CN111671827B - 一种裸花紫珠提取物在制备溃疡性结肠炎药物中的应用 - Google Patents

一种裸花紫珠提取物在制备溃疡性结肠炎药物中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种裸花紫珠提取物在制备缓解溃疡性结肠炎药物中的应用，具体涉及中药提取物技术领域。所述的裸花紫珠提取物，按重量份数计：由20‑50份裸花紫珠总黄酮、15‑25份裸花紫珠总苯乙醇苷和1‑5份裸花紫珠多糖组成。在实施过程中采用混合溶剂对裸花紫珠总黄酮进行提取，通过控制提取溶剂的体积比以及混合溶剂的浓度，明显了提高裸花紫珠中总黄酮类有效成分的提取率，缩短提取时间，在较低的温度下依然可以保证有效成分的高效释放，能够使黄酮类物质的总提取率达到90％以上，提高提取效率，减少中药浪费；本发明提供的裸花紫珠提取物能够有效的治疗溃疡性结肠炎，治疗效果好，安全有效。

Description

一种裸花紫珠提取物在制备溃疡性结肠炎药物中的应用
技术领域
本发明涉及中药提取物技术领域，具体涉及一种裸花紫珠提取物在制备缓解溃疡性结肠炎药物中的应用。
背景技术
裸花紫珠系马鞭草科植物裸花紫珠的根、茎、叶，内含缩合鞣酸、黄酮苷、中性树脂、酚类、多糖、羟基化合物及镁、钙、铁盐等，具有消炎、解毒、收敛、止血、阵痛等多种功能。裸花紫珠能降低毛细血管通透性，有明显收缩血管的作用，能抑制金黄色葡萄球菌、链球菌、伤寒沙门菌、绿脓杆菌等多种细菌生长，可预防继发感染和抗感染；对早期的炎性渗出、肿胀有显著的抗炎性反应，能加快创面渗出的吸收，促进上皮生长和伤口愈合。此外，裸花紫珠分散片还有抗病毒作用。由于其广泛的药理作用，被应用于各种皮肤病的治疗，如寻常痤疮、带状疱疹、湿疹、接触性皮炎、过敏性皮炎、过敏性紫癜、皮肤血管炎及液氮冷冻术后等。
溃疡性结肠炎是一种慢性非特异性结肠炎症，病变主要累及结肠黏膜和黏膜下层，范围多自远段结肠开始，可逆行向近段发展，甚至累及全结肠及末段回肠，呈连续性分布，临床主要表现为腹泻、腹痛和黏液脓血便。欧美流行病学资料调查显示，该病在欧洲和北美发病率最高，并在我国呈逐年上升的趋势。由于该病病因不清，具有反复发作、迁延难愈的病情特点，WHO将视为现代疑难杂症之一，不仅给人们造成精神和肉体的痛苦还给人们造成了沉重的经济负担。
溃疡性结肠炎病变早期可见水肿、充血与灶性出血，结肠炎在反复发作的过程中，有大量新生肉芽组织增生，常出现炎性息肉，粘膜因不断破坏和修复，其正常结构丧失，纤维组织增加，从而造成腺体变性、数目减少等改变，进而会造成结肠器质性和功能性的变化，从而影响人体的健康。
裸花紫珠多以干燥的叶入药，主要分布于我国的广东、海南和广西等省，并以海南五指山产为上品。始载于唐《本草拾遗》，入选《中国药典》2015年版新增中药品种。其味苦、微辛、性平；全年均可采收，根茎叶均可入药，有止血消炎、散瘀消肿、抗菌解毒等功效。作为临床常备药物，裸花紫珠以单味药成药，适用于止血恢复和炎症消退。通过急性毒性实验测试，在合理剂量浓度范围内安全无毒。裸花紫珠中发现的化学成分以黄酮类、苯丙素、环烯醚萜及三萜类为主，但是目前公开的裸花紫珠的提取方法主要为单一组分有机溶剂提取。
例如中国专利申请201711285943.3中公开了一种裸花紫珠提取物、其制备方法及应用。其制备方法为：取裸花紫珠与有机溶剂混合，提取，获得提取液，离心，收集滤液；所述有机溶剂为乙醇，乙醇的体积浓度为50％～70％，制得的裸花紫珠提取物中总黄酮的含量至少为0.2mg/mL，毛蕊花糖苷的含量至少为2mg/mL，制得的裸花紫珠提取物中所述毛蕊花糖苷的质量百分含量为2.6％，其有效成分的提取率较低，无法满足需求。
再如，中国专利申请201910537780.6中公开了一种裸花紫珠提取物在制备降脂药物中的应用。所述的裸花紫珠提取物是通过以下方法制备的：取新鲜干燥的裸花紫珠叶，自然风干，粉碎过筛，使用甲醇超声浸提，冷却后，将提取液冷冻离心，静置，取上清液过微孔滤膜，将滤液冷冻干燥，得到裸花紫珠提取物，该申请公开的提取方法使用单一溶剂提取，其提取效率不高，有效成分的含量不高，从而造成中药成分的浪费。
因此，开发一种可以有效提高裸花紫珠的提取效率，减少中药有效成分流失的裸花紫珠提取物的制备方法十分必要。
发明内容
基于上述现有技术的缺陷，本发明提供了一种裸花紫珠提取方法，得到的有效成分并通过合理的组合，提供一种裸花紫珠提取物，该提取物各组分间相互发挥作用，能够有效的缓解溃疡性结肠炎，为溃疡性结肠炎的临床诊断和治疗提供科学依据。
为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：
一方面，本发明提供了一种裸花紫珠提取物，按重量份数计：由20-50份裸花紫珠总黄酮、15-25份裸花紫珠总苯乙醇苷和1-5份裸花紫珠多糖组成。
优选地，所述的裸花紫珠提取物，按重量份数计包括由30-50份裸花紫珠总黄酮、20-25份裸花紫珠总苯乙醇苷和3-5份裸花紫珠多糖组成。
所述的裸花紫珠提取物，所述的裸花紫珠总黄酮、裸花紫珠总苯乙醇苷和裸花紫珠多糖的重量份数之比为10-50：5-20：1；
优选地，所述的裸花紫珠总黄酮、裸花紫珠总苯乙醇苷和裸花紫珠多糖的重量份数之比为20-40：10-20：1；
在一个优选实施方案中，所述的裸花紫珠提取物，按重量份数计包括：由40份裸花紫珠总黄酮、20份裸花紫珠总苯乙醇苷和1份裸花紫珠多糖组成。
在另一个优选实施方案中，所述的裸花紫珠提取物，按重量份数计包括：由50份裸花紫珠总黄酮、25份裸花紫珠总苯乙醇苷和4份裸花紫珠多糖组成。
所述的裸花紫珠总黄酮提取物的提取方法，包括以下步骤：
S1、取干净的裸花紫珠根、茎、叶，干燥后粉碎，然后加水超声浸泡，过滤，得滤液1和滤渣1，备用；
S2、将步骤S1中得到的滤渣1中加入混合溶剂回流提取，得到的滤液2和滤渣2，备用；
S3、将步骤S1中得到的滤液1和步骤S2中得到的滤液2混合，过滤，将滤液浓缩后，通过AB-8树脂，乙醇为洗脱液，收集洗脱液，真空干燥即得裸花紫珠总黄酮提取物。
上述步骤S1中所述的粉碎粒径为100-150目；优选为120-150目。
上述步骤S1中所述的超声频率为20-50KHz，优选为30-40KHz；超声时间为20-30分钟；优选为25-30分钟。
上述步骤S2中所述的混合溶剂为乙醇、丙酮和石油醚的混合溶液；
所述的乙醇、丙酮和石油醚的体积比为1-5：1-2：1-2；
优选地，所述的乙醇、丙酮和石油醚的体积比为2-4：1-2：1-2；
再优选地，所述的乙醇、丙酮和石油醚的体积比为4：1：2。
所述的乙醇的浓度为60-80%，所述的丙酮的浓度为50-60%，所述的石油醚的浓度为50-60%。
优选地，所述的乙醇的浓度为80%，所述的丙酮的浓度为60%，所述的石油醚的浓度为60%
上述步骤S2中所述的回流提取的温度为60-80℃，优选为60-70℃。
上述步骤S2中所述的回流提取时间为5-10分钟，回流提取次数为1-2次。
上述步骤S3中所述的过滤为微孔滤膜过滤，所述的微孔滤膜的粒径为0.22μm；
所述的药材与提取溶剂的质量体积比为1-5g：10-50mL；
优选地，药材与提取溶剂的质量体积比为1g：10mL、2g：20mL、3g：30mL、4g：40mL或5g：50mL。
在一些优选实施方案中，本发明提供了一种裸花紫珠总黄酮提取物的提取方法，包括以下步骤：
S1、取干净的裸花紫珠根、茎、叶，干燥后粉碎至粒径为100-150目，然后加水在频率为20-50KHz条件下超声，浸泡时间为20-30分钟，过滤，得滤液1和滤渣1，备用；
S2、将步骤S1中得到的滤渣1中加入体积比为1-5：1-2：1-2的乙醇、丙酮和石油醚混合溶剂中回流提取，回流提取的温度为60-80℃，提取时间为5-10分钟，提取1-2次，得到的滤液2和滤渣2，备用；
S3、将步骤S1中得到的滤液1和步骤S2中得到的滤液2混合，过0.22μm微孔滤膜，将滤液浓缩后，通过AB-8树脂，乙醇为洗脱液，收集洗脱液，真空干燥即得裸花紫珠总黄酮提取物。
所述的裸花紫珠总苯乙醇苷和裸花紫珠多糖的提取方法为本领域常规的提取方法。
本发明还提供了一种本发明还提供了所述的裸花紫珠提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用。
本发明还提供了一种组合物，包括所述的裸花紫珠提取物和药学上可接受的辅料。
本发明所述的组合物的剂型为片剂、注射剂、胶囊剂、颗粒剂、栓剂或喷雾剂，优选为颗粒剂。
本发明还提供了所述的组合物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
（1）本发明提供的裸花紫珠提取物的提取方法采用混合溶剂进行提取，通过控制提取溶剂的体积比，可以明显提高裸花紫珠中总黄酮类有效成分的释放，能够使黄酮类物质的总提取率明显提高；
（2）本发明通过控制提取溶剂的浓度可以明显提高提取效率，缩短提取时间，在较低的温度下依然可以保证有效成分的高效释放，提高提取效率，减少中药浪费；
（3）本发明提供的裸花紫珠提取物能够有效的治疗溃疡性结肠炎，治疗效果好，安全有效。
具体实施方式
以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。
本发明所用于提取试验的裸花紫珠均为药店购买的常规药材。
基础实施例1一种裸花紫珠总黄酮提取物的提取方法
包括以下步骤：
S1、取干净的裸花紫珠根、茎、叶，干燥后粉碎至粒径为100目，然后加水在频率为20KHz条件下超声，浸泡时间为20分钟，过滤，得滤液1和滤渣1，备用；
S2、将步骤S1中得到的滤渣1中加入体积比为1：1：1的60%乙醇、50%丙酮和50%石油醚混合溶剂中回流提取，回流提取的温度为60℃，提取时间为10分钟，提取2次，得到的滤液2和滤渣2，备用；
S3、将步骤S1中得到的滤液1和步骤S2中得到的滤液2混合，过0.22μm微孔滤膜，将滤液浓缩后，通过AB-8树脂，乙醇为洗脱液，收集洗脱液，真空干燥即得裸花紫珠总黄酮提取物。
基础实施例2一种裸花紫珠总黄酮提取物的提取方法
包括以下步骤：
S1、取干净的裸花紫珠根、茎、叶，干燥后粉碎至粒径为150目，然后加水在频率为50KHz条件下超声，浸泡时间为30分钟，过滤，得滤液1和滤渣1，备用；
S2、将步骤S1中得到的滤渣1中加入体积比为5：2：2的80%乙醇、60%丙酮和60%石油醚混合溶剂中回流提取，回流提取的温度为80℃，提取时间为5分钟，提取2次，得到的滤液2和滤渣2，备用；
S3、将步骤S1中得到的滤液1和步骤S2中得到的滤液2混合，过0.22μm微孔滤膜，将滤液浓缩后，通过AB-8树脂，乙醇为洗脱液，收集洗脱液，真空干燥即得裸花紫珠总黄酮提取物。
基础实施例3一种裸花紫珠总黄酮提取物的提取方法
包括以下步骤：
S1、取干净的裸花紫珠根、茎、叶，干燥后粉碎至粒径为120目，然后加水在频率为30KHz条件下超声，浸泡时间为25分钟，过滤，得滤液1和滤渣1，备用；
S2、将步骤S1中得到的滤渣1中加入体积比为4：1：2的80%乙醇、60%丙酮和60%石油醚混合溶剂中回流提取，回流提取的温度为70℃，提取时间为8分钟，提取2次，得到的滤液2和滤渣2，备用；
S3、将步骤S1中得到的滤液1和步骤S2中得到的滤液2混合，过0.22μm微孔滤膜，将滤液浓缩后，通过AB-8树脂，乙醇为洗脱液，收集洗脱液，真空干燥即得裸花紫珠总黄酮提取物。
基础对比例1
与基础实施例3的区别在于80%乙醇、60%丙酮和60%石油醚的体积比为1：5：5，其他操作和步骤与基础实施例3相同。
基础对比例2
与基础实施例3的区别在于80%乙醇、60%丙酮和60%石油醚的体积比为10：1：1，其他操作和步骤与基础实施例3相同。
基础对比例3
与基础实施例3的区别在于仅使用70%的乙醇，其他操作和步骤与基础实施例3相同。
试验例1提取率检测
基础实施例1-3和基础对比例1-3中得到的裸花紫珠总黄酮提取物中毛蕊花糖苷、木犀草苷的提取率以及黄酮类物质的总提取率检测。
检测方法：
色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.1%磷酸溶液（60：40）为流动相，检测波长为348nm，理论板数按木犀草苷峰计算应不低于3000。
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.1%醋酸溶液（16：84）为流动相，检测波长为332nm，理论板数按毛蕊花糖苷峰计算应不低于4000。
对照品溶液制备：取木犀草苷和毛蕊花糖苷对照品适量，称定，分别加70%甲醇和50%甲醇制成每毫升含30mg和40mg的溶液，即得。
供试品溶液制备：
分别取基础实施例1-3和基础对比例1-3的样品，加溶剂溶解，定容后过滤，记得供试品溶液。
测定法：分别吸取对照品溶液、供试品溶液个10µL，注入液相色谱仪，测定，即得。
具体提取效率见下表1。
表1基础实施例1-3和基础对比例1-3中得到的裸花紫珠提取物中毛蕊花糖苷、木 犀草苷的提取率以及黄酮类物质的总提取率
实例 毛蕊花糖苷提取率（mg/g药材） 木犀草苷提取率（mg/g药材） 黄酮类物质的总提取率（mg/g药材） 黄酮类物质的纯度%
基础实施例1 3.2% 0.21% 0.56% 85.6%
基础实施例2 3.4% 0.22% 0.58% 86.2%
基础实施例3 3.5% 0.24% 0.61% 88.9%
基础对比例1 3.0% 0.18% 0.45% 75.1%
基础对比例2 3.1% 0.16% 0.42% 76.4%
基础对比例3 2.5% 0.12% 0.40% 75.4%
实施例1一种裸花紫珠提取物
按重量份数计：由20份裸花紫珠总黄酮、15份裸花紫珠总苯乙醇苷和1份裸花紫珠多糖组成。
所述的裸花紫珠总黄酮由基础实施例1得到。
实施例2一种裸花紫珠提取物
按重量份数计：由50份裸花紫珠总黄酮、25份裸花紫珠总苯乙醇苷和5份裸花紫珠多糖组成。
所述的裸花紫珠总黄酮由基础实施例2得到。
实施例3一种裸花紫珠提取物
按重量份数计：由30份裸花紫珠总黄酮、20份裸花紫珠总苯乙醇苷和3份裸花紫珠多糖组成。
所述的裸花紫珠总黄酮由基础实施例3得到。
实施例4一种裸花紫珠提取物
按重量份数计：由40份裸花紫珠总黄酮、20份裸花紫珠总苯乙醇苷和1份裸花紫珠多糖组成。
所述的裸花紫珠总黄酮由基础实施例3得到。
实施例5一种裸花紫珠提取物
按重量份数计：由50份裸花紫珠总黄酮、25份裸花紫珠总苯乙醇苷和4份裸花紫珠多糖组成。
所述的裸花紫珠总黄酮由基础实施例3得到。
对比例1
与实施例4的区别在于：不含裸花紫珠总黄酮，其他组分及含量与实施例4相同。
对比例2
与实施例4的区别在于：不含裸花紫珠总苯乙醇苷，其他组分及含量与实施例4相同。
对比例3
与实施例4的区别在于：不含裸花紫珠多糖，其他组分及含量与实施例4相同。
对比例4
与实施例5的区别在于：裸花紫珠总黄酮、裸花紫珠总苯乙醇苷和裸花紫珠多糖的重量分数比为4：5：1，即31.6份裸花紫珠总黄酮、39.5份裸花紫珠总苯乙醇苷和7.9份裸花紫珠多糖。
对比例5
与实施例5的区别在于：裸花紫珠总黄酮、裸花紫珠总苯乙醇苷和裸花紫珠多糖的重量分数比为6：1：0.9，即60份裸花紫珠总黄酮、10份裸花紫珠总苯乙醇苷和9份裸花紫珠多糖。
试验例2动物实验
1、实验动物：SPE级雄性SD大鼠120只，体重体质量(220±20)g。
2、动物分组及给药：120只SD雄性大鼠分为正常组、模型组、实验组（实施例1-5和对比例1-5），各组均10只。除正常组外，其余各组硝基苯磺酸(TNBS,100mg/kg)灌肠法建立UC模型。造模8h后，各组开始灌胃给药，分别灌胃实施例1-5及对比例1-5制备的提取物350mg/Kg；空白组、模型组均给予ELE溶液和蒸馏水1:3体积比的混合液10mL/kg，共10d。
3、检测指标
(1)造模6h后电子温度计测大鼠肛温，连测3d；末次给药后大鼠称重；统计各组大鼠的死亡数，分析死亡原因；一般行为学观察。
(2)结肠损伤分数，以结肠黏膜损伤点的长度计算，即≤0.5mm为1分，≤1mm为2分，≤2mm为3分，以次类推，损伤点宽度≥2mm时，分数加倍；
（3）红细胞超氧化物歧化酶(SOD)，按SUN等的肾上腺素法略加改进进行测定；
（4）结肠黏膜过氧化脂质(LPO)测定，在刮取胃黏膜中按1∶10加入1mL 4℃的0.3mol/L蔗糖液，匀浆，以4000 r/mh离心10min，取上清液测酶活性，LPO测定按于树玉法；
（5）用免疫化试剂盒检测TLR4和TLR2。
4、统计学方法：采用SPSS 17.0处理数据，计量数据采用(平均数±标准差)表示，采用方差分析。
5.实验结果
(1)对溃疡性结肠炎大鼠结肠损伤分数和大便乳酸含量的影响
表2各组大鼠结肠损伤分数和大便乳酸含量
实例 只数 损伤分数 大便乳酸
空白组 10 0 5.86±0.18
模型组 10 15.25±1.12 5.74±0.21
实施例1 10 4.83±1.32** 1.82±0.23**
实施例2 10 4.65±1.03** 1.86±0.22**
实施例3 10 4.54±1.09** 1.75±0.25**
实施例4 10 4.12±1.01** 1.54±0.21**
实施例5 10 4.35±1.20** 1.65±0.22**
对比例1 10 5.12±1.32* 3.12±0.19*
对比例2 10 5.15±1.21* 3.15±0.16*
对比例3 10 5.20±1.08* 3.16±0.21*
对比例4 10 5.04±1.09* 3.07±0.17*
对比例5 10 5.05±1.12* 3.09±0.20*
注：与模型组相比**P≤0.01，*P≤0.05
根据上表可知，表格中各组均可见溃疡形成，与空白组相比，模型组损伤分数和大便乳酸含量最高，与模型组相比，实施例1-5组与对比例1-6组的损伤分数和大便乳酸含量均不同程度的下降，均有统计学意义，实施例1-5组相当于与对比例1-5组损伤分数和大便乳酸含量明显减少，具有统计学意义。
（2）对溃疡性结肠炎大鼠SOD和LPO含量的影响
表3各组大鼠SOD和LPO含量
实例 n SOD/（U/mL） LPO（nmol/mg）
空白组 10 35.12±2.01 1.36±0.25
模型组 10 5.86±2.10 10.25±0.21
实施例1 10 22.13±2.03** 4.61±0.19**
实施例2 10 21.36±1.96** 4.58±0.23**
实施例3 10 21.52±1.98** 4.63±0.19**
实施例4 10 25.45±2.05** 4.42±0.22**
实施例5 10 23.28±2.11** 4.55±0.21**
对比例1 10 18.12±2.07* 7.84±0.20*
对比例2 10 18.54±1.96* 7.79±0.18*
对比例3 10 19.32±1.98* 7.82±0.25*
对比例4 10 20.37±1.95* 6.12±0.18*
对比例5 10 20.54±2.01* 6.24±0.24*
注：与模型组相比**P≤0.01，*P≤0.05
与空白组相比，模型组红细胞SOD活性显著下降(P＜0.5)，与模型组相比，实施例1-5组与对比例1-6组的红细胞SOD活性均不同程度的升高，均有统计学意义，实施例1-5组相当于与对比例1-5组红细胞SOD活性明显升高，具有统计学意义。与空白组相比，模型组肠黏膜LPO含量显著升高(P＜0.5)，与模型组相比，实施例1-5组与对比例1-6组的肠黏膜LPO含量均不同程度的下降，均有统计学意义，实施例1-5组相当于与对比例1-5组肠黏膜LPO含量明显降低，具有统计学意义。
（3）对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜周边组织TLR4、TLR2表达的影响
表4各组大鼠结肠组织TLR4、TLR2表达的影响
实例 n TLR4 TLR2
空白组 10 2.98±0.52 3.05±0.62
模型组 10 25.12±1.98 15.16±2.53
实施例1 10 7.23±1.35** 4.23±1.15**
实施例2 10 7.05±1.21** 4.35±1.13**
实施例3 10 6.84±1.23** 4.42±1.09**
实施例4 10 6.52±1.30** 4.15±0.96**
实施例5 10 6.64±1.15** 4.23±1.12**
对比例1 10 9.42±1.23* 7.46±1.30*
对比例2 10 9.67±1.18* 7.52±0.98*
对比例3 10 9.58±1.09* 7.61±1.25*
对比例4 10 8.84±1.13* 6.83±1.12*
对比例5 10 8.79±1.08* 6.76±1.30*
注：与模型组相比**P≤0.01，*P≤0.05
与空白组比较，模型组TLR4和TLR2显著上升(P＜0.05)，实施例1-5与对比例1-5治疗后TLR4、TLR2因子表达进一步减弱，与模型组比较有显著差异(P＜0.01)。
经研究发现，溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜TLR2和TLR4的表达与SOD活性及LPO含量之间均有直线相关关系。裸花紫珠提取物缓解溃疡性结肠炎的机制之一可能与其减弱TLR2和TLR4的表达，降低结肠黏膜LPO含量，增加红细胞SOD含量，进而增加机体对O2的清除，从而达到促进大便乳酸排泄，减少结肠炎症损伤的治疗作用。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰。

Claims (3)

1.一种裸花紫珠提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用，其特征在于：所述的裸花紫珠提取物按重量份数计：由10-50份裸花紫珠总黄酮、5-20份裸花紫珠总苯乙醇苷和1份裸花紫珠多糖组成；
所述的裸花紫珠总黄酮提取物的提取方法，包括以下步骤：
S1、取干净的裸花紫珠根、茎、叶，干燥后粉碎，然后加水超声浸泡，过滤，得滤液1和滤渣1，备用；
S2、将步骤S1中得到的滤渣1中加入混合溶剂回流提取，得到的滤液2和滤渣2，备用；
S3、将步骤S1中得到的滤液1和步骤S2中得到的滤液2混合，过滤，将滤液浓缩后，通过AB-8树脂，乙醇为洗脱液，收集洗脱液，真空干燥即得裸花紫珠总黄酮提取物；
步骤S2中所述的混合溶剂为乙醇、丙酮和石油醚的混合溶液。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的裸花紫珠提取物，按重量份数计：由40份裸花紫珠总黄酮、20份裸花紫珠总苯乙醇苷和1份裸花紫珠多糖组成。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的混合溶液中乙醇、丙酮和石油醚的体积比为1-5：1-2：1-2。
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