CN104313112A - 用于检测食醋中产气、产膜菌的培养基及检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于检测食醋中产气、产膜菌的培养基及检测方法，培养基是以土豆、葡萄糖、酵母膏、牛肉膏和硫酸铵等为原料制成的液体培养基，检测方法以装有杜氏小管的试管接种待测食醋样品后培养72小时进行观察，若试管中出现气泡、菌膜时，说明食醋不合格不能直接出厂。本发明的培养基原材料配方是专为食醋中的产气、产膜菌而配制的，它有利于产气、产膜菌在较短的时间内繁殖和释放气体，同时也有利于产气、产膜菌在短时间内繁殖和产生菌膜，达到同时检测两种有害菌的目的，不仅能够缩短检测的时间，提高检出效率，还能够有效预防出厂食醋产品涨袋、涨瓶或出现菌膜等现象发生。

Description

用于检测食醋中产气、产膜菌的培养基及检测方法

技术领域

本发明的实施方式涉及食醋质量检测领域，更具体地，本发明的实施方式涉及一种用于检测食醋中产气、产膜菌的培养基及其检测方法。

背景技术

食醋是以粮食、果实、酒类等含有淀粉、糖类、酒精的原料，经微生物酿造而成的一种液体酸性调味品。虽然食醋本身具有一定的杀菌功效，采用国家标准对菌落总数进行检测，在结果远低于标准要求的情况下，食醋产品仍有可能出现涨瓶、涨袋以及絮状物，严重影响产品品质，因此，建立一种国家标准之外，用于食醋中产气、产膜菌检测的方法，在产品出厂之前判断是否存在可能导致食醋涨瓶、涨袋及长膜的有害菌，便于生产上及早发现、及早防治不合格品，具有十分重要的现实意义。

发明内容

本发明克服了现有技术的不足，提供一种用于检测食醋中产气、产膜菌的培养基及其检测方法的实施方式，以期望可以有效预防食醋产品出厂后涨瓶、涨袋或长膜等不合格问题的发生。

为解决上述的技术问题，本发明的一种实施方式采用以下技术方案：

一种用于检测食醋中产气、产膜菌的培养基，它包括以下原料：

其制作的方法是：首先将土豆去皮并切成小块，然后向其加入蒸馏水，煮沸10～20min，接着用纱布过滤，所得滤液加蒸馏水定容到1000mL，然后加入葡萄糖、酵母膏、牛肉膏及硫酸铵，搅拌溶解即获得目的培养基。

优选的，所述的用于检测食醋中产气菌及絮状物产生菌的培养基包括以下原料：

微生物所需要的六类营养物质包括碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐和水，根据不同微生物对营养物质的需求不同，在配置培养基时，必须充分考虑到目的微生物的营养需求，有针对性的配置培养基，这样才有利于微生物的生长、繁殖、代谢及产物合成。

本发明在天然土豆培养基的基础上，添加葡萄糖、酵母膏、牛肉膏、硫酸铵，为产气、产膜菌的生长繁殖提供更丰富的营养物质。新鲜土豆中所含的营养成分有淀粉、蛋白质、脂肪等，每100g新鲜土豆能为微生物提供70～120J的热量，还可以作为氮源提供氮，酵母膏、牛肉膏富含多种氨基酸、维生素、核苷酸、多肽及微量元素，能够为微生物的生长提供多种必需生长元素，葡萄糖为微生物提供碳源及能量，硫酸铵则提供氮源。该培养基各成分均具有良好的溶解性，制成的液体培养基澄清，不会对后期结果判定产生干扰。

本发明明确了各种原料物质的种类和用量，这些原料物质易得且成本不高，而其用量之间相互配合，为产气、产膜菌提供了合适的碳源、氮源、能源、无机盐及维生素等营养物质。本发明限定了原料的用量，并不是说只有在这种用量下才能检测出食醋中的产气、产膜菌，而是在这种原料配方既能够满足产气、产膜菌对碳源、氮源、能源、无机盐及维生素等营养物质的需求，也不会浪费各种原材料，在微生物生长繁殖阶段不会缺少其所需的营养，在检测实验完成后，培养基的营养物质得到充分的利用。

本发明的原料配方还有一个优势，那就是既满足食醋中产气菌的繁殖生长及产气，也适合产膜菌的生长繁殖和产生菌膜，因此在检测时可同时检测两种类型的菌，判断是否存在引起涨袋、涨瓶及长膜等不良现象。

一种采用如权利要求1所述的培养基检测食醋中产气菌及絮状物产生菌的方法，它包括以下步骤：

A、培养基分装、灭菌

取洁净试管，内置倒立的杜氏小管，每支试管分别装入18mL上述培养基，塞上试管塞并用牛皮纸将试管包扎好，于121℃灭菌30min，选择灭菌后杜氏小管内无气泡的试管作为试管无菌培养基备用；

B、接种培养

在无菌操作下，取装有3～5颗玻璃珠的无菌三角瓶，加入待测食醋样品，不调pH值，保持自然PH，充分振荡摇匀，取步骤A中的1支试管无菌培养基作为空白对照，然后再取3支试管无菌培养基各接种2mL所述待测食醋样品，振荡均匀；

C、培养

将步骤B作为空白对照的试管无菌培养基和接种了2mL所述待测食醋样品的试管无菌培养基置于34±1℃恒温箱中培养72h；

D、结果判定

培养72h后，接种了待测食醋样品的试管无菌培养基无气泡、菌膜产生且空白对照试管无任何染菌现象则表示食醋中不存在产气、产膜菌；或者培养72h后，接种了待测食醋样品的任意一根试管无菌培养基出现气泡和/或菌膜且空白对照试管无任何染菌现象则表示食醋中存在产气、产膜菌。

食醋感染产气、产膜菌的多少可以根据异常试管的管数及异常特征进行判定，判定标准如下：

注：“-”为不存在产气、产膜菌；“+”为产气、产膜菌存在但轻微；“++”为产气、产膜菌存在且比较严重；“+++”为产气、产膜菌存在且严重；“++++”为产气、产膜菌存在且非常严重。

通过采用本发明的培养基及检测方法对食醋进行检测，结合上述判定标准可以准确的判定食醋中菌量的情况，从而确定食醋的下一步操作。

与现有技术相比，本发明的有益效果之一是：本发明的培养基原材料配方是专为食醋中的产气、产膜菌而配置的，它有利于产气菌在较短的时间内繁殖和释放气体，同时也有利于产膜菌在短时间内繁殖和产生菌膜，在34℃±1℃条件下培养，既能保证真菌类微生物不会死掉，又能在较快的时间内检出，及时预防问题产品出厂，防止产品在货架期涨瓶、涨袋及长膜。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例1

一、培养基的原料及制备：

将土豆去皮并切成小块，然后向其加入蒸馏水，煮沸15min，接着用纱布过滤，所得滤液加蒸馏水定容到1000mL，然后加入葡萄糖、酵母膏、牛肉膏及硫酸铵，搅拌溶解即获得目的培养基。

二、食醋中产气菌及絮状物产生菌的检测

取10支洁净试管，内置倒立的杜氏小管，分别装入18mL上述培养基，塞上试管塞并用牛皮纸将试管包扎好，于121℃灭菌30min，选择灭菌后杜氏小管内无气泡的试管作为试管无菌培养基备用；

在无菌操作下，取装有5颗玻璃珠的无菌三角瓶，加入适量待测食醋样品，保持自然PH，充分振荡摇匀，取1支试管无菌培养基作为空白对照，然后再取3支试管无菌培养基各接种2mL所述待测食醋样品，振荡均匀；

将作为空白对照的试管无菌培养基和接种了2mL所述待测食醋样品的试管无菌培养基都置于34℃恒温箱中培养72h；

接种培养72小时后进行观察，记录试管中气泡上冒现象、杜氏小管中气泡堆积现象、培养基菌膜大小，记录结果如表1。

表1 观察结果统计表

如表1所示，空白对照没有出现任何染菌现象，而其它3支试管中有2支出现了气体和菌膜，因此该批食醋产品中存在少量产气、产膜菌，染菌情况轻微，在产品出厂后有可能引发涨袋、涨瓶及长膜现象发生，应当对该批食醋进行进一步的灭菌和质量把控。

实施例2

一、培养基的原料及制备：

采用如实施例1所示的方法制备培养基，但将培养基的原料改变为：

二、食醋中产气菌及絮状物产生菌的检测

取10支洁净试管，内置倒立的杜氏小管，分别装入18mL上述培养基，塞上试管塞并用牛皮纸将试管包扎好，于121℃灭菌30min，选择灭菌后杜氏小管内无气泡的试管作为试管无菌培养基备用；

在无菌操作下，取装有5颗玻璃珠的无菌三角瓶，加入适量待测食醋样品，保持自然PH，充分振荡摇匀，取1支试管无菌培养基作为空白对照，然后再取3支试管无菌培养基各接种2mL所述待测食醋样品，振荡均匀；

将作为空白对照的试管无菌培养基和接种了2mL所述待测食醋样品的试管无菌培养基都置于35℃恒温箱中培养72h；72h后统计的结果如表2所示：

表2 观察结果统计表

如表2所示，空白对照没有出现任何染菌现象，而其它3支试管全都产生了气泡和菌膜，因此可以判定该批食醋产品染产气、产膜菌严重，需要重新杀菌处理后再进行检测。

实施例3

采用如实施例1所示的方法制备培养基，但将培养基的原料改变为：

采用如实施例1所示的方法检测产气、产膜菌，72h后统计的结果如表3所示：

表3 观察结果统计表

如表3所示，空白对照没有染菌现象，其它的试管也没有染菌现象，说明本批食醋杀菌效果达标，可以出厂上市。

表4是不采用本发明进行产气菌和絮状物产生菌时一年内食醋出现涨袋、涨瓶或者长出菌膜的次数与实用本发明进行检测后食醋出现涨袋、涨瓶、絮状物的次数对比：

表4 采用本发明方法前后食醋质量问题统计表

结合表4可知，食醋出厂前采用本发明的培养基和检测方法检测产气、产膜菌后，合格出厂的产品出现问题的量明显减少，食醋损失大大降低。

尽管这里参照本发明的多个解释性实施例对本发明进行了描述，但是，应该理解，本领域技术人员可以设计出很多其他的修改和实施方式，这些修改和实施方式将落在本申请公开的原则范围和精神之内。更具体地说，在本申请公开和权利要求的范围内，可以对主题组合布局的组成部件和/或布局进行多种变型和改进。除了对组成部件和/或布局进行的变型和改进外，对于本领域技术人员来说，其他的用途也将是明显的。

Claims (3)

1.一种用于检测食醋中产气、产膜菌的培养基，其特征在于它包括以下原料：

其制作的方法是：首先将土豆去皮并切成小块，然后向其加入蒸馏水，煮沸10～20min，接着用纱布过滤，所得滤液加蒸馏水定容到1000mL，然后加入葡萄糖、酵母膏、牛肉膏及硫酸铵，搅拌溶解即获得目的培养基。

2.根据权利要求1所述的用于检测食醋中产气、产膜菌的培养基，其特征在于它包括以下原料：

3.一种采用如权利要求1所述的培养基检测食醋中产气、产膜菌的方法，其特征在于它包括以下步骤：

A、培养基分装、灭菌

取洁净试管，内置倒立的杜氏小管，每支试管分别装入18mL上述培养基，塞上试管塞并用牛皮纸将试管包扎好，于121℃灭菌30min，选择灭菌后杜氏小管内无气泡的试管作为试管无菌培养基备用；

B、接种培养

在无菌操作下，取装有3～5颗玻璃珠的无菌三角瓶，加入待测食醋样品，保持自然PH，充分振荡摇匀，取步骤A中的1支试管无菌培养基作为空白对照，然后再取3支试管无菌培养基各接种2mL所述待测食醋样品，振荡均匀；

C、培养

将步骤B作为空白对照的试管无菌培养基和接种了2mL所述待测食醋样品的试管无菌培养基置于34±1℃恒温箱中培养72h；

D、结果判定

培养72h后，接种了待测食醋样品的试管无菌培养基无气泡、菌膜产生且空白对照试管无任何染菌现象则表示食醋中不存在产气、产膜菌；或者培养72h后，接种了待测食醋样品的任意一根试管无菌培养基出现气泡和/或菌膜且空白对照试管无任何染菌现象则表示食醋中存在产气、产膜菌。