CN111704639A - 核桃分心木中酚酸葡萄糖苷类化合物的分离方法及应用 - Google Patents

核桃分心木中酚酸葡萄糖苷类化合物的分离方法及应用 Download PDF

Info

Publication number
CN111704639A
CN111704639A CN202010502435.1A CN202010502435A CN111704639A CN 111704639 A CN111704639 A CN 111704639A CN 202010502435 A CN202010502435 A CN 202010502435A CN 111704639 A CN111704639 A CN 111704639A
Authority
CN
China
Prior art keywords
glucopyranoside
beta
ethanol
phenolic acid
acid glucoside
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202010502435.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111704639B (zh
Inventor
孙秀兰
徐一达
徐德平
张银志
耿树香
宁德鲁
马婷
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Jiangnan University
Yunnan Academy of Forestry and Grassland Sciences
Original Assignee
Jiangnan University
Yunnan Academy of Forestry and Grassland Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jiangnan University, Yunnan Academy of Forestry and Grassland Sciences filed Critical Jiangnan University
Priority to CN202010502435.1A priority Critical patent/CN111704639B/zh
Publication of CN111704639A publication Critical patent/CN111704639A/zh
Priority to PCT/CN2021/098138 priority patent/WO2021244610A1/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111704639B publication Critical patent/CN111704639B/zh
Priority to US17/506,985 priority patent/US11384109B2/en
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
    • C07H1/06—Separation; Purification
    • C07H1/08—Separation; Purification from natural products
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
    • A61K31/704—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin attached to a condensed carbocyclic ring system, e.g. sennosides, thiocolchicosides, escin, daunorubicin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/52—Juglandaceae (Walnut family)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/60—Sugars; Derivatives thereof
    • A61K8/602—Glycosides, e.g. rutin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/20—Carbocyclic rings
    • C07H15/203—Monocyclic carbocyclic rings other than cyclohexane rings; Bicyclic carbocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/10—Preparation or pretreatment of starting material
    • A61K2236/15—Preparation or pretreatment of starting material involving mechanical treatment, e.g. chopping up, cutting or grinding
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps

Abstract

本发明公开了核桃分心木中酚酸葡萄糖苷类化合物的分离方法及应用，属于食品技术领域。所述方法包括以下步骤：(1)提取：核桃分心木经粉碎后，采用乙醇提取得到核桃醇提物；(2)分离：将步骤(1)得到的核桃醇提物进行柱层析，并依次采用不同浓度乙醇依次洗脱，反复净化洗脱，分离得到酚酸葡萄糖苷类化合物；所述酚酸葡萄糖苷类化合物为2‑羟基‑5‑甲氧基苯基‑O‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷，6‑羟基萘基‑1,2‑(2‑O‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷)和2,6‑二羟基萘基‑O‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷。通过药理实验证实这三种化合物具有良好的抗氧化活性。

Description

核桃分心木中酚酸葡萄糖苷类化合物的分离方法及应用
技术领域
本发明涉及核桃分心木中酚酸葡萄糖苷类化合物的分离方法及应用，属于食品技术领域。
背景技术
核桃是胡桃(Juglans regial L.)的成熟种子，含有丰富的不饱和脂肪酸，有“木本油料王”之称，具有改善脑缺血，抗疲劳，提高记忆力的作用。然而目前对核桃产品的综合利用与开发依旧不够，比如核桃副产物中分心木。目前关于核桃分心木的文献报到说明核桃分心木中有槲皮素、儿茶素等黄酮类化合物，薄荷醇、雪松醇等挥发性物质，没食子酸等酚酸类化合物，且具有抗菌、抗氧化、降糖、抑制脑功能衰退、抗肿瘤等多种活性功能。然而，具体是哪几个化合物且其对应的生物活性功能尚不明确，还需要进一步深入研究确证。为提高核桃副产物的综合利用，提升核桃产品附加值，弄清核桃分心木中的功效成分十分必要。
发明内容
本发明首次从核桃分心木中分离得到三种酚酸葡萄糖苷类化合物，分别为2-羟基-5-甲氧基苯基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，6-羟基萘基-1,2-(2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)以及2,6-二羟基萘基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，通过药理实验证实具有良好的抗氧化活性。
本发明的第一个目的是提供一种从核桃分心木中分离酚酸葡萄糖苷类化合物的方法，所述方法包括以下步骤：
(1)提取：核桃分心木经粉碎后，采用乙醇提取得到核桃醇提物；
(2)分离：将步骤(1)得到的核桃醇提物进行柱层析，并依次采用不同浓度乙醇依次洗脱，反复净化洗脱，分离得到酚酸葡萄糖苷类化合物；酚酸葡萄糖苷类化合物为2-羟基-5-甲氧基苯基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，6-羟基萘基-1,2-(2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)或2,6-二羟基萘基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。
本发明一种实施方式中，所述2-羟基-5-甲氧基苯基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷结构式为：
Figure BDA0002522380880000011
在本发明一种实施方式中，所述6-羟基萘基-1,2-(2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)结构式为：
Figure BDA0002522380880000021
在本发明一种实施方式中，所述2,6-二羟基萘基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷结构式为：
Figure BDA0002522380880000022
在本发明的一种实施方式中，步骤(1)中核桃分木和乙醇溶液的料液比为1:10-20(M/V，g/mL)。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤(1)提取是：核桃分心木经粉碎后，按料液比1:10-20(M/V，g/mL)加入75％的乙醇，于40-70℃条件下搅拌提取2-5h，过滤取上清液，如此重复3次，将3次所得上清液减压浓缩去乙醇后即得核桃醇提物。
在本发明的一种实施方式中，步骤(2)是将步骤(1)得到的核桃醇提物上MCI柱，并依次用去离子水、30％、50％、70％的乙醇洗脱，收集水洗脱和30％乙醇洗脱部分后合并，减压浓缩后上样到MCI柱，依次用去离子水、体积分数为10％、20％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，收集10％乙醇洗脱部分，减压浓缩后上样到ODS柱，依次用去离子水、体积分数为5％、10％、20％的乙醇溶液洗脱收集，然后再反复净化洗脱，分离得到酚酸葡萄糖苷类化合物。
本发明的第二个目的是提供一种酚酸葡萄糖苷类化合物在制备预防或治疗氧化应激诱发疾病药物和保健品中的应用，所述酚酸葡萄糖苷类化合物为2-羟基-5-甲氧基苯基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、6-羟基萘基-1,2-(2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)或2,6-二羟基萘基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。
在本发明的一种实施方式中，所述氧化应激诱发疾病为慢性阻塞性肺疾病、呼吸道炎症、皮肤病变、糖尿病、神经退行性疾病或肿瘤疾病。
本发明一种实施方式中，所述酚酸葡萄糖苷类化合物为2-羟基-5-甲氧基苯基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，结构式为：
Figure BDA0002522380880000023
在本发明一种实施方式中，所述酚酸葡萄糖苷类化合物为6-羟基萘基-1,2-(2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)，结构式为：
Figure BDA0002522380880000031
在本发明一种实施方式中，所述酚酸葡萄糖苷类化合物为2,6-二羟基萘基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，结构式为：
Figure BDA0002522380880000032
在本发明一种实施方式中，所述应用为提高超氧化物歧化酶SOD活力，降低肝脏丙二醛MDA水平的应用。
本发明的第三个目的是提供一种对氧化应激相关疾病具有治疗或保健作用的组合物，所述组合物中的有效成分为酚酸葡萄糖苷类化合物，所述组合物含有2-羟基-5-甲氧基苯基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、6-羟基萘基-1,2-(2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)和2,6-二羟基萘基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷中的一种或多种。
在本发明一种实施方式中，所述的组合物还包括载体和/或辅料。
在本发明一种实施方式中，所述的组合物的剂型为医学上认可的任意一种剂型，剂型包括粉剂、片剂、针剂、口服液或注射液。
本发明的第四个目的是提供一种酚酸葡萄糖苷类化合物在制备具有抗氧化功能的食品或化妆品中的应用，所述酚酸葡萄糖苷类化合物为2-羟基-5-甲氧基苯基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、6-羟基萘基-1,2-(2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)或2,6-二羟基萘基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。
本发明的有益效果：
在核桃分心木提取物的研究过程中，我们首次在核桃分心木中发现了三种酚酸葡萄糖苷，并提供了一种从核桃中制备得到该三种化合物的方法，并通过药理实验证实这三个化合物可提高SOD活力，并降低MDA水平，具有良好的抗氧化活性。
附图说明
图1为化合物1的1H-NMR谱图。
图2为化合物1的13C-NMR谱图。
图3为化合物1的135DEPT-NMR谱图。
图4为化合物1结构式。
图5为化合物2的1H-NMR谱图
图6为化合物2的13C-NMR谱图
图7为化合物2的135DEPT-NMR谱图
图8为化合物2结构式。
图9为化合物3的1H-NMR谱图。
图10为化合物3的13C-NMR谱图。
图11为化合物3的135DEPT-NMR谱图。
图12为化合物3结构式。
具体实施方式
以下对本发明的优选实施例进行说明，应当理解实施例是为了更好地解释本发明，不用于限制本发明。
实施例1：
从核桃中获得该三种酚酸葡萄糖苷类化合物的提取方法，具体如下：
核桃分心木经粉碎后，按料液比1:15(M/V)加入75％的乙醇，于50℃条件下搅拌提取3h，过滤取上清液，如此重复3次。将3次所得上清液减压浓缩去乙醇后即得核桃醇提物。将核桃醇提物上MCI柱，并依次用去离子水、30％、50％、70％的乙醇洗脱，收集水洗脱和30％乙醇洗脱部分后合并，减压浓缩后上样到MCI柱，依次用去离子水、体积分数为10％、20％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，收集10％乙醇洗脱部分，减压浓缩后上样到ODS柱，依次用去离子水、体积分数为5％、10％、20％的乙醇溶液洗脱收集，然后再反复净化洗脱，分离得到三种新化合物，分别为2-羟基-5-甲氧基苯基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(化合物1)，6-羟基萘基-1,2-(2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)(化合物2)以及2,6-二羟基萘基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(化合物3)。经HPLC测定，所得三种化合物的收率分别为92％、90％、93％，纯度为97.8％、98.0％、98.1％。
实施例2：
从核桃中获得该三种化合物的提取方法，具体如下：
核桃分心木经粉碎后，按料液比1:10(M/V)加入75％的乙醇，于40℃条件下搅拌提取5h，过滤取上清液，如此重复3次。将3次所得上清液减压浓缩去乙醇后即得核桃醇提物。将核桃醇提物上MCI柱，并依次用去离子水、30％、50％、70％的乙醇洗脱，收集水洗脱和30％乙醇洗脱部分后合并，减压浓缩后上样到MCI柱，依次用去离子水、体积分数为10％、20％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，收集10％乙醇洗脱部分，减压浓缩后上样到ODS柱，依次用去离子水、体积分数为5％、10％、20％的乙醇溶液洗脱收集，然后再反复净化洗脱，分离得到三种新化合物，分别为2-羟基-5-甲氧基苯基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(化合物1)，6-羟基萘基-1,2-(2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)(化合物2)以及2,6-二羟基萘基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(化合物3)。经HPLC测定，所得三种化合物的收率分别为90％、86％、90％，纯度为98.0％、98.1％、98.1％。
实施例3：
从核桃中获得该三种化合物的提取方法，具体如下：
核桃分心木经粉碎后，按料液比1:20(M/V)加入75％的乙醇，于70℃条件下搅拌提取2h，过滤取上清液，如此重复3次。将3次所得上清液减压浓缩去乙醇后即得核桃醇提物。将核桃醇提物上MCI柱，并依次用去离子水、30％、50％、70％的乙醇洗脱，收集水洗脱和30％乙醇洗脱部分后合并，减压浓缩后上样到MCI柱，依次用去离子水、体积分数为10％、20％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，收集10％乙醇洗脱部分，减压浓缩后上样到ODS柱，依次用去离子水、体积分数为5％、10％、20％的乙醇溶液洗脱收集，然后再反复净化洗脱，分离得到三种新化合物，分别为2-羟基-5-甲氧基苯基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(化合物1)，6-羟基萘基-1,2-(2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)(化合物2)以及2,6-二羟基萘基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(化合物3)。经HPLC测定，所得三种化合物的收率分别为93％、92％、93.5％，纯度为97.2％、97.7％、97.8％。
实施例4：
本发明中提供了三种新化合物的结构解析步骤，具体如下：
化合物1为黄色无定形粉末，易溶于水，乙醇等，不溶于氯仿。
该化合物的1H-NMR谱图见图1，从图中可知，δ6.46，δ6.64，δ6.68处各有1个质子信号，为同一个苯环上的3个氢，从偶合常数看3个H分布在苯环上邻位和间位。δ5.31处为葡萄糖端基质子信号，且该糖为β构型，δ3.01～δ3.21为糖上的其他质子信号。
化合物1的13C-NMR谱图如图2，从图中可知，化合物1中有13个碳，其中6个碳为糖中的碳。δ141.52，δ148.06，δ150.98为苯环上的连氧碳信号，δ102.00，δ108.16，δ115.44为苯环上的-CH-信号。δ55.74为苯环上的甲氧基信号。
结合该化合物的1H-NMR谱、13C-NMR谱和135DEPT-NMR谱(图3)数据并参照文献可确定该化合物为2-羟基-5-甲氧基苯基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷,结构式见图4。
化合物2为白色粉末，易溶于水、乙醇等，不溶于氯仿。
该化合物的1H-NMR谱图见图5，从图中可知，δ6.84和δ7.01处分别有一个质子信号，是连接羟基的碳的邻位碳上的氢。δ5.45处有两个葡萄糖端基质子信号，且两个葡萄糖均为β构型，葡萄糖6’位上的两个质子，分别在δ3.50和δ3.54，δ3.18～δ3.44为糖上的其他质子信号。
化合物的13C-NMR谱图见图6，从图中可知化合物2共有22个碳，其中12个碳为糖中的碳。δ148.81、δ149.00、δ153.35为萘环上的连氧碳信号，δ126.96和δ128.05为两苯环连接处的碳信号，δ109.39～δ115.78为萘环上的-CH-信号。
根据化合物2的1H-NMR谱、13C-NMR谱和135DEPT-NMR谱(图7)，并参考文献可确定该化合物为6-羟基萘基-1,2-(2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)，结构式见图8。
化合物3为棕色无定形粉末，易溶于水、乙醇等，不溶于氯仿。
该化合物的1H-NMR谱图见图9，由图可知，δ6.00、δ6.40、δ6.46、δ6.84、δ6.85为萘环上的芳氢质子信号。δ5.87处有葡萄糖端基质子信号，且该糖为β构型。
化合物的13C-NMR谱图见图10，由图可知，化合物3共有16个碳，其中6个为糖中的碳。δ148.92、δ150.83、δ155.03为萘环上的连氧碳，δ108.52～δ129.15为萘环上的其他碳信号。δ62.86～δ105.64为糖基上的碳信号。
根据化合物3的1H-NMR谱、13C-NMR谱和135DEPT-NMR谱(图11)，参考文献可确定该化合物为2,6-二羟基萘基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，结构式见图12。
实施例5：三种化合物的抗氧化作用
材料与方法
1材料
1.1动物ICR小鼠，6周龄，20-25g，SPF级，购于上海斯莱克实验动物有限公司。
1.2试剂D-半乳糖，美国Sigma公司；丙二醛(MDA)试剂盒，南京建成生物工程研究所；超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒，上海艾莱萨生物科技有限公司。
2实验方法
2.1动物分组与给药小鼠适应性饲养一周后，随机分成5组，每组10只。其中给药组分别灌胃化合物1-3，每种各500mg/kg，空白组与衰老模型组分别灌胃等体积生理盐水，连续6周。同时对衰老模型组与给药组分别皮下注射D-半乳糖150mg/kg，建立小鼠亚急性衰老模型，空白对照组注射等体积生理盐水，连续6周。
2.2样本制备与指标测定小鼠末次给药24h后，眼球取血，收集血液；后脱臼处死，摘取肝脏，经清洁后低温研磨，制得10％组织匀浆液，于3500rpm，4℃下离心10min，取上清液，-20℃保存。用比色法测定肝组织MDA含量，用酶联免疫测定血清中SOD活力。
2.3统计学分析结果以x±s表示，采用SPSS 20软件，通过One-way Anova Dunnett检验来分析结果。
3结果
3.1结果以通过对D-半乳糖诱导的衰老模型小鼠给药后，小鼠饮食正常，体重未出现异常变化。测定实验各组小鼠的血清SOD水平、肝脏MDA含量的，结果如表1所示。结果表明，模型组小鼠的血清SOD活性极显著(P<0.01)低于正常组，肝脏MDA含量显著(P<0.05)高于正常组，说明造模成功。与模型组相比，化合物1给药组小鼠的血清SOD活性显著(P<0.05)升高，肝脏MDA含量显著(P<0.05)降低；化合物2给药组小鼠的血清SOD活性极显著(P<0.05)升高，肝脏MDA含量显著(P<0.05)降低；化合物3给药组小鼠的血清SOD活性显著(P<0.05)高于模型组，肝脏MDA含量显著(P<0.05)低于模型组。说明化合物1-3均具有显著的抗氧化活性。
表1化合物1-3对D-半乳糖致衰老模型小鼠血清SOD活性、肝脏MDA含量的影响
Figure BDA0002522380880000071
Figure BDA0002522380880000072
注：a代表P<0.05，b代表P<0.01，均与模型组比较。
对比例1：
参照实施例1方法提取酚酸葡萄糖苷类化合物，区别在于，仅改变上MCI柱时乙醇洗脱浓度，将核桃醇提物上MCI柱，并依次用去离子水、20％、50％、70％的乙醇洗脱，其他条件和实验步骤同实施例1。结果发现20％乙醇时化合物1洗脱不完全，得率小于60％，并在50％乙醇下检测到，说明需要30％乙醇洗脱后化合物1才能洗脱完全。
对比例2：
参照实施例1方法提取酚酸葡萄糖苷类化合物，区别在于，仅改变ODS柱中乙醇洗脱条件，减压浓缩后上样到ODS柱，依次用去离子水、10％、20％的乙醇溶液洗脱收集，其他条件和实验步骤同实施例1。结果发现如果不先用5％乙醇洗脱，10％乙醇会将化合物2和3一并洗脱，说明需要先用5％洗脱，再用10％乙醇洗脱。
虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。

Claims (10)

1.一种从核桃分心木中分离酚酸葡萄糖苷类化合物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
(1)提取：核桃分心木经粉碎后，采用乙醇提取得到核桃醇提物；
(2)分离：将步骤(1)中所得核桃醇提物上MCI柱，并依次用去离子水、30％、50％、70％的乙醇洗脱，收集水洗脱和30％乙醇洗脱部分后合并；将合并后的洗脱液减压浓缩后，上样到MCI柱，依次用去离子水、体积分数为10％、20％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，收集10％乙醇洗脱部分；将10％乙醇洗脱部分减压浓缩后上样到ODS柱，依次用去离子水、体积分数为5％、10％、20％的乙醇溶液洗脱收集，然后再反复净化洗脱，分离得到酚酸葡萄糖苷类化合物；
所述酚酸葡萄糖苷类化合物为2-羟基-5-甲氧基苯基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，6-羟基萘基-1,2-(2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)或2,6-二羟基萘基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)提取是将核桃分心木经粉碎后，按料液比1:10-20加入75％的乙醇，于40-70℃条件下搅拌提取2-5h，过滤取上清液，重复3次，将3次所得上清液减压浓缩去乙醇后即得核桃醇提物。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述2-羟基-5-甲氧基苯基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷结构式为：
Figure FDA0002522380870000011
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述6-羟基萘基-1,2-(2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)结构式为：
Figure FDA0002522380870000012
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述2,6-二羟基萘基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷结构式为：
Figure FDA0002522380870000013
6.酚酸葡萄糖苷类化合物在制备预防或治疗氧化应激诱发疾病药物和保健品中的应用，所述酚酸葡萄糖苷类化合物为2-羟基-5-甲氧基苯基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、6-羟基萘基-1,2-(2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)或2,6-二羟基萘基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，不涉及疾病的治疗方法。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述氧化应激诱发疾病为慢性阻塞性肺疾病、呼吸道炎症、皮肤病变、糖尿病、神经退行性疾病或肿瘤疾病。
8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述应用中剂型包括粉剂、片剂、针剂、口服液或注射液。
9.酚酸葡萄糖苷类化合物在制备具有抗氧化功能的食品或化妆品中的应用，所述酚酸葡萄糖苷类化合物为2-羟基-5-甲氧基苯基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、6-羟基萘基-1,2-(2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)或2,6-二羟基萘基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。
10.一种对氧化应激相关疾病具有治疗或保健作用的组合物，其特征在于，所述组合物中的有效成分为酚酸葡萄糖苷类化合物，所述酚酸葡萄糖苷类化合物为2-羟基-5-甲氧基苯基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、6-羟基萘基-1,2-(2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)和2,6-二羟基萘基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷中的一种或多种。
CN202010502435.1A 2020-06-03 2020-06-03 核桃分心木中酚酸葡萄糖苷类化合物的分离方法及应用 Active CN111704639B (zh)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010502435.1A CN111704639B (zh) 2020-06-03 2020-06-03 核桃分心木中酚酸葡萄糖苷类化合物的分离方法及应用
PCT/CN2021/098138 WO2021244610A1 (zh) 2020-06-03 2021-06-03 核桃分心木中酚酸葡萄糖苷类化合物的分离方法
US17/506,985 US11384109B2 (en) 2020-06-03 2021-10-21 Method for separating phenolic acid glucoside compounds from Diaphragma juglandis Fructu

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010502435.1A CN111704639B (zh) 2020-06-03 2020-06-03 核桃分心木中酚酸葡萄糖苷类化合物的分离方法及应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111704639A true CN111704639A (zh) 2020-09-25
CN111704639B CN111704639B (zh) 2021-09-03

Family

ID=72539452

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010502435.1A Active CN111704639B (zh) 2020-06-03 2020-06-03 核桃分心木中酚酸葡萄糖苷类化合物的分离方法及应用

Country Status (3)

Country Link
US (1) US11384109B2 (zh)
CN (1) CN111704639B (zh)
WO (1) WO2021244610A1 (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112645838A (zh) * 2020-12-21 2021-04-13 江南大学 1-羧基-2-羟基-3-亚氨基丙烷及其提取方法
WO2021244610A1 (zh) * 2020-06-03 2021-12-09 江南大学 核桃分心木中酚酸葡萄糖苷类化合物的分离方法
CN114213476A (zh) * 2021-12-29 2022-03-22 江南大学 巴旦木中4-戊三醇-β-甲基龙胆二糖苷的分离方法及应用

Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2005200319A (ja) * 2004-01-14 2005-07-28 Pola Chem Ind Inc 新規ジカルボン酸配糖体
CN101366827A (zh) * 2008-10-09 2009-02-18 丹东药业集团有限公司 核桃楸皮提取物及其制备方法
CN101611148A (zh) * 2006-06-14 2009-12-23 利布莱根公司 用于皮肤化妆应用和治疗应用的水溶性的酚类衍生物
CN104725520A (zh) * 2015-03-13 2015-06-24 凤庆县裕泽谷核桃专业合作社 一种分心木酸性多糖及其制备和应用
CN104961779A (zh) * 2015-05-25 2015-10-07 天津科技大学 一种含咖啡酰基的鞣质衍生物及其制备工艺和应用
CN105801637A (zh) * 2016-04-26 2016-07-27 黑龙江中医药大学 化合物4(S)-4,5-二羟基-α-四氢萘酮 5-O-β-D-吡喃葡萄糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷及其制备方法与应用
CN105801634A (zh) * 2016-04-19 2016-07-27 黑龙江中医药大学 核桃青皮中一种新的直链醇苷化合物的制备方法和应用
CN105859805A (zh) * 2016-05-08 2016-08-17 黑龙江中医药大学 核桃青皮中一种新的酚苷化合物的制备方法和用途
CN110078654A (zh) * 2019-05-23 2019-08-02 徐一达 一种核桃中乙酰5-羟色胺的分离方法及应用
CN110302240A (zh) * 2018-10-24 2019-10-08 河北科技大学 提取核桃分心木中多酚的方法

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108997509B (zh) * 2018-07-24 2021-01-01 山东省医学科学院药物研究所（山东省抗衰老研究中心、山东省新技术制药研究所） 一种分心木多糖、分心木多糖的制备方法及用途
CN111704639B (zh) * 2020-06-03 2021-09-03 江南大学 核桃分心木中酚酸葡萄糖苷类化合物的分离方法及应用

Patent Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2005200319A (ja) * 2004-01-14 2005-07-28 Pola Chem Ind Inc 新規ジカルボン酸配糖体
CN101611148A (zh) * 2006-06-14 2009-12-23 利布莱根公司 用于皮肤化妆应用和治疗应用的水溶性的酚类衍生物
CN101366827A (zh) * 2008-10-09 2009-02-18 丹东药业集团有限公司 核桃楸皮提取物及其制备方法
CN104725520A (zh) * 2015-03-13 2015-06-24 凤庆县裕泽谷核桃专业合作社 一种分心木酸性多糖及其制备和应用
CN104961779A (zh) * 2015-05-25 2015-10-07 天津科技大学 一种含咖啡酰基的鞣质衍生物及其制备工艺和应用
CN105801634A (zh) * 2016-04-19 2016-07-27 黑龙江中医药大学 核桃青皮中一种新的直链醇苷化合物的制备方法和应用
CN105801637A (zh) * 2016-04-26 2016-07-27 黑龙江中医药大学 化合物4(S)-4,5-二羟基-α-四氢萘酮 5-O-β-D-吡喃葡萄糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷及其制备方法与应用
CN105859805A (zh) * 2016-05-08 2016-08-17 黑龙江中医药大学 核桃青皮中一种新的酚苷化合物的制备方法和用途
CN110302240A (zh) * 2018-10-24 2019-10-08 河北科技大学 提取核桃分心木中多酚的方法
CN110078654A (zh) * 2019-05-23 2019-08-02 徐一达 一种核桃中乙酰5-羟色胺的分离方法及应用

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ANIS BEN HSOUNA ET AL.: "Antioxidant constituents from Lawsonia inermis leaves: Isolation, structure elucidation and antioxidative capacity", 《FOOD CHEMISTRY》 *
MAGED G. EL-GHAZOOLY ET AL.: "Chemical constituents of Helichrysum conglobatum growing in Egypt", 《NATURAL PRODUCT SCIENCES》 *
周媛媛: "青龙衣正丁醇部位化学成分研究", 《中草药》 *
孟先华 等: "青花椒中酚类化学成分及其抗氧化活性", 《中草药》 *
赵焕新 等: "分心木中的化学成分及抗氧化活性研究", 《中国实验方剂学杂志》 *

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2021244610A1 (zh) * 2020-06-03 2021-12-09 江南大学 核桃分心木中酚酸葡萄糖苷类化合物的分离方法
US11384109B2 (en) 2020-06-03 2022-07-12 Jiangnan University Method for separating phenolic acid glucoside compounds from Diaphragma juglandis Fructu
CN112645838A (zh) * 2020-12-21 2021-04-13 江南大学 1-羧基-2-羟基-3-亚氨基丙烷及其提取方法
CN112645838B (zh) * 2020-12-21 2022-01-07 江南大学 1-羧基-2-羟基-3-亚氨基丙烷及其提取方法
US11655208B2 (en) 2020-12-21 2023-05-23 Jiangnan University 1-carboxy-2-hydroxy-3-iminopropane and extraction method thereof
CN114213476A (zh) * 2021-12-29 2022-03-22 江南大学 巴旦木中4-戊三醇-β-甲基龙胆二糖苷的分离方法及应用
CN114213476B (zh) * 2021-12-29 2022-11-01 江南大学 巴旦木中4-戊三醇-β-甲基龙胆二糖苷的分离方法及应用

Also Published As

Publication number Publication date
US11384109B2 (en) 2022-07-12
CN111704639B (zh) 2021-09-03
US20220041639A1 (en) 2022-02-10
WO2021244610A1 (zh) 2021-12-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN111704639B (zh) 核桃分心木中酚酸葡萄糖苷类化合物的分离方法及应用
KR101062670B1 (ko) 2,5-비스-아릴-3,4-디메틸테트라하이드로퓨란 리그난을 유효성분으로 포함하는 에이엠피케이의 활성화에 의해 매개되는 비만 관련 질환의 예방 또는 치료용 조성물
JP6226459B2 (ja) Ｆｒａｘｉｎｕｓｅｘｃｅｌｓｉｏｒ種子の抽出物とその治療適用
JP2012502901A (ja) ボスウェリア・セラータエキスを含む相乗作用性抗炎症組成物
CN104640555A (zh) 用于治疗代谢综合征的新的洋蓟(Cynara Scolymus)、咖啡属(Coffea spp.)和油橄榄(Olea Europaea)的提取物
US20040247715A1 (en) Water soluble extract from plant of solanum genus and the preparation process thereof, and pharmaceutical composition containing the water soluble extract
Bailly The traditional and modern uses of Selaginella tamariscina (P. Beauv.) Spring, in medicine and cosmetic: Applications and bioactive ingredients
Xu et al. Identification of bioactive components from Ruellia tuberosa L. on improving glucose uptake in TNF-α-induced insulin-resistant mouse FL83B hepatocytes
CN116606269B (zh) 米团花二倍半萜化合物与提取物l01及其在制药中的应用
KR100979459B1 (ko) 근육세포에서 포도당 흡수를 증가시키는 데이츄 추출물과이로부터 분리한 4ｈ-크로멘-4-온 유도체
KR101355483B1 (ko) 수검초 추출물 또는 이로부터 분리된 알파-아사론을 유효성분으로 함유하는 퇴행성 신경질환 예방 및 치료용 조성물
CN113925948B (zh) 生姜总提取物或其活性成分的用途、药物组合物和制法
KR101784294B1 (ko) 모과 추출물을 포함하는 뇌신경질환 예방 또는 치료용 의약 조성물
KR101719709B1 (ko) 인동 및 지황의 혼합 추출물을 포함하는 대사성 질환 예방 또는 치료용 조성물
Umar et al. In vivo antihyperglycaemic activity of crude and partitioned fractions of selected medicinal plants
CN111920799A (zh) 一种苦乐果有效成分组合物及其制备方法和应用
CN111067924A (zh) 一种具有抑制醛糖还原酶活性的琼花果实总木脂素提取物及其活性成分和用途
EP1508334B1 (en) Water soluble extract from plant of solanum genus and the preparation process thereof, and pharmaceutical composition containing the water soluble extract
KR101264900B1 (ko) 초임계유체법을 이용한 세사미놀 배당체의 정제방법, 그로부터 수득된 세사미놀 배당체 및 그의 용도
CN106478556A (zh) 一种盐酸洛非西定的药物组合物及其医药用途
JP5461872B2 (ja) アラビノシルビテキシンを含有する経口摂取用組成物の製造方法とその用途
KR20100059050A (ko) 리그난 유도체를 함유하는 세라마이드 대사관련 효소에 의해 매개되는 질환의 예방 또는 치료용 조성물
JP4406503B2 (ja) 新規肝障害抑制剤
CN100354292C (zh) 黄酮类新化合物
Juliannah GC-MS Based Metabolite Profiling and Phytochemical Screening of Different Solvent Extracts of Moringa oleifera Seeds

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant