CN111662853A - 一种厨余垃圾生物干化稳定化菌剂及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种厨余垃圾生物干化稳定化菌剂及其制备方法和应用。具体技术方案为：一株铜绿假单胞菌，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.17868。并利用该铜绿假单胞菌提供了一种微生物组合物，包括：淀粉降解菌、蛋白质降解菌、纤维素降解菌、油脂降解菌和除臭菌；油脂降解菌包括铜绿假单胞菌。该微生物组合物可针对性处理厨余垃圾，实现厨余垃圾脱水干化、减容减量和资源化利用的目的。

Description

一种厨余垃圾生物干化稳定化菌剂及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种厨余垃圾生物干化稳定化菌剂及其制备方法和应用。
背景技术
厨余垃圾占生活垃圾的60％以上；其有机物含量高，非常容易腐败变质，是城市生活恶臭污染主要来源。因此，如何对厨余垃圾进行资源化、减量化、无害化处理，是目前急需解决的重要问题。
现有技术中，将厨余垃圾与其他生活垃圾混合后进行焚烧发电，是解决上述问题的重要手段之一。但生活垃圾的含水率在50％左右，而厨余垃圾含水率高达80％以上。这导致两者混合后，含水率高、低位热值低、燃烧性极差，因此需添加燃油或煤炭等辅助燃料助燃。也有许多城镇将这类高含水率的混合垃圾直接进行填埋处理。但直接填埋会产生大量的渗滤液，同时会释放恶臭气体与温室气体，成为严重的二次污染源。不仅污染环境，还严重影响了周边居民的生活与健康。
生物干化是近几年来兴起的一种厨余垃圾预处理技术，适用性强，可作为制备垃圾衍生燃料(RDF)或者作为垃圾焚烧的预处理手段。目前，生物干化技术主要应用于污泥处理领域；在厨余垃圾处理上的研究主要集中于研发干化设备、探究原料处理方法、优化干化通风等条件方面。但这些方法需要外部提供通风条件和热源等，处理成本较高。现有技术中尚未出现使用微生物复合菌剂对厨余垃圾进行针对性生物干化的研究。
发明内容
本发明的目的是提供一种新的针对厨余垃圾处理的生物菌制剂及其制备方法和应用。（以下保藏地址均为北京市朝阳区北辰西路1号院3号）
为实现上述发明目的，本发明所采用的技术方案是：一株铜绿假单胞菌，于2019年5月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCCNo.17868。
相应的，一株铜绿假单胞菌，其16S rDNA如SEQ ID NO：5所示。
相应的，一株铜绿假单胞菌，菌落呈黄色，边缘整齐，表面湿润，中间隆起；菌体呈短杆状，无芽孢；适宜温度范围为25～40℃，适宜 pH值范围为4～10。
相应的，所述铜绿假单胞菌在降解油脂中的应用。
相应的，一种包含所述铜绿假单胞菌的微生物组合物，所述微生物组合物包括：淀粉降解菌、蛋白质降解菌、纤维素降解菌、油脂降解菌和除臭菌；所述油脂降解菌包括所述铜绿假单胞菌。
优选的，所述淀粉降解菌为解淀粉芽孢杆菌；和/或；所述蛋白质降解菌为土壤短芽孢杆菌或短短芽孢杆菌或土壤短芽孢杆菌和短短芽孢杆菌的混合物；和/或；所述纤维素降解菌为橙色嗜热子囊菌；和/或；所述油脂降解菌为所述铜绿假单胞菌或所述铜绿假单胞菌和解硫胺素芽孢杆菌的混合物；和/或；所述除臭菌为鞘鞍醇杆菌或地尿素芽孢杆菌或鞘鞍醇杆菌和地尿素芽孢杆菌的混合物。
优选的，所述解淀粉芽孢杆菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.14264；和/或；所述土壤短芽孢杆菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.19516；和/或；所述短短芽孢杆菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.19517；和/或；所述橙色嗜热子囊菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.19606；和/或；所述解硫胺素芽孢杆菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.17867；和/或；所述鞘鞍醇杆菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.12632；和/或；所述地尿素芽孢杆菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.19518。
优选的，按活菌量，淀粉降解菌：蛋白质降解菌：纤维素降解菌：油脂降解菌：除臭菌＝(15～30):(15～20)：(10～15)：(15～30)：(10～ 15)。
相应的，利用所述微生物组合物制备的微生物复合菌剂，所述微生物复合菌剂包括微生物组合物和固体发酵辅料，微生物组合物在微生物复合菌剂中占比为1％～2％，L/kg；
按重量份数，所述固体发酵辅料包括：10～20份麸皮、0.3～0.5 份硫酸镁、0.1～0.2份磷酸二氢钾、0.2～0.4份磷酸氢二钠、1～2份葡萄糖。
相应的，所述微生物组合物或所述微生物复合菌剂在处理厨余垃圾中的应用。
本发明具有以下有益效果：
(1)本发明提供了一种可针对性处理厨余垃圾的微生物复合菌剂。微生物可利用厨余垃圾中能生物降解的有机物进行好氧呼吸，在满足自身生长繁殖需求的同时可释放大量的热量。这部分热量可以使垃圾堆体内的温度显著升高。同时，微生物活动还能使物料中的束缚水活化，降低其束缚状态，使其更容易被加热蒸发。物料中的水分在生物能的加热下转化为水蒸气，通过自由扩散和强制对流带出，从而有效降低了厨余垃圾的含水量。这种处理方式既不消耗外源热能，又可提高垃圾低位热值；不仅有利于热能回收利用，还能使可生物降解的有机物部分稳定化，减少后续处理过程中污染物的污染。同时，获得干化产品还可以制成有机肥，从而实现资源的循环利用。因此，最终可达到厨余垃圾的脱水干化、减容减量和资源化利用的目的。
虽然理论上微生物可以达到上述作用，但由于厨余垃圾的化学组成复杂，单一或少量的微生物无法对厨余垃圾的主要成分全部进行有效降解。因此，本发明提供的微生物复合菌剂联合使用了8种不同的微生物，能够对厨余垃圾的主要有机物成分(淀粉、蛋白质、纤维素、油脂)进行针对性有效降解，释放出大量的热量，这部分热量可以使垃圾堆体内的温度显著升高，有助于水分的气化蒸发，实现了厨余垃圾的减量化和干化。同时，通过大量前期试验表明，各微生物间并无拮抗作用，不会相互产生抑制作用；在特定配比下，这些微生物在处理厨余垃圾过程中，还会发生一定的协同作用。
(2)考虑到厨余垃圾的堆肥处理过程是一个温度变化的过程，所以本发明的微生物菌剂中同时包括了中温菌和高温菌。在升温阶段，中温菌起主要作用，降解厨余垃圾的部分有机物成分，释放热量，使堆体温度升高；在高温阶段，高温菌发挥作用，进一步降解厨余垃圾中的有机物。
(3)油脂是厨余垃圾中最难降解的物质，且油脂覆盖在厨余垃圾其他成分表面，也会阻碍了氧气的通入，严重影响微生物的活性，影响对其它物质的降解。本发明的微生物复合菌剂中选择了特定的中、高温高效油脂降解菌，可快速降解厨余垃圾中的动植物废弃油脂，方便氧气进入堆体，有助于其他微生物的生长和发挥功能。
(4)麸皮和稻壳渣作为固体发酵辅料，是微生物复合菌剂的良好载体，还可增加厨余垃圾原料的含碳量，调节原料的含水率，并且可增加原料的孔隙度，有利于通风扩散，携带水分。
具体实施方式
一、本发明提供了一种可针对性处理厨余垃圾的微生物复合菌剂。
所述微生物复合菌剂中的微生物组成包括：淀粉降解菌、蛋白质降解菌、纤维素降解菌、油脂降解菌、除臭菌。
优选的方案为：按活菌量，微生物组成中，淀粉降解菌：蛋白质降解菌：纤维素降解菌：油脂降解菌：除臭菌＝(15～30):(15～20)：(10～ 15)：(15～30)：(10～15)；微生物复合菌剂中，各微生物的活菌量≥ 1010CFU/mL。可选的操作为：将各微生物培养至活菌量≥1010CFU/mL，获得各微生物种子液，再按上述比例作为各微生物种子液的体积比，称量后混匀即可。
其中，所述淀粉降解菌为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens，命名编号为H5)，菌株保藏编号为CGMCC No.14264。
所述蛋白质降解菌包括中温菌土壤短芽孢杆菌(Brevibacillus agri，命名编号为N10)，保藏编号为：CGMCC No.19516；还包括高温菌短短芽孢杆菌(Brevibacillusbrevis，命名编号为50-11)，保藏编号为CGMCC No.19517。
所述纤维素降解菌为橙色嗜热子囊菌(Thermoascus aurantiacus，命名编号为ZJ3)，菌株保藏编号为CGMCC No.19606。
所述油脂降解菌包括中温菌铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa，命名编号为M4)，菌株保藏编号为CGMCC No.17868；还包括高温菌嗜热嗜气解硫胺素芽孢杆菌(Aneurinibacillus thermoaerophilus，编号为H7)，菌株保藏编号为CGMCC No.17867。
所述除臭菌包括硫氧化细菌鞘鞍醇杆菌(sphingobacterium sp.编号为DS-4)，菌株保藏编号为CGMCC No.12632；还包括高温氨氧化菌地尿素芽孢杆菌(Ureibacillusterrenus，命名编号SD2-2)，菌株保藏编号为CGMCC No.19518。
更优选的方案为：所述微生物复合菌剂中，除含有各微生物外，还包括固体发酵辅料。加入固体发酵辅料后，所述微生物复合菌剂中，微生物的总占比为1％～2％(L/kg)。
所述固体发酵辅料包括：麸皮、硫酸镁、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、葡萄糖。
优选的方案为，按重量份数，所述固体发酵辅料包括：10～20份麸皮、0.3～0.5份硫酸镁、0.1～0.2份磷酸二氢钾、0.2～0.4份磷酸氢二钠、1～2份葡萄糖。
二、本发明还提供了一种可针对性处理厨余垃圾的微生物复合菌剂的制备方法。具体包括如下步骤：
1、分别培养所述淀粉降解菌、蛋白质降解菌、纤维素降解菌、油脂降解菌和除臭菌。
2、按上述比例混合所述培养的淀粉降解菌、蛋白质降解菌、纤维素降解菌、油脂降解菌、除臭菌，获得复合菌体。
3、将所述复合菌体加入固体发酵辅料中，在湿度为55％～65％范围内经固体发酵3～7天，即得所需的微生物复合菌剂。
三、本发明还提供了一种所述微生物复合菌剂的应用方法。具体包括如下步骤：
1、将稻壳渣投入待处理的厨余垃圾中。所述稻壳渣的粒径为2～ 5mm；稻壳渣重量为待处理厨余垃圾湿重的20～35％。混合均匀，调节原料的C/N为20～35，调节湿度为60％～70％，得到混合物料A。
2、称取微生物复合菌剂，投入到物料A中，混合均匀得到物料B。所述微生物复合菌剂的重量为混合物料A重量的2‰～10‰。
3)将物料B装入容器中，堆肥发酵处理；堆体高度为容器高度的 70～85％。
下面结合具体实施例，对本发明进行进一步阐释。
全文涉及培养基较多，统一列在此处：
1、牛肉膏蛋白胨液体培养基：蛋白胨10.0g，牛肉膏5.0g，NaCl 5.0g，葡萄糖20.0g，蒸馏水1000mL，调pH至7.0～7.2。
2、淀粉液体培养基：可溶性淀粉10.0g、牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、 NaCl 5.0g和蒸馏水1000mL，调pH至7.0～7.2。
3、蛋白质培养基：NaCl 0.5g，KH2PO4 0.35g，K2HPO4 0.7g，蛋白质30.0g，蒸馏水1000mL，调pH至7.0～7.2。
4、PDA液体培养基：称取去皮土豆200g，切成小块，加水煮沸20～ 30分钟，用八层纱布过滤，滤液中加入葡萄糖20.0g，补充水分到1000mL。
5、纤维素固体培养基：羧甲基纤维素钠5.0g、(NH4)2SO4 1.0g、KH2PO4 1.0g、CaCl20.3g、NaCl 0.5g、琼脂20.0g、调pH至6.5～7.0。
6、纤维素液体培养基：羧甲基纤维素钠15.0g、MgSO4·7H2O 0.5g、 KH2PO4 4.0g、CaCl2 0.3g、NaCl 0.5g、酵母膏0.5g，蛋白胨3.0g和蒸馏水1000mL制成，调pH至6.5～7.0。
7、油脂培养基：蛋白胨10.0g，KH2PO4 2.0g，K2HPO4 2.0g，NaCl 2.0g， MgSO4·7H2O0.5g，油脂15.0g，蒸馏水1000mL，调pH至7.0～7.2。
实施例一：各微生物的筛选
本实施例对微生物复合菌剂中各微生物的筛选过程进行简单展示。需要说明的是，发明人实际并非只进行了如下试验；而是进行了大量筛选、优化试验，并反复验证是否存在拮抗作用和协同作用后，才最终获得并选定微生物复合菌剂中的各微生物。由于篇幅原因，本实施例中只选择了发明人进行的少部分具有代表性的工作进行展示。
微生物复合菌剂中的各微生物并不能在同种间进行随意替换；替换后很可能对厨余垃圾的处理效果降低，甚至因发生拮抗作用等原因，无法有效处理厨余垃圾，无法实现发明目的。
1、淀粉降解菌的筛选。
从如下可能具有降解淀粉能力的微生物中进行选择：蜡样芽孢杆菌 (Bacilluscereus，命名编号为W1，购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC1.10243)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis，命名编号为B3，购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC 1.12939)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens，编号为H5，2016年，本实验室于四川的某餐馆的餐厨垃圾中分离获得并保存)。
将上述3株菌活化后，各取一环到牛肉膏蛋白胨液体培养基中，35℃培养24h，分别制备获得种子液。再将种子液分别以体积比为5％的接种量转接到淀粉液体培养基中，35℃、160r/min培养72h，获得各发酵液。
在600nm处分别测定各组发酵液的OD值，相同培养条件下，OD值越高，菌株生长越好。同时采用3,5-二硝基水杨酸法测定各组发酵液的淀粉酶活力，淀粉酶活力越高，证明菌株降解淀粉类物质的能力越强。结果如表1所示。
表1各备选微生物的生长情况和淀粉酶活力展示
菌株编号 OD<sub>600nm</sub> 淀粉酶活力(U/mL)
W1 1.96 49.91
B3 1.49 28.84
H5 2.32 65.03
本实验室筛选保存的解淀粉芽孢杆菌H5的生长情况和降解淀粉的能力都显然优于其它微生物，因此，将其作为所需的淀粉降解菌。
所述解淀粉芽孢杆菌H5在LB平板上呈淡黄色，不透明，表面粗糙，中间有隆起，边缘不规则。革兰氏染色呈阳性，菌体呈杆状，可形成内生芽孢，呈椭圆形，两端钝圆。适宜生长条件为：0～37℃，pH为中性。可产多种α-淀粉酶，从而可快速降解含淀粉类物质，适合分解厨余垃圾中的米饭、馒头、面条等物质。所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)H5于2017年6月22日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。保藏编号为：CGMCC No.14264。其16S rDNA如SEQ ID NO：1所示。
2、蛋白质降解菌的筛选。
从如下可能具有降解蛋白质能力的微生物中进行选择：地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis，命名编号为F4；购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC1.10314)，约翰氏不动杆菌 (Acinetobacter johnsonii，命名编号为A2；购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC 1.15885)，以上两株菌为购买。土壤短芽孢杆菌(Brevibacillus agri，命名编号为N10；2016年，本实验室于四川的畜禽养殖场土壤中分离获得并保存)，短短芽孢杆菌 (Brevibacillus brevis，命名编号为50-11；2018年，本实验室于四川的畜禽养殖场土壤中分离获得并保存)，以上两株菌为本实验室分离保存。
将上述4株菌活化后，各取一环到牛肉膏蛋白胨液体培养基中，在 35℃或50℃下培养24h，分别制备种子液。将各种子液以体积比为5％的接种量转接到蛋白质培养基中，在35℃或50℃、160r/min培养72h，获得各发酵液。其中，F4、N10为中温菌，培养温度为35℃；A2、50-11 为高温菌，培养温度为50℃。
在600nm处测定各发酵液的OD值，相同培养条件下，OD值越高，菌株生长越好。同时采用双缩脲法测定蛋白质降解率，蛋白质降解率越高，证明菌株降解蛋白类物质的能力越强。结果如表2所示。
表2各备选微生物的生长情况和蛋白质降解率展示
菌株编号 OD<sub>600nm</sub> 蛋白质降解率(％)
F4 1.75 20.89
N10 2.01 43.72
A2 1.87 24.29
50-11 2.23 46.17
本实验室筛选保存的土壤短芽孢杆菌N10(中温)和短短芽孢杆菌 50-11(高温)的生长情况和降解蛋白质的能力都显然优于其它微生物，因此，将其作为所需的蛋白质降解菌。
所述土壤短芽孢杆菌N10的菌落呈黄灰色圆形，表面光滑湿润，有光泽，边缘不规则。菌体呈杆状，芽孢中生，不膨大，孢子椭圆形。适宜培养条件为：25～35℃，pH值为5～8。可产蛋白酶，能快速分解动植物蛋白类物质，适合在中温(室温)期分解厨余垃圾中的豆制品、肉制品和牛奶等物质。所述土壤短芽孢杆菌(Brevibacillus agri)N10 于2020年3月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。保藏编号为：CGMCC No.19516。其16S rDNA如SEQ ID NO：2所示。
所述短短芽孢杆菌50-11的菌落呈圆形，表面光滑、湿润、边缘整齐，颜色为灰白色。菌体呈球杆状，无芽孢，无鞭毛。适宜培养条件为： 40～60℃，pH值为5～9。可产蛋白酶，能快速分解动植物蛋白类物质，适合在高温时期(发酵中后期、放热期)分解厨余垃圾中的豆制品、肉制品和牛奶等物质。所述短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis)50-11 于2020年3月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。保藏编号为：CGMCCNo.19517。其16S rDNA如SEQ ID NO：3所示。
3、纤维素降解菌的筛选。
从如下可能具有降解纤维素能力的微生物中进行选择：嗜热毛壳菌 (Chaetomiumthermophilum，命名编号为ZJ1)、橙色嗜热子囊菌 (Thermoascus aurantiacus，命名编号为ZJ3)、褐色嗜热裂孢菌 (Thermobifida fusca，命名编号为F5)，以上3株菌均为2019年，本实验室于浙江的园林垃圾中分离获得并保存。
将上述3株菌活化后，各取一环到PDA液体培养基中，50℃培养24h，获得各种子液。再分别取一环种子液分别接种到纤维素固体培养基中， 50℃倒置培养48h。利用游标卡尺测定菌落直径D，相同培养条件下，D 值越高，表明菌株的生长越好。同时，将各种子液以体积比为5％的接种量转接到纤维素液体培养基中，50℃、160r/min培养72h。采用DNS法测定纤维素酶的活力，纤维素酶活力越高，菌株降解纤维素类物质的能力越强。结果如表3所示。
表3各备选微生物的生长情况和纤维素降解率展示
菌株编号 D(cm) 纤维素酶活力(U/mL)
ZJ1 1.67 27.83
ZJ3 1.82 55.89
F5 0.65 32.79
本实验室筛选保存的橙色嗜热子囊菌(Thermoascus aurantiacus) ZJ3的生长情况和降解纤维素的能力显然优于其它微生物，因此，将其作为所需的纤维素降解菌。
所述橙色嗜热子囊菌ZJ3的菌落呈棉絮状，初为白色，在培养过程中逐渐变为橙色，后期分泌橙色液体，生长极快，在PDA培养基上，50℃下可在24h内长满平板。最适生长温度为45～50℃，最适生长pH为5～6。可产纤维素酶，能快速分解纤维素类物质，适合分解厨余垃圾中的水果、蔬菜等食物残渣。所述橙色嗜热子囊菌(Thermoascus aurantiacus)ZJ3于2020年3月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。保藏编号为：CGMCC No.19606。其16S rDNA 如SEQ ID NO：4所示。
4、油脂降解菌的筛选。
从如下可能具有降解油脂能力的微生物中进行选择：产酸克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca，命名编号为K3；购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC 1.15628),嗜热脱氮芽孢杆菌 (Geobacillus thermodenitrificans，命名编号为G6；购自中国微生物菌种查询网，保藏编号为ATCC 29492)，以上两株菌为购买；铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa，命名编号为M4)，嗜热嗜气解硫胺素芽孢杆菌(Aneurinibacillus thermoaerophilus，命名编号为H7)，以上两株菌均为2018年本实验室于四川的餐厨垃圾处理厂的餐厨垃圾中分离获得并保存。
将上述4株菌活化后，各取一环到牛肉膏蛋白胨液体培养基中，35℃或50℃培养24h，制备种子液。将种子液以体积比为5％的接种量转接到油脂培养基中，35℃或50℃、160r/min培养72h，获得各发酵液。其中， K3、M4为中温菌，培养温度为35℃；G6、H7为高温菌，培养温度为50℃。
在600nm处测定各发酵液的OD值，相同培养条件下，OD值越高，菌株生长越好。采用红外分光光度法测定油脂降解率，油脂降解率越高，菌株降解油脂类物质的能力越强。结果如表4所示。
表4各备选微生物的生长情况和油脂降解率展示
Figure BDA0002590389900000111
Figure BDA0002590389900000121
本实验室筛选保存的铜绿假单胞菌M4(中温)和嗜热嗜气解硫胺素芽孢杆菌H7(高温)的生长情况和降解油脂的能力都显然优于其它微生物，因此，将其作为所需的油脂降解菌。
所述的铜绿假单胞菌M4的菌落呈黄色，边缘整齐，表面湿润，中间隆起。菌体呈短杆状，无芽孢。适宜温度范围为10～40℃，适宜pH 值范围为4～10，具有一定的耐盐能力和降解蛋白质的能力，尤其是降解高浓度油脂的能力较强，适合在中温(室温)阶段分解厨余垃圾中的动植物废弃油脂。所述铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)M4于 2019年5月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。保藏编号为：CGMCCNo.17868。其16S rDNA如SEQ ID NO：5所示。
嗜热嗜气解硫胺素芽孢杆菌H7的菌落呈白色，边缘不整齐，表面平整，粘稠不易挑取，菌体呈短杆状。适宜温度范围为40～60℃，适宜 pH值范围为4～9，具有一定的耐盐能力和高效降解油脂的能力，适合在高温阶段分解厨余垃圾中的动植物废弃油脂。所述嗜热嗜气解硫胺素芽孢杆菌(Aneurinibacillus thermoaerophilus)H7于2019年5月 30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。保藏编号为：CGMCC No.17867。其16SrDNA如SEQ ID NO：6所示。
5、除臭菌的筛选。
本发明使用的除臭菌包括硫氧化细菌鞘鞍醇杆菌DS-4(是本实验室于2016年于污水处理厂好氧池污泥中筛选、分离、保存获得)和地尿素芽孢杆菌SD2-2(是本实验室于2018年于垃圾堆肥中筛选、分离、保存获得)。
所述的硫氧化细菌鞘鞍醇杆菌DS-4的菌落呈圆形，表面湿润，中间凸起，边缘整齐，颜色为淡黄色，菌体呈短杆状，革兰氏阴性。适宜生长温度为：20℃～40℃，最适生长温度为30℃，适宜pH为6.0～8.0，最适pH值为7.0。去除硫化物的能力强，可用于厨余垃圾生物干化过程中产生的含硫化物如硫化氢、硫醇和甲硫醇等恶臭气体的去除；为中温菌。所述鞘鞍醇杆菌(sphingobacterium sp.)DS-4于2016年6月16 日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。保藏编号为：CGMCC No.12632。其16S rDNA如SEQ ID NO：7所示。
所述氨氧化菌地尿素芽孢杆菌SD2-2的菌落呈白色，表面干燥，边缘不整齐，不易挑取，菌体呈棒杆状，革兰氏阳性。适宜生长条件为： 45～65℃，pH为4～8。高温条件下氨的挥发较为严重，非常容易造成氨恶臭。该菌能够将挥发性的氨气氧化为不挥发的硝酸盐，可用于降低厨余垃圾生物干化高温期氨的挥发，从而达到除臭的目的。所述氨氧化菌地尿素芽孢杆菌(Ureibacillus terrenus)SD2-2于2020年3月27 日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。保藏编号为：CGMCC No.19518。其16S rDNA如SEQ ID NO：8所示。
实施例二：微生物复合菌剂的制备和效果展示
1、扩大培养。
分别制备上述的淀粉降解菌H5，蛋白质降解菌N10和50-11，纤维素降解菌ZJ3，油脂降解菌M4和H7，除臭菌DS-4和SD2-2的一级种子液。各一级种子液中，活菌量均≥109CFU/mL。
无菌条件下，从淀粉降解菌H5、蛋白质降解菌N10和50-11、纤维素降解菌ZJ3、油脂降解菌M4和H7一级种子液中各挑取一环，分别接种于8个各装有50mL牛肉膏蛋白胨液体培养基或PDA液体培养基的 250mL的三角瓶中(ZJ3接种于PDA液体培养基，其余微生物接种于牛肉膏蛋白胨液体培养基)，根据各菌的适宜温度，在30℃或50℃下分别震荡培养20～24h，得到二级种子液。
无菌条件下，将各二级种子液以5％的接种量(v/v)分别接种到8 个装有1L牛肉膏蛋白胨液体培养基或PDA液体培养基的3L的三角瓶中，再在30℃或50℃震荡培养20～24h，得到三级种子液；各微生物的三级种子液中，活菌量菌均≥1010CFU/mL。
2、接种。将三级种子液按不同比例混合，获得不同比例组成的多组混合菌液。按2％(L/kg)的接种量加入固体发酵辅料中，混合均匀后，调节湿度60％，常温环境，培养3天，摊开晾干，得到微生物复合菌剂 (固体)。
所述固体发酵辅料组成为：麸皮15kg、硫酸镁0.4kg、磷酸二氢钾 0.15kg、磷酸氢二钠0.3kg、葡萄糖1.5kg。
按混合菌液中各菌的混合比例不同，设置5个处理组。同时设置对照组：按本实施例扩大培养的方法，同时分别扩大培养并获得淀粉降解菌W1、蛋白质降解菌F4和A2、纤维素降解菌ZJ1、油脂降解菌K3和 G6的三级种子液，在相同条件下获得混合菌液，并进一步制备获得微生物复合菌剂，获得各对照组。
各处理组及对照组具体微生物组成如表5所示。表5中的数据指各微生物三级种子液的体积份数。以组1为例，指按体积份数，混合菌液中包括：25份淀粉降解菌H5、15份蛋白质降解菌N10和50-11(N10与 50-11的体积比为1：1)、15份纤维素降解菌ZJ3、20份油脂降解菌H7、 10份除臭菌DS-4和SD2-2(DS-4与SD2-2的体积比为1：1)。
表5各处理组中各微生物的组合方式
Figure BDA0002590389900000141
Figure BDA0002590389900000151
3、将上述表5各组分别设置3个实验处理。包括：CK组，不添加对应的微生物复合菌剂，以等量待处理的厨余垃圾替代微生物复合菌剂进行添加(替代接种)。实验组1，按2‰的质量比在厨余垃圾中接种对应微生物复合菌剂。实验组2，按1％的质量比在厨余垃圾中接种对应微生物复合菌剂。对各组进行充分混匀、堆肥处理。具体处理包括如下步骤：
(1)将预先准备的稻壳渣，投入到待处理的厨余垃圾原料中，混合均匀。其中，稻壳渣添加重量为投入厨余垃圾湿重的26％，厨余垃圾原料的含水率为76.7％。调节原料的C/N为22.7，调节湿度为68％。获得混合物料A。将混合物料A均匀分成三份。
(2)将表5的各微生物复合菌剂分别接种到各均分的混合物料A 中，接种量分别为2‰和1％。同时接种1％的待处理厨余垃圾，作为CK 组。
(3)将各接种后的厨余垃圾分别装入厨余垃圾堆放桶中。厨余垃圾堆放桶的容积为200L，高100cm，堆体高度均为80cm。在室温下混合物料堆放30天，测量各组堆体高度、含水率及有无恶臭气体。
上述各处理均重复3次取平均值，结果如表6所示。
表6各组处理厨余垃圾效果展示
Figure BDA0002590389900000152
Figure BDA0002590389900000161
序列表
<110> 中国科学院成都生物研究所
<120> 一种厨余垃圾生物干化稳定化菌剂及其制备方法和应用
<160> 8
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1464
<212> DNA
<213> 解淀粉芽孢杆菌H5(Bacillus amyloliquefaciens)
<400> 1
taacatctgt ccaccttcgg cggctggctc ctaaaaggtt acctcaccga cttcgggtgt 60
tacaaactct cgtggtgtga cgggcggtgt gtacaaggcc cgggaacgta ttcaccgcgg 120
catgctgatc cgcgattact agcgattcca gcttcacgca gtcgagttgc agactgcgat 180
ccgaactgag aacagatttg tgggattggc ttaacctcgc ggtttcgctg ccctttgttc 240
tgtccattgt agcacgtgtg tagcccaggt cataaggggc atgatgattt gacgtcatcc 300
ccaccttcct ccggtttgtc accggcagtc accttagagt gcccaactga atgctggcaa 360
ctaagatcaa gggttgcgct cgttgcggga cttaacccaa catctcacga cacgagctga 420
cgacaaccat gcaccacctg tcactctgcc cccgaagggg acgtccttat ctcttaggat 480
tgtcagagga tgtcaagacc tggtaaggtt cttacgcgtt gmttsgaatt gaaaccacat 540
gstscaaccg cttgtgcggg ccccccgtca attcctttga gtttcagtct tgcgaccgta 600
ctccccaggc ggagtgctta atgcgttagc tgcagcacta aggggcggaa accccctaac 660
acttagcact catcgtttac ggcgtggact accagggtat ctaatcctgt tcgctcccca 720
cgctttcgct cctcagcgtc agttacagac cagagagtcg ccttcgccac tggtgttcct 780
ccacatctct acgcatttca ccgctacacg tggaattcca ctctcctctt ctgcactcaa 840
gttccccagt ttccaatgac cctccccggt tgagccgggg gctttcacat cagacttaag 900
aaaccgcctg cgagcccttt acgcccaata attccggaca acgcttgcca cctacgtatt 960
accgcggctg ctggcacgta gttagccgtg gctttctggt taggtaccgt caaggtgccg 1020
ccctatttga acggcacttg ttcttcccta acaacagagc tttacgatcc gaaaaccttc 1080
atcactcacg cggcgttgct ccgtcagact ttcgtccatt gcggaagatt ccctactgct 1140
gcctcccgta ggagtctggg ccgtgtctca gtcccagtgt ggccgatcac cctctcaggt 1200
cggctacgca tcgtcgcctt ggtgagccgt tacctcacca actagctaat gcgccgcggg 1260
tccatctgta agtggtagcc gaagccacct tttatgtctg aaccatgcgg ttcaaacaac 1320
catccggtat tagccccggt ttcccggagt tatcccagtc ttacaggcag gttacccacg 1380
tgttactcac ccgtccgccg ctaacatcag ggagcaagct cccatctgtc cgctcgactt 1440
gcattatagc acgccccatt cccc 1464
<210> 2
<211> 1401
<212> DNA
<213> 土壤短芽孢杆菌N10(Brevibacillus agri)
<400> 2
cggctggctc cttgcggttc ctcaccgact tcgggtgttg caaactcccg tggtgtgacg 60
ggcggtgtgt acaaggcccg ggaacgtatt caccgcggca tgctgatccg cgattactag 120
cgattccgac ttcatgtagg cgagttgcag cctacaatcc gaactgagat tggttttaag 180
agattggcgt cctctcgcga ggtagcatcc cgttgtacca accattgtag cacgtgtgta 240
gcccaggtca taaggggcat gatgatttga cgtcatcccc gccttcctcc gtcttgtcga 300
cggcagtctc tctagagtgc ccaactgaat gctggcaact aaagataagg gttgcgctcg 360
ttgcgggact taacccaaca tctcacgaca cgagctgacg acaaccatgc accacctgtc 420
accgctgccc cgaagggaag ctctgtctcc agagcggtca gcgggatgtc aagacctggt 480
aaggttcttc gcgttgcttc gaattaaacc acatgctcca ccgcttgtgc ggacccccgt 540
caattccttt gagtttcact cttgcgagcg tactccccag gcggagtgct tattgcgtta 600
gctgcggcac tgagggtatt gaaaccccca acacctagca ctcatcgttt acggcgtgga 660
ctaccagggt atctaatcct gtttgctccc cacgctttcg cgcctcagcg tcagttacag 720
accagaaagc cgccttcgcc actggtgttc ctccacatct ctacgcattt caccgctaca 780
cgtggaatac cgctttcctc ttctgcactc aagctacaca gtttccgatg cgaaccgggg 840
ttgagccccg ggctttaaca ccagacttac atagccgcct gcgcgcgctt tacgcccaat 900
aaatccggac aacgcttgcc acctacgtat taccgcggct gctggcacgt agttagccgt 960
ggctttctcg tcaggtaccg tcaaggtacc gccctattcg aacggtacgt gttcgtccct 1020
gacaacagaa ctttacaatc cgaagacctt catcgttcac gcggcgttgc tccatcagac 1080
tttcgtccat tgtggaaaat tccctactgc tgcctcccgt aggagtctgg gccgtgtctc 1140
agtcccagtg tggccggtca ccctctcagg tcggctacgc atcgtcgcct tggtaggccg 1200
ttaccccacc aactagctaa tgcgccgcag gcccatctcc cagtgatagc gaaaagccat 1260
cttttctttt cagatcatgc gatccaaaaa cctatccggt attagcataa gtttccctat 1320
gttatcccag tctgagaggc aggttgccta cgtgttactc acccgtccgc cgctagcccc 1380
cgaagggact cgctcgactg c 1401
<210> 3
<211> 1468
<212> DNA
<213> 短短芽孢杆菌50-11(Brevibacillus brevis)
<400> 3
tcaggacgaa cgctggcggc gtgcctaata catgcaagtc gagcgagggt tttcggaccc 60
tagcggcgga cgggtgagta acacgtaggc aacctgcctc tcagaccggg ataacatagg 120
gaaacttatg ctaataccgg ataggttttt ggatcgcatg atctgaaaag gaaagatggc 180
gtttgctatc actgggagat gggcctgcgg cgcattagct agttggtggg gtaacggcct 240
accaaggcga cgatgcgtag ccgacctgag agggtgaccg gccacactgg gactgagaca 300
cggcccagac tcctacggga ggcagcagta gggaattttc cacaatggac gaaagtctga 360
tggagcaacg ccgcgtgaac gatgaaggtc ttcggattgt aaagttctgt tgtcagggac 420
gaataagtac cgttcgaaca gggcggtacc ttgacggtac ctgacgagaa agccacggct 480
aactacgtgc cagcagccgc ggtaatacgt aggtggcaag cgttgtccgg aattattggg 540
cgtaaagcgc gcgcaggcgg ctatgtaagt ctggtgttaa agcccggggc tcaaccccgg 600
ttcgcatcgg aaactgtgta gcttgagtgc agaagaggaa agcggtattc cacgtgtagc 660
ggtgaaatgc gtagagatgt ggaggaacac cagtggcgaa ggcggctttc tggtctgtaa 720
ctgacgctga ggcgcgaaag cgtggggagc aaacaggatt agataccctg gtagtccacg 780
ccgtaaacga tgagtgctag gtgttggggg tttcaatacc ctcagtgccg cagctaacgc 840
aataagcact ccgcctgggg agtacgctcg caagagtgaa actcaaagga attgacgggg 900
gcccgcacaa gcggtggagc atgtggttta attcgaagca acgcgaagaa ccttaccagg 960
tcttgacatc ccgctgaccg ctctggagac agagcttccc ttcggggcag cggtgacagg 1020
tggtgcatgg ttgtcgtcag ctcgtgtcgt gagatgttgg gttaagtccc gcaacgagcg 1080
caacccttat ctttagttgc cagcattcag ttgggcactc tagagagact gccgtcgaca 1140
agacggagga aggcggggat gacgtcaaat catcatgccc cttatgacct gggctacaca 1200
cgtgctacaa tggttggtac aacgggatgc tacctcgcga gaggacgcca atctcttaaa 1260
accaatctca gttcggattg taggctgcaa ctcgcctaca tgaagtcgga atcgctagta 1320
atcgcggatc agcatgccgc ggtgaatacg ttcccgggcc ttgtacacac cgcccgtcac 1380
accacgggag tttgcaacac ccgaagtcgg tgaggtaacc gcaaggagcc agccgccgaa 1440
ggtggggtag atgactgggg tgaagtcg 1468
<210> 4
<211> 593
<212> DNA
<213> 橙色嗜热子囊菌ZJ3(Thermoascus aurantiacus)
<400> 4
tccgtagggt ggacctgcgg aaggatcatt accgagtgcg ggtcctccgg ggcccaacct 60
ccccacccgt gtgtaccgta ccctgttgct tcggcgggcc cgccgcaagg ccgccggggg 120
gcgtgtcccg cccccgggcc cgcgcccgcc ggagaccctt cgaacgctga gcttttgaag 180
gcgtgccgtc tgagtcgcgt gagaaatcgt gaaaactttc aacaacggat ctcttggttc 240
cggcatcgat gaagaacgca gcgaaatgcg ataagtaatg tgaattgcag aattccgtga 300
atcatcgaat ctttgaacgc acattgcgcc ccctggcatt ccggggggca tgcctgtccg 360
agcgtcattg ctgccctcaa gcccggcttg tgtgttgggc cgccgtcccc gcccgccgcg 420
gggggacggg cccgaaaggc agcggcggcg ccgcgtccgg tcctcgagcg tatggggctt 480
cgtcacccgc tcttgcaggc ccggccggag cctcagcccg accccgcgtc aacatcttcc 540
aggttgacct cggatcaggt agggataccc gctgaactta agcatatcaa aaa 593
<210> 5
<211> 1400
<212> DNA
<213> 铜绿假单胞菌M4(Pseudomonas aeruginosa)
<400> 5
accgtccccc ttgcggttag actagctact tctggagcaa cccactccca tggtgtgacg 60
ggcggtgtgt acaaggcccg ggaacgtatt caccgtgaca ttctgattca cgattactag 120
cgattccgac ttcacgcagt cgagttgcag actgcgatcc ggactacgat cggttttatg 180
ggattagctc cacctcgcgg cttggcaacc ctttgtaccg accattgtag cacgtgtgta 240
gccctggccg taagggccat gatgacttga cgtcatcccc accttcctcc ggtttgtcac 300
cggcagtctc cttagagtgc ccacccgagg tgctggtaac taaggacaag ggttgcgctc 360
gttacgggac ttaacccaac atctcacgac acgagctgac gacagccatg cagcacctgt 420
gtctgagttc ccgaaggcac caatccatct ctggaaagtt ctcagcatgt caaggccagg 480
taaggttctt cgcgttgctt cgaattaaac cacatgctcc accgcttgtg cgggcccccg 540
tcaattcatt tgagttttaa ccttgcggcc gtactcccca ggcggtcgac ttatcgcgtt 600
agctgcgcca ctaagatctc aaggatccca acggctagtc gacatcgttt acggcgtgga 660
ctaccagggt atctaatcct gtttgctccc cacgctttcg cacctcagtg tcagtatcag 720
tccaggtggt cgccttcgcc actggtgttc cttcctatat ctacgcattt caccgctaca 780
caggaaattc caccaccctc taccgtactc tagctcagta gttttggatg cagttcccag 840
gttgagcccg gggatttcac atccaacttg ctgaaccacc tacgcgcgct ttacgcccag 900
taattccgat taacgcttgc acccttcgta ttaccgcggc tgctggcacg aagttagccg 960
gtgcttattc tgttggtaac gtcaaaacag caaggtatta acttactgcc cttcctccca 1020
acttaaagtg ctttacaatc cgaagacctt cttcacacac gcggcatggc tggatcaggc 1080
tttcgcccat tgtccaatat tccccactgc tgcctcccgt aggagtctgg accgtgtctc 1140
agttccagtg tgactgatca tcctctcaga ccagttacgg atcgtcgcct tggtaggcct 1200
ttaccccacc aactagctaa tccgacctag gctcatctga tagcgtgagg tccgaagatc 1260
ccccactttc tccctcagga cgtatgcggt attagcgccc gtttccggac gttatccccc 1320
actaccaggc agattcctag gcattactca cccgtccgcc gctgaatcca ggagcaagct 1380
cccttcatcc gctcgactgc 1400
<210> 6
<211> 1412
<212> DNA
<213> 嗜热嗜气解硫胺素芽孢杆菌H7(Aneurinibacillus thermoaerophilus)
<400> 6
ttcggcggct ggctccagaa ggttacctca ccgacttcgg gtgttgcaaa ctctcgtggt 60
gtgacgggcg gtgtgtacaa gacccgggaa cgtattcacc gcggcatgct gatccgcgat 120
tactagcgat tccggcttca tgcaggcgag ttgcagcctg caatccgaac tgagaacggt 180
ttttagggat tggctcaccc tcgcgggttg gcacgcccgt tgtaccgtcc attgtagcac 240
gtgtgtagcc caggacataa ggggcatgat gatttgacgt catccccacc ttcctccgtc 300
ttgtcgacgg cagtctcctt agagtgccca actgaatgct ggcaacaaag gacaagggtt 360
gcgctcgttg cgggacttaa cccaacatct cacgacacga gctgacgaca accatgcacc 420
acctgtcacc gctgtcccga aggaaacctc catctctgga ggggtcagcg ggatgtcaag 480
ccctggtaag gttcttcgcg ttgcttcgaa ttaaaccaca tgctccaccg cttgtgcggg 540
tccccgtcaa ttcctttgag tttcagcctt gcggccgtac tccccaggcg gagtgcttat 600
tgcgttagct gcggcactga ggaggtggac tccccaacac ctagcactca tcgtttacgg 660
cgtggactac cagggtatct aatcctgttt gctccccacg ctttcgcgcc tcagcgtcag 720
ttacaggcca gagagccgcc ttcgccactg gtgttcctcc acatctctac gcatttcacc 780
gctacacgtg gaattccgct ctcctctcct gcactcaagc tccccagttt cagatggccc 840
tccacggttg agccgtgggc tttcacacct gacttaagaa gccgcctgcg cgcgctttac 900
gcccaataat tccggacaac gcttgccccc tacgtattac cgcggctgct ggcacgtagt 960
tagccggggc tttctcgtca ggtaccgtca gaccgggagg tcatcccggc ggttcttccc 1020
tgacaacaga gttttacgat ccgaagacct tcctcactca cgcggcgttg ctccgtcaga 1080
ctttcgtcca ttgcggaaga ttccctactg ctgcctcccg taggagtctg ggccgtgtct 1140
cagtcccagt gtggccgttc accctctcag gtcggctacg catcgtcgcc ttggtaggcc 1200
gttaccccac caactagcta atgcgccgca ggcccatctg tacgcggctc aaaggccttt 1260
ccatgccgaa ccatgcggtt cggcatccta tccggtatta gctccggttt cccggagtta 1320
tcccggtcgt acaggcaggt tgcctacgtg ttactcaccc gtccgccgct aacctcagga 1380
atgcaagcac tccatcggtt cgctcgactt gc 1412
<210> 7
<211> 878
<212> DNA
<213> 鞘鞍醇杆菌DS-4(sphingobacterium sp.)
<400> 7
gaaggatggc gtctgtctac aatgcagtcg agcgcaccct tcggggtgct cggtgtccgg 60
gtgaatagtg cgtgacggta ggccctttgg tgcgcaatct acccgtatca cggggatagc 120
cccagtatgc gcccttcggg gcaaagattt atctcccccg gcatccccgc gttggattaa 180
gttattggag gggtatgggc tcacgtgacc taagatcctt ggtggtttga gaggatgatc 240
agcgaacatg tcactgagat ctgaccagac tcctaccaca cgggtactgg gacaatctta 300
aaactcctac gcaaccctga tctaacgatg cctggtgaat gatgacagcc ctgaacctgc 360
catgctcttt gcacgatgac tgccctatgg gttgtaaact gcttttgtta ggctaactcc 420
ccgtctacat gtacgtggct gaatgtaccg ctagcgttgt gctcaattac tggccggcca 480
gcgcacgtag taataccgaa gatccgagcg ttatccggat ttattgggtt taagaggtgc 540
ctacgcggta ctttaagtcg agggtgagag actgcgtgtt attgtcgtgt gcctttgata 600
ctgaagtgct tgaatgcaat acaagacggc ggagtgagac actgactcga tacatgcata 660
gaagtgtctc agaatgccga ttgcgaaagg atctgtctac tgcgttactg acccctgatg 720
caaaaaatgc tggtcatcga acagcatgat gtacccttga cagaccctac ccctataaag 780
atgacaactc cgatgattgc accctacccg atcacatccc aaacgaaatc gataagtttc 840
tccatcttgg cgagggcgct tcgtgcgttt tgtattta 878
<210> 8
<211> 949
<212> DNA
<213> 地尿素芽孢杆菌SD2-2(Ureibacillus terrenus)
<400> 8
gggacgggtg ctataatgca agtcgagcgg acctcatagg aagcttgctt tttatgaggt 60
tagcggcgga cgggtgagta acacgtgggt aacctgccct atagaccggg ataactcgcg 120
gaaacgcgtg ctaataccgg ataacacagc ggagcgcatg ctccggtgtt gaaaggtggt 180
tctgctaccg ctataggatg ggcccgcggc gcattagcta gttggtgggg taacggccta 240
ccaaggcgac gatgcgtagc cgacctgaga gggtgatcgg ccacactggg actgagacac 300
ggcccagact cctacgggag gcagcagtag ggaatcttcc acaatgggcg aaagcctgat 360
ggagcaacgc cgcgtgagcg aagaaggtct tcggatcgta aagctctgtt gtaagggaag 420
aacaagtgcg gtagtaactg accgcaccct gacggtacct tacgagaaag ccacggctaa 480
ctacgtgcca gcagccgcgg taatacgtag gtggcgagcg ttgtccggaa ttattgggcg 540
taaagcgcgc gcaggcggtc tcttaagtct gatgtgaaag cccccggctc aaccggggag 600
ggtcattgga aactgggaga cttgagtgca ggagagggaa gcggaattcc atgtgtagcg 660
gtgaaatgcg tagagatatg gaggaacacc agtggcgaag gcggcttcct ggcctgtaac 720
tgacgctgag gcgcgaaagc gtggggagca aacaggatta gataccctgg tagtccacgc 780
cgtaaacgat gagtgctagg tgttaggggg cttgcccctt agtgctgcag ctaacgcatt 840
aagcactccg cctggggagt acggtcgcaa gactgaaact caaaggaatt gacgggggcc 900
cgcacaagcg gtggagcatg tggtttaatt cgaagcaacg cgaagaacc 949

Claims (10)

1.一株铜绿假单胞菌，其特征在于：于2019年5月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.17868。
2.一株铜绿假单胞菌，其特征在于：其16S rDNA如SEQ ID NO：5所示。
3.一株铜绿假单胞菌，其特征在于：菌落呈黄色，边缘整齐，表面湿润，中间隆起；菌体呈短杆状，无芽孢；适宜温度范围为25～40℃，适宜pH值范围为4～10。
4.权利要求1～3任意一项所述铜绿假单胞菌在降解油脂中的应用。
5.一种包含权利要求1～3任意一项所述铜绿假单胞菌的微生物组合物，其特征在于：所述微生物组合物包括：淀粉降解菌、蛋白质降解菌、纤维素降解菌、油脂降解菌和除臭菌；所述油脂降解菌包括所述铜绿假单胞菌。
6.根据权利要求5所述的微生物组合物，其特征在于：所述淀粉降解菌为解淀粉芽孢杆菌；和/或；所述蛋白质降解菌为土壤短芽孢杆菌或短短芽孢杆菌或土壤短芽孢杆菌和短短芽孢杆菌的混合物；和/或；所述纤维素降解菌为橙色嗜热子囊菌；和/或；所述油脂降解菌为所述铜绿假单胞菌或所述铜绿假单胞菌和解硫胺素芽孢杆菌的混合物；和/或；所述除臭菌为鞘鞍醇杆菌或地尿素芽孢杆菌或鞘鞍醇杆菌和地尿素芽孢杆菌的混合物。
7.根据权利要求6所述的微生物组合物，其特征在于：所述解淀粉芽孢杆菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.14264；和/或；所述土壤短芽孢杆菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCCNo.19516；和/或；所述短短芽孢杆菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.19517；和/或；所述橙色嗜热子囊菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.19606；和/或；所述解硫胺素芽孢杆菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.17867；和/或；所述鞘鞍醇杆菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.12632；和/或；所述地尿素芽孢杆菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.19518。
8.根据权利要求5所述的微生物组合物，其特征在于：按活菌量，淀粉降解菌：蛋白质降解菌：纤维素降解菌：油脂降解菌：除臭菌＝(15～30):(15～20)：(10～15)：(15～30)：(10～15)。
9.利用权利要求5～8任意一项所述微生物组合物制备的微生物复合菌剂，其特征在于：所述微生物复合菌剂包括微生物组合物和固体发酵辅料，微生物组合物在微生物复合菌剂中占比为1％～2％，L/kg；
按重量份数，所述固体发酵辅料包括：10～20份麸皮、0.3～0.5份硫酸镁、0.1～0.2份磷酸二氢钾、0.2～0.4份磷酸氢二钠、1～2份葡萄糖。
10.权利要求6～8任意一项所述微生物组合物或权利要求9所述微生物复合菌剂在处理厨余垃圾中的应用。
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