CN111956730A

CN111956730A - 大蒜沙葱组合物在制备抗病毒产品中的用途

Info

Publication number: CN111956730A
Application number: CN202010682552.0A
Authority: CN
Inventors: 王煜伟; 梁健; 王乐; 尹卫; 张超
Original assignee: Qinghai University
Current assignee: Qinghai University
Priority date: 2020-07-15
Filing date: 2020-07-15
Publication date: 2020-11-20

Abstract

本发明公开了大蒜沙葱组合物在制备抗病毒产品中的用途，所述组合物包括如下重量份组分：大蒜醇提物2.5～20份、大蒜水提物0.5～20份、沙葱醇提物0.7～4.3份、沙葱水提物0.5～1份，能够有效抑制甲型H1N1流感病毒的复制和繁殖，且抑制活性优于任意单一提取物的效果，可用于制备预防和/或治疗甲型H1N1流感及其并发症的产品。

Description

大蒜沙葱组合物在制备抗病毒产品中的用途

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及大蒜沙葱组合物在制备抗病毒产品中的用途。

背景技术

大蒜，为百合科(Liliaceae)葱属(Allium)植物的地下鳞茎,含有丰富的蛋白质、低聚糖和多糖类、另外还有脂肪、矿物质等，不仅可作调味料，而且可入药，是著名的食药两用植物，长期食用可起到防病保健作用，具有多方面的生物活性，有望用于开发预防或治疗多种疾病的产品。

沙葱，又名蒙古韭，是百合科葱属植物，生长于海拔800～2800米的荒漠、砂地或干旱山坡，在我国主要分布于新疆(东北部)、青海(北部)、甘肃、宁夏(北部)、陕西(北部)、内蒙古和辽宁(西部)，目前沙葱主要用于食用，凉拌、油炒、肉炒、腌制食用、作调味品均可，对其药用价值的开发较少，因此，沙葱的药用用途还有待进一步开发，可进行更加深入、细微的研究与活性机制探讨。

流感，是流感病毒引起的急性呼吸道感染，也是一种传染性强、传播速度快的疾病。其主要通过空气中的飞沫、人与人之间的接触或与被污染物品的接触传播。典型的临床症状是：急起高热、全身疼痛、显著乏力和轻度呼吸道症状。一般秋冬季节是其高发期，所引起的并发症和死亡现象非常严重。该病是由流感病毒引起，可分为甲(A)、乙(B)、丙(C)三型，甲型病毒经常发生抗原变异，传染性大，传播迅速，极易发生大范围流行，甲型H1N1也就是甲型一种。

甲型H1N1流感，属于正粘病毒科(0rthomyxoviridae)，甲型流感病毒属(Influenza virus A)，其遗传物质为RNA。典型病毒颗粒呈球状，直径为80nm～120nm，有囊膜。囊膜上有许多放射状排列的突起糖蛋白，分别是血凝素HA、神经氨酸酶NA和M2蛋白。病毒颗粒内为核衣壳,呈螺旋状对称，直径为10nm。甲型H1N1流感病毒为单股负链RNA病毒，基因组约为13.6kb，由大小不等的8个独立片段组成。甲型H1N1流感症状与感冒类似，患者会出现发烧、咳嗽、疲劳、食欲不振等。有报道说，美国2009年疫情中发现病例的主要表现为突然发热、咳嗽、肌肉痛和疲倦，其中一些患者还出现腹泻和呕吐症状；墨西哥发现病例还出现眼睛发红、头痛和流涕等症状。少数病例病情重，进展迅速，可出现病毒性肺炎，合并呼吸衰竭、多脏器功能损伤，严重者可以死亡。

人的肺部受到流感或呼吸道病毒侵袭时，会出现大量被激活的T细胞以抵抗病毒。T细胞被激活的同时导致人体内细胞激素上升，形成“细胞激素风暴”，使肺部出现炎症。几天后，T细胞促使体内OX40分子增多，而OX40分子向T细胞发出“继续存活”的信号，使T细胞继续在肺部停留，“细胞激素风暴”加剧，肺部炎症加重，最终造成人体免疫系统不堪重负，危害人体健康。青壮年体内免疫力太强，反而会导致抗体反应过于剧烈，形成“细胞激素风暴”，致使肺部组织严重受伤害，所以发病人群多为青壮年，而不是季节性流感的易感人群(老人和儿童)。2009年，H1N1流感在美国大面积爆发，并蔓延到214个国家和地区，导致近20万人死亡。

目前针对H1N1流感的治疗手段主要是服用抗病毒类药物、抗生素、解热镇痛类药物，以及再对应并发症使用一些缓解的药物。

可是，没有专门针对人类感染甲型H1N1流感的特效药，通常使用的有两类共4种抗流感药物：1)adamantanes(adamantanes和remantadine)，和2)流感的神经氨酸酶抑制剂(达菲oseltamivir和扎那米韦zanamivir)；但从美国获得的感染甲型H1N1流感病毒的人类病例临床显示，这种变异病毒对其中2种具有抗药性，对达菲和扎那米韦抗性金刚烷胺很敏感，但是对amantadine和remantadine有抵抗性，流感病毒对抗病毒药物产生抗药性，限制了治疗效果。因此，还需开发新的对甲型H1N1流感病毒具有抗病毒效果的产品。

发明内容

本发明的目的在于提供大蒜沙葱组合物在制备抗病毒产品中的用途，可用于甲型H1N1流感及其并发症等。

本发明提供一种组合物在制备抗病毒产品中的用途，所述组合物包括如下重量份组分：大蒜醇提物2.5～20份、大蒜水提物0.5～20份、沙葱醇提物0.7～4.3份、沙葱水提物0.5～1份。

进一步地，所述组合物包括大蒜醇提物5～10份、大蒜水提物1～2份、沙葱醇提物1.7～2.7份、沙葱水提物0.5份。

进一步地，所述组合物包括大蒜醇提物5份、大蒜水提物1份、沙葱醇提物1.7份、沙葱水提物0.5份。

进一步地，所述醇提物的醇选自甲醇、乙醇、丁醇、戊醇中的一种或几种。

所述醇提物的醇不仅包括甲醇、乙醇、丁醇、戊醇等醇化合物或混合醇，还包括醇的水溶液。

在本发明的具体实施方式中，所述醇选自乙醇；进一步为60～100％v/v乙醇水溶液，优选70～90％v/v乙醇水溶液，例如70％、80％、90％乙醇水溶液。

另外，在提取的过程中，若提取2次以上，每次提取时的乙醇浓度可以相同，也可以不同，例如，将大蒜提取3次，每次都使用80％乙醇水溶液提取；或者，将大蒜提取3次，依次经90％v/v、80％v/v、70％v/v乙醇水溶液提取；或者，将大蒜依次经70％v/v、80％v/v、90％v/v乙醇水溶液提取；或者，将大蒜依次用90％v/v、70％v/v乙醇水溶液提取，等等。

将沙葱提取3次，每次都使用80％乙醇水溶液提取；或者，将沙葱提取3次，依次经90％v/v、80％v/v、70％v/v乙醇水溶液提取；或者，将沙葱依次经70％v/v、80％v/v、90％v/v乙醇水溶液提取；或者，将沙葱依次用90％v/v、70％v/v乙醇水溶液提取，等等。

本发明中的提取方法，可以采用天然植物药物的常规提取方法，例如超声、回流、煎煮、微波辅助、浸渍等。

进一步地，所述产品为抗流感病毒的产品。

进一步地，所述流感病毒为甲型流感病毒。

进一步地，所述甲型流感病毒为H1N1。

进一步地，所述产品为预防和/或甲型H1N1流感及其并发症的产品。

进一步地，所述并发症选自高热、咳嗽、鼻塞、流涕、肌痛、头痛、咽痛、咳嗽、乏力、肺炎、呼吸衰竭、中毒性休克、脏器功能障碍。

本发明的有益效果是：

(1)本发明提供了一系列由大蒜醇提物、大蒜水提物、沙葱醇提物、沙葱水提物组成的组合物在在制备抑制抗病毒产品中的用途，通过试验证明了组合物能够有效抑制甲型H1N1流感病毒的复制和繁殖，且抑制活性优于任意单一提取物的效果，可用于制备预防和/或治疗甲型H1N1流感及其并发症的产品。

(2)大蒜、沙葱均为日常可使用的原料，本发明为天然食物提取物，安全性高。

具体实施方式

下面对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1大蒜、沙葱提取物的制备

(1)大蒜醇提物的制备：取干燥至恒重的大蒜干粉分别加入90％v/v、80％v/v、70％v/v乙醇水溶液回流提取3次，过滤，药渣备用，合并提取液，回收乙醇，干燥，即得大蒜醇提物，经测定，出膏率约为75.13±5％。

(2)大蒜水提物的制备：取步骤(1)中的药渣，加水煎煮3次，过滤，合并滤液，浓缩，干燥，即得大蒜水提物，经测定，出膏率约为15.18±2％。

(3)沙葱醇提物的制备：取干燥至恒重的沙葱干粉分别加入90％v/v、80％v/v、70％v/v乙醇水溶液回流提取3次，过滤，药渣备用，合并提取液，回收乙醇，干燥，即得沙葱醇提物，经测定，出膏率约为68.92±5％。

(4)沙葱水提物的制备：取步骤(1)中的药渣，加水煎煮3次，过滤，合并滤液，浓缩，干燥，即得沙葱水提物，经测定，出膏率约为16.21±2％。

实施例2大蒜沙葱组合物

取实施例1制备的大蒜醇提物5g、大蒜水提物1g、沙葱醇提物1.7g、沙葱水提物0.5g，混合均匀，即得本发明组合物。

实施例3大蒜沙葱组合物

取实施例1制备的大蒜醇提物10g、大蒜水提物2g、沙葱醇提物1.7g、沙葱水提物0.5g，混合均匀，即得本发明组合物。

实施例4大蒜沙葱组合物

取实施例1制备的大蒜醇提物10g、大蒜水提物2g、沙葱醇提物2.7g、沙葱水提物0.5g，混合均匀，即得本发明组合物。

实施例5大蒜沙葱组合物胶囊

取实施例1制备的大蒜醇提物5g、大蒜水提物1g、沙葱醇提物1.7g、沙葱水提物0.5g，加入适量微晶纤维素，混合均匀，干燥，装胶囊，即得本发明组合物的胶囊剂。

实施例6抗病毒活性

本实施例中的提取物均采用实施例1的方法制备。

测定细胞半数感染量：利用细胞维持液将甲型流感病毒A/PR/8/34(H1N1)梯度稀释至10^－1～10^－8，加至将狗肾细胞株(MDCK)单层细胞洗涤3次，将100μL病毒加至各孔MDCK细胞中，于5％CO₂培养箱中37℃吸附1h，感染细胞后弃上清液，PBS洗涤5次后，各孔加入100μL细胞维持液，72h后观察细胞病变效应，记录细胞病变孔数及程度。采用Reed－Muench法计算细胞半数感染量为10^-4.1/0.1mL。

提取物的抑制作用：设正常细胞对照组、病毒对照组、阳性对照组和不同配伍药物组，100μL/孔无病毒的细胞维持液加至正常细胞对照组，取细胞维持液将提取物稀释至0.5mg/mL加至不同配伍药物组，分别与流感病毒液等体积中和，37℃孵育1h后，100μL/孔接种于MDCK细胞中，每配伍5个复孔。5％CO₂培养箱37℃培养48h后，每孔加入20μL5g/LMTT,测定490nm的OD值，计算不同配伍的提取物对病毒的抑制率，结果见表2：

病毒抑制率％＝(OD药物组－OD病毒组)/(OD正常组－OD病毒组)×100％

表2不同提取物对流感感染MDCK细胞的抑制率(n＝3)

从表1数据可以看出，大蒜醇提物、大蒜水提物、沙葱醇提物、沙葱水提物对流感病毒均有抑制作用，但抑制作用较弱；当四者配伍后，在相同的用量下，对流感病毒的抑制作用均强于任意单一提取物的效果，说明大蒜醇提物、大蒜水提物、沙葱醇提物、沙葱水提物配伍后协同增效，提升了提取物的抑制活性，其中，大蒜醇提物：大蒜水提物：沙葱醇提物：沙葱水提物＝5.0:1.0:1.7:0.5时抑制活性最高，可用于制备治疗预防和/或治疗流感的产品。

以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。

Claims

1.一种组合物在制备抗病毒产品中的用途，所述组合物包括如下重量份组分：大蒜醇提物2.5～20份、大蒜水提物0.5～20份、沙葱醇提物0.7～4.3份、沙葱水提物0.5～1份。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述组合物包括大蒜醇提物5～10份、大蒜水提物1～2份、沙葱醇提物1.7～2.7份、沙葱水提物0.5份。

3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，所述组合物包括大蒜醇提物5份、大蒜水提物1份、沙葱醇提物1.7份、沙葱水提物0.5份。

4.根据权利要求1～3任一项所述的用途，其特征在于，所述醇提物的醇选自甲醇、乙醇、丁醇、戊醇中的一种或几种。

5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述醇选自乙醇；进一步为60～100％v/v乙醇水溶液，优选70～90％v/v乙醇水溶液。

6.根据权利要求1～5任一项所述的用途，其特征在于，所述产品为抗流感病毒的产品。

7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，所述流感病毒为甲型流感病毒。

8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于，所述甲型流感病毒为H1N1。

9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于，所述产品为预防和/或治疗甲型H1N1流感及其并发症的产品。

10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于，所述并发症选自高热、咳嗽、鼻塞、流涕、肌痛、头痛、咽痛、咳嗽、乏力、肺炎、呼吸衰竭、中毒性休克、脏器功能障碍。