CN110501438B - 一种减肥茶中匹可硫酸钠的检测方法 - Google Patents

一种减肥茶中匹可硫酸钠的检测方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种保健品中非法添加化学药物的检测方法，具体是涉及一种减肥茶中匹可硫酸钠的检测方法。本方法以酸化乙腈提取样品，三重四级杆串联质谱法检测。主要具体步骤为：标准溶液配制，酸化乙腈提取减肥茶液体中目标物，液相色谱‑质谱联用仪检测，外标法定量。本发明以酸化乙腈代替了标准方法中水溶液提取，克服了水溶液提取效率差，方法繁琐的问题，方法回收率、重复性、灵敏度和检测限均满足于国标要求。本发明具有快速，简便，高效，廉价和环保等特点。

Description

一种减肥茶中匹可硫酸钠的检测方法
技术领域
本发明涉及一种保健品中非法添加化学药物的检测方法，具体是涉及一种减肥茶中匹可硫酸钠的检测方法。
背景技术
随着人民生活水平提高，肥胖已成为人们越发关注的健康问题。现代医学证明，肥胖会增加人们患心脑血管疾病、消化系统疾病和内分泌系统疾病的风险，甚至可能诱发某些癌症。肥胖给人们的健康带来了巨大的隐患，也为各国公共卫生体系造成了日益沉重的负担。庞大的减肥需求催生了减肥产品市场，减肥茶产品在其中占据了一定的份额，然而某些商贩为了提高产品功效，在减肥茶中添加某些缓泻药，如匹可硫酸钠来达到减肥的目的。
目前，按照《食品补充检验方法工作规定》有关要求，《食品中匹可硫酸钠的测定(BJS 201911)》食品补充检验方法已经国家市场监督管理总局批准，发布，标准适用于食品(含保健食品)中匹可硫酸钠的测定。其中减肥茶液体加水，80℃水浴，聚酰胺固相萃取柱净化，洗脱液再经80℃水浴浓缩，液相色谱质谱法检测。前处理方法复杂，耗时，成本较高。
申请公布号CN109839458A的中国发明专利公开了一种检测食品中匹可硫酸钠的方法，包括以下步骤：1)制备样品溶液：用水提取食品样品，得到样品溶液；2)配制匹可硫酸钠标准溶液：用匹可硫酸钠标准品和水配成系列标准溶液；3)样品检测：将样品溶液和匹可硫酸钠标准液分别注入高效液相色谱-质谱联用仪，进行定性或/和定量分析。该方法可覆盖果冻、蜜饯、固体饮料、液体饮料、口服液、茶类食品、片剂保健食品、胶囊剂保健食品或颗粒剂保健食品。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术缺陷，提供一种减肥茶中匹可硫酸钠的检测方法。本发明改用酸化乙腈对样品进行提取净化，结合三重四级杆串联质谱检测减肥茶中的匹可硫酸钠，具有快速简便，灵敏准确，环保廉价等特点，对减肥类产品中匹可硫酸钠检测具有实际应用、指导意义。
本发明的技术方案如下：
一种减肥茶中匹可硫酸钠的检测方法，包括以下步骤，
S1、配制标准品：将匹可硫酸钠标准品用甲醇溶解配制成1.0mg/ml的标准储备溶液，将所述标准储备溶液用乙腈/水溶液稀释成浓度为100ng/ml标准工作溶液；
S2、标准溶液配制：分别吸取步骤S1所述的标准工作溶液10、20、50、100、500 μL于2ml离心管中，乙腈/水溶液定容到1.0ml，过滤，得到系列标准溶液；
S3、样品前处理：减肥茶样品加入热水冲泡，混匀后，置于50mL洁净的离心管中，加入含甲酸的乙腈溶液，定容至10mL，涡旋混匀30秒以上，取约1ml过滤，得滤液；
S4、检测：将步骤S2的系列标准溶液和步骤S3的滤液分别注入三重四级杆串联质谱仪中进行定量和/或定性分析测试。
优选的，步骤S1中所述乙腈/水溶液中乙腈和水的体积比为0.5-1.2:9.5-8.8。
更优选的，所述乙腈/水溶液中乙腈和水的体积比为1:9。
优选的，步骤S2中所述乙腈/水溶液中乙腈和水的体积比为0.5-1.5:9.5-8.5。
更优选的，所述乙腈/水溶液中乙腈和水的体积比为1:9。
优选的，步骤S2中所述过滤为采用0.22μm聚四氟乙烯滤膜过滤。
优选的，步骤S3中所述含甲酸的乙腈溶液中甲酸的体积百分含量为0.1％。
优选的，步骤S3中所述过滤为采用0.22μm聚四氟乙烯滤膜过滤。
优选的，步骤S4中所述三重四级杆串联质谱仪的测试条件为：
1)液相色谱条件
色谱柱：Phenomenex Kinetex C18柱(2.1mm×100mm，2.6μm)；柱温：30-40℃；流速：0.2-0.3ml/min；进样量：5μL；流动相A：0.010mol/L乙酸胺水溶液；流动相B：乙腈；流动相A和流动相B按体积比60-70:30-40组成混合物进行等度洗脱，时间为5min；
2)质谱条件
离子源：电喷雾电离源；离子源温度：325℃；毛细管电压：4000V；鞘气温度： 350℃。
更优选的，所述流动相A和流动相B按体积比65:35组成混合物；所述质谱条件中质谱扫描信息为：定量离子对为438.2/184.0，碰撞能35V，源内碎裂电压240V；定性离子对为438.2/278.0，碰撞能20V，源内碎裂电压240V。
本发明的有益效果是：
(1)在匹可硫酸钠流动相的选择中，发明人经过大量的试验，发现使用0.010mol/L乙酸铵水溶液-乙腈体系，目标物峰形好，响应高。
(2)发明人发现选用0.22μm的PTFE滤膜对标准品进行过滤，在有效去除颗粒杂质的情况下，对目标物基本没有吸附作用。
(3)发明人在大量测试样品的提取溶液，发现甲酸体积百分含量为0.1％的甲酸乙腈溶液提取的回收率好，提取效果和峰形均较好。
附图说明：
图1为本发明采用外标法定量，所得标准曲线的回归方程、相关系数和线性范围。
图2为匹可硫酸钠浓度为1ng/ml下的信噪比。
图3实施例的空白样品和加标样品测试结果，
图中，1-空白样品加标的谱图，2-空白样品谱图。
具体实施方式
以下通过具体实施方式对本发明的技术方案进行进一步的说明和描述。
如无特别指明，以下实施方案中的份数都为重量份数。
实施方式
一、仪器、试剂和材料
匹可硫酸钠标准品(纯度≥98％，百灵威)
甲酸、甲醇、乙腈(色谱纯，德国Sigma公司)
IKA MS3 Digital数显型旋涡混匀器、Unique+UV实验室多功能纯水-超纯水系统(厦门锐思捷科学仪器有限公司)、6460液相色谱-三重四级杆质谱联用仪(美国Agilent公司)、0.22μmPTFE针头式过滤器(天津津腾实验设备有限公司)。
二、测试过程
(1)配制标准品：精密称取匹可硫酸钠标准品10mg置于10ml容量瓶中，用甲醇溶解稀释定容，配制成1.0mg/ml的标准储备溶液；准确移取适量的标准储备液用乙腈/水溶液稀释成浓度为100ng/ml标准工作溶液；乙腈/水溶液中乙腈和水的体积比为 0.5-1.2:9.5-8.8，更优选的，体积比为1:9。
(2)配制标准溶液：分别吸取上述标准工作溶液10、20、50、100、500μL于2ml 离心管中，乙腈/水溶液定容到1.0ml，0.22μmPTFE滤膜过滤，得到系列标准溶液；所述乙腈/水溶液中乙腈和水的体积比为0.5-1.5:9.5-8.5，优选体积比1:9。
(3)样品前处理：减肥茶样品按照饮用方法冲泡，涡旋混匀后，准确移取1.0ml，置于50mL洁净的离心管中，加入含甲酸的乙腈溶液，定容至10mL，涡旋混匀30秒以上，取约1ml用0.22μmPTFE滤膜过滤，得滤液；含甲酸的乙腈溶液中甲酸的体积百分含量为0.1％。
(4)检测：将上述系列标准溶液和上述滤液分别注入三重四级杆串联质谱仪中进行定量和/或定性分析测试。
所述三重四级杆串联质谱仪的测试条件为：
1)液相色谱条件
色谱柱：Phenomenex Kinetex C18柱(2.1mm×100mm，2.6μm)；柱温：30-40℃；流速：0.2-0.3ml/min；进样量：5μL；流动相A：0.010mol/L乙酸胺水溶液；流动相B：乙腈；流动相A和流动相B按体积比60-70:30-40组成混合物进行等度洗脱，时间为5min；
2)质谱条件
离子源：电喷雾电离源；离子源温度：325℃；毛细管电压：4000V；鞘气温度： 350℃。
更优选的，所述流动相A和流动相B按体积比65:35组成混合物；所述质谱条件中质谱扫描信息为：定量离子对为438.2/184.0，碰撞能35V，源内碎裂电压240V；定性离子对为438.2/278.0，碰撞能20V，源内碎裂电压240V。
图1为本发明采用外标法定量，所得标准曲线的回归方程、相关系数和线性范围。
图2为匹可硫酸钠浓度为1ng/ml下的信噪比。
以10倍信噪比时相应浓度确定检测低限，见表1；本发明对匹可硫酸钠的仪器检测限为0.043μg/kg；在10倍稀释条件下的匹可硫酸钠方法检测限为0.43μg/kg，说明本方法灵敏度高。
表1检测低限与定量限
Figure BDA0002187765600000041
实施例
以市售的减肥茶产品作为测试对象，分别加标0.05mg/kg和0.5mg/kg，同时做本方法与标准方法(BJS 201911)的平行试验(n＝6)，两法的测定回收率及RSD见表2，本方法的空白样品和加标样品见图3。结果显示，本专利方法回收率及重现性均略好于标准方法，在两个加标浓度条件下匹可硫酸钠的回收率在80.15％～103.33％，相对标准偏差RSD (n＝6)，在2.93％～5.42％。测定结果符合药物残留检测分析的要求。
应用本方法对市售的三种品牌减肥茶进行检测，每份样品平行检测两次，结果见表3。
其中，配制标准品和标准溶液中乙腈/水溶液中乙腈和水的体积比为1:9，液相色谱测试中流动相A和流动相B按体积比65:35组成混合物。
表2加标回收率
Figure BDA0002187765600000051
表3市售三种减肥茶产品检测结果
Figure BDA0002187765600000052
以上所述，显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和优点。本领域技术人员应该了解本发明不受上述实施例的限制，上述实施例仅为本发明的较佳实施例而已，不能依此限定本发明实施的范围，即依本发明专利范围及说明书内容所作的等效变化与修饰，皆应仍属本发明涵盖的范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等同物界定。

Claims (8)

1.一种减肥茶中匹可硫酸钠的检测方法，其特征在于：包括以下步骤，
S1、配制标准品：将匹可硫酸钠标准品用甲醇溶解配制成1.0mg/ml的标准储备溶液，将所述标准储备溶液用乙腈/水溶液稀释成浓度为100ng/ml标准工作溶液；
S2、标准溶液配制：分别吸取步骤S1所述的标准工作溶液10、20、50、100、500μL于2ml离心管中，乙腈/水溶液定容到1.0ml，过滤，得到系列标准溶液；
S3、样品前处理：减肥茶样品加入热水冲泡，混匀后，置于50 mL洁净的离心管中，加入含甲酸的乙腈溶液，定容至10 mL，涡旋混匀30 秒以上，取约1 ml过滤，得滤液；
S4、检测：将步骤S2的系列标准溶液和步骤S3的滤液分别注入三重四级杆串联质谱仪中进行定量和/或定性分析测试；
步骤S4中所述三重四级杆串联质谱仪的测试条件为：
1）液相色谱条件
色谱柱：2.1 mm×100 mm，2.6 μm的Phenomenex Kinetex C18柱；柱温：30-40 ℃；流速：0.2-0.3 ml/min；进样量：5 μL；流动相A：0.010 mol/L乙酸胺水溶液；流动相B：乙腈；流动相A和流动相B按体积比60-70:30-40组成混合物进行等度洗脱，时间为5 min；
2）质谱条件
离子源：电喷雾电离源；离子源温度：325 ℃；毛细管电压：4000 V；鞘气温度：350 ℃；
所述流动相A和流动相B按体积比65:35组成混合物；所述质谱条件中质谱扫描信息为：定量离子对为438.2/184.0，碰撞能35V，源内碎裂电压240V；定性离子对为438.2/278.0，碰撞能20V，源内碎裂电压240V。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤S1中所述乙腈/水溶液中乙腈和水的体积比为0.5-1.2:9.5-8.8。
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于：步骤S1中所述乙腈/水溶液中乙腈和水的体积比为1:9。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤S2中所述乙腈/水溶液中乙腈和水的体积比为0.5-1.5:9.5-8.5。
5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于：步骤S2中所述乙腈/水溶液中乙腈和水的体积比为1:9。
6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤S2中所述过滤为采用0.22μm聚四氟乙烯滤膜过滤。
7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤S3中所述含甲酸的乙腈溶液中甲酸的体积百分含量为0.1%。
8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤S3中所述过滤为采用0.22μm聚四氟乙烯滤膜过滤。
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