CN111733134A - 用于胰腺癌细胞的新型培养液 - Google Patents
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Abstract
一种用于胰腺癌细胞的新型培养液，质量百分比组分为：1640培养基85～95%，白蛋白2～4%，生长因子0.8～1.2%，类固醇激素0.8～1.2%，脂肪酸1.5～2.5%，维生素0.5～1.5%，微量矿质元素1.5～2.5%。所得培养液可用于Aspc1,Cfpac1细胞系培养。上述组分中1640培养基还可为DMEM培养基，相应培养液用于Bxpc3,Panc1,miapan2细胞系培养。本发明中以白蛋白替代了胎牛血清中蛋白质以及血红蛋白的成分；在组分中加入了类固醇激素和生长因子以刺激细胞增值，加入脂肪酸、维生素和微量元素为癌细胞增值提供支持作用。本发明的培养液能够完全替代使用胎牛血清的胰腺癌细胞培养液，降低了实验成本，同时规避了胎牛血清中携带的细胞内毒素及病毒，使实验结果更加准确。
Description
技术领域
本发明属于医疗研究的技术领域，具体涉及一种用于胰腺癌细胞的新型培养液。
背景技术
胰腺癌是一种较为常见的消化系统肿瘤，恶性程度极高，为研究应对胰腺癌的治疗方案需要对胰腺癌细胞进行体外培养。现有技术中通常使用1640 培养基添加10％胎牛血清以及DMEM培养基添加10％胎牛血清来制备培养胰腺癌细胞的培养液，1640培养基+10％胎牛血清主要针对Aspc1,Cfpac1细胞系,DMEM培养基+10％胎牛血清主要针对Bxpc3,Panc1,miapan2细胞系。但是胰腺癌细胞增值迅速，培养胰腺癌细胞系需要耗费大量的胎牛血清，大大增加了实验成本预算。另外一面，胎牛血清的成分中含有细菌内毒素、噬菌体，同时也有携带腹泻病毒的风险，不利于胰腺癌细胞的培养。
发明内容
本发明是为了解决上述技术问题而提供的一种用于胰腺癌细胞的新型培养液。
本发明通过以下技术方案实现：
本发明的用于胰腺癌细胞的新型培养液，上述培养液的组分按质量百分比为：1640培养基85～95％
白蛋白2～4％
生长因子0.8～1.2％
类固醇激素0.8～1.2％
脂肪酸1.5～2.5％
维生素0.5～1.5％
微量矿质元素1.5～2.5％
本发明还可以采用以下技术措施：
所述的培养液的组分按质量百分比为：1640培养基90％
白蛋白3％
生长因子1％
类固醇激素1％
脂肪酸2％
维生素1％
微量矿质元素2％。
用于胰腺癌细胞的新型培养液在Aspc1,Cfpac1细胞系培养中的应用。
本发明的用于胰腺癌细胞的新型培养液，上述培养液的组分按质量百分比为：DMEM培养基85～95％
白蛋白2～4％
生长因子0.8～1.2％
类固醇激素0.8～1.2％
脂肪酸1.5～2.5％
维生素0.5～1.5％
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所述的培养液的组分按质量百分比为：DMEM培养基90％
白蛋白3％
生长因子1％
类固醇激素1％
脂肪酸2％
维生素1％
微量矿质元素2％。
用于胰腺癌细胞的新型培养液在Bxpc3,Panc1,miapan2细胞系培养中的应用。
本发明的有益效果是：
本发明的用于胰腺癌细胞的新型培养液中，利用白蛋白替代了胎牛血清中蛋白质以及血红蛋白的成分，以白蛋白作为胰腺癌细胞增值中的必须成分；同时，在组分中加入了类固醇激素和生长因子以刺激细胞增值，加入脂肪酸、维生素和微量元素为癌细胞增值提供支持作用。本发明的培养液能够完全替代现有技术中使用胎牛血清的胰腺癌细胞培养液，降低了实验成本，同时规避了胎牛血清中携带的细胞内毒素及病毒，使实验结果更加准确，减少了对实验的影响。
附图说明
图1为Aspc1在常规培养液与本发明的培养液中根据cck-8的实验结果示意图；
图2为Cfpac1在常规培养液与本发明的培养液根据cck-8的实验结果示意图；
图3为平板克隆实验结果示意图；
图4为在常规培养液与本发明的培养液中细胞集落形成数示意图。
具体实施方式
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明技术方案，下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。
本发明的用于胰腺癌细胞的新型培养液，上述培养液的组分按质量百分比为：1640培养基85～95％
白蛋白2～4％
生长因子0.8～1.2％
类固醇激素0.8～1.2％
脂肪酸1.5～2.5％
维生素0.5～1.5％
微量矿质元素1.5～2.5％
培养液的组分按质量百分比为：1640培养基90％
白蛋白3％
生长因子1％
类固醇激素1％
脂肪酸2％
维生素1％
微量矿质元素2％。
用于胰腺癌细胞的新型培养液在Aspc1,Cfpac1细胞系培养中的应用。
使用本发明的培养液与常规的采用胎牛血清的1640培养液进行对比性研究，Aspc1,Cfpac1细胞系培养在上述两种的细胞液生长速度，周期无明显差异。
1.使用了CCK-8实验检测细胞增殖能力，以每孔1×103个细胞接种 96孔板中，在6h，24h，48h，72h,96h时，将CCK-8的溶液置于每孔中，在37度下静止2h,使用酶标仪在450mm处检测CCK-8吸光度，然后绘制曲线。
2.平板克隆集落形成实验将细胞接种到大皿中(6cm),密度调整为 1000个，培养箱中8h,弃培养基，用4％多聚甲醛固定30min后，弃掉甲醛，加入结晶紫30min，弃去结晶紫，纯水清洗，计数染色。
图1为Aspc1在常规培养液与本发明的培养液根据cck-8实验结果。
图2分别为Cfpac1在常规培养液与新型培养液根据cck-8实验结果。
如图中所示，两种细胞系在不同培养基液均无差异(P>0.05)。
图3显示了平板克隆实验结果，图4显示了细胞集落形成数，在两种培养液中细胞集落形成无差异，P>0.05。
由实验可得结果：1.通过分析常规培养液和新型培养液对Aspc1和 Cfpac1细胞的增殖能力分析，在48，72，96小时，新型培养液增长速率不如常规培养液，但是两者无统计学差异(P>0.05)。2.细胞在培养皿中培养9 天后，Aspc1在常规培养液和新型培养中集落形成数量为548个和568个， Cfpac1在常规培养液和新型培养液中集落形成数量为245个和262个，在两种细胞集落形成数目无明显统计学差异(P>0.05)。
本发明的用于胰腺癌细胞的新型培养液，上述培养液的组分按质量百分比为：DMEM培养基85～95％，白蛋白2～4％
生长因子0.8～1.2％
类固醇激素0.8～1.2％
脂肪酸1.5～2.5％
维生素0.5～1.5％
微量矿质元素1.5～2.5％
所述的培养液的组分按质量百分比为：DMEM培养基90％
白蛋白3％
生长因子1％
类固醇激素1％
脂肪酸2％
维生素1％
微量矿质元素2％。
用于胰腺癌细胞的新型培养液在Bxpc3,Panc1,miapan2细胞系培养中的应用。
申请人声明，以上所述仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，所属技术领域的技术人员应该明了，任何属于本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
Claims (6)
1. 一种用于胰腺癌细胞的新型培养液，其特征在于，上述培养液的组分按质量百分比为：1640培养基85～95%
白蛋白2～4%
生长因子0.8～1.2%
类固醇激素0.8～1.2%
脂肪酸1.5～2.5%
维生素0.5～1.5%
微量矿质元素1.5～2.5%。
2.根据权利要求1所述的用于胰腺癌细胞的新型培养液，其特征在于：培养液的组分按质量百分比为：1640培养基90%
白蛋白3%
生长因子1%
类固醇激素1%
脂肪酸2%
维生素1%
微量矿质元素2%。
3.基于权利要求1所述的用于胰腺癌细胞的新型培养液在Aspc1, Cfpac1细胞系培养中的应用。
4. 一种用于胰腺癌细胞的新型培养液，其特征在于，上述培养液的组分按质量百分比为：DMEM培养基85～95%
白蛋白2～4%
生长因子0.8～1.2%
类固醇激素0.8～1.2%
脂肪酸1.5～2.5%
维生素0.5～1.5%
微量矿质元素1.5～2.5%。
5.根据权利要求4所述的用于胰腺癌细胞的新型培养液，其特征在于：培养液的组分按质量百分比为：DMEM培养基90%
白蛋白3%
生长因子1%
类固醇激素1%
脂肪酸2%
维生素1%
微量矿质元素2%。
6.基于权利要求4所述的用于胰腺癌细胞的新型培养液在Bxpc3, Panc1, miapan2细胞系培养中的应用。
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Legal Events
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|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20201002 |
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