CN115505627A - 一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法 - Google Patents

一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法 Download PDF

Info

Publication number
CN115505627A
CN115505627A CN202211241486.9A CN202211241486A CN115505627A CN 115505627 A CN115505627 A CN 115505627A CN 202211241486 A CN202211241486 A CN 202211241486A CN 115505627 A CN115505627 A CN 115505627A
Authority
CN
China
Prior art keywords
drug
sensitivity
liquid
bacterial
culture medium
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
CN202211241486.9A
Other languages
English (en)
Inventor
慎佩晶
高强
孟纪伦
李喜莲
徐洋
程海华
彭菲
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhejiang Institute of Freshwater Fisheries
Original Assignee
Zhejiang Institute of Freshwater Fisheries
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhejiang Institute of Freshwater Fisheries filed Critical Zhejiang Institute of Freshwater Fisheries
Priority to CN202211241486.9A priority Critical patent/CN115505627A/zh
Publication of CN115505627A publication Critical patent/CN115505627A/zh
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/18—Testing for antimicrobial activity of a material
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B26—HAND CUTTING TOOLS; CUTTING; SEVERING
    • B26F—PERFORATING; PUNCHING; CUTTING-OUT; STAMPING-OUT; SEVERING BY MEANS OTHER THAN CUTTING
    • B26F1/00—Perforating; Punching; Cutting-out; Stamping-out; Apparatus therefor
    • B26F1/24—Perforating by needles or pins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/44—Staphylococcus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/44—Staphylococcus
    • C12R2001/445—Staphylococcus aureus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/46—Streptococcus ; Enterococcus; Lactococcus
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Forests & Forestry (AREA)
  • Mechanical Engineering (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明涉及药敏实验技术领域，具体是一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法，步骤如下：S1、材料准备；S2、实验物料制备；S3、待测菌株接种物制备；S4、接种平板；S5、打孔器打孔；S6、药液注射；S7、孵育；S8、观察结果；S9、效果比较；S10、使用注意事项，打孔器包括操作杆、限位片与打孔针头。本发明通过打孔器根据需求在不同位置按压多个孔位，通过限位片对打孔针头刺入深度限位，保证能刺破培养基表面又不会因为力量过猛刺穿培养基，对药物浓度的要求严格，提高实验数据的精准度，通过抗菌药物在琼脂内向四周扩散的扩散大小，推断出实验结果，对敏感度划分细致，进一步提高实验数据的精准度。

Description

一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法
技术领域
本发明涉及药敏实验技术领域，具体是一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法。
背景技术
随着水产养殖规模日益发展壮大，各种水产生物疾病逐渐显露，这些显而易见的水产养殖危机使得抗生素成为养殖中必不可少的重要用药物品之一，但伴随着利益而来的是抗生素滥用情况，产生了对环境微生态平衡破坏、水源污染、耐药菌株产生、人类健康等各方面的影响，如何科学、合理地指导用药，减少、控制抗生素使用问题成为水产养殖的重要研究内容，在使用前需要进行药敏实验，保证用于水产养殖的安全性。
但是，目前市场上的药敏实验方法对采用肉汤稀释法、琼脂稀释法、纸片扩散法，药物敏感实验是在涂有细菌的琼脂平板培养基上按照一定要求贴浸有抗菌药的纸片，培养一段时间后测量抑菌圈大小，并根据相关解释标准进行结果分析，从而得出受试菌株药物敏感性的结论，打孔法是以无菌操作将灭菌的不锈钢小管，放置在培养基上打孔，将孔中的培养基用针头挑出，并以火焰封底，使培养基能充分的与平皿融合，打孔操作较为复杂，不利于实验效率。因此，本领域技术人员提供了一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法，步骤如下：
S1、材料准备：准备待测菌株接种物、4.5%的生理盐水、比浊仪、琼脂培养基平板、涂布棒、打孔器、移液器；
S2、实验物料制备：按商品药的使用治疗量的比例配制药液，加入水中稀释，此稀释液即为用于做药敏试验的药液；
S3、待测菌株接种物制备：从过夜孵育的平板，优先选择哥伦比亚血琼脂平板上的菌落上挑取数个单个菌落，直接接种4.5%生理盐水制成菌悬液，使用比浊仪调整悬液的浊度使其达到0.5麦氏单位，使菌悬液中含有相当于ATCC 25922大肠埃希菌*1012CFU/mL浓度；
S4、接种平板：用涂布棒浸入菌悬液内，紧贴试管内壁在液体上方旋转拭子数次，除去涂布棒上多余的液体，用涂布棒在整个琼脂表面按同方向将菌液涂匀，从平板顶部到底部，均匀涂布，重复两次此过程一共三次，每次旋转平板约60度，确保每次接种菌液均匀分布，最后在琼脂平板的边缘涂抹一圈，防止有流动的菌悬液，并使菌液涂布于整块平板的每个角落，涂布菌液完成的平板，在室温放置3-5分钟，以便琼脂吸收表面多余的水分，放置时间不超过15分钟；
S5、打孔器打孔：手持打孔器，在培养基表面不同地方按压打孔；
S6、药液注射：用移液枪移取2微升药液，缓慢均匀注射在打孔培养基的上表面；
S7、孵育：在培养基的上表面放置药敏纸片，将培养皿倒置于培养箱中，恒温37℃孵育时间在24小时内；
S8、观察结果：在涂有细菌的琼脂平板上，抗菌药物在琼脂内向四周扩散，其浓度呈梯度递减，因此在纸片周围一定距离内的细菌生长受到抑制，将平板置于黑色不反光的背景上，采用游标卡尺，来测量抑菌环的直径，可以从平板的背面，利用反射光，用肉眼观测，读取最接近的毫米数，没有肉眼可见的明显的生长的部位即是抑菌环的边缘，平板上的抑菌环呈均匀的圆形，测试菌株在平板上呈现融合生长菌苔，若出现单个菌落稀疏生长的情况，则说明接种时调制的菌液浓度过稀，需要寻找可能的原因，并重新再一次进行测试；
S9、效果比较：制备同剂量的药敏纸片，进行实验对照，结果显示这两种方法的抑菌圈无显著性差异，证明该方法能应用于基层养殖场；
S10、使用注意事项：药物敏感实验后，应选择高敏药物进行治疗，也可选用两种药物协助使用，以减少耐药菌株，在选择高敏药物时应考虑药物的吸收途径，因此药敏实验是药液直接和细菌接触，而在给水产动物用药的时候，必须通过机体的吸收才能使药物达到一定的效果，在用药时高敏药物要配合适宜的给药方法，这样才会达到好的治疗效果。
作为本发明进一步的方案：所述S2中，药敏试验的药液制作方式：如商品药其说明量治疗量30mg/L，可按这个比例配制药液，取30毫克加入1升的水中混匀，药物的浓度和总量直接影响抑菌试验的结果，需精确配制，商品药应严格按照其推荐治疗量配制。
作为本发明再进一步的方案：所述S3中，细菌接种量应恒定，如太多，抑菌圈变小，能产酶的菌株更可破坏药物的抗菌活性。
作为本发明再进一步的方案：所述S4中， 培养基的数量应根据试验菌的营养需要进行配制，平板厚度在5-6mm，为90mm直径，倾注培养基18-20ml，培养基内应尽量避免有抗菌药物的拮抗物质，如钙、镁离子能减低氨基糖苷类的抗菌活性，胸腺嘧啶核苷和对氨苯甲酸能拮抗磺胺药和TMP的活性。
作为本发明再进一步的方案：所述S5中，打孔器包括操作杆、限位片与打孔针头，所述限位片位于操作杆的一侧位置处，所述打孔针头位于限位片的一侧位置处，操作杆垂直培养基表面，限位片推动打孔针头下压，根据需求在不同位置按压打孔，一组打孔针头为42个，所述打孔针头长2mm、外径0.8mm，所述限位片的直径为8mm，一组打孔针头覆盖为直径6mm的圆，且两个圆心距离不少于24mm，所述打孔针头覆盖的圆边缘距离琼脂边缘不少于15mm。
作为本发明再进一步的方案：所述S6中，所述移液枪移取的药液，均匀注射在6mm直径圆内，药液通过6mm直径圆内的孔渗入培养基。
作为本发明再进一步的方案：所述S7中，测试苯唑西林、头孢西丁对葡萄球菌的敏感性时，孵育时间必须达到24h，测试万古霉素对金黄色葡萄球菌及肠球菌属的敏感性，孵育时间必须达到24小时。
作为本发明再进一步的方案：所述S7中，所述药敏纸片为直径6mm的圆形滤纸，两纸片之间圆心的距离不少于24mm，纸片边缘距离琼脂边缘不少于15mm。
作为本发明再进一步的方案：所述S8中，在抑菌环边缘出现只能在放大镜下观察到的微小菌落，可以忽略不计，过夜培养后形成一个抑菌圈，抑菌圈越大，说明该菌对此药敏感性越大，反之越小，若无抑菌圈，则说明该菌对此药具有耐药性，其直径大小与药物浓度、细菌浓度有直接关系。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明适用于养殖场商品药物的药敏实验方法，通过打孔器根据需求在不同位置按压多个孔位，通过限位片对打孔针头刺入深度限位，保证能刺破培养基表面又不会因为力量过猛刺穿培养基，本方法省去了打孔法打孔时药液容易渗漏需要封底等问题，对药物浓度的要求严格，提高实验数据的精准度，通过抗菌药物在琼脂内向四周扩散的扩散大小，推断出实验结果，对敏感度划分细致，进一步提高实验数据的精准度。
附图说明
图1为一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法中打孔器的结构示意图；
图2为一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法中打孔器的平面图；
图3为一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法中打孔器的尺寸结构示意图。
图中：1、操作杆；2、限位片；3、打孔针头。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
请参阅图1～3，本发明实施例中，一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法，步骤如下：
S1、材料准备：准备待测菌株接种物、4.5%的生理盐水、比浊仪、琼脂培养基平板、涂布棒、打孔器、移液器；
S2、实验物料制备：按商品药的使用治疗量的比例配制药液，加入水中稀释，此稀释液即为用于做药敏试验的药液，药敏试验的药液制作方式：如商品药其说明量治疗量30mg/L，可按这个比例配制药液，取30毫克加入1升的水中混匀，药物的浓度和总量直接影响抑菌试验的结果，需精确配制，商品药应严格按照其推荐治疗量配制；
S3、待测菌株接种物制备：从过夜孵育的平板，优先选择哥伦比亚血琼脂平板上的菌落上挑取数个单个菌落，直接接种4.5%生理盐水制成菌悬液，使用比浊仪调整悬液的浊度使其达到0.5麦氏单位，使菌悬液中含有相当于ATCC 25922大肠埃希菌1-2*1012CFU/mL浓度，细菌接种量应恒定，如太多，抑菌圈变小，能产酶的菌株更可破坏药物的抗菌活性；
S4、 接种平板：用涂布棒浸入菌悬液内，紧贴试管内壁在液体上方旋转拭子数次，除去涂布棒上多余的液体，用涂布棒在整个琼脂表面按同方向将菌液涂匀，从平板顶部到底部，均匀涂布，重复两次此过程一共三次，每次旋转平板约60度，确保每次接种菌液均匀分布，最后在琼脂平板的边缘涂抹一圈，防止有流动的菌悬液，并使菌液涂布于整块平板的每个角落，涂布菌液完成的平板，在室温放置3-5分钟，以便琼脂吸收表面多余的水分，放置时间不超过15分钟， 培养基的数量应根据试验菌的营养需要进行配制，平板厚度在5-6mm，为90mm直径，倾注培养基18-20ml，培养基内应尽量避免有抗菌药物的拮抗物质，如钙、镁离子能减低氨基糖苷类的抗菌活性，胸腺嘧啶核苷和对氨苯甲酸PABA能拮抗磺胺药和TMP的活性；
S5、打孔器打孔：手持打孔器，在培养基表面不同地方按压打孔，打孔器包括操作杆1、限位片2与打孔针头3，限位片2位于操作杆1的一侧位置处，打孔针头3位于限位片2的一侧位置处，操作杆1垂直培养基表面，限位片2推动打孔针头3下压，根据需求在不同位置按压打孔，一组打孔针头3为42个，打孔针头3长2mm、外径0.8mm，限位片2的直径为8mm，一组打孔针头3覆盖为直径6mm的圆，且两个圆心距离不少于24mm，打孔针头3覆盖的圆边缘距离琼脂边缘不少于15mm；
S6、药液注射：用移液枪移取2微升药液，缓慢均匀注射在打孔培养基的上表面，移液枪移取的药液，均匀注射在6mm直径圆内，药液通过6mm直径圆内的孔渗入培养基；
S7、孵育：在培养基的上表面放置药敏纸片，将培养皿倒置于培养箱中，恒温37℃孵育时间在24小时内，测试苯唑西林、头孢西丁对葡萄球菌的敏感性时，孵育时间必须达到24h，测试万古霉素对金黄色葡萄球菌及肠球菌属的敏感性，孵育时间必须达到24小时，药敏纸片为直径6mm的圆形滤纸，两纸片之间圆心的距离不少于24mm，纸片边缘距离琼脂边缘不少于15mm；
S8、观察结果：在涂有细菌的琼脂平板上，抗菌药物在琼脂内向四周扩散，其浓度呈梯度递减，因此在纸片周围一定距离内的细菌生长受到抑制，将平板置于黑色不反光的背景上，采用游标卡尺，来测量抑菌环的直径，可以从平板的背面，利用反射光，用肉眼观测，读取最接近的毫米数，没有肉眼可见的明显的生长的部位即是抑菌环的边缘，平板上的抑菌环呈均匀的圆形，测试菌株在平板上呈现融合生长菌苔，若出现单个菌落稀疏生长的情况，则说明接种时调制的菌液浓度过稀，需要寻找可能的原因，并重新再一次进行测试，得到的观察结果即为药敏实验的结果，其判定标准如表一所示，
表一 为药物敏感实验判定标准
抑菌圈直径（毫米） 敏感度
20以上 极敏
15-20 高敏
10-14 中敏
10以下 低敏
0 不敏
药敏实验应按抑菌圈直径大小作为判定敏感度高低的标准，在抑菌环边缘出现只能在放大镜下观察到的微小菌落，可以忽略不计，过夜培养后形成一个抑菌圈，抑菌圈越大，说明该菌对此药敏感性越大，反之越小，若无抑菌圈，则说明该菌对此药具有耐药性，其直径大小与药物浓度、细菌浓度有直接关系；
S9、效果比较：制备同剂量的药敏纸片，进行实验对照，结果显示这两种方法的抑菌圈无显著性差异，证明该方法能应用于基层养殖场；
S10、药物敏感实验后，应选择高敏药物进行治疗，也可选用两种药物协助使用，以减少耐药菌株，在选择高敏药物时应考虑药物的吸收途径，因此药敏实验是药液直接和细菌接触，而在给水产动物用药的时候，必须通过机体的吸收才能使药物达到一定的效果，在用药时高敏药物要配合适宜的给药方法，这样才会达到好的治疗效果。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。不应将权利要求中的任何附图标记视为限制所涉及的权利要求。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (9)

1.一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法，其特征在于，步骤如下：
S1、材料准备：准备待测菌株接种物、4.5%的生理盐水、比浊仪、琼脂培养基平板、涂布棒、打孔器、移液器；
S2、实验物料制备：按商品药的使用治疗量的比例配制药液，加入水中稀释，此稀释液即为用于做药敏试验的药液；
S3、待测菌株接种物制备：从过夜孵育的平板，优先选择哥伦比亚血琼脂平板上的菌落上挑取数个单个菌落，直接接种4.5%生理盐水制成菌悬液，使用比浊仪调整悬液的浊度使其达到0.5麦氏单位，使菌悬液中含有相当于ATCC 25922大肠埃希菌（1-2）*1012CFU/mL浓度；
S4、接种平板：用涂布棒浸入菌悬液内，紧贴试管内壁在液体上方旋转拭子数次，除去涂布棒上多余的液体，用涂布棒在整个琼脂表面按同方向将菌液涂匀，从平板顶部到底部，均匀涂布，重复两次此过程一共三次，每次旋转平板约60度，确保每次接种菌液均匀分布，最后在琼脂平板的边缘涂抹一圈，防止有流动的菌悬液，并使菌液涂布于整块平板的每个角落，涂布菌液完成的平板，在室温放置3-5分钟，以便琼脂吸收表面多余的水分，放置时间不超过15分钟；
S5、打孔器打孔：手持打孔器，在培养基表面不同地方按压打孔；
S6、药液注射：用移液枪移取2微升药液，缓慢均匀注射在打孔培养基的上表面；
S7、孵育：在培养基的上表面放置药敏纸片，将培养皿倒置于培养箱中，恒温37℃孵育时间在24小时内；
S8、观察结果：在涂有细菌的琼脂平板上，抗菌药物在琼脂内向四周扩散，其浓度呈梯度递减，因此在纸片周围一定距离内的细菌生长受到抑制，将平板置于黑色不反光的背景上，采用游标卡尺，来测量抑菌环的直径，可以从平板的背面，利用反射光，用肉眼观测，读取最接近的毫米数，没有肉眼可见的明显的生长的部位即是抑菌环的边缘，平板上的抑菌环呈均匀的圆形，测试菌株在平板上呈现融合生长菌苔，若出现单个菌落稀疏生长的情况，则说明接种时调制的菌液浓度过稀，需要寻找可能的原因，并重新再一次进行测试；
S9、效果比较：制备同剂量的药敏纸片，进行实验对照，结果显示这两种方法的抑菌圈无显著性差异，证明该方法能应用于基层养殖场；
S10、使用注意事项：药物敏感实验后，应选择高敏药物进行治疗，也可选用两种药物协助使用，以减少耐药菌株，在选择高敏药物时应考虑药物的吸收途径，因此药敏实验是药液直接和细菌接触，而在给水产动物用药的时候，必须通过机体的吸收才能使药物达到一定的效果，在用药时高敏药物要配合适宜的给药方法，这样才会达到好的治疗效果。
2.根据权利要求1所述的一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法，其特征在于，所述S2中，药敏试验的药液制作方式：如商品药其说明量治疗量30mg/L，可按这个比例配制药液，取30毫克加入1升的水中混匀，药物的浓度和总量直接影响抑菌试验的结果，需精确配制，商品药应严格按照其推荐治疗量配制。
3.根据权利要求1所述的一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法，其特征在于，所述S3中，细菌接种量应恒定，如太多，抑菌圈变小，能产酶的菌株更可破坏药物的抗菌活性。
4.根据权利要求1所述的一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法，其特征在于，所述S4中， 培养基的数量应根据试验菌的营养需要进行配制，平板厚度在5-6mm，为90mm直径，倾注培养基18-20ml，培养基内应尽量避免有抗菌药物的拮抗物质，如钙、镁离子能减低氨基糖苷类的抗菌活性，胸腺嘧啶核苷和对氨苯甲酸（PABA）能拮抗磺胺药和TMP的活性。
5.根据权利要求1所述的一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法，其特征在于，所述S5中，打孔器包括操作杆（1）、限位片（2）与打孔针头（3），所述限位片（2）位于操作杆（1）的一侧位置处，所述打孔针头（3）位于限位片（2）的一侧位置处，操作杆（1）垂直培养基表面，限位片（2）推动打孔针头（3）下压，根据需求在不同位置按压打孔，一组打孔针头（3）为42个，所述打孔针头（3）长2mm、外径0.8mm，所述限位片（2）的直径为8mm，一组打孔针头（3）覆盖为直径6mm的圆，且两个圆心距离不少于24mm，所述打孔针头（3）覆盖的圆边缘距离琼脂边缘不少于15mm。
6.根据权利要求1所述的一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法，其特征在于，所述S6中，所述移液枪移取的药液，均匀注射在6mm直径圆内，药液通过6mm直径圆内的孔渗入培养基。
7.根据权利要求1所述的一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法，其特征在于，所述S7中，测试苯唑西林、头孢西丁对葡萄球菌的敏感性时，孵育时间必须达到24h，测试万古霉素对金黄色葡萄球菌及肠球菌属的敏感性，孵育时间必须达到24小时。
8.根据权利要求1所述的一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法，其特征在于，所述S7中，所述药敏纸片为直径6mm的圆形滤纸，两纸片之间圆心的距离不少于24mm，纸片边缘距离琼脂边缘不少于15mm。
9.根据权利要求1所述的一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法，其特征在于，所述S8中，在抑菌环边缘出现只能在放大镜下观察到的微小菌落，可以忽略不计，过夜培养后形成一个抑菌圈，抑菌圈越大，说明该菌对此药敏感性越大，反之越小，若无抑菌圈，则说明该菌对此药具有耐药性，其直径大小与药物浓度、细菌浓度有直接关系。
CN202211241486.9A 2022-10-11 2022-10-11 一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法 Withdrawn CN115505627A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202211241486.9A CN115505627A (zh) 2022-10-11 2022-10-11 一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202211241486.9A CN115505627A (zh) 2022-10-11 2022-10-11 一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN115505627A true CN115505627A (zh) 2022-12-23

Family

ID=84509865

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202211241486.9A Withdrawn CN115505627A (zh) 2022-10-11 2022-10-11 一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN115505627A (zh)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Mirani et al. An advanced multifunctional hydrogel‐based dressing for wound monitoring and drug delivery
US7611860B2 (en) Indicator for in-situ detecting of lysozyme
US3929583A (en) Apparatus for enumerating microorganisms
EP2788497B1 (en) Microsensor
US3416998A (en) Method of detecting or classifying microorganisms using agar reagent sheets
US3728228A (en) Device for indication of bacterial sensitivity to antibiotics
CN106556599B (zh) 一种微生物快速检测方法
US11279079B2 (en) Cell electrochemical sensor based on 3D printing technology and application thereof
JP2018514212A (ja) 乳酸菌用培養デバイス
CN111088318A (zh) 利用ttc还原反应检测细菌药物敏感性的方法
CN115505627A (zh) 一种适用于养殖场商品药物的药敏实验方法
CN107937479B (zh) 一种测定生防细菌代谢产物拮抗活性的方法
CN101381762B (zh) 一种改进的拮抗细菌生物测定方法
CN205115476U (zh) 一种药敏板条
Ameko et al. Effects of antibiotic self-medication on the efficacy of four antibiotics commonly used in Ghana on clinically isolated micro organisms
CN2564584Y (zh) 细菌药物敏感性试验检测抗菌素的最小抑菌浓度检测板
CN105219636A (zh) 一种药敏板条及其制备方法
CN208617881U (zh) 一种药敏试验快速定位模具
CN203007257U (zh) 医用细菌分离接种及药物敏感试验比照盘
CN220926790U (zh) 一种抗菌敷料在动态模拟创口下的抗菌性能评价系统
CN206843476U (zh) 自由组合式药敏测试板
CN2433626Y (zh) 组合药敏纸片
CN114292897A (zh) 一种快速检测抑菌物质活性的试剂盒及其应用
WO2016077293A1 (en) Culture peel plate
US10988720B1 (en) Peel plate assembly

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WW01 Invention patent application withdrawn after publication

Application publication date: 20221223

WW01 Invention patent application withdrawn after publication