CN111562227B - 一种检测赖氨酸的纳米金比色法 - Google Patents

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Abstract

本发明适用于纳米金的识别检测领域，提供一种检测赖氨酸的纳米金比色法。先按常规工艺制备硼簇还原的纳米金，并将其稀释，得到稀释后的溶液；然后用酸调节稀释后溶液的pH，再加入样品水溶液，即可实现对赖氨酸的特异性识别；最后对所得纳米金样品溶液进行紫外可见吸收光谱扫描，根据纳米金A650/A525的信号强弱，即可对赖氨酸的浓度加以测定。本发明相较于传统检测方法具有方便快捷、成本低、原料损失少、对仪器要求低等优点。

Description

一种检测赖氨酸的纳米金比色法
技术领域
本发明属于纳米金的识别检测领域，尤其涉及一种检测赖氨酸的纳米金比色法。
背景技术
赖氨酸是人体的必需氨基酸之一，是合成蛋白质的各种氨基酸中重要的一种。它在促进生长发育、改善营养不良、提高记忆力、改善失眠、提高免疫力、帮助钙吸收、防止骨质流失、预防心脑血管疾病等方面具有很重要的作用。人体内缺乏赖氨酸，则可出现虚弱、疲劳、恶心、头晕、呕吐、贫血、食欲下降、发育迟缓等症状。但是人体内不能依靠自身合成赖氨酸，必须从食物或药物中摄取。因此，检测某些食物或药物中是否含有赖氨酸，以及含有多少赖氨酸，成为某些食物或药物的检测标准之一。
传统的氨基酸检测方法包括高效液相色谱法(HPLC)、毛细管电泳法(CE)、电化学法等。但是这些方法都存在着操作复杂、重现性差、灵敏度低、对设备要求高等缺点。
发明内容
鉴于上述问题，本发明的目的在于提供一种检测赖氨酸的纳米金比色法，旨在解决现有检测方法存在的操作复杂、重现性差、灵敏度低以及对设备要求高等技术问题。
所述方法包括如下步骤：
步骤S1：按常规工艺制备硼簇还原的纳米金，并将其稀释，得到稀释后的溶液；
步骤S2：用酸调节稀释后溶液的pH，再加入样品水溶液，即可实现对赖氨酸的特异性识别；
步骤S3：对所得纳米金样品溶液进行紫外可见吸收光谱扫描，根据纳米金A650/A525的信号强弱，即可对赖氨酸的浓度加以测定。
优选的，步骤S1中，采用Cs2B12H12作为还原剂和稳定剂，按照摩尔比1:1的量将Cs2B12H12加入到氯金酸溶液中，在25℃下搅拌30min，即可得到硼簇还原的纳米金。
优选的，Cs2B12H12和氯金酸在溶液中的浓度均为0.4mM，且溶剂为水。
优选的，步骤S2中，溶液pH为2.4-2.6，样品水溶液中氨基酸的浓度为0-50μM。
本发明提供一种检测赖氨酸的纳米金比色法，具有以下优点：
1.纳米金合成简便，不需要过多的修饰步骤；
2.检测过程简便，配好溶液即可进行定性检测；
3.定性检测现象肉眼可见，易于观测；
4.检测成本低，检测过程无繁琐步骤，所需样品量少，损失低；
5.定量检测仅需测定样品的紫外可见吸收光谱，对仪器要求低。
附图说明
图1为本发明实施例一中紫外可见吸收光谱A650/A525对氨基酸种类的柱状图；
图2为本发明实施例二中紫外可见吸收光谱A650/A525对盐浓度的曲线图；
图3为本发明实施例三中紫外可见吸收光谱A650/A525对赖氨酸浓度的曲线图；
图4为本发明实施例四中不同氨基酸体系的紫外可见吸收光谱图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
一种检测赖氨酸的纳米金比色法，所述方法包括如下步骤：
步骤S1：按常规工艺制备硼簇还原的纳米金，并将其稀释，得到稀释后的溶液。
本步骤中，在制备硼簇还原的纳米金时，采用Cs2B12H12作为还原剂和稳定剂，按照摩尔比1:1的量将Cs2B12H12加入到氯金酸溶液中，在25℃下搅拌30min，即可得到硼簇还原的纳米金。其中Cs2B12H12和氯金酸在体系中的浓度均为0.4mM，且溶剂为水；将纳米金进行稀释时，根据检测仪器的型号类型进行稀释2-10倍，作为一种优选，本实验中选择稀释4-5倍。
步骤S2：用酸调节稀释后溶液的pH，再加入样品水溶液，即可实现对赖氨酸的特异性识别。
本步骤中，溶液pH为2.4-2.6，调节溶液pH时只能用酸，过高浓度的缓冲溶液会带来过高的盐浓度，从而影响纳米金的稳定性；样品水溶液中氨基酸的浓度为0-50μM。
步骤S3：对所得纳米金样品溶液进行紫外可见吸收光谱扫描，根据纳米金A650/A525的信号强弱，即可对赖氨酸的浓度加以测定。
本步骤中，对所得纳米金样品溶液进行紫外可见吸收光谱扫描，在一定范围内，650nm和525nm处的吸光度比值与赖氨酸的浓度成正比。
为了说明本发明所述的技术方案，下面通过具体实施例来进行说明。
实施例一：
将Cs2B12H12还原稳定的纳米金稀释5倍，用浓盐酸调节溶液pH为2.5，记录所用浓盐酸的体积。
另取Cs2B12H12还原稳定的纳米金稀释4倍，加入上步相同体积比的浓盐酸，再加入原纳米金溶液1倍体积的氨基酸(20种天然氨基酸)水溶液，其中只有加入赖氨酸的体系的颜色由红色变为蓝紫色。对体系进行紫外可见吸收光谱扫描，结果如图1所示。
实施例二：
将Cs2B12H12还原稳定的纳米金稀释3倍，加入不同体积的NaCl水溶液，再用去离子水定容至总体积为原纳米金溶液的4倍。然后加入实施例1中相同体积比的浓盐酸，再加入原纳米金溶液1倍体积的去离子水或赖氨酸水溶液，其中在盐浓度小于60mM时，不加赖氨酸的体系没有发生明显变色，而加入赖氨酸的体系出现了较大的颜色改变。对体系进行紫外可见吸收光谱扫描，结果如图2所示。
实施例三：
将Cs2B12H12还原稳定的纳米金稀释4倍，加入一定体积的NaCl水溶液和一定体积的浓盐酸，再加入不同体积的赖氨酸水溶液，并用去离子水定容，使最终体系中的纳米金稀释5倍，NaCl浓度为60mM，体系pH为2.5，赖氨酸浓度为0-20μM。对体系进行紫外可见吸收光谱扫描，其中在0.01-1μM范围内，紫外可见吸收光谱A650/A525与赖氨酸的浓度呈正比，结果如图3所示。
实施例四：
将Cs2B12H12还原稳定的纳米金稀释4倍，加入一定体积的NaCl水溶液和一定体积的浓盐酸，再加入一定体积的各种氨基酸水溶液，并用去离子水定容，使最终体系中的纳米金稀释5倍，NaCl浓度为60mM，体系pH为2.5，各种氨基酸浓度均为1μM。对体系进行紫外可见吸收光谱扫描，其中加入不含赖氨酸的19种天然氨基酸的体系呈红色，紫外可见吸收光谱最大吸收峰在525nm附近，加入20种天然氨基酸的体系呈蓝紫色，紫外可见吸收光谱最大吸收峰向高波数红移，结果如图4所示。
在本发明实施例中，利用带负电的硼簇化合物与赖氨酸在酸性条件下质子化的氨基之间的静电相互作用，以及纳米金粒径改变对溶液颜色的影响和对体系吸光度的改变，实现对赖氨酸的特异性识别和定量检测。本发明相较于传统检测方法具有方便快捷、成本低、原料损失少、对仪器要求低等优点。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (3)

1.一种检测赖氨酸的纳米金比色法，其特征在于，所述纳米金比色法包括如下步骤：
步骤S1：按常规工艺制备硼簇还原的纳米金，并将其稀释，得到稀释后的溶液；
步骤S2：用酸调节稀释后溶液的pH，再加入样品水溶液，即可实现对赖氨酸的特异性识别；溶液pH为2.4-2.6，样品水溶液中氨基酸的浓度为0-50μM；
步骤S3：对所得纳米金样品溶液进行紫外可见吸收光谱扫描，根据纳米金A650/A525的信号强弱，即可对赖氨酸的浓度加以测定，在0.01-1μM范围内，紫外可见吸收光谱A650/A525与赖氨酸的浓度呈正比。
2.如权利要求1所述检测赖氨酸的纳米金比色法，其特征在于，步骤S1中，采用Cs2B12H12作为还原剂和稳定剂，按照摩尔比1:1的量将Cs2B12H12加入到氯金酸溶液中，在25℃下搅拌30min，即可得到硼簇还原的纳米金。
3.如权利要求2所述检测赖氨酸的纳米金比色法，其特征在于，Cs2B12H12和氯金酸在溶液中的浓度均为0.4mM，且溶剂为水。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116858824B (zh) * 2023-06-13 2024-06-21 广州大学 一种色氨酸的比色检测方法及其应用

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010057351A1 (zh) * 2008-11-18 2010-05-27 中国检验检疫科学研究院 利用原子力显微镜进行生物标记检测的方法
CN107118226A (zh) * 2017-05-18 2017-09-01 扬州大学 赖氨酸修饰的苝酰亚胺功能化金纳米颗粒溶液的制备方法及其应用
CN107153059A (zh) * 2017-05-18 2017-09-12 中国工程物理研究院材料研究所 一种纳米金比色传感器的制备方法及其在二价汞离子检测中的应用
CN108007923A (zh) * 2016-10-27 2018-05-08 武汉大学 一种快速检测铅离子的纳米金比色法
CN108956593A (zh) * 2018-07-27 2018-12-07 海南大学 一种无适配体纳米金水溶胶可视化检测三聚氰胺的方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010057351A1 (zh) * 2008-11-18 2010-05-27 中国检验检疫科学研究院 利用原子力显微镜进行生物标记检测的方法
CN108007923A (zh) * 2016-10-27 2018-05-08 武汉大学 一种快速检测铅离子的纳米金比色法
CN107118226A (zh) * 2017-05-18 2017-09-01 扬州大学 赖氨酸修饰的苝酰亚胺功能化金纳米颗粒溶液的制备方法及其应用
CN107153059A (zh) * 2017-05-18 2017-09-12 中国工程物理研究院材料研究所 一种纳米金比色传感器的制备方法及其在二价汞离子检测中的应用
CN108956593A (zh) * 2018-07-27 2018-12-07 海南大学 一种无适配体纳米金水溶胶可视化检测三聚氰胺的方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"纳米金的制备及其在重金属离子检测中的应用——一个分析化学综合性研究型实验";丁琼等;《化学通报》;20191231;第82卷(第2期);第187-191页 *
光谱法研究pH值对纳米银及其与赖氨酸相互作用的影响;张磊等;《光散射学报》;20160930(第03期);全文 *

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