CN112708586B - 一种可降解厨余垃圾的微生物菌剂及其应用 - Google Patents

一种可降解厨余垃圾的微生物菌剂及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种可降解厨余垃圾的微生物菌剂及其应用,该微生物菌剂由枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌、特基拉芽孢杆菌组成;将四种菌株利用厨余垃圾浸出液进行预培养活化并制备复合菌剂,能够明显提高厨余垃圾的降解效率,比LB培养基培养制备的降解率提高了15.5%,且发酵完成后上清出水COD小于200mg·L‑1,对环境污染小;利用厨余垃圾浸出液预培养并制备菌剂,能够大幅度降低固态菌剂生产成本、减少废水处理量,具有更高的应用前景。

Description

一种可降解厨余垃圾的微生物菌剂及其应用
技术领域
本发明涉及具体涉及一种可降解厨余垃圾的微生物菌剂及其应用,属于厨余垃圾处理技术领域。
背景技术
厨余垃圾主要成分包括米和面粉类食物残余、蔬菜、肉骨等,还经常混杂玻璃、筷子、塑料袋、易拉罐等各种杂质。实现厨余垃圾的减量化、资源化及无害化对保持我国生活环境的可持续发展具有重要的意义。
目前国内外厨余垃圾处理方法主要分为两大类,一类是非生物处理法,主要包括卫生填埋、粉碎直排、焚烧等,但是填埋占用的土地面积大、容易产生恶臭气体、渗滤液易对环境造成二次污染;焚烧的资源水平极低,且易造成环境的二次污染;而第二类是生物处理法,主要有堆肥、厌氧发酵、深度发酵产氢、蚯蚓处理法、饲料化、厨余垃圾处理器;但是厌氧、发酵产氢等处理设施设备投入巨大,处理能力有限;饲料化处理不能完全的消除病原菌的存在,通过动物饲料的方式再次进入到食物链的循环,对动物和人类的健康存在一定的安全隐患;而厨余垃圾中有机质含量高,在收集和运输过程中容易变质,滋生各种细菌,所以就地化、快速化处理的厨余垃圾处理器越来越引起人们的重视。
厨余垃圾处理器其原理和好氧堆肥相似,在高温好氧的条件下利用微生物菌促进水分的蒸发及有机质的降解,最终产品为有机肥。厨余垃圾处理器单独安装了脱臭装置,油水分离装置,粉碎挤压装置,对生物仓的发酵创造了良好的条件,并减少了对环境的污染,目前在国内外都被广泛的应用,但是,厨余垃圾处理器仍存在着降解处理时间长、减量化程度低、发酵不完全等问题,而筛选高效降解菌剂是提高厨余垃圾处理器降解效率的有效途径。
虽然现有技术中,有采用复合微生物菌剂进行降解厨余垃圾,但是,现有报道中所采用的方法,降解率达到70%以上的处理周期长,成本高,因此,如何得到一种成本低、降解周期短的微生物菌剂及其制备方法,成为急需解决的问题。
发明内容
技术问题:
本发明要解决的技术问题是:提供一种成本低、降解周期短的微生物菌剂及其制备方法,以及该微生物菌剂的应用。
技术方案:
为了解决上述技术问题,本发明提供了一种可降解厨余垃圾的微生物菌剂,所述微生物菌剂按照以下步骤制备得到:
(1)制备厨余垃圾浸出液:将厨余垃圾用粉碎机粉碎搅匀,置于加热容器中,加入2-4 倍质量的水,100℃加热1-2h,冷却后过10-20目筛,将液体部分置于4500-5000r/min离心机常温下离心0.5-1h,去油取液体部分;
制备固体厨余垃圾浸出液培养基:向厨余垃圾浸出液中加入1.5-2%的琼脂;
(2)分别将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、短小芽孢杆菌(Bacilluspumilus)、特基拉芽孢杆菌(Bacillus tequilensis)和嗜温鞘氨醇杆菌(Sphingobacterium thalpophilum)接种至固体厨余垃圾浸出液培养基中,培养8-12h后,制备得到单菌落,将制备得到的单菌落接种至新的固体厨余垃圾浸出液培养基中,重复上述步骤,培养50~200代后,分别得到传代培养之后的枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、特基拉芽孢杆菌及嗜温鞘氨醇杆菌单菌落;
(3)分别将步骤(2)得到的经传代培养之后的单菌落,即:枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、特基拉芽孢杆菌及嗜温鞘氨醇杆菌接种至液体厨余垃圾浸出液培养基中进行培养,得到发酵液;将制备得到的发酵液离心,收集菌体;
(4)将步骤(3)得到的菌体按比例制备菌悬液之后与载体混合,干燥,制备得到混合微生物菌剂。
在本发明的一种实施方式中,步骤(2)为:分别将枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)、特基拉芽孢杆菌(Bacillus tequilensis)和嗜温鞘氨醇杆菌 (Sphingobacterium thalpophilum)接种至固体厨余垃圾浸出液培养基中,进行种子预培养,培养8-12h后,制备得到单菌落,挑选菌株直径大于1.5mm的单菌落接种至新的固体厨余垃圾浸出液培养基中,重复上述步骤,培养50~200代后,分别得到传代培养之后的枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、特基拉芽孢杆菌及嗜温鞘氨醇杆菌单菌落。
在本发明的一种实施方式中,所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌ACCC60364;所述的短小芽孢杆菌为短小芽孢杆菌ACCC04180;所述的特基拉芽孢杆菌为特基拉芽孢杆菌ACCC06525;所述的嗜温鞘氨醇杆菌为嗜温鞘氨醇杆菌CICC22013。
在本发明的一种实施方式中,步骤(4)中所述菌悬液的制备方法为:分别将枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、特基拉芽孢杆菌及嗜温鞘氨醇杆菌菌体与无菌水按照质量比为1:2的比例混合,分别制备得到枯草芽孢杆菌菌悬液、短小芽孢杆菌菌悬液、特基拉芽孢杆菌菌悬液及嗜温鞘氨醇杆菌菌悬液;分别将制备的枯草芽孢杆菌菌悬液、短小芽孢杆菌菌悬液、特基拉芽孢杆菌菌悬液及嗜温鞘氨醇杆菌菌悬液按照体积比为(1~2):(1~2):(1~2):(1~2) 的比例制备得到菌悬液。
在本发明的一种实施方式中,所述步骤(2)中,单菌落的培养条件为:在45℃恒温培养箱培养8-12h。
在本发明的一种实施方式中,步骤(3)中,枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、特基拉芽孢杆菌及嗜温鞘氨醇杆菌接种至液体厨余垃圾浸出液培养基中,发酵条件为:温度为45℃,转速为350~450r/min,通气量为1.5vvm,接种量为3%~5%,培养30~36h,pH控制在6.5~7.5。
在本发明的一种实施方式中,步骤(3)制备得到的发酵液上清COD小于200mg·L-1;制备过程中的COD值比较低,对环境友好。
在本发明的一种实施方式中,步骤(4)中,所述载体是由55%~75%(w/w)的麸皮、15%~25%(w/w)的壳聚糖以及10%~20%(w/w)的海藻酸钠混合均匀制备而成。
在本发明的一种实施方式中,步骤(4)中,所述载体是由75%(w/w)的麸皮、15%(w/w) 的壳聚糖以及10%(w/w)的海藻酸钠混合均匀制备而成。
在本发明的一种实施方式中,所述步骤(4)中,所述菌悬液与载体是按照质量比为1:1~3:1 的比例进行混合。
在本发明的一种实施方式中,所述步骤(3)中,所述发酵液是在转速4500~6000r/min 条件下离心20~40min得到菌体。
在本发明的一种实施方式中,所述步骤(3)中,所述发酵液是在转速为4750r/min条件下离心30min得到菌体。
在本发明的一种实施方式中,步骤(6)中的干燥方式为:烘箱45℃干燥。
本发明还提供了一种降解厨余垃圾的方法,所述方法为,将上述微生物菌剂添加至含有厨余垃圾的反应体系中进行反应。
在本发明的一种实施方式中,所述微生物菌剂在反应体系中的添加量按照与底物厨余垃圾的质量比例至少为3%。
在本发明的一种实施方式中,所述反应体系中的反应条件为:初始温度45℃,每隔30min 搅拌2min。
本发明还提供了上述微生物菌剂在制备降解厨余垃圾产品中的应用。
有益效果
(1)本发明将具有强降解能力的菌株进行复配制成微生物菌剂,具有更强的厨余垃圾降解能力;利用厨余垃圾制备成厨余垃圾浸出液培养基,对筛选的菌株进行种子液预培养及菌剂制备,使得菌株具有更强的适应性和降解能力。
(2)采用本发明的微生物菌剂在发酵培养完成后上清出水COD由原来的20000±5000 mg·L-1降低至小于200mg·L-1,对环境污染小。利用厨余垃圾浸出液作为培养基及诱导复合菌剂能明显提高厨余垃圾降解效率,且大幅度降低固态菌剂的生产成本,在厨余垃圾降解处理中具有更强的降解及适应能力,在厨余垃圾减量化工业化生产提供一定借鉴。
(3)本发明采用厨余垃圾浸出液即作为培养基又能起到诱导激活各种酶系的作用,使得该复合菌剂在厨余垃圾降解中有更强的适应能力,具有更强的降解能力。
具体实施方式
下述实施例中所涉及的厨余垃圾的参数如表1所示:
表1厨余垃圾的组成
Figure BDA0002936644850000041
下述实施例中所涉及的厨余垃圾处理器购自苏州韩博环境科技有限公司。
下述实施例中所涉及的培养基如下:
LB培养基(g/L):酵母浸粉5.0,氯化钠10.0,胰蛋白胨10.0。
固体淀粉选择培养基:蛋白胨10.0g·L-1,可溶性淀粉2.0g·L-1,牛肉膏5.0g·L-1,NaCl 5.0g·L-1,琼脂20.0g·L-1,pH 7.0~7.2。
固体蛋白质选择培养基:脱脂奶粉50g·L-1,可溶性淀粉10g·L-1,酵母膏5g·L-1,KH2PO4 1g·L-1,MgSO4·7H2O 0.2g·L-1,琼脂20g·L-1,pH 7.0~7.2。蛋白质培养基中脱脂奶粉分开灭菌后混合。
固体脂肪选择培养基:氯化钠5.0g·L-1,蛋白胨10.0g·L-1,CaCl2·7H2O 0.1g·L-1,Tween-80 10g·L-1,1.0%中性红水溶液1mL,橄榄油乳化液12mL(成分及制备方式:橄榄油20g与聚乙烯醇(PVA)60g混合,超声乳化5min后间隔1分钟再次乳化),pH调至7.4。
固体纤维素选择培养基:K2HPO4 0.5g·L-1,MgSO4 0.25g·L-1,CMC-Na 1.88g·L-1,刚果红0.2g·L-1琼脂16g·L-1,明胶2.0g·L-1,pH 7.0。
下述实施例中所涉及的检测方法如下:
胞外酶活的测定方法:
取筛选菌株培养一定时间的发酵液,于10000r/min离心10min,取上清液测胞外淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶及纤维素酶活。
淀粉酶活力定义:每毫升粗酶液每分钟水解淀粉生成1μg还原糖所用酶量定义为一个酶活单位,以“U/mL”表示;
蛋白酶活定义:每毫升粗酶液每分钟水解酪蛋白产生1μg酪氨酸所用酶量定义为一个酶活单位,以“U/mL”表示;
脂肪酶活定义每毫升粗酶液每分钟催化水解底物对硝基苯棕榈酸酯(p-NPP)产生1μmol 对硝基苯酸(p-NP)所需酶量定义为一个酶活单位,以“U/mL”表示;
纤维素酶活定义每毫升粗酶液每分钟水解纤维素生成1μg还原糖所用酶量定义为一个酶活单位,以“U/mL”表示。
COD含量的检测方法:重铬酸钾法CJ/T 3018.12-1993。
厨余垃圾降解率的检测方法:
Figure BDA0002936644850000051
式中:A0表示厨余垃圾初始重量;Ai表示48h后厨余垃圾重量。
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,以使本领域的技术人员能够更好的理解本发明的优点和特征,从而对本发明的保护范围做出更为清楚的界定。本发明所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例,基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1:复合菌剂的初步选育
具体步骤如下:
分别将枯草芽孢杆菌ACCC60364、短小芽孢杆菌ACCC04180、巨大芽孢杆菌ACCC04366、嗜温鞘氨醇杆菌CICC22013、特基拉芽孢杆菌ACCC06525、地衣芽孢杆菌ACCC01942接种于固体淀粉选择培养基、固体蛋白选择培养基、固体脂肪选择培养基及固体纤维素选择培养基中,在45℃培养箱中培养24h后观察透明圈直径与菌落直径比,比值越大则降解能力越强。
各菌株的直径比值如表2所示。
表2各菌株在蛋白、脂肪、淀粉、纤维素平板上透明圈与菌直径比
Figure BDA0002936644850000052
Figure BDA0002936644850000061
通过菌株胞外酶活测定来确认菌株对淀粉、蛋白、脂肪及纤维素的降解能力,酶活越高,则降解能量越强。此时菌株的酶活结果如表3所示。
表3各菌株在LB培养基中的酶活对比
Figure BDA0002936644850000062
由表3可知,枯草芽孢杆菌ACCC60364、短小芽孢杆菌ACCC04180、嗜温鞘氨醇杆菌CICC22013、特基拉芽孢杆菌ACCC06525的胞外酶活均高于巨大芽孢杆菌ACCC04366和地衣芽孢杆菌ACCC01942;
因此,选用枯草芽孢杆菌ACCC60364、短小芽孢杆菌ACCC04180、嗜温鞘氨醇杆菌CICC22013、特基拉芽孢杆菌ACCC06525作后续研究。
实施例2:微生物固态菌剂的制备
具体方法如下:
(1)制备厨余垃圾浸出液:将厨余垃圾用粉碎机粉碎搅匀,置于加热容器中,加入2-4 倍质量的水,100℃加热1-2h,冷却后过10-20目筛,将液体部分置于4750r/min离心机常温下离心0.5-1h,去油取液体部分;
制备固体厨余垃圾浸出液培养基:向厨余垃圾浸出液中加入1.5-2%的琼脂;
(2)分别将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、短小芽孢杆菌(Bacilluspumilus)、特基拉芽孢杆菌(Bacillus tequilensis)和嗜温鞘氨醇杆菌(Sphingobacterium thalpophilum)接种至固体厨余垃圾浸出液培养基中进行种子预培养,在45℃恒温培养箱培养8-12h,挑选菌株直径大于1.5mm的单菌落接种至新的固体厨余垃圾浸出液培养基中,重复上述步骤,培养 50~200代后,分别得到传代培养之后的枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、特基拉芽孢杆菌及嗜温鞘氨醇杆菌单菌落;
(3)分别将步骤(2)得到的各菌株单菌落,即:枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、特基拉芽孢杆菌及嗜温鞘氨醇杆菌接种至厨余垃圾浸出液液体中,在45℃,150-200r/min转速条件下培养8-16h,制备种子液;
(4)将经活化培养的种子液分别接种至液体厨余垃圾浸出液培养基5L发酵罐中,发酵条件为:温度为45℃,转速为350~450r/min,通气量为1.5vvm,接种量为3%~5%,培养 30~36h,pH控制在6.5~7.5;得到发酵液;将制备得到的发酵液是在转速为4750r/min条件下离心30min得到菌体,收集菌体;
(5)制备载体:75%(w/w)的麸皮、15%(w/w)的壳聚糖以及10%(w/w)的海藻酸钠混合均匀制备而成;
制备菌悬液:将枯草芽孢杆菌菌体、短小芽孢杆菌菌体、特基拉芽孢杆菌菌体及嗜温鞘氨醇杆菌菌体分别与无菌水按照质量比为1:2的比例混合,分别制备得到枯草芽孢杆菌菌悬液、短小芽孢杆菌菌悬液、特基拉芽孢杆菌菌悬液及嗜温鞘氨醇杆菌菌悬液;分别将制备的枯草芽孢杆菌菌悬液、短小芽孢杆菌菌悬液、特基拉芽孢杆菌菌悬液及嗜温鞘氨醇杆菌菌悬液按照一定体积比制备得到菌悬液;
(6)将步骤(5)得到的菌悬液与载体按照质量比为1:1的比例进行混合均匀,在45℃条件下烘干后研磨成粉,从而得到微生物菌剂。
其中不同菌悬液比例的所获得的微生物菌剂如下:
枯草芽孢杆菌菌悬液、短小芽孢杆菌菌悬液、特基拉芽孢杆菌菌悬液及嗜温鞘氨醇杆菌菌悬液的比例为1:1:1:1时所获得的复合菌剂定义为微生物菌剂C1;
枯草芽孢杆菌菌悬液、短小芽孢杆菌菌悬液、特基拉芽孢杆菌菌悬液及嗜温鞘氨醇杆菌菌悬液的比例为2:1:1:1时所获得的复合菌剂定义为微生物菌剂C2;
枯草芽孢杆菌菌悬液、短小芽孢杆菌菌悬液、特基拉芽孢杆菌菌悬液及嗜温鞘氨醇杆菌菌悬液的比例为1:2:1:1时所获得的复合菌剂定义为微生物菌剂C3;
枯草芽孢杆菌菌悬液、短小芽孢杆菌菌悬液、特基拉芽孢杆菌菌悬液及嗜温鞘氨醇杆菌菌悬液的比例为1:1:2:1时所获得的复合菌剂定义为微生物菌剂C4;
枯草芽孢杆菌菌悬液、短小芽孢杆菌菌悬液、特基拉芽孢杆菌菌悬液及嗜温鞘氨醇杆菌菌悬液的比例为1:1:1:2时所获得的复合菌剂定义为微生物菌剂C5。
作为对照:
具体步骤同上述一致,区别在于将筛选的菌株直接接种至LB培养基中进行种子液活化培养,将经活化培养的种子接种至LB培养基5L发酵罐中,得到发酵液;将制备得到的发酵液离心,收集菌体;按照上述步骤制备得到微生物菌剂。
不同菌种比例的所获得的微生物菌剂如下:
枯草芽孢杆菌菌悬液、短小芽孢杆菌菌悬液、特基拉芽孢杆菌菌悬液及嗜温鞘氨醇杆菌菌悬液的比例为1:1:1:1时所获得的复合菌剂定义为微生物菌剂L1;
枯草芽孢杆菌菌悬液、短小芽孢杆菌菌悬液、特基拉芽孢杆菌菌悬液及嗜温鞘氨醇杆菌菌悬液的比例为2:1:1:1时所获得的复合菌剂定义为微生物菌剂L2;
枯草芽孢杆菌菌悬液、短小芽孢杆菌菌悬液、特基拉芽孢杆菌菌悬液及嗜温鞘氨醇杆菌菌悬液的比例为1:2:1:1时所获得的复合菌剂定义为微生物菌剂L3;
枯草芽孢杆菌菌悬液、短小芽孢杆菌菌悬液、特基拉芽孢杆菌菌悬液及嗜温鞘氨醇杆菌菌悬液的比例为1:1:2:1时所获得的复合菌剂定义为微生物菌剂L4;
枯草芽孢杆菌菌悬液、短小芽孢杆菌菌悬液、特基拉芽孢杆菌菌悬液及嗜温鞘氨醇杆菌菌悬液的比例为1:1:1:2时所获得的复合菌剂定义为微生物菌剂L5。
实施例3:厨余垃圾浸出液制备过程中复合菌剂发酵液上清COD含量测定
分别将实施例2的步骤(2)制备得到的枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、特基拉芽孢杆菌及嗜温鞘氨醇杆菌单菌落接种至厨余垃圾浸出液中培养30h,分别获得发酵液,经离心处理得到的上清液进行COD测定,以确定复合菌剂在培养过程中对培养基的利用率。
作为对照,将经LB活化的不同菌株种子液也接种至厨余垃圾浸出液中培养获得发酵液,经离心处理得到的上清液进行COD测定。
厨余垃圾浸出液原液COD值为20000±5000mg/L,经30h后获得不同发酵上清的出水 COD含量如表4所示。
表4不同菌株发酵上清液COD含量
Figure BDA0002936644850000081
注:A指经LB预培养活化后接种至厨余垃圾浸出液获得上清液测定的COD值,B指经厨余垃圾浸出液预培养活化后接种至厨余垃圾浸出液培养获得上清液测定的COD值。
由表4可知,经厨余垃圾浸出液预培养活化的菌株在复合培养时对培养基有更强的利用率,上清液的COD值都在200mg/L以下,对环境造成的污染小,经济环保。
实施例4:微生物固态菌剂对厨余垃圾的降解率
具体步骤如下:
(1)将实施例2制备得到的微生物固态菌剂C1-C5和L1-L5与厨余垃圾分别按照3%(w/w)的比例投加厨余垃圾处理器中,其中厨余垃圾样品是取自江南大学各食堂及周边饭店。反应初始温度控制在45℃,每隔30min搅拌2min。通过48h的降解,厨余垃圾的降解率如表5所示。
表5:48h后的厨余垃圾降解率
Figure BDA0002936644850000091
由表5可知:用LB活化培养微生物固态菌剂L1-L5的降解率普遍偏低,在58.32%-65.14%之间,降解效果最佳的是枯草芽孢杆菌:短小芽孢杆菌:特基拉芽孢杆菌:嗜温鞘氨醇杆菌比例为2:1:1:1时降解率达到65.14%。
而用厨余垃圾浸出液培养制备的微生物固态菌剂C1-C5在厨余垃圾样品中都有很好的降解率,48h的降解率达到70.43%-79.65%。降解效果最佳的是枯草芽孢杆菌:短小芽孢杆菌:特基拉芽孢杆菌:嗜温鞘氨醇杆菌比例为2:1:1:1时,降解率最大达到79.65%,比同比例LB活化培养制备的菌剂提高了15.5%,提高了厨余垃圾的降解率。
综上所述,本发明提供了一种可降解厨余垃圾的微生物菌剂,该方法利用厨余垃圾浸出液对筛选菌株进行预培养活化及制备,与LB培养基相比,对厨余垃圾的降解率有了显著的提高,且利用厨余垃圾浸出液作为培养基培养后,发酵上清出水的COD小于200mg·L-1,对环境污染小,大幅度降低了菌剂的生产成本,具有工业实践应用前景。
虽然本发明已以较佳实施例公开如上,但其并非用以限定本发明,任何熟悉此技术的人,在不脱离本发明的精神和范围内,都可做各种的改动与修饰,因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。

Claims (9)

1.一种可降解厨余垃圾的微生物菌剂,其特征在于,所述微生物菌剂按照以下步骤制备得到:
(1)制备厨余垃圾浸出液:将厨余垃圾用粉碎机粉碎搅匀,置于容器中,加水后在100℃加热1~2 h,冷却后过滤,将液体部分置于离心机中离心,去油,取液体部分;
(2)分别将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)、特基拉芽孢杆菌(Bacillus tequilensis)和嗜温鞘氨醇杆菌(Sphingobacteriumthalpophilum)接种至固体厨余垃圾浸出液培养基中,培养8-12 h后,制备得到单菌落,将制备得到的单菌落接种至新的固体厨余垃圾浸出液培养基中,重复上述步骤,培养50~200代后,得到传代培养之后的枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、特基拉芽孢杆菌及嗜温鞘氨醇杆菌单菌落;所述固体厨余垃圾浸出液培养基是向厨余垃圾浸出液中加入1.5~2%的琼脂制备得到的,所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌ACCC60364;所述的短小芽孢杆菌为短小芽孢杆菌ACCC04180;所述的特基拉芽孢杆菌为特基拉芽孢杆菌ACCC06525;所述的嗜温鞘氨醇杆菌为嗜温鞘氨醇杆菌CICC22013;
(3)分别将步骤(2)得到的经传代培养之后的单菌落接种至液体厨余垃圾浸出液中进行培养,得到发酵液;将制备得到的发酵液离心,收集菌体;
(4)将步骤(3)得到的菌体制备成菌悬液之后,与载体按比例混合,干燥,制备得到微生物菌剂,所述载体是由55%~75%的麸皮、15%~25%的壳聚糖以及10%~20%的海藻酸钠混合均匀制备而成。
2.如权利要求1所述的微生物菌剂,其特征在于,步骤(4)中所述菌悬液的制备方法为:将步骤(3)得到的枯草芽孢杆菌菌体、短小芽孢杆菌菌体、特基拉芽孢杆菌菌体及嗜温鞘氨醇杆菌菌体分别与无菌水按照质量比为1:2的比例混合,分别制备得到枯草芽孢杆菌菌悬液、短小芽孢杆菌菌悬液、特基拉芽孢杆菌菌悬液及嗜温鞘氨醇杆菌菌悬液;
分别将制备的枯草芽孢杆菌菌悬液、短小芽孢杆菌菌悬液、特基拉芽孢杆菌菌悬液及嗜温鞘氨醇杆菌菌悬液按照体积比为1~2: 1~2: 1~2: 1~2的比例混合,制备得到复合微生物菌悬液。
3.如权利要求2所述的微生物菌剂,其特征在于,所述步骤(2)中,单菌落的培养条件为:在45 ℃ 恒温培养箱培养8-12 h。
4.如权利要求3所述的微生物菌剂,其特征在于,步骤(3)中,发酵条件为:温度为45℃,转速为350~450 r/min,通气量为1.5 vvm,接种量为3%~5%,培养30~36 h,pH控制在6.5~7.5。
5.如权利要求4所述的微生物菌剂,其特征在于,步骤(3)制备得到的发酵液上清COD小于200 mg·L-1
6.如权利要求5所述的微生物菌剂,其特征在于,所述步骤(4)中,所述菌悬液与载体是按照1:1~3:1的比例混合。
7.一种降解厨余垃圾的方法,其特征在于,将权利要求1~6任一所述的微生物菌剂添加至含有厨余垃圾的反应体系中进行反应。
8.如权利要求7所述的方法,其特征在于,所述微生物菌剂在反应体系中的添加量按照与底物厨余垃圾的质量比例至少为3%。
9.权利要求1~6任一所述的微生物菌剂在制备降解厨余垃圾产品中的应用。
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