CN111407783B - 赶黄草在制备治疗高蛋白尿药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了赶黄草在制备治疗高蛋白尿药物中的应用。本发明是基于本发明人发现赶黄草对高蛋白尿导致的大量蛋白尿、低蛋白血症、脂质代谢紊乱以及不同程度的水肿均具有良好疗效，所提出的发明创造。赶黄草具有保肝护肝功效，因此，其在制备治疗高蛋白尿药物中，安全性更高。

Description

赶黄草在制备治疗高蛋白尿药物中的应用

技术领域

本发明涉及一种苗药的应用，尤其涉及赶黄草在制备治疗高蛋白尿药物中的应用。

背景技术

赶黄草，又名扯根菜、水杨柳以及水泽兰，为多年生草本植物虎耳草科扯根菜(Penthorum chinense Pursh)的干燥地上部分。赶黄草始载于明代《救荒本草》，具有清热解毒、退黄化湿、活血散瘀、利水消肿之功效，为苗族预防和治疗肝病的经验方，被称之为“神仙草”，主要分布在乌蒙山区海拔1000m左右的潮湿地带，为四川省古蔺县道地药材。赶黄草的化学成分主要包括黄酮类、有机酸类、甾醇类、木质素类和挥发油类等，研究表明赶黄草的保肝、抗氧化、抗病毒等生物活性与其黄酮类和有机酸等成分有关。

蛋白尿是肾脏疾病最常见的临床症状之一，肾小球滤过屏障破坏、肾小管重吸收功能受损、血浆中小分子蛋白异常增多并滤过以及肾排泌增加或组织损伤并释放入尿中等原因均可引起不同程度的蛋白尿。蛋白尿不仅是肾脏疾病的病理产物，也是促使肾脏疾病发展的独立危险因素。蛋白尿损害肾脏的机制有以下两种：通过肾小球基膜滤过的大分子物质在系膜区过度堆积，造成系膜细胞损伤，促进增生及基质合成增多，导致系膜硬化大分子蛋白质进入肾小管，和小分子蛋白质竞争性地被肾小管上皮细胞重吸收，因此，蛋白尿具有明显的系膜毒性。蛋白质含量的过度增多，使溶酶体活性增加，肾小管刷状缘脱落，直接损害了肾小管上皮细胞结构的完整性。

蛋白尿是肾小管间质损伤独立的危险因素，其导致肾损害主要是促进肾小球硬化、肾小管损伤和肾间质炎症细胞浸润及纤维化。肾小球硬化与肾小管间质纤维化(肾纤维化)是慢性肾衰竭的病理基础，亦是几乎所有肾脏疾病进展至终末期肾衰竭的共同通路，但目前尚无有效的治疗手段，为了减缓和治疗肾脏疾病的发展，降低蛋白尿尤为重要。有效降低蛋白尿、且安全性高的药物，仍然是人们的研究目标。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供赶黄草在制备治疗高蛋白尿药物中的应用。

本发明的目的通过以下技术方案来实现：赶黄草在制备治疗高蛋白尿药物中的应用。

所述赶黄草在制备治疗高蛋白尿药物中的应用，优选包括如下步骤：对赶黄草进行提取，得到的赶黄草提取物用于制备治疗高蛋白尿药物。

所述的赶黄草提取物优选为赶黄草水提物。

所述的赶黄草提取物的制备方法，包括如下步骤：

(1)用水煎煮赶黄草，固液分离，获得煎液和药渣；将药渣复煎0次以上，得到煎液，复煎是为了更好地提取赶黄草的有效成分；合并煎液，得到赶黄草提取物。

所述的赶黄草提取物的制备方法，还包括如下步骤：

(2)将步骤(1)得到的煎液浓缩，得到赶黄草清膏。

所述的赶黄草提取物的制备方法，还包括如下步骤：

(3)在步骤(2)得到的赶黄草清膏中加入乙醇，搅拌，得到赶黄草乙醇溶液，其中，赶黄草乙醇溶液中的乙醇浓度为体积百分比40～80％；静置，过滤，得到滤液和沉淀；将沉淀用浓度为体积百分比40～80％的乙醇溶液洗涤0次以上，过滤，得到滤液，洗涤沉淀是为了更充分地将沉淀中的有效成分提取出来；合并滤液；

(4)将滤液浓缩，得到赶黄草浸膏。

步骤(1)中：

所述的水的用量优选按赶黄草：水＝料液比1:5～1:15(g：mL)配比计算；更优选按赶黄草：水＝料液比1:10(g：mL)配比计算。

所述的煎煮的时间优选为1～3h；更优选为2h。

所述的复煎中的水的用量优选按赶黄草：水＝料液比1:5～1:15(g：mL)配比计算；更优选按赶黄草：水＝料液比1:10(g：mL)配比计算。

所述的复煎的时间优选为1～3h；更优选为2h。

所述的复煎的次数优选为2～6次；更优选为4次。

步骤(3)中：

所述的赶黄草乙醇溶液中的乙醇浓度优选为体积百分比60％。

所述的沉淀优选使用浓度为体积百分比60％的乙醇溶液洗涤。

所述的洗涤的次数优选为3次。

所述的高蛋白尿是肾病引起的高蛋白尿。

所述的肾病优选为综合性肾病、膜性肾病和糖尿病肾病中的一种。

所述的药物的剂型为汤剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、冲剂、口服液剂、胶囊剂、片剂、注射剂。

所述的药物为普通制剂、缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及微粒给药系统。

本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：

1.本发明发明人首次发现赶黄草对高蛋白尿导致的大量蛋白尿、低蛋白血症、脂质代谢紊乱以及不同程度的水肿均具有良好疗效；赶黄草还具有改善肾功能、提高肾组织抗氧化能力的功效。

2.赶黄草具有清热解毒、退黄化湿、活血散瘀、利水消肿之功效，在保肝护肝方面广泛应用，因此安全性较高。

3.赶黄草和阳性药醋酸泼尼松相比，对高蛋白尿治疗效果更优、恢复更快，在肾病的治疗领域具有广阔的应用前景。

附图说明

图1是赶黄草对PHN大鼠24h尿蛋白的影响结果图；其中，^###表示相对于对照组，PNH组P<0.001；**表示相对于PNH组，PNH+赶黄草组P<0.01。

具体实施方式

下面结合实施例和说明书附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实施例1赶黄草浸膏治疗高蛋白尿的药效实验

阿霉素肾病动物模型是广泛应用的经典实验性肾病动物模型，具有简便，成功率高，大量蛋白尿持续时间长而稳定，病变稳定等特点。阿霉素肾病大鼠肾脏组织损伤的演变过程与人类肾脏病变、肾损害的慢性病理过程相似，故阿霉素诱导肾病可以用作实验性肾病的模型。该模型具有大量蛋白尿的特点，是评价各种不同肾脏损伤程度及药物治疗干预高蛋白尿病症效果的临床常用的实验性肾病模型。本发明采用阿霉素诱导肾病作为实验性肾病的模型。病症主要症状为：大量蛋白尿、低蛋白血症、脂质代谢紊乱以及不同程度的水肿。

1.实验材料

(1)实验动物

清洁级雄性SD大鼠72只，体重210±20g，由广东省实验动物中心提供(许可证号SCXK(粤)2013-0002)。适应性喂养2周，选取大鼠中尿蛋白测定呈阴性者，进行实验。实验期间，选取的大鼠在暨南大学SPF级动物房以标准饲料饲养，自由摄食及饮水。

(2)药物与试剂

赶黄草(成都天森科技生物有限公司)、注射用盐酸阿霉素(浙江海正药业有限公司)、醋酸泼尼松片(上海上药信谊药厂有限公司)、血尿素氮(BUN)试剂盒、血肌酐(Scr)试剂盒、血白蛋白(Alb)试剂盒、血胆固醇(CHO)试剂盒、三酰甘油(TG)试剂盒、总蛋白(TP)试剂盒、超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、丙二醛(MDA)试剂盒、谷胱甘肽(GSH)试剂盒(SOD、MDA及GSH试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供)。

2.实验方法

(1)赶黄草浸膏制备

1)取赶黄草2.5kg，切碎，按料液比(kg:L)1:10加水，煎煮2h，获得煎液和药渣。

2)按步骤1)中加水煎煮的操作将药渣复煎4次。合并步骤1)和前述复煎步骤所获得的煎液，过滤，浓缩，获得赶黄草清膏。

3)将赶黄草清膏冷却，加入无水乙醇至乙醇含量为体积百分比60％，搅拌，静置，过滤得到滤液和沉淀。

4)将沉淀用浓度为体积百分比60％的乙醇溶液洗涤3次，得到洗液；合并洗液和步骤3)得到的滤液，浓缩，获得赶黄草浸膏并回收乙醇，制得浓度为2.5g原生药/mL的赶黄草浸膏。

(2)动物模型的复制

取健康的清洁级雄性SD大鼠，按5.0mg/kg的剂量尾静脉单次注入盐酸阿霉素，并于第7天放入代谢笼中24h，之后取其尿液并测尿蛋白，选取尿蛋白定量值大于100mg的模型大鼠准备进行药效实验。

(3)实验分组与给药

选取空白组大鼠10只，并将50只造模成功大鼠按随机数字表随机分为模型组、阳性药(醋酸泼尼松)组、赶黄草高剂量组、赶黄草中剂量组、赶黄草低剂量组，每组10只。空白组与模型组给予等量生理盐水灌胃，其余各组给予相应药物干预(醋酸泼尼松组：醋酸泼尼松8mg/kg；赶黄草低剂量组：赶黄草浸膏0.6mL·kg^-1·d^-1，相当于原生药1.5g·kg^-1·d^-1；赶黄草中剂量组：赶黄草浸膏1.8mL·kg^-1·d^-1，相当于原生药4.5g·kg^-1·d^-1；赶黄草高剂量组：赶黄草浸膏5.4mL·kg^-1·d^-1，相当于原生药13.5g·kg^-1·d^-1；连续6周。

(4)检测方法

1)一般情况观察

大鼠一般状态，包括大鼠精神状态、进食量、摄水量、排尿量、排粪量、体重、体毛、活动情况及水肿情况等。给药后连续观察一般症状，观察动物是否出现异常症状。

2)24h尿蛋白定量

收集6组大鼠末次给药后24h的尿液，用考马氏亮蓝法检测尿蛋白含量。

3)血清生化值

收集6组大鼠尿液后，以10％水合氯醛麻醉大鼠，分别将其腹主动脉取血并置于10mL离心管中，4000r/min离心10min，取上清液，即血清。用全自动生化分析仪检测血清中血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、血白蛋白(Alb)、血胆固醇(CHO)、三酰甘油(TG)以及总蛋白(TP)水平。

4)肾生化值

将取血后的大鼠取右肾，冷生理盐水冲洗，滤纸拭干，称取0.5g组织，与5mL生理盐水充分混匀，用组织匀浆器制成匀浆，使每mL含0.1g组织，整个过程均在0～4℃下操作。将组织匀浆液4000r/min离心15min，取上清液测定。GSH、SOD及MDA分别采用DTNB法、黄嘌呤氧化酶吸附法、硫代巴比妥酸比色法(TBA法)检测，严格按照说明书测定含量。

3.结果

(1)一般情况观察

整个实验过程中，空白组大鼠活动自如，饮食、饮水均正常，双目有神，皮毛有光泽，尾部色泽红润、光亮，体重逐渐增加，排尿量和排粪量正常，无消瘦及腹胀症状，精神状态良好。模型组大鼠进食量、饮水量及排尿量均明显减少，开始出现食欲不振、被毛蓬松、竖起、凌乱且失去光泽、精神萎靡、喜卧恶动、畏寒喜温，并伴有不同程度的脱毛、体重明显下降、形体消瘦、后足爪明显水肿及尾部溃烂，大鼠出现死亡，死亡3只。用药后除模型组之外，其余各组大鼠较造模初进食量、摄水量及排尿量均明显增加，体重也逐渐增加，皮毛稍有凌乱，浮肿症状明显轻于模型组，烂尾症状均有不同程度地改善，精神逐渐好转，同时，除模型组之外的其余各组大鼠出现死亡状况，各死亡2只。各组大鼠给药6周后的体重变化情况如表1所示，给药6周后，模型组大鼠体重明显下降，与模型组比较，空白组、醋酸泼尼松组、赶黄草中剂量组、赶黄草高剂量组大鼠体重有极显著性差异，而赶黄草低剂量组体重与模型组比较无显著性差异；与醋酸泼尼松组比较，赶黄草低剂量组有显著性差异。

表1.各组大鼠第6周末体重

注：*p﹤0.05，**p<0.01与模型组比较；#p﹤0.05，##p<0.01与醋酸泼尼松组比较.

(2)24h尿蛋白定量

不同浓度的受试药物对高蛋白尿病症大鼠24h尿蛋白定量的影响如表2所示，给药6周后，测得各组大鼠的24h尿蛋白定量，与模型组相比较，其余各组大鼠的24h尿蛋白定量均有极显著性下降，表明赶黄草具有很好的降蛋白尿的作用。与醋酸泼尼松组比较，空白组、模型组具有极显著性差异，赶黄草中、高剂量组具有显著性差异，赶黄草低剂量组无显著性差异。

表2.各组大鼠第6周末次给药24h之后尿蛋白定量

注：*p﹤0.05，**p<0.01与模型组比较；#p﹤0.05，##p<0.01与醋酸泼尼松组比较.

(3)各组大鼠血清生化值

给药6周后检测各组大鼠血清中BUN、Scr、Alb、TP、TG、CHO水平，具体如表3、表4所示，模型组大鼠存在着脂质代谢紊乱、低蛋白血症、高脂血症和肾功能损害，与空白组大鼠存在显著性差异。与模型组BUN比较，其余组具有显著性差异，表明赶黄草具有很好的改善肾功能，降低BUN的能力。与模型组Scr比较，空白组、醋酸泼尼松组具有显著性差异，其余组均无显著性差异。与模型组Alb比较，空白组、醋酸泼尼松组具有显著性差异，其余组均无显著性差异。与模型组TP比较，空白组、醋酸泼尼松组、赶黄草低剂量组具有显著性差异，赶黄草中、高剂量组均无显著性差异。与模型组CHO比较，其余组均具有极显著性差异。与模型组TG比较，其余组均具有极显著性差异，醋酸泼尼松组、赶黄草低、中、高剂量组可明显纠正脂质代谢紊乱，降低CHO、TG水平。

表3.各组大鼠血清生化指标检测结果

注：*p﹤0.05，**p<0.01与模型组比较；

表4各组大鼠血清生化指标检测结果

注：*p﹤0.05，**p<0.01与模型组比较；

(4)肾生化值

给药6周后检测肾生化指标，如表5所示，与模型组SOD比较，空白组具有显著性差异，其余组均无显著性差异。与模型组GSH比较，其余组均无显著性差异。与模型组MDA比较，空白组、醋酸泼尼松组具有极显著性差异，赶黄草低剂量组具有显著性差异，其余组均无显著性差异。

表5.肾脏中SOD、GSH、MDA含量

注：*p﹤0.05，**p<0.01与模型组比较；

4.结论

由实验结果可知，造模后，与空白组比较，模型组大鼠出现明显的体重下降，高蛋白尿，脂质代谢紊乱、低蛋白血症和肾功能损伤等症状，且大鼠因病症严重出现死亡。给药6周后，醋酸泼尼松组可明显增加大鼠体重，使造模后的大鼠体重趋近于正常大鼠，明显降低高蛋白尿，改善肾功能，改善低蛋白血症症状，纠正脂质代谢紊乱，并具有一定的提高肾组织抗氧化能力，但因大鼠前期病症严重及撕咬出现死亡。赶黄草中、高剂量组均可明显增加大鼠体重，使造模后的大鼠体重趋近于正常大鼠，赶黄草低剂量组大鼠因前期病症严重出现死亡，赶黄草中、高剂量组因大鼠前期病症严重及撕咬出现死亡。赶黄草低、中、高剂量组可明显降低高蛋白尿，且赶黄草中、高剂量组降高蛋白尿效应强于醋酸泼尼松组。赶黄草低、中、高剂量组可明显降低BUN的水平，表明赶黄草具有明显的改善肾功能的作用。赶黄草低剂量组可明显降低TP的水平，表明赶黄草具有明显的改善低蛋白血症的作用。赶黄草低、中、高剂量组可明显降低CHO、TG的水平，纠正脂质代谢紊乱。赶黄草低剂量组可明显降低MDA的水平，表明赶黄草具有一定的提高肾组织抗氧化能力。

结果说明：赶黄草浸膏以降高蛋白尿的作用为主，并具有一定的纠正脂质代谢紊乱、低蛋白血症、改善肾功能、提高肾组织抗氧化能力、减轻水肿症状的功效，且安全性好。因此，赶黄草有望开发成为新一代治疗高蛋白尿的药物。

实施例2赶黄草对膜性肾病大鼠尿蛋白的影响

1、材料及方法

(1)材料

赶黄草浸膏制备同实施例1。

动物实验和伦理说明：雄性Wistar和Sprague-Dawley大鼠和雄性新西兰白兔从中国科学院上海实验动物中心获得。将所有大鼠饲养在无特定病原体的条件下，并将兔子饲养在清洁级动物实验室中。所有动物程序均按照东直门医院的机构动物护理和使用委员会(IACUC)批准的动物护理和使用方案(2013-01-ZJP-19)进行。

(2)实验模型制作

从雄性Wistar大鼠的肾皮质制备Fx1A抗原，然后，接着用Fx1A抗原免疫雄性新西兰白兔以制备兔抗血清(具体操作步骤参见“陈圳炜等.兔抗鼠Fx1A抗体制备膜性肾病大鼠模型的实验研究.国际免疫学杂志2014年1月第37卷第1期”)。在体重为180-200g的雄性SpragueDawley大鼠中，腹膜内注射兔抗鼠Fx1A抗血清(3mL/200g体重)，诱导得到Sprague-Dawley大鼠被动Heymann肾炎(PHN)模型。在PHN诱导成功后第4天，根据蛋白尿水平将大鼠随机分组。

(3)实验分组及给药方法

将PHN大鼠随机分为四组，每组5只。第二天开始灌胃治疗并持续29天。正常组(CON)组及PNH组给予等量蒸馏水灌胃，CON+赶黄草组为赶黄草原生药3.125g·kg^-1·d^-1灌胃正常大鼠，PNH+赶黄草组为赶黄草原生药3.125g·kg^-1·d^-1灌胃PNH大鼠。

(4)标本采集

用药24周时将四组大鼠放入代谢笼，4h收集1次尿液，4℃储存，收集24h尿液后测总量。

(5)统计学方法

数据采用SPSS 20.0统计软件处理，计量资料以均数±标准误(mean±SEM)表示，统计数据经检验，服从正态分布，具有方差齐性，采用单因素方差分析进行组间比较。P＜0.05为差异有统计学意义。

2、实验结果

(1)大鼠24h尿蛋白定量

PHN组大鼠的24h尿蛋白总量显著高于正常组(P<0.001，mean±SEM，n＝5)，赶黄草干预后得到的PHN+赶黄草组的24h尿蛋白较PHN组显著性降低(P<0.01)，正常组+赶黄草组的24h尿蛋白较正常组则基本没有变化(见图1)。结果表明，赶黄草能够显著降低膜性肾病大鼠的尿蛋白含量，对正常Sprague-Dawley大鼠尿液中尿蛋白含量无影响。

实施例3赶黄草对糖尿病肾病大鼠肾功能的影响

1、材料与方法

(1)材料

赶黄草制剂制备同实施例1，Sprague-Dawley大鼠的来源同实施例2。

(2)实验模型制作

大鼠适应性饲养1周后，随机抽取5只为正常组，其余为模型组。测定尿蛋白，确定为阴性后腹腔注射戊巴比妥钠进行麻醉，常规备皮、消毒，经背部切口行左肾切除术并于伤口处滴庆大霉素以预防感染。2周后，模型组单次左下腹腔注射1％链脲佐菌素溶液(以0.1mol/L柠檬缓冲液冰上配制，pH 4.2～4.5)55mg/kg，空白组注射等量的柠檬酸缓冲液。造模48小时内给予5％葡萄糖饮水，72小时后尾尖采血，血糖仪测定随机血糖浓度≥16.7mmol/L且血糖水平维持一周者确定为糖尿病肾病大鼠(DN)模型。

(3)实验分组及给药方法

将大鼠随机分为四组，每组5只。正常组(CON)及糖尿病肾病(DN)模型组给予等量蒸馏水灌胃，CON+赶黄草组为赶黄草原生药3.125g·kg^-1·d^-1灌胃正常大鼠，DN+赶黄草组为赶黄草原生药3.125g·kg^-1·d^-1灌胃糖尿病肾病大鼠，用药20周。

(4)标本采集

用药20周时将四组大鼠放入代谢笼，4h收集1次尿液，4℃储存，收集24h尿液后测总量。采用ELISA法检测尿白蛋白，采用自动生化分期器检测血浆、尿肌酐、尿素水平。

(5)统计学方法

方法同实施例2。

2、结果

DN组大鼠的体重显著高于正常组(P<0.001)，赶黄草干预后得到的DN+赶黄草组的体重较DN组无显著性差异(P>0.05)；DN组大鼠血肌酐、肌酸酐清除率、血尿素氮均明显高于正常组(P<0.01,P<0.01,P<0.05)，赶黄草干预后得到的DN+赶黄草组大鼠的血肌酐、内生肌酐清除率与DN组均无显著性差异(P>0.05)，血尿素氮水平明显低于正常组(P<0.05)；DN组尿白蛋白、尿总蛋白、尿白蛋白/肌酐(Alb/Cr)均明显高于正常组(P<0.001、P<0.01、P<0.001)，赶黄草干预后得到的DN+赶黄草组大鼠的白蛋白、尿总蛋白、尿Alb/Cr均明显低于DN组(P<0.01、P<0.05、P<0.05)(见表6)。

表6.赶黄草对糖尿病肾病大鼠肾功能的影响(mean±SEM，n＝5)

注：^#:P<0.05DN vs CON，^##:P<0.01DN vs CON，^###:P<0.001DN vs CON，*:P<0.05DN+赶黄草vs DN，**:P<0.01DN+赶黄草vs DN，***:P<0.001DN+赶黄草vs DN。

实施例4赶黄草治疗高蛋白尿的临床研究

(1)赶黄草制剂的制备：赶黄草加水煎煮两次(每次30分钟)，过滤，合并滤液，即得。

(2)对象：所用数据为回顾性分析2017年4月至2018年4月收集的北京东直门医院门诊患者的病历资料，疗程超过6个月且诊断明确的糖尿病肾病患者和特发性膜性肾病患者，临床表现为蛋白尿，共41例。其中，膜性肾病患者25例，糖尿病肾病患者16例，患者性别、年龄比较，差异不具有统计学意义。

纳入标准：

特发性膜性肾病患者：肾组织病理检查诊断为膜性肾病，临床排除系统性红斑狼疮、乙型病毒性肝炎、肿瘤、药物等继发性膜性肾病；继发性膜性综合征患者风湿性疾病、肾淀粉样病变、肿瘤相关性肾损害等，既往有肿瘤，严重呼吸、血液、心血管系统疾病等基础疾病者，既往有精神疾病者不在纳入标准内。

糖尿病肾病患者：对于有明确糖尿病病史且病程大于6月的患者出现以下任意一条即可纳入：①白蛋白尿(3-6个月内复查，3次结果中2次或以上异常)；②糖尿病视网膜病变伴任意一期的慢性肾脏病；③经肾活检证实为糖尿病肾病。

(3)方法：研究采取自身前后对照，赶黄草加以治疗前仅采用西医基础治疗，赶黄草加以治疗是采用西医基础治疗加赶黄草30g。赶黄草以水煎服，每日1剂，早晚分服，28天为一个疗程。

(4)主要观察指标：

疗效性指标：24h尿蛋白定量(24h-UTP)、血白蛋白(Alb)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(Bun)。

安全性指标：血钾、肝功能等。

(5)统计学方法

用SPSS20.0进行统计分析，治疗前后采用配对样本t检验，P＜0.05表示有统计学意义。

(6)结果

(A)疗效性指标比较

赶黄草治疗糖尿病肾病患者自身前后对照，24h-UTP差异有统计学意义(P＜0.01)；Alb、Scr、Bun差异无统计学意义(P＞0.05)，但Bun有下降趋势(见表7)。

表7.赶黄草治疗糖尿病肾病患者前后疗效性指标的比较(mean±SEM，n＝25)

注：与本组治疗前比较**P<0.01，*P<0.05；

(B)两组患者安全性指标比较

赶黄草治疗糖尿病肾病患者自身前后对照，各项安全性指标变化差异均无统计学意义(P＞0.05)(见表8)。

表8.赶黄草治疗糖尿病肾病患者治疗前后安全性指标的比较(mean±SEM，n＝25)

(C)疗效性指标比较

赶黄草治疗膜性肾病患者自身前后对照，24h-UTP差异有统计学意义。(P＜0.01)Alb、Scr、Bun差异无统计学意义，但Bun有下降的趋势(P＞0.05)(见表9)。

表9.赶黄草治疗膜性肾病患者前后疗效性指标的比较(x±s,n＝16)

注：与本组治疗前比较**P<0.01，*P<0.05。

(D)两组患者安全性指标比较

赶黄草治疗膜性肾病患者自身前后对照，各项安全性指标变化差异均无统计学意义(P＞0.05)(见表10)。

表10.赶黄草治疗膜性肾病患者前后治疗前后安全性指标的比较(x±s,n＝16)

结论：发明人经过多年的临床探索，发现赶黄草在治疗慢性肾脏病方面临床效果佳，能够改善临床患者的水肿，小便泡沫增多，大便粘滞不爽，舌苔厚腻等不适症状，尤其是降低患者的尿蛋白水平。发明人选取了现发病率较高的膜性肾病、糖尿病肾病进行临床研究和基础研究。研究结果提示，单味赶黄草在治疗膜性肾病、糖尿病肾病的蛋白尿方面具有疗效好和安全性较高的特点，在降低尿素氮水平也有一定效果，值得临床应用和推广。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他任何未背离本发明的精神实质与原理下所做的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (11)

1.赶黄草作为唯一活性成分在制备治疗高蛋白尿药物中的应用。

2.根据权利要求1所述赶黄草作为唯一活性成分在制备治疗高蛋白尿药物中的应用，其特征在于包括如下步骤：对赶黄草进行提取，得到的赶黄草提取物用于制备治疗高蛋白尿药物。

3.根据权利要求2所述赶黄草作为唯一活性成分在制备治疗高蛋白尿药物中的应用，其特征在于：所述的赶黄草提取物为赶黄草水提物。

4.根据权利要求3所述赶黄草作为唯一活性成分在制备治疗高蛋白尿药物中的应用，其特征在于：所述的赶黄草提取物的制备方法，包括如下步骤：

（1）用水煎煮赶黄草，固液分离，获得煎液和药渣；将药渣复煎0次以上，得到煎液；合并煎液，得到赶黄草提取物。

5.根据权利要求4所述赶黄草作为唯一活性成分在制备治疗高蛋白尿药物中的应用，其特征在于：所述的赶黄草提取物的制备方法，还包括如下步骤：

（2）将步骤（1）得到的煎液浓缩，得到赶黄草清膏。

6.根据权利要求5所述赶黄草作为唯一活性成分在制备治疗高蛋白尿药物中的应用，其特征在于：所述的赶黄草提取物的制备方法，还包括如下步骤：

（3）在步骤（2）得到的赶黄草清膏中加入乙醇，搅拌，得到赶黄草乙醇溶液，其中，赶黄草乙醇溶液中的乙醇浓度为体积百分比40～80%；静置，过滤，得到滤液和沉淀；将沉淀用浓度为体积百分比40～80%的乙醇溶液洗涤0次以上，过滤，得到滤液；合并滤液；

（4）将滤液浓缩，得到赶黄草浸膏。

7.根据权利要求6所述赶黄草作为唯一活性成分在制备治疗高蛋白尿药物中的应用，其特征在于：

步骤（3）中所述的赶黄草乙醇溶液中的乙醇浓度为体积百分比60%；

步骤（3）中所述的沉淀是使用浓度为体积百分比60%的乙醇溶液洗涤。

8.根据权利要求4～7任一项所述赶黄草作为唯一活性成分在制备治疗高蛋白尿药物中的应用，其特征在于：步骤（1）中所述的水的用量按赶黄草：水=料液比1:5～1:15（g：mL）配比计算；

步骤（1）中所述的煎煮的时间为1～3h；

步骤（1）中所述的水的用量按赶黄草：水=料液比1:10（g：mL）配比计算；

步骤（1）中所述的煎煮的时间为2h；

步骤（1）中所述的复煎的条件如下：水的用量按赶黄草：水=料液比1:5～1:15（g：mL）配比计算，复煎时间为1～3h；复煎次数为2～6次。

9.根据权利要求1～7任一项所述赶黄草作为唯一活性成分在制备治疗高蛋白尿药物中的应用，其特征在于：所述的高蛋白尿是肾病引起的高蛋白尿；

所述的肾病为综合性肾病、膜性肾病或糖尿病肾病中的一种。

10.根据权利要求1～7任一项所述赶黄草作为唯一活性成分在制备治疗高蛋白尿药物中的应用，其特征在于：所述的药物的剂型为汤剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、冲剂、口服液剂、胶囊剂、片剂、注射剂。

11.根据权利要求1～7任一项所述赶黄草作为唯一活性成分在制备治疗高蛋白尿药物中的应用，其特征在于：所述的药物为普通制剂、缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及微粒给药系统。

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