或治疗与肠道微生物紊乱相关疾病的药物。
Description
技术领域
本发明属于医药保健领域，具体涉及一种枸杞在调节肠道微生物中的用途。
背景技术
肠道是人体的重要消化吸收和排毒器官，同时也是人体最大的免疫系统。人体的肠包括小肠、大肠和直肠三大段，大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的，大肠主要浓缩食物残渣，形成粪便，再通过直肠经肛门排出体外。肠道中存在着数量庞大的微生物，其中约有1000-1150种、约100万亿个细菌，接近人体体细胞数量的10倍。因此，肠道是人体最重要的“内生环境因素”。肠道微生物本身及其代谢产物不仅能调节人体健康，更在膳食和宿主之间起到了重要的桥梁作用。在正常情况下，肠道微生物处于一个动态平衡的生态环境，正常菌群不仅在消化、免疫和抗病毒方面发挥着不可替代的作用，而且肠道微生物的改变与机体健康或疾病，特别是一些慢性疾病的发生具有极为密切的关系。肠道菌群失调通过影响机体对营养物质的吸收，削弱肠道的屏障功能，加重疾病。研究证实，人体的多种疾病如长期腹泻、便秘、肥胖、食物过敏、胰腺炎、肝损伤、肠道炎症、肠易激综合征、消化道溃疡、糖尿病、克罗恩病、心血管疾病、肿瘤等的发病都与肠道微生物密切相关。因此，肠道微生物已被认为是多种疾病的可能治疗靶标。
目前，调节肠道微生物的方法主要有药物、饮食干预、益生菌、益生元和菌群移植。例如，专利CN201780017713.0提供了一种或多种防御素和/或GLP-1/GLP-1类似物来调节肠道微生物群的方法以及通过口服给予一种或多种防御素来预防或治疗肠道炎症的方法，GLP-1类似物如利拉鲁肽以及哺乳动物和家禽α防御素和β防御素可以引起肠道中微生物群和代谢组组成的变化。专利CN201810364707.9提供了一种具有调节肠道微生物结构并增殖嗜黏蛋白阿卡曼氏菌的组合物，该组合物包括复合蛋白质粉、低聚糖益生元、功能性益生元和复合脂溶性维生素，低聚糖益生元包括短链菊粉、低聚果糖和抗性糊精，复合蛋白质粉包括浓缩乳清蛋白、大豆分离蛋白和胶原多肽，功能性益生元由盐酸二甲双胍、茶多酚、花青素和原花青素中的一种或几种组成，复合脂溶性维生素包括维生素A、维生素E、维生素D和维生素K；该发明通过多种益生元的特殊配比，达到定向增殖盲肠和回肠中嗜黏蛋白阿卡曼氏菌，并对肠道内的拟杆菌门/厚壁菌门比例进行调节。
由于现代人的生活和工作节凑加快，饮食不规律，使得一部分人出现肠道微生物紊乱的情况，多数情况下可以通过饮食进行调节，已有研究表明中药及某些药食同源的食品可以调节人体或动物的肠道微生物。
枸杞气微寒，味甘苦，能补肾明耳目、安神耐寒暑、延寿添精、固髓健骨。专利CN201810937175.3公开了一种治疗风湿免疫性疾病的中药组合物及其制备方法，包括沙苑、枸杞、肉苁蓉、杜仲、天门冬、茯苓、乌梢蛇、鹿角胶、桑葚、冰片；该发明的中药组合物能有效调节肠道微生物群落，增强机体免疫力，增强机体修复和抗病能力。专利CN200910217474.0提供了一种枸杞多糖双歧杆菌合生元结肠靶向微生态调节剂，将枸杞多糖提取物与双歧杆菌及卡波姆混合在一起，装入聚丙稀酸树脂胶囊中制成的中药结肠靶向微生态调节剂；枸杞多糖为益生元，双歧杆菌为益生菌，益生元促进益生菌定植、生长、结肠靶向剂型，避免益生菌在胃及小肠的破坏，促进人体优势菌双歧杆菌在体内的生长，以达到调整肠道菌群失调，恢复人体微生态平衡的作用。目前现有技术对药物所调节的具体菌种的研究较少，为弥补此缺陷，在本发明中，发明人对枸杞调节肠道具体菌种进行了相关研究。
发明内容
本发明提供了一种枸杞在调节肠道微生物中的用途。
本发明还提供了一种枸杞在制备药物中的用途，所述药物为预防和/或治疗与肠道菌群紊乱相关疾病的药物。
本发明还提供了一种包含枸杞的组合物在调节肠道微生物中的用途和所述组合物在制备药物中的用途，所述药物为治疗与肠道菌群紊乱相关疾病的药物。
具体的，第一方面，本发明提供了一种枸杞在调节肠道微生物中的用途，所述的调节肠道微生物为选择性的增加或抑制肠道中细菌、真菌、病毒和原生动物的数量。具体的，所述的调节肠道微生物可以为选择性的增加肠道中细菌的数量，也可以为选择性的抑制肠道中细菌的数量，还可以为选择性的增加肠道中真菌和病毒的数量，还可以为选择性的增加肠道中原生动物的数量。
所述的调节肠道微生物可以为选择性的增加肠道中细菌的数量，所述细菌选自：乳酸杆菌属(Lactobacillus)、密螺旋体属(Treponema)、拟杆菌属(Bacteroides)、念珠菌属(Candidatus)、丁酸弧菌属(Butyrivibrio)、弯曲杆菌(Campylobacter)、罗斯拜瑞氏菌属(Roseburia)、食谷菌属(Victivallales)、丁酸盐产生菌属(butyrate-producingbacterium)、粪球菌属(Coprococcus)、Libanicoccus菌属、薄层菌属(Hymenobacter)、副杆状菌属(Parabacteroides)、Phycisphaerae菌属中的一种或两种以上的组合。
优选的，所述细菌选自：密螺旋体属、念珠菌属、丁酸弧菌属、罗斯拜瑞氏菌属、食谷菌属、丁酸盐产生菌属、粪球菌属、Libanicoccus菌属、薄层菌属、副杆状菌属、Phycisphaerae菌属中的一种或两种以上的组合。
更优选的，所述细菌选自：Lactobacillus amylovorus、Treponemasuccinifaciens、uncultured Bacteroides sp.、Candidatus Melainabacteriabacterium MEL.A1、uncultured bacterium Contigcl_1493、Bacteroidales bacteriumCF、uncultured bacterium fosmid pJB92C9、uncultured bacterium LAB20、unculturedbacterium Ad_143_A19、uncultured bacterium IN-02、Lactobacillus johnsonii、Butyrivibrio hungatei、Butyrivibrio proteoclasticus、Campylobacter fetus、Roseburia intestinalis、uncultured bacterium Lq_025_E06、Lactobacillusacidophilu、Victivallales bacterium CCUG 44730、butyrate-producing bacteriumL2-50、Coprococcus sp.ART55/1、Libanicoccus massiliensi、Hymenobacter sp.APR13、Parabacteroides distasonis、Phycisphaerae bacterium L21-RPul-D3中的一种或两种以上的组合。
所述的调节肠道微生物也可以为选择性的抑制肠道中细菌的数量，所述细菌选自：拟杆菌属(Bacteroides)、另枝菌属(Alistipes)、普雷沃菌属(Prevotella)、链球菌属(Streptococcus)、毛螺菌属(Lachnospiraceae)、乳酸杆菌属(Lactobacillus)、脱硫弧菌属(Desulfovibrio)、志贺氏菌属(Shigella)、真杆菌属(Eubacterium)、螺杆菌属(Helicobacter)、弯曲杆菌(Campylobacter)、埃希氏菌属(Escherichia)中的一种或两种以上的组合。
优选的，所述细菌选自：拟杆菌属、另枝菌属、脱硫弧菌属、志贺氏菌属、埃希氏菌属、链球菌属、普雷沃菌属、真杆菌属、螺杆菌属、毛螺菌属中的一种或两种以上的组合。
更优选的，所述细菌选自：Bacteroides ovatus、Alistipes shahii、Prevotellaoris、Streptococcus agalactiae、Prevotella denticola、Bacteroides vulgatus、Lachnospiraceae bacterium GAM79、Lactobacillus mucosae、Desulfovibrio vulgaris、Prevotella bivia、Shigella dysenteriae、Lactobacillus agilis、unculturedbacterium IN-06、Prevotella sp.oral taxon 299、Prevotella enoeca、unculturedPrevotella sp.、Prevotella ruminicola、[Eubacterium]rectale、Streptococcusdysgalactiae、Streptococcus gallolyticus、Helicobacter bilis、unculturedbacterium、Streptococcus pasteurianus、[Eubacterium]eligens、Streptococcusthermophilus、Streptococcus macedonicus、Prevotella copri、Prevotella jejuni、Prevotella fusca、Prevotella scopos、Prevotella melaninogenica、Streptococcusinfantarius、Campylobacter jejuni、Streptococcus lutetiensis、Escherichia coli、Campylobacter coli中的一种或两种以上的组合。
所述的调节肠道微生物还可以为选择性的增加肠道中病毒的数量，所述病毒包含噬菌体。
优选的，所述病毒包含unidentified phage。
所述的调节肠道微生物还可以为选择性的增加肠道中原生动物的数量，所述原生动物包含芽囊原虫属(Blastocystis)。
优选的，所述原生动物选自：Blastocystis hominis、Blastocystis sp.subtype2、Blastocystis sp.subtype 1中的一种或两种以上的组合。
所述的调节肠道微生物还可以为选择性的增加肠道中真菌的数量，所述真菌包含木霉属(Trichoderma)。
优选的，所述真菌包含Trichoderma atroviride。
第二方面，本发明还提供一种枸杞在制备药物中的用途，所述药物为预防和/或治疗与肠道菌群紊乱相关疾病的药物，优选的，所述的疾病选自：长期腹泻、便秘、肥胖、食物过敏、胰腺炎、肝损伤、肠道炎症包括克罗恩病、肠易激综合征、消化道溃疡、肾结石、糖尿病包括妊娠期糖尿病、类风湿性关节炎、白塞病、心血管疾病、脑血管疾病包括中风、肿瘤、瘫痪、眼病、多发性硬化症、强直性脊柱炎、帕金森症、焦虑、自闭症、抑郁症、慢性疲劳症。
第三方面，本发明还提供了包含枸杞的组合物在调节肠道微生物中的用途，所述组合物含有枸杞与选自补气药、补血药、补阴药、温化寒痰药、凉血止血药、化瘀止血药、利水消肿药和清热凉血药中的一种或两种以上的组合。
所述补气药选自：人参、西洋参、党参、太子参、黄芪、白术、山药、白扁豆、甘草、大枣、刺五加、绞股蓝、红景天、沙棘、饴糖、蜂蜜中的一种或两种以上的组合；优选的，所述补气药选自：黄芪、山药、红景天中的一种或两种以上的组合；更优选的，所述补气药选自：黄芪、人参中的一种或两种。
所述补血药选自：熟地黄、白芍、阿胶、何首乌、龙眼肉、楮实子中的一种或两种以上的组合；优选的，所述补血药选自：熟地黄、白芍中的一种或两种。
所述补阴药选自：北沙参、南沙参、百合、麦冬、天冬、石斛、玉竹、黄精、明党参、墨旱莲、女贞子、桑椹、黑芝麻、龟甲、鳖甲、银耳、燕窝、鱼鰾胶中的一种或两种以上的组合；优选的，所述补阴药选自：北沙参、百合、麦冬、石斛、黄精中的一种或两种以上的组合；更优选的，所述补阴药选自：黄精。
所述温化寒痰药选自：半夏、天南星、白芥子、皂荚、旋覆花、川贝母、瓜蒌、竹茹、竹沥、天竺黄、前胡、桔梗、胖大海中的一种或两种以上的组合；优选的，所述温化寒痰药选自：半夏、天南星，桔梗中的一种或两种以上的组合。
所述凉血止血药选自：小蓟、大蓟、地榆、槐花、侧柏叶、白茅根、郁金、苎麻根中的一种或两种以上的组合；优选的，所述凉血止血药选自：白茅根、郁金、地榆中的一种或两种以上的组合。
所述化瘀止血药选自：三七、茜草、蒲黄、花蕊石、降香、血余炭中的一种或两种以上的组合；优选的，所述化瘀止血药选自：三七。
所述利水消肿药选自：茯苓、薏仁、猪苓、泽泻、冬瓜皮、玉米须、葫芦、香加皮、枳椇子、泽漆、蝼蛄、荠菜中的一种或两种以上的组合；优选的，所述利水消肿药选自：茯苓、薏仁、玉米须中的一种或两种以上的组合。
所述清热凉血药选自：生地黄、大黄炭、玄参、牡丹皮、赤芍、紫草、水牛角、溪黄草中的一种或两种以上的组合；优选的，所述清热凉血药选自：生地黄、大黄炭、玄参中的一种或两种以上的组合。
本发明所述的组合物中枸杞与选自补气药、补血药、补阴药、温化寒痰药、凉血止血药、化瘀止血药、利水消肿或清热凉血药中的一种或两种以上的组合的份数比为1-99:99-1。
优选的，枸杞与选自补气药、补血药、补阴药、温化寒痰药、凉血止血药、化瘀止血药、利水消肿或清热凉血药中的一种或两种以上的组合的份数比为1-50:50-1。
在本发明的优选实施方式中，所述组合物为枸杞与人参的组合，所述枸杞与人参的重量份数比分别为1:1、1:3、5:1。
在本发明优选的实施方式中，所述组合物为枸杞与黄精和白芍的组合，所述枸杞与茯苓和生地黄的重量份数比分别为1:1:1、1:2:5、5:3:3。
优选的，所述组合物中还包括药剂学上可接受的辅料，所述辅料选自：载体、稀释剂、粘合剂、润滑剂或润湿剂。
优选的，所述组合物的剂型选自：片剂、胶囊、丸剂、注射剂、吸入剂、含片、栓剂、乳剂、微乳剂、亚微乳剂、纳米颗粒、凝胶剂、粉剂、悬乳液、乳膏剂、胶冻剂、喷雾剂等。
优选的，所述组合物可采取的给药方式选自：口服、肠给药、皮下注射、肌肉注射、静脉注射、鼻腔给药、透皮给药、结膜下给药、眼球内给药、眼眶给药、眼球后给药、视网膜给药、脉络膜给药、鞘内注射等。
第四方面，本发明还提供了所述的包含枸杞的组合物在调节肠道微生物中的用途，所述用途为选择性的增加或抑制肠道中细菌、病毒、真菌和原生动物的数量。具体的，所述用途可以是选择性的增加肠道中细菌的数量，也可以是选择性的抑制肠道中细菌的数量，还可以是选择性的增加肠道中病毒、原生动物和真菌的数量。
根据所述的包含枸杞的组合物在调节肠道微生物中的用途，可以是选择性的增加肠道中细菌的数量，所述细菌选自：乳酸杆菌属(Lactobacillus)、密螺旋体属(Treponema)、拟杆菌属(Bacteroides)、念珠菌属(Candidatus)、丁酸弧菌属(Butyrivibrio)、弯曲杆菌(Campylobacter)、罗斯拜瑞氏菌属(Roseburia)、食谷菌属(Victivallales)、丁酸盐产生菌属(butyrate-producing bacterium)、粪球菌属(Coprococcus)、Libanicoccus菌属、薄层菌属(Hymenobacter)、副杆状菌属(Parabacteroides)、Phycisphaerae菌属中的一种或两种以上的组合。
优选的，所述细菌选自：密螺旋体属、念珠菌属、丁酸弧菌属、罗斯拜瑞氏菌属、食谷菌属、丁酸盐产生菌属、粪球菌属、Libanicoccus菌属、薄层菌属、副杆状菌属、Phycisphaerae菌属中的一种或两种以上的组合。
更优选的，所述细菌选自：Lactobacillus amylovorus、Treponemasuccinifaciens、uncultured Bacteroides sp.、Candidatus Melainabacteriabacterium MEL.A1、uncultured bacterium Contigcl_1493、Bacteroidales bacteriumCF、uncultured bacterium fosmid pJB92C9、uncultured bacterium LAB20、unculturedbacterium Ad_143_A19、uncultured bacterium IN-02、Lactobacillus johnsonii、Butyrivibrio hungatei、Butyrivibrio proteoclasticus、Campylobacter fetus、Roseburia intestinalis、uncultured bacterium Lq_025_E06、Lactobacillusacidophilu、Victivallales bacterium CCUG 44730、butyrate-producing bacteriumL2-50、Coprococcus sp.ART55/1、Libanicoccus massiliensi、Hymenobacter sp.APR13、Parabacteroides distasonis、Phycisphaerae bacterium L21-RPul-D3中的一种或两种以上的组合。
根据所述的包含枸杞的组合物在调节肠道微生物中的用途，也可以是选择性的抑制肠道中细菌的数量，所述细菌选自：拟杆菌属(Bacteroides)、另枝菌属(Alistipes)、普雷沃菌属(Prevotella)、链球菌属(Streptococcus)、毛螺菌属(Lachnospiraceae)、乳酸杆菌属(Lactobacillus)、脱硫弧菌属(Desulfovibrio)、志贺氏菌属(Shigella)、真杆菌属(Eubacterium)、螺杆菌属(Helicobacter)、弯曲杆菌(Campylobacter)、埃希氏菌属(Escherichia)中的一种或两种以上的组合。
优选的，所述细菌选自：拟杆菌属、另枝菌属、脱硫弧菌属、志贺氏菌属、埃希氏菌属、链球菌属、普雷沃菌属、真杆菌属、螺杆菌属、毛螺菌属中的一种或两种以上的组合。
更优选的，所述细菌选自：Bacteroides ovatus、Alistipes shahii、Prevotellaoris、Streptococcus agalactiae、Prevotella denticola、Bacteroides vulgatus、Lachnospiraceae bacterium GAM79、Lactobacillus mucosae、Desulfovibrio vulgaris、Prevotella bivia、Shigella dysenteriae、Lactobacillus agilis、unculturedbacterium IN-06、Prevotella sp.oral taxon 299、Prevotella enoeca、unculturedPrevotella sp.、Prevotella ruminicola、[Eubacterium]rectale、Streptococcusdysgalactiae、Streptococcus gallolyticus、Helicobacter bilis、unculturedbacterium、Streptococcus pasteurianus、[Eubacterium]eligens、Streptococcusthermophilus、Streptococcus macedonicus、Prevotella copri、Prevotella jejuni、Prevotella fusca、Prevotella scopos、Prevotella melaninogenica、Streptococcusinfantarius、Campylobacter jejuni、Streptococcus lutetiensis、Escherichia coli、Campylobacter coli中的一种或两种以上的组合。
根据所述的包含枸杞的组合物在调节肠道微生物中的用途，还可以是选择性的增加肠道中病毒的数量，所述病毒包含噬菌体。
优选的，所述病毒包含unidentified phage。
根据所述的包含枸杞的组合物在调节肠道微生物中的用途，还可以是选择性的增加肠道中原生动物的数量，所述原生动物包含芽囊原虫属(Blastocystis)。
优选的，所述原生动物选自：Blastocystis hominis、Blastocystis sp.subtype2、Blastocystis sp.subtype 1中的一种或两种以上的组合。
根据所述的包含枸杞的组合物在调节肠道微生物中的用途，还可以为选择性的增加肠道中真菌的数量，所述真菌包含木霉属(Trichoderma)。
优选的，所述真菌包含Trichoderma atroviride。
第五方面，本发明提供一种包含枸杞的组合物在制备药物中的用途，所述药物为预防和/或治疗与肠道微生物紊乱相关疾病的药物，优选的，所述的疾病选自：长期腹泻、便秘、肥胖、食物过敏、胰腺炎、肝损伤、肠道炎症包括克罗恩病、肠易激综合征、消化道溃疡、肾结石、糖尿病包括妊娠期糖尿病、类风湿性关节炎、白塞病、心血管疾病、脑血管疾病包括中风、肿瘤、瘫痪、眼病、多发性硬化症、强直性脊柱炎、帕金森症、焦虑、自闭症、抑郁症、慢性疲劳症。
第六方面，本发明提供了一种调节肠道微生物的方法，所述方法为摄入枸杞或包含枸杞的药物，所述摄入的方式选自：口服、肠给药、皮下注射、肌肉注射、静脉注射、鼻腔给药、透皮给药、结膜下给药、眼球内给药、眼眶给药、眼球后给药、视网膜给药、脉络膜给药、鞘内注射等。
本发明所述的枸杞包括枸杞子、枸杞叶、枸杞粉或枸杞提取物，优选的，所述枸杞为枸杞子或枸杞提取物。
所述枸杞提取物的提取方法选自：溶剂浸提法、渗漉法、煎煮法、回流法、连续回流法、超声提取法、超临界流体萃取法、水蒸气蒸馏法、升华法、树脂吸附分离法或凝胶色谱分离法。
优选的，所述提取方法选自：溶剂浸提法、煎煮法或树脂吸附分离法。
第七方面，一种枸杞提取物的制备方法包括以下步骤：(1)粉碎，(2)提取，(3)吸附洗脱，(4)浓缩干燥。
优选的，所述枸杞提取物的制备方法包括以下步骤：
(1)将枸杞子去除果柄，晾干后，粉碎至80-300目，得到枸杞粉；
(2)将枸杞粉用溶剂提取、过滤后，对滤液进行减压浓缩，得到浓缩液；
(3)将所述浓缩液通过吸附柱吸附后，先用纯化水洗脱，除去杂质，再用乙醇洗脱，得到洗脱液；
(4)减压浓缩所述洗脱液，再经过精制、减压浓缩和干燥后，得到枸杞提取物。
优选的，所述步骤(1)中枸杞子粉碎至80-120目。
优选的，所述步骤(2)中溶剂选自：N,N-二甲基甲酰胺、乙酸、二氯甲烷、甲醇、乙醇、异丙醇、叔丁醇、乙腈或丙酮；优选的，所述溶剂选自：40％-100％乙醇溶液；更优选的，所述溶剂选自：50％-80％乙醇溶液。
优选的，所述步骤(2)提取中，所述枸杞粉与溶剂的体积比为1：1-100，更优选的，所述体积比为1：1-50。
优选的，所述步骤(3)中吸附柱的填料选自：HPD系列、ADS系列、HZ系列、XAD系列和D系列大孔树脂填料中的一种或两种以上的组合；更优选的，所述吸附柱的填料选自：HPD100、HZ18和D101中的一种或两种以上的组合。
优选的，所述步骤(4)中干燥方式选自：喷雾干燥、真空干燥、冷冻干燥、近红外干燥和微波干燥中的一种或两种以上的组合；更优选的，所述干燥方式为真空干燥，干燥温度为30-50℃。
附图说明
图1枸杞提取物改变的肠道微生物物种
具体实施方式
实施例1
一种枸杞提取物的制备方法包括以下步骤：
(1)将枸杞子去除果柄，晾干后，粉碎至120目，得到枸杞粉；
(2)将枸杞粉用80％乙醇溶液提取，枸杞粉与80％乙醇溶液的体积比为1：50，过滤后，对滤液进行减压浓缩，得到浓缩液；
(3)将浓缩液通过D101吸附柱吸附后，先用纯化水洗脱，除去杂质，再用乙醇洗脱，得到洗脱液；
(4)减压浓缩所述洗脱液，再经过精制、减压浓缩后，在30℃中真空干燥，最后得到枸杞提取物。
实施例2
一种可选的枸杞提取物的制备方法包括以下步骤：
(1)将枸杞子去除果柄，晾干后，粉碎至80目，得到枸杞粉；
(2)将枸杞粉用70％乙醇溶液提取，枸杞粉与70％乙醇溶液的体积比为1：40，过滤后，对滤液进行减压浓缩，得到浓缩液；
(3)将浓缩液通过D101吸附柱吸附后，先用纯化水洗脱，除去杂质，再用乙醇洗脱，得到洗脱液；
(4)减压浓缩所述洗脱液，再经过精制、减压浓缩后，在30℃中真空干燥，最后得到枸杞提取物。
实施例3水煎煮法制备枸杞提取物
称取100g枸杞子，置适宜容积的煎器中，加水约600ml浸没药材1h，煮沸后加热0.5h。分离煎出液，药渣进行二次煎煮，煎出液与第一次煎出液混合，用量筒量取体积，若体积超过600ml则将煎出液进一步煮沸浓缩至约600ml，达到相应体积后将煎出液进行真空包装，装至7-8个小袋中，放入4℃保存待用。
实施例4 枸杞与人参组合物的制备
枸杞提取物与人参提取物分别采用实施例1的方法进行提取，再经过大孔树脂吸附分离法进行分离，真空干燥后，得到枸杞提取物与人参提取物，取1重量份枸杞提取物和1重量份人参提取物，并充分混合，制得枸杞与人参的组合物。
实施例5 一种可选的枸杞与人参组合物的制备
枸杞提取物与人参提取物分别采用实施例1的方法进行提取，再经过大孔树脂吸附分离法进行分离，真空干燥后，得到枸杞提取物与人参提取物，取1重量份枸杞提取物和3重量份人参提取物，并充分混合，制得枸杞与人参的组合物。
实施例6 另一种可选的枸杞与人参组合物的制备
枸杞提取物与人参提取物分别采用实施例1的方法进行提取，再经过大孔树脂吸附分离法进行分离，真空干燥后，得到枸杞提取物与人参提取物，取5重量份枸杞提取物和1重量份人参提取物，并充分混合，制得枸杞与人参的组合物。
实施例7 枸杞与黄精和白芍组合物的制备
枸杞提取物、黄精提取物和白芍提取物分别采用实施例1的方法进行提取，再经过大孔树脂吸附分离法进行分离，真空干燥后，得到枸杞提取物、黄精提取物和白芍黄提取物，分别取枸杞提取物、黄精提取物和白芍提取物各1重量份，并充分混合，制得枸杞与黄精和白芍的组合物。
实施例8 一种可选的枸杞与黄精和白芍组合物的制备
枸杞提取物、黄精提取物和白芍提取物分别采用实施例1的方法进行提取，再经过大孔树脂吸附分离法进行分离，真空干燥后，得到枸杞提取物、黄精提取物和白芍黄提取物，分别取1重量份枸杞提取物、2重量份黄精提取物和5重量份白芍提取物，并充分混合，制得枸杞与黄精和白芍的组合物。
实施例9 另一种可选的枸杞与黄精和白芍组合物的制备
枸杞提取物、黄精提取物和白芍提取物分别采用实施例1的方法进行提取，再经过大孔树脂吸附分离法进行分离，真空干燥后，得到枸杞提取物、黄精提取物和白芍黄提取物，分别取5重量份枸杞提取物、3重量份黄精提取物和3重量份白芍提取物，并充分混合，制得枸杞与黄精和白芍的组合物。
实施例10 枸杞提取物对肠道微生物的影响
本实施例以实验用猴子为实验对象，实验药物为按照实施例3制备的枸杞提取物，给药方式为经鼻灌胃给药，灌胃为每天一次，连续14天。采集灌胃14天中每天、灌胃前后各1天的粪便。实验标准如下：猴子饲养按照非灵长类实验动物饲养标准执行，每天早上8点对动物笼底进行冲洗，将一不锈钢网放入动物笼底，之后等待猴子自行排便，排便后核对猴子ID，对粪便进行拍照，使用采便管采集粪便，注意采集过程中避开与网面接触的粪便，之后放入-80℃的冰箱保存。
DNA的提取采用强力粪便DNA提取试剂盒(Qiagen，USA)进行提取，每个样品提取100ng DNA，用非接触式超声波破碎仪制成300-400bp的DNA片段，使用高通量测序平台文库构建定向优化试剂盒VAHTS Nano DNA Library Prep Kit for Illumina(Vazyme，中国)进行测序，测序深度达3千万-5千万/每个样品，对每个测序读数进行质量控制，对于非人源序列采用Kraken及Bracken进行分析，以自定义的数据库作为参考，此数据库包括在2017年12月22日前RefSeq中所有的细菌、古细菌、病毒、真菌和原生动物的基因组。
实验结果如表1、2所示，对实验结果进行统计后发现，枸杞提取物对肠道微生物的影响包括选择性的增加肠道中一些细菌的数量，同时抑制肠道中另外一些细菌的数量，选择性的增加肠道中一些病毒、真菌和原生动物的数量来发挥作用的。
表1枸杞提取物改变的肠道细菌物种
表2枸杞提取物增加肠道原生动物、真菌和病毒的物种
| 原生动物种类 | D0(计数/百万) | D14(计数/百万) | 倍数变化(D14/D0) |
| Blastocystis hominis | 274.1 | 1173.2 | 3.4 |
| Blastocystis sp.subtype 2 | 2.8 | 194.4 | 2.9 |
| Blastocystis sp.subtype 1 | 113.9 | 377.5 | 2.2 |
| 真菌种类 | D0(计数/百万) | D14(计数/百万) | 倍数变化(D14/D0) |
| Trichoderma atroviride | 42.2 | 186.7 | 2.0 |
| 病毒种类 | D0(计数/百万) | D14(计数/百万) | 倍数变化(D14/D0) |
| unidentified phage | 253.0 | 627.2 | 2.1 |
枸杞提取物改变的肠道微生物物种的实验结果如图1所示，在图1中部区域的微生物为不受枸杞提取物影响的肠道微生物，其分布大致符合y＝x代表的方程曲线；在y＝x曲线上方为服用枸杞提取物后，数量增加的肠道微生物种类；在y＝x曲线下方为服用枸杞提取物后，数量减少的肠道微生物种类。实验证明，服用枸杞提取物能够增加某种肠道微生物的数量，同时降低某种肠道微生物数量，达到调节肠道微生物的目的。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
Claims (15)
1.枸杞在调节肠道微生物中的用途。
2.根据权利要求1所述的枸杞在调节肠道微生物中的用途，其特征在于，所述的调节肠道微生物为选择性的增加或抑制肠道中细菌、病毒、真菌和原生动物的数量。
3.根据权利要求2所述的枸杞在调节肠道微生物中的用途，其特征在于，所述数量增加的肠道中的细菌选自：乳酸杆菌属(Lactobacillus)、密螺旋体属(Treponema)、拟杆菌属(Bacteroides)、念珠菌属(Candidatus)、丁酸弧菌属(Butyrivibrio)、弯曲杆菌(Campylobacter)、罗斯拜瑞氏菌属(Roseburia)、食谷菌属(Victivallales)、丁酸盐产生菌属(butyrate-producing bacterium)、粪球菌属(Coprococcus)、Libanicoccus菌属、薄层菌属(Hymenobacter)、副杆状菌属(Parabacteroides)、Phycisphaerae菌属中的一种或两种以上的组合。
4.根据权利要求2所述的枸杞在调节肠道微生物中的用途，其特征在于，所述数量被抑制的肠道中的细菌选自：拟杆菌属(Bacteroides)、另枝菌属(Alistipes)、普雷沃菌属(Prevotella)、链球菌属(Streptococcus)、毛螺菌属(Lachnospiraceae)、乳酸杆菌属(Lactobacillus)、脱硫弧菌属(Desulfovibrio)、志贺氏菌属(Shigella)、真杆菌属(Eubacterium)、螺杆菌属(Helicobacter)、弯曲杆菌(Campylobacter)、埃希氏菌属(Escherichia)中的一种或两种以上的组合。
5.根据权利要求2所述的枸杞在调节肠道微生物中的用途，其特征在于，所述数量增加的肠道中的病毒包含噬菌体。
6.根据权利要求2所述的枸杞在调节肠道微生物中的用途，其特征在于，所述数量增加的肠道中的原生动物包含芽囊原虫属(Blastocystis)。
7.根据权利要求2所述的枸杞在调节肠道微生物中的用途，其特征在于，所述数量增加的肠道中的真菌包含木霉属(Trichoderma)。
8.枸杞在制备药物中的用途，其特征在于，所述药物为预防和/或治疗与肠道菌群紊乱相关疾病的药物。
9.根据权利要求8所述的枸杞在制备药物中的用途，其特征在于，所述疾病选自：长期腹泻、便秘、肥胖、食物过敏、胰腺炎、肝损伤、肠道炎症、肠易激综合征、消化道溃疡、肾结石、糖尿病、类风湿性关节炎、白塞病、心血管疾病、脑血管疾病、肿瘤、瘫痪、眼病、多发性硬化症、强直性脊柱炎、帕金森症、焦虑、自闭症、抑郁症、慢性疲劳症。
10.包含枸杞的组合物在调节肠道微生物中的用途。
11.根据权利要求10所述的包含枸杞的组合物在调节肠道微生物中的用途，其特征在于，所述用途为选择性的增加或抑制肠道中细菌、病毒、真菌和原生动物的数量。
12.根据权利要求10所述的包含枸杞的组合物在调节肠道微生物中的用途，其特征在于，所述组合物含有枸杞与选自补气药、补血药、补阴药、温化寒痰药、凉血止血药、化瘀止血药、利水消肿药和清热凉血药中的一种或两种以上的组合；所述补气药选自：人参、西洋参、党参、太子参、黄芪、白术、山药、白扁豆、甘草、大枣、刺五加、绞股蓝、红景天、沙棘、饴糖、蜂蜜中的一种或两种以上的组合；所述补血药选自：熟地黄、白芍、阿胶、何首乌、龙眼肉、楮实子中的一种或两种以上的组合；所述补阴药选自：北沙参、南沙参、百合、麦冬、天冬、石斛、玉竹、黄精、明党参、墨旱莲、女贞子、桑椹、黑芝麻、龟甲、鳖甲、银耳、燕窝、鱼鰾胶中的一种或两种以上的组合；所述温化寒痰药选自：半夏、天南星、白芥子、皂荚、旋覆花、川贝母、瓜蒌、竹茹、竹沥、天竺黄、前胡、桔梗、胖大海中的一种或两种以上的组合；所述凉血止血药选自：小蓟、大蓟、地榆、槐花、侧柏叶、白茅根、郁金、苎麻根中的一种或两种以上的组合；所述化瘀止血药选自：三七、茜草、蒲黄、花蕊石、降香、血余炭中的一种或两种以上的组合；所述利水消肿药选自：茯苓、薏仁、猪苓、泽泻、冬瓜皮、玉米须、葫芦、香加皮、枳椇子、泽漆、蝼蛄、荠菜中的一种或两种以上的组合；所述清热凉血药选自：生地黄、大黄炭、玄参、牡丹皮、赤芍、紫草、水牛角、溪黄草中的一种或两种以上的组合。
13.包含枸杞的组合物在制备药物中的用途，其特征在于，所述药物为预防和/或治疗与肠道菌群紊乱相关疾病的药物。
14.根据权利要求1-13任一所述的用途，其特征在于，所述的枸杞为枸杞子或枸杞提取物。
15.根据权利要求14所述的用途，其特征在于，所述枸杞提取物的提取方法选自：溶剂浸提法、渗漉法、煎煮法、回流法、连续回流法、超声提取法、超临界流体萃取法、水蒸气蒸馏法、升华法、树脂吸附分离法或凝胶色谱分离法。
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