CN111888527A - 一种富集高浓度自体脂肪svf及其细胞外基质的制备方法 - Google Patents
一种富集高浓度自体脂肪svf及其细胞外基质的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111888527A CN111888527A CN202010777365.0A CN202010777365A CN111888527A CN 111888527 A CN111888527 A CN 111888527A CN 202010777365 A CN202010777365 A CN 202010777365A CN 111888527 A CN111888527 A CN 111888527A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fat
- injector
- layer
- svf
- extracellular matrix
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 title claims abstract description 25
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 title claims abstract description 25
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 title claims abstract description 25
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 15
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 36
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 claims abstract description 21
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 claims abstract description 18
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 17
- 239000004519 grease Substances 0.000 claims abstract description 17
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims abstract description 14
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 14
- 239000000047 product Substances 0.000 claims abstract description 12
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims abstract description 11
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims abstract description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 11
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims abstract description 6
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 11
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 7
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 6
- 241000273930 Brevoortia tyrannus Species 0.000 claims description 5
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 claims description 5
- ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N heparin Chemical compound CC(O)=N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](C(O)=O)O[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@@H](O[C@@H]3[C@@H](OC(O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]3O)C(O)=O)O[C@@H]2O)CS(O)(=O)=O)[C@H](O)[C@H]1O ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N 0.000 claims description 5
- 229960001008 heparin sodium Drugs 0.000 claims description 5
- 230000008961 swelling Effects 0.000 claims description 5
- 208000026137 Soft tissue injury Diseases 0.000 claims description 3
- 238000002676 facial rejuvenation Methods 0.000 claims description 3
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 claims description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 3
- 230000008439 repair process Effects 0.000 claims description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 6
- 238000011068 loading method Methods 0.000 abstract 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 3
- 238000009168 stem cell therapy Methods 0.000 description 3
- 238000009580 stem-cell therapy Methods 0.000 description 3
- 208000032170 Congenital Abnormalities Diseases 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000005189 flocculation Methods 0.000 description 1
- 230000016615 flocculation Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 230000009323 psychological health Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000003997 social interaction Effects 0.000 description 1
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
- A61L27/3604—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix characterised by the human or animal origin of the biological material, e.g. hair, fascia, fish scales, silk, shellac, pericardium, pleura, renal tissue, amniotic membrane, parenchymal tissue, fetal tissue, muscle tissue, fat tissue, enamel
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
- A61L27/3604—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix characterised by the human or animal origin of the biological material, e.g. hair, fascia, fish scales, silk, shellac, pericardium, pleura, renal tissue, amniotic membrane, parenchymal tissue, fetal tissue, muscle tissue, fat tissue, enamel
- A61L27/3633—Extracellular matrix [ECM]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
- A61L27/3683—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix subjected to a specific treatment prior to implantation, e.g. decellularising, demineralising, grinding, cellular disruption/non-collagenous protein removal, anti-calcification, crosslinking, supercritical fluid extraction, enzyme treatment
- A61L27/3687—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix subjected to a specific treatment prior to implantation, e.g. decellularising, demineralising, grinding, cellular disruption/non-collagenous protein removal, anti-calcification, crosslinking, supercritical fluid extraction, enzyme treatment characterised by the use of chemical agents in the treatment, e.g. specific enzymes, detergents, capping agents, crosslinkers, anticalcification agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
- A61L27/3683—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix subjected to a specific treatment prior to implantation, e.g. decellularising, demineralising, grinding, cellular disruption/non-collagenous protein removal, anti-calcification, crosslinking, supercritical fluid extraction, enzyme treatment
- A61L27/3691—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix subjected to a specific treatment prior to implantation, e.g. decellularising, demineralising, grinding, cellular disruption/non-collagenous protein removal, anti-calcification, crosslinking, supercritical fluid extraction, enzyme treatment characterised by physical conditions of the treatment, e.g. applying a compressive force to the composition, pressure cycles, ultrasonic/sonication or microwave treatment, lyophilisation
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2430/00—Materials or treatment for tissue regeneration
- A61L2430/34—Materials or treatment for tissue regeneration for soft tissue reconstruction
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Botany (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
- Public Health (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明涉及一种富集高浓度自体脂肪SVF及其细胞外基质的制备方法，包括以下步骤：抽取移植用脂肪颗粒,将获得的脂肪颗粒放入离心管中离心后，将上层的油脂回收备用，中间层的脂肪组织转移至第一注射器中；将装有脂肪组织的第一注射器与第二注射器通过脂肪破碎器连接，得到破碎脂肪；将第二注射器拧下，通过鲁尔接头与第三注射器的注射口密封对接，将破碎脂肪通过鲁尔接头推注至第三注射器中；将油脂加入到脂肪组织中，混匀过滤，将滤液装入第四注射器内，保持注射器内负压，离心后，收取中间层产物，即得富集高浓度自体脂肪SVF及其细胞外基质；本发明操作过程简便、成本低廉，且制得的脂肪移植材料相比原有脂肪体积大大浓缩。
Description
[技术领域]
本发明属于脂肪移植技术领域，具体地说是一种富集高浓度自体脂肪SVF及其细胞外基质的制备方法。
[背景技术]
由于外伤、感染、肿瘤切除或先天性缺陷原因等造成的体表组织器官凹陷畸形，除了影响容貌之外，还会不同程度的影响患者的心理健康及社会交际活动。自体脂肪移植填充是目前治疗体表软组织凹陷或轮廓不对称的主要方法之一。其主要缺点是移植后容易吸收，吸收率占20％～90％不等，大多需要接受反复数次注射才能达到较为满意的效果。
脂肪干细胞和基质血管片段细胞在干细胞治疗领域的应用越发广泛，尤其是SVF的应用已在众多国家展开临床试验，其在提高脂肪移植后保存率以及创面修复方面优势明显：脂肪组织新鲜分离得到的SVFs中含有大量的、具有生物学活性的自体ASCs；来源于自身脂肪组织，无免疫排斥反应；人体内储量丰富；无需体外培养，降低细菌污染的风险。
然而现有技术在获取脂肪移植材料的过程较为复杂，成本较高，对于脂肪移植材料的提取不能达到很好的效果，尤其是不能够去除成熟的脂肪细胞及油脂。因此，若能提供一种富集高浓度自体脂肪SVF及其细胞外基质，将具有非常重要的意义。
[发明内容]
本发明的目的就是要解决上述的不足而提供一种富集高浓度自体脂肪SVF及其细胞外基质的制备方法，不仅操作过程简便、成本低廉，而且制得的脂肪移植材料相比原有脂肪体积大大浓缩，为脂肪移植填充提供了良好的材料。
为实现上述目的设计一种富集高浓度自体脂肪SVF及其细胞外基质的制备方法，包括以下步骤:1)用带螺纹注射器抽取移植用脂肪颗粒,在抽取的脂肪颗粒中添加肝素钠，上、下颠倒带螺纹注射器将其混匀；2)将获得的脂肪颗粒放入离心管中,以1000-1200g/min速度离心4-5min，离心后，脂肪颗粒分为上、中、下三层，将上层的油脂回收备用，底层的液体弃去，将中间层的脂肪组织转移至第一注射器中；3)将装有脂肪组织的第一注射器与第二注射器通过脂肪破碎器连接，推动带螺纹注射器的活塞，将脂肪颗粒通过脂肪破碎器推注至第一注射器中，反复推注，得到破碎脂肪；4)将装有破碎脂肪的第二注射器拧下，通过鲁尔接头与第三注射器的注射口密封对接，将破碎脂肪通过鲁尔接头推注至第三注射器中，推注速度为10-20ml/s，如此连续往返推注2-3min；5)将步骤2)回收的上层油脂加入到步骤4)经反复推注过的脂肪组织中，混匀后过滤，将滤液装入密封的第四注射器内，保持注射器内负压，轻微震荡30-40s后，将震荡后的混合物以2500-2800g/min的速度离心6-8min；6)离心后，混合液分为上、中、下三层，上层为油脂层，下层为肿胀液层，收取中间层产物，即得富集高浓度自体脂肪SVF及其细胞外基质。
进一步地，步骤5)中，所述过滤为40-80目数筛网过滤，且筛网过滤时采用负压吸取残留在过滤器中的脂肪组织。
进一步地，步骤6)中，收取中间层产物后，加入等体积的生理盐水混匀，于6000-8000rpm条件下离心5～10min，弃去离心沉淀，收集上层产物，即为富集高浓度自体脂肪SVF及其细胞外基质。
进一步地，步骤6)离心后，若混合液不分层或分层不明显，则重复步骤4)至步骤5)。
本发明还提供了一种富集高浓度自体脂肪SVF及其细胞外基质，该脂肪移植材料由上述制备方法制备得到。
本发明所述的制备方法制备得到的富集高浓度自体脂肪SVF及其细胞外基质在作为面部年轻化及软组织损伤修复的应用。
本发明同现有技术相比，具有如下优点：
(1)本发明在获取脂肪颗粒后，采取了离心的方式，在简单的操作流程下，致使脂肪颗粒先出现简单的分层后，随即去除脂肪颗粒中多余的膨胀液后，为后续的操作提供更为优质的脂肪颗粒；
(2)本发明应用流体涡旋原理，将脂肪组织中绝大多数成熟脂肪细胞破碎，同时采用絮凝沉淀技术，将破碎脂肪细胞产生的油滴汇集并去除；
(3)本发明采用的注射器在使用前均经过杀菌消毒，并放置于密闭袋中，保证了操作过程的严谨度；
(4)本发明不仅操作过程简便、成本低廉，而且制得的脂肪移植材料比原有的脂肪体积浓缩了近10倍，为脂肪移植填充提供了良好的材料；
(5)本发明移植后定植于局部的干细胞数量远远大于普通脂肪移植数量，作为干细胞疗法，远期疗效更佳，值得推广应用。
[具体实施方式]
下面结合具体实施例对本发明作以下进一步说明：
实施例1
本发明提供了一种富集高浓度自体脂肪SVF及其细胞外基质的制备方法，包括以下步骤：
1)用带螺纹注射器抽取移植用脂肪颗粒,在抽取的脂肪颗粒中添加肝素钠，上、下颠倒带螺纹注射器将其混匀；
2)将获得的脂肪颗粒放入离心管中,以1000g/min速度离心5min，离心后，脂肪颗粒分为上、中、下三层，将上层的油脂回收备用，底层的液体弃去，将中间层的脂肪组织转移至第一注射器中；
3)将装有脂肪组织的第一注射器与第二注射器通过脂肪破碎器连接，推动带螺纹注射器的活塞，将脂肪颗粒通过脂肪破碎器推注至第一注射器中，反复推注，得到破碎脂肪；
4)将装有破碎脂肪的第二注射器拧下，通过鲁尔接头与第三注射器的注射口密封对接，将破碎脂肪通过鲁尔接头推注至第三注射器中，推注速度为20ml/s，如此连续往返推注2min；
5)将步骤2)回收的上层油脂加入到步骤4)经反复推注过的脂肪组织中，混匀后过滤，将滤液装入密封的第四注射器内，保持注射器内负压，轻微震荡30s后，将震荡后的混合物以2500g/min的速度离心6min；其中，过滤为60目数筛网过滤，且筛网过滤时采用负压吸取残留在过滤器中的脂肪组织；
6)离心后，混合液分为上、中、下三层，上层为油脂层，下层为肿胀液层，收取中间层产物，即得富集高浓度自体脂肪SVF及其细胞外基质。
实施例2
本发明提供了一种富集高浓度自体脂肪SVF及其细胞外基质的制备方法，包括以下步骤：
1)用带螺纹注射器抽取移植用脂肪颗粒,在抽取的脂肪颗粒中添加肝素钠，上、下颠倒带螺纹注射器将其混匀；
2)将获得的脂肪颗粒放入离心管中,以1200g/min速度离心4min，离心后，脂肪颗粒分为上、中、下三层，将上层的油脂回收备用，底层的液体弃去，将中间层的脂肪组织转移至第一注射器中；
3)将装有脂肪组织的第一注射器与第二注射器通过脂肪破碎器连接，推动带螺纹注射器的活塞，将脂肪颗粒通过脂肪破碎器推注至第一注射器中，反复推注，得到破碎脂肪；
4)将装有破碎脂肪的第二注射器拧下，通过鲁尔接头与第三注射器的注射口密封对接，将破碎脂肪通过鲁尔接头推注至第三注射器中，推注速度为10ml/s，如此连续往返推注3min；
5)将步骤2)回收的上层油脂加入到步骤4)经反复推注过的脂肪组织中，混匀后过滤，将滤液装入密封的第四注射器内，保持注射器内负压，轻微震荡40s后，将震荡后的混合物以2600g/min的速度离心7min；其中，过滤为40目数筛网过滤，且筛网过滤时采用负压吸取残留在过滤器中的脂肪组织；
6)离心后，混合液分为上、中、下三层，上层为油脂层，下层为肿胀液层，收取中间层产物，即得富集高浓度自体脂肪SVF及其细胞外基质。
步骤6)收取中间层产物后，加入等体积的生理盐水混匀，于6000-8000rpm条件下离心5～10min，弃去离心沉淀，收集上层产物，即为富集高浓度自体脂肪SVF及其细胞外基质。
实施例3
本发明提供了一种富集高浓度自体脂肪SVF及其细胞外基质的制备方法，包括以下步骤：
1)用带螺纹注射器抽取移植用脂肪颗粒,在抽取的脂肪颗粒中添加肝素钠，上、下颠倒带螺纹注射器将其混匀；
2)将获得的脂肪颗粒放入离心管中,以1100g/min速度离心5min，离心后，脂肪颗粒分为上、中、下三层，将上层的油脂回收备用，底层的液体弃去，将中间层的脂肪组织转移至第一注射器中；
3)将装有脂肪组织的第一注射器与第二注射器通过脂肪破碎器连接，推动带螺纹注射器的活塞，将脂肪颗粒通过脂肪破碎器推注至第一注射器中，反复推注，得到破碎脂肪；
4)将装有破碎脂肪的第二注射器拧下，通过鲁尔接头与第三注射器的注射口密封对接，将破碎脂肪通过鲁尔接头推注至第三注射器中，推注速度为15ml/s，如此连续往返推注3min；
5)将步骤2)回收的上层油脂加入到步骤4)经反复推注过的脂肪组织中，混匀后过滤，将滤液装入密封的第四注射器内，保持注射器内负压，轻微震荡35s后，将震荡后的混合物以2800g/min的速度离心8min；其中，过滤为80目数筛网过滤，且筛网过滤时采用负压吸取残留在过滤器中的脂肪组织；
6)离心后，混合液分为上、中、下三层，上层为油脂层，下层为肿胀液层，收取中间层产物，即得富集高浓度自体脂肪SVF及其细胞外基质。
步骤6)离心后，若混合液不分层或分层不明显，则重复步骤4)至步骤5)。
上述制备方法制备得到的富集高浓度自体脂肪SVF及其细胞外基质可以应用于面部年轻化及软组织损伤修复，且疗效满意。
本发明并不受上述实施方式的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (6)
1.一种富集高浓度自体脂肪SVF及其细胞外基质的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)用带螺纹注射器抽取移植用脂肪颗粒,在抽取的脂肪颗粒中添加肝素钠，上、下颠倒带螺纹注射器将其混匀；
2)将获得的脂肪颗粒放入离心管中,以1000-1200g/min速度离心4-5min，离心后，脂肪颗粒分为上、中、下三层，将上层的油脂回收备用，底层的液体弃去，将中间层的脂肪组织转移至第一注射器中；
3)将装有脂肪组织的第一注射器与第二注射器通过脂肪破碎器连接，推动带螺纹注射器的活塞，将脂肪颗粒通过脂肪破碎器推注至第一注射器中，反复推注，得到破碎脂肪；
4)将装有破碎脂肪的第二注射器拧下，通过鲁尔接头与第三注射器的注射口密封对接，将破碎脂肪通过鲁尔接头推注至第三注射器中，推注速度为10-20ml/s，如此连续往返推注2-3min；
5)将步骤2)回收的上层油脂加入到步骤4)经反复推注过的脂肪组织中，混匀后过滤，将滤液装入密封的第四注射器内，保持注射器内负压，轻微震荡30-40s后，将震荡后的混合物以2500-2800g/min的速度离心6-8min；
6)离心后，混合液分为上、中、下三层，上层为油脂层，下层为肿胀液层，收取中间层产物，即得富集高浓度自体脂肪SVF及其细胞外基质。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤5)中，所述过滤为40-80目数筛网过滤，且筛网过滤时采用负压吸取残留在过滤器中的脂肪组织。
3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤6)中，收取中间层产物后，加入等体积的生理盐水混匀，于6000-8000rpm条件下离心5～10min，弃去离心沉淀，收集上层产物，即为富集高浓度自体脂肪SVF及其细胞外基质。
4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤6)离心后，若混合液不分层或分层不明显，则重复步骤4)至步骤5)。
5.一种富集高浓度自体脂肪SVF及其细胞外基质，其特征在于：由权利要求1至4中任一项所述的制备方法制备得到。
6.根据权利要求1至4中任一项所述的制备方法制备得到的富集高浓度自体脂肪SVF及其细胞外基质在作为面部年轻化及软组织损伤修复的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010777365.0A CN111888527A (zh) | 2020-08-05 | 2020-08-05 | 一种富集高浓度自体脂肪svf及其细胞外基质的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010777365.0A CN111888527A (zh) | 2020-08-05 | 2020-08-05 | 一种富集高浓度自体脂肪svf及其细胞外基质的制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111888527A true CN111888527A (zh) | 2020-11-06 |
Family
ID=73245693
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202010777365.0A Pending CN111888527A (zh) | 2020-08-05 | 2020-08-05 | 一种富集高浓度自体脂肪svf及其细胞外基质的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111888527A (zh) |
-
2020
- 2020-08-05 CN CN202010777365.0A patent/CN111888527A/zh active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106676065B (zh) | 一种脂肪组织来源外泌体胶及制备方法及应用 | |
| CN106178134B (zh) | 一种含高度浓缩的脂肪来源干细胞和细胞外基质的脂肪移植材料及其纯物理制备方法和应用 | |
| CN107224614A (zh) | 一种富含细胞因子的脂肪源性基质细胞复合移植材料的制备及其临床应用 | |
| CN106421920B (zh) | 一种脂肪填充物及其制备方法 | |
| CN109511648B (zh) | 临床局部注射用间充质干细胞保存液及保存间充质干细胞的方法 | |
| CN110038165B (zh) | 一种富集高活性脂肪颗粒细胞和脂肪干细胞的脂肪移植物及其制备方法和应用 | |
| CN104491944A (zh) | 一种血浆的提取装置及其提取方法 | |
| JP6471259B2 (ja) | 毛髪再生用の細胞製剤 | |
| CN102284082B (zh) | 一种可用于面部美容的皮下软组织填充定位纤维蛋白复合物及其制备方法 | |
| CN113041397A (zh) | 一种含有交联葡聚糖的面部填充剂及其制备方法 | |
| CN109876189A (zh) | 一种利用超声波高效制备脂肪源生物材料的方法 | |
| US20200222601A1 (en) | Blood separation method | |
| CN112244008A (zh) | 脐带血来源的浓缩生长因子试剂盒制备 | |
| CN111888527A (zh) | 一种富集高浓度自体脂肪svf及其细胞外基质的制备方法 | |
| CN106540334A (zh) | 一种组合物及其应用 | |
| CN113456807A (zh) | 一种软组织填充剂及其应用 | |
| CN108744043A (zh) | 一种利用内置式超声制备脂肪来源细胞外基质的方法 | |
| CN113769170A (zh) | 用于注射填充的含有自体血清和高浓度脂肪干细胞的复合脂肪胶及其制备方法 | |
| CN114832015A (zh) | 一种基于prp与干细胞外泌体的面部修复注射剂及其制备方法 | |
| CN114469855A (zh) | 一种人脐带间充质干细胞诱导分化为成纤维细胞组合应用技术 | |
| CN111632197A (zh) | 一种svf-gel脂肪胶制备方法 | |
| CN108744042A (zh) | 一种利用内置式超声波高效富集基质血管片段细胞材料的制备方法 | |
| CN111419877A (zh) | 一种用于治疗男性勃起障碍的药物及其制备方法 | |
| CN108728407A (zh) | 一种利用外置式超声波高效富集基质血管片段细胞材料的制备方法 | |
| CN111548988B (zh) | 一种医用漂洗液及其制备方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20201106 |
|
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |