CN111595978A - 一种血浆中度他雄胺浓度的检测方法 - Google Patents

一种血浆中度他雄胺浓度的检测方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111595978A
CN111595978A CN202010505117.0A CN202010505117A CN111595978A CN 111595978 A CN111595978 A CN 111595978A CN 202010505117 A CN202010505117 A CN 202010505117A CN 111595978 A CN111595978 A CN 111595978A
Authority
CN
China
Prior art keywords
dutasteride
sample
concentration
standard
internal standard
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202010505117.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111595978B (zh
Inventor
林辉
萧世良
谢云昇
王元
陈源明
林小利
张淑芬
吴仕伟
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhejiang Huize Pharmaceutical Technology Co ltd
Original Assignee
Zhejiang Huize Pharmaceutical Technology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhejiang Huize Pharmaceutical Technology Co ltd filed Critical Zhejiang Huize Pharmaceutical Technology Co ltd
Priority to CN202010505117.0A priority Critical patent/CN111595978B/zh
Publication of CN111595978A publication Critical patent/CN111595978A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111595978B publication Critical patent/CN111595978B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/86—Signal analysis
    • G01N30/8624—Detection of slopes or peaks; baseline correction
    • G01N30/8631—Peaks
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)

Abstract

本申请实施例提供了一种血浆中度他雄胺浓度的检测方法，应用液质联用技术(LC‑MS/MS)以及内标法，定量检测人血浆中度他雄胺的浓度，操作简便，重现性好，定量准确、可操作性强，可以直接运用于生物等效性及药代动力学研究中实际生物样品的检测分析。

Description

一种血浆中度他雄胺浓度的检测方法
技术领域
本申请涉及度他雄胺检测技术领域，特别是涉及一种血浆中度他雄胺浓度的检测方法。
背景技术
度他雄胺(Dutasteride，分子式为C27H30F6N2O2，分子量为528.53，结构式如式Ⅰ所示)，是一种5α-还原酶抑制剂，也是第一个能同时抑制I型和II型5α-还原酶催化睾酮转化产生二氢睾酮的药物。与其他5α-还原酶抑制剂(如非那雄胺)相比，度他雄胺起效时间更快，体内半衰期更长。研究表明，在服药后(口服)，度他雄胺在血液中的浓度约在2-3h内即可达到峰值。度他雄胺在体内主要通过肝脏进行代谢，产生6β-羟基度他雄胺等5种代谢产物。
Figure BDA0002526250120000011
检测生物基质(血液/血浆)中度他雄胺的浓度不仅有助于理解其在体内的起效机理和代谢行为，同时还可以将该方法应用于一致性评价中，以协助相关仿制药的开发。目前已有相关文献报道的生物基质(血浆)中度他雄胺的检测方法，大多需要通过液-液萃取(LLE)或者固相萃取对样品进行处理，都存在着样品消耗量大，步骤繁琐等缺点，因此，开发一个更加简便、高效、准确的分析方法用于检测生物基质中度他雄胺的浓度就显得十分必要，必将具有很高的实用价值。
发明内容
本申请实施例的目的在于提供一种血浆中度他雄胺浓度的检测方法，以实现血浆中度他雄胺的快速检测。具体技术方案如下：
本申请提供了一种血浆中度他雄胺浓度的检测方法，包括以下步骤：
(1)建立标准曲线；
向空白血浆中加入含有度他雄胺的乙腈水溶液，制备成6-10个具有不同的已知浓度的度他雄胺的校正标样，其中，各校正标样中，度他雄胺的浓度为0.1-10ng/mL；
以乙腈水溶液为溶剂，以度他雄胺-13C6作为内标，配制度他雄胺-13C6浓度为10-60ng/mL的内标工作溶液；
以(100-300)：(5-15)的体积比，向各校正标样中加入所述内标工作溶液，配制成相应数量的含内标的校正标样；其中，各校正标样与内标工作液的体积比相同；
将所述含内标的校正标样进行蛋白沉淀处理后，经色谱分离，并通过质谱检测确定度他雄胺和度他雄胺-13C6的色谱峰，然后计算获得两者峰面积比；
以各含内标的校正标样中度他雄胺和度他雄胺-13C6的色谱峰面积比为纵坐标，以各校正标样中度他雄胺的浓度为横坐标制作标准曲线；
(2)血浆样品中度他雄胺浓度的检测
向待测血浆样品中加入所述内标工作溶液，其中，待测血浆样品与内标工作液的体积比与含内标的校正标样中校正标样与内标工作液的体积比相同；蛋白沉淀处理后，在与步骤(1)相同的色谱条件和质谱条件下，获得度他雄胺和度他雄胺-13C6的色谱峰，并计算获得两者峰面积比；
根据待测血浆样品中度他雄胺和度他雄胺-13C6的色谱峰面积比，以及所述标准曲线，获得待测血浆样品中度他雄胺的含量；
其中，
所述乙腈水溶液中，乙腈的体积分数为50-70％；
色谱条件包括：
固定相：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱(即C18色谱柱)；
流动相：流动相A：4.8-5.2mM的醋酸铵水溶液/乙腈/甲酸溶液，其中醋酸铵水溶液、乙腈、甲酸的体积比为100：(0.8-1.2)：(0.05-0.15)；流动相B：乙腈/甲酸溶液，其中乙腈与甲酸的体积比为100：(0.05-0.15)；采用30-50％A，50-70％B等度洗脱；柱温箱温度：30-45℃；流速：0.2-0.8mL/min；进样体积：5-20μL。
所述“空白血浆”是指未服用度他雄胺药物的人的血浆；所述“血浆样品”是指服用度他雄胺药物的人的血浆。
在本申请的一些实施方式中，所述蛋白沉淀处理包括：
向所述含内标的校正标样中以体积比1:(1-3)加入乙腈进行蛋白沉淀，混匀后于5-15℃，3000-6000rpm离心3-5分钟，取上清液，以体积比1：(2-3)加入超纯水中，混合2-5分钟。
在本申请的一些实施方式中，质谱条件包括：
离子源为ESI源，采用正离子模式、多反应监测模式；电喷雾电压：4200-4500V；涡旋离子喷雾温度：530-570℃；气帘气：32-38psi；碰撞池气体：中级；雾化气Gas1：53-57psi；辅助气Gas2：53-57psi；数据采集时间：2.5-3.5min。
在本申请的一些实施方式中，所述质谱条件还包括：入口电压8-12V，碰撞室出口电压6-8V。
在本申请的一些实施方式中，质谱检测包括：检测度他雄胺的监测离子对529.3/461.3，检测度他雄胺-13C6的监测离子对535.2/467.3；每次扫描一个离子对时所停留的时间为100-300ms，去簇电压30-50V，碰撞能量40-60eV。
在本申请的一些实施方式中，还包括标准曲线可靠性验证，具体包括：
制备3-8个浓度为0.3-8ng/mL的度他雄胺浓度的质控样品；向质控样品中加入所述内标工作液，混合获得含内标的质控样品，经蛋白沉淀后，在与建立标准曲线步骤(1)相同的色谱条件和质谱条件下，确定含内标的质控样品中度他雄胺和度他雄胺-13C6的色谱峰面积比；根据所述标准曲线，获得质控样品中度他雄胺浓度的测量值，与质控样品的配制浓度对比，验证标准曲线的可靠性。
本申请实施例提供的血浆中度他雄胺的检测方法，应用液质联用技术(LC-MS/MS)以及内标法，定量检测人血浆中度他雄胺的浓度，操作简便，重现性好，定量准确、可操作性强，可以直接运用于生物等效性及药代动力学研究中实际生物样品的检测分析。
附图说明
为了更清楚地说明本申请实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本申请一个实施例的度他雄胺浓度标准曲线；
图2为血浆样品1中度他雄胺和度他雄胺-13C6的色谱图，A图为度他雄胺的色谱图，B图为度他雄胺-13C6的色谱图；
图3为血浆样品2中度他雄胺和度他雄胺-13C6的色谱图，A图为度他雄胺的色谱图，B图为度他雄胺-13C6的色谱图；
图4为血浆样品3中度他雄胺和度他雄胺-13C6的色谱图，A图为度他雄胺的色谱图，B图为度他雄胺-13C6的色谱图。
具体实施方式
下面将结合本申请实施例中的附图，对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。
1仪器和试剂：
1.1仪器：Sciex ExionLC AC-QTRAP6500+高效液相色谱仪-质谱联用仪(Sciex,Toronto,Canada)；Thermo Sorvall ST40R低温离心机(Thermo Scientific,Osterode,Germany)，各规格Gilson PIPETMAN系列移液器(Gilson,France)，SI Vortex-Genie2涡旋振荡器(Scientific Industries,New York,USA)，XPR2百万分之一天平(Mettler-Toledo,Greifensee,Switzerland)。
1.2试剂：乙腈(Merck,Darmstadt,Germany)和甲酸(阿拉丁，上海，中国)均为HPLC级；醋酸铵(分析纯)购买自西陇科学股份有限公司(汕头，广东，中国)；超纯水经Milli-QDirect 8系统(Millipore,Bedford,MA,USA)纯化。血浆来源自浙江省台州医院药物I期临床试验中心；度他雄胺标准品(分子式为C27H30F6N2O2，分子量为528.53，结构式如式Ⅰ所示)和度他雄胺-13C6(分子式为C21 13C6H30F6N2O2，分子量为534.49，结构式如式Ⅱ)均购自TLCPharmaceutical Standards Ltd.(Ontario,Canada)。
Figure BDA0002526250120000051
2.溶液配制
2.1校正标样：
称取一定量的度他雄胺标准品至离心管中，加入体积分数为60％的乙腈水溶液配制成浓度为100ng/μL的度他雄胺储备溶液，所述度他雄胺储备液保存于2-8℃，有效期一年；取适量度他雄胺储备溶液，用60％的乙腈水溶液梯度稀释获得浓度为2、4、10、20、60、80、120、200ng/mL的度他雄胺工作液；
取190μL空白血浆，分别加入10μL上述度他雄胺工作液，制备成浓度分别为0.1、0.2、0.5、1、3、4、6、10ng/mL的校正标样。
2.2质控样品
称取一定量的度他雄胺标准品至离心管中，加入体积分数为60％的乙腈水溶液配制成浓度为100ng/μL的度他雄胺储备溶液(用于配制质控样品的度他雄胺储备溶液与用于制备校正标样的度他雄胺储备溶液需分别配制)，所述度他雄胺储备液保存于2-8℃，有效期一年；取适量度他雄胺储备溶液，用60％的乙腈水溶液梯度稀释获得浓度为6、40、100、160ng/mL的度他雄胺工作液；
取190μL空白血浆，分别加入10μL上述度他雄胺工作液，制备成浓度分别为0.3、2、5、8ng/mL的质控样品。质控样品于-15～-90℃下保存。
2.3内标工作液
称取一定量的度他雄胺-13C6标准品至离心管中，加入体积分数为60％的乙腈水溶液配制成浓度为200ng/μL的内标储备液。再用60％的乙腈水溶液逐级稀释，获得浓度为60ng/mL的内标工作溶液。内标工作溶液储存于2-8℃，有效期为一个月。
2.4含内标的校正标样
取各校正标样200μL，分别加入10μL内标工作溶液，配制成含内标的校正标样。
2.5空白对照样品
取空白血浆190μL，加入20μL 60％的乙腈水溶液，配制成空白对照样品。
2.6含内标的质控样品
取各质控样品200μL，分别加入10μL内标工作溶液，配制成含内标的质控样品。
3.色谱条件和质谱条件：
3.1色谱条件
色谱柱：Agilent Poroshell 120EC-C18 2.7μm(2.1×50mm)；
流动相A：5mM醋酸铵水溶液/乙腈/甲酸溶液(100/1/0.1，v/v/v)；
流动相B：乙腈/甲酸溶液(100/0.1，v/v)；
洗针液：乙腈/水/甲酸溶液(95/5/0.05，v/v/v)；
柱温箱温度：40℃；流速：0.3mL/min；进样体积：10μL；自动进样器温度：15℃；色谱柱平衡时柱压：～8.4MPa；自动进样器洗针体积：200μL；自动进样器进样针清洗时浸泡时间：5s；进样针清洗模式：进样前及进样后；色谱分离梯度(等度洗脱)：流动相A：40％，流动相B：60％。
3.2质谱条件：
离子源：ESI；离子化模式：正离子模式；数据采集模式：多反应监测(MRM)模式；电喷雾电压：4500V；涡旋离子喷雾温度：550℃；气帘气：35psi；碰撞池气体：中级；雾化气Gas1：55psi；辅助气Gas2：55psi；入口电压：10V；碰撞室出口电压：7V；数据收集时间：3.0min。度他雄胺和度他雄胺-13C6的质谱参数见表1。
表1
Figure BDA0002526250120000071
*注：停留时间，此处指的是在监测离子对时，每次扫描一个离子对时所停留的时间。
4.标准曲线建立
4.1蛋白沉淀：向2.4的含内标的校正标样中加入乙腈进行蛋白沉淀，涡旋混合均匀后于5-15℃的离心机中，4000rpm离心5分钟，取200μL上清液至400μL超纯水中，涡旋混合2-5分钟，进行LC-MS/MS分析。
4.2标准曲线建立：按上述色谱条件和质谱条件对蛋白沉淀后的校正标样进行检测，色谱图采集和色谱峰积分由软件Analyst 1.7.0(AB Sciex)进行处理，以分析物度他雄胺和度他雄胺-13C6的色谱峰面积比为纵坐标(Y)，以校正标样中度他雄胺的浓度为横坐标(X)，用加权(W＝1/X2)最小二乘法以校正标样中度他雄胺的浓度(X)与峰面积比(Y)进行线性回归，所得的回归方程(Y＝a+b×X)即为标准曲线。以图1为例，具体为Y＝-0.0139+0.733×X(r＝0.9998)，浓度单位ng/mL，结果表明，度他雄胺在0.1-10ng/mL范围内线性良好。
4.3标准曲线可靠性验证：
按4.1的方法对2.5的空白对照样品和2.6的含内标的质控样品进行蛋白沉淀，在3.1的色谱条件和3.2的质谱条件下对含内标的质控样品进行检测，获得分析物度他雄胺和度他雄胺-13C6的色谱峰面积比，根据4.2的标准曲线计算各质控样品中度他雄胺的浓度，与已知质控样品中度他雄胺的浓度对比，结果如表2所示。
表2
Figure BDA0002526250120000081
5.血浆样品中度他雄胺浓度的检测：
取待测血浆样品200μL，加入10μL 2.3的内标工作溶液，采用4.1的方法对待测血浆样品进行蛋白沉淀，在3.1的色谱条件和3.2的质谱条件下对血浆样品进行检测，获得血浆中度他雄胺和度他雄胺碳-13C6的色谱峰面积比，根据4.2的标准曲线计算获得各血浆样品中度他雄胺的浓度，结果如表3所示(各血浆样品对应的色谱图如图2-4所示)。
表3
Figure BDA0002526250120000082
6.分析方法精密度/准确度考察
取适量用于配制质控样品的度他雄胺储备溶液，用60％的乙腈水溶液梯度稀释获得浓度为2、6、40、100、160ng/mL的度他雄胺工作液；
取190μL空白血浆，分别加入10μL上述度他雄胺工作液，制备成浓度分别为0.1、0.3、2、5、8ng/mL的质控样品；
每个分析批(每个分析批均包含一系列校正标样和质控样品)每个浓度的质控样品各平行配制6个，取各质控样品200μL，分别加入10μL内标工作溶液，混匀，蛋白沉淀后取上清溶于水中，在3.1的色谱条件和3.2的质谱条件下进行检测。平行配制三个分析批，计算批内/批间准确度和精密度，结果如表4所示：
表4
Figure BDA0002526250120000091
本申请应用液质联用技术(LC-MS/MS)定量检测人血浆中度他雄胺的浓度，通过合理选择色谱柱、稀释剂、流动相等，并对液相色谱流速、洗脱方式、柱温及质谱条件等进行优化，使得本申请所涉及的度他雄胺定量分析方法操作简便，重现性好，定量准确、可操作性强，可以直接运用于生物等效性及药代动力学研究中实际生物样品的检测分析。本申请的方法，与现有其他度他雄胺的定量检测方法相比，具有以下优点：(1)操作简便，样品预处理快，只需要一步蛋白沉淀即可，无需繁琐的液液萃取或者固相萃取步骤；(2)选择性好，样品基质对分析物和内标定量分析无干扰，分析物和内标对彼此的检测也无干扰；(3)定量准确、检测灵敏度高，本方法处理的样品背景响应低，检测灵敏度高，定量下限可达纳克级；(4)提取回收率高，基本都在80％以上；(5)无明显基质效应，绝对基质因子达到了0.85-1.15之间。本申请所述新方法对于度他雄胺等效性的研究具有重要的意义，可以直接应用于生物等效性试验中生物样品的检测分析，在度他雄胺的仿制药一致性评价中具有广阔的应用前景。
本说明书中的各个实施例均采用相关的方式描述，各个实施例之间相同相似的部分互相参见即可，每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处。尤其，对于系统实施例而言，由于其基本相似于方法实施例，所以描述的比较简单，相关之处参见方法实施例的部分说明即可。
以上所述仅为本申请的较佳实施例，并非用于限定本申请的保护范围。凡在本申请的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换、改进等，均包含在本申请的保护范围内。

Claims (6)

1.一种血浆中度他雄胺浓度的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)建立标准曲线；
向空白血浆中加入含有度他雄胺的乙腈水溶液，制备成6-10个具有不同的已知浓度的度他雄胺的校正标样，其中，各校正标样中，度他雄胺的浓度为0.1-10ng/mL；
以乙腈水溶液为溶剂，配制度他雄胺-13C6浓度为10-60ng/mL的内标工作溶液；
以(100-300)：(5-15)的体积比，向各校正标样中加入所述内标工作溶液，配制成相应数量的含内标的校正标样；其中，各校正标样与内标工作液的体积比相同；
将所述含内标的校正标样进行蛋白沉淀处理后，经色谱分离，并通过质谱检测确定度他雄胺和度他雄胺-13C6的色谱峰，然后计算获得两者峰面积比；
以各含内标的校正标样中度他雄胺和度他雄胺-13C6的色谱峰面积比为纵坐标，以各校正标样中度他雄胺的浓度为横坐标制作标准曲线；
(2)血浆样品中度他雄胺浓度的检测
向待测血浆样品中加入所述内标工作溶液，其中，待测血浆样品与内标工作液的体积比与含内标的校正标样中校正标样与内标工作液的体积比相同；蛋白沉淀处理后，在与步骤(1)相同的色谱条件和质谱条件下，获得度他雄胺和度他雄胺-13C6的色谱峰，并计算获得两者峰面积比；
根据待测血浆样品中度他雄胺和度他雄胺-13C6的色谱峰面积比，以及所述标准曲线，获得待测血浆样品中度他雄胺的含量；
其中，
所述乙腈水溶液中，乙腈的体积分数为50-70％；
色谱条件包括：
固定相：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；
流动相：流动相A：4.8-5.2mM的醋酸铵水溶液/乙腈/甲酸溶液，其中醋酸铵水溶液、乙腈、甲酸的体积比为100：(0.8-1.2)：(0.05-0.15)；流动相B：乙腈/甲酸溶液，其中乙腈与甲酸的体积比为100：(0.05-0.15)；采用30-50％A，50-70％B等度洗脱；柱温箱温度：30-45℃；流速：0.2-0.8mL/min；进样体积：5-20μL。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述蛋白沉淀处理包括：
向所述含内标的校正标样中以体积比1:(1-3)加入乙腈进行蛋白沉淀，混匀后于5-15℃，3000-6000rpm离心3-5分钟，取上清液，以体积比1：(2-3)加入超纯水中，混合2-5分钟。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，质谱条件包括：
离子源为ESI源，采用正离子模式、多反应监测模式；电喷雾电压：4200-4500V；涡旋离子喷雾温度：530-570℃；气帘气：32-38psi；碰撞池气体：中级；雾化气Gas1：53-57psi；辅助气Gas2：53-57psi；数据采集时间：2.5-3.5min。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述质谱条件还包括：入口电压8-12V，碰撞室出口电压6-8V。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，质谱检测包括：检测度他雄胺的监测离子对529.3/461.3，检测度他雄胺-13C6的监测离子对535.2/467.3；每次扫描一个离子对时所停留的时间为100-300ms，去簇电压30-50V，碰撞能量40-60eV。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其特征在于，还包括标准曲线可靠性验证，具体包括：
制备3-8个浓度为0.3-8ng/mL的度他雄胺浓度的质控样品；质控样品与所述内标工作液混合获得含内标的质控样品，经蛋白沉淀后，在与建立标准曲线步骤(1)相同的色谱条件和质谱条件下，确定含内标的质控样品中度他雄胺和度他雄胺-13C6的色谱峰面积比；根据所述标准曲线，获得质控样品中度他雄胺浓度的测量值，与质控样品的配制浓度对比，验证标准曲线的可靠性。
CN202010505117.0A 2020-06-05 2020-06-05 一种血浆中度他雄胺浓度的检测方法 Active CN111595978B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010505117.0A CN111595978B (zh) 2020-06-05 2020-06-05 一种血浆中度他雄胺浓度的检测方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010505117.0A CN111595978B (zh) 2020-06-05 2020-06-05 一种血浆中度他雄胺浓度的检测方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111595978A true CN111595978A (zh) 2020-08-28
CN111595978B CN111595978B (zh) 2023-04-07

Family

ID=72182130

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010505117.0A Active CN111595978B (zh) 2020-06-05 2020-06-05 一种血浆中度他雄胺浓度的检测方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111595978B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115219616A (zh) * 2022-06-27 2022-10-21 湖北省疾病预防控制中心（湖北省预防医学科学院） 基于液质联用技术测定生物样本中内源性物质包括辅酶q10浓度的方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110749690A (zh) * 2019-11-26 2020-02-04 重庆柳江医药科技有限公司 一种血浆样品中度他雄胺含量的检测方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110749690A (zh) * 2019-11-26 2020-02-04 重庆柳江医药科技有限公司 一种血浆样品中度他雄胺含量的检测方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
N.V.S. RAMAKRISHNA ET AL.: "Selective and rapid liquid chromatography–tandem mass spectrometry assay of dutasteride in human plasma", 《JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY B》 *
PRITESH CONTRACTOR ET AL.: "Reliable and sensitive determination of dutasteride in human plasma by liquid chromatography–tandem mass spectrometry", 《BIOMED. CHROMATOGR.》 *
刘丽等: "度他雄胺自微乳口腔膜剂的制备及其体内外评价", 《华西药学杂志》 *
刘翠 等: "度他雄胺固体自微乳给药系统的制备及评价", 《中国新药杂志》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115219616A (zh) * 2022-06-27 2022-10-21 湖北省疾病预防控制中心（湖北省预防医学科学院） 基于液质联用技术测定生物样本中内源性物质包括辅酶q10浓度的方法
CN115219616B (zh) * 2022-06-27 2024-06-25 湖北省疾病预防控制中心（湖北省预防医学科学院） 基于液质联用技术测定生物样本中内源性物质包括辅酶q10浓度的方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN111595978B (zh) 2023-04-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106442758A (zh) 非衍生化检测人体血浆中多种氨基酸的液相质谱方法
WO2022067533A1 (zh) 一种同时检测微量血液中维生素k1和维生素k2的方法
CN114674961A (zh) 一种非衍生化同步检测血清中17种类固醇激素的试剂盒及其应用
CN112485341A (zh) 一种利用液相色谱串联质谱技术检测血浆中激素的方法
CN105891364A (zh) 高效液相色谱串联质谱技术检测唾液中褪黑素的方法及试剂盒
CN113049719A (zh) 一种检测游离睾酮的方法及试剂盒
CN114720704A (zh) 一种测定血清中游离睾酮的试剂盒及方法
CN110501438B (zh) 一种减肥茶中匹可硫酸钠的检测方法
CN116773693A (zh) 液相色谱串联质谱法检测血液中11种抗高血压药物及1种代谢产物的方法及应用
Lai et al. Rapid screening assay of congenital adrenal hyperplasia by measuring 17α‐hydroxyprogesterone with high‐performance liquid chromatography/electrospray ionization tandem mass spectrometry from dried blood spots
CN110672732B (zh) 百日咳毒素产品和百白破疫苗中活性蛋白的测定方法
CN111595978B (zh) 一种血浆中度他雄胺浓度的检测方法
Adamowicz et al. Simple approach for evaluation of matrix effect in the mass spectrometry of synthetic cannabinoids
Vicente et al. Measurement of serum testosterone using high-performance liquid chromatography/tandem mass spectrometry
CN116519850B (zh) 一种快速检测血清样本中16种激素浓度的方法
CN116973464A (zh) 一种17种抗癫痫药物及2种代谢物的检测方法
Karlonas et al. Rapid and highly sensitive determination of clonazepam and 7-aminoclonazepam in whole blood using gas chromatography with negative-ion chemical ionization mass spectrometry
CN114371227A (zh) 血中舒芬太尼及代谢物的超高压液质联用检验方法
CN115808493A (zh) 一种利用液相色谱串联质谱技术检测血浆中激素的方法
Song et al. Capillary high performance liquid chromatography coupled with electrospray ionization mass spectrometry for rapid analysis of pinane monoterpene glycosides in Cortex Moutan
CN112067685A (zh) 一种FaPEx-TD-ESI-MS/MS快速检测肉类中瘦肉精的方法
CN109324139A (zh) 一种烟叶中玉米素核苷液液萃取-液相色谱-串联质谱的测定方法
CN109324140A (zh) 一种烟叶中玉米素核苷固相萃取-液相色谱-串联质谱的测定方法
CN116735761A (zh) 一种人血浆中布立西坦的uplc-ms/ms检测方法
EP3654032B1 (en) Disease detection method

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant