TW202210090A - 藥學組合物及其於治療肌少症之用途 - Google Patents

Abstract

本揭示內容是關於一種藥學組合物，以及其用以治療肌少症的用途。依據本揭示內容的某些實施方式，該藥學組合物包含一有效量之中草藥混合物的乙醇萃物，以及一藥學上可接受的賦形劑，其中該中草藥混合物是由艾蒿、桑樹、益母草、番椒、淡竹葉、川薑黃及甘草所組成。依據本揭示內容的某些實施方式，該乙醇萃物包含14種成分，包含綠原酸、益母草鹼、沙夫托甙、芸香苷、異沙夫托甙、異綠原酸、4,5-二咖啡奎寧酸、槲皮素、芹菜素、甘草酸苷、二去甲氧基薑黃素、去甲氧基薑黃素、薑黃素及艾黃素。

Description

藥學組合物及其於治療肌少症之用途

本揭示內容是關於治療疾病的領域。更具體來說，本揭示內容是關於新穎的藥學組合物，以及其於治療肌少症(muscle atrophy)的用途。

充足的骨骼肌塑性對於個體活動相當重要，肌功能不足會嚴重影響個體的生活品質、發病率及死亡率。肌少症亦稱為肌肉萎縮症，是一種以肌肉組織流失及漸進性肌無力為特徵的疾病。肌少症的發生與不同因素相關，例如長期不活動、基因遺傳、老化、營養不良、藥物及/或各種影響肌肉骨骼或神經系統的損傷或疾病。肌少症的病徵會隨著病因及肌肉流失的嚴重度而有所不同。除了肌肉量減少之外，肌少症的病徵亦包含身體活動(例如站立、行走、攀爬或平衡)產生困難或喪失、脊柱彎曲(脊柱側彎)、心臟問題、吞嚥問題，甚至呼吸問題。

物理治療(包含特定的伸展及運動)可藉由增加肌肉強度、改善血液循環、減少痙攣及防止固定不動而對肌少症病患提供某些助益。功能性電刺激(functional electrical stimulation, FES)為肌少症的替代療法。FES主要使用電脈衝來刺激患部肌肉的收縮。然而，該些治療僅能減緩肌肉流失的進程，而無法逆轉回復或治癒肌少症。在治療罹患嚴重肌少症的病患時，可投予同化類固醇(anabolic steroid；或稱為同化雄性素類固醇(anabolic-androgenic steroid, AAS；例如羥甲基雄素酮)藉由增加病患體內蛋白合成、醣生成及肌肉強度來減緩與肌少症相關的症狀。然而，該些同化類固醇往往會產生不同程度的副作用，進而限制了其臨床應用，例如腎臟問題或腎衰竭、肝損傷(例如，肝硬化)、心臟問題(例如，心臟肥大、高血壓、血膽固醇改變、動脈損傷、中風及心臟病)、血塊、癌症(例如，睪丸癌或前列腺癌)、感染(例如，肝炎或人類免疫缺陷病毒感染)、荷爾蒙改變，以及精神問題(例如，攻擊性、躁狂及妄想)。

有鑑於此，相關領域亟需一種新穎之用以治療肌少症的方法及/或藥劑。

發明內容旨在提供本揭示內容的簡化摘要，以使閱讀者對本揭示內容具備基本的理解。此發明內容並非本揭示內容的完整概述，且其用意並非在指出本發明實施例的重要/關鍵元件或界定本發明的範圍。

本揭示內容是關於新穎的藥學組合物，以及其於治療肌少症的用途。

本揭示內容的第一態樣是關於一種藥學組合物，包含一中草藥混合物的乙醇萃物，以及一藥學上可接受的賦形劑；其中該中草藥混合物是由艾蒿(Artemisia argyi )、桑樹(Morus alba L. )、益母草(Leonurus japonicus Houtt )、番椒(Capsicum annuum L. )、淡竹葉(Lophatherum gracile Brongn )、川薑黃(Curcuma longa )及甘草(Glycyrrhiza uralensis )所組成。

依據本揭示內容的某些實施方式，該乙醇萃物是於約30-100°C的溫度下，利用乙醇對艾蒿、桑樹、益母草、番椒、淡竹葉、川薑黃及甘草萃取0.5-5小時所製備。

依據某些較佳的實施方式，該乙醇萃物是於約50-80°C的溫度下，利用95%乙醇對艾蒿的葉子、桑樹的葉子、益母草的葉子、番椒的葉子、淡竹葉的葉子、川薑黃的根及甘草的根萃取3-5小時所製備。

依據某些實施方式，在萃取過程中，是以約4-6：4-6：4-6：2-3：2-3：1：1的重量比(weight ratio)來混合艾蒿的葉子、桑樹的葉子、益母草的葉子、番椒的葉子、淡竹葉的葉子、川薑黃的根及甘草的根。依據特定實施例，是以約5：5：5：2.5：2.5：1：1的重量比來混合艾蒿的葉子、桑樹的葉子、益母草的葉子、番椒的葉子、淡竹葉的葉子、川薑黃的根及甘草的根。

依據某些實施方式，製得的乙醇萃物包含 14種中草藥成分，包含綠原酸(chlorogenic acid)、益母草鹼(leonurine)、沙夫托甙(schaftoside)、芸香苷(rutin)、異沙夫托甙(schaftoside)、異綠原酸(chlorogenic acid)、4,5-二咖啡奎寧酸(4,5-dicaffeoylquinic acid)、槲皮素(quercetin)、芹菜素(apigenin)、甘草酸苷(glycyrrhizic acid)、二去甲氧基薑黃素(bisdemethoxycurcumin)、去甲氧基薑黃素(demethoxycurcumin)、薑黃素(curcumin)及艾黃素(artemisetin)。依據某些實施例，該包含中草藥成分的乙醇萃物可藉由調控肌少症之致病途徑中不同分子的表現及/或改善粒線體功能來治療肌少症。

本揭示內容的第二態樣因此是關於一種藥學組合物，包含一綠原酸、益母草鹼、沙夫托甙、芸香苷、異沙夫托甙、異綠原酸、4,5-二咖啡奎寧酸、槲皮素、芹菜素、甘草酸苷、二去甲氧基薑黃素、去甲氧基薑黃素、薑黃素及艾黃素的混合物；以及一藥學上可接受的賦形劑。

依據本揭示內容的某些實施方式，該混合物包含 5-10重量百分比(wt%)的綠原酸、0.1-2重量百分比的益母草鹼、0.1-2重量百分比的沙夫托甙、5-10重量百分比的芸香苷、35-45重量百分比的異沙夫托甙、20-30重量百分比的異綠原酸、3-6重量百分比的4,5-二咖啡奎寧酸、0.1-0.5重量百分比的槲皮素、1-3重量百分比的芹菜素、1-3重量百分比的甘草酸苷、1-3重量百分比的二去甲氧基薑黃素、1-3重量百分比的去甲氧基薑黃素、5-10重量百分比的薑黃素，以及0.1-0.5重量百分比的艾黃素。

在某些較佳的實施方式中，該混合物包含 7-8重量百分比的綠原酸、0.5-1重量百分比的益母草鹼、0.5-1.5重量百分比的沙夫托甙、7-8重量百分比的芸香苷、38-42重量百分比的異沙夫托甙、20-25重量百分比的異綠原酸、4-5重量百分比的4,5-二咖啡奎寧酸、0.1-0.3重量百分比的槲皮素、1-2重量百分比的芹菜素、1-2重量百分比的甘草酸苷、2-3重量百分比的二去甲氧基薑黃素、2-3重量百分比的去甲氧基薑黃素、5-7重量百分比的薑黃素，以及0.1-0.3重量百分比的艾黃素。

本揭示內容亦提供利用本發明藥學組合物來治療一個體之肌少症的方法。該方法包含對該個體投予一有效量之本發明藥學組合物。

依據本揭示內容的某些實施方式，是對該個體口服或局部投予該藥學組合物。在較佳的實施方式中，是每日對該個體投予該藥學組合物，至少投予7天；更佳地，至少投予14天。在一特定實施例中，是每日對該個體投予藥學組合物，共投予14天。

適用以本發明藥學組合物及/或方法治療的個體為一哺乳動物；較佳為一人類。

在參閱下文實施方式後，本發明所屬技術領域中具有通常知識者當可輕易瞭解本發明之基本精神及其他發明目的，以及本發明所採用之技術手段與實施態樣。

為了使本揭示內容的敘述更加詳盡與完備，下文針對了本發明的實施態樣與具體實施例提出了說明性的描述；但這並非實施或運用本發明具體實施例的唯一形式。實施方式中涵蓋了多個具體實施例的特徵以及用以建構與操作這些具體實施例的方法步驟與其順序。然而，亦可利用其他具體實施例來達成相同或均等的功能與步驟順序。

I. 定義

雖然用以界定本發明較廣範圍的數值範圍與參數皆是約略的數值，此處已盡可能精確地呈現具體實施例中的相關數值。然而，任何數值本質上不可避免地含有因個別測試方法所致的標準偏差。在此處，「約」通常係指實際數值在一特定數值或範圍的正負10%、5%、1%或0.5%之內。或者是，「約」一詞代表實際數值落在平均值的可接受標準誤差之內，視本發明所屬技術領域中具有通常知識者的考量而定。除了實驗例之外，或除非另有明確的說明，當可理解此處所用的所有範圍、數量、數值與百分比（例如用以描述材料用量、時間長短、溫度、操作條件、數量比例及其他相似者）均經過「約」的修飾。因此，除非另有相反的說明，本說明書與附隨申請專利範圍所揭示的數值參數皆為約略的數值，且可視需求而更動。至少應將這些數值參數理解為所指出的有效位數與套用一般進位法所得到的數值。在此處，將數值範圍表示成由一端點至另一段點或介於二端點之間；除非另有說明，此處所述的數值範圍皆包含端點。

除非本說明書另有定義，此處所用的科學與技術詞彙之含義與本發明所屬技術領域中具有通常知識者所理解與慣用的意義相同。此外，在不和上下文衝突的情形下，本說明書所用的單數名詞涵蓋該名詞的複數型；而所用的複數名詞時亦涵蓋該名詞的單數型。

「萎縮」(atrophy)一詞在本揭示內容是指在到達正常尺寸後，一組織(例如一肌肉組織)或器官的細胞的大小及/或數量減少。「肌肉萎縮」或「肌少症」(muscle atrophy)在本揭示內容是指肌肉量及強度的減少。肌少症可以是部分或全部肌肉的流失，且可發生於個體任何部位的肌肉，包含骨骼肌(例如， 二頭肌、四頭肌、腓腸肌、脛前肌、前臂肌、腹肌及椎旁肌)及非骨骼肌(例如，橫膈膜及眼外肌)。

在本揭示內容中，「萃取物」(extract)一詞包含粗萃物(crude extract)及精製萃取物(refined extract)。具體來說，粗萃物是由簡單萃取所得的產物，其係讓所選的植物部分和至少一種萃取劑(即萃取溶劑)接觸。在可任選的情形中，後續可對所得的粗萃取物進行一或多種分離及／或純化處理，以得到精製萃取物。植物萃取物可以是液體形式(例如，溶液、濃縮液、蒸餾液)，也可以是去除溶劑的固形物(例如，糊劑、顆粒或粉末)。

「重量百分比」(weight percentage, wt %)一詞在本揭示內容是指在包含一成分的混合物中，該成分(例如，本發明藥學組合物的綠原酸、益母草鹼、沙夫托甙、芸香苷、異沙夫托甙、異綠原酸、4,5-二咖啡奎寧酸、槲皮素、芹菜素、甘草酸苷、二去甲氧基薑黃素、去甲氧基薑黃素、薑黃素或艾黃素)的重量百分比。重量百分比(wt %)是將該成分的重量除以該混合物的總重量所得到，並以百分比及/或小數來表示。

在本揭示內容中，「重量比」(weight ratio)一詞是指各組份(例如，艾蒿的葉子、桑樹的葉子、益母草的葉子、番椒的葉子、淡竹葉的葉子、川薑黃的根及甘草的根)在一混合物(例如，本揭示內容的中草藥混合物)中個別的含量，並以各組份的重量比例來表示。

在本揭示內容中，「治療」(treat)一詞包含部份或完全預防、改善、減輕及/或處理與肌少症相關的症狀、次要疾病或病徵。「治療」(treat)一詞於此說明書中亦指應用或投予本揭示內容之藥學組合物至一個體，其患有與肌少症相關的症狀、次要疾病或病徵，以達到部份或完全減輕、減緩、治癒疾病、延遲發病、抑制病程發展、降低疾病嚴重性，及/或降低一或多個與肌少症相關的症狀、次要疾病或病徵的發生。與肌少症相關之症狀、次要疾病或病徵包含，但不限於，肌肉量及/或強度減少、身體活動(例如站立、行走、攀爬或平衡)產生困難度或喪失、脊柱彎曲(脊柱側彎)、心臟問題、吞嚥問題，以及呼吸問題。「治療」亦可以是投予至患有早期該些病徵或症狀之個體，以降低與肌少症相關之症狀、次要疾病或病徵的發生。當一或多症狀或臨床標記降低時，則該治療為「有效的」(effective)。或者是，當一症狀、次要疾病或病徵的進程減緩或中止時，則該治療為「有效的」(effective)。

「有效量」(effective amount) 在此處係指一藥劑的用量足以產生欲求的療效反應。有效量亦指一種化合物或組合物，其治療利益效果超越其毒性或有害影響。藥劑的有效量不必然能夠治癒疾病或病徵，但能夠延緩、阻礙或防止該疾病或病徵的發生，或是可緩減與疾病或病徵相關的病徵。可將治療有效量可分成一、二或更多劑，而以適當的劑型在指定期間內施用一次、二次或更多次。具體的治療有效量取決於多種因素，例如欲治療的特定狀況、個體的生理條件(如，個體重、年齡或性別)、接受治療的個體類型、治療持續時間、併行治療(如果有的話)的本質以及所用的具體配方和化合物或其衍生物的結構。舉例來說，可將治療有效量表示成活性成分的總重量，譬如以克、毫克或微克來表示；或表示成活性成分重量相對於體重的比例，譬如表示為每公斤體重多少毫克(mg/kg)。或者是，可將有效量表示成活性成分(例如，本發明藥學組合物之特定化合物的混合物，或是中草藥混合物的乙醇萃物)的濃度，例如莫耳濃度、重量濃度、體積濃度、重量莫耳濃度、莫耳分率、重量分率及混合比值。習知技藝人士可依據動物模式的劑量來計算藥劑(例如，本揭示內容之藥學組合物)的人體等效劑量(human equivalent dose, HED)。舉例來說，習知技藝人士可依據美國食品藥物管理局(US Food and Drug Administration, FDA)所公告之「估算成人健康志願者在初始臨床治療測式之最大安全起始劑量」(Estimating the Maximum Safe Starting Dose in Initial Clinical Trials for Therapeutics in Adult Healthy Volunteers)來估算人體使用之最高安全劑量。

「個體」(subject)及「病患」(patient)在本揭示內容為可互換的詞彙，且係指包含人類等可接受本發明藥學組合物及/或方法治療的動物。除非另有所指，否則「個體」(subject)或「病患」(patient)一詞同時意指男性及女性。據此，「個體」(subject)或「病患」(patient)一詞包含任何在接受本揭示內容之藥學組合物或治療方法後，可產生治療效益的哺乳動物。例示性之「個體」(subject)或「病患」(patient)包含，但不限於，人類、大鼠、小鼠、天竺鼠、猴子、豬、山羊、牛、馬、狗、貓、鳥及家禽。在一例示性之實施方式中，個體是一人類。

II. 發明詳細說明

(i) 藥學組合物

本發明旨在提供用以治療一個體之肌少症的方法，以及用以實施該方法的藥物製劑或膳食補充劑。

據此，本揭示內容的第一態樣是關於一種藥學組合物，其可用以治療一罹患或疑似罹患肌少症之個體。該藥學組合物包含一中草藥混合物乙醇萃物，以及一藥學上可接受的賦形劑；其中該中草藥混合物是由艾蒿(Artemisia argyi ，亦稱為銀艾草(silvery wormwood)或中國艾草(Chinese mugwort))、桑樹(Morus alba L. ，亦稱為白桑(white mulberry))、益母草(Leonurus japonicus Houtt ，亦稱為中國益母草(Chinese motherwort))、番椒(Capsicum annuum L. ，亦稱為辣椒(chili)或胡椒(pepper))、淡竹葉(Lophatherum gracile Brongn )、川薑黃(Curcuma longa ，亦稱為白果仁(turmeric))及甘草(Glycyrrhiza uralensis ，亦稱為中國甘草(Chinese liquorice))所組成。

依據某些實施方式，是在適當溫度下，混合艾蒿、桑樹、益母草、番椒、淡竹葉、川薑黃及甘草，並以溶劑(例如，水或乙醇)萃取一段時間，以製備本發明包含活性成分(即對肌少症具有治療效益的成分)的萃取物。

依據所需目的，用以萃取所述中草藥(即，艾蒿、桑樹、益母草、番椒、淡竹葉、川薑黃及甘草的組合)的溶劑可以是一超臨界流體(supercritical fluid, SFC；例如二氧化碳、水、甲烷、乙烷、丙烷、乙烯、丙烯、甲醇、乙醇及丙酮)、水、C_1-4 醇類(例如乙醇、1-丙醇、正丁醇、異丁醇及叔丁醇)、丙酮、乙酸乙酯、正己烷，或其組合。依據某些實施方式，是在30-100°C (例如30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95或100°C)的溫度下，以75-100% (例如 75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100%)乙醇萃取所述中草藥0.5-5小時(例如0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5或5小時)，以得到本發明藥學組合物的萃取物。

依據某些實施例，是混合艾蒿的葉子、桑樹的葉子、益母草的葉子、番椒的葉子、淡竹葉的葉子、川薑黃的根及甘草的根後，在約50-80°C的溫度下，以95% 乙醇萃取混合的中草藥組份或中草藥混合物約3-5小時，以得到本發明藥學組合物的萃取物。在一例示性實施方式中，是在約70°C的溫度下，以95% 乙醇對所述中草藥混合物或中草藥組份(即，艾蒿的葉子、桑樹的葉子、益母草的葉子、番椒的葉子、淡竹葉的葉子、川薑黃的根及甘草的根)萃取約4小時，以得到本發明藥學組合物的萃取物。

依據本揭示內容的某些實施方式，所述中草藥組份是以約4-6 (例如，4、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9或6)：4-6 (例如，4、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9或6)：4-6 (例如，4、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9或6)：2-3 (例如，2、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9或3)：2-3 (例如，2、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9或3)：1：1的重量比混合。當可想見，習知技藝人士可依據所需目的來調整所述中草藥組份的比例。舉例來說，所述中草藥組份可以約4：4：4：2：2：1：1的重量比混合。或者是，所述中草藥組份可以約4.5：5：6：2.5：2：1：1的重量比混合。亦或是，所述中草藥組份可以約5：5：5：2：3：1：1的重量比混合。 依據本揭示內容某些實施例，所述中草藥組份是以約5：5：5：2.5：2.5：1：1的重量比混合並進行萃取，以得到一粗萃物(crude extract)。可接著對粗萃物進行過濾、濃縮及/或冷凍乾燥等處理，以得到粗萃物粉末或糊劑。或者是，可進一步對其進行純化(例如管注層析或沉澱)，以得到精製萃取物。

依據某些實施方式，得到的萃取物包含可用以治療肌少症的活性成分；該些活性成分至少包含綠原酸、益母草鹼、沙夫托甙、芸香苷、異沙夫托甙、異綠原酸、4,5-二咖啡奎寧酸、槲皮素、芹菜素、甘草酸苷、二去甲氧基薑黃素、去甲氧基薑黃素、薑黃素及艾黃素。

據此，本揭示內容的第二態樣提供一種藥學組合物，其包含複數個化合物的混合物，以及一藥學上可接受的賦形劑，其中該混合物是由14種活性成分所組成，包含： (1) 綠原酸，具有

的結構； (2) 益母草鹼，具有

的結構； (3) 沙夫托甙，具有

的結構； (4) 芸香苷，具有

的結構； (5) 異沙夫托甙，具有

的結構； (6) 異綠原酸，具有

的結構； (7) 4,5-二咖啡奎寧酸，具有

的結構； (8) 槲皮素，具有

的結構； (9) 芹菜素，具有

的結構； (10) 甘草酸苷，具有

的結構； (11) 二去甲氧基薑黃素，具有

的結構； (12) 去甲氧基薑黃素，具有

的結構； (13) 薑黃素，具有

的結構；以及 (14) 艾黃素，具有

的結構。

依據某些實施方式， (1) 在該混合物中，綠原酸之重量約佔該混合物之總重量的5-10% (例如，5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5或10%)，即5-10 wt%； (2) 在該混合物中，益母草鹼之重量約佔該混合物之總重量的0.1-2% (例如，0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9或2%)，即，0.1-2 wt%； (3) 在該混合物中，沙夫托甙之重量約佔該混合物之總重量的0.1-2% (例如，0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9或2%)，即0.1-2 wt%； (4) 在該混合物中，芸香苷之重量約佔該混合物之總重量的5-10% (例如，5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5或10%)，即5-10 wt%； (5) 在該混合物中，異沙夫托甙之重量約佔該混合物之總重量的 35-45% (例如，35、35.5、36、36.5、37、37.5、38、38.5、39、39.5、40、40.5、41、41.5、42、42.5、43、43.5、44、44.5或45%)，即35-45 wt%； (6) 在該混合物中，異綠原酸之重量約佔該混合物之總重量的20-30% (例如，20、20.5、21、21.5、22、22.5、23、23.5、24、24.5、25、25.5、26、26.5、27、27.5、28、28.5、29、29.5或30%)，即20-30 wt%； (7) 在該混合物中，4,5-二咖啡奎寧酸之重量約佔該混合物之總重量的3-6% (例如，3、3.5、4、4.5、5、5.5或6%)，即3-6 wt%； (8) 在該混合物中，槲皮素之重量約佔該混合物之總重量的0.1-0.5% (例如，0.1、0.2、0.3、0.4或0.5%)，即0.1-0.5 wt%； (9) 在該混合物中，芹菜素、甘草酸苷、二去甲氧基薑黃素及去甲氧基薑黃素之個別重量分別約佔該混合物之總重量的1-3% (例如，1、2或3%)，即1-3 wt%； (10) 在該混合物中，薑黃素之重量約佔該混合物之總重量的5-10% (例如，5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5或10%)，即5-10 wt%；以及 (11) 在該混合物中，艾黃素之重量約佔該混合物之總重量的0.1-0.5% (例如，0.1、0.2、0.3、0.4或0.5%)，即0.1-0.5 wt%。

依據某些例示的實施方式，該混合物包含 7-8重量百分比的綠原酸、0.5-1重量百分比的益母草鹼、0.5-1.5重量百分比的沙夫托甙、7-8重量百分比的芸香苷、38-42重量百分比的異沙夫托甙、20-25重量百分比的異綠原酸、4-5重量百分比的4,5-二咖啡奎寧酸、0.1-0.3重量百分比的槲皮素、1-2重量百分比的芹菜素、1-2重量百分比的甘草酸苷、2-3重量百分比的二去甲氧基薑黃素、2-3重量百分比的去甲氧基薑黃素、5-7重量百分比的薑黃素，以及0.1-0.3重量百分比的艾黃素。

依據一特定實施例，該混合物包含 7.7重量百分比的綠原酸、0.8重量百分比的益母草鹼、1重量百分比的沙夫托甙、7.2重量百分比的芸香苷、40.9重量百分比的異沙夫托甙、23.8重量百分比的異綠原酸、4.8重量百分比的4,5-二咖啡奎寧酸、0.2重量百分比的槲皮素、1.2重量百分比的芹菜素、1.8重量百分比的甘草酸苷、2.2重量百分比的二去甲氧基薑黃素、2.2重量百分比的去甲氧基薑黃素、6重量百分比的薑黃素，以及0.2重量百分比的艾黃素。

本揭示內容的藥學組合物較佳是進行冷凍乾燥處理，並保存於低溫及乾燥的環境，以待之後使用。

依據實施目的之不同，可以一或多種適當的藥學上可接受之載體或賦形劑來配製本揭示內容的藥學組合物，並將本揭示內容的藥學組合物配製為固體、半固體或液體劑形，例如丸劑、片劑、膠囊、粉末、糊劑、顆粒及軟膏。如此一來，可藉由口服、頰部、局部及及腸胃外等方式投予活性成分(例如，所述中草藥或所述中草藥組份的萃取物，或是所述化合物的混合物)。在藥物劑型中，本揭示內容的藥學組合物可單獨或與其他已知用以治療肌少症的藥學活性劑合併投予至個體體內。適用以各投予路徑之不同劑型為習知技藝人士所熟知。須知，最佳投予路徑會隨著疾病或病狀的種類及嚴重程度而有所不同。

在某些實施方式中，本揭示內容之藥學組合物是適用於非口腔施予的劑型，例如局部投予或注射，其係包含，但不限於皮下、肌肉內、腹腔內及靜脈內注射。醫藥組合物可以配製成油性或水性的等張懸浮液、溶液或乳膠，且可以包含處方藥劑(formulatoary agents)，例如懸浮、穩定或分散藥劑。另外，組合物可以製成乾燥形式，例如粉末、晶體或冷凍乾燥的固體，並附與使用前為無菌且無熱原(pyrogen-free)的水或等張生理食鹽水。組合物亦可置於無菌的安瓶或小瓶中。

在某些實施方式中，本揭示內容之藥學組合物是以固體劑型作口服施予。該些固體劑型可以是膠囊、密封袋、錠片、丸劑、錠劑、粉末或顆粒。在該些劑型中，將本發明藥學組合物(包含綠原酸、益母草鹼、沙夫托甙、芸香苷、異沙夫托甙、異綠原酸、4,5-二咖啡奎寧酸、槲皮素、芹菜素、甘草酸苷、二去甲氧基薑黃素、去甲氧基薑黃素、薑黃素及艾黃素) 與至少一種藥學上可接受之賦形劑混合。任何上述之固體劑型可選擇性地包含包衣和殼層，例如腸溶包衣及用以改善任何成分之釋放率的包衣。該些包衣的範例為該技術領域所熟知的。在一實施例中，本揭示內容之藥學組合物為錠片，例如快速釋放錠片。在另一實施例中，本揭示內容之藥學組合物配製為長效釋放劑型。在再一實施方式中，本揭示內容之藥學組合物為粉末，其係包覆於軟式及硬式明膠膠囊中。

在某些實施方式中，本揭示內容之藥學組合物是以液體劑型作口服施予。液體劑型可以更包含一緩衝藥劑以維持一期望的pH值。亦可將液體劑型填充於軟式明膠膠囊中。舉例來說，液體可以包含一溶液、懸浮液、乳膠、微浮膠、沈澱物或任何期望的液體介質，其係帶有藥學組合物的活性成分。液體可加以設計來改善本發明藥學組合物的活性成分，以形成一包含藥物的乳膠或經釋放後的分散質。依據本揭示內容一實施例，是以一包含包含95%橄欖油及5% 甘油的溶劑來配製本發明藥學組合物的活性成分，以進行口服投予。

(ii) 本揭示藥學組合物之用途

本揭示內容的第二態樣是關於一種用以治療一個體之肌少症的方法。該方法包含對該個體投予一有效量之本揭示內容的藥學組合物。

在某些實施方式中，是對該個體局部投予本揭示內容之藥學組合物。或者是，以口服方式對該個體投予本揭示內容之藥學組合物。然而，本揭示內容並不侷限於此。

依據本揭示內容的實施方式，是對該個體口服或局部投予一劑或多劑(例如，2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或更多劑)的本發明藥學組合物。

在一實施方式中，該個體為一小鼠。

為產生治療功效，對小鼠投予每劑每公斤體重約1-1,000毫克之本發明藥學組合物；較佳地，約為每劑每公斤體重約10-100毫克之本發明藥學組合物；更佳地，投予每劑每公斤體重約50-70毫克之本發明藥學組合物即足以對罹患肌少症之個體產生治療功效。在一特定實施例中，是對個體投予每劑每公斤體重60毫克的本發明藥學組合物，以產生治療效果。

習知技藝人士可基於本揭示內容實施例所提供之動物實驗的投予劑量，來決定本發明藥學組合物的人體等效劑量。據此，本發明藥學組合物適用於人類個體的有效劑量係界於每劑每公斤體重0.1-100毫克之間；較佳地，每劑每公斤體重1-10毫克。在一較佳實施例中，人體等效劑量約為每劑每公斤體重4-6毫克。

依據某些較佳實施方式，是每日對個體投予本揭示內容之藥學組合物，至少投予7天；舉例來說，每日對個體投予本揭示內容之藥學組合物，共投予7、8、9、10、11、12、13、14或更多天。在一特定實施例中，是每日對個體投予本揭示內容之藥學組合物，共投予14天。

當可想見，習知技藝人士或臨床操作人員可依據病患的生理狀況或疾病的嚴重程度來調整劑量及療程。

依據所需目的之不同，本發明藥學組合物可單獨投予至個體，或是與其他對肌少症具有治療效益的治療合併投予至個體。本發明藥學組合物可在投予該其他治療之前、同時或之後，投予至個體。

可利用本發明藥學組合物及/或方法治療的個體是一哺乳動物；舉例來說，人類、小鼠、大鼠、天仁鼠、倉鼠、猴子、豬、狗、貓、馬、綿羊、山羊、牛及兔子。較佳地，該個體為一人類。

下文提出多個實驗例來說明本發明的某些態樣，以利本發明所屬技術領域中具有通常知識者實作本發明，且不應將這些實驗例視為對本發明範圍的限制。據信習知技藝者在閱讀了此處提出的說明後，可在不需過度解讀的情形下，完整利用並實踐本發明。此處所引用的所有公開文獻，其全文皆視為本說明書的一部分。實施例

材料及方法

製備本發明藥學組合物 (ATG-125)

於室溫下，將七種中草藥成分，包含艾蒿的葉子(512公克)、桑樹的葉子(512公克)、益母草的葉子(512公克)、番椒的葉子(256公克)、淡竹葉的葉子(256公克)、川薑黃的根(103公克)及甘草的根(103公克)，浸泡於15公升的95%乙醇一天，之後進行過濾。保留濾液，並以相同方法再次浸泡處理該些中草藥成分。合併濾液後，置於70°C水浴槽萃取4小時，並再次過濾。重複萃取步驟二次。混合所有萃取物，並進行減壓濃縮。得到以下產率：331.11公克(14.69%)。

依據高效液相層析法(high performance liquid chromatography, HPLC)及液相色譜-質譜法(liquid chromatography-mass spectrometry, LC/MS)的分析結果，得到的乙醇萃物包含綠原酸(重量佔乙醇萃物總重量之0.38%)、益母草鹼(重量佔乙醇萃物總重量之0.04%)、沙夫托甙(重量佔乙醇萃物總重量之0.05%)、芸香苷(重量佔乙醇萃物總重量之0.36%)、異沙夫托甙(重量佔乙醇萃物總重量之2.03%)、異綠原酸(重量佔乙醇萃物總重量之1.18%)、4,5-二咖啡奎寧酸(重量佔乙醇萃物總重量之0.24%)、槲皮素(重量佔乙醇萃物總重量之0.01%)、芹菜素(重量佔乙醇萃物總重量之0.06%)、甘草酸苷(重量佔乙醇萃物總重量之0.09%)、二去甲氧基薑黃素(重量佔乙醇萃物總重量之0.11%)、去甲氧基薑黃素(重量佔乙醇萃物總重量之0.11%)、薑黃素(重量佔乙醇萃物總重量之0.3%)及艾黃素(重量佔乙醇萃物總重量之0.01%)(結果未顯示)。

在進行動物試驗前，將1.5公克的乙醇萃物溶於100毫升的溶劑(由95%橄欖油及5%甘油所組成)中，並將溶液命名為「ATG-125」溶液。

動物模式 - 局部投予

將C57BL/6公鼠(6及18個月)飼養於可隨意取用食物及水、平均恆溫(26°C)及光照週期(12小時光照/黑暗週期)的環境。將小鼠隨機分為四組(每組n = 5)，包含： (1)正常對照組：以水連續餵食30天(由第1天至第30天)的老化小鼠(18月齡)； (2)蔗糖組：以30%蔗糖(經水稀釋)連續餵食30天(由第1天至第30天)的老化小鼠，以誘發肌少症，並由第17天至第30天局部投予100微升的橄欖油 (即，將100微升的橄欖油局部施予至小鼠的腹部；作為負對照組)，每日投予一次； (3) ATG-125組：以30%蔗糖(經水稀釋)連續餵食30天(由第1天至第30天)的老化小鼠，並由第17天至第30天局部投予每公斤60毫克的ATG-125溶液(經橄欖油稀釋；即，將每公斤60毫克的ATG-125溶液局部施予至小鼠的腹部)，每日投予一次；以及 (4) 4-OHT組：以30%蔗糖(經水稀釋)連續餵食30天(由第1天至第30天)的老化小鼠，並由第17天至第30天腹腔注射每公斤1毫克的4-羥他莫昔芬(4-hydroxytamoxifen, 4-OHT；經橄欖油稀釋；作為正對照組)，每日注射一次。

於第31天犠牲所有小鼠。所有小鼠均維持特定飲食及治療，直到犠牲為止。所有的動物試驗皆經動物保護及使用委員會批准。

動物模式 - 口服投予

將C57BL/6公鼠(6及18個月)飼養於可隨意取用食物及水、平均恆溫(26°C)及光照週期(12小時光照/黑暗週期)的環境。將小鼠隨機分為四組(每組n = 5)，包含： (1)正常對照組：以水連續餵食30天(由第1天至第30天)的老化小鼠(18月齡)； (2)蔗糖+MPTP組：以30%蔗糖(經水稀釋)連續餵食30天(由第1天至第30天)的老化小鼠，並由第11天至第17天腹腔注射每公斤15毫克的1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine, MPTP；溶於磷酸鹽緩衝液中)，以誘發肌少症；由第17天至第30天局部投予老化小鼠100微升的橄欖油(作為負對照組)，每日投予一次； (3)蔗糖+MPTP+ATG-125組：以30%蔗糖(經水稀釋)連續餵食30天(由第1天至第30天)的老化小鼠，並由第11天至第17天腹腔注射每公斤15毫克的MPTP (溶於磷酸鹽緩衝液中)；由第17天至第30天局部投予老化小鼠每公斤60毫克的ATG-125溶液(經橄欖油稀釋)，每日投予一次；以及 (4)蔗糖+MPTP+希利治林組: 以30%蔗糖(經水稀釋)連續餵食30天(由第1天至第30天)的老化小鼠，並由第11天至第17天腹腔注射每公斤15毫克的MPTP (溶於磷酸鹽緩衝液中)；由第17天至第30天腹腔注射每公斤1毫克的希利治林(經橄欖油稀釋)，每日注射一次。

於第31天犠牲所有小鼠。所有小鼠均維持特定飲食及治療，直到犠牲為止。所有的動物試驗皆經動物保護及使用委員會批准。

西方墨點分析

犠牲小鼠後立即收集其肌肉組織，接著在液態氮中急速冷凍並儲存於-80°C。以含有蛋白酶抑制劑的蒸餾水萃取肌肉組織中的蛋白，並利用蛋白試驗套組來決定蛋白的濃度。以10%的十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE)來分析蛋白(50微克)，接著轉移至聚偏氟乙烯(polyvinylidene difluoride, PVDF)膜。以不同小鼠/兔子單株或多株抗體進行免疫墨點法，之後與山葵過氧化酶(horseradish peroxidase, HRP)鍵結的二級抗體反應。依據使用者操作說明，以化學螢光系統偵測反應。藉由軟體來定量分析蛋白帶的光學強度。本實驗使用的抗體包含：抗pAMPK抗體、抗AMPK抗體、抗pFOXO3a抗體、抗FOXO3a抗體、抗 MURF1抗體、抗β-肌動蛋白抗體、抗SIRT1抗體、抗PGC1α抗體、抗UCP1抗體、抗UCP2抗體、抗UCP3抗體、抗pIGF1R抗體、抗IGF1R抗體、抗pIRS1抗體、抗IRS1抗體、抗pPI3K抗體、抗PI3K抗體、抗pAKT抗體、抗AKT抗體、抗pmTOR抗體、抗mTOR抗體、抗pS6K抗體、抗S6K抗體、抗p4EBP1抗體，以及抗4EBP1抗體。

組織學、免疫組織化學及免疫螢光分析

將小鼠的肌肉組織固定於4%三聚甲醛中，進行石蠟包埋處理後，將包埋組織切為5微米厚度的組織切片。免疫染色前，依據常規方法，以二甲苯及不同濃度的酒精對組織檢體進行脫蠟。利用過氧化氫酶來阻斷內源性過氧化酶的活性。以蒸餾水洗滌組織檢體，並置於包含5%正常山羊血清之Tris緩衝液(包含0.5% TWEEN^® 20、pH 7.4 (TBS-T))，反應30分鐘。之後，將組織檢體與抗pAMPK抗體、抗Glut4抗體、抗pFOXO3A抗體、抗FOXO3A抗體、抗MuRF1抗體、抗PGC1α抗體、抗UCP1抗體、抗UCP2抗體、抗UCP3抗體、抗pIGF1R抗體、抗pIRS1抗體、抗pPI3K抗體、抗pAKT抗體、抗pmTOR抗體、抗pS6K抗體、抗p4EBP1抗體、抗脂褐質抗體，以及MITOTRACKER^TM 於室溫反應2小時。加入二級抗體(ALEXAFLUOR^® 488、ALEXAFLUOR^® 633、抗小鼠或抗兔子抗體)，並於室溫反應1小時。所有的抗體皆是以2%之非免疫山羊血清(於含有TWEEN^® 的磷酸鹽緩衝液(PBST))進行稀釋。將組織檢體與3,30-二氨基聯苯胺(3,30-diaminobenzidine, DAB)反應5-10分鐘，並以蘇木精或4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(4’,6-diamidino-2-phenylindole, DAPI)染色細胞核。

分離 RNA 及即時 PCR 分析

利用RNA萃取套組由0.2公克的肌肉組織分離RNA。為進行即時反轉錄PCT (real-time reverse transcription-PCR, qRT-PCR)，依據使用者操作說明，以cDNA反轉錄套組將等量的RNA反轉錄為cDNA。以SYBR^® 綠PCR混液(SYBR^® Green PCR master mix)分析atrogin-1 、klotho 、TFAM 、 SIRT1 、PGC1α 、 NRF1 、 UCP1 及UCP2 mRNA的含量。以持續表現型基因標準化後，利用△△Ct法來計算相對表現量。

統計分析

將數據表示為平均值±標準差(平均值 ± SE)。使用Mann-Whitney秩和檢定及Wilcoxon秩和檢定來比對不同組別之數據。P ＜ 0.05即視為具有統計意義。

實施例 1 ATG-125 溶液對肌少症相關分子的影響

如材料及方法所述，利用蔗糖來誘發老化小鼠的肌少症。分別對經蔗糖誘發的小鼠投予特定治療，包含橄欖油、ATG-125溶液及4-OHT，一共投予14天。本實施例將分析與肌少症相關之不同分子的表現量，包含pAMPK、AMPK、pFOXO3a、FOXO3a、MuRF1、脂褐質、atrogin-1及klotho。結果分別闡述於第1到3圖。

在餵食蔗糖之老化小鼠的肌肉組織中，可觀察到脂肪細胞及變性肌纖維(degenerated myofiber)(第1圖)。此外，相較於正常對照組，餵食蔗糖會增加小鼠肌肉中pAMPK、FOXO3a、MuRF1及脂褐質(四種已知會造成肌少症的蛋白)的蛋白量(第1及2圖)，以及Atrogin-1 及Klotho (已知其表量會誘發肌少症)的mRNA含量(第3圖)。投予ATG-125或4-OHT治療可減少肌肉中脂肪細胞及變性肌纖維的含量，且可顯著反轉蔗糖對老化小鼠之肌肉組織造成的不良作用(第1到3圖)。

該些結果證實，本發明ATG-125溶液可藉由降低AMPK、FOXO3a及MuRF1訊息傳遞路徑中不同分子的表現量，來治療肌少症。

實施例 2 ATG-125 溶液對 mTOR/ 胰島素訊息傳遞路徑及肌肉蛋白合成的影響

已知胰島素訊息傳遞受損(即，血糖增加)會造成肌少症，而mTOR/胰島素路徑的訊息活化則會增加肌肉蛋白的合成，進而正向調控肌少症病患的肌肉量。據此，本實施例將分析本發明ATG-125溶液對 mTOR/胰島素訊息傳遞路徑中不同分子的影響，包含IGF1R、IRS1、PI3K、AKT、mTOR、S6K及4EBP1。結果分別闡述於第4A及4B圖中。

如第4A及4B圖的結果所示，在餵食蔗糖的老化小鼠體內，pIGF1R、pIRS1、pPI3K、pAKT、pmTOR、pS6及p4EBP1的蛋白含量(即IGF1R、IRS1、PI3K、AKT、mTOR、S6K及4EBP1的活化狀態)會顯著地降低，而投予ATG-125或4-OHT治療則會增加該些mTOR/胰島素訊息傳遞分子的磷酸化程度(即，活化程度)。意外地是，本發明ATG-125溶液的功效優於4-OHT的功效(第4A及4B圖)。

該些結果證實，本發明ATG-125溶液可藉由調升mTOR/胰島素訊息傳遞路徑來改善蔗糖誘發的胰島素訊息傳遞損傷，據以增加蔗糖誘發小鼠體內的肌肉蛋白合成。

實施例 3 ATG-125 溶液於改善粒線體功能的功效

粒線體在能量產生、氧化還原平衡及調控細胞死亡路徑中扮演著重要的角色。已知在肌少症病患體內，粒線體的形態和功能會有明顯的改變。因此，本實施例將評估ATG-125溶液是否可改善罹患肌少症之動物體內粒線體的功能。結果分別闡述於第5及6圖。

相較於正常對照組，餵食蔗糖會降低肌肉中不同粒線體分子的表現量，該些分子皆為已知可調控粒線體生物合成及/或功能的分子(第5及6圖)。具體來說，第5圖的(A)小圖及(B)小圖分別指出，餵食蔗糖會降低小鼠肌肉組織中SIRT1 、PGC1α 、NRF1 、 TFAM 、 UCP1 及UCP2 的mRNA含量。第6圖的數據進一步證實，相較於餵食水的小鼠，餵食蔗糖的小鼠肌肉組織中具有較低的SIRT1、PGC1α、UCP1、UCP2及UCP3蛋白表現量。投予ATG-125或4-OHT治療可增加蔗糖誘發之老化小鼠肌肉組織中該些粒線體生物合成媒介者的表現量(第5及6圖)。值得注意的是，相較於4-OHT，投予ATG-125對蔗糖誘發小鼠可產生更佳的治療效益(第5及6圖)。

實施例 4 ATG-125 溶液對肌少症相關分子的影響

如材料及方法所述，利用蔗糖及MPTP來誘發老化小鼠產生肌少症。分別對經蔗糖及MPTP誘發的小鼠投予特定治療，包含橄欖油、ATG-125溶液及希利治林，一共投予14天。本實施例將分析與肌少症相關之不同分子(包含atrogin-1及klotho)的表現量。結果闡述於第7圖。

在餵食蔗糖的老化小鼠肌肉組織中可觀察到變性肌纖維(第7圖)。此外，相較於正常對照組，餵食蔗糖及MPTP會增加小鼠肌肉組織中Atrogin-1 及Klotho 的mRNA含量(已知其表現會誘發肌少症；第7圖)。投予ATG-125或希利治林治療可降低肌肉中變性肌纖維的含量，且顯著反轉蔗糖及MPTP對老化小鼠肌肉組織造成的不良作用(第7圖)。

該些結果證明，本發明ATG-125溶液可藉由調降atrogin-1 及klotho 的表現來治療肌少症。

實施例 5 ATG-125 溶液於改善粒線體功能的功效

粒線體在能量產生、氧化還原平衡及調控細胞死亡路徑中扮演著重要的角色。已知在肌少症病患體內，粒線體的形態和功能會有明顯的改變。因此，本實施例將評估ATG-125溶液是否可改善罹患肌少症之動物體內粒線體的功能。結果分別闡述於第8圖。

相較於正常對照組，餵食蔗糖會降低肌肉中不同粒線體分子的表現量，該些分子皆為已知可調控粒線體生物合成及/或功能的分子(第8圖)。具體來說，第8圖的(A)小圖及(B)小圖分別指出，餵食蔗糖會降低小鼠肌肉組織中SIRT1 、PGC1α 、NRF1 、 TFAM 、 UCP 及UCP2 的mRNA含量。投予ATG-125或希利治林治療可增加蔗糖及MPTP誘發之老化小鼠肌肉組織中該些粒線體生物合成媒介者的表現量(第8圖)。值得注意的是，相較於希利治林，投予ATG-125對蔗糖誘發小鼠可產生更佳的治療效益(第8圖)。

該些結果指出，本發明ATG-125溶液可改善蔗糖及蔗糖/MPTP誘發肌少症小鼠的粒線體功能。

總結上述，本揭示內容提供一種藥學組合物(即，ATG-125溶液)，其可藉由調控肌少症致病路徑中不同蛋白的表現，以及增加肌少症動物體中粒線體的功能，來達到治療肌少症的目的。因此，本發明藥學組合物可作為一種用以預防及/或治療肌少症的治療藥劑，據以改善病患的壽命及生活品質。

雖然上文實施方式中揭露了本發明的具體實施例，然其並非用以限定本發明，本發明所屬技術領域中具有通常知識者，在不悖離本發明之原理與精神的情形下，當可對其進行各種更動與修飾，因此本發明之保護範圍當以附隨申請專利範圍所界定者為準。

無

為讓本發明的上述與其他目的、特徵、優點與實施例能更明顯易懂，所附圖式之說明如下： 第1圖是依據本揭示內容實施例1所闡述的代表性照片，其係關於經投予特定治療後小鼠的肌肉組織，其中是以蘇木精及伊紅(hematoxylin and eosin, H&E)，以及抗第4型葡萄糖轉運體(glucose transporter type 4, Glut4)抗體、抗磷酸化AMP活化蛋白激酶(phosphorylated AMP-activated protein kinase, pAMPK)抗體、抗磷酸化叉頭框O3a　(phosphorylated forkhead box O3a, pFOXO3a)抗體、抗FOXO3a抗體、抗肌環指蛋白-1 (muscle RING-finger protein-1, MURF1)抗體，或是抗脂褐質(lipofuscin)抗體來染色肌肉組織；箭號所指為染色陽性細胞；以450-490奈米之波長來偵測脂褐質的自發螢光；比例尺：100微米； 第2圖是依據本揭示內容實施例1所繪示之結果，其闡述經投予特定處理後，本發明ATG-125對小鼠肌肉組織中特定分子之蛋白表現量的影響；(A)小圖：pAMPK、AMPK、pFOXO3a、FOXO3a、MuRF1及β-肌動蛋白的蛋白表現量；(B)小圖：pAMPK對AMPK、pFOXO3a對FOXO3a，以及MuRF1對β-肌動蛋白的表現比(expression ratio)；將結果表示為五組獨立試驗的平均值±S.E.M，利用非配對Student’s t試驗來分析均值差異的統計意義；*p ＜ 0.05：正常對照組相對於蔗糖組；#p ＜ 0.05：蔗糖組相對於蔗糖+ATG-125組；¥P ＜0.05：蔗糖組相對於蔗糖+4-OHT組； 第3圖是依據本揭示內容實施例1所繪示之柱狀圖，其闡述經投予特定處理後，本發明ATG-125對小鼠肌肉組織中肌肉萎縮F盒蛋白(atrogin-1 )及克羅索(klotho ) mRNA的影響；將結果表示為五組獨立試驗的平均值±S.E.M，利用非配對Student’s t試驗來分析均值差異的統計意義；*p ＜ 0.05：正常對照組相對於蔗糖組；#p ＜ 0.05：蔗糖組相對於蔗糖+ATG-125組；¥P ＜0.05：蔗糖組相對於蔗糖+4-OHT組； 第4A及4B圖是依據本揭示內容實施例2所繪示之結果，其分別闡述經投予特定處理後，本發明ATG-125對小鼠肌肉組織中mTOR/胰島素訊息傳遞路徑的影響；第4A圖：磷酸化類胰島素生長因子-1受體(phosphorylated insulin-like growth factor-1 receptor, pIGF1R)、IGF1R、磷酸化胰島素受體受質1 (phosphorylated insulin receptor substrate 1, pIRS1)、IRS1、磷酸化磷脂醯肌醇三激酶(phosphorylated phosphoinositide 3-kinase, pPI3K)、PI3K、磷酸化AKT (pAKT)、AKT、磷酸化哺乳類雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian target of rapamycin, pmTOR)、mTOR、磷酸化核醣體S6激酶(phosphorylated ribosomal S6 kinase, pS6K)、S6K、磷酸化真核轉譯起始因子4E(phosphorylated eukaryotic translation initiation factor 4E, eIF4E)結合蛋白1 (p4EBP1)、4EBP1，以及β-肌動蛋白(β-actin)的蛋白表現量；第4B圖：pIGF1R對IGF1R，及pIRS1對IRS1的表現比((A)小圖)；pPI3K對PI3K，及pAKT對AKT的表現比((B)小圖)；以及pmTOR對mTOR、pS6K對S6K，及p4EBP1對4EBP1的表現比((C)小圖)；將結果表示為五組獨立試驗的平均值±S.E.M，利用非配對Student’s t試驗來分析均值差異的統計意義；*p ＜ 0.05：正常對照組相對於蔗糖組；#p ＜ 0.05：蔗糖組相對於蔗糖+ATG-125組；¥P ＜0.05：蔗糖組相對於蔗糖+4-OHT組； 第5圖是依據本揭示內容實施例3所繪示之結果，其闡述經投予特定處理後，本發明ATG-125對小鼠肌肉組織中特定粒線體分子的影響；(A)小圖：沉默調節蛋白1 (sirtuin 1, SIRT1 )、過氧化體增生活化受體-γ共活化因子-1α (peroxisome proliferator-activated receptor (PPAR)-γ coactivator-1, PGC1α )及細胞核呼吸因子1 (nuclear respiratory factor 1, NRF1 )之mRNA含量；(B)小圖：粒線體轉錄因子A (mitochondrial transcription factor A, TFAM )、解偶聯蛋白1 (uncoupling protein 1, UCP1 )及UCP2 的mRNA含量；將結果表示為五組獨立試驗的平均值±S.E.M，利用非配對Student’s t試驗來分析均值差異的統計意義；*p ＜ 0.05：正常對照組相對於蔗糖組；#p ＜ 0.05：蔗糖組相對於蔗糖+ATG-125組；¥P ＜0.05：蔗糖組相對於蔗糖+4-OHT組； 第6圖是依據本揭示內容實施例3所繪示之結果，其闡述經投予特定處理後，本發明ATG-125對小鼠肌肉組織中SIRT1、PGC1α、UCP1、UCP2及UCP3蛋白表現量的影響；將結果表示為五組獨立試驗的平均值±S.E.M，利用非配對Student’s t試驗來分析均值差異的統計意義；*p ＜ 0.05：正常對照組相對於蔗糖組；#p ＜ 0.05：蔗糖組相對於蔗糖+ATG-125組；¥P ＜0.05：蔗糖組相對於蔗糖+4-OHT組； 第7圖是依據本揭示內容實施例4所闡述的代表性照片，其係關於經投予特定處理後小鼠的肌肉組織；(A)小圖：經(H&E)染色的肌肉組織；箭號所指為染色陽性細胞；比例尺：100微米；(B)小圖：該柱狀圖闡述經投予特定處理後，本發明ATG-125對小鼠肌肉組織中atrogin-1 及klotho mRNA的影響；將結果表示為五組獨立試驗的平均值±S.E.M，利用非配對Student’s t試驗來分析均值差異的統計意義；*p ＜ 0.05：正常對照組相對於蔗糖 + MPTP組；#p ＜ 0.05：蔗糖+MPTP組相對於蔗糖+MPTP+ATG-125組；¥P ＜0.05：蔗糖組相對於蔗糖+MPTP+希利治林(selegiline)組；以及 第8圖是依據本揭示內容實施例5所繪示之結果，其闡述經投予特定處理後，本發明ATG-125對小鼠肌肉組織中特定粒線體分子的影響；(A)小圖：SIRT1 、PGC1α 及NRF1 的mRNA含量；(B)小圖：TFAM 、UCP1 及UCP2 的mRNA含量；將結果表示為五組獨立試驗的平均值±S.E.M，利用非配對Student’s t試驗來分析均值差異的統計意義；*p ＜ 0.05：正常對照組相對於蔗糖 + MPTP組；#p ＜ 0.05：蔗糖+MPTP組相對於蔗糖+MPTP+ATG-125組；¥P ＜0.05：蔗糖組相對於蔗糖+MPTP+希利治林組。

Claims (15)

1. 一種用以治療肌少症的藥學組合物，包含： 一綠原酸(chlorogenic acid)、益母草鹼(leonurine)、沙夫托甙(schaftoside)、芸香苷(rutin)、異沙夫托甙(schaftoside)、異綠原酸(chlorogenic acid)、4,5-二咖啡奎寧酸(4,5-dicaffeoylquinic acid)、槲皮素(quercetin)、芹菜素(apigenin)、甘草酸苷(glycyrrhizic acid)、二去甲氧基薑黃素(bisdemethoxycurcumin)、去甲氧基薑黃素(demethoxycurcumin)、薑黃素(curcumin)及艾黃素(artemisetin)的混合物；以及 一藥學上可接受的賦形劑。
2. 如請求項1所述之藥學組合物，其中該混合物包含 5-10重量百分比的該綠原酸、0.1-2重量百分比的該益母草鹼、0.1-2重量百分比的該沙夫托甙、5-10重量百分比的該芸香苷、35-45重量百分比的該異沙夫托甙、20-30重量百分比的該異綠原酸、3-6重量百分比的該4,5-二咖啡奎寧酸、0.1-0.5重量百分比的該槲皮素、1-3重量百分比的該芹菜素、1-3重量百分比的該甘草酸苷、1-3重量百分比的該二去甲氧基薑黃素、1-3重量百分比的該去甲氧基薑黃素、5-10重量百分比的該薑黃素，以及0.1-0.5重量百分比的該艾黃素。
3. 如請求項2所述之藥學組合物，其中該混合物包含 7-8重量百分比的該綠原酸、0.5-1重量百分比的該益母草鹼、0.5-1.5重量百分比的該沙夫托甙、7-8重量百分比的該芸香苷、38-42重量百分比的該異沙夫托甙、20-25重量百分比的該異綠原酸、4-5重量百分比的該4,5-二咖啡奎寧酸、0.1-0.3重量百分比的該槲皮素、1-2重量百分比的該芹菜素、1-2重量百分比的該甘草酸苷、2-3重量百分比的該二去甲氧基薑黃素、2-3重量百分比的該去甲氧基薑黃素、5-7重量百分比的該薑黃素，以及0.1-0.3重量百分比的該艾黃素。
4. 如請求項1所述之藥學組合物，其中該混合物是於約30-100°C的溫度下，利用乙醇萃取艾蒿(Artemisia argyi )、桑樹(Morus alba L. )、益母草(Leonurus japonicus Houtt )、番椒(Capsicum annuum L. )、淡竹葉(Lophatherum gracile Brongn )、川薑黃(Curcuma longa )及甘草(Glycyrrhiza uralensis ) 0.5-5小時所製備。
5. 如請求項4所述之藥學組合物，其中該混合物是於約50-80°C的溫度下，利用95%乙醇萃取該艾蒿的葉子、該桑樹的葉子、該益母草的葉子、該番椒的葉子、該淡竹葉的葉子、該川薑黃的根及該甘草的根3-5小時所製備。
6. 如請求項5所述之藥學組合物，其中在萃取過程中，該艾蒿的葉子、該桑樹的葉子、該益母草的葉子、該番椒的葉子、該淡竹葉的葉子、該川薑黃的根及該甘草的根是以約4-6：4-6：4-6：2-3：2-3：1：1的重量比混合。
7. 如請求項6所述之藥學組合物，其中該艾蒿的葉子、該桑樹的葉子、該益母草的葉子、該番椒的葉子、該淡竹葉的葉子、該川薑黃的根及該甘草的根是以約5：5：5：2.5：2.5：1：1的重量比混合。
8. 一種用以治療肌少症的藥學組合物，包含： 一中草藥混合物的乙醇萃物，其中該中草藥混合物是由艾蒿、桑樹、益母草、番椒、淡竹葉、川薑黃及甘草所組成；以及 一藥學上可接受的賦形劑。
9. 如請求項8所述之藥學組合物，其中該中草藥混合物是由該艾蒿的葉子、該桑樹的葉子、該益母草的葉子、該番椒的葉子、該淡竹葉的葉子、該川薑黃的根及該甘草的根所組成。
10. 如請求項9所述之藥學組合物，其中在該中草藥混合物中，該艾蒿的葉子、該桑樹的葉子、該益母草的葉子、該番椒的葉子、該淡竹葉的葉子、該川薑黃的根及該甘草的根的重量比約為4-6：4-6：4-6：2-3：2-3：1：1。
11. 如請求項10所述之藥學組合物，其中該重量比約為5：5：5：2.5：2.5：1：1。
12. 如請求項1或請求項8所述之藥學組合物於製備一藥物的用途，其中該藥物係用以治療一個體的肌少症。
13. 如請求項12所述之用途，其中是對該個體口服或局部投予該藥物。
14. 如請求項13所述之用途，其中是每日對該個體投予該藥物，至少投予7天。
15. 如請求項14所述之用途，其中是每日對該個體投予該藥物，至少投予14天。

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