CN111896192A - 一种色水法测定包装密封性的测试方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及包装检测领域，具体公开了一种色水法测定包装系统密封性的测试方法。该方法提供了一种新的色水溶剂，并通过结合气相色谱法顶空进样建立半定量的包装密封性检测方法，新建的密封性测试方法耐用、适用范围广并且灵敏度高，对保证产品在有效期内包装完整性有着非常重要的意义，并最终确定产品的安全有效。

Description

一种色水法测定包装密封性的测试方法

技术领域

本发明涉及包装检测领域，具体涉及一种色水法测定包装系统密封性的测试方法。

背景技术

中国药典2015年版四部通则0102注射剂项下指明，注射剂容器的密封性须用适宜的方法确证。CDE最新发布的《化学药品注射剂包装系统密封性研究技术指南(征求意见稿)》指出，包装系统密封性是注射剂研究和评价的一项重点关注内容。注射剂的包装系统应能保证药品在货架期内和使用过程中满足相应的理化及微生物质量要求。故包装系统密封性是注射剂开发必须研究的一项重要指标。

现有的密封性测试方法有：《药品GMP指南》2010年版推荐了密封完整性的方法包括微生物侵入实验法、饱和盐水法、亚甲基蓝溶液法(色水法)、高压电检漏、灯检法等。USP43<1207.1>中包装完整性评估的方法包括了确定性的方法(比如：失踪气法、激光顶空分析法、真空衰减法、压力衰减法、质量提取法等)和概率性的方法(比如：微生物挑战法、液体示踪法、失踪气体嗅探探针测试法等)。

CN110793730A公开了一种注射液色水法包装完整性的分析方法，包括以下步骤：取西林瓶包装的注射液，置于一定浓度的色水溶液中，在合适的真空条件下放置一定时间后，取出常压放置，对比药液与限度溶液的吸光度值，进行结果判定。尽管常见色水法因其具有操作简便、迅速、不需要复杂和昂贵的设备等优点，作为常用的密封性检测方法。但受个人视觉疲劳、个体差异等影响，特别是包装微小渗漏时测试结果偏差较大，故通常结合UV法进行半定量检查。

色水法常用亚甲基蓝溶液作为色水溶剂，但某些注射剂产品本身颜色很深，很难直接肉眼观察到泄露的亚甲基蓝，同时也不适合半定量的UV法和HPLC法测定；另外当检测包装内药剂为固体时，色水法也存在极大的局限。

综上，亟需一种改良后的色水法测定包装系统密封性的测试方法，使其适用范围更广，灵敏度更高。

发明内容

本发明为了解决上述问题，提供了一种色水法测定包装系统密封性的测试方法，参考USP43<1207.1>中概率法中的失踪气体法，筛选合适的有机溶剂的水溶液作为色水溶剂按色水法的测试方法，结合气相色谱仪建立半定量的包装密封性检测方法，改良的密封性测试方法耐用、灵敏度高，最低可检测3.5μm的漏孔。

一种色水法测定包装密封性的测试方法，具体步骤包括：

(1)将装有药品的样品置于密封性测试仪中处理后，在色水溶剂中静置，得到供试品；

(2)取步骤(1)供试品直接或稀释后置于顶空瓶中，进行半定量测定；

(3)以色水溶剂半定量测试结果为对照组，将步骤(2)中供试品半定量测试结果与其对比，分析样品包装密封性。

进一步的，步骤(1)中所述西林瓶样品置于密封性测试仪中，先在抽真空状态下保持，再置常压。

具体的，步骤(1)中抽真空度为-90KPa至-60KPa，维持20-90 分钟，恢复常压后加入色水溶剂，再常压维持20-60分钟。

进一步的，步骤(1)中所述的色水溶剂为成分不同于所述药品的纯溶剂或其混水溶剂。

具体的，所述色水溶剂为有机溶剂或其混水溶剂。

具体的，步骤(1)中所述的色水溶剂为异丙醇、乙醇、正丙醇、正丁醇、丙酮、丁酮的一种或多种或与水的混合物。

优选的，步骤(1)中所述的色水溶剂为异丙醇与水的混合物。

具体的，所述异丙醇与水的混合物的体积百分比为10：90。

另一优选的，步骤(1)中所述的色水溶剂为纯乙醇。

另一优选的，步骤(1)中所述的色水溶剂为正丁醇水溶液。

具体的，所述正丁醇与水的混合物的体积百分比为10：90。

本发明所用的色水溶剂为混合溶剂时，浓度越高，结果灵敏度相应会提高，但不与浓度呈线性递增。从试验操作和环境的安全角度出发，选择低浓度的有机相，同时该浓度能够保证结果的灵敏度。

进一步的，步骤(2)稀释用的稀释剂为水。

进一步的，步骤(2)半定量测定在FID检测器中进行。

进一步的，步骤(2)所述的半定量测定为气相色谱法测定。

进一步的，步骤(2)所述的半定量测定的进样方法为顶空进样或直接进样。

如果采用顶空进样，应选择低沸点的有机溶剂，保证溶剂在100℃以下能够挥发，才能保证检测的灵敏度。考虑实验操作人员的安全和环境的安全，可选择中国药典中规定的3类残留溶剂，毒性较小。选择溶剂的水混合溶液，从操作和环境方面均更加安全友好。

具体的，进样口温度为200℃；检测器温度为250℃；顶空瓶平衡温度为80℃，平衡时间为25分钟。

进一步的，所述气相色谱法中色谱柱是固定相为非极性、弱极性、中等极性或极性的色谱柱。

进一步的，所述气相色谱法中色谱柱是毛细管柱。

具体的，所述气相色谱法中色谱柱为6％氰丙基苯基-94％二甲基聚硅氧烷或极性相近的有机物为固定相的毛细管柱。

进一步的，步骤(2)所述的半定量测定中柱温可采取程序升温法或等温法。

具体的，步骤(2)所述的半定量测定中采用起始温度为40-90℃，维持0-15分钟，升温速率8℃-50℃/min，维持0-10分钟的程序升温法。

具体的，所述等温法柱温设置为40-120℃。

进一步的，步骤(3)中将供试品溶液色谱图和对照组色谱图进行比较。

本发明的有益之处在于：

(1)本方法适用于不能用常规染色剂结合UV法进行半定量检查的产品的密封性检测，同时也适合于能用常规染色剂结合UV法进行半定量检查的产品的密封性检测，可以检测装有固体或液体药物的西林瓶的密封性，较现有常规的方法使用范围更广。

(2)本发明先将对照品和阳性对照品进行色谱图对比，进行系统适用性判断，要求当对照品溶液色谱图中，主成分色谱峰的信噪比大于10，并且阳性对照品溶液色谱图中，所用色水溶剂成分的峰面积应大于对照品溶液主成分面积，这样才满足系统适用性，在一定程度上减少了实验误差和人为操作误差，后续供试品和对照品进行色谱图对比，分析样品包装密封性。

(3)本方法采用供试品溶液与对照品溶液对比，多次测定检出 3.5μm孔径的西林瓶的峰面积远大于对照品溶液的主峰面积，即本方法灵敏度高，对存在3.5μm孔径的西林瓶有足够的检出能力。对保证产品在有效期内包装完整性有着非常重要的意义，并最终确定产品的安全有效。

附图说明

图1为本发明的测试方法实施例1中空白水的GC图

图2为本发明的测试方法实施例1中对照品溶液的GC图

图3为本发明的测试方法实施例1中5μm阳性对照的GC图

图4为本发明的测试方法实施例1中供试品的GC图

图5为本发明的测试方法实施例1中3.5μm阳性对照的GC图

图6为本发明的测试方法实施例2中乙醇作色水溶剂的阳性瓶 GC图

图7为本发明的测试方法实施例2中乙醇对照品溶液GC图

图8为本发明的测试方法实施例2中注射用甲泼尼龙琥珀酸钠供试品溶液GC图

图9为本发明的测试方法实施例3中盐酸帕洛司琼注射液供试品溶液GC图

图10为本发明的测试方法实施例3中10％正丁醇作色水溶剂的阳性瓶溶液GC图

图11为本发明的测试方法实施例3中正丁醇对照品溶液GC图

具体实施方式

下面通过实施例和附图，对本发明进行进一步详细说明，应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明，本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的结构思路、使用范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。

本发明列举三种不同样品的包装密封性检测方法，但本发明的检测方法不仅限于列举的以下三种样品的包装密封性检测，列举的相关实验条件和选用试剂采用《中国药典》推荐的试剂和实验条件等，诸如：进样温度、毒性较小的3类残留溶剂和色谱柱固定液种类等，因此其它常见且可置换的但未明确记载于本说明书的实验条件、试剂、常规操作等均落入本发明的保护范围内。

实施例1：用于注射用利福平包装密封性检测

1.照气相色谱法(《中国药典》2020年版四部通则0521)测定：

供试品溶液：取本品20瓶，放入合适容器中，置密封性测试仪中，真空度-90kPa，维持20分钟，恢复至常压，立即加入药品种不可能存在的纯溶剂或其混水溶剂，例如10％的异丙醇水溶液中，没过整个西林瓶，常压放置60分钟，取出，用水冲洗瓶外壁，加水7ml，振摇使利福平溶解，取5ml置顶空瓶中，密封。

本发明所用的色水溶剂为混合溶剂时，浓度越高，结果灵敏度相应会提高，但不与浓度呈线性递增。从试验操作和环境的安全角度出发，选择低浓度的有机相，同时该浓度能够保证结果的灵敏度。

对照品溶液：精密称取异丙醇适量，用水定量稀释制成每1ml中含异丙醇约2μg的溶液。精密量取5ml，置顶空瓶中，密封。

阳性对照品溶液：取5μm孔径西林瓶，向其中加入水7ml，压塞密封，放入合适容器中，再置密封性测试仪中，真空度-90kPa，维持20分钟，恢复至常压，立即加入成分不同于药液的纯溶剂或其混水溶剂，例如10％异丙醇溶液，没过整个西林瓶，常压放置60分钟，取出，摇匀，用水冲洗瓶外壁。精密量取5ml，置顶空瓶中，密封。

色谱条件：色谱柱固定相为中等极性的毛细管柱，以(6％)氰丙基苯基-(94％)二甲基聚硅氧烷(或极性相近)为固定液的毛细管柱为色谱柱；起始温度为45℃，维持7分钟，以每分钟30℃速率升温至220℃，维持6分钟；进样口温度为200℃；检测器温度为250℃；顶空瓶平衡温度为80℃，平衡时间为25分钟。

气相的色谱条件在《中国药典》四部附录0861残留溶剂下有推荐的温度，可选择程序升温或者等温法。其中程序升温起始温度 40-90℃(维持0-15分钟)，升温速率8℃-50℃/min，维持0-10分钟。等温法柱温设置40-120℃。

系统适用性要求：对照品溶液色谱图中，主成分色谱峰的信噪比大于10。阳性对照品溶液色谱图中，异丙醇峰峰面积应大于对照品溶液主成分面积。

测定法：取供试品溶液、对照品溶液和阳性对照品溶液分别顶空进样，记录色谱图。采用顶空进样，应选择低沸点的有机溶剂，保证溶剂在100℃以下能够挥发，才能保证检测的灵敏度。同时考虑实验操作人员的安全和环境的安全，可选择《中国药典》中规定的3类残留溶剂，毒性较小。选择溶剂的水混合溶液，从操作和环境的更加安全友好，因此不排除使用非药典规定的可替代的有机溶剂，均落入本发明的保护范围。

限度：供试品溶液色谱图中如有异丙醇峰，其峰面积不得大于对照品溶液主峰面积。

本发明可将供试品和对照品的色谱图进行直接对比，分析包装密封性，也可先将对照品和阳性对照品进行色谱图对比，进行系统适用性判断，当对照品溶液色谱图中主成分色谱峰的信噪比大于10，并且阳性对照品溶液色谱图中，所用色水溶剂成分的峰面积应大于对照品溶液主成分面积，这样才满足系统适用性，在一定程度上减少了实验误差和人为操作误差，后续供试品和对照品进行色谱图对比，分析样品包装密封性。

2、检测灵敏度试验：

取3.5μm孔径的西林瓶，加水7ml，压塞密封，再置密封性测试仪中，真空度-90kPa，维持20分钟，恢复至常压，立即加入10％异丙醇溶液，没过整个西林瓶，常压放置60分钟，取出，摇匀，用水冲洗瓶外壁，取5ml置20ml顶空瓶中，作为检测限样品溶液。同法制备3份。结果，检出3.5μm孔径的西林瓶的峰面积远大于对照品溶液的主峰面积，本法对存在3.5μm孔径的西林瓶有检出能力。

实施例2：用于注射用甲泼尼龙琥珀酸钠包装密封性检测

照气相色谱法(《中国药典》2020年版四部通则0521)测定。

供试品溶液：取本品，放入合适容器中，置密封性测试仪中，真空度-60kPa，维持90分钟，恢复至常压，立即加入药品中不可能存在的纯溶剂或其混水溶剂，例如纯乙醇中，没过整个西林瓶，常压放置60分钟，取出，用水冲洗瓶外壁，加水7ml振摇使内容物溶解，取5ml置顶空瓶中，密封。

对照品溶液：精密称取乙醇适量，用水定量稀释制成每1ml中含乙醇约2μg的溶液。精密量取5ml，置顶空瓶中，密封。

阳性对照品溶液：取5μm孔径西林瓶，向其中加入水7ml，压塞密封，放入合适容器中，再置密封性测试仪中，真空度-60kPa，维持90分钟，恢复至常压，立即加入成分不同于药液的纯溶剂或其混水溶剂，例如乙醇，没过整个西林瓶，常压放置60分钟，取出，摇匀，用水冲洗瓶外壁。精密量取5ml，置顶空瓶中，密封。

色谱条件：色谱柱固定相为弱极性的毛细管柱，以(5％)苯基-(95％) 甲基聚硅氧烷为固定液的毛细管柱为色谱柱；起始温度为40℃，维持5分钟，以每分钟20℃速率升温至200℃，维持5分钟；进样口温度为200℃；检测器温度为250℃；顶空瓶平衡温度为80℃，平衡时间为30分钟。

系统适用性要求：对照品溶液色谱图中，主成分色谱峰的信噪比大于10。阳性对照品溶液色谱图中，乙醇峰峰面积应大于对照品溶液主成分面积。

测定法：取供试品溶液、对照品溶液和阳性对照品溶液分别顶空进样，记录色谱图。

实施例3：用于盐酸帕洛司琼注射液包装密封性检测

照气相色谱法(《中国药典》2020年版四部通则0521)测定。

供试品溶液：取本品，放入合适容器中，置密封性测试仪中，真空度-85kPa，维持60分钟，恢复至常压，立即加入药液中不可能存在的纯溶剂或其混水溶剂，例如10％正丁醇水溶液中，没过整个西林瓶，常压放置20分钟，取出，用水冲洗瓶外壁，因为本品药物为液体，可以不用加水稀释，直接取药液置顶空瓶中，密封。

对照品溶液：精密称取正丁醇适量，用水定量稀释制成每1ml中含正丁醇约2μg的溶液。取5ml，置顶空瓶中，密封。

阳性对照品溶液：取5μm孔径西林瓶，向其中加入水5ml，压塞密封，放入合适容器中，再置密封性测试仪中，真空度-85kPa，维持60分钟，恢复至常压，立即加入成分不同于药液的纯溶剂或其混水溶剂，例如10％正丁醇水溶液中，没过整个西林瓶，常压放置20 分钟，取出，摇匀，用水冲洗瓶外壁。取内容物，置顶空瓶中，密封。

色谱条件：色谱柱固定相为弱极性的毛细管柱，以(5％)苯基-(95％) 甲基聚硅氧烷为固定液的毛细管柱为色谱柱；起始温度为40℃，维持5分钟，以每分钟20℃速率升温至200℃，维持5分钟；进样口温度为200℃；检测器温度为250℃；顶空瓶平衡温度为80℃，平衡时间为30分钟。

系统适用性要求：对照品溶液色谱图中，主成分色谱峰的信噪比大于10。阳性对照品溶液色谱图中，正丁醇峰峰面积应大于对照品溶液主成分面积。

测定法：取供试品溶液、对照品溶液和阳性对照品溶液分别顶空进样，记录色谱图。

本方法适用于不能用常规染色剂结合UV法进行半定量检查的产品的密封性检测，同时也适合于能用常规染色剂结合UV法进行半定量检查的产品的密封性检测，可以检测装有固体或液体药物的西林瓶的密封性，较现有常规的方法使用范围更广。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种色水法测定包装密封性的测试方法，其特征在于，具体步骤包括：

(1)将装有药品的样品置于密封性测试仪中处理后，在色水溶剂中静置，得到供试品；

(2)取步骤(1)供试品直接或稀释后置于顶空瓶中，进行半定量测定；

(3)以色水溶剂半定量测试结果为对照组，将步骤(2)中供试品半定量测试结果与其对比，分析样品包装密封性。

2.根据权利要求1所述的测试方法，其特征在于，步骤(1)中所述西林瓶样品置于密封性测试仪中，先在抽真空状态下保持，再置常压。

3.根据权利要求1所述的测试方法，其特征在于，步骤(1)中抽真空度为-90KPa至-60KPa，维持20-90分钟，恢复常压后加入色水溶剂，再常压维持20-60分钟。

4.根据权利要求1所述的测试方法，其特征在于，步骤(1)中所述的色水溶剂为成分不同于所述药品的纯溶剂或其混水溶剂。

5.根据权利要求4所述的测试方法，其特征在于，所述色水溶剂为有机溶剂或其混水溶剂。

6.根据权利要求1所述的测试方法，其特征在于，步骤(2)所述的半定量测定为气相色谱法测定。

7.根据权利要求6所述的测试方法，其特征在于，步骤(2)所述的半定量测定的进样方法为顶空进样或直接进样。

8.根据权利要求6所述的测试方法，其特征在于，所述气相色谱法中色谱柱是固定相为非极性、弱极性、中等极性或极性的色谱柱。

9.根据权利要求6所述的测试方法，其特征在于，所述气相色谱法中色谱柱是毛细管柱。

10.根据权利要求6-9任一所述的测试方法，其特征在于，步骤(2)所述的半定量测定中采用起始温度为40-90℃，维持0-15分钟，升温速率8℃-50℃/min，维持0-10分钟的程序升温法。

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