CN111733204A - 微生物快速检测膜及其制备方法和使用方法 - Google Patents

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    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/04Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor

Abstract

本发明涉及的微生物快速检测膜的制备方法如下:S1、将营养肉汤、蛋白胨、氯化钠、琼脂加入到无菌去离子水中,加热直至溶解得到溶液,调节溶液PH值,得到脂质体;S2、提供模具,将脂质体注入模具中,自然冷却得到微生物快速检测膜,该制备方法简单,材料易得,得到的微生物快速检测膜能够快速准确地检测到出多种常见的真菌和细菌,且操作简单、使用方便、环保、成本低,同时,能够快速检测抗菌剂的产品性能,可操作性强。

Description

微生物快速检测膜及其制备方法和使用方法
技术领域
本发明涉及一种微生物快速检测膜及其制备方法和使用方法。
背景技术
随着人们的生活越来越好,人们越发注重生活品质,无论是对感染性疾病的控制和治疗,还是食品安全的监测和管理,都需要减少接触对人体有害的微生物。目前,为了减小微生物的量,常常使用杀菌剂或者抗菌剂来进行杀菌,但是,在实际生活中,为了确定杀菌剂或者抗菌剂的效果,或者确定某个地方是否滋生细菌或者真菌,无法肉眼观察到微生物是否存在或者微生物的量是否超标,现有的检测方法是将待检测物送至实验室检测,但是该方法麻烦、费时、并且需要依赖精密仪器和专业人员,大幅度提高了检测成本。
发明内容
本发明的目的在于提供一种微生物快速检测膜的制备方法,该制备方法简单,材料易得,得到的微生物快速检测膜能够快速检测多种常见的真菌和细菌,且操作简单、使用方便、成本低、环保。
为达到上述目的,本发明提供如下技术方案:一种微生物快速检测膜的制备方法,所述制备方法如下:
S1、将营养肉汤、蛋白胨、氯化钠、琼脂加入到无菌去离子水中,加热直至溶解得到溶液,调节所述溶液PH值,得到脂质体;
S2、提供模具,将所述脂质体注入所述模具中,自然冷却得到微生物快速检测膜。
进一步地,所述营养肉汤的量为3-5g,所述蛋白胨的量为10-15g、所述氯化钠的量为5-8.5g,所述琼脂的量为15-20g,所述无菌去离子水的量为1000-1200mL。
进一步地,在步骤S1中,所述加热温度为90-100℃。
进一步地,调节所述溶液PH值的方法为:向所述溶液中加入氢氧化钠,直至所述溶液的PH值为7.2±0.2。
进一步地,所述微生物快速检测膜为长方形、正方形、圆形中的任一个。
进一步地,所述微生物快速检测膜的厚度范围为2-8mm。
本发明还提供一种微生物快速检测膜的使用方法,所述使用方法如下:
S1、将所述微生物快速检测膜与待测样品接触,并将部分所述待测样品附在所述微生物快速检测膜上;
S2、将附有所述待测样品的所述微生物快速检测膜培养,观察所述微生物快速检测膜表面的微生物生长状况。
进一步地,所述微生物快速检测膜与待测样品接触时长为5-10s。
进一步地,附有所述待测样品的所述微生物快速检测膜培养条件为:35℃培养24-72h,或者室温下培养28-72h。
本发明还提供一种微生物快速检测膜,用以检测细菌和/或真菌,所述微生物快速检测膜由所述的微生物快速检测膜的制备方法得到。
本发明的有益效果在于:本发明所提供的微生物快速检测膜的制备方法,将营养肉汤、蛋白胨、氯化钠、琼脂和无菌去离子水混合溶解得到脂质体,而后在模具中形成膜,该制备方法简单,材料易得,得到的微生物快速检测膜能够快速准确地检测到出多种常见的真菌和细菌,且操作简单、使用方便、环保、成本低,同时,能够快速检测抗菌剂的产品性能,可操作性强。
上述说明仅是本发明技术方案的概述,为了能够更清楚了解本发明的技术手段,并可依照说明书的内容予以实施,以下以本发明的较佳实施例并配合附图详细说明如后。
附图说明
图1为本发明一实施例制备微生物快速检测膜的流程图。
具体实施方式
下面将结合附图对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
此外,下面所描述的本发明不同实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互结合。
本发明所示的微生物快速检测膜,用以检测生活中常见的细菌和/或真菌,例如:大肠杆菌、金色葡萄球菌、链球菌、毛霉菌、青霉菌、曲霉菌等等,但不仅限于此,在此不一一列举。微生物快速检测膜可以为长方形、正方形、圆形中的任一个,但不仅限于此,微生物快速检测膜可以制备成任何所需要的形状,在此不做具体限定。微生物快速检测膜的厚度范围为2-8mm,尺寸范围为1-5cm,但不仅限于此,具体的尺寸可根据实际需要进行制备。
请参见图1,本发明还提供一种用以制备上述所示的微生物快速检测膜的方法,具体制备方法如下:
S1、将营养肉汤、蛋白胨、氯化钠、琼脂加入到无菌去离子水中,加热直至溶解得到溶液,调节溶液PH值,得到脂质体;
S2、提供模具,将脂质体注入模具中,自然冷却得到微生物快速检测膜。
其中,营养肉汤的量为3-5g,蛋白胨的量为10-15g、氯化钠的量为5-8.5g,琼脂的量为15-20g,无菌去离子水的量为1000-1200mL,营养肉汤、蛋白胨、氯化钠、琼脂以及无菌去离子水具体的使用量可根据实际需要进行选择,在此不做具体限定。
为了加快营养肉汤、蛋白胨、氯化钠、琼脂在无菌去离子水中的溶解速度将其得到的混合物加热,且加热温度为90-100℃,可以使用加热套等加热装置加热。
调节溶液PH值的方法为:向加热得到的溶液中加入氢氧化钠,直至溶液的PH值为7.2±0.2。诚然,在其他实施例中,可以使用其他碱性物质进行调节PH值,在此不做具体限定。
一个模具上可设置若干凹槽,凹槽可根据实际需要的微生物快速检测膜的结构和尺寸进行设置,以此可批量生产出微生物快速检测膜。
需要说明的是,在制备微生物快速检测膜时,整个过程是要在无菌环境进行,并且所有使用的用具,比如模具等,都应经过消毒灭菌处理。
无菌去离子水的处理方法为:将纯净的水经过高分子渗透膜,进行反向渗透,除去水中所含有的离子,得到去离子水,然后再用高压灭菌锅灭菌,得到无菌去离子水,其中,温度为121℃,压强为0.15Mpa,灭菌处理时长为20-25min。对去离子水的灭菌方式在此不做具体限定。
关于微生物快速检测膜的制备方法,下面以具体实施例进行详细说明:
实施例一
步骤一、提供烧杯、去离子水、以及具有若干凹槽的模具,并使用高压灭菌锅对其灭菌,灭菌条件为:温度为121℃,压强为0.15Mpa,处理时长为20-25min,得到灭菌后的烧杯、模具和无菌去离子水。
步骤二、将3g营养肉汤、10g蛋白胨、5g氯化纳、15g琼脂加入到烧杯内,加入1000mL的无菌去离子水,将烧杯放置在加热套中加热,加热温度90-100℃,搅拌直至所加入的粉末完全溶解得到溶液,向溶液中加入少量氢氧化钠调节PH值,使溶液的PH值稳定在7.2±0.2,得到脂质体。
步骤三、将脂质体注入模具中的凹槽,自然冷却得到若干微生物快速检测膜,冷却时长为15~20min。
本发明还提供一种微生物快速检测膜的使用方法,使用方法如下:
S1、将微生物快速检测膜与待测样品接触,并将部分待测样品附在微生物快速检测膜上;
S2、将附有待测样品的微生物快速检测膜培养,观察微生物快速检测膜表面的微生物生长状况。
具体的,微生物快速检测膜与待测样品接触时长为5-10s。附有待测样品的微生物快速检测膜培养条件为:35℃培养24-72h,或者室温下培养28-72h,但具体的培养时长可根据温度和微生物的种类而定,比如,微生物快速检测膜在检测酵母和真菌时,需要培养72-96h,而微生物快速检测膜在检测细菌时,只需要培养24-48h。
待测样品可以是液体状或者固体状,针对液体待测样品,将微生物快速检测膜在样品中浸没5-10s后取出,滴干多余的液体即可。针对固体待测样品,比如桌子、扶手、玻璃等一系列木制品、玻璃制品、纺织品等等,将微生物快速检测膜在样品表面刮蹭,使微生物快速检测膜表面充分与样品表面接触,持续5-10s即可。
为了该微生物快速检测膜能够在生活中应用,将微生物快速检测膜放置在一个具有盖体的容器内,比如具有盖体的试管,避免了微生物快速检测膜与外界的接触,延长了微生物快速检测膜的寿命,本发明得到的微生物快速检测膜可以放置6个月的时长。为了操作方便,将微生物快速检测膜的一端固定在盖体上,另一端位于容器内,当将盖体和容器分离的同时,将微生物快速检测膜同盖体被带出,从而无需额外工具将微生物快速检测膜取出,并且,避免了工具或者操作者接触。将附有待测样品的生物快速检测膜重新放进容器中,拧紧盖体,在容器中培养即可,避免接触外界,保证了微生物快速检测膜的质量和检测微生物的准确性,操作方便。微生物快速检测膜为一次性使用产品,使用结束后可按一般废弃物处理。
需要说明的时,为了保证微生物快速检测膜的质量,具有盖体的容器在使用前要进行灭菌处理。
该微生物快速检测膜可检测家庭中常见的家具等任何可能滋生细菌或者真菌地方,在此不一一列举。此外,为了检测抗菌剂的产品的性能,可以在相同条件下选择两处位置,一处作为对照区,另一处作为测试区,作为测试区的一处喷涂需要检测的抗菌剂,作为对照区的一处不做任何处理,同时尽量保证两处的其他条件保持一致,过一段时间后(1-2h),准备两个微生物快速检测膜,分别与测试区和对照区接触并取样,而后进行培养,24-48h后,可以通过观察两个微生物快速检测膜表面微生物的生长情况来判断抗菌剂性能的好坏。
综上,本发明所提供的微生物快速检测膜的制备方法,将营养肉汤、蛋白胨、氯化钠、琼脂和无菌去离子水混合溶解得到脂质体,而后在模具中形成膜,该制备方法简单,材料易得,得到的微生物快速检测膜能够快速准确地检测到出多种常见的真菌和细菌,且操作简单、使用方便、环保、成本低,同时,能够快速检测抗菌剂的产品性能,可操作性强。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合,为使描述简洁,未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述,然而,只要这些技术特征的组合不存在矛盾,都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。因此,本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (10)

1.一种微生物快速检测膜的制备方法,其特征在于,所述制备方法如下:
S1、将营养肉汤、蛋白胨、氯化钠、琼脂加入到无菌去离子水中,加热直至溶解得到溶液,调节所述溶液PH值,得到脂质体;
S2、提供模具,将所述脂质体注入所述模具中,自然冷却得到微生物快速检测膜。
2.如权利要求1所述的微生物快速检测膜的制备方法,其特征在于,所述营养肉汤的量为3-5g,所述蛋白胨的量为10-15g、所述氯化钠的量为5-8.5g,所述琼脂的量为15-20g,所述无菌去离子水的量为1000-1200mL。
3.如权利要求1所述的微生物快速检测膜的制备方法,其特征在于,在步骤S1中,所述加热温度为90-100℃。
4.如权利要求1所述的微生物快速检测膜的制备方法,其特征在于,调节所述溶液PH值的方法为:向所述溶液中加入氢氧化钠,直至所述溶液的PH值为7.2±0.2。
5.如权利要求1所述的微生物快速检测膜的制备方法,其特征在于,所述微生物快速检测膜为长方形、正方形、圆形中的任一个。
6.如权利要求1所述的微生物快速检测膜的制备方法,其特征在于,所述微生物快速检测膜的厚度范围为2-8mm。
7.一种微生物快速检测膜的使用方法,其特征在于,所述使用方法如下:
S1、将所述微生物快速检测膜与待测样品接触,并将部分所述待测样品附在所述微生物快速检测膜上;
S2、将附有所述待测样品的所述微生物快速检测膜培养,观察所述微生物快速检测膜表面的微生物生长状况。
8.如权利要求7所述的微生物快速检测膜的使用方法,其特征在于,所述微生物快速检测膜与待测样品接触时长为5-10s。
9.如权利要求7所述的微生物快速检测膜的使用方法,其特征在于,附有所述待测样品的所述微生物快速检测膜培养条件为:35℃培养24-72h,或者室温下培养28-72h。
10.一种微生物快速检测膜,其特征在于,所述微生物快速检测膜用以检测细菌和/或真菌,所述微生物快速检测膜由如权利要求1至6项中任一项所述的微生物快速检测膜的制备方法得到。
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