CN111821340A - 一种治疗颈椎病的纳米中药制剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种治疗颈椎病的纳米中药制剂，所述纳米中药制剂的原料包括：三七1‑15份，川芎3‑20份，延胡索2‑15份，白芍3‑20份，威灵仙4‑25份，葛根3‑20份，羌活4‑25份和一种或多种药学上可接受的辅料，通过一定的制备方法将该组方制备成纳米级别的纳米中药制剂，提高该中药组方的肠胃吸收率、药物溶解度以及生物利用度，并且将上述中药组方制备成纳米中药制剂可以使药物中的挥发油及其水溶性成分和水溶性、脂溶性都较差的成分能够很好地进行结合，提高药物稳定性的同时毒副作用小。

Description

一种治疗颈椎病的纳米中药制剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及治疗颈椎病的中药制剂技术领域，具体涉及一种治疗颈椎病的纳米中药制剂及其制备方法。
背景技术
公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
神经根型颈椎病(血瘀气滞及脉络闭阻症)在中医中属于“痹症”范畴，以颈椎间盘退变为先导，在椎间孔狭窄的基础上，神经根受到机械压迫和化学刺激而产生充血、水肿、炎症反应而发病的。
现有技术中由三七、川芎、延胡索、白芍、威灵仙、葛根、羌活组成的中药组方制备的中药制剂已经用于神经根型颈椎病的治疗。但是发明人发现该中药组方的原有制剂存在：肠胃吸收率低、透膜性差、生物利用度低、剂型单一的问题，亟待开发新的中药制剂的制备方法和剂型。
并且原有的治疗颈椎病的药剂其制备方法先对中药组方中的各原料进行了有效成分的提取然后制成药剂，但是现有的提取技术也只能将部分有效成分提取出来，因此造成了有些中药中有效成分的浪费。
发明内容
为了克服上述技术问题，本发明针对由三七、川芎、延胡索、白芍、威灵仙、葛根、羌活组成的中药组方的制备工艺进行改进，提供一种治疗颈椎病的纳米中药制剂及其制备方法，提高该中药组方的肠胃吸收率、药物溶解度以及生物利用度，并且将上述中药组方制备成纳米中药制剂可以使药物中的挥发油及其水溶性成分和水溶性、脂溶性都较差的成分能够很好地进行结合，提高药物稳定性的同时毒副作用小。
具体地，本发明的技术方案如下所述：
在本发明的第一方面，提供一种治疗颈椎病的纳米中药制剂，所述纳米中药制剂的原料包括：三七1-15份，川芎3-20份，延胡索2-15份，白芍3-20份，威灵仙4-25份，葛根3-20份，羌活4-25份和一种或多种药学上可接受的辅料。
所述治疗颈椎病的纳米中药制剂的制备方法为：
(1)称取配伍量的三七，初步粉碎后将三七细粉通过湿法球磨将三七制备成纳米散液，所述三七纳米粒子的粒径为200-400nm；
(2)称取配伍量的羌活和威灵仙，将羌活和威灵仙通过超声波辅助法提取并收集挥发油，提取液浓缩成清膏，将挥发油与清膏混合，采用动态超高压微射流均质机进行均质处理，得到羌活、威灵仙纳米分散液；
超声波辅助法提取挥发油的工艺条件为：超声功率700-900W，优选为800W，超声温度为55-65℃，优选为60℃，超声时间为10-20min，优选为15min，料液比为1:12-15(g/ml)；
(3)称取配伍量的葛根，初步粉碎后将葛根细粉通过湿法球磨将葛根制备成纳米散液，所述葛根纳米粒子的粒径为200-400nm；
(4)称取配伍量的白芍，白芍加水煎煮两次，第一次2小时，第二次1小时，滤液浓缩、醇沉，回收乙醇，浓缩后成为在50℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；将清膏采用动态超高压微射流均质机进行均质处理，得到白芍纳米分散液；
(5)称取配伍量的川芎、延胡索，将川芎、延胡索用乙醇回流提取，弃去残渣，提取液回收乙醇，浓缩成50℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；将清膏采用动态超高压微射流均质机进行均质处理，得到川芎、延胡索纳米分散液；
(6)取稳定剂溶于水中，将上述三七纳米粉末，羌活、威灵仙纳米分散液，葛根纳米分散液、白芍纳米分散液和川芎、延胡索纳米分散液按一定比例混合，加入稳定剂的水溶液中，搅拌均匀，即得治疗颈椎病的纳米中药制剂；
所述稳定剂选自十二烷基磺酸钠、泊洛沙姆188、卵磷脂和PVP-K-30中的一种或多种；
所述稳定剂的用量为中药原料质量的2％-4％。
在本发明的第二方面，提供一种方面所述治疗颈椎病的纳米中药制剂在治疗颈椎病中的应用。
本发明的具体实施方式具有以下有益效果：
制备的治疗颈椎病的纳米中药制剂由于稳定剂的筛选和加入，粒度均匀，分散良好，稳定性高，不容易发生聚沉，可以促进药物有效成分的溶出和利用；
原有的治疗颈椎病的药剂其制备方法先对中药组方中的各原料进行了有效成分的提取然后制成药剂，但是由于有些药物成分溶解性差，如葛根中的异黄酮类物质，现有的提取技术也只能将部分有效成分提取出来，因此造成了大量中药中有效成分的浪费，本发明中将葛根纳米化，使得葛根中的有效成分能够得到有效的溶出和利用，减少了药材的浪费，提高了药材的利用率；
制备成纳米剂型，由于药物成分具有极小的粒径，使得药物具有较大的比表面积，药物中有效成分的溶出速率在短时间内达到最大，另外其还能延长药物在胃肠道部位的滞留时间，从而提高口服药物的生物利用度。
附图说明
构成本发明的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。
图1为实施例1组小鼠8h时血清中人参皂苷Rg1的高效液相色谱图；
图2为对比例1组小鼠8h时血清中人参皂苷Rg1的高效液相色谱图。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。
除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。本发明所使用的试剂或原料均可通过常规途径购买获得，如无特殊说明，本发明所使用的试剂或原料均按照本领域常规方式使用或者按照产品说明书使用。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
正如背景技术中论述的，现有技术中公开的用于治疗颈椎病的药剂存在肠胃吸收率低、透膜性差、生物利用度低、剂型单一的问题；并且其制备方法中除了三七之外先对中药中的成分进行了提取，但是由于部分原料药物的有效成分溶解性差，原有的提取方法只能将部分有效成分提取出来，造成了大量药材中有效成分的浪费。鉴于此本发明在原有治疗颈椎病的药剂的基础上对其制备方法进行改进，以期得到肠胃吸收率高、透膜性好、生物利用度高，且能够最大程度利用药材中有效成分的治疗颈椎病的纳米中药制剂。
本发明的一种实施方式中，提供一种治疗颈椎病的纳米中药制剂，所述纳米中药制剂的原料包括：三七1-15份，川芎3-20份，延胡索2-15份，白芍3-20份，威灵仙4-25份，葛根3-20份，羌活4-25份和一种或多种药学上可接受的辅料；
所述治疗颈椎病的纳米中药制剂的制备方法为：
(1)称取配伍量的三七，初步粉碎后将三七细粉通过湿法球磨将三七制备成纳米散液，所述三七纳米粒子的粒径为200-400nm；
在一种具体的实施方式中，先将三七粉碎成100目并过筛，60-70℃真空干燥60min；取干燥的三七细粉，用湿法球磨加工15-20h；
在一种优选的实施方式中，所述葛根纳米粒子的粒径为250-350nm；
本发明发现葛根纳米粒子的平均粒径为在200nm以下时稳定性较差，容易发生聚集，平均粒径为在400nm以上时药物粒子中的有效成分溶出效果下降。
将三七制备成纳米级的分散液更加有助于三七总皂苷等有效药用成分的溶出，并且有助于药物在生物体内的充分吸收和利用。
(2)称取配伍量的羌活和威灵仙，将羌活和威灵仙通过超声波辅助法提取并收集挥发油，提取液浓缩成清膏，将挥发油与清膏混合，采用动态超高压微射流均质机进行均质处理，得到羌活、威灵仙纳米分散液；
在一种具体地实施方式中，所述超声波辅助法提取挥发油的工艺条件为：超声功率700-900W，优选为800W，超声温度为55-65℃，优选为60℃，超声时间为10-20min，优选为15min，料液比为1:12-15(g/ml)，优选为1:12(g/ml)；
水蒸气蒸馏法提取挥发油会使得部分药物成分发生聚合、氧化等变性反应，从而降低部分药效；本发明采用超声波辅助法提取挥发油可以提高挥发油的提取率，缩短提取时间，在提取过程中温度升高不明显，可以抑制有效成分的挥发并保持提取物的原有药性；本发明的超声提取条件可以最大限度地将羌活和威灵仙中的挥发油提取出来，并且提取出的挥发油可以保持良好的药物活性。
(3)称取配伍量的葛根，初步粉碎后将葛根细粉通过湿法球磨将葛根制备成纳米散液，所述葛根纳米粒子的粒径为200-400nm；
葛根中的有效药物成分葛根素为异黄酮类物质，在水中和乙醇中溶解度都不高，现有的葛根素的提取方法能够得到的葛根素的提取率都不高，将葛根先进行有效成分的提取再将有效成分合并到药物中的做法浪费了葛根中大部分的有效成分，使其不能得到充分的利用；因此为了提高葛根素能够得到充分利用的同时增加其在药物中的溶出，将葛根制备成纳米分散液，使葛根中的葛根素得到充分的利用。
在一种优选的实施方式中，所述葛根纳米粒子的粒径为250-350nm；
本发明发现葛根纳米粒子的平均粒径为在200nm以下时稳定性较差，容易发生聚集，平均粒径为在400nm以上时药物粒子中的有效成分溶出效果下降。
在一种具体的实施方式中，先将葛根粉碎成100目并过筛，60-70℃真空干燥60min；取干燥的葛根细粉，用湿法球磨加工18-20h。
(4)称取配伍量的白芍，白芍加水煎煮两次，第一次2小时，第二次1小时，滤液浓缩、醇沉，回收乙醇，浓缩后成为在50℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；将清膏采用动态超高压微射流均质机进行均质处理，得到白芍纳米分散液；
(5)称取配伍量的川芎、延胡索，将川芎、延胡索用乙醇回流提取，弃去残渣，提取液回收乙醇，浓缩成50℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；将清膏采用动态超高压微射流均质机进行均质处理，得到川芎、延胡索纳米分散液；
(6)取稳定剂溶于水中，将上述三七纳米粉末，羌活、威灵仙纳米分散液，葛根纳米分散液、白芍纳米分散液和川芎、延胡索纳米分散液按一定比例混合，加入稳定剂的水溶液中，搅拌均匀，即得治疗颈椎病的纳米中药制剂；
所述稳定剂选自十二烷基磺酸钠、泊洛沙姆188、卵磷脂和PVP-K-30中的一种或多种；
所述稳定剂的用量为中药原料质量的2％-4％。
在一种具体的实施方式中，所述稳定剂为泊洛沙姆188和卵磷脂的混合物；
优选的，泊洛沙姆188和卵磷脂的质量比为1:2-3；
进一步优选的，泊洛沙姆188和卵磷脂的质量比为1:2；
中药在治疗疾病中的活性作用不仅取决于其化学成分，如皂苷、黄酮和生物碱等有效成分，与药物的物理状态也有密切的联系，比如中药药材的粒度和表面积，尤其是当中药的粒度达到一定范围时甚至会出现质的改变。采用动态超高压微射流均质方法得到的纳米级中药颗粒由于体积小，表面能较大，因此其纳米制剂不稳定，容易重新聚集成较大的颗粒从而影响纳米制剂的药效。加入稳定剂可以解决纳米制剂不稳定的问题，本发明针对三七、川芎、延胡索、白芍、威灵仙、葛根和羌活的中药组分对稳定剂进行了筛选。本发明发现，稳定剂中十二烷基磺酸钠、泊洛沙姆188、卵磷脂和PVP-K-30对本发明的组方的纳米制剂稳定效果较好，但是同时还需要考虑稳定剂对药物中有效成分的溶出速率以及对溶解度和生物利用度的影响，发现泊洛沙姆188和卵磷脂的组合制备的三七、川芎、延胡索、白芍、威灵仙、葛根和羌活纳米制剂稳定性好的同时溶出速率高，生物利用度好。
在一种具体的实施方式中，所述采用动态超高压微射流均质机进行均质处理的参数设置为：先采用500-1000bar的均质压力进行预均质，然后采用1500-2000bar的均质压力均质15-20次。
本发明的一种实施方式中，提供上述治疗颈椎病的纳米中药制剂在治疗颈椎病中的应用。
实施例1
一种治疗颈椎病的纳米中药制剂，包括：三七2.3份，川芎7.6份，延胡索5.4份，白芍7.6份，威灵仙10.5份，葛根7.6份，羌活10.5份，泊洛沙姆188 1份，卵磷脂0.5份；
所述治疗颈椎病的纳米中药制剂的制备方法为：
(1)称取配伍量的三七，将三七粉碎成100目并过筛，60-70℃真空干燥60min；取干燥的三七细粉，用湿法球磨加工15-20h，得三七纳米分散液；
(2)称取配伍量的羌活和威灵仙，通过超声波辅助法提取并收集挥发油，超声功率为800W，超声温度为60℃，超声时间为15min，料液比为1:12(g/ml)；提取液浓缩成清膏，将挥发油与清膏混合，采用动态超高压微射流均质机进行均质处理，得到羌活、威灵仙纳米分散液；
(3)称取配伍量的葛根，先将葛根粉碎成100目并过筛，60-70℃真空干燥60min；取干燥的葛根细粉，用湿法球磨加工18-20h，得葛根纳米分散液；
(4)称取配伍量的白芍，白芍加水煎煮两次，第一次2小时，第二次1小时，滤液浓缩、醇沉，回收乙醇，浓缩后成为在50℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；将清膏采用动态超高压微射流均质机进行均质处理，得到白芍纳米分散液；
(5)称取配伍量的川芎、延胡索，将川芎、延胡索用乙醇回流提取，弃去残渣，提取液回收乙醇，浓缩成50℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；将清膏采用动态超高压微射流均质机进行均质处理，得到川芎、延胡索纳米分散液；
(6)取泊洛沙姆188和卵磷脂溶于水中，将上述三七纳米粉末，羌活、威灵仙纳米分散液，葛根纳米分散液、白芍纳米分散液和川芎、延胡索纳米分散液混合，加入稳定剂的水溶液中，搅拌均匀，即得治疗颈椎病的纳米中药制剂；
实施例2
一种治疗颈椎病的纳米中药制剂，包括：三七2.3份，川芎7.6份，延胡索5.4份，白芍7.6份，威灵仙10.5份，葛根7.6份，羌活10.5份，泊洛沙姆188 1.5份；
所述治疗颈椎病的纳米中药制剂的制备方法为：
(1)称取配伍量的三七，将三七粉碎成100目并过筛，60-70℃真空干燥60min；取干燥的三七细粉，用湿法球磨加工15-20h，得三七纳米分散液；
(2)称取配伍量的羌活和威灵仙，通过超声波辅助法提取并收集挥发油，超声功率为800W，超声温度为60℃，超声时间为15min，料液比为1:12(g/ml)；提取液浓缩成清膏，将挥发油与清膏混合，采用动态超高压微射流均质机进行均质处理，得到羌活、威灵仙纳米分散液；
(3)称取配伍量的葛根，先将葛根粉碎成100目并过筛，60-70℃真空干燥60min；取干燥的葛根细粉，用湿法球磨加工18-20h，得葛根纳米分散液；
(4)称取配伍量的白芍，白芍加水煎煮两次，第一次2小时，第二次1小时，滤液浓缩、醇沉，回收乙醇，浓缩后成为在50℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；将清膏采用动态超高压微射流均质机进行均质处理，得到白芍纳米分散液；
(5)称取配伍量的川芎、延胡索，将川芎、延胡索用乙醇回流提取，弃去残渣，提取液回收乙醇，浓缩成50℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；将清膏采用动态超高压微射流均质机进行均质处理，得到川芎、延胡索纳米分散液；
(6)取泊洛沙姆188溶于水中，将上述三七纳米粉末，羌活、威灵仙纳米分散液，葛根纳米分散液、白芍纳米分散液和川芎、延胡索纳米分散液混合，加入稳定剂的水溶液中，搅拌均匀，即得治疗颈椎病的纳米中药制剂；
实施例3
一种治疗颈椎病的纳米中药制剂，包括：三七2.3份，川芎7.6份，延胡索5.4份，白芍7.6份，威灵仙10.5份，葛根7.6份，羌活10.5份，十二烷基磺酸钠1.5份；
所述治疗颈椎病的纳米中药制剂的制备方法为：
(1)称取配伍量的三七，将三七粉碎成100目并过筛，60-70℃真空干燥60min；取干燥的三七细粉，用湿法球磨加工15-20h，得三七纳米分散液；
(2)称取配伍量的羌活和威灵仙，通过超声波辅助法提取并收集挥发油，超声功率为800W，超声温度为60℃，超声时间为15min，料液比为1:12(g/ml)；提取液浓缩成清膏，将挥发油与清膏混合，采用动态超高压微射流均质机进行均质处理，得到羌活、威灵仙纳米分散液；
(3)称取配伍量的葛根，先将葛根粉碎成100目并过筛，60-70℃真空干燥60min；取干燥的葛根细粉，用湿法球磨加工18-20h，得葛根纳米分散液；
(4)称取配伍量的白芍，白芍加水煎煮两次，第一次2小时，第二次1小时，滤液浓缩、醇沉，回收乙醇，浓缩后成为在50℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；将清膏采用动态超高压微射流均质机进行均质处理，得到白芍纳米分散液；
(5)称取配伍量的川芎、延胡索，将川芎、延胡索用乙醇回流提取，弃去残渣，提取液回收乙醇，浓缩成50℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；将清膏采用动态超高压微射流均质机进行均质处理，得到川芎、延胡索纳米分散液；
(6)取十二烷基磺酸钠溶于水中，将上述三七纳米粉末，羌活、威灵仙纳米分散液，葛根纳米分散液、白芍纳米分散液和川芎、延胡索纳米分散液混合，加入稳定剂的水溶液中，搅拌均匀，即得治疗颈椎病的纳米中药制剂；
实施例4
一种治疗颈椎病的纳米中药制剂，包括：三七2.3份，川芎7.6份，延胡索5.4份，白芍7.6份，威灵仙10.5份，葛根7.6份，羌活10.5份，PVP-K-30 1.5份；
所述治疗颈椎病的纳米中药制剂的制备方法为：
(1)称取配伍量的三七，将三七粉碎成100目并过筛，60-70℃真空干燥60min；取干燥的三七细粉，用湿法球磨加工15-20h，得三七纳米分散液；
(2)称取配伍量的羌活和威灵仙，通过超声波辅助法提取并收集挥发油，超声功率为800W，超声温度为60℃，超声时间为15min，料液比为1:12(g/ml)；提取液浓缩成清膏，将挥发油与清膏混合，采用动态超高压微射流均质机进行均质处理，得到羌活、威灵仙纳米分散液；
(3)称取配伍量的葛根，先将葛根粉碎成100目并过筛，60-70℃真空干燥60min；取干燥的葛根细粉，用湿法球磨加工18-20h，得葛根纳米分散液；
(4)称取配伍量的白芍，白芍加水煎煮两次，第一次2小时，第二次1小时，滤液浓缩、醇沉，回收乙醇，浓缩后成为在50℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；将清膏采用动态超高压微射流均质机进行均质处理，得到白芍纳米分散液；
(5)称取配伍量的川芎、延胡索，将川芎、延胡索用乙醇回流提取，弃去残渣，提取液回收乙醇，浓缩成50℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；将清膏采用动态超高压微射流均质机进行均质处理，得到川芎、延胡索纳米分散液；
(6)取PVP-K-30溶于水中，将上述三七纳米粉末，羌活、威灵仙纳米分散液，葛根纳米分散液、白芍纳米分散液和川芎、延胡索纳米分散液混合，加入稳定剂的水溶液中，搅拌均匀，即得治疗颈椎病的纳米中药制剂；
对比例1
一种用于治疗颈椎病药剂，组成为：三七2.3份，川芎7.6份，延胡索5.4份，白芍7.6份，威灵仙10.5份，葛根7.6份，羌活10.5份；
制备方法为：
(1)先将三七粉碎成100-120目细粉；
(2)将羌活、威灵仙提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣加水煎煮1小时，滤液备用；
(3)葛根、白芍加水煎煮两次，第一次2小时，第二次1小时，滤液与上述两水溶液合并、浓缩、醇沉，回收乙醇，浓缩后成为在50℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；
(4)川芎、延胡索用乙醇回流提取，弃去残渣，提取液回收乙醇，浓缩成50℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；
(5)将上述两清膏合并，加入三七粉，混合均匀，并干燥，再粉碎成细粉，加入适量胡精，混合均匀，喷入上述提取的羌活、威灵仙挥发油，即得。
对比例2
一种治疗颈椎病的纳米中药制剂，包括：三七2.3份，川芎7.6份，延胡索5.4份，白芍7.6份，威灵仙10.5份，葛根7.6份，羌活10.5份；
所述治疗颈椎病的纳米中药制剂的制备方法为：
(1)称取配伍量的三七，将三七粉碎成100目并过筛，60-70℃真空干燥60min；取干燥的三七细粉，用湿法球磨加工15-20h，得三七纳米分散液；
(2)称取配伍量的羌活和威灵仙，通过超声波辅助法提取并收集挥发油，超声功率为800W，超声温度为60℃，超声时间为15min，料液比为1:12(g/ml)；提取液浓缩成清膏，将挥发油与清膏混合，采用动态超高压微射流均质机进行均质处理，得到羌活、威灵仙纳米分散液；
(3)称取配伍量的葛根，先将葛根粉碎成100目并过筛，60-70℃真空干燥60min；取干燥的葛根细粉，用湿法球磨加工18-20h，得葛根纳米分散液；
(4)称取配伍量的白芍，白芍加水煎煮两次，第一次2小时，第二次1小时，滤液浓缩、醇沉，回收乙醇，浓缩后成为在50℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；将清膏采用动态超高压微射流均质机进行均质处理，得到白芍纳米分散液；
(5)称取配伍量的川芎、延胡索，将川芎、延胡索用乙醇回流提取，弃去残渣，提取液回收乙醇，浓缩成50℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；将清膏采用动态超高压微射流均质机进行均质处理，得到川芎、延胡索纳米分散液；
(6)将上述三七纳米粉末，羌活、威灵仙纳米分散液，葛根纳米分散液、白芍纳米分散液和川芎、延胡索纳米分散液混合，即得治疗颈椎病的纳米中药制剂。
效果验证
1、将实施例1-4和对比例2得到的纳米中药制剂静置观察，分别于12h、24h、4天、8天、16天、24天、30天记录纳米中药制剂的团聚情况；记录结果为：24h内实施例1-4均不发生团聚，其中实施例1的纳米中药制剂稳定时间最长，30天内未发生团聚现象；实施例2-4分别在24天开始出现较小的颗粒团聚现象；对比例2得到的纳米中药制剂静置后12h即发生团聚，制剂中出现较大粒径的团聚颗粒；对比例1得到的为固体制剂，不存在团聚的问题。
2、治疗颈椎病的纳米中药制剂的生物利用度研究
以本发明中标志性成分人参皂苷Rg1进行生物利用度考察
取小鼠150只，随机分为2组，实施例1组(用药量10mg/kg)、对比例1(用药量10mg/kg)，对比例2(用药量10mg/kg)，各组通过灌胃的方式给药，给药前取空白血，并分别于给药1h、4h、8h抽取小鼠的静脉血，通过高效液相色谱法检测小鼠血清中的人参皂苷Rg1成分，比较实施例1和对比例1、对比例2组小鼠血液中这三种成分的含量。
HPLC测定条件：色谱柱：C18柱；流动相：乙腈一醋酸水溶液；流速：1ml/min柱温：200℃，检测波长：320nm；进样量为40微升，室温25℃。
表1：小鼠体内人参皂苷Rg1浓度测定结果
Figure BDA0002619385420000101
从表1可以看出，实施例1组的小鼠在灌胃1h后血液中人参皂苷Rg1含量较高，4h达到最高，8h后含量开始下降；对比例1组的小鼠在灌胃1h后血液中人参皂苷Rg1含量不高，4h稍有提高，8h后含量降至很低；对比例2组小鼠在灌胃1h后血液中人参皂苷Rg1含量比对比例组的含量高，但是比实施例1组低，4h和8h的含量变化依然为4h时有所提高，8h开始下降，但是其各个时间点的人参皂苷Rg1含量均低于实施例1，但高于对比例1。
从以标志性成分人参皂苷Rg1在小鼠血清中的含量结果可以看出，本发明通过改变制备方法，将治疗颈椎病的方剂制备成稳定的纳米中药制剂，大大提高了组方有效药物成分的吸收和生物体内的利用度，进而能够取得更好的治疗颈椎病的效果；并且通过稳定剂的筛选，得到稳定的治疗颈椎病的纳米中药制剂。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种治疗颈椎病的纳米中药制剂，其特征在于，包括：三七1-15份，川芎3-20份，延胡索2-15份，白芍3-20份，威灵仙4-25份，葛根3-20份，羌活4-25份和一种或多种药学上可接受的辅料；
所述治疗颈椎病的纳米中药制剂的制备方法为：
(1)称取配伍量的三七，初步粉碎后将三七细粉通过湿法球磨将三七制备成纳米散液，所述三七纳米粒子的粒径为200-400nm；
(2)称取配伍量的羌活和威灵仙，将羌活和威灵仙通过超声波辅助法提取并收集挥发油，提取液浓缩成清膏，将挥发油与清膏混合，采用动态超高压微射流均质机进行均质处理，得到羌活、威灵仙纳米分散液；
(3)称取配伍量的葛根，初步粉碎后将葛根细粉通过湿法球磨将葛根制备成纳米散液，所述葛根纳米粒子的粒径为200-400nm；
(4)称取配伍量的白芍，白芍加水煎煮两次，第一次2小时，第二次1小时，滤液浓缩、醇沉，回收乙醇，浓缩后成为在50℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；将清膏采用动态超高压微射流均质机进行均质处理，得到白芍纳米分散液；
(5)称取配伍量的川芎、延胡索，将川芎、延胡索用乙醇回流提取，弃去残渣，提取液回收乙醇，浓缩成50℃下相对密度为1.25-1.30的清膏；将清膏采用动态超高压微射流均质机进行均质处理，得到川芎、延胡索纳米分散液；
(6)取辅料溶于水中，将上述三七纳米粉末，羌活、威灵仙纳米分散液，葛根纳米分散液、白芍纳米分散液和川芎、延胡索纳米分散液按一定比例混合，加入稳定剂的水溶液中，搅拌均匀，即得治疗颈椎病的纳米中药制剂。
2.如权利要求1所述的治疗颈椎病的纳米中药制剂，其特征在于，步骤(1)中，先将三七粉碎成100目并过筛，60-70℃真空干燥60min；取干燥的三七细粉，用湿法球磨加工15-20h；
优选的，所述葛根纳米粒子的粒径为250-350nm。
3.如权利要求1所述的治疗颈椎病的纳米中药制剂，其特征在于，
步骤(2)中，所述超声波辅助法提取挥发油的工艺条件为：超声功率700-900W，优选为800W；超声温度为55-65℃，优选为60℃；超声时间为10-20min，优选为15min；料液比为1:12-15(g/ml)，优选为1:12(g/ml)。
4.如权利要求1所述的治疗颈椎病的纳米中药制剂，其特征在于，步骤(3)中，先将葛根粉碎成100目并过筛，60-70℃真空干燥60min；取干燥的葛根细粉，用湿法球磨加工18-20h；
优选的，所述葛根纳米粒子的粒径为250-350nm。
5.如权利要求1所述的治疗颈椎病的纳米中药制剂，其特征在于，所述稳定剂选自十二烷基磺酸钠、泊洛沙姆188、卵磷脂和PVP-K-30中的一种或多种。
6.如权利要求1所述的治疗颈椎病的纳米中药制剂，其特征在于，所述稳定剂的用量为中药原料质量的2％-4％。
7.如权利要求5所述的治疗颈椎病的纳米中药制剂，其特征在于，所述稳定剂为泊洛沙姆188和卵磷脂的混合物。
8.如权利要求7所述的治疗颈椎病的纳米中药制剂，其特征在于，泊洛沙姆188和卵磷脂的质量比为1:2-3；
优选的，泊洛沙姆188和卵磷脂的质量比为1:2。
9.如权利要求1所述的治疗颈椎病的纳米中药制剂，其特征在于，所述采用动态超高压微射流均质机进行均质处理的参数设置为：先采用500-1000bar的均质压力进行预均质，然后采用1500-2000bar的均质压力均质15-20次。
10.权利要求1-9任一权利要求所述的纳米中药制剂在治疗颈椎病中的应用。
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