CN111830188B - 一种儿童清肺丸的质量检测方法 - Google Patents

一种儿童清肺丸的质量检测方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种儿童清肺丸的质量检测方法，涉及药品检测技术领域。本发明公开的质量检测方法包括如下步骤：取儿童清肺丸，破碎，加入硅藻土，再加入甲醇，超声，过滤，将滤液蒸干，在残渣中加入甲醇溶液使其溶解，得到供试品溶液。以薄层色谱法对其中的橘红进行定性鉴定，所用展开剂包含三氯甲烷、甲醇、冰乙酸和水，四种材料的体积比为：三氯甲烷:甲醇:冰乙酸:水＝(6～12):(3～6):(0.5～1):(0.2～0.8)。以本发明公开的配方制备的展开剂，在质量检测过程中可使橘红与化橘红明显区别开来，并且制备过程简单，所需设备较少，适合推广。

Description

一种儿童清肺丸的质量检测方法
技术领域
本发明涉及药品检测技术领域，尤其涉及一种儿童清肺丸的质量检测方法。
背景技术
随着社会、经济及医药卫生事业的不断发展，加之儿童是一群独特的和富有挑战性的人群，对药品的种类、用法用量都有其特殊的要求，儿童的健康和用药的安全问题越来越受到社会的关注和重视。因此，应保证处方中易混淆的药材品种用药准确性，以提高儿童用药的安全性和有效性。儿童清肺丸作为儿科用中成药，用于小儿风寒外束、肺经痰热所致的面赤身热、咳嗽气促、痰多黏稠、咽痛声哑等症。收载于《中国药典》(2015年版)一部，其处方为:麻黄 10g、石膏40g、蜜桑白皮30g、黄芩40g、橘红30g、炒紫苏子20g、浙贝母 40g、细辛8g、蜜枇杷叶40g、前胡20g、天花粉30g、炒苦杏仁20g、甘草 10g、瓜蒌皮30g、板蓝根40g、法半夏30g、葶苈子10g、紫苏叶20g、薄荷 30g、白前30g、石菖蒲30g、煅青礞石10g。制法为:以上二十二味，粉碎成细粉，过筛，混匀。每100g粉末加炼蜜45～65g与适量的水，制成水蜜丸，干燥；或每100g粉末加炼蜜140～160g制成大蜜丸，即得。
《中国药典》(2015年版)一部分别收载了橘红与化橘红两个不同品种，其中橘红主要有效成份为橙皮苷，而化橘红主要有效成份为柚皮苷。橘红和化橘红均为芸香科植物，该品种植物作为药用植物种类繁多，在长期发展的过程中，普遍存在品种基源复杂、同名异物和同物异名、别名繁多等问题，造成了滥用、误用、混用，严重影响了中药的临床疗效。市面上橘红、化橘红这两种药在使用上较混乱，人们经常将橘红与化橘红混为一谈，或将化橘红作橘红用。然而这两味中药的功用主治在中药大词典中的记载也是不同的，其中化橘红功能主治为:理气宽中，燥湿化痰，兼消食；用于咳嗽痰多及食积不化但无热象者。而橘红功能主治为:发表散寒、理气宽中，燥湿化痰。其温燥之性胜于陈皮，外感风寒咳嗽痰多者用之为宜，还用于食积伤酒，呕恶痞闷。可见，为了保障儿童清肺丸的疗效，对于中药橘红和化橘红在复方投料中的严格区分是十分必要的。根据现行2015版《中国药典》中所述橘红的薄层色谱鉴别法进行试验，结果显示，橙皮苷和柚皮苷斑点的颜色和Rf值非常相近，无法得到很好的区分鉴别。
因此，为了保证儿童清肺丸质量与疗效，有必要在对儿童清肺丸进行薄层鉴别时使橙皮苷和柚皮苷在薄层板上得到较好的分离鉴别，以确保投料的是橘红，而非化橘红，或是参杂了化橘红的橘红。
发明内容
本发明旨在改进上述薄层色谱鉴别法，以使橙皮苷和柚皮苷在薄层板上具有明显不同的Rf值，达到较好的区分效果，因此而提供一种稳定可靠的儿童清肺丸质量检测方法。
为实现上述目的，本发明所采取的技术方案为：一种儿童清肺丸的质量检测方法，包含如下步骤：
(1)制备供试品溶液:取儿童清肺丸，破碎，加入硅藻土，再加入甲醇溶液A进行超声提取，过滤，将滤液蒸干，得到滤液中的残渣，在残渣中加入甲醇溶液B使其溶解，得到所述供试品溶液；所述儿童清肺丸包含大蜜丸和水蜜丸中的至少一种；
(2)制备对照品溶液:分别取橙皮苷和柚皮苷对照品，加甲醇制成1mg/mL 的橙皮苷和柚皮苷对照品溶液；
(3)展开剂的选择:展开剂包含三氯甲烷、甲醇、冰乙酸和水，四种材料的体积比为:三氯甲烷:甲醇:冰乙酸:水＝(6～12):(3～6):(0.5～1): (0.2～0.8)；
(4)待步骤(1)、(2)和(3)完成后，以薄层色谱法对儿童清肺丸中的橘红进行定性鉴别。
优选地，所述步骤(1)中，相对于每3～5g水蜜丸或4～6g大蜜丸，硅藻土的添加量为2～3g。
优选地，所述步骤(1)中，相对于每4g水蜜丸或5g大蜜丸，硅藻土的添加量为2.5g。
优选地，所述步骤(1)中，相对于每3～5g水蜜丸或4～6g大蜜丸，甲醇溶液A的加入量为20～30mL，甲醇溶液B的加入量为0.5～2mL，超声提取的时间为1～2h；所述甲醇溶液A和甲醇溶液B中，甲醇的体积分数为60-80％。
优选地，相对于每4g水蜜丸或5g大蜜丸，甲醇溶液A的加入量为25mL，甲醇溶液B的添加量为1mL，超声提取的时间为1.5h；所述甲醇溶液A和甲醇溶液B中甲醇的体积百分数为70％。
优选地，所述步骤(3)中，三氯甲烷、甲醇、冰乙酸和水的体积比为:三氯甲烷:甲醇:冰乙酸:水＝9:4.5:0.7:0.5。本发明申请人通过多次实验研究发现，以上述配比制备的展开剂具有最优性能。
优选地，所述步骤(4)中的薄层色谱法为:吸取供试品溶液和对照品溶液各2μL，分别滴于硅胶G薄层板上，在-8～-3℃以展开剂展开，展开时环境湿度为70～90％，然后取出、晾干，喷以三氯化铝乙醇溶液，热风吹干，在紫外光下检视。
优选地，所述步骤(4)中，展开温度为-5℃，展开湿度为80％。
优选地，所述步骤(4)中，所述三氯化铝乙醇溶液中，三氯化铝的质量分数为3～5％。
优选地，所述步骤(4)中，所述紫外光的波长为366nm。
相比于现有技术，本发明的有益效果为:本发明通过对橘红薄层色谱鉴别方法进行改进，采用一种不同的展开剂系统，检测儿童清肺丸中的橘红组分，并与化橘红的主成分加以区分，以排除投料错误产生的干扰，保障橘红投料的准确性以及产品的治疗效果；在对橘红检测方法进行改进的同时，不仅使橙皮苷和柚皮苷在同一个薄层板上得到较好的区分鉴别，并且大大地提高了橘红检测的专属性，更加提高了产品质量的可控性。
附图说明
图1为以本发明实施例1检测方法检测所得色谱图；
图2为以本发明实施例2检测方法检测所得色谱图；
图3为以本发明实施例3检测方法检测所得色谱图；
图4为以本发明实施例4检测方法检测所得色谱图；
图5为以本发明实施例5检测方法检测所得色谱图；
图6为以本发明对比例1检测方法检测所得色谱图；
图7为以本发明对比例2检测方法检测所得色谱图。
具体实施方式
为更好地说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明。
实施例1
本实施例为本发明儿童清肺丸的质量检测方法的一种实施例。
实验材料：儿童清肺丸及阴性对照样品均由白云山敬修堂药业股份有限公司提供；橙皮苷和柚皮苷对照品由中国食品药品检定研究院提供，橙皮苷批号: 110721-201115，柚皮苷批号:110722-201111。甲醇和硅藻土均为分析纯，水为纯化水。
供试品溶液的制备:取水蜜丸4g，粉碎，加入2.5g硅藻土，加入甲醇体积分数为70％的甲醇溶液25mL，超声1.5h，过滤，滤液蒸干，残渣中加入1mL 甲醇使其溶解，得到供试品溶液。
对照品溶液的制备:取橙皮苷和柚皮苷对照品，分别加入甲醇，配制成浓度为1mg/mL的橙皮苷对照品溶液和柚皮苷对照品溶液。
色谱条件:
展开剂(体积比):三氯甲烷:甲醇:冰乙酸:水＝9:4.5:0.7:0.5；
展开温度:-5℃；
展开湿度:80％。
点样:照薄层色谱法(2015版药典通则0502)试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液各2μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，按上述色谱条件展开，取出，晾干，喷以三氯化铝质量分数为4％的三氯化铝乙醇溶液，热风吹干，在紫外光(366nm)下检视。
图1为以实施例1的质量检测方法测出的色谱图，从图中可以观察到，橙皮苷对照品溶液和柚皮苷对照品溶液的色谱上，荧光条斑的位置明显不同，两者的Rf值相差最大，即使两味药丸混合使用，通过此展开条件可使两者的荧光条斑清晰区别开来，方法简便快速准确。对于供试品溶液，从色谱图上可以看到，其荧光条斑的位置与橙皮苷对照品相对应。
实施例2
本实施例为本发明儿童清肺丸的质量检测方法的一种实施例。实验材料和对照品溶液与实施例1相同。以展开剂比例边界的下限进行展开。
供试品溶液的制备:取水蜜丸4g，粉碎，加入2.5g硅藻土，加入甲醇体积分数为70％的甲醇溶液25mL，超声1.5h，过滤，滤液蒸干，残渣中加入1mL 甲醇使其溶解，得到供试品溶液。
色谱条件:
展开剂(体积比):三氯甲烷:甲醇:冰乙酸:水＝6:3:0.5:0.2；
展开温度:-5℃；
展开湿度:80％。
点样:照薄层色谱法(2015版药典通则0502)试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液各2μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，按上述色谱条件展开，取出，晾干，喷以三氯化铝质量分数为4％的三氯化铝乙醇溶液，热风吹干，在紫外光(366nm)下检视。
图2为以实施例2的质量检测方法测出的色谱图，从图中可以观察到，橙皮苷对照品溶液和柚皮苷对照品溶液的色谱上，荧光条斑的位置明显不同，可以区别开来，但是两者位置差距相比实施例1较近，且斑点相对分散，说明展开剂的比例对最终色谱图的效果具有较大影响。
实施例3
本实施例为本发明儿童清肺丸的质量检测方法的一种实施例。实验材料和对照品溶液与实施例1相同。以展开剂比例边界的上限进行展开。
供试品溶液的制备:取水蜜丸4g，粉碎，加入2.5g硅藻土，加入甲醇体积分数为70％的甲醇溶液25mL，超声1.5h，过滤，滤液蒸干，残渣中加入0.5mL 甲醇使其溶解，得到供试品溶液。
色谱条件:
展开剂(体积比):三氯甲烷:甲醇:冰乙酸:水＝12:6:1:0.8；
展开温度:-5℃；
展开湿度:80％。
点样:照薄层色谱法(2015版药典通则0502)试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液各2μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，按上述色谱条件展开，取出，晾干，喷以三氯化铝质量分数为4％的三氯化铝乙醇溶液，热风吹干，在紫外光(366nm)下检视。
图3为以实施例3的质量检测方法测出的色谱图，从图中可以观察到，橙皮苷对照品溶液和柚皮苷对照品溶液的色谱上，荧光条斑的位置明显不同，可以区别开来，但是两者位置差距相比实施例1较近，说明展开剂中各成分的最优体积比为：三氯甲烷：甲醇：冰乙酸：水＝9:4.5:0.7:0.5。
实施例4
本实施例为本发明儿童清肺丸的质量检测方法的一种实施例。实验材料和对照品溶液与实施例1相同。展开温度控制为温度上限。
供试品溶液的制备:取水蜜丸4g，粉碎，加入2.5g硅藻土，加入甲醇体积分数为70％的甲醇溶液25mL，超声1.5h，过滤，滤液蒸干，残渣中加入1mL 甲醇使其溶解，得到供试品溶液。
色谱条件:
展开剂(体积比):三氯甲烷:甲醇:冰乙酸:水＝9:4.5:0.7:0.5；
展开温度:-3℃；
展开湿度:80％。
点样:照薄层色谱法(2015版药典通则0502)试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液各2μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，按上述色谱条件展开，取出，晾干，喷以三氯化铝质量分数为4％的三氯化铝乙醇溶液，热风吹干，在紫外光(366nm)下检视。
图4为以实施例4的质量检测方法测出的色谱图，从图中可以观察到，橙皮苷对照品溶液和柚皮苷对照品溶液的色谱上，荧光条斑的位置明显不同，可以区别开来，但是两者位置差距相比实施例1较近，且斑点略为分散，说明以实施例1所述的温度进行展开时，测试结果相对较好。
实施例5
本实施例为本发明儿童清肺丸的质量检测方法的一种实施例。实验材料和对照品溶液与实施例1相同。展开温度控制为温度下限。
供试品溶液的制备:取大蜜丸5g，粉碎，加入2.5g硅藻土，加入甲醇体积分数为70％的甲醇溶液25mL，超声1.5h，过滤，滤液蒸干，残渣中加入1mL 甲醇使其溶解，得到供试品溶液。
色谱条件:
展开剂(体积比):三氯甲烷:甲醇:冰乙酸:水＝9:4.5:0.7:0.5；
展开温度:-8℃；
展开湿度:80％。
点样:照薄层色谱法(2015版药典通则0502)试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液各2μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，按上述色谱条件展开，取出，晾干，喷以三氯化铝质量分数为4％的三氯化铝乙醇溶液，热风吹干，在紫外光(366nm)下检视。
图5为以实施例5的质量检测方法测出的色谱图，从图中可以观察到，橙皮苷对照品溶液和柚皮苷对照品溶液的色谱上，荧光条斑的位置明显不同，并且从两者的混合液的荧光条斑中也可以观察到两条与橙皮苷对照品溶液和柚皮苷对照品溶液中的荧光条斑的位置一一对应的荧光条斑，说明以本方法展开，可有效检测出产品中的橘红和化橘红成分。
对比例1
本对比例所用实验材料及对照品溶液均与实施例1相同。
供试品溶液的制备:取水蜜丸2g，粉碎，加入乙醇体积分数为70％的乙醇溶液20mL，加热回流1h，过滤，滤液浓缩至2mL，加在聚酰胺柱(80-100目， 1g，柱内径为1cm，湿法装柱)上，分别用水、乙醇体积分数为30％的乙醇溶液洗脱，收集30％乙醇洗脱液蒸干，残渣加甲醇2mL使其溶解，作为供试品溶液。
色谱条件:照薄层色谱法(2015版药典通则0502)试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液各2μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，使成条状，以乙酸乙酯:甲醇:水体积比＝10:1.7:1.3的混合溶液为展开剂展开，取出，晾干，喷以三氯化铝质量分数为1％的三氯化铝乙醇溶液，热风吹干，在紫外光(366nm) 下检视。
图6为以对比例1的质量检测方法测出的色谱图，从图中可以观察到，橙皮苷对照品溶液和柚皮苷对照品溶液的色谱上，荧光条斑的位置非常接近，无法分辨，而从供试品溶液的荧光条斑中也难以辨别供试品中是否含有橘红。
对比例2
与实施例1相比，本对比例的展开温度为室温25℃。
供试品溶液的制备:取水蜜丸4g，粉碎，加入2.5g硅藻土，加入甲醇体积分数为70％的甲醇溶液25mL，超声1.5h，过滤，滤液蒸干，残渣中加入1mL 甲醇使其溶解，得到供试品溶液。
色谱条件:
展开剂(体积比):三氯甲烷:甲醇:冰乙酸:水＝9:4.5:0.7:0.5；
展开温度:25℃；
展开湿度:80％。
点样:照薄层色谱法(2015版药典通则0502)试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液各2μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，按上述色谱条件展开，取出，晾干，喷以三氯化铝质量分数为4％的三氯化铝乙醇溶液，热风吹干，在紫外光(366nm)下检视。
图7为以对比例2的质量检测方法测出的色谱图，从图中可以观察到，橙皮苷对照品溶液和柚皮苷对照品溶液的色谱上，荧光条斑的位置非常接近，无法清晰分辨，易造成混淆，从供试品溶液的荧光条斑中也难以辨别供试品中是否含有橘红，故应该严格控制在低温条件下展开。
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，但并不脱离本发明技术方案的实质和范围。

Claims (9)

1.一种儿童清肺丸的质量检测方法，其特征在于，包含如下步骤：
(1)制备供试品溶液:取儿童清肺丸，破碎，加入硅藻土，再加入甲醇溶液A进行超声提取，过滤，将滤液蒸干，得到滤液中的残渣，在残渣中加入甲醇溶液B使其溶解，得到所述供试品溶液；所述儿童清肺丸包含大蜜丸和水蜜丸中的至少一种；
(2)制备对照品溶液：分别取橙皮苷和柚皮苷对照品，加甲醇制成1mg/mL的橙皮苷和柚皮苷对照品溶液；
(3)展开剂的选择：展开剂包含三氯甲烷、甲醇、冰乙酸和水，三氯甲烷、甲醇、冰乙酸和水的体积比为:三氯甲烷:甲醇:冰乙酸:水＝(9～12):(4.5～6):(0.7～1):(0.5～0.8)；
(4)待步骤(1)、(2)和(3)完成后，以薄层色谱法对儿童清肺丸中的橘红进行定性鉴别；
所述步骤(4)中的薄层色谱法为:吸取供试品溶液和对照品溶液各2μL，分别滴于硅胶G薄层板上，在-5～-3℃以展开剂展开，展开时环境湿度为70～90％，然后取出、晾干，喷以三氯化铝乙醇溶液，热风吹干，在紫外光下检视。
2.如权利要求1所述的质量检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中，相对于每3～5g水蜜丸或4～6g大蜜丸，硅藻土的添加量为2～3g。
3.如权利要求2所述的质量检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中，相对于每4g水蜜丸或5g大蜜丸，硅藻土的添加量为2.5g。
4.如权利要求1所述的质量检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中，相对于每3～5g水蜜丸或4～6g大蜜丸，甲醇溶液A的加入量为20～30mL，甲醇溶液B的加入量为0.5～2mL，超声提取的时间为1～2h；所述甲醇溶液A和甲醇溶液B中，甲醇的体积分数为60-80％。
5.如权利要求4所述的质量检测方法，其特征在于，相对于每4g水蜜丸或5g大蜜丸，甲醇溶液A的加入量为25mL，甲醇溶液B的添加量为1mL，超声提取的时间为1.5h；所述甲醇溶液A和甲醇溶液B中甲醇的体积百分数为70％。
6.如权利要求1所述的质量检测方法，其特征在于，所述步骤(3)中，三氯甲烷、甲醇、冰乙酸和水的体积比为:三氯甲烷:甲醇:冰乙酸:水＝9:4.5:0.7:0.5。
7.如权利要求6所述的质量检测方法，其特征在于，展开温度为-5℃，展开湿度为80％。
8.如权利要求6所述的质量检测方法，其特征在于，所述三氯化铝乙醇溶液中，三氯化铝的质量分数为3～5％。
9.如权利要求6所述的质量检测方法，其特征在于，所述紫外光的波长为366nm。
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