CN111714580A - 一种麻芩消咳药物在制备抗过敏性哮喘药物中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种麻芩消咳药物在制备抗过敏性哮喘药物中的应用，所述麻芩消咳药物是由蜜麻黄116‑117重量份，桑白皮116‑117重量份，金银花232‑233重量份，黄芩117‑118重量份，百蕊草212‑213重量份，石膏212‑214重量份，浙贝母117‑118重量份，苦杏仁117‑118重量份，紫苏子117‑118重量份，款冬花117‑118重量份。本发明麻芩消咳颗粒对卵蛋白诱导的大鼠过敏性哮喘具有明显的的保护作用，可通过改善炎性反应，重塑气道以及降低血清中IgE、IL‑4水平等机制，来改善大鼠哮喘，本发明测试方法，测试效果准确，可以充分证明麻芩消咳颗粒具有抗过敏性哮喘的作用。

Description

一种麻芩消咳药物在制备抗过敏性哮喘药物中的应用
技术领域
本发明涉及中药药物制剂的领域，具体涉及一种麻芩消咳药物在制备抗过敏性哮喘药物中的应用。
技术背景
哮喘是由多种细胞和细胞组分参与的气道慢性炎症为特征的异质性疾病，这种慢性炎症与气道高反应性相关，通常出现广泛而多变的可逆性呼气气流受限，导致反复发作的喘息、气促、胸闷和咳嗽等症状，强度随时间变化。哮喘多在夜间和清晨发作、加剧，如诊治不及时，可产生气道不可逆性缩窄和气道重塑。目前，全球哮喘人群超过3.58亿，我国占其中6.67％，年龄分布广泛，不受性别限制。
过敏性哮喘是哮喘的一种最常见类型，流行病学研究表明全世界人口的5％～16％都患有过敏性哮喘。过敏性哮喘主要是由吸入性过敏原引起的一系列哮喘症状，持久的气道炎性反应是过敏性哮喘的主要病理学改变。这些改变包括支气管黏膜肿胀、分泌物增多、气道内炎症细胞浸润、气道平滑肌痉挛等。过敏性哮喘长期反复发作易损害患者肺功能，引起呼吸衰竭、肺心病等严重疾病，处于发作期的患者，需要及时控制病情。儿童由于免疫系统尚未完全成熟，乃是该病的多发人群，尤其是中、重度过敏性哮喘对患儿的生命健康安全造成了严重威胁。作为复杂疾病，哮喘发病机制多元，且至今仍未有令人满意的治疗方案。
西医治疗哮喘，主要的药物类型包括有支气管舒张剂、消除非特异炎症药物、抑制过敏介质释放药物、免疫抑制药物等，能起到部分缓解哮喘症状的作用，但不能改变病程，难以达到根治的目的。哮喘属于中医学“哮病”“喘证”等范畴，其形成外因于六淫之邪，内因于痰饮、气壅、虚劳，病位在肺，与五脏相关。中医药以其毒副作用小，耐受性好，在哮喘的治疗与管理中具有重要优势，但是目前中医药治疗哮喘的研究主要集中在个人经验的报道方面，开发成的治疗过敏性哮喘的中成药较少。
发明内容
本发明提供了一种由蜜麻黄、桑白皮、金银花、黄芩、百蕊草、石膏、浙贝母、苦杏仁、紫苏子、款冬花、葶苈子、地龙、姜半夏、炒白果仁、炙甘草组成的麻芩消咳药物在制备抗过敏性哮喘药物中的应用。
为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：
一种麻芩消咳药物在制备抗过敏性哮喘药物中的应用，所述麻芩消咳药物是由蜜麻黄116-117重量份，桑白皮116-117重量份，金银花232-233重量份，黄芩117-118重量份，百蕊草212-213重量份，石膏212-214重量份，浙贝母117-118重量份，苦杏仁117-118重量份，紫苏子117-118重量份，款冬花117-118重量份，葶苈子117-118重量份，地龙212-213重量份，姜半夏83-84重量份，炒白果仁117-118重量份，炙甘草83-84重量份组成的中药组合物制备的；
所述抗过敏性哮喘药物成分包含麻芩消咳药物成分；
所述麻芩消咳药物在制备抗过敏性哮喘药物中的应用包含测试麻芩消咳药物抗过敏性哮喘效果的实验方法，包括如下步骤：
1、实验材料准备；
1.1实验动物；
准备健康雄性SD大鼠，180-200g，动物于24±2℃，相对湿度50％～60％，昼夜交替时间12h条件下饲养，1周后用于实验；
1.2、准备实验药物与试剂；
(1)麻芩消咳颗粒；
(2)肺宁颗粒；
(3)咳喘宁口服液；
(4)氨茶碱片；
(5)卵蛋白；
(6)Ig E ELISA试剂盒；
(7)IL-4ELISA试剂盒；
1.3准备实验仪器：
(1)酶标仪；
(2)精密电子天平；
(3)超声雾化器；
2、实验方法：
2.1药物配制：
(1)阳性药氨茶碱组：取氨茶碱片，研钵研碎后加入超纯水溶解，得5mg/ml肺宁颗粒溶液，即给药剂量为50mg/kg；
(2)阳性药肺宁颗粒组：取肺宁颗粒，加入超纯水溶解，得0.25g/ml肺宁颗粒溶液，即给药剂量为2.5g/kg；
(3)阳性药咳喘宁组：量取咳喘宁口服液，加入超纯水稀释，得0.17ml/ml肺宁颗粒溶液，即给药剂量为1.7ml/kg；
(4)麻芩消咳颗粒高剂量组：取麻芩消咳颗粒，加入超纯水溶解，得0.4g/ml麻芩消咳颗粒溶液，即给药剂量为4g/kg；
(5)麻芩消咳颗粒中剂量组：取麻芩消咳颗粒，加入超纯水溶解，得0.2g/ml溶液，即给药剂量为2g/kg；
(6)麻芩消咳颗粒低剂量组：取麻芩消咳颗粒，加入超纯水溶解，得0.1g/ml麻芩消咳颗粒溶液，即给药剂量为1g/kg；
(7)麻芩消咳颗粒最低剂量组：取麻芩消咳颗粒，加入超纯水溶解，得0.05g/ml麻芩消咳颗粒溶液，即给药剂量为0.5g/kg；
2.2动物分组和给药；
准备SD大鼠，适应性喂养3天后，随机分组：空白组、模型组，阳性药物组，给药组：麻芩消咳颗粒最低、低、中、高剂量组，除空白组外各组参照改良Palmans方法致敏建立哮喘模型，即每只造模大鼠第1天和第8天皮下多点注射含10mg OVA和100mg Al(OH)3的1mL生理盐水混悬液致敏，空白组以生理盐水代替，第15天开始，用1％的OVA生理盐水溶液激发哮喘，每次30min，共4周，从激发第一天开始给药，空白、模型组给予溶媒灌胃；
2.3肺组织的病理学-苏木素-伊红HE染色；
在大鼠最后一次激发造模后，腹主动脉取血，暴露胸腔，统一取动物左肺，用10％甲醛固定，制作石蜡切片，HE染色观察肺组织病理学变化，观察肺泡上皮细胞的损伤程度、感染严重程度以及肺泡壁增厚程度；
2.4血清的生化指标测定；
各组大鼠腹主动脉取血5mL，静置30min，3000r/min离心15min，取上清液，于-80℃冰箱保存，按照ELISA试剂盒说明书步骤检测各组大鼠血清中免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素-4(IL-4)含量；
2.5统计学处理；
实验数据以均数±标准差x±S表示，采用单因素方差分析ANOVA对数据进行统计分析，P<0.05有统计学意义；
3实验结果；
3.1麻芩消咳颗粒对过敏性哮喘大鼠肺部组织的影响；
在卵蛋白雾化造模后，取大鼠左肺，经10％甲醛固定后，HE染色观察各组大鼠肺部组织变化；
3.2麻芩消咳颗粒对过敏性哮喘大鼠血清各指标的影响；
(1)血清IgE指标：血清IgE指标检测结果：与空白组相比，记录对比结果；
(2)血清IL-4指标：血清IL-4指标检测结果，与空白组相比，记录对比结果。
本发明的有益效果：1、通过空白组大鼠肺组织结构清晰，无气道重塑表现及炎性细胞浸润。与空白组比较，模型组大鼠肺组织紊乱，支气管管腔狭窄，支气管壁厚明显增加，支气管和肺泡间质大量炎性细胞浸润。阳性药中氨茶碱的改善作用不明显，肺宁颗粒和咳喘宁口服液能够改善哮喘大鼠的气道重塑表现，给药组各个剂量组可以不同程度的改善炎性反应和气道重塑表现，其中以低剂量和中剂量效果最好。
2、血清IgE指标：与空白组相比，模型组大鼠血清中IgE含量显著升高(P＜0.01)，说明哮喘大鼠肥大细胞脱敏粒引发炎症反应明显，阳性药中肺宁颗粒(P＜0.01)和咳喘宁口服液(P＜0.05)均可降低IgE的水平，氨茶碱效果不显著；给药组中，各个剂量组均可显著降低哮喘大鼠血清中IgE的水平(P＜0.01)，且各给药组哮喘大鼠血清中IgE水平与空白组相当。血清IL-4指标的测试效果，血清IL-4指标检测结果，与空白组相比，模型组大鼠血清中IL-4分泌增多，IL-4是Th2细胞因子中的重要一员，可以诱导B细胞内IgE的合成分泌，促进肥大细胞的脱敏粒引发炎症反应，该结果说明哮喘大鼠中免疫失衡；阳性药中，肺宁颗粒具有较好抑制IL-4上升的作用(P＜0.05)，氨茶碱和咳喘宁有下降趋势但没有显著性；给药组中，各个剂量均可逆转哮喘大鼠血清中IL-4的增加(P＜0.05)，且各给药组哮喘大鼠血清中IL-4水平与空白组相当。
本实验结果表明，麻芩消咳颗粒对卵蛋白诱导的大鼠过敏性哮喘具有明显的的保护作用，可通过改善炎性反应，重塑气道以及降低血清中IgE、IL-4水平等机制，来改善大鼠哮喘，本发明测试方法，测试效果准确，可以充分证明麻芩消咳颗粒具有抗过敏性哮喘的作用。
附图说明
图1为空白组大鼠肺部组织的HE染色显微图；
图2为模型组大鼠肺部组织的HE染色显微图；
图3为氨茶碱组大鼠肺部组织的HE染色显微图；
图4为肺宁颗粒组大鼠肺部组织的HE染色显微图；
图5为咳喘宁大鼠肺部组织的HE染色显微图；
图6为麻芩消咳药物最低剂量组大鼠肺部组织的HE染色显微图；
图7为麻芩消咳药物低剂量组大鼠肺部组织的HE染色显微图；
图8为麻芩消咳药物中剂量组大鼠肺部组织的HE染色显微图；
图9为麻芩消咳药物高剂量组大鼠肺部组织的HE染色显微图；
图10为测试实验方法中各组血清中IgE水平对比图；
图11为测试实验方法中各组血清中IL-4水平对比图；
具体实施方式
一种麻芩消咳药物在制备抗过敏性哮喘药物中的应用，所述麻芩消咳药物是由蜜麻黄116-117重量份，桑白皮116-117重量份，金银花232-233重量份，黄芩117-118重量份，百蕊草212-213重量份，石膏212-214重量份，浙贝母117-118重量份，苦杏仁117-118重量份，紫苏子117-118重量份，款冬花117-118重量份，葶苈子117-118重量份，地龙212-213重量份，姜半夏83-84重量份，炒白果仁117-118重量份，炙甘草83-84重量份组成的中药组合物制备的；
所述抗过敏性哮喘药物成分包含麻芩消咳药物成分；
所述麻芩消咳药物在制备抗过敏性哮喘药物中的应用包含测试麻芩消咳药物抗过敏性哮喘效果的实验方法，包括如下步骤：
1、实验材料准备；
1.1实验动物；
准备健康雄性SD大鼠，180-200g，动物于24±2℃，相对湿度50％～60％，昼夜交替时间12h条件下饲养，1周后用于实验；
1.2、准备实验药物与试剂；
(1)麻芩消咳颗粒；
(2)肺宁颗粒；
(3)咳喘宁口服液；
(4)氨茶碱片；
(5)卵蛋白；
(6)Ig E ELISA试剂盒；
(7)IL-4ELISA试剂盒；
1.3准备实验仪器：
(1)酶标仪；
(2)精密电子天平；
(3)超声雾化器；
2、实验方法：
2.1药物配制：
(1)阳性药氨茶碱组：取氨茶碱片，研钵研碎后加入超纯水溶解，得5mg/ml肺宁颗粒溶液，即给药剂量为50mg/kg；
(2)阳性药肺宁颗粒组：取肺宁颗粒，加入超纯水溶解，得0.25g/ml肺宁颗粒溶液，即给药剂量为2.5g/kg；
(3)阳性药咳喘宁组：量取咳喘宁口服液，加入超纯水稀释，得0.17ml/ml肺宁颗粒溶液，即给药剂量为1.7ml/kg；
(4)麻芩消咳颗粒高剂量组：取麻芩消咳颗粒，加入超纯水溶解，得0.4g/ml麻芩消咳颗粒溶液，即给药剂量为4g/kg；
(5)麻芩消咳颗粒中剂量组：取麻芩消咳颗粒，加入超纯水溶解，得0.2g/ml溶液，即给药剂量为2g/kg；
(6)麻芩消咳颗粒低剂量组：取麻芩消咳颗粒，加入超纯水溶解，得0.1g/ml麻芩消咳颗粒溶液，即给药剂量为1g/kg；
(7)麻芩消咳颗粒最低剂量组：取麻芩消咳颗粒，加入超纯水溶解，得0.05g/ml麻芩消咳颗粒溶液，即给药剂量为0.5g/kg；
2.2动物分组和给药；
准备SD大鼠，适应性喂养3天后，随机分组：空白组、模型组，阳性药物组，给药组：麻芩消咳颗粒最低、低、中、高剂量组，除空白组外各组参照改良Palmans方法致敏建立哮喘模型，即每只造模大鼠第1天和第8天皮下多点注射含10mg OVA和100mg Al(OH)3的1mL生理盐水混悬液致敏，空白组以生理盐水代替，第15天开始，用1％的OVA生理盐水溶液激发哮喘，每次30min，共4周，从激发第一天开始给药，空白、模型组给予溶媒灌胃；
2.3肺组织的病理学-苏木素-伊红HE染色；
在大鼠最后一次激发造模后，腹主动脉取血，暴露胸腔，统一取动物左肺，用10％甲醛固定，制作石蜡切片，HE染色观察肺组织病理学变化，观察肺泡上皮细胞的损伤程度、感染严重程度以及肺泡壁增厚程度；
2.4血清的生化指标测定；
各组大鼠腹主动脉取血5mL，静置30min，3000r/min离心15min，取上清液，于-80℃冰箱保存，按照ELISA试剂盒说明书步骤检测各组大鼠血清中免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素-4(IL-4)含量；
2.5统计学处理；
实验数据以均数±标准差x±S表示，采用单因素方差分析ANOVA对数据进行统计分析，P<0.05有统计学意义；
3实验结果；
3.1麻芩消咳颗粒对过敏性哮喘大鼠肺部组织的影响；
在卵蛋白雾化造模后，取大鼠左肺，经10％甲醛固定后，HE染色观察各组大鼠肺部组织变化；
3.2麻芩消咳颗粒对过敏性哮喘大鼠血清各指标的影响；
(1)血清IgE指标；
血清IgE指标检测结果如图2所示。与空白组相比，模型组大鼠血清中IgE含量显著升高(P＜0.01)，说明哮喘大鼠肥大细胞脱敏粒引发炎症反应明显。阳性药中肺宁颗粒(P＜0.01)和咳喘宁口服液(P＜0.05)均可降低IgE的水平，氨茶碱效果不显著；给药组中，各个剂量组均可显著降低哮喘大鼠血清中IgE的水平(P＜0.01)，且各给药组哮喘大鼠血清中IgE水平与空白组相当。
(2)血清IL-4指标；
血清IL-4指标检测结果如图3所示，与空白组相比，模型组大鼠血清中IL-4分泌增多，IL-4是Th2细胞因子中的重要一员，可以诱导B细胞内IgE的合成分泌，促进肥大细胞的脱敏粒引发炎症反应，该结果说明哮喘大鼠中免疫失衡；阳性药中，肺宁颗粒具有较好抑制IL-4上升的作用(P＜0.05)，氨茶碱和咳喘宁有下降趋势但没有显著性；给药组中，各个剂量均可逆转哮喘大鼠血清中IL-4的增加(P＜0.05)，且各给药组哮喘大鼠血清中IL-4水平与空白组相当。
4结论；
本实验结果表明，麻芩消咳颗粒对卵蛋白诱导的大鼠过敏性哮喘具有明显的的保护作用，可通过改善炎性反应，重塑气道以及降低血清中IgE、IL-4水平等机制，来改善大鼠哮喘。
通过以上实验可以证明，麻芩消咳颗粒具有抗过敏性哮喘的作用；
本发明的有益效果：1、通过空白组大鼠肺组织结构清晰，无气道重塑表现及炎性细胞浸润，与空白组比较，模型组大鼠肺组织紊乱，支气管管腔狭窄，支气管壁厚明显增加，支气管和肺泡间质大量炎性细胞浸润。阳性药中氨茶碱的改善作用不明显，肺宁颗粒和咳喘宁口服液能够改善哮喘大鼠的气道重塑表现，给药组各个剂量组可以不同程度的改善炎性反应和气道重塑表现，其中以低剂量和中剂量效果最好。
2、血清IgE指标：与空白组相比，模型组大鼠血清中IgE含量显著升高(P＜0.01)，说明哮喘大鼠肥大细胞脱敏粒引发炎症反应明显，阳性药中肺宁颗粒(P＜0.01)和咳喘宁口服液(P＜0.05)均可降低IgE的水平，氨茶碱效果不显著；给药组中，各个剂量组均可显著降低哮喘大鼠血清中IgE的水平(P＜0.01)，且各给药组哮喘大鼠血清中IgE水平与空白组相当，血清IL-4指标的测试效果，血清IL-4指标检测结果，与空白组相比，模型组大鼠血清中IL-4分泌增多，IL-4是Th2细胞因子中的重要一员，可以诱导B细胞内IgE的合成分泌，促进肥大细胞的脱敏粒引发炎症反应，该结果说明哮喘大鼠中免疫失衡；阳性药中，肺宁颗粒具有较好抑制IL-4上升的作用(P＜0.05)，氨茶碱和咳喘宁有下降趋势但没有显著性；给药组中，各个剂量均可逆转哮喘大鼠血清中IL-4的增加(P＜0.05)，且各给药组哮喘大鼠血清中IL-4水平与空白组相当。

Claims (1)

1.一种麻芩消咳药物在制备抗过敏性哮喘药物中的应用，其特征在于：所述麻芩消咳药物是由蜜麻黄116-117重量份，桑白皮116-117重量份，金银花232-233重量份，黄芩117-118重量份，百蕊草212-213重量份，石膏212-214重量份，浙贝母117-118重量份，苦杏仁117-118重量份，紫苏子117-118重量份，款冬花117-118重量份，葶苈子117-118重量份，地龙212-213重量份，姜半夏83-84重量份，炒白果仁117-118重量份，炙甘草83-84重量份组成的中药组合物制备的；
所述抗过敏性哮喘药物成分包含麻芩消咳药物成分；
所述麻芩消咳药物在制备抗过敏性哮喘药物中的应用包含测试麻芩消咳药物抗过敏性哮喘效果的实验方法，包括如下步骤：
1、实验材料准备；
1.1实验动物；
准备健康雄性SD大鼠，180-200g，动物于24±2℃，相对湿度50％～60％，昼夜交替时间12h条件下饲养，1周后用于实验；
1.2、准备实验药物与试剂；
(1)麻芩消咳颗粒；
(2)肺宁颗粒；
(3)咳喘宁口服液；
(4)氨茶碱片；
(5)卵蛋白；
(6)Ig E ELISA试剂盒；
(7)IL-4 ELISA试剂盒；
1.3准备实验仪器：
(1)酶标仪；
(2)精密电子天平；
(3)超声雾化器；
2、实验方法：
2.1药物配制：
(1)阳性药氨茶碱组：取氨茶碱片，研钵研碎后加入超纯水溶解，得5mg/ml肺宁颗粒溶液，即给药剂量为50mg/kg；
(2)阳性药肺宁颗粒组：取肺宁颗粒，加入超纯水溶解，得0.25g/ml肺宁颗粒溶液，即给药剂量为2.5g/kg；
(3)阳性药咳喘宁组：量取咳喘宁口服液，加入超纯水稀释，得0.17ml/ml肺宁颗粒溶液，即给药剂量为1.7ml/kg；
(4)麻芩消咳颗粒高剂量组：取麻芩消咳颗粒，加入超纯水溶解，得0.4g/ml麻芩消咳颗粒溶液，即给药剂量为4g/kg；
(5)麻芩消咳颗粒中剂量组：取麻芩消咳颗粒，加入超纯水溶解，得0.2g/ml溶液，即给药剂量为2g/kg；
(6)麻芩消咳颗粒低剂量组：取麻芩消咳颗粒，加入超纯水溶解，得0.1g/ml麻芩消咳颗粒溶液，即给药剂量为1g/kg；
(7)麻芩消咳颗粒最低剂量组：取麻芩消咳颗粒，加入超纯水溶解，得0.05g/ml麻芩消咳颗粒溶液，即给药剂量为0.5g/kg；
2.2动物分组和给药；
准备SD大鼠，适应性喂养3天后，随机分组：空白组、模型组，阳性药物组，给药组：麻芩消咳颗粒最低、低、中、高剂量组，除空白组外各组参照改良Palmans方法致敏建立哮喘模型，即每只造模大鼠第1天和第8天皮下多点注射含10mg OVA和100mg Al(OH)3的1mL生理盐水混悬液致敏，空白组以生理盐水代替，第15天开始，用1％的OVA生理盐水溶液激发哮喘，每次30min，共4周，从激发第一天开始给药，空白、模型组给予溶媒灌胃；
2.3肺组织的病理学-苏木素-伊红HE染色；
在大鼠最后一次激发造模后，腹主动脉取血，暴露胸腔，统一取动物左肺，用10％甲醛固定，制作石蜡切片，HE染色观察肺组织病理学变化，观察肺泡上皮细胞的损伤程度、感染严重程度以及肺泡壁增厚程度；
2.4血清的生化指标测定；
各组大鼠腹主动脉取血5mL，静置30min，3000r/min离心15min，取上清液，于-80℃冰箱保存，按照ELISA试剂盒说明书步骤检测各组大鼠血清中免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素-4(IL-4)含量；
2.5统计学处理；
实验数据以均数±标准差x±S表示，采用单因素方差分析ANOVA对数据进行统计分析，P<0.05有统计学意义；
3实验结果；
3.1麻芩消咳颗粒对过敏性哮喘大鼠肺部组织的影响；
在卵蛋白雾化造模后，取大鼠左肺，经10％甲醛固定后，HE染色观察各组大鼠肺部组织变化；
3.2麻芩消咳颗粒对过敏性哮喘大鼠血清各指标的影响；
(1)血清IgE指标：血清IgE指标检测结果：与空白组相比，记录对比结果；
(2)血清IL-4指标：血清IL-4指标检测结果，与空白组相比，记录对比结果。
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