CN209854159U - 水样中菌落总数荧光检测系统 - Google Patents

Abstract

本实用新型公开了一种水样中菌落总数荧光检测系统。该系统包括试剂盒和荧光检测仪器，试剂盒包括外包装盒以及放置在外包装盒内的试剂瓶，其中，试剂瓶包括：用于盛放快速计数培养基的第一试剂瓶、用于盛放活细胞特异性的荧光染色液的第二试剂瓶和用于盛放荧光染色液稀释缓冲液的第三试剂瓶。应用本实用新型的水样中菌落总数荧光检测系统，能够通过活细胞特异性的荧光染色液对培养后的水样中活体微生物进行染色，并通过荧光检测仪检测水样中菌落总数，将检测周期由传统微生物培养法中的48h缩短至8h，极大的提高了检测的效率。

Description

水样中菌落总数荧光检测系统

技术领域

本实用新型涉及食品卫生与安全领域，具体而言，涉及一种水样中菌落总数荧光检测系统。

背景技术

水体菌落总数是反映水质状况的重要指标，目前水样中菌落总数检测方法仍为微生物培养法，需将水样于计数培养基中培养48h，然后统计培养基上形成的菌落数，以每个菌落代表一个菌落形成单位，一定体积水样中菌落形成单位的数量即为该水样中菌落总数。然而，这种广泛使用的基于细菌生长原理的测定方法虽然相对准确，但费时费力。而快速检测方法中，流式细胞仪技术检测迅速、结果准确，但对检测人员技术要求较高，同时设备成本及后期维护成本极其昂贵；ATP荧光法受基质本底影响极大，多用于商业无菌检测，在定量检测方向远不成熟；DAPI计数的方法虽然迅速，但测定结果误差较大，另外，DAPI计数使用了有毒试剂，对操作人员的健康有潜在的危害。由此来看，函需一种简单、容易操作、安全的方法或装置，来检测饮用水中细菌的数量。

实用新型内容

本实用新型旨在提供一种水样中菌落总数荧光检测系统，以提高水样中菌落总数荧光检测效率。

为了实现上述目的，根据本实用新型的一个方面，提供了一种水样中菌落总数荧光检测系统。该系统包括试剂盒和荧光检测仪器，试剂盒包括外包装盒以及放置在外包装盒内的试剂瓶，其中，试剂瓶包括：用于盛放快速计数培养基的第一试剂瓶、用于盛放活细胞特异性的荧光染色液的第二试剂瓶和用于盛放荧光染色液稀释缓冲液的第三试剂瓶。

进一步地，快速计数培养基为干粉形态的快速计数培养基，第一试剂瓶内装有袋装干燥剂。

进一步地，试剂盒还包括放置在外包装盒内的用于微生物过滤的滤膜。

进一步地，试剂盒还包括放置在外包装盒内的用于盛放无菌水的第四试剂瓶。

进一步地，试剂盒还包括放置在外包装盒内的无菌培养皿。

进一步地，试剂盒还包括放置在外包装盒内的试剂瓶内衬，试剂瓶内衬上设置孔位，孔位大小与试剂瓶对应，试剂瓶放置在孔位内固定。

进一步地，试剂盒还包括放置在外包装盒内的计时器。

进一步地，试剂盒还包括放置在外包装盒内的无菌吸管。

进一步地，荧光检测仪器为全自动荧光检测仪。

进一步地，荧光检测仪器包括激发光发射模块、图像捕捉模块、自动计数模块和控制模块，其中，控制模块控制激发光发射模块、图像捕捉模块和自动计数模块。

本实用新型的系统包括试剂盒和荧光检测仪器，试剂盒内包括用于盛放快速计数培养基的第一试剂瓶、用于盛放活细胞特异性的荧光染色液的第二试剂瓶、用于盛放荧光染色液稀释缓冲液的第三试剂瓶，应用本实用新型的水样中菌落总数荧光检测系统，能够通过活细胞特异性的荧光染色液对活性微生物进行染色，然后通过荧光检测仪检测水样中菌落总数，不需要等待菌落生长48h，极大的提高了检测的效率。

附图说明

构成本申请的一部分的说明书附图用来提供对本实用新型的进一步理解，本实用新型的示意性实施例及其说明用于解释本实用新型，并不构成对本实用新型的不当限定。在附图中：

图1示出了本实用新型一实施例的试剂盒的外包装盒的结构示意图；

图2示出了本实用新型一实施例的无菌培养皿的结构示意图；

图3示出了本实用新型一实施例的试剂瓶的结构示意图；以及

图4示出了本实用新型一实施例的试剂瓶内衬的结构示意图。

具体实施方式

需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下面将参考附图并结合实施例来详细说明本实用新型。

根据本实用新型一典型的实施方式，提供了一种水样中菌落总数荧光检测系统。该系统包括试剂盒和荧光检测仪器，该试剂盒包括外包装盒以及放置在外包装盒内的试剂瓶，其中，试剂瓶包括：用于盛放快速计数培养基的第一试剂瓶、用于盛放活细胞特异性的荧光染色液的第二试剂瓶和用于盛放荧光染色液稀释缓冲液的第三试剂瓶。

本实用新型的系统包括试剂盒和荧光检测仪器，试剂盒内包括用于盛放快速计数培养基的第一试剂瓶、用于盛放活细胞特异性的荧光染色液的第二试剂瓶、用于盛放荧光染色液稀释缓冲液的第三试剂瓶，应用本实用新型的水样中菌落总数荧光检测系统，能够通过活细胞特异性的荧光染色液对活性微生物进行染色，然后通过荧光检测仪检测水样中菌落总数，不需要等待菌落生长48h，极大的提高了检测的效率。

优选的，放快速计数培养基为干粉形态的快速计数培养基，这样更便于保存，方便系统的使用。第一试剂瓶为半透明塑料瓶内装有袋装干燥剂，内装有袋装干燥剂以防止培养基吸潮；更优选的，用于盛放活细胞特异性的荧光染色液的第二试剂瓶和用于盛放荧光染色液稀释缓冲液的第三试剂瓶为棕色玻璃瓶，对试剂进行避光保护。

根据本实用新型一典型的实施方式，试剂盒还包括放置在外包装盒内的用于微生物过滤的滤膜。为了方便使用，优选的，试剂盒还包括放置在外包装盒内的用于盛放无菌水的第四试剂瓶、无菌培养皿、试剂瓶内衬，试剂瓶内衬上设置孔位，孔位大小与试剂瓶对应，试剂瓶放置在孔位内固定。更优选的，试剂盒还包括放置在外包装盒内的计时器、无菌吸管。

根据本实用新型一典型的实施方式，荧光检测仪器为全自动荧光检测仪，荧光检测仪器包括激发光发射模块、图像捕捉模块、自动计数模块和控制模块，其中，控制模块控制激发光发射模块、图像捕捉模块和自动计数模块。

在本实用新型一典型的实施例中，水样中菌落总数荧光检测系统包括试剂盒和为实现结果自动读取所配套的荧光检测仪器一台，试剂盒包括如图1所示的外包装盒10、无菌培养皿 (参见图2无菌培养皿20)、干粉形态快速计数培养基一瓶(参见图3试剂瓶30)、液体形态荧光染色液两瓶、液体形态荧光染色液稀释缓冲液一瓶。为了方便使用，试剂盒还包括放置在外包装盒内的用于盛放试剂瓶内衬(参见图4)的试剂瓶内衬11，试剂瓶内衬11上设置孔位(例如，孔位12和13)，孔位大小与试剂瓶对应，试剂瓶放置在孔位内固定。该系统采用荧光微菌落技术，检测原理为将适宜稀释度的待测水样使用滤膜(也称除菌滤膜)进行过滤，水样中的微生物截留于滤膜上，将滤膜于快速计数培养基上培养8h使微生物形成的微菌落，之后使用荧光剂对微菌落进行染色，荧光剂具有生物特异性，其本身无荧光，只有在进入活细胞并降解后才会产生荧光，将染色后的微菌落短暂孵育后直接于荧光检测仪器中进行检测，荧光检测仪可发射激发光，被染色的微菌落吸收激发光后释放出较强的荧光，每个微菌落在滤膜上可形成一个明亮的荧光斑点，荧光检测仪通过自带的自动计数软件计算出荧光斑点的数量，整个结果的读取过程完全自动化，无需进行任何参数设置。同时在背景干扰方面，由于荧光剂对活细胞的特异性，背景无明显荧光，样品及滤膜上的杂质颗粒等不会显现荧光从而干扰计数，保证计数结果的准确性。本系统整体检测结果与GB4789.2-2016相比一致性达到90％。

在本实用新型一典型的实施例中，检测步骤如下：

1.培养基平板的制备：根据检测样品数量称取干粉形态的快速计数培养基，加入等比例的蒸馏水，加热溶解后于121℃高压灭菌15min，待冷却至55℃左右时于超净台中铺制成平板待用；

2.样品的过滤及培养：于超净台中，将待测水样(必要时进行适当稀释)使用膜过滤法进行过滤，将滤膜正置放置于快速计数培养基平板上，于36℃培养箱中培养8h；

3.染色工作液的配制：根据检测样品数量，于超净台中使用无菌吸管分别吸取荧光染色液(本实施例中荧光染色液的有效成分为二醋酸羟基荧光素)与稀释缓冲液，混合均匀后备用；

4.染色：将滤膜于培养基平板上取出，于吸水垫上滴加2-3mL染色工作液并覆盖于滤膜上，36℃培养30min；

5.计数：将染色后的滤膜放置于荧光检测仪中进行荧光计数。

本实用新型上述的实施例实现了如下技术效果：

1.培养时间短：本产品提供的快速计数培养基专门根据水体微生物营养需求研制，将检测时间由国标中的48h大幅缩短至8h，大大减少了检测周期；

2.背景干扰低：本产品使用二醋酸羟基荧光素作为荧光剂，该荧光剂具有生物特异性，自身无荧光，只有进入活细胞并被降解后才会产生荧光，除活细胞外，滤膜背景、杂质颗粒等非活性物质不会产生干扰荧光，增加了菌落与背景的对比度，减少了假阳性数量；

3.结果读取自动化：荧光检测仪可发射激发光，同时自带计数软件，可实现发光、图像捕获、荧光斑点计数的一键式自动检测；

4.自动计数结果准确：本产品采用微菌落技术，水样中细菌于滤膜上呈微菌落状态，不同细菌形成的菌落基本实现一致化，无菌落粘边成片、差异较大影响判别等情况。

以上所述仅为本实用新型的优选实施例而已，并不用于限制本实用新型，对于本领域的技术人员来说，本实用新型可以有各种更改和变化。凡在本实用新型的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本实用新型的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种水样中菌落总数荧光检测系统，其特征在于，包括试剂盒和荧光检测仪器，所述试剂盒包括外包装盒以及放置在所述外包装盒内的试剂瓶，其中，所述试剂瓶包括：用于盛放快速计数培养基的第一试剂瓶、用于盛放活细胞特异性的荧光染色液的第二试剂瓶和用于盛放荧光染色液稀释缓冲液的第三试剂瓶。

2.根据权利要求1所述的水样中菌落总数荧光检测系统，其特征在于，所述快速计数培养基为干粉形态的快速计数培养基，所述第一试剂瓶内装有袋装干燥剂。

3.根据权利要求1所述的水样中菌落总数荧光检测系统，其特征在于，所述试剂盒还包括放置在所述外包装盒内的用于微生物过滤的滤膜。

4.根据权利要求1所述的水样中菌落总数荧光检测系统，其特征在于，所述试剂盒还包括放置在所述外包装盒内的用于盛放无菌水的第四试剂瓶。

5.根据权利要求1所述的水样中菌落总数荧光检测系统，其特征在于，所述试剂盒还包括放置在所述外包装盒内的无菌培养皿。

6.根据权利要求1所述的水样中菌落总数荧光检测系统，其特征在于，所述试剂盒还包括放置在所述外包装盒内的试剂瓶内衬，所述试剂瓶内衬上设置孔位，所述孔位大小与所述试剂瓶对应，所述试剂瓶放置在所述孔位内固定。

7.根据权利要求1所述的水样中菌落总数荧光检测系统，其特征在于，所述试剂盒还包括放置在所述外包装盒内的计时器。

8.根据权利要求1所述的水样中菌落总数荧光检测系统，其特征在于，所述试剂盒还包括放置在所述外包装盒内的无菌吸管。

9.根据权利要求1所述的水样中菌落总数荧光检测系统，其特征在于，所述荧光检测仪器为全自动荧光检测仪。

10.根据权利要求9所述的水样中菌落总数荧光检测系统，其特征在于，所述荧光检测仪器包括激发光发射模块、图像捕捉模块、自动计数模块和控制模块，其中，所述控制模块控制所述激发光发射模块、所述图像捕捉模块和所述自动计数模块。