CN100427096C - 一种红景天苷纳米脂质体悬浮液的制备方法 - Google Patents
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Abstract
一种红景天苷纳米脂质体悬浮液的制备方法,属于功能性保健食品技术领域。本发明悬浮液中包含红景天有效成分提取物红景天苷及包封红景天苷的纳米脂质体。本发明方法是将卵磷脂、胆固醇按适当比例溶于少量无水乙醚,减压蒸发有机溶剂,再加入含一定浓度表面活性剂的红景天苷磷酸盐缓冲液,经水合溶胀(自组装),超声分散等步骤得到红景天苷纳米脂质体的悬浮液。本发明制得的红景天苷纳米脂质体的平均粒径小于100nm,红景天苷的包封率可达25%-35%,可克服市售红景天苷保健品在体内浓度忽高忽低、没有缓释功效、服用次数频繁、生物利用度低等等问题。
Description
技术领域
一种红景天苷纳米脂质体悬浮液的制备方法,属功能性保健食品技术领域。
背景技术
红景天(Rhodiola sachalinensis A.Bor.)是最近几十年才被重视的东方民间草药,它是继人参、刺五加之后所发展的又一种重要保健药源植物。主要有效成分是红景天苷(Salidroside)及其苷元,即对酪醇(ρ-Tyrosol),对人体具有双向调节作用,且无任何毒副作用或成习瘾性,具有促进机体能量代谢,刺激神经兴奋,调节内分泌功能及抗毒解毒等生物效应。近年来已有不少研究报道证明红景天苷具有抗疲劳作用、抗缺氧、抗微波辐射作用、抑制血糖升高、抗过氧化作用等保健功效。红景天类的保健品已广泛被宇航员、登山运动员、司机等特殊行业的从业人员服用。2002年卫生部确定的三类物品名单中,红景天被列为可用作保健食品的物品名单之一。可见,红景天作为中药保健食品的研究是极具开发潜能的。但市售的红景天苷保健品存在许多问题,诸如在体内浓度忽高忽低、没有缓释功效、服用次数频繁、生物利用度低等等。
迄今为止,国内外未见有关于红景天苷纳米脂质体制备的报道。虽然不少的科研工作者已开始尝试将红景天苷进行海藻酸钠-壳聚糖微胶囊化包埋和制备药用注射的磷脂复合物。国内学者赵武奇采用无毒、生物相容性好、可生物降解的天然高分子材料海藻酸钠和壳聚糖为膜材,制备了红景天苷的缓释胶囊。但此种方法一方面所用红景天苷的纯度低,仅将红景天苷的粗提液进行包埋,粗提液中含有大量的淀粉、蛋白、鞣质、树胶、极性色素等等杂质,另一方面,所制备的微胶囊粒径很大,缓释功能仍不明显。作为新型药物制剂的开发,顾艳丽等人尝试将经过纯化的红景天苷制备红景天苷的磷脂复合物,药物动力学的研究结果表明,红景天磷脂复合物的分布特征与红景天提取物相比发生了较大的变化,其血浆药物初始浓度明显降低。进一步做小鼠体内分布也证明,注射同等剂量的红景天苷,二者在小鼠脏器中红景天苷浓度却不同,尤其在小鼠的心脏、脑中分布的红景天苷浓度,注射红景天提取物磷脂复合物乳剂组明显比注射红景天提取物组分布浓度高。但此磷脂复合物仅作为药物注射用,且制备中使用了大量的泊洛沙姆和注射用油等医用乳化剂,安全性隐患较大,不适合于食品工业中。
发明内容
本发明的目的是提供一种红景天苷纳米脂质体的制备方法,为了增强红景天的主要成分-红景天苷作为保健因子的生物利用率,达到缓释或控释效果,增强在体内的靶向性以提高其抗疲劳、抗辐射等保健功效。
本发明的技术方案:红景天苷纳米脂质体悬浮液的制备方法为该悬浮液中包含红景天有效成分提取物红景天苷及包封红景天苷的纳米脂质体。以经过大孔吸附树脂、超滤处理的红景天苷提取液为芯材,卵磷脂、胆固醇为膜材,辅以吐温80,采用超声法制备红景天苷纳米脂质体。
(1)配制红景天苷磷酸盐缓冲液:以过60目筛的红景天粉为原料,用20%(v/v)乙醇作提取溶剂,固液比以g/mL计为1∶25~30,预浸60分钟,采用微波辅助提取技术,微波功率为130W,微波辐照时间1分钟,重复操作提取一次,合并二次的粗提液,所得红景天苷的粗提液再经DA201-C大孔吸附树脂吸附,用4倍柱体积的50%(v/v)乙醇洗脱,收集到的洗脱液浓缩回收乙醇后加水稀释,控制红景天苷浓度为1mg/mL,经截留分子量3000Da的超滤膜超滤,将收集的滤过液浓缩至干,用pH 7.0、0.05mol/L磷酸盐缓冲液配制红景天苷溶液,控制红景天苷溶液的浓度为0.5mg/mL。
(2)脂质成膜:将卵磷脂、胆固醇按质量比5∶1溶于少量无水乙醚,转移至旋转蒸发瓶中,40℃旋转蒸发有机溶剂,在瓶壁上形成均匀的一层脂质薄膜,并保持减压30分钟,以除去残余乙醚;
(3)水合溶胀:将吐温80添加入配制的红景天苷磷酸盐缓冲液中,使缓冲液中吐温80的浓度为1%(w/w),卵磷脂质量比缓冲液体积以g/mL计为1∶100,取该溶液在40℃下旋转水合30分钟;
(4)超声分散:水合后的悬浮液再经过探头式超声处理,超声强度50%~70%,1秒开,1秒停,处理5~7分钟,即得红景天苷纳米脂质体的悬浮液。
粒径的测定:采用动态光散射粒度仪进行测定,测定温度25℃,样品稀释至磷脂浓度0.025%。红景天苷包封率采用透析法测定。
制得的红景天苷纳米脂质体的平均粒径小于100nm,红景天苷的包封率可达25%~35%。
本发明的有益效果:以经过大孔吸附树脂、超滤处理的红景天苷提取液为芯材,卵磷脂、胆固醇为膜材,辅以吐温80,采用超声法制备红景天苷纳米脂质体。可增强红景天的主要成分-红景天苷作为保健因子的生物利用率,达到缓释或控释效果,增强在体内的靶向性以提高其抗疲劳、抗辐射等保健功效。
附图说明
图1红景天苷纳米脂质体的粒径分布图
具体实施方式
实施例1
准确称取60目红景天粉末50g,以1450mL20%(v/v)乙醇预浸60min,在微波功率130W、微波辐照时间60s下提取1min,过滤得粗提液。滤渣仍按以上操作提取一次,合并二次的粗提液,浓缩回收乙醇。所得红景天苷的粗提液再经DA201-C大孔吸附树脂吸附,4倍柱体积的50%(v/v)乙醇洗脱,收集到的洗脱液浓缩回收乙醇后加水稀释至红景天苷浓度为1mg/mL,再用截留分子量3000Da的超滤膜处理,将收集的滤过液浓缩至干,配成磷酸盐缓冲液(pH7.0)。准确称取卵磷脂200mg、胆固醇40mg,溶于5mL无水乙醚,转移至250mL旋转蒸发瓶中,40℃旋转蒸发去除乙醚,在瓶壁上形成均匀的一层脂质薄膜,并保持减压30min,以除去残余乙醚。往蒸发瓶中加入含有1%(w/w)吐温80的红景天苷磷酸盐缓冲液(pH7.0)20mL,40℃下旋转水合30min。水合体积为卵磷脂质量的100倍,红景天苷浓度为0.5mg/mL。水合后的悬浮液再经过5min的探头式超声处理(强度70%,1s开,1s停),即得红景天苷纳米脂质体的悬浮液。
实施例2
准确称取60目红景天粉末50g,以1250mL20%(v/v)乙醇预浸60min,在微波功率130W、微波辐照时间60s下提取1min,过滤得粗提液。滤渣仍按以上操作提取一次,合并二次的粗提液,浓缩回收乙醇。所得红景天苷的粗提液再经DA201-C大孔吸附树脂吸附,4倍柱体积的50%(v/v)乙醇洗脱,收集到的洗脱液浓缩回收乙醇后加水稀释至红景天苷浓度为1mg/mL,再用截留分子量3000Da的超滤膜处理,将收集的滤过液浓缩至干,配成磷酸盐缓冲液(pH7.0)。准确称取卵磷脂100mg、胆固醇20mg,溶于5mL无水乙醚,转移至250mL旋转蒸发瓶中,40℃旋转蒸发去除乙醚,在瓶壁上形成均匀的一层脂质薄膜,并保持减压30min,以除去残余乙醚。往蒸发瓶中加入含有1%(w/w)吐温80的红景天苷磷酸盐缓冲液(pH7.0)10mL,40℃下旋转水合30min。水合体积为卵磷脂质量的100倍,红景天苷浓度为0.5mg/mL。水合后的悬浮液再经过5min的探头式超声处理(强度70%,1s开,1s停),即得红景天苷纳米脂质体的悬浮液。
实施例3
准确称取60目红景天粉末50g,以1500mL20%(v/v)乙醇预浸60min,在微波功率130W、微波辐照时间60s下提取1min,过滤得粗提液。滤渣仍按以上操作提取一次,合并二次的粗提液,浓缩回收乙醇。所得红景天苷的粗提液再经DA201-C大孔吸附树脂吸附,4倍柱体积的50%(v/v)乙醇洗脱,收集到的洗脱液浓缩回收乙醇后加水稀释至红景天苷浓度为1mg/mL,再用截留分子量3000Da的超滤膜处理,将收集的滤过液浓缩至干,配成磷酸盐缓冲液(pH7.0)。准确称取卵磷脂200mg、胆固醇40mg,溶于5mL无水乙醚,转移至250mL旋转蒸发瓶中,40℃旋转蒸发去除乙醚,在瓶壁上形成均匀的一层脂质薄膜,并保持减压30min,以除去残余乙醚。往蒸发瓶中加入含有1%(w/w)吐温80的红景天苷磷酸盐缓冲液(pH7.0)20mL,40℃下旋转水合30min。水合体积为卵磷脂质量的100倍,红景天苷浓度为0.5mg/mL。水合后的悬浮液再经过7min的探头式超声处理(强度50%,1s开,1s停),即得红景天苷纳米脂质体的悬浮液。
Claims (1)
1、一种红景天苷纳米脂质体悬浮液的制备方法,其特征在于该悬浮液中包含红景天有效成分提取物红景天苷及包封红景天苷的纳米脂质体,制备工艺为:
(1)配制红景天苷磷酸盐缓冲液:以过60目筛的红景天粉为原料,用20%(v/v)乙醇作提取溶剂,固液比以g/mL计为1∶25~30,预浸60分钟,采用微波辅助提取技术,微波功率为130W,微波辐照时间1分钟,重复操作提取一次,合并二次的粗提液,所得红景天苷的粗提液再经DA201-C大孔吸附树脂吸附,用4倍柱体积的50%(v/v)乙醇洗脱,收集到的洗脱液浓缩回收乙醇后加水稀释,控制红景天苷浓度为1mg/mL,经截留分子量3000Da的超滤膜超滤,将收集的滤过液浓缩至干,用pH7.0、0.05mol/L磷酸盐缓冲液配制红景天苷溶液,控制红景天苷溶液的浓度为0.5mg/mL;
(2)脂质成膜:将卵磷脂、胆固醇按质量比5∶1溶于少量无水乙醚,转移至旋转蒸发瓶中,40℃旋转蒸发无水乙醚,在瓶壁上形成均匀的一层脂质薄膜,并保持减压30分钟,以除去残余乙醚;
(3)水合溶胀:将吐温80添加入配制的红景天苷磷酸盐缓冲液中,使缓冲液中吐温80的浓度为1%(w/w),加入到蒸发瓶中,卵磷脂质量比缓冲液体积以g/mL计为1∶100,将该溶液在40℃下旋转水合30分钟;
(4)超声分散:水合后的悬浮液再经过探头式超声处理,超声强度50%~70%,1秒开,1秒停,处理5~7分钟,即得红景天苷纳米脂质体的悬浮液。
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微波辅助提取红景天苷. 赵武奇等.食品与发酵工业,第30卷第2期. 2004 |
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