CN111728985B - 一种以蛤蟆油为主要成分的组合物及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种具有防治前列腺作用的天然药物组合物，该组合物由蛤蟆油及显齿蛇葡萄总黄酮所组成，经药理试验证明该组合物具有防治前列腺炎和前列腺增生等作用，具有在制备防治前列腺疾病的药物中的新用途。本发明组合物的各组份之间产生了良好的协同作用，疗效显著，且原料易得，成本相对较低，具有较强的实用性。并阐述了组合物的药物制剂，可以是片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、混悬剂、滴丸剂、软膏剂、栓剂直肠给药制剂中的任何一种。

Description

一种以蛤蟆油为主要成分的组合物及其用途

技术领域

本发明是关于以蛤蟆油及显齿蛇葡萄总黄酮组成的组合物的医药新用途，具体的说是蛤蟆油及显齿蛇葡萄总黄酮组成的组合物在制备前列腺疾病药物中的应用，也涉及该药物的药物制剂，本发明属于医药技术领域。

背景技术

近年来，前列腺疾病呈上升和年轻化趋势，前列腺增生和前列腺炎是男性前列腺的常见疾病。前列腺增生，是男性老年病人的常见疾病之一。随着年龄的增加，男人们或多或少都有前列腺增生的现象发生。有研究表明前列腺增生始于40岁以后，但60岁以上的老年人更为多见。前列腺增生的主要症状有排尿困难，轻者夜里起床小便次数增多，有尿不净或尿完后还有少量排出的现象；严重者出现尿流变细，甚或排不出的现象；同时常伴有腰酸腰痛、四肢无力、遗精等症状。前列腺增生严重者必须手术摘除，一般保守疗法，包括手部按摩，效果都不太满意。前列腺炎分急性和慢性两种。急性前列腺炎以膀胱刺激症状和终末血尿、会阴部疼痛为主要症状，但临床较少见。慢性前列腺炎以排尿延迟、尿后滴尿，或滴出白色前列腺液，或引起遗精、阳痿、早泄等为主要症状。慢性前列腺炎是一种常见和多发的泌尿科疾患，据统计，35岁以上男性30-40％患有不同程度的慢性前列腺炎(江苏中医，2000，(2)：43)，本病原因复杂，症状繁多，病程迁延，顽固难愈，严重影响成年男性的身心健康，因此，一个安全有效的治疗前列腺药物，正是慢性前列腺患者所需要的。

哈蟆油为蛙科动物中国林蛙(Rana temporaria chensinensis Dav id)雌蛙的输卵管，经采制干燥而得。哈蟆油又称为林蛙油、田鸡油、哈什蟆油、雪蛤油。黑龙江、吉林、辽宁为主要产地，其中以吉林为主。哈蟆油味甘、咸，性平，具有补肾益精、健脾益胃、滋阴补肾、润肺生津等功效。哈蟆油作为一种扶正固本药，对体弱气虚、精力耗损、记忆力不佳、神经衰弱等疗效较好，富有滋补“软黄金”的美誉，清代曾被列为皇室供品，也是我国东北特产、闻名中外的名贵食疗性中药。化学成分主要含有蛋白质、氨基酸类；脂肪酸类；激素；磷脂类；核酸类；固醇类；维生素类等。目前为止，药理研究表明，哈蟆油具有提高机体免疫功能与应激性能作用、抗氧化与抗衰老作用、调节血脂作用、对生长发育和性功能的影响、耐缺氧、抗焦虑作用、抗疲劳作用、对运动失调的调节作用。

显齿蛇葡萄是国家规定的新资源食品。显齿蛇葡萄总黄酮是从葡萄科蛇葡萄属植物显齿蛇葡萄(藤茶)Ampelopsis Grossedenta(Hand-Mazz.)W.T.Wa中提取纯化而得。显齿蛇葡萄嫩茎叶中总黄酮的含量高达43.4％-45.52％。显齿蛇葡萄中的黄酮化合物种类多样，有二氢杨梅素、槲皮素、花旗松素、山奈酚、显齿蛇葡萄素、杨梅苷、橙皮素、洋芹素等。其中二氢杨梅素是显齿蛇葡萄中的主要活性成分。显齿蛇葡萄为民间传统用药，早在《名医别录》中就有记载，广泛用于消炎解毒，治疗骨髓炎，急性淋巴结炎，急性乳腺炎，脓疱疮，湿疹，丹毒疖肿，嗜盐菌食物中毒等。并可治疗恶心，呕吐腹泻兼能通利小便；预防肝内部分纤维变化为肝硬化。研究表明，显齿蛇葡萄总黄酮毒性小，小鼠灌胃给药，最大耐受量为22.5g/kg(钟正贤，广西藤茶总黄酮保肝作用的实验研究，广西科学，2002，第1期，57)，并且具有广泛的生理活性，其抗氧化作用可清除氧自由基，可抑制机体内的氧化损伤，免疫功能的调节作用可调节人体免疫机能；降低血糖血脂作用可用于防治糖尿病、动脉粥样硬化、高血脂等症。显齿蛇葡萄含有二氢杨梅素，具有明显的保肝护肝作用，抑制脂肪肝的形成。研究发现蛇葡萄中的杨梅树皮素能明显降低四氯化碳、D-半乳糖胺和异硫氰酸萘酯致小鼠急性肝损伤模型血清中ALT、AST活性和T-BIL含量，减轻肝组织的变性和坏死，从而达到保肝降酶退黄的作用。陈晓军研究表明显齿蛇葡萄总黄酮可明显降低蛋黄型高脂血症小鼠血清TC、TG及AI值，对实验性高脂血症鹌鹑可明显降低血清TC、TG，升高血清HDL-C，降低AI值；明显减少主动脉及肝脏TC含量，抑制动脉粥样硬化及肝脏脂肪化病变，具有降血脂、抗动脉粥样硬化和抑制脂肪肝形成的作用(广西中医药，2001，第5期，53)。

本发明完成前未发现有关蛤蟆油及显齿蛇葡萄总黄酮组成的组合物作为防治前列腺疾病的药物的报道,也未发现蛤蟆油及显齿蛇葡萄总黄酮组成的组合物用于防治前列腺疾病的临床方面应用。

发明内容

本发明的目的是提供一种可以防治前列腺疾病的药物组合物，具体地说，以蛤蟆油及显齿蛇葡萄总黄酮组成的组合物具有在制备前列腺疾病的药物中的新用途。更具体地以蛤蟆油及显齿蛇葡萄总黄酮组成的组合物在预防和治疗前列腺疾病的药物及保健品中的应用。这种天然的药物组合物是本发明人首次通过实验筛选得到，也体现了复方中药的协同作用，具有突出的贡献及显著的技术进步。

本发明另一个突出贡献在于，将可以食用的蛤蟆油、显齿蛇葡萄总黄酮首次组合成组合物，首次用于保健食品或食品。本发明组方含有蛋白质、氨基酸、脂肪酸、激素、维生素及黄酮类化合物，体现了本组方的显著特色及技术进步。同时，本品制备工艺简单，体现了价格低廉的优点。并且本品疗效确切，无毒副作用，服用方便，剂型科学，体现了本发明的实用性。

本发明以蛤蟆油及显齿蛇葡萄总黄酮组方，通过调节人体的激素水平，提高机体免疫功能与应激性能，抗菌，抗炎等方面入手，达到治疗作用。体现了中药化学成分之间协同增效，多靶点、多部位入手，从而达到治疗前列腺疾病的作用，具有组方的新颖性和创新性。

本发明提供了一种由蛤蟆油为主要成分的组合物在制备前列腺疾病防治的药物中的应用，其特征在于，它是由下述重量份的原料制成：蛤蟆油1-50份，显齿蛇葡萄总黄酮2-25份。优选蛤蟆油25份，显齿蛇葡萄总黄酮10份。其按照比例混合组成活性成份与药用辅料制成的。

本发明的另一目的是提供了本发明组合物的制备方法：

a.取蛤蟆油，用去离子水清洗，冷冻干燥。粉碎成细粉，备用；

b.取显齿蛇葡萄叶，用30-75％乙醇回流提取2-3次，每次2-3小时，过滤，合并滤液，加入药液体积0.1-2.0％药用活性炭，搅拌均匀，滤过，滤液回收乙醇，浓缩，滤过，滤饼干燥，粉碎成细粉，即得；

c.将蛤蟆油细粉、显齿蛇葡萄总黄酮细粉按照比例混合均匀后，加入辅料均匀，即得。

由于本发明首次公开了由蛤蟆油、及显齿蛇葡萄总黄酮组成的组合物具有治疗前列腺炎及前列腺增生的作用，因此，将本组合物单独或与其它活性组份或辅料配合制成药剂，只要是该药剂具有治疗前列腺炎及前列腺增生的作用，均属于本发明的保护范围。本发明的组合物在制成任何一种剂型时，具有治疗前列腺炎及前列腺增生的作用，均在本发明的保护范围。

由蛤蟆油、及显齿蛇葡萄总黄酮组成的组合物(简称组合物)具有治疗前列腺炎及前列腺增生的作用，通过以下药效学实验得到证实。

实验原料：本药效学中用到的组合物及单一提取物均为发明人提供。

本药效学试验中提到的蛤蟆油为实例1提取的样品；显齿蛇葡萄总黄酮为实例2提取的样品；本发明组合物是实例3制备的样品(蛤蟆油：显齿蛇葡萄总黄酮＝2.5：1)。

1、本发明组合物的抗炎作用

1.1本发明组合物对二甲苯所致小鼠耳廓炎症肿胀的影响

取小鼠70只，雄性，体重(20±2)g，随机分成7组，按照表1灌胃给药，每天1次，连续7d，于末次给药1h后，将二甲苯0.3mL滴于小鼠右耳，左耳不涂做对照。2h后将小鼠颈部脱臼处死，用直径9mm的打孔器分别在左、右耳同一部位打下圆耳片，称重，计算左、右耳片重量之差作为肿胀度，比较组间差异。结果见表1。

表1、对二甲苯所致小鼠耳廓炎症肿胀的影响(n＝10，X±SD)

**P＜0.01，*P＜0.05。与对照组比较

从表1可见，组合物高、中、低三种剂量对二甲苯所致小鼠耳廓炎症肿胀均具有显著的抑制作用，表明它们均具有显著的抗炎作用。同样，阳性对照药物吲哚美辛灌胃后，也具有显著的抗炎作用。本发明组合物同相同剂量蛤蟆油及显齿蛇葡萄总黄酮相比，活性更强。

1.2本发明组合物对大鼠棉球肉芽肿形成的影响

取大鼠70只，按性别及体重随机分为7组。按棉球置入法操作步骤于腹股沟皮下各埋植(30±1)mg的消毒棉球。术后当日给药，剂量同表2，连续7d，于第8d处死动物，剥离并取出棉球肉芽组织，置6O℃烤箱干燥12h后称重，计算肿胀度及抑制率。

表2、对大鼠棉球肉芽肿形成的影响(n＝10，X±SD)

**P＜0.01，*P＜0.05。与对照组比较

从表2可见，本发明组合物三个剂量，对大鼠棉球肉芽肿形成具有显著的抑制作用，具显著的抗炎作用。与生理盐水对照组比较，显示对肉芽增生性炎症具有显著的抗炎作用。吲哚美辛对肉芽增生性炎症亦具有显著的抗炎作用。本发明组合物同相同剂量蛤蟆油及显齿蛇葡萄总黄酮相比，活性更强。

2、本发明组合物对前列腺增生的治疗作用

2.1本发明组合物对丙酸睾丸素致去势大鼠前列腺增生的作用

取雄性大鼠90只，其中10只在无菌术下切开阴囊后缝合为对照组，另80只在无菌下手术切除双侧睾丸，一周后随机分为8组，按表3给药。每天1次，连续灌胃给药14天后(同时皮下注射丙酸睾丸素5mg/kg)，与阴性模拟组比较，本发明组合物高、中二个剂量组大鼠的前列腺重量、前列腺指数有所减少(P＜0.01)。保列治逆转前列腺增生的作用最强。高剂量本发明组合物的作用与前列康作用相近，但弱于保列治的作用。本发明组合物同相同剂量蛤蟆油及显齿蛇葡萄总黄酮相比，活性更强。

表3、组合物对去势大鼠前列腺增生的治疗(n＝10，X±SD)

**P＜0.01，*P＜0.05。与阴性对照组比较

2.2本发明组合物对小鼠前列腺增生的治疗作用

取雄性小鼠90只，留下10只作正常对照，其余小鼠每天依次皮下注射丙酸睾丸素5mg/kg，21天后，处死其中10只小鼠，正常对照小鼠亦同样处死，称取体重和前列腺重并作病理组织学切片镜检，证实前列腺有增生后，将余下小鼠均分为8组，每组10只，按表4所示剂量灌胃给药。每日1次，对照组和模型对照组给予等体积水，连续1个月。末次给药后称量小鼠体重，将动物处死，剖取前列腺称重，并作病理组织学切片镜检。结果见表4。

表4、组合物对实验性小鼠前列腺增生的治疗作用(X±SD)

**P＜0.01，*P＜0.05。与阴性对照组比较

结果表明：注射丙酸睾丸素21天后，小鼠的前列腺重明显示增大，前列腺腺体明显增生。具有前列腺增生的小鼠服用本品1个月后，其前列腺重量给药组与模型对照组比较明显减轻；前列腺指数亦显著偏小，镜检治疗组前列腺增生程度较对照组明显减轻，近乎正常。对小鼠的体重无明显差异。本发明组合物同相同剂量蛤蟆油及显齿蛇葡萄总黄酮相比，活性更强。

3、本发明组合物对动物实验性非细菌性前列腺炎的治疗作用

3.1本发明组合物对角叉菜胶致小鼠前列腺炎的影响

取雄性小鼠80只，随机分为8组，按表5所示剂量每日灌胃给药一次，共给药14天，第15天用3％戊巴比妥钠腹腔麻醉，无菌术下，下腹部切开，在靠近前列腺头叶的精囊腺注射1％角叉菜胶0.1ml，正常对照组注入注射用0.9％的氯化钠0.1ml，缝合后在给药一次，第16日处死小鼠，用微型进样器去10ul前列腺液，记白细胞数，结果见表5。取出前列腺用10％甲醛溶液固定，进行组织学检查。

表5、组合物对角叉菜胶致小鼠前列腺炎的影响(n＝10，X±SD)

**P＜0.01。与阴性对照组比较

从表5可以看出，阴性模型组的白细胞显著增加，组合物各剂量组和前列康组的白细胞显著减少。与阴性模型组比较有显著性差异。本发明组合物同相同剂量蛤蟆油及显齿蛇葡萄总黄酮相比，活性更强。

3.2本发明组合物对角叉菜胶致大鼠前列腺炎的影响

取雄性大鼠80只，随机分为8组，按表6所示剂量每日灌胃给药一次，共给药14天，第15天用3％戊巴比妥钠腹腔麻醉，无菌术下，下腹部切开，在靠近前列腺头叶的精囊腺注射1％角叉菜胶0.1ml，正常对照组注入注射用0.9％的氯化钠0.1ml，缝合后在给药一次，第16日处死小鼠，用微型进样器取10ul前列腺液，记白细胞数，结果见表6。取出前列腺用10％甲醛溶液固定，进行组织学检查。

表6、组合物对角叉菜胶致大鼠前列腺炎的影响(n＝10，X±SD)

**P＜0.01。与阴性对照组比较

从表6可以看出，阴性模型组的白细胞显著增加，组合物各剂量组和前列康组的白细胞显著减少。与阴性模型组比较有显著性差异。本发明组合物同相同剂量蛤蟆油及显齿蛇葡萄总黄酮相比，活性更强。

从以上的药效学实验可知，本发明组合物具有治疗前列腺增生和/或前列腺炎的作用。

本发明是通过如下的实验施例得以实现(证实)。

实例1蛤蟆油的制备方法

取蛤蟆油2kg，用去离子水清洗，冷冻干燥，粉碎成细粉，即得。

实例2显齿蛇葡萄总黄酮的制备方法

取显齿蛇葡萄叶5kg，用10倍量50％乙醇回流提取3次，每次2小时，滤过，合并滤液，加入200g药用活性炭，搅拌均匀，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至5000ml，滤过，滤饼干燥，粉碎成细粉，以芦丁为对照品，采用紫外分光光度法测定，总黄酮的含量为80.8％。

实例3组合物的制备方法

取蛤蟆油细粉250g，显齿蛇葡萄总黄酮细粉100g，混合均匀，即得。

Claims (6)

1.一种由蛤蟆油和显齿蛇葡萄总黄酮组成的组合物在制备前列腺疾病治疗药物中的应用，其特征在于：所述的前列腺疾病为前列腺炎或前列腺增生；所述组合物由蛤蟆油及显齿蛇葡萄总黄酮所组成；由下述重量份的原料制成：蛤蟆油细粉1-50份，显齿蛇葡萄总黄酮细粉2-25份；

所述组合物的制备方法，包括以下步骤：

a.取蛤蟆油，用去离子水清洗，冷冻干燥，粉碎成细粉，得蛤蟆油细粉；

b.取显齿蛇葡萄叶，用30-75%乙醇回流提取2-3次，每次2-3小时，过滤，合并滤液，加入药液体积0.1-2.0%药用活性炭，搅拌均匀，滤过，滤液回收乙醇，浓缩，滤过，滤饼干燥，粉碎成细粉，即得显齿蛇葡萄总黄酮细粉；

c.将蛤蟆油细粉、显齿蛇葡萄总黄酮细粉按照比例混合均匀后，加入辅料混合均匀，即得。

2.根据权利要求1所述的一种由蛤蟆油和显齿蛇葡萄总黄酮组成的组合物在制备前列腺疾病治疗药物中的应用，其特征在于，它是由下述重量份的原料制成：蛤蟆油细粉25份，显齿蛇葡萄总黄酮细粉10份。

3.一种药物制剂，其特征在于：含有治疗有效剂量的由蛤蟆油和显齿蛇葡萄总黄酮组成的组合物，和一种或多种药学上可接受的药用赋形剂，所述组合物由蛤蟆油及显齿蛇葡萄总黄酮所组成；由下述重量份的原料制成：蛤蟆油细粉1-50份，显齿蛇葡萄总黄酮细粉2-25份；

所述组合物的制备方法，包括以下步骤：

a.取蛤蟆油，用去离子水清洗，冷冻干燥，粉碎成细粉，得蛤蟆油细粉；

b.取显齿蛇葡萄叶，用30-75%乙醇回流提取2-3次，每次2-3小时，过滤，合并滤液，加入药液体积0.1-2.0%药用活性炭，搅拌均匀，滤过，滤液回收乙醇，浓缩，滤过，滤饼干燥，粉碎成细粉，即得显齿蛇葡萄总黄酮细粉；

c.将蛤蟆油细粉、显齿蛇葡萄总黄酮细粉按照比例混合均匀后，加入辅料混合均匀，即得。

4.根据权利要求3所述的药物制剂，其特征在于所述的制剂选自于片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、混悬剂、滴丸剂中的任何一种。

5.根据权利要求3所述的药物制剂，其特征在于所述药用赋形剂包括填充剂、崩解剂，填充剂选自淀粉、乳糖、微晶纤维素、糊精、磷酸钙中的一种或两种；崩解剂选自羧甲基淀粉钠、羟丙纤维素、交联聚维酮中的一种或两种。

6.根据权利要求3所述的药物制剂，其特征在于所述药用赋形剂还包括黏合剂、润湿剂和润滑剂。