CN2795214Y - 即用型细菌计数平板 - Google Patents

Abstract

本实用新型涉及一种检测食品中细菌总数的一次性平板。该平板由圆形容器、容器内底部的载体膜层以及容器上的容器盖三部分组成。载体膜层中渗有胶体溶液，该胶体溶液含有水溶性植物胶、细菌培养基和显色剂。本实用新型的产品利用人造纤维的快速渗透作用，样品中的细菌在培养基上生长均匀，重复性好；添加的菌落显色物质使所有菌落着色，易于辨认，避免了将食品残渣计入统计结果。该平板可广泛食品、饮料和饮水等方面的微生物卫生质量检测、环保微生物污染的监测。

Description

即用型细菌计数平板

技术领域

本实用新型涉及食品中细菌总数计数用的平板，尤其是一种即开即用型细菌计数平板。

背景技术

近几年来我国食品工业高速发展。在国内市场，食品品种不断增多，适合快速生活节奏的即食食品大量进入人们的生活。在进出口贸易方面，我国的食品贸易量逐年递增。随着世界各国对食品安全的重视，要求食品微生物实验室尽可能在很短的时间内提供准确可靠的检验数据。而目前传统的微生物检验需要洗刷器皿、配制培养基以及严格灭菌，前期准备工作耗时费力，越来越不能适应形势发展的要求，要解决该问题就必须应用检测快速方法或使用快速检测试剂。因此，在食品微生物检测领域中快速方法越来越受到重视。

美国FDA细菌分析手册BAM专门有一章节介绍快速方法，并在附表中分门别类列出了推荐产品。快速方法及产品有的已成为标准方法，如美国3M产品近5年中在AOAC期刊上给予了大量验证报道文章。在国外，微生物快速检验用品具有逐渐替代传统方法之势，此外，检测速度是除贸易壁垒以外影响出口的主要因素。因此，快速检测用品的使用在我国逐年递增。但用户在愿意使用国外快速检测用品的同时，也感受到了检测成本的压力。

发明内容

本实用新型的目的在于提供一种即开即用型细菌计数平板，该平板不但使用方便，免除了培养基配制的准备工作，而且成本低廉，同时在计数方面已达到或超过了传统方法和国外产品的水平，大大提高了食品微生物实验室工作效率。

本实用新型的细菌计数平板由圆形容器、容器内底部的载体膜层以及容器上的容器盖三部分组成。

本实用新型的圆形容器根据实际需要可以制成各种大小尺寸，但在细菌总数计数上，本领域常用的尺寸为底部直径60mm或90mm的器皿；容器的高度也可根据需要制成各种尺寸，常用的高度范围在8mm-10mm。该容器可以采用塑料、玻璃等材质，这些材质优选是透明的，优选采用塑料制成。

本实用新型的容器底部铺设的载体膜层为人造网状纤维，优选使用水刺型网状纤维，更优选为20-40g/每平方米规格的无纺布(单位面积重量，反映了无纺布的厚度)，实验中可使检测样品液迅速扩散。而传统方法中以琼脂为载体的平板，常温下为固体状态，由于含大量水分因而最多只能保存3周。

载体膜层中渗有胶体溶液，该胶体溶液含有水溶性植物胶、细菌培养基和显色剂，这三种组分在胶体溶液中的含量分别为1-2％、3-6％和0.2-0.4％(W/W)。

水溶性植物胶可以是阿拉伯胶、刺槐豆胶、香豆胶、瓜尔胶、胡豆胶、香豆粉、葫芦巴胶、魔芋胶，优选植物胶瓜尔豆胶，该胶粘度最适合本产品，且成本低廉。植物胶对各种营养物质起固定作用，使营养物质均匀附着在载体膜上，同时防止菌落扩散，形成肉眼可见菌落。

本实用新型所述的细菌培养基可以是任何一种为细菌生长提供氮源、碳源和维持代谢平衡的钠离子的培养基，包含蛋白胨、葡萄糖和氯化钠的培养基。

本实用新型的显色剂可选用化学物质3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑盐，商品名为噻唑蓝，简称MTT；或者显色剂也可选用TTC(氯化三苯四氮唑)。目前常规的菌落计数平板上生长的菌落为无色或乳白色，而本实用新型产品上菌落为蓝紫色(MTT染色)，添加TTC则为红色菌落，但文献报导，TTC对革兰氏阳性菌具有一定抑制作用。使用MTT后菌落非常容易识别，尤其是对于缺乏微生物检测经验的人员来说不会将和菌落相似的食品残渣颗粒计入总菌数，结果更准确。目前MTT还未见用于食品中的细菌计数。

本实用新型提供的细菌计数平板的制作工艺包括以下步骤：

1.无菌圆形容器的制作和无菌处理

使用本产品专用模具，以容器制作工艺制成60mm直径的圆形塑料平皿，经辐照灭菌处理备用。

2.载体膜片用试剂配制

准确称量蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、植物胶，显色剂，配制成胶体溶液，高压灭菌。

3.载体膜片制备

将制备好的胶体溶液，以多头定量分装器进行点样，将冲裁成盒底内径大小的无纺布通过气动机械手放入盒底，以专用设备加压，使膜片与盒内底部粘接。

4.冷冻干燥

将上述制好的半成品放入低温冰柜或直接放入冷冻干燥机舱内预冻。最后真空冷冻干燥。

5.包装

冻干后的产品喷打批号、有效期、生产日期，用铝箔包装、封口。

本实用新型的细菌计数平板是一种即开即用型一次性细菌计数平板，所谓即开即用型一次性细菌计数平板，是指在使用时只要将稀释后的样品液1ml滴加在打开的平板上，即可直接放入培养箱中培养，培养一定时间后，通过统计平板上的紫色菌落即可得出检测结果。目前常规方法是首先将玻璃器皿灭菌，然后配制培养基高压灭菌后于45℃左右保温，将样品稀释液1ml滴加到平皿后，再将培养基15ml倾注到平皿内，轻轻晃动摇匀，待培养基凝固后放培养箱中培养，对菌落识别后进行统计得到结果。

因此，本实用新型的细菌计数平板即开即用，无需配制培养基，省时省力，产品还可长期保存，为使用人员带来极大的便利。并且，本发明的产品利用人造纤维的快速渗透作用，样品中的细菌在培养基上生长均匀，重复性好；添加的菌落显色物质使所有菌落着色，易于辨认，避免了将食品残渣计入统计结果。

本实用新型产品适用于食品、饮料和饮水等方面的微生物卫生质量检测以及环保微生物污染的监测。

附图说明

图1为本实用新型的即用型细菌计数平板的截面图

其中1代表容器盖；2代表容器；3代表载体膜层。

图2为本实用新型的即用型细菌计数平板的立体图

具体实施方式

实施例1

该即开即用型细菌总数计数一次性平板，容器采用直径60mm圆形塑料盒，载体膜片采用20-40g/每平方米规格的无纺布，还有一个塑料容器盖。

胶体溶液为蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、植物胶和MTT的混合物。

该平板的制备方法按以下步骤进行：

1.容器的灭菌处理

将塑料容器通过辐照灭菌。

2.胶体溶液配制

按下列配方：蛋白胨20g，葡萄糖1g，瓜尔豆胶10g，氯化钠5g，蒸馏水1000ml，121℃高压灭菌15分钟备用。将MTT配成1％水溶液，0.22μm过滤除菌后作为母液，具体用量为10ml的MTT母液/升胶体溶液，搅拌均匀备用。

3.膜片制备

将步骤2制备好的胶体溶液通过无菌专用分装设备吸取1ml点在步骤1处理过的容器底部，无纺布通过专用冲裁设备裁成60mm直径的圆形膜片，通过气动机械手抓取平铺在点过胶的胶点上，再使用轧膜装置冲压，使膜片与容器底部很好黏结。

4.冷冻干燥

将步骤3制备好的膜片放在-40℃低温冰箱或冻干机冷冻舱内预冻2小时，开始抽真空，直到冻干为止。

5.包装

在冻干后的膜片上喷打产品批号、有效期、生产日期，用铝箔包装、封口，得到即开即用型食品中细菌总数计数一次性平板。

6.使用

从超市随机选取10份肉类(5份制成品、5份肉馅，各100g)样品，每份样品称取25g于225ml灭菌生理盐水，均质，制成1∶10稀释液，吸取该稀释液10ml于90ml灭菌生理盐水制成1∶100，同样方法再制成1∶1000稀释液。从三个稀释度中每个稀释度各吸取2个1ml稀释液分别滴加到制备好的两个细菌总数计数一次性平板，每份样品共使用6块，37℃下培养48h，记录结果，并按GB4789.2-94《食品微生物学检验—细菌总数测定》方法计算。

实施例2

该即用型细菌计数平板，容器采用直径为90mm的玻璃皿，载体膜片采用小于20g/每平方米规格的无纺布，还有一个玻璃盖。

胶体溶液为蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、植物胶和MTT的混合物。

该平板的制备方法按以下步骤进行：

1.容器的灭菌处理

将玻璃容器通过辐照灭菌。

2.胶体溶液配制

按下列配方：蛋白胨20g，葡萄糖1g，刺槐豆胶15g，氯化钠5g，蒸馏水1000ml，121℃高压灭菌15分钟备用。将MTT配成1％水溶液，0.22μm过滤除菌后作为母液，具体用量为10ml的MTT母液/升胶体溶液，搅拌均匀备用。

3.膜片制备

将制备好的胶体溶液通过无菌专用分装设备吸取1.5ml点在步骤1处理过的容器底部，无纺布通过专用冲裁设备裁成90mm直径的圆形膜片，通过气动机械手抓取平铺在点过胶的胶点上，再使用轧膜装置冲压，使膜片与容器底部很好黏结。

4.冷冻干燥

将步骤3制备好的膜片放在-40℃低温冰箱或冻干机冷冻舱内预冻2小时，开始抽真空，直到冻干为止。

5.包装

在冻干后的膜片上喷打产品批号、有效期、生产日期，用铝箔包装、封口，得到即开即用型食品中细菌总数计数一次性平板。

6.使用

从超市随机选取10份袋装豆制品，每份样品称取25g于225ml灭菌生理盐水，均质，制成1∶10稀释液，吸取该稀释液10ml于90ml灭菌生理盐水制成1∶100，同样方法再制成1∶1000稀释液。从三个稀释度中每个稀释度各吸取2个1ml稀释液分别滴加到制备好的两个细菌总数计数一次性平板，每份样品共使用6块，37℃下培养48h，记录结果，并按GB4789.2-94方法计算。

实施例3

该即开即用型食品中细菌总数计数一次性平板，容器采用直径60mm透明圆形塑料盒，载体膜片采用28g/每平方米规格的无纺布，还有一个塑料容器盖。

胶体溶液为包含蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、植物胶和TTC的混合物。

该平板的制备方法按以下步骤进行：

1.容器的灭菌处理

将塑料容器通过辐照灭菌。

2.胶体溶液配制

按下列配方：蛋白胨20g，葡萄糖1g，瓜尔豆胶10g，氯化钠5g，蒸馏水1000ml，121℃高压灭菌15分钟备用，将TTC配成1％水溶液，0.22μm过滤除菌后作为母液，具体用量为15ml的TTC母液/升胶体溶液，搅拌均匀备用。

3.膜片制备

将制备好的胶体溶液通过无菌专用分装设备吸取1ml点在步骤1处理过的容器底部，无纺布通过专用冲裁设备裁成60mm直径的圆形膜片，通过气动机械手抓取平铺在点过胶的胶点上，再使用轧膜装置冲压，使膜片与容器底部很好黏结。

4.冷冻干燥

将步骤3制备好的碟片放在-40℃低温冰箱或冻干机冷冻舱内预冻2小时，开始抽真空，直到冻干为止。

5.包装

在冻干后的碟片上喷打产品批号、有效期、生产日期，用铝箔包装、封口，得到即开即用型食品中细菌总数计数一次性平板。

6.使用

无菌选取10份饮用水和水源水，以无菌操作方法吸取1mL混匀的水样注入盛有9mL灭菌生理盐水的试管中混匀成1∶10稀释液，吸取1∶10的稀释液1mL注入盛有9mL灭菌生理盐水的试管中混匀成1∶100稀释液，按同法依次稀释成1∶1000、1∶10000稀释液等备用，以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1mL充分混匀的饮用水水样，接种到上述制备好的细菌总数计数一次性平板，按GB 5750-85方法统计结果。

Claims (5)

1.一种即用型细菌计数平板，其特征在于，该计数平板由圆形容器、容器内底部的载体膜层以及容器上的容器盖三部分组成。

2.如权利要求1所述的细菌计数平板，其特征在于，该圆形容器的直径为60mm或90mm。

3.如权利要求1所述的细菌计数平板，其特征在于，所述的载体膜层为人造网状纤维。

4.如权利要求3所述的细菌计数平板，其特征在于，所述的载体膜层为水刺型网状纤维。

5.如权利要求1所述的细菌计数平板，其特征在于，该圆形容器为塑料容器。

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