CN111349710B - 用于鉴定西瓜果肉颜色的控制位点、方法及应用 - Google Patents

用于鉴定西瓜果肉颜色的控制位点、方法及应用 Download PDF

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Abstract

本发明属于生物技术领域，提供了一种用于鉴定西瓜果肉颜色的控制位点、方法及应用。本发明提供的用于鉴定或者辅助鉴定待测西瓜果肉颜色的控制位点包括位于西瓜橙瓤基因FO的第445位碱基G，位于西瓜红瓤基因fr的第676位碱基G，和第1305位碱基G；当西瓜橙瓤基因FO的第445位碱基为G，且西瓜红瓤基因fr的第676位碱基不为G、和/或第1305位碱基不为G时，待测西瓜果肉为或候选为橙瓤；当西瓜为隐形纯合体frfr，且西瓜红瓤基因fr的第676位碱基为G、且第1305位碱基为G时，待测西瓜果肉为或候选为红瓤。利用该位点可以快速准确地鉴定西瓜果肉的颜色，对于西瓜果肉颜色的品种育种具有重大的积极意义。

Description

用于鉴定西瓜果肉颜色的控制位点、方法及应用
技术领域
本发明属于生物技术领域，特别涉及一种用于鉴定西瓜果肉颜色的控制位点、方法及应用。
背景技术
西瓜(Citrullus lanatus)是葫芦科的重要作物，其占世界蔬菜作物面积的7％，全球年产量约为90,000,000吨(http://faostat.fao.org)。我国西瓜产销量位于世界第一，是我国具有国际竞争力和较大经济增长空间的重要园艺作物。随着西瓜全基因组序列的发布，如何挖掘重要功能基因，提高西瓜果实品质是分子育种工作的关键。如何寻找控制西瓜重要性状的关键基因，是目前西瓜分子生物学研究的首要内容。
西瓜的瓤色(果肉颜色)是重要的果实品质性状，鲜艳的瓤色不仅是一种重要的商品感官品质更是西瓜营养价值的体现，在高品质西瓜育种工作中具有重要指标意义。西瓜果肉颜色丰富，在不同的西瓜种质资源中果瓤的颜色大体可分为红色、粉红、橙红、黄色、白色等五种，而这些果肉颜色形成的主要原因在于各种类胡萝卜素含量及种类不同。Watanabe(1987)对3种瓤色西瓜品种的类胡萝卜素组成进行了分析，认为红瓤瓜中以番茄红素为主，橙黄瓤瓜中以β-胡萝卜素为主，黄瓤瓜以β-胡萝卜素和叶黄素类为主；Tadmor(1999)分析了红、黄、橙三种瓤色西瓜的类胡萝卜素含量，发现红色和橙色西瓜以番茄红素为主，橙黄色西瓜以前番茄红素、八氢番茄红素及ζ-胡萝卜素为主；贾关荣等(2008)分析了红、黄、桃红、粉与白色5种瓤色西瓜的类胡萝卜素含量，得出五种瓤色西瓜均含有六氢番茄红素、β-胡萝卜素与ζ-胡萝卜素，番茄红素在红黄、桃红、粉四种瓤色中均含有，在白瓤瓜未检测到。而一些原产非洲的野生西瓜瓤色为白色；同时还存在大量的中间类型瓤色，如淡黄、橙黄、橙红、粉色、桃红等。西瓜多样化果瓤颜色类型为解析有色体发育规律及其机制提供了丰富而独特的试验材料。
发明内容
本发明针对西瓜特殊的高β-胡萝卜素积累的橙瓤西瓜材料，通过与多种其他果肉颜色西瓜的杂交试验明确了其控制基因(Flesh Orange，FO)与红瓤控制基因(Flesh Red，fr)间的遗传关系，为西瓜果肉颜色鉴别和育种工作提供理论和实践帮助。
本发明的第一个方面提供了一种用于鉴定或者辅助鉴定待测西瓜果肉是否为橙瓤的控制位点，所述控制位点包括：
位于西瓜橙瓤基因FO的第445位碱基G；
位于西瓜红瓤基因fr的第676位碱基G，和第1305位碱基G；
其中，当西瓜橙瓤基因FO的第445位碱基为G，且西瓜红瓤基因fr的第676位碱基不为G、和/或第1305位碱基不为G时，待测西瓜果肉为或候选为橙瓤。
本发明的第二个方面提供了一种用于鉴定或者辅助鉴定待测西瓜果肉是否为红瓤的控制位点，所述控制位点包括：
位于西瓜红瓤基因fr的第676位碱基G，和第1305位碱基G；
其中，当西瓜为隐形纯合体frfr，且西瓜红瓤基因fr的第676位碱基为G、且第1305位碱基为G时，待测西瓜果肉为或候选为红瓤。
本发明的第三个方面提供了一种用于鉴定或者辅助鉴定待测西瓜果肉是否为橙瓤的方法，所述方法包括检测待测西瓜是否具有橙瓤基因FO片段，以及是否具有红瓤基因fr片段；
其中，若待测西瓜具有橙瓤基因FO片段，且不具有红瓤基因fr片段，则待测西瓜果肉为或候选为橙瓤。
本发明的第四个方面提供了一种用于鉴定或者辅助鉴定待测西瓜果肉是否为红瓤的方法，所述方法包括检测待测西瓜是否具有红瓤基因fr片段；
其中，若待测西瓜具有纯合的红瓤基因fr片段，则待测西瓜果肉为红瓤。
本发明的第五个方面提供了一种用于扩增西瓜橙瓤基因FO片段或fo片段的引物，所述引物包括：
序列表中序列1所示的上游引物序列：
5’-ATGTCTTTTGCTCCTTCGTTGG-3’；
序列表中序列2所示的下游引物序列：
5’-GCCCAAATAGCCTTTTGCCTCTC-3’。
本发明的第六个方面提供了一种用于扩增西瓜橙瓤基因FO片段或fo片段的试剂盒，所述试剂盒含有根据本发明的第五个方面提供的用于扩增西瓜橙瓤基因FO片段或fo片段的引物，还含有下述至少一种成分：
在反应体系中终浓度为0-2.0mM(优选为1.5mM，还可以为0mM、0.5mM、1.0mM、1.8mM、2.0mM中的任意值或任意二者之间的范围)的MgCl2；
在反应体系中终浓度为0.1-0.4mM(优选为0.25mM，还可以为0.1mM、0.2mM、0.3mM、0.4mM中的任意值或任意二者之间的范围)的dNTPs；
在反应体系中终浓度为0.2-2U/20μL(优选为1U/20μL，还可以为0.2U/20μL、0.5U/20μL、1.5U/20μL、1.7U/20μL、2U/20μL中的任意值或任意二者之间的范围)的Taq DNA聚合酶；
和PCR缓冲液(优选为：其体积与反应体系体积之比为10％，还可以为10％、20％、25％、30％、40％中的任意值或任意二者之间的范围)。
上述用于扩增西瓜橙瓤基因FO片段或fo片段的引物，在反应体系中的终浓度为0.1-1.0mM(优选为0.5mM，还可以为0.1mM、0.2mM、0.3mM、0.4mM、0.6mM、0.8mM、1.0mM中的任意值或任意二者之间的范围)。
本发明的第七个方面提供了一种用于扩增西瓜红瓤基因FR片段或fr片段的引物，所述引物包括：
序列表中序列3所示的上游引物序列：
5’-ATGGATACTTTACTTAAAATC-3’；
序列表中序列4所示的下游引物序列：
5’-ATCTCTATCCTTTACCAGATTGC-3’。
本发明的第八个方面提供了一种用于扩增西瓜红瓤基因FR片段或fr片段的试剂盒，所述试剂盒含有根据本发明的第七个方面提供的用于扩增西瓜红瓤基因FR片段或fr片段的引物，还含有下述至少一种成分：
在反应体系中终浓度为0-2.0mM(优选为1.5mM，还可以为0mM、0.5mM、1.0mM、1.8mM、2.0mM中的任意值或任意二者之间的范围)的MgCl2；
在反应体系中终浓度为0.1-0.4mM(优选为0.25mM，还可以为0.1mM、0.2mM、0.3mM、0.4mM中的任意值或任意二者之间的范围)的dNTPs；
在反应体系中终浓度为0.2-2U/20μL(优选为1U/20μL，还可以为0.2U/20μL、0.5U/20μL、1.5U/20μL、1.7U/20μL、2U/20μL中的任意值或任意二者之间的范围)的Taq DNA聚合酶；
和PCR缓冲液(可以为10×Buffer，优选为其体积与反应体系体积之比为10％，还可以为10％、20％、25％、30％、40％中的任意值或任意二者之间的范围)。
上述用于扩增西瓜红瓤基因FR片段或fr片段的引物，在反应体系中的终浓度为0.1-1.0mM(优选为0.5mM，还可以为0.1mM、0.2mM、0.3mM、0.4mM、0.6mM、0.8mM、1.0mM中的任意值或任意二者之间的范围)。
本发明的第九个方面提供了一种根据本发明的第一个方面提供的用于鉴定或者辅助鉴定待测西瓜果肉是否为橙瓤的控制位点在选育西瓜瓤色品种中的应用。
本发明的第十个方面提供了一种根据本发明的第二个方面提供的用于鉴定或者辅助鉴定待测西瓜果肉是否为红瓤的控制位点在选育西瓜瓤色品种中的应用。
本发明提供的用于鉴定西瓜果肉颜色的控制位点和方法，通过分析西瓜橙瓤基因FO片段以及西瓜红瓤基因fr片段的控制位点的碱基，即可快速准确地鉴定西瓜果肉的颜色，对于西瓜果肉颜色的品种育种具有重大的积极意义。
本发明的其他特征和优点将在如下的具体实施方式部分详细描述。
附图说明
图1示出了西瓜果肉颜色遗传中父本、母本、F1代、部分F2代群体的果肉颜色剖面图。
图2示出了西瓜果肉颜色遗传中父本、母本、F1代、F2代群体的瓤色遗传模式示意图。
图3示出了西瓜果肉颜色遗传中西瓜果实橙瓤基因FO的定位结果图。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明的实施方式作进一步地详细描述。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
下述实施例中除ZHT(即：邹黄椭)为本课题发现的橙瓤西瓜新材料外，其他各个供试材料均为北京农作物种质资源库保存的种质资源材料，公众均可以自由地从该处获取相关材料。
实施例1
本实施例用来说明用于鉴定或者辅助鉴定西瓜果肉颜色的控制位点的获得。
一、供试材料
供试材料包括父本、母本、F1代、F2代群体(如图1所示)；
父本：97103，为典型的红瓤西瓜栽培品种；
母本：ZHT，为典型的橙瓤西瓜材料；
F1代：以上述97103为父本，ZHT为母本进行杂交获取的F1代；
F2代：上述F1代自交多代获得的F2代群体，共313株。
通过表型及卡方检测发现，后代(F1代和F2代)群体果肉颜色的遗传符合双基因控制模型(表1所示)，其中红瓤基因fr位于橙瓤基因FO下游，fr隐性纯合(frfr)条件下后代都表现为红瓤表型。橙瓤基因FO显性控制橙瓤表型，在FOFO或Fofo条件下果肉颜色都表现为橙色，果瓤中都大量积累β-胡萝卜素(其双亲及F1的果实中类胡萝卜素含量测定见表2，遗传示意图如图2所示。图2中，“FO”简写为“O”，“fo”简写为“o”，“FR”简写为“R”，“fr”简写为“r”。)。
表1：西瓜橙瓤基因定位群体中父本、母本、F1代、F2代群体的表型
Figure BDA0001918651860000051
Figure BDA0001918651860000061
二、西瓜果肉颜色控制基因的定位和颜色控制基因控制位点的获得
利用Joinmap4.0软件对部分F2代群体及分布在11条染色体上的分子标记进行遗传连锁分析，初步定位目标基因区间。通过遗传连锁分析将橙瓤基因定位在西瓜1号染色体上，命名为FO。在初定位区间中加密分子标记，利用全部F2代群体精细定位到西瓜1号染色体上的22M附近，其中包含Cla009122基因序列，其在西瓜基因组网站(http://www.cucurbitgenomics.org/)注释为八氢番茄红素合酶(Phytoene synthase，PSY)基因(如图3所示)。
利用西瓜基因组网站(http://www.cucurbitgenomics.org/)公布的基因组序列信息，针对上述候选FO基因中的Cla009122基因序列设计与西瓜橙瓤基因连锁的分子标记，发现在橙瓤材料中该基因的CDS区域发生了引起氨基酸变化的突变，从FO基因的起始密码子ATG开始的445bp处，在红瓤材料中为A，而橙瓤材料在该位点为G，从而导致149位的赖氨酸(K)变为谷氨酸(E)。
而西瓜红瓤的控制基因fr根据已发表文章(Bang H,Kim S,Leskovar D,King S(2007)Development of a codominant CAPS marker for allelic selection betweencanary yellow and red watermelon based on SNPin lycopene b-cyclase(LCYB)gene.Mol Breeding 20:63–72；和Zhang J,Gong G,Guo S,Ren Y,Zhang H,Xu Y(2014)Fine mapping of the flesh color controlling genes in watermelon(Citrulluslanatus).In:Harbor B,ed.Curcurbitaceae 2014Proceedings,Michigan,USA.Alexandria,VA:American Society for Horticultural Science Press,111–116)确定为Cla005011。两篇文章分别通过不同的F2群体，确定了来源于红瓤的番茄红素-β-环化酶(Lycopeneβ-cyclase，LCYB)基因是红瓤控制基因，该基因的功能为催化底物番茄红素形成下游的β-胡萝卜素。本发明通过PCR扩增及测序结果检测发现，所有红瓤西瓜中该LCYB基因序列一致；而在与黄瓤及白瓤等其他瓤色品种中该基因的序列比较时，发现红瓤第676位和第1305位碱基均为G，而其他瓤色在第676位和第1305位的碱基均不为G。研究结果认为与其他瓤色中正常的LCYB基因功能相比，红瓤LCYB基因由于这两个位点的不同导致其功能降低，从而使得瓤色变红。
综上叙述可知：
当西瓜橙瓤基因FO的第445位碱基为G，且西瓜红瓤基因fr的第676位碱基不为G、和/或第1305位碱基不为G时，待测西瓜果肉为或候选为橙瓤。
由于西瓜红瓤的控制基因为隐性基因fr，因此当西瓜为隐形纯合体frfr，且西瓜红瓤基因fr的第676位碱基为G、同时第1305位碱基为G时，待测西瓜果肉为或候选为红瓤。
实施例2
本实施例用来说明如何使用实施例1获得的用于鉴定或者辅助鉴定西瓜果肉颜色的控制位点鉴定或者辅助鉴定西瓜果肉颜色。
具体步骤如下：
1、基因组DNA提取
分别提取西瓜材料(参见表2中的西瓜材料)的基因组DNA。DNA提取方法在参照Murry等(1980)的方法(Murray M,Thompson W F.Rapid isolation of high molecularweight plant DNA[J].Nucl Acid Res,1980,8:668-673)的基础上改进而成；具体步骤如下：
ⅰ.取上述各供试材料的叶片1.5克，在液氮中研磨成粉末，再加入9ml 2％CTAB提取液(2％CTAB，1.4mM NaCl，100mM Tris-HCl pH8.0，20mM EDTA pH8.0，1％PVP-40，0.2％β-巯基乙醇)，混匀，于65℃水浴1小时，得到混合物A；
ⅱ.将上述混合物A停止水浴，加入1/3体积的5M的醋酸钾溶液，混匀后冰浴20分钟；再加入等体积的氯仿/异戊醇(24：1)抽提两次，得到上清液A；
ⅲ.向上述上清A中加入2/3体积异丙醇用来沉淀DNA；再用洗涤缓冲液(75％乙醇，10mM乙酸铵)洗涤一次，吹干后加TE缓冲液(10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH7.4)溶解，得到溶液A；
ⅳ.向上述溶液A中加入RNase A，使其终浓度达100μg/ml，再混匀37℃水浴1小时；再用等体积氯仿/异戊醇(24：1)抽提一次，得到上清液B；
ⅴ.向上述上清液B中加入1/2体积7.5M醋酸铵、2倍体积无水乙醇，得到DNA沉淀；
ⅵ.用70％乙醇洗涤上述DNA沉淀，吹干后加适量ddH2O溶解DNA，得到各自的基因组DNA；再用紫外分光光度计(Shimadzu UV-1201，日本)以OD260值测定所述的各自的基因组DNA的浓度，再用1.2％琼脂糖凝胶电泳检测各自的基因组DNA的提取质量。上述生化试剂购自北京益利精细化学品有限公司。
2、PCR扩增
分别以步骤1提取的基因组DNA为模板，采用如下引物进行PCR扩增，分别得到PCR扩增产物。
用于扩增西瓜橙瓤基因FO片段(序列5)或fo片段(序列6)的引物如下(西瓜橙瓤是由显性基因FO控制，fo是FO的等位基因)：
FO-F(上游引物序列)：5’-ATGTCTTTTGCTCCTTCGTTGG-3’(序列1)；
FO-R(下游引物序列)：5’-GCCCAAATAGCCTTTTGCCTCTC-3’(序列2)。
用于扩增西瓜红瓤基因fr片段(序列8)或FR片段(序列7)的引物如下(西瓜红瓤是由隐性基因fr控制，FR是fr的等位基因)：
FR-F(上游引物序列)：5’-ATGGATACTTTACTTAAAATC-3’(序列3)；
FR-R(下游引物序列)：5’-ATCTCTATCCTTTACCAGATTGC-3’(序列4)。
上述引物均由上海生工公司北京合成部合成。
上述PCR扩增反应的反应体系均为：
2μL含15mM MgCl2的10×Buffer；2μL浓度为2.5mM的dNTPs；1U Taq DNA聚合酶；2μL浓度为10mM PCR上、下游混合引物(上下游引物各1μL)；50ng模板DNA；ddH2O补足到20μL。
Taq DNA聚合酶及反应缓冲液购自TaKaRa公司。dNTPs购自北京全式金生物技术有限公司。
上述PCR扩增反应的反应程序均为：
阶段1：94℃预变性5min；阶段2：94℃20s，56℃20s，72℃30s，共循环34次；阶段3：72℃延伸5min；阶段4：4℃保持。其中PCR仪为购自Applied Biosystems公司的Veriti96well Thermal Cycler。
3、扩增产物的测序
将上述各个PCR扩增产物，送测序公司进行测序。
测序结果表明：
红瓤西瓜材料均具有纯合的frfr基因序列，基因fr的第676位碱基为G、且第1305位碱基为G。
橙瓤西瓜材料具有FO_FRFR序列，西瓜橙瓤基因FO的第445位碱基为G，且西瓜红瓤基因fr均存在如下情况之一：第676位碱基不为G、第1305位碱基不为G、或者第676位碱基和第1305位碱基均不为G。
一般来说杂合体(FOfoFRfr)会表现出橙红瓤的表型，但也有例外，因此本发明不考虑这种情况。
表2测定的各种西瓜瓤色及类胡萝卜素的含量及其基因型
Figure BDA0001918651860000091
由此可见，可以通过如下方法鉴定或辅助鉴定待测西瓜为红瓤品种还是橙瓤品种：
使用用于扩增西瓜橙瓤基因FO片段或fo片段的引物，和用于扩增西瓜红瓤基因fr片段或FR片段的引物对待测西瓜材料的基因组DNA进行PCR扩增，得到PCR扩增产物；然后对PCR扩增产物进行测序；
若通过序列1和序列2作为引物对扩增出来的PCR扩增产物中，第445位碱基为G，且通过序列3和序列4作为引物对扩增出来的PCR扩增产物中，第676位碱基不为G、第1305位碱基不为G、或者第676位碱基和第1305位碱基均不为G，则待测西瓜为或候选为橙瓤品种。
若通过序列3和序列4作为引物对扩增出来的PCR扩增产物中，第676位碱基为G、且第1305位碱基也为G，则待测西瓜为或候选为红瓤品种。
由技术常识可知，本发明可以通过其它的不脱离其精神实质或必要特征的实施方案来实现。因此，上述公开的实施方案，就各方面而言，都只是举例说明，并不是仅有的。所有在本发明范围内或在等同于本发明的范围内的改变均被本发明包含。
<110> 北京市农林科学院，京研益农（北京）种业科技有限公司
<120> 用于鉴定西瓜果肉颜色的控制位点、方法及应用
<160> 8
<210> 1
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<212> DNA
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<212> DNA
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<212> DNA
<213> 人工序列
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<211> 2886
<212> DNA
<213> 西瓜橙瓤基因FO
<220>
<400> 5
atgtcttttg ctccttcgtt ggttgtttct cccaacgtcg aactttcccc atcgagcttt 60
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tctttatttc atcttttctg ctttgatcat tgtccattgc tgcaaaaaca gttggtctag 720
gtgcttttgg acatatgttt gatgagtgtt ttatttttcc ttttcatgca atttaatgct 780
catgataccc ttttgcctgt gaaatcaatc atcatggatc agcctagtga actgatcaaa 840
aaattaaact aaaaggtaaa aaatttgaca taatggaagt ttctaattga gaggaatgtg 900
gacttaattt ctccttcttg cctttgttct tggcatgaag tatggtgtag gaggacagat 960
gaacttgttg atgggccaaa tgcttcacat ataacaccta ctgcattgga cagatgggag 1020
gcaaggttgg aagagctttt ccaagggagg ccttttgata tgctcgatgc agctttagcc 1080
gataccgtta ctaagtttcc agttgatatt caggtcggat atagtttgat caacactgat 1140
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ataattctgc cttagcatta ggcatagcta atcagctcac aaacattctc agagatgttg 1500
gagaagagta agttcactgc cctttattaa tgttttctta gctcaaaacc acaatgaaat 1560
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accaaaaact ccccaatttt catcacttaa aacctcaaca actcgacaag gattaatgaa 1680
aatgtaaaag ccttagagag aatgcattca aagtgatagt caaaggattt tgttctataa 1740
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ttgatgaggc tgagaaagga gttttggagc ttaataaagc tagcagatgg ccggtaattt 2160
tcccttttcc tttttttttc cttttttctt tctaatactt ttgttttttt tttctttttt 2220
ctttttaata cttttgtttt ttttttttct tccatacatg aaaaagtgaa aaattaaatc 2280
aacacatcaa agttagcata tctcaactag cataaagtgt gtactttctc gaccaaaaca 2340
tctgaagttc aaattaatga ctccatgtta aatttaaata ataataataa taaatgaata 2400
agcattttac ataataaaat tgagaaaaat actttttcta tatagaacaa aagaagtgtt 2460
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cataaatttg gatatctatg tttatggaac aattttagtt atatggtact tttactaata 2580
taaaatgaat atgattcctt ttattacttt ttttagtagt ttggatcact aacacatctc 2640
tattcagttg agtcatgttt gctttgacga ttagttgttc tccaagaaac aaggatacta 2700
ataatgtaat ttgcttattg ttttgttgtg taggtgtggg cctcattgct attatatagg 2760
caaatattgg atgagattga agcaaatgac tacaacaact tcacaaagag ggcttatgtg 2820
agcaaagcca aaaaaatatt ggctttgcct atggcttatg caaggtctct ccttggccct 2880
tcatga 2886
<210> 6
<211> 2886
<212> DNA
<213> 西瓜橙瓤基因fo
<220>
<400> 6
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cataaatttg gatatctatg tttatggaac aattttagtt atatggtact tttactaata 2580
taaaatgaat atgattcctt ttattacttt ttttagtagt ttggatcact aacacatctc 2640
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caaatattgg atgagattga agcaaatgac tacaacaact tcacaaagag ggcttatgtg 2820
agcaaagcca aaaaaatatt ggctttgcct atggcttatg caaggtctct ccttggccct 2880
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aggcttgaaa tcatggcaaa gggaactcca tctttggtaa acatgatcgg caatctggta 1500
aaggatagag attaa 1515

Claims (1)

1.一种用于鉴定或者辅助鉴定待测西瓜果肉是否为橙瓤的方法，所述方法包括检测西瓜橙瓤基因的片段和检测西瓜红瓤基因的片段，所述检测西瓜橙瓤基因的片段如序列表SEQ ID NO.5所示；所述检测西瓜红瓤基因的片段如序列表SEQ ID NO.7所示；
以待测西瓜的基因组DNA为模板，用如序列表中SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ IDNO.3和SEQ ID NO.4所示的引物进行PCR扩增，然后对扩增产物进行测序；
若待测西瓜同时具有所述检测西瓜橙瓤基因的片段和所述检测西瓜红瓤基因的片段，且所述检测西瓜红瓤基因的片段为纯合，则待测西瓜果肉为或候选为橙瓤。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112391489B (zh) * 2020-11-18 2022-06-17 湖北省农业科学院经济作物研究所 一种与西瓜瓤色相关的snp分子标记及其应用
CN114853856B (zh) * 2021-02-03 2023-07-07 北京市农林科学院 ClZISO基因在制备黄瓤西瓜中的应用以及在鉴定黄瓤西瓜中的应用
CN113151563B (zh) * 2021-05-12 2022-04-29 东北农业大学 鉴定西瓜果肉颜色的方法、引物对、试剂盒及其应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104342438A (zh) * 2014-09-28 2015-02-11 华中农业大学 ClCAC基因和ClSAND基因在西瓜果实基因表达分析中作为内参基因的应用
CN104711356A (zh) * 2015-03-17 2015-06-17 东北农业大学 一种预示和鉴定西瓜果肉颜色的分子标记MboII-37及应用
CN104711357A (zh) * 2015-03-17 2015-06-17 东北农业大学 一种预示和鉴定西瓜果肉颜色的分子标记MboII-40及应用
KR20160069382A (ko) * 2014-12-08 2016-06-16 순천대학교 산학협력단 과채류의 노란 과색 판정방법

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104342438A (zh) * 2014-09-28 2015-02-11 华中农业大学 ClCAC基因和ClSAND基因在西瓜果实基因表达分析中作为内参基因的应用
KR20160069382A (ko) * 2014-12-08 2016-06-16 순천대학교 산학협력단 과채류의 노란 과색 판정방법
CN104711356A (zh) * 2015-03-17 2015-06-17 东北农业大学 一种预示和鉴定西瓜果肉颜色的分子标记MboII-37及应用
CN104711357A (zh) * 2015-03-17 2015-06-17 东北农业大学 一种预示和鉴定西瓜果肉颜色的分子标记MboII-40及应用

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Development of a codominant CAPS marker for allelic selection between canary yellow and red watermelon based on SNP in lycopene β-cyclase (LCYB) gene;Haejeen Bang et al.;《Molecular Breeding》;20070228;第20卷(第1期);摘要，第65页右栏最后一段-第66页左栏第1段，第67页右栏最后一段-第68页左栏第2段，图2，图3 *
Genetic mapping of a major codominant QTL associated with β-carotene accumulation in watermelon;Sandra Branham et al.;《Molecular Breeding》;20171109;第37卷;文献号：146 *
Haejeen Bang et al..Development of a codominant CAPS marker for allelic selection between canary yellow and red watermelon based on SNP in lycopene β-cyclase (LCYB) gene.《Molecular Breeding》.2007,第20卷(第1期),63–72. *
Studies on carotenoids in watermelon flesh;Wen’en Zhao et al.;《Agricultural Sciences》;20131231;第4卷(第7期);第13-20页 *
王楠 等.红色和橙黄色果肉西瓜番茄红素和β–胡萝卜素代谢基因的表达分析.《园艺学报》.2016,第43卷(第5期),918–926. *
红色和橙黄色果肉西瓜番茄红素和β–胡萝卜素代谢基因的表达分析;王楠 等;《园艺学报》;20160531;第43卷(第5期);摘要，第923页最后一段-第924页第1段 *

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