CN111334464B - 鹅副粘病毒在加快鹅成纤维细胞增殖速度中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于未分化的脊椎动物细胞或组织培养基技术领域，具体涉及一种鹅副粘病毒在加快鹅成纤维细胞增殖速度中的应用。鹅副粘病毒能够显著加快鹅成纤维细胞增殖速度。

Description

鹅副粘病毒在加快鹅成纤维细胞增殖速度中的应用
技术领域
本发明属于未分化的脊椎动物细胞或组织培养基技术领域，具体涉及鹅副粘病毒在加快鹅成纤维细胞增殖速度中的应用。
背景技术
皮肤组织工程是应用组织工程学方法，利用体外细胞培养技术将皮肤种子细胞姐终于细胞外基质所构成的三维支架上，构建在结构和功能上与政策皮肤类似的人工皮肤，以达到修复创面的目的。而组织工程皮肤的构建，首要问题是如何通过体外扩增得到足量有活力的皮肤种子细胞(“组织工程皮肤种子细胞学特性的研究”，董力等，西部医学，2009年第21卷第4期，第553页左栏第1段第1-7行，公开日2009年12月31日)。
目前，用于构建组织工程皮肤替代物的种子细胞主要有表皮细胞、成纤维细胞和干细胞等。其中，成纤维细胞的生物学作用广泛,增殖快,黏附力强,同时因为成纤维细胞、特别是胎儿来源的成纤维细胞免疫原性低,不引起机体明显的排斥反应，因此，成纤维细胞是目前皮肤组织工程应用最为广泛的种子细胞(“组织工程皮肤种子细胞的研究进展”，孙强等，感染、炎症、修复，2008年第9卷第1期，第55页左栏第1段第11-12行及右栏第6段第1-4行，公开日2008年12月31日)。
成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分，细胞呈梭形或扁的星状，具有突起。成纤维细胞是功能活动旺盛的细胞，细胞和细胞核较大，轮廓清楚，核仁大而明显，细胞质弱嗜碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动；处于成熟期或称静止状态的成纤维细胞，胞体变小，呈长梭形，粗面内质网和高尔基复合体均不发达，被称为纤维细胞。
然而，现有的用于鹅成纤维细胞培养的细胞培养基，将其用于鹅成纤维细胞培养时，鹅成纤维细胞的繁殖速度较慢。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于鹅副粘病毒在加快鹅成纤维细胞增殖速度中的应用。
除特殊说明外，所述百分比均为体积百分比。
为实现上述目的，本发明的技术方案为：
鹅副粘病毒在加快鹅成纤维细胞增殖速度中的应用。
发明人在研究过程中意外发现，鹅副粘病毒能够明显加快鹅成纤维细胞的增殖速度。
进一步，所述鹅副粘病毒为鹅副粘病毒NDV VG/GA毒株。
本发明的目的之二在于保护鹅成纤维细胞培养基。
鹅成纤维细胞培养基，包括DMEM培养基、胎牛血清和鹅副粘病毒。
所述DMEM的英文全称为dulbecco's modified eagle medium，中文译名为改良杜氏伊格尔培养基，是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基，是在MEM培养基的基础上研制的。与MEM比较增加了各种成分用量。
发明人意外发现，将以上培养基用于鹅成纤维细胞的培养，能够明显加快鹅成纤维细胞的增殖速度。
进一步，所述鹅副粘病毒为鹅副粘病毒NDV VG/GA毒株。
进一步，所述鹅成纤维细胞培养基，以体积百分比计，配比关系为：65％-75％DMEM培养基、5％-15％胎牛血清和15％-25％鹅副粘病毒。
本发明的目的还在于保护所述鹅成纤维细胞培养基的使用方法，细胞开始培养后6-24小时添加。
本发明的有益效果在于：
本发明的培养基能够明显加快鹅成纤维细胞的增殖速度。
具体实施方式
所举实施例是为了更好地对本发明的内容进行说明，但并不是本发明的内容仅限于所举实施例。所以熟悉本领域的技术人员根据上述发明内容对实施方案进行非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。
以下DMEM培养基购自上海生工生物工程有限公司，以下胎牛血清购自上海生工生物工程有限公司，以下NDV VG/GA毒株病毒液为美国农业部东南家禽研究所惠赠。
实施例1
鹅成纤维细胞培养基，其制备方法为：
按照体积百分比取65％DMEM培养基、10％胎牛血清和25％NDV VG/GA毒株病毒液，并混合均匀，即得。
对比例1
鹅成纤维细胞培养基，其制备方法为：
按照体积百分比取95％DMEM培养基和5％胎牛血清，并混合均匀，即得。
鹅成纤维细胞于37℃，5％CO2培养箱中培养6小时后，均分为两份，分别添加实施例1(实验组1)和对比例1(对照组1)的培养基，72h后分别采用赛默飞全自动细胞计数仪按照仪器操作说明检测细胞密度，经检测，实验组1和对照组1的细胞悬液密度分别为13000细胞/毫升和10000细胞/毫升(实验组1和对照组1除培养基不同外，其他处理方式相同)。
实施例2
鹅成纤维细胞培养基，其制备方法为：
按照体积百分比量取70％的DMEM培养基，5％胎牛血清和25％NDV VG/GA毒株病毒液，并混合均匀，即得。
对比例2
鹅成纤维细胞培养基，其制备方法为：
按照体积百分比量取96％DMEM培养基和4％胎牛血清，并混合均匀，即得。
鹅成纤维细胞于37℃，5％CO2培养箱中培养10小时后，均分为两份，分别添加实施例2(实验组2)和对比例2(对照组2)的培养基，72h后分别采用赛默飞全自动细胞计数仪按照仪器操作说明检测细胞密度，经检测，实验组2和对照组2的细胞悬液密度分别为12000细胞/毫升和10000细胞/毫升(实验组2和对照组2除培养基不同外，其他处理方式相同)。
实施例3
鹅成纤维细胞培养基，其制备方法为：
按照体积百分比量取75％的DMEM培养基，15％胎牛血清和10％NDV VG/GA毒株病毒液，并混合均匀，即得。
对比例3
鹅成纤维细胞培养基，其制备方法为：
按照体积百分比量取96％DMEM培养基和4％胎牛血清，并混合均匀，即得。
鹅成纤维细胞于37℃，5％CO2培养箱中培养12小时后，均分为两份，分别添加实施例3(实验组3)和对比例3(对照组3)的培养基，72h后分别采用赛默飞全自动细胞计数仪按照仪器操作说明检测细胞密度，经检测，实验组3和对照组3的细胞悬液密度分别为15000细胞/毫升和10000细胞/毫升(实验组3和对照组3除培养基不同外，其他处理方式相同)。
实施例4
鹅成纤维细胞培养基，其制备方法为：
按照体积百分比量取75％的DMEM培养基，15％胎牛血清和10％NDV VG/GA毒株病毒液，并混合均匀，即得。
对比例4
鹅成纤维细胞培养基，其制备方法为：
按照体积百分比量取97％DMEM培养基和3％胎牛血清，并混合均匀，即得。
鹅成纤维细胞于37℃，5％CO2培养箱中培养24小时后，均分为两份，分别添加实施例4(实验组4)和对比例4(对照组4)的培养基，72h后分别采用赛默飞全自动细胞计数仪按照仪器操作说明检测细胞密度，经检测，实验组4和对照组4的细胞悬液密度分别为15000细胞/毫升和10000细胞/毫升(实验组4和对照组4除培养基不同外，其他处理方式相同)。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (4)

1.鹅副粘病毒在加快鹅成纤维细胞增殖速度中的应用，其特征在于，所述鹅副粘病毒为鹅副粘病毒NDV VG/GA毒株。
2.鹅成纤维细胞培养基，其特征在于，包括DMEM培养基、胎牛血清和鹅副粘病毒；所述鹅副粘病毒为鹅副粘病毒NDV VG/GA毒株。
3.根据权利要求2所述的鹅成纤维细胞培养基，其特征在于，以体积百分比计，配比关系为：65%-75%DMEM培养基、5%-15%胎牛血清和15%-25%鹅副粘病毒。
4.权利要求2或3所述鹅成纤维细胞培养基的使用方法，其特征在于，细胞开始培养后6-24小时添加所述培养基。
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