CN114748465B - 一种用于治疗小儿哮喘的药物组合物及其用途 - Google Patents

一种用于治疗小儿哮喘的药物组合物及其用途 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种用于治疗小儿哮喘的药物组合物及其用途,所述药物组合物的活性成分为野鸢尾黄素和大黄酸或其药学上可接受的盐的组合。本发明通过从中药组分中挖掘活性单体野鸢尾黄素和大黄酸,并将其制成药物组合物,由此可以提高患者接受的程度。本发明的野鸢尾黄素和大黄酸通过特定比例的组合,有助于提高治疗小儿哮喘的治疗效果。

Description

一种用于治疗小儿哮喘的药物组合物及其用途
技术领域
本发明属于医药技术领域,具体涉及一种用于治疗小儿哮喘的药物组合物及其用途。
背景技术
支气管哮喘(bronchialasthma,BA)简称哮喘,是一种常见且复杂的慢性气道疾病,临床以症状多样、反复发作,气流受阻,气道高反应性和潜在的炎症反应为主要特征,多表现为反复发作的呼吸困难,胸闷,喘息或咳嗽,及气流受阻等症状。有国外文献显示,0~17岁的儿童哮喘患病率已高达9.6%,成为儿童中较为常见的呼吸道疾病之一。
哮喘病的病理学改变以气道内嗜酸性粒细胞浸润为主,肥大细胞、淋巴细胞和巨噬细胞浸润为辅的慢性气道炎症为基本特征,临床上以气道炎症诱发的气道高反应性和气道通气障碍为主要临床特征。发病机制目前尚不完全明确,主要血清学特征是总IgE水平和特异性IgE水平增高。近年来,现代医学对本病的病因、病机已深入到分子水平,免疫遗传学认为,哮喘患者的气道高反应性和气道炎症与受基因调控的血清总IgE和特异性IgE阳性率密切相关。
目前小儿支气管哮喘作为一种潜在致命的慢性疾病,给患儿、家庭和社会带来重大负担,也因此成为医学界研究的重点。依据全球哮喘防治创议(GINA)方案,本病主要治疗药物有糖皮质激素、β2受体激动剂、茶碱类药物等。临床实践表明,上述药物长期应用后副作用较大,且易产生耐药。但是,从目前中医药对小儿支气管哮喘的研究现状来看,中药制剂越来越受到临床医生及患儿家长的重视,已被广泛应用到本病的治疗当中,且临床效果显著。
例如,本申请的发明人曾研究抗支口服液对哮喘大鼠IgE和ECP含量的影响,,相关研究成果发表在“李志军等."抗支口服液对哮喘大鼠IgE和ECP含量的影响."中医药信息30.003(2013):49-50.”此外,本申请的发明人还曾研究抗支糖浆治疗小儿支气管哮喘,相关研究成果发表在“李志军等."抗支糖浆治疗小儿支气管哮喘80例临床疗效分析."河北医学(2017).”。抗支糖浆由蜜麻黄、石膏、射干、苦杏仁、蜜百部、平贝母、桑白皮、黄芩、虎杖、拳参等药物组成。其中,蜜麻黄为君药,辛、微苦,温;归肺、膀胱经。此药辛散苦泄,温通宣畅,入肺经能开宣肺气,具有开腠理、宣肺气平喘之功效,且取其能宣肺而泄邪热之用,是“火郁发之”之义。因其性温,故方中配伍辛甘大寒之石膏。石膏:性辛、大寒,味甘;归肺、胃经,能清泄肺热,止咳平喘。此方中麻黄与石膏相伍,一宣一清,透邪于外,合而用之,既使肺中风热得以宣散,又使肺中郁热得以清宣。二者又可相互制约,麻黄得石膏,宣肺平喘而不助热,石膏得麻黄,清解肺热而不凉遏,二者合用既消致病之因,又使肺气肃降有权,相辅相成,咳喘自平。方中臣以苦寒之射干,取其利咽喉、散痰结之效,与辛温之麻黄相配,以畅肺气,增强宣降之功,进而达到祛痰顺气止咳之用。方中苦杏仁降气平喘,与蜜麻黄相伍宣降相应。蜜百部、平贝母、桑白皮三者合用,共奏止咳化痰之功;黄芩、虎杖、拳参、鱼腥草合用,加大清热解毒之效;芦根则取其清热泻火生津之力;地龙、僵蚕为入络之药,可活血祛风通络,清热开肺平喘,诸药合用,共为佐药¨。甘草为使药,具有泻火解毒、平喘止咳之效,且能调和诸药。
虽然抗支糖浆在配伍上巧妙而不失严谨,诸药合用,令气机调和,津液得以运行,百脉通调,则气顺痰少,喘咳自止。但是,由于抗支糖浆组方较为复杂,其质量控制存在一定的难度,而且,对于年龄较小的婴幼儿而言,口服中药存在给药困难。如果能够基于抗支糖浆提供一种活性成分明确的药物组合物,对于治疗小儿哮喘将具有重要意义。
有文献(靳京妹等."麻黄非生物碱部位抗过敏性哮喘活性组分的化学成分分析."中国药房31.9(2020):6.)报道麻黄用85%乙醇提取,正庚烷萃取后经固相萃取(填料为AC18)前处理,对麻黄提取物进行非生物碱部位富集,并采用高效液相色谱法经UnitaryC18柱和EclipseXDB-C18色谱柱进行麻黄非生物碱类组分制备.以HT-29细胞中高表达的G蛋白偶联受体35(GPR35受体)为靶标,GPR35受体激动剂敏喘宁(1μmol/L)为阳性对照,动态质量重置(DMR)响应值为检测指标,通过无标记细胞整合药理学方法考察各组分(质量浓度均为100μg/mL)对GPR35受体的激动活性和脱敏活性,以筛选抗过敏性哮喘的活性组分.应用高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(HPLC-Q-TOF-MS)技术对活性组分的化学成分进行鉴定.结果:麻黄非生物碱部位主要分为固相萃取前处理的沉淀部分和95%甲醇洗脱部分,从上述两部分中共富集得到了20个组分.其中,沉淀部分中组分F1.5~F1.10及95%甲醇洗脱部分中组分F2.5~F2.10对GPR35受体有较强的激动活性,同时对GPR35受体激动剂敏喘宁显示出了较强的脱敏活性;并且沉淀部分中组分F1.5~F1.10在HT-29细胞上引起的DMR响应信号强度甚至超过了阳性对照药敏喘宁.经HPLC-Q-TOF-MS分析,共从活性组分中鉴定出了24个化合物,其中黄酮类14个,挥发油类2个,有机羧酸类7个,蒽醌类1个.结论:麻黄非生物碱部位主要以黄酮类成分为主,其具有一定的抗过敏性哮喘活性。
还有文献(王康,等."麻黄-苦杏仁药对治疗支气管哮喘机制研究."辽宁中医药大学学报23.6(2021):8.)运用网络药理学和分子对接的方法研究麻黄-苦杏仁药对治疗支气管哮喘的分子机制.方法利用中药系统药理学数据库与分析平台(traditionalChinesemedicinesystemspharmacologydatabaseandanalysisplatform,TCMSP)查找麻黄,苦杏仁的有效成分及相关靶点,并运用Uniprot数据库对靶点进行人类基因名称标注并规范化处理.通过OMIM及GeneCards查找支气管哮喘疾病靶点.将中药的靶点与疾病靶点进行比对,找出药物与疾病的共同蛋白靶点.运用Cytoscape3.3.0构建"成分-靶点"网络,找出麻黄-苦杏仁的主要活性成分.运用String数据库对共同靶点进行蛋白相互作用网络(protein-proteininteraction,PPI)分析,找出关键靶点蛋白.运用Bioconductor对共同蛋白靶点进行基因本体论(geneontology,GO)功能富集和京都基因与基因组百科全书(kyotoencyclopediaofgenesandgenomes,KEGG)通路富集分析,预测麻黄-苦杏仁药对治疗疾病的作用机制.通过iGemdock及AutoDockTools软件对筛选出的主要活性成分与关键蛋白靶点的最优结合模式进行分子对接.结果筛选出麻黄-苦杏仁药对治疗支气管哮喘疾病的36个有效成分和80个有效靶点.其中主要活性成分8个,包括quercetin,kaempferol,luteolin,Stigmasterol,beta-sitosterol,Glabridin,(+)-catechin,naringenin.治疗疾病的关键靶点蛋白7个,分别是TP53,IL6,EGFR,VEGFA,CASP3,ESR1,MAPK8.GO功能富集共得到1591个条目,其中生物过程(BP)占比最高,达89%.KEGG通路富集分析得到127条信号通路,涉及的主要通路为TNFsignalingpathway,PI3K-Aktsignalingpathway,p53signalingpathway,C-typelectinreceptorsignalingpathway.分子对接显示麻黄-苦杏仁药对的8个主要有效成分与7个关键靶点的最优结合模式都能完美对接.结论本研究显示了麻黄-苦杏仁药对可能通过调节TNF,PI3K-Akt,p53等信号通路来达到抗炎,降低气道高反应性以及气道上皮细胞损伤修复的功能,从而治疗支气管哮喘,也为后期实验验证提供了理论依据。
此外,有关中药中能够用于缓解哮喘的相关文献数以万计,但是,如何从中挖掘出确实能够治疗小儿哮喘的药物组合物,仍然是本领域技术人员亟待解决的技术问题。
发明内容
基于上述背景技术,本发明所要解决的技术问题在于提供一种用于治疗小儿哮喘的药物组合物及其用途。为了实现本发明的发明目的,拟采用如下技术方案:
本发明一方面涉及一种用于治疗小儿哮喘的药物,所述药物的活性成分为野鸢尾黄素和大黄酸或其药学上可接受的盐的组合。
本发明的野鸢尾黄素其结构式如下:
Figure BDA0003590726010000031
本发明的大黄酸的结构式如下:
Figure BDA0003590726010000041
在本发明的一个优选实施方式中,所述野鸢尾黄素和大黄酸或其药学上可接受的盐的重量比为1:0.5-2;优选为1:0.8-1.5;特别优选为1:0.8-1.2。本发明通过将野鸢尾黄素和大黄酸的重量比控制在本发明的优选范围内,有助于进一步提高其治疗小儿哮喘的效果。
在本发明的一个优选实施方式中,所述药物组合物含有或者不含有其它活性成分。
在本发明的另一个优选实施方式中,所述药物组合物还含有药学上可接受的辅料。
在本发明的一个优选实施方式中,所述药物组合物为口服制剂,所述口服制剂包括但不限于糖浆剂、片剂、胶囊剂等;优选地,所述口服制剂为糖浆剂。本发明通过将药物组合物制作成糖浆剂,更有利于小儿患者接受,能够提高患者的依从性。
本发明另一方面还涉及上述药物组合物的用途,所述药物组合物用于制备治疗小儿哮喘的药物。
在本发明的一个优选实施方式中,所述药物用于降低哮喘患者血清中IgE含量。
在本发明的一个优选实施方式中,所述药物用于降低哮喘患者血清中ECP含量。
有益效果
本发明通过从中药组分中挖掘活性单体野鸢尾黄素和大黄酸,并将其制成药物组合物,由此可以提高患者接受的程度。本发明的野鸢尾黄素和大黄酸通过特定比例的组合,有助于提高治疗小儿哮喘的治疗效果。
具体实施方式
为了进一步理解本发明,下面将结合本发明实施例,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
如无特殊说明,本发明实施例中所涉及的试剂均为市售产品,均可以通过商业渠道购买获得。
实施例1:动物学实验。
1材料
1.1实验动物及分组
成年Wistar大鼠70只,体质量180-230g,由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。随机分为空白组、模型组、野鸢尾黄素组、大黄酸组、野鸢尾黄素和大黄酸组合组1、野鸢尾黄素和大黄酸组合组2、抗支口服液组。
1.2药品和试剂
抗支口服液(组成:麻黄、石膏、杏仁、黄芩、射干、僵蚕、地龙、炙百部、川贝母、桑白皮、虎杖、芦根、甘草,由黑龙江中医药大学附属第二医院制剂室生产);野鸢尾黄素、大黄酸、大鼠IgE试剂盒和ECP大鼠血清试剂盒购自于试剂公司。
2实验方法
2.1哮喘动物模型的建立
实验大鼠经适应性饲养3天后,除空白组外,其余大鼠分别于实验的第1天和第8天给予腹腔内注射10%卵蛋白、氢氧化铝混合液1ml,与两侧腰部各取1点,每次每点皮下注射0.5ml,使大鼠致敏。于第15天起,用40ml3%的卵蛋白雾化吸人激发大鼠哮喘发作,其雾化流量为5ml/min,每次20rain,隔日1次,共4周。激发成功标志为大鼠出现呼吸加快、口唇发绀、腹肌痉挛,点头呼吸及站立不稳等表现。以生理盐水代替卵蛋白对空白组进行腹腔注射及雾化吸人。
2.2动物分组及给药
适应性饲养后,将70只实验大鼠随机分为空白组、模型组、野鸢尾黄素组(0.2mg/kg/d)、大黄酸(0.2mg/kg/d)组、野鸢尾黄素(0.1mg/kg/d)和大黄酸(0.1mg/kg/d)组合组1、野鸢尾黄素(0.1mg/kg/d)和大黄酸(0.15mg/kg/d)组合组2、抗支口服液组(20g/kg/d),每组10只。对各组大鼠分别标号,组间平均体重差控制在<20g,进行药物灌胃干预实验。各治疗组均从第1次哮喘激发开始,每日灌胃给药,直至处死前,连续4周,空白对照组用等量生理盐水灌胃,每5天复查动物体质量。
2.3标本采集
于末次给药2h提取血标本,颈静脉采血,静置4h,然后以3000r/min的转速离心10min,取上层血清低温放置备用。
2.4统计学处理
应用统计软件SPSS 25.0软件进行t检验或方差分析,P<0.05为有统计学意义。
2.4.1药物组合物对IgE的影响结果见表1。
表1给药4周后各组IgE情况(x±s)
Figure BDA0003590726010000061
实验结果显示,模型组与空白组相比,IgE含量极显著增高(P<0.01);与模型组相比,各治疗组IgE含量均极显著降低(P<0.01)。野鸢尾黄素和大黄酸组合组1、2与抗支口服液组之间无显著差异,野鸢尾黄素组、大黄酸组与抗支口服液组有明显差异。提示野鸢尾黄素和大黄酸以特定比例进行组合,在显著降低给药量的情况下,能够实现与抗支口服液基本相似甚至是更明显降低哮喘大鼠血清IgE含量。
2.4.2药物组合物对ECP的影响结果见表2。
表2给药4周后各组ECP情况(x±s)
Figure BDA0003590726010000071
实验结果显示,模型组与空白组相比,ECP含量极显著增高(P<0.01);与模型组相比,各治疗组ECP含量均显极显著降低(P<0.01)。野鸢尾黄素和大黄酸组合组1、2与抗支口服液组之间无显著差异,野鸢尾黄素组、大黄酸组与抗支口服液组有明显差异。提示野鸢尾黄素和大黄酸以特定比例进行组合,在显著降低给药量的情况下,能够实现与抗支口服液基本相似甚至是更明显降低哮喘大鼠血清ECP含量。
本实验结果显示,野鸢尾黄素和大黄酸以特定比例进行组合能明显降低哮喘大鼠血清中IgE和ECP含量。由此可见,野鸢尾黄素和大黄酸以特定比例进行组合对实验大鼠哮喘病具有较好的治疗作用,为阐明药物组合物进行临床实验提供了初步的实验依据。
实施例2:临床药效学实验
1资料与方法
1.1一般资料:选取2019年2月至2020年2月于黑龙江中医药大学附属第二医院儿科住院部治疗的支气管哮喘患儿作为研究对象,入选患儿共计40例,符合纳入标准,按随机数字表法,将患儿随机分为治疗组与对照组,各20例。对两组患儿的平均年龄、病程、体重进行比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。见表3。
表3患者一般资料比较
Figure BDA0003590726010000081
1.2诊断标准
1.2.1西医诊断标准:参照《儿童支气管哮喘诊断与防治指南(2020年版)》中的诊断标准制定。
1.2.2中医诊断标准(痰热阻肺):参照《中医儿科学》痰热阻肺证制定:咳嗽,喘息,喉间哮吼痰鸣,痰黄,胸膈满闷,身热,舌质红,苔黄,脉滑数。
1.3纳入标准:
①纳入患儿均需符合上述儿童支气管哮喘的中西医诊断标准;
②纳入患儿年龄需满足5~14岁,性别不限;
③法定监护人知情同意,且患儿能配合治疗。
1.4排除标准:
①合并心、肝、肾及其他脏器的严重原发性疾病者;
②与纳入患儿年龄不符者;
③两周内有使用过激素者;
④未按规定服药,无法判断疗效者;
⑤对该类药物或试验用药中某味中药过敏者。
1.5治疗方法:
对照组:解痉、平喘、化痰等西医常规治疗;
治疗组:在与对照组相同用药的基础上加服药物组合物(含野鸢尾黄素1mg/mL、大黄酸1mg/mL、蔗糖0.1g/mL)15-30mL/次,日3次口服。
1.6观察指标:
①观察两组患儿治疗前后中医证候(喘息、哮鸣音)疗效情况;
②比较两组患儿临床疗效;
③记录两组患儿治疗期间不良反应的发生情况。
1.7临床疗效判定标准:参照《小儿支气管哮喘中药新药临床试验设计与评价技术指南》制定:根据中医证候评分,以积分改善率为标准来判定综合疗效。积分改善率=(治疗前总积分-治疗后总积分)÷治疗前总积分×100%。
①临床控制:治疗后证候积分较治疗前减少率>90%以上;
②显效:治疗后证候积分较治疗前减少率为70~90%;
③有效:治疗后证候积分较治疗前减少率为30~70%;
④无效:治疗后证候积分较治疗前减少率<30%。
2结果
2.1两组治疗前后喘息症状及肺部哮鸣音体征积分比较见表4。
表4患者治疗前后喘息症状及肺部哮鸣音体征积分比较(x±s)
Figure BDA0003590726010000091
由表4可看出,两组患儿治疗后喘息症状及肺部哮鸣音体征积分较治疗前均显著降低,且差异有统计学意义(P<0.05),治疗后治疗组患儿较对照组喘息症状及肺部哮鸣音体征积分降低值高,且差异有统计学意义(P<0.05)。
2.2两组综合疗效比较,见表5。
表5患者综合治疗效果比较
组别 n 临床控制 显效 有效 显控率(%) 总有效率(%)
治疗组 20 10 5 4 75 95
对照组 20 7 6 3 65 80
两组患儿显控率及总有效率比较,治疗组显控率(75%)及总有效率(95%)明显高于对照组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。
以上描述了本发明优选实施方式,然其并非用以限定本发明。本领域技术人员对在此公开的实施方案可进行并不偏离本发明范畴和精神的改进和变化。

Claims (6)

1.药物组合物在制备治疗小儿哮喘的药物中的应用,所述药物组合物的活性成分为野鸢尾黄素和大黄酸的组合,所述野鸢尾黄素和大黄酸的重量比为1:0.5-2。
2.根据权利要求1所述的用途,所述野鸢尾黄素和大黄酸的重量比为1:0.8-1.5。
3.根据权利要求1所述的用途,所述野鸢尾黄素和大黄酸的重量比为1:0.8-1.2。
4.根据权利要求1所述的应用,所述药物组合物还含有药学上可接受的辅料。
5.根据权利要求1所述的应用,所述药物组合物为口服制剂,所述口服制剂选自糖浆剂、片剂或胶囊剂。
6.根据权利要求5所述的应用,所述口服制剂为糖浆剂。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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《虎杖解毒颗粒抗病毒的药效物质探究》;唐荣霜;《中国药业》;20210405;第30卷(第7期);第1-8页 *

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