CN111346580B - 高温高压下结合超声提取聚羟基脂肪酸酯的方法和系统 - Google Patents
高温高压下结合超声提取聚羟基脂肪酸酯的方法和系统 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111346580B CN111346580B CN202010359273.0A CN202010359273A CN111346580B CN 111346580 B CN111346580 B CN 111346580B CN 202010359273 A CN202010359273 A CN 202010359273A CN 111346580 B CN111346580 B CN 111346580B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- polyhydroxyalkanoate
- solid
- liquid separation
- fermentation
- cells
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Classifications
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J19/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
- B01J19/08—Processes employing the direct application of electric or wave energy, or particle radiation; Apparatus therefor
- B01J19/10—Processes employing the direct application of electric or wave energy, or particle radiation; Apparatus therefor employing sonic or ultrasonic vibrations
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D36/00—Filter circuits or combinations of filters with other separating devices
- B01D36/04—Combinations of filters with settling tanks
- B01D36/045—Combination of filters with centrifugal separation devices
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
- C08G63/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming a carboxylic ester link in the main chain of the macromolecule
- C08G63/02—Polyesters derived from hydroxycarboxylic acids or from polycarboxylic acids and polyhydroxy compounds
- C08G63/06—Polyesters derived from hydroxycarboxylic acids or from polycarboxylic acids and polyhydroxy compounds derived from hydroxycarboxylic acids
- C08G63/08—Lactones or lactides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
- C08G63/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming a carboxylic ester link in the main chain of the macromolecule
- C08G63/88—Post-polymerisation treatment
- C08G63/90—Purification; Drying
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明涉及PHA提取分离技术领域,公开了一种高温高压下结合超声提取聚羟基脂肪酸酯的方法和系统,该方法包括(1)将聚羟基脂肪酸酯的发酵液进行固液分离,得到含聚羟基脂肪酸酯的菌体细胞;(2)将所述菌体细胞进行重悬,得到菌悬液,然后在超声以及加热和加压的条件下破碎所述菌体细胞,得到含聚羟基脂肪酸酯的浆液;(3)将所述浆液进行第二板框过滤,得到聚羟基脂肪酸酯;其中,所述第二板框过滤的滤布的表面预涂覆有聚羟基脂肪酸酯层;采用本发明的方法能够有效提高PHA的收率和纯度,得到的PHA的聚合度较高,并降低了生产成本。
Description
技术领域
本发明涉及聚羟基脂肪酸酯的提取分离领域,具体涉及一种高温高压下结合超声提取聚羟基脂肪酸酯的方法和系统。
背景技术
聚羟基脂肪酸酯(PHA)是一类完全由微生物合成的高分子聚酯的统称。PHA具有生物可降解性和生物相容性,因而被认为是环境友好型材料,有助于解决日益严重的环境污染问题。
虽然PHA的使用能够有效地避免石化塑料对环境造成的危害,但目前,在提取分离PHA方面存在一些问题。目前提取分离PHA的技术主要集中在有机溶剂提取法和酸碱或表面活性剂处理处理提取这两种方法。有机溶剂提取法中使用的溶剂的成本较高且对人的身体健康和环境造成较严重的危害;用酸碱或表面活性剂提取PHA容易对PHA造成一定程度的降解,导致得到的PHA的聚合度下降且变差。而且采用上述两种方向提取得到的PHA的纯度和回收率较低。而且采用上述两种方法产生的废液还需要额外增加污水处理工序进行处理,大大提高了生产的成本。
发明内容
本发明的目的是为了克服现有技术存在的上述问题,提供一种高温高压下结合超声提取聚羟基脂肪酸酯的方法和系统,该方法具有提取得到的PHA的聚合度较高,且得到的PHA的纯度和收率较高以及降低PHA生产成本的优势。
为了实现上述目的,本发明一方面提供一种提取聚羟基脂肪酸酯的方法,其中,该方法包括以下步骤:
(1)将聚羟基脂肪酸酯的发酵液进行固液分离,得到含聚羟基脂肪酸酯的菌体细胞;
(2)用将所述菌体细胞进行重悬,得到菌悬液,然后在超声以及加热和加压的条件下破碎所述菌体细胞,得到含聚羟基脂肪酸酯的浆液;
(3)将所述浆液进行板框过滤,得到聚羟基脂肪酸酯;
其中,所述第二板框过滤的滤布的表面预涂覆有聚羟基脂肪酸酯层。
本发明第二方面提供一种提取聚羟基脂肪酸酯的系统,其中,该系统包括第一固液分离单元,细胞破碎单元和第二固液分离单元;
所述第一固液分离单元用于将含聚羟基脂肪酸酯的发酵液进行固液分离,得到含聚羟基脂肪酸酯的菌体细胞;
所述细胞破碎单元用于将第一固液分离单元得到的菌体细胞在加热和加压的条件下进行超声破碎,得到含聚羟基脂肪酸酯的浆液;所述细胞破碎单元中设置有超声装置;
所述第二固液分离单元用于将细胞破碎单元中得到的含聚羟基脂肪酸酯的浆液进行第二板框过滤,得到所述的聚羟基脂肪酸酯;所述第二固液分离单元中设置有板框过滤设备Ⅱ;所述第二板框过滤设备Ⅱ的滤布的表面预涂覆有聚羟基脂肪酸酯层。
通过上述技术方案,能够有效提高所得聚羟基脂肪酸酯的收率和纯度,并且降低了成本;并且在高温高压条件下,并以阶段性控制超声的功率进行辅助提取,可以显著的缓解PHA的降解情况,进而使得得到的PHA具有较高的聚合度;尤其在通过阶段性控制超声的功率的情况下,具有更显著的优势。
附图说明
图1是本发明中优选的一种提取聚羟基脂肪酸酯的系统的示意图。
附图标记说明
1、第一固液分离单元 2、细胞破碎单元 3、第二固液分离单元
4、PHA发酵单元 11第一固液分离区Ⅰ 12、第一固液分离区Ⅱ
13、第一固液分离区Ⅲ 31、固液分离区 111、碟片式离心设备Ⅰ
121、带式真空过滤设备 131、板框过滤设备Ⅰ 311、碟片式离心设备Ⅱ
321、板框过滤设备Ⅱ
具体实施方式
在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值,这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说,各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间,以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围,这些数值范围应被视为在本文中具体公开。
第一方面,本发明提供了一种提取聚羟基脂肪酸酯(PHA)的方法,其中,该方法包括以下步骤:
(1)将聚羟基脂肪酸酯的发酵液进行固液分离,得到含聚羟基脂肪酸酯的菌体细胞;
(2)将所述菌体细胞进行重悬,得到菌悬液,然后在超声以及加热和加压的条件下破碎所述菌体细胞,得到含聚羟基脂肪酸酯的浆液;
(3)将所述浆液进行板框过滤,得到聚羟基脂肪酸酯;
其中,所述第二板框过滤的滤布的表面预涂覆有聚羟基脂肪酸酯层。
本发明的发明人经过研究发现,超声波的频率范围为2×104-109Hz,作为纵波,在介质中通过疏密振动传播,当超声波在液体中传播时,液体质点的振动是机械波传播的必然需求,当介质质点大幅度高频率振动的需求与介质流动性的局限性之间的矛盾不可调和的时候,液体中就产生了空腔,即空化效应;空腔的猝灭和坍塌,导致空腔的表面能释放,在局部微观环境中,产生了巨大的能量,伴随产生了剧烈振动。空化效应和振动作用不仅可以破碎细胞,促进PHA与细胞内其它大分子的剥离,从而可以在弱碱的条件下,实现进一步提纯PHA,使得得到的PHA具有较高的聚合度,且得到的PHA的纯度和收率较高以及降低了PHA生产成本,避免了使用强碱及强酸或SDS等带来的不利影响。
本发明的发明人经过进一步研究发现,在高温高压条件下进行破碎菌体细胞的同时配合使用超声,可显著的降低在提取过程中PHA的降解的程度,使得提取得到的PHA具有更高的聚合度,同时可显著提高提取得到的PHA的纯度和收率;发明人经过更进一步的研究发现,当阶段性控制超声功率时,可以更加显著地降低在提取过程中PHA的降解的程度,使得提取得到的PHA具有更高的聚合度,同时可更加显著地提高提取得到的PHA的纯度和收率。另所得到的液流中含有非PHA细胞溶出物,可作为一下批菌体细胞培养基的营养物质,加以重复利用,同时降低发酵成本和废水处理成本。
本发明中,聚羟基脂肪酸酯的聚合度即平均聚合度,指的是聚合物分子中羟基烷酸单体的数量,通过其重均分子量进行表征。可以理解的是,所述聚羟基脂肪酸酯的聚合度与其重均分子量成正相关的关系。
本发明中,所述的压力均为表压
应当理解的是,本发明中,所述菌体细胞指的是从发酵液中分离出的菌体沉淀,主要成分为菌体细胞,其他杂质成分(如,少量的菌体细胞碎片、菌体细胞溶出物、菌体代谢产物等)的含量和水含量由固液分离的次数和条件所决定。随着固液分离次数的增加,所得菌体沉淀中的其他杂质成分会逐渐减少甚至基本全部除去。
本发明中,优选地,所述滤布表面涂覆的聚羟基脂肪酸酯的粒径大于所述浆液中的聚羟基脂肪酸酯的粒径。需要说明的是,“所述滤布表面涂覆的聚羟基脂肪酸酯的粒径大于所述浆液中的聚羟基脂肪酸酯的粒径”并非是指所述滤布表面涂覆的聚羟基脂肪酸酯的每一个聚羟基脂肪酸酯的颗粒的粒径均大于所述浆液中的聚羟基脂肪酸酯的每一个聚羟基脂肪酸酯颗粒的粒径,而是指所述滤布表面涂覆的聚羟基脂肪酸酯的平均粒径大于所述浆液中的聚羟基脂肪酸酯的平均粒径。所述浆液中的聚羟基脂肪酸酯的粒径通常为0.1-10μm。
更优选地,所述滤布表面涂覆的聚羟基脂肪酸酯的粒径为1-200μm。其中,可以通过商购获得预涂覆在所述滤布上的聚羟基脂肪酸酯。
本发明中,优选地,所述滤布表面涂覆的聚羟基脂肪酸酯的厚度为1-20mm,优选为5-10mm。
优选地,预涂覆有聚羟基脂肪酸酯层的滤布的孔径为1-25μm,进一步优选为13-23μm。
本发明中,在所述滤布表面涂覆聚羟基脂肪酸酯的方法包括:先将聚羟基脂肪酸酯与水混合配制成悬浮液,然后将所得悬浮液涂覆在滤布表面,再然后将涂覆悬浮液的滤布进行干燥,得到涂覆聚羟基脂肪酸酯的滤布。
本发明中,优选地,所述固液分离的条件使得所得菌体细胞的水含量为70-90重量%,更优选为75-85重量%。
本发明中,优选地,将所述聚羟基脂肪酸酯的发酵液进行固液分离的方法包括:
(a)将聚羟基脂肪酸酯的发酵液进行第一固液分离,得到含聚羟基脂肪酸酯的第一菌体细胞和第一发酵残液;
(b)将所得的第一菌体细胞进行第二固液分离,得到含聚羟基脂肪酸酯的第二菌体细胞和第二发酵残液。
能够理解的是,当所述固液分离仅进行步骤(a)时,则所述菌体细胞指的是所述的第一菌体细胞;当所述固液分离依次进行步骤(a)和步骤(b)时,则所述菌体细胞指的是所述的第二菌体细胞。
优选地,在进行所述第二固液分离之前,先将所得第一菌体细胞进行洗涤;更优选地,相对于1体积份的第一菌体细胞,所述洗涤使用的洗涤液的用量为1-2体积份;进一步优选地,所述洗涤的次数为1-3次。本发明中,可以使用本领域常规使用的洗涤液进行洗涤,例如水、生理盐水或缓冲液等,优选为使用水进行洗涤,更优选为蒸馏水。
优选地,所述第一固液分离的条件使得所得的第一菌体细胞的水含量为70-90重量%。
优选地,所述第二固液分离的条件使得所得的第二菌体细胞的水含量为75-85重量%。需要说明的是,在进行第二固液分离之前包括洗涤的情况下,所述第二菌体细胞的水含量可以大于第一菌体细胞的水含量。
本发明中,优选地,所述第一固液分离为第一碟片式离心分离。
优选地,所述进行第二固液分离为真空过滤分离。
优选地,所述过滤在带式真空过滤机中完成。
本发明中,为了提高聚羟基脂肪酸酯的收率和纯度,优选地,所述方法还包括:将所得的第一发酵残液和所得的第二发酵残液进行第三固液分离,得到含聚羟基脂肪酸酯的第三菌体细胞和第三发酵残液,然后将所得的第三菌体细胞与所得的第二菌体细胞混合作为所述含聚羟基脂肪酸酯的菌体细胞。
优选地,所述第三固液分离为第一板框过滤分离。
更优选地,所述第一板框过滤分离的压力为0.1-0.6MPa,进一步优选为0.2-0.5MPa。
更优选地,所述第一板框过滤分离使用的滤布的孔径为500-1000目。
本发明中,在将所述的菌体细胞进行破碎之前,优选地,该方法还包括对所述菌体细胞进行洗涤的步骤;更优选地,所述洗涤的次数为1-5次。本发明中,可以使用本领域常规使用的洗涤液进行洗涤,例如水、生理盐水或缓冲液(例如,PBS缓冲液)等。
本发明中,对重悬所述菌体细胞使用的溶液没有特别的限制,比如,可以为水,优选地,重悬所述菌体细胞使用的水的用量与所述菌体细胞的体积比为0.5-5:1(例如,0.5:1、0.8:1、0.9:1、1:1、1.5:1、2:1、2.5:1、3:1、3.5:1、4:1、4.5:1、5:1,或者上述数值之间的任意值),优选为0.8-2:1。
本发明中,对破碎所述菌体细胞的压力没有特别的限制,可以在较宽的范围内进行选择,优选地,破碎的压力为0.1-0.3MPa(例如,可以为0.1MPa、0.15MPa、0.2MPa、0.25MPa、0.3MPa,或者上述数值之间的任意值),优选为0.15-0.25MPa。
本发明中,对破碎所述菌体细胞的温度没有特别的限制,可以在较宽的范围内进行选择,优选地,破碎的温度为90-135℃(例如,可以为90℃、95℃、100℃、105℃、110℃、115℃、120℃、125℃、130℃、135℃,或者上述数值之间的任意值),优选为110-125℃。
本发明中,对破碎所述菌体细胞的温度没有特别的限制,可以在较宽的范围内进行选择,优选地,破碎的时间为10-60min(例如,可以为10min、20min、30min、40min、50min、60min,或者上述数值之间的任意值),优选为20-40min。
本发明中,对破碎所述菌体细胞的超声功率没有特别的限制,可以在较宽的范围内进行选择,优选地,超声的功率为200-2000W/m3菌悬液(例如,可以为200W/m3菌悬液、400W/m3菌悬液、600W/m3菌悬液、800W/m3菌悬液、1000W/m3菌悬液、1200W/m3菌悬液、1400W/m3菌悬液、1600W/m3菌悬液、1800W/m3菌悬液、2000W/m3菌悬液,或者上述数值之间的任意值),进一步优选为300-1000W/m3菌悬液。
进一步优选的,所述超声的控制方式包括:先进行10-20min的第一超声,然后再进行第二超声,其中所述第二超声的功率比所述第一超声的功率高100-200W/m3菌悬液。
进一步优选地,所述第一超声的功率为300-800W/m3菌悬液。
本发明中,可以理解的是,从进行高温高压蒸煮破碎计时开始即开启超声进行第一超声。
本发明中,更优选地,在进行破碎的同时进行搅拌,搅拌转速为50-450rpm(例如,可以为50rpm、55rpm、60rpm、80rpm、100rpm、120rpm、150rpm、180rpm、200rpm、250rpm、300rpm、350rpm、400rpm、450rpm,或者上述数值之间的任意值),优选为200-400rpm。
本发明中,优选地,所述第二板框过滤的条件包括:温度为0-40℃,压力为0.1-0.6MPa,时间为0.5-5小时;更优选地,温度为10-30℃,压力为0.15-0.55MPa,时间为1-4小时;更优选地,温度为15-25℃,压力为0.2-0.5MPa,时间为2-3h。
本发明中,在将所述浆液进行第二板框过滤之前,优选地,该方法还包括对所述浆液进行除杂处理。
优选的,所述除杂的方法包括:将所述浆液进行离心分离处理,所述离心分离的条件使得杂质在上层,聚羟基脂肪酸酯在下层。如此,上层中不仅包含了大部分的大分子等不溶性杂质,还包括了所有的可溶性杂质,而下层主要为PHA不溶性物质;更优选地,所述离心分离的条件包括:转速为3000-10000rpm;进一步优选地,使用碟片离心机将所述浆液进行离心分离处理。
优选的,所述除杂的方法还包括将下层中的聚羟基脂肪酸酯进行洗涤;更优选地,所述洗涤的方式为水洗;进一步优选地,所述洗涤的次数为3-5次。
本发明中,根据实际需要,还可以将所得聚羟基脂肪酸酯进行干燥,优选为喷雾干燥。
本发明中,步骤(3)中将所述浆液进行第二板框过滤,还得到了液流。所得的液流中含有细胞溶出物等营养物质,因此,可以用于聚羟基脂肪酸酯发酵。
根据本发明,所述聚羟基脂肪酸酯的发酵液可以为本领域常规的可用于制备聚羟基脂肪酸酯的微生物的发酵液,优选的,所述微生物为嗜盐菌,例如,可以为盐单胞菌属中的一种,根据本发明一种优选的实施方式,所述PHA发酵菌种为盐单胞菌(Halomonas sp.);更优选的,所述PHA发酵菌种为盐单胞菌(Halomonas sp.)TD01,其保藏编号为CGMCCNO.4353(CN201010578858.8)。
本发明中,对所述聚羟基脂肪酸酯发酵使用的发酵培养基没有特别的限制,可以为本领域常规使用的发酵培养基,此处不再进行赘述。
本发明中,对所述聚羟基脂肪酸酯发酵的条件没有特别的限制,可以为本领域常规使用的发酵条件。此处不再进行赘述。
第二方面,本发明提供了一种提取聚羟基脂肪酸酯的系统,其中,该系统包括第一固液分离单元1,细胞破碎单元2和第二固液分离单元3;
所述第一固液分离单元1用于将含聚羟基脂肪酸酯的发酵液进行固液分离,得到含聚羟基脂肪酸酯的菌体细胞;
所述细胞破碎单元2用于将第一固液分离单元1得到的菌体细胞在加热和加压的条件下进行超声破碎,得到含聚羟基脂肪酸酯的浆液;所述细胞破碎单元2中设置有超声装置;
所述第二固液分离单元3用于将细胞破碎单元2中得到的含聚羟基脂肪酸酯的浆液进行第二板框过滤,得到所述的聚羟基脂肪酸酯;所述第二固液分离单元3中设置有板框过滤设备Ⅱ321;所述第二板框过滤设备Ⅱ321的滤布的表面预涂覆有聚羟基脂肪酸酯层。
优选地,所述聚羟基脂肪酸酯层的厚度为1-20mm,更优选为5-10mm。
优选地,预涂覆有聚羟基脂肪酸酯层的滤布的孔径为1-25μm,更优选为13-23μm。
优选地,所述第一固液分离单元1包括依次连通的第一固液分离区Ⅰ11和第一固液分离区Ⅱ12;
其中,所述第一固液分离区Ⅰ11用于将所述聚羟基脂肪酸酯的发酵液进行第一次第一固液分离,得到含聚羟基脂肪酸酯的第一菌体细胞和第一发酵残液;所述第一固液分离区Ⅱ12用于将在第一固液分离区Ⅰ11得到的第一菌体细胞进行第二次第二固液分离,得到含聚羟基脂肪酸酯的第二菌体细胞和第二发酵残液,并将所得的第二菌体细胞输送进入细胞破碎单元2。
优选地,所述第一固液分离区Ⅰ11中设置有碟片离心设备Ⅰ111。
优选地,所述第一固液分离区Ⅱ12中设置有带式真空过滤设备121。
优选地,所述第一固液分离单元1中还设置有第一固液分离区Ⅲ区13,所述第一固液分离区Ⅲ13用于将在第一固液分离区Ⅰ11得到的第一发酵残液和在第一固液分离区Ⅱ12得到的第二发酵残液并进行第三次第一固液分离,得到含聚羟基脂肪酸酯的第三菌体细胞和第三发酵残液,并将所得的第三菌体细胞输送进入细胞破碎单元2。
优选地,所述第一固液分离区Ⅲ13中设置有板框过滤设备Ⅰ131。
优选地,所述细胞破碎单元2中设置有加压装置。
优选地,所述细胞破碎单元2中设置有加热装置。
优选地,所述细胞破碎单元2中设置有搅拌装置。
优选地,所述第二固液分离单元3中板框过滤设备Ⅱ321的上游设置有固液分离区31;
所述固液分离区31用于将在细胞破碎单元2中得到的含聚羟基脂肪酸酯的浆液进行固液分离,得到含聚羟基脂肪酸酯的物料;
所述板框过滤设备Ⅱ321用于将在细胞破碎单元2中得到的含聚羟基脂肪酸酯的浆液或者固液分离区31中得到的含聚羟基脂肪酸酯的物料进行板框过滤分离。
优选地,所述固液分离区31中设置有碟片离心设备Ⅱ311。
优选地,所述系统还包括聚羟基脂肪酸酯发酵单元4,所述第二固液分离单元3与聚羟基脂肪酸酯发酵单元4之间设置有回流管,使第二固液分离单元3得到的液流回流至聚羟基脂肪酸酯发酵单元4。
以下将通过实施例对本发明进行详细描述。以下实施例中,
聚羟基脂肪酸酯聚合度即平均聚合度,指的是聚合物分子中羟基烷酸单体的数量,通过其重均分子量进行表征;
碟片式离心机购自南京华盛分离机械技术有限公司,型号DR203;
带式真空过滤机购自湖州核工惠能环保过滤科技有限公司,型号DY-500;
板框过滤机购自海宁市云飞过滤设备有限公司,型号YF-100-1;
聚羟基脂肪酸酯购自蓝晶生物科技有限公司,粒径1-200μm;
超声循环提取机GCXZ-2B购自北京弘祥隆生物技术股份有限公司;
PHA的收率和纯度的检测方法参考文献(Engineering self-flocculatingHalomonas campaniensis for wastewaterless open and continuous fermentation)
所述微量元素I和II,参照CN102120973B;
补料培养基:葡萄糖400-800g/L,玉米浆粉0-80g/L,根据生长曲线,配置不同的碳氮比补料培养基,过程控制残糖浓度为5-20g/L;
制备例1
将盐单胞菌(TD01,其保藏编号为CGMCC NO.4353(CN201010578858.8))接种于种子培养基(5g/L的酵母粉、10g/L的蛋白胨以及60g/L的氯化钠)中在37℃和200rpm的条件下进行一级活化培养,培养至OD600达到4左右,得到一级种子液;
将所述一级种子液以10体积%的接种量接种于种子培养基中,在37℃和200rpm的条件下进行二级活化培养,培养至OD600达到4左右,得到二级种子液,得到发酵种子液。
然后将10体积%的接种量将二级种子液接入到初始发酵培养基(氯化钠50g/L,葡萄糖50g/L,玉米浆粉15g/L,尿素2g/L,硫酸镁0.2g/L,磷酸二氢钾5g/L,微量元素母液I10mL/L,微量元素母液II 3mL/L。所述微量元素母液I和II,参照引用专利CN201010578858.8)中,发酵体系不灭菌直接发酵。控制温度37℃,转速控制600-1000rpm,通风量0.5-2.0vvm,初始溶氧控制在30%以上;发酵过程中通过补料控制糖浓度在5-20g/L之间,用NaOH控制发酵pH为8-9之间,发酵55小时。
实施例1
(1)将制备例1制备的聚羟基脂肪酸酯发酵液通过碟片式离心机进行离心分离,使得发酵液分成富含菌体细胞的底流(水含量80%)(第一菌体细胞)和发酵残液顶流(第一发酵残液),所述发酵残液顶流进入发酵残液暂存罐。
(2)将步骤(1)得到的富含目标菌体细胞的底流用等体积的水洗涤2次,然后泵入带式真空过滤机进行滤干,滤干后的菌体(含水量80%)(第二菌体细胞)进入提取罐,滤液(第二发酵残液)进入发酵残液暂存罐。
(3)将所述发酵残液暂存罐中的发酵残液和滤液的混合液泵入板框过滤机进行过滤,过滤压力为0.35MPa,滤布孔径为800目,得到第三菌体细胞和第三发酵残液,将第三菌体细胞送入提取罐与步骤(2)中的菌体(第二菌体细胞)混合,第三发酵残液进入吸附分离罐进行吸附处理。
(4)将提取罐中的菌体细胞进行水洗2次,离心分离,去除其中的杂质。
(5)开启提取罐的搅拌装置,转速为300rpm,向提取罐中加入1倍体积于待破碎的菌体细胞的水,得到菌悬液(菌悬液的OD600值为100);然后进行加热加压破碎,从破碎菌体细胞计时开始控制超声功率为500W/m3菌悬液进行超声至第15min,然后将超声的功率提高150W/m3菌悬液进行超声至破碎菌体细胞计时结束,得到含聚羟基脂肪酸酯的浆液,加热加压破碎的条件为:菌悬液温度为120℃、压力为0.2MPa、蒸煮时间为30min。
(6)将所得浆液泵入碟片式离心分离机进行固液分离,转速为7000rpm,分离条件使得浆液分成含氨和菌体碎片等杂质的顶流(液流)和含聚羟基脂肪酸酯的沉淀,然后将所得沉淀返回到提取罐中水洗2次,所得的含氨和菌体碎片等杂质的顶流用于下一批发酵培养基的配料。
(7)将步骤(6)中水洗后的沉淀送入板框过滤机进行固液分离,得到聚羟基脂肪酸酯和滤液,过滤的条件为:温度为20℃,压力为0.35MPa,时间为2.5h,其中,滤布的孔径为19μm,滤布涂覆有聚羟基脂肪酸酯层(厚度为7mm);所得滤液作为发酵培养基的配料。
(8)将所得聚羟基脂肪酸酯进行喷雾干燥,得到聚羟基脂肪酸酯干粉。
对所得聚羟基脂肪酸酯的重均分子量、收率和纯度进行测定,结果如表1所示。
实施例2
(1)将制备例1制备的聚羟基脂肪酸酯发酵液通过碟片式离心机进行离心分离,使得发酵液分成富含菌体细胞的底流(水含量90重量%)(第一菌体细胞)和发酵残液顶流(第一发酵残液),所述发酵残液顶流进入发酵残液暂存罐。
(2)将步骤(1)得到的富含目标菌体细胞的底流用等体积的水洗涤2次,然后泵入带式真空过滤机进行滤干,滤干后的菌体(含水量75重量%)(第二菌体细胞)进入提取罐,滤液(第二发酵残液)进入发酵残液暂存罐。
(3)将所述发酵残液暂存罐中的发酵残液和滤液的混合液泵入板框过滤机进行过滤,过滤的压力为0.2MPa,滤布孔径为500目,得到第三菌体细胞和第三发酵残液,将第三菌体细胞送入提取罐与步骤(2)中的菌体(第二菌体细胞)混合,第三发酵残液进入吸附分离罐进行吸附处理。
(4)将提取罐中的菌体细胞进行水洗2次,离心分离,去除其中的杂质。
(5)开启提取罐的搅拌装置,转速为300rpm,向提取罐中加入0.8倍体积于待破碎的菌体细胞的水,得到菌悬液(菌悬液的OD600值为150);然后加热加压进行破碎,从破碎菌体细胞计时开始控制超声功率为300W/m3菌悬液进行超声至第20min,然后将超声的功率提高100W/m3进行超声至破碎菌体细胞计时结束,得到含聚羟基脂肪酸酯的浆液,蒸煮破碎的条件为:菌悬液温度为110℃、压力为0.15MPa、蒸煮时间为40min。
(6)将所得浆液泵入碟片式离心分离机进行固液分离,转速为3000rpm,分离条件使得浆液分成含氨和菌体碎片等杂质的顶流(液流)和含聚羟基脂肪酸酯的沉淀,然后将所得沉淀返回到提取罐中水洗2次,所得的含氨和菌体碎片等杂质的顶流用于下一批发酵培养基的配料。
(7)将步骤(6)中水洗后的沉淀送入板框过滤机进行固液分离,得到聚羟基脂肪酸酯和滤液,过滤的条件为:温度为25℃,压力为0.5MPa,时间为3h,其中,滤布的孔径为23μm,滤布涂覆有聚羟基脂肪酸酯层(厚度为5mm);所得滤液作为发酵培养基的配料。
(8)将所得聚羟基脂肪酸酯进行喷雾干燥,得到聚羟基脂肪酸酯干粉。
对所得聚羟基脂肪酸酯的重均分子量、收率和纯度进行测定,结果如表1所示。
实施例3
(1)将制备例1制备的聚羟基脂肪酸酯发酵液通过碟片式离心机进行离心分离,使得发酵液分成富含菌体细胞的底流(水含量70重量%)(第一菌体细胞)和发酵残液顶流(第一发酵残液),所述发酵残液顶流进入发酵残液暂存罐。
(2)将步骤(1)得到的富含目标菌体细胞的底流用等体积的水洗涤2次,然后泵入带式真空过滤机进行滤干,滤干后的菌体(含水量85重量%)(第二菌体细胞)进入提取罐,滤液(第二发酵残液)进入发酵残液暂存罐。
(3)将所述发酵残液暂存罐中的发酵残液和滤液的混合液泵入板框过滤机进行过滤,过滤的压力为0.5MPa,滤布孔径为1000目,得到第三菌体细胞和第三发酵残液,将第三菌体细胞送入提取罐与步骤(2)中的菌体(第二菌体细胞)混合,第三发酵残液进入吸附分离罐进行吸附处理。
(4)将提取罐中的菌体细胞进行水洗2次,离心分离,去除其中的杂质。
(5)开启提取罐的搅拌装置,转速为400rpm,向提取罐中加入2倍体积于待破碎的菌体细胞的水,得到菌悬液(菌悬液的OD600值为120);然后加热加压进行破碎,从破碎菌体细胞计时开始控制超声功率为800W/m3菌悬液进行超声至第10min,然后将超声的功率提高200W/m3进行超声至破碎菌体细胞计时结束,得到含聚羟基脂肪酸酯的浆液,蒸煮破碎的条件为:菌悬液温度为125℃、压力为0.25MPa、蒸煮时间为20min。
(6)将所得浆液泵入碟片式离心分离机进行固液分离,转速为10000rpm,分离条件使得浆液分成含氨和菌体碎片等杂质的顶流(液流)和含聚羟基脂肪酸酯的沉淀,然后将所得沉淀返回到提取罐中水洗2次,所得的含氨和菌体碎片等杂质的顶流用于下一批发酵培养基的配料。
(7)将步骤(6)中水洗后的沉淀送入板框过滤机进行固液分离,得到聚羟基脂肪酸酯和滤液,过滤的条件为:温度为15℃,压力为0.2MPa,时间为2h,其中,滤布的孔径为13μm,滤布涂覆有聚羟基脂肪酸酯层(厚度为10mm);所得滤液作为发酵培养基的配料。
(8)将所得聚羟基脂肪酸酯进行喷雾干燥,得到聚羟基脂肪酸酯干粉。
对所得聚羟基脂肪酸酯的重均分子量、收率和纯度进行测定,结果如表1所示。
实施例4
按照实施例1的方法进行聚羟基脂肪酸酯发酵液的处理,不同的是,步骤(1)中,使用板框过滤机进行过滤,步骤(2)中使用碟片式离心机进行离心分离,步骤(3)中使用带式真空过滤机进行过滤。
对所得聚羟基脂肪酸酯的重均分子量、收率和纯度进行测定,结果如表1所示。
实施例5
按照实施例1的方法提取聚羟基脂肪酸酯,不同的是,步骤(5)中,向提取罐中加入5倍体积于待破碎的菌体细胞的水;蒸煮破碎的条件为:菌悬液温度为135℃、压力为0.3MPa、蒸煮时间为60min。
对所得聚羟基脂肪酸酯的重均分子量、收率和纯度进行测定,结果如表1所示。
实施例6
按照实施例1的方法提取聚羟基脂肪酸酯,不同的是,步骤(7)中板框过滤机的滤膜预涂覆的聚羟基脂肪酸酯层的厚度为20mm。
对所得聚羟基脂肪酸酯的重均分子量、收率和纯度进行测定,结果如表1所示。
实施例7
按照实施例1的方法提取聚羟基脂肪酸酯,不同的是,步骤(5)中从破碎菌体细胞计时开始至破碎结束,超声的功率为500W/m3菌悬液。
对所得聚羟基脂肪酸酯的重均分子量、收率和纯度进行测定,结果如表1所示。
实施例8
(1)将制备例1制备的聚羟基脂肪酸酯发酵液通过碟片式离心机进行离心分离,使得发酵液分成富含菌体细胞的底流(水含量80重量%)(第一菌体细胞)和发酵残液顶流(第一发酵残液),所述发酵残液顶流进入发酵残液暂存罐。
(2)将步骤(1)得到的富含目标菌体细胞的底流用等体积的水洗涤2次,然后泵入带式真空过滤机进行滤干,滤干后的菌体(含水量70重量%)(第二菌体细胞)进入提取罐,滤液(第二发酵残液)进入发酵残液暂存罐。
(3)将所述发酵残液暂存罐中的发酵残液和滤液的混合液泵入板框过滤机进行过滤,过滤的压力为0.3MPa,滤布孔径为1000目,得到第三菌体细胞和第三发酵残液,将第三菌体细胞送入提取罐与步骤(2)中的菌体(第二菌体细胞)混合,第三发酵残液进入吸附分离罐进行吸附处理。
(4)将提取罐中的菌体细胞进行水洗2次,离心分离,取出其中的杂质。
(5)开启提取罐的搅拌装置,转速为200rpm,向提取罐中加入1倍体积于待破碎的菌体细胞的水,得到菌悬液(菌悬液的OD600值200);然后进行蒸煮破碎,得到含聚羟基脂肪酸酯的浆液,蒸煮破碎的条件为:菌悬液温度为120℃、压力为0.2MPa、蒸煮时间为30min。
(6)将所得浆液泵入碟片式离心分离机进行固液分离,转速为7000rpm,分离条件使得浆液分成含氨和菌体碎片等杂质的顶流(液流)和含聚羟基脂肪酸酯的沉淀,然后将所得沉淀返回到提取罐中水洗2次,所得的含氨和菌体碎片等杂质的顶流用于下一批发酵培养基的配料。
(7)将步骤(6)中水洗后的沉淀送入板框过滤机进行固液分离,得到聚羟基脂肪酸酯和滤液,过滤的条件为:温度为20℃,压力为0.2MPa,时间为2.5h,其中,滤布的孔径为19μm,滤布涂覆有聚羟基脂肪酸酯层(厚度为7mm);所得滤液作为发酵培养基的配料。
(8)将所得聚羟基脂肪酸酯进行喷雾干燥,得到聚羟基脂肪酸酯干粉。
对所得聚羟基脂肪酸酯的重均分子量、收率和纯度进行测定,结果如表1所示。
实施例9
(1)将制备例1制备的聚羟基脂肪酸酯发酵液通过碟片式离心机进行离心分离,使得发酵液分成富含菌体细胞的底流(水含量75重量%)(第一菌体细胞)和发酵残液顶流(第一发酵残液),所述发酵残液顶流进入发酵残液暂存罐。
(2)将步骤(1)得到的富含菌体细胞的底流用等体积的水洗涤2次,然后泵入带式真空过滤机进行滤干,滤干后的菌体(含水量70%)(第二菌体细胞)进入提取罐待下一步处理,滤液(第二发酵残液)进入发酵残液暂存罐。
(3)将所述发酵残液暂存罐中的发酵残液和滤液的混合液泵入板框过滤机进行过滤,过滤的压力(表压)为0.3MPa,滤布孔径为800目,得到含菌体细胞的第三菌体细胞和第三发酵残液,将第三菌体细胞送入提取罐与步骤(2)中的菌体(第二菌体细胞)混合,第三发酵残液进入吸附分离罐进行吸附处理。
(4)开启提取罐的搅拌装置,转速为300rpm,向提取罐中加入0.5倍体积于提取罐中的菌体细胞的水,得到菌悬液(菌悬液的OD600值300);然后进行蒸煮破碎,得到含聚羟基脂肪酸酯的浆液,蒸煮破碎的条件为:菌悬液温度为125℃、压力为0.25MPa、蒸煮时间为20min。
(5)将步骤(4)中所得浆液送入板框过滤机进行固液分离,得到聚羟基脂肪酸酯和滤液,过滤的条件为:温度为20℃,压力为0.35MPa,时间为2.5h,其中,滤布的孔径为19μm,所得滤液用于发酵培养基的配料。
对所得聚羟基脂肪酸酯的重均分子量、收率和纯度进行测定,结果如表1所示。
实施例10
(1)将制备例1制备的聚羟基脂肪酸酯发酵液通过碟片式离心机进行离心分离,使得发酵液分成富含菌体细胞的底流(水含量90%)(第一菌体细胞)和发酵残液顶流(第一发酵残液),所述发酵残液顶流进入发酵残液暂存罐。
(2)将步骤(1)得到的富含菌体细胞的底流用等体积的水洗涤2次,然后泵入带式真空过滤机进行滤干,滤干后的菌体(含水量70%)(第二菌体细胞)进入提取罐待下一步处理,滤液(第二发酵残液)进入发酵残液暂存罐。
(3)将所述发酵残液暂存罐中的发酵残液和滤液的混合液泵入板框过滤机进行过滤,过滤的压力为0.25MPa,滤布孔径为800目,得到含菌体细胞的第三菌体细胞和第三发酵残液,将第三菌体细胞送入提取罐与步骤(2)中的菌体(第二菌体细胞)混合,第三发酵残液进入吸附分离罐进行吸附处理。
(4)开启提取罐的搅拌装置,转速为300rpm,向提取罐中加入1倍体积于提取罐中的菌体细胞的水,得到菌悬液(菌悬液的OD600值200);然后进行蒸煮破碎,得到含聚羟基脂肪酸酯的浆液,蒸煮破碎的条件为:菌悬液温度为115℃、压力为0.15MPa、蒸煮时间为25min。
(5)将步骤(4)中所得浆液送入板框过滤机进行固液分离,得到聚羟基脂肪酸酯和滤液,过滤的条件为:温度为20℃,压力为0.35MPa,时间为2.5h,其中,滤布的孔径为23μm,所得滤液用于发酵培养基的配料。
对所得聚羟基脂肪酸酯的重均分子量、收率和纯度进行测定,结果如表1所示。
对比例1
按照CN106687502A中实施例1公开的方法对实施例2的步骤(3)中提取罐中的菌体细胞进行PHA的提取。
对所得聚羟基脂肪酸酯的重均分子量、收率和纯度进行测定,结果如表1所示。
对比例2
按照实施例1的方法提取聚羟基脂肪酸酯,不同的是,步骤(7)中板框过滤机的滤膜不预涂覆聚羟基脂肪酸酯层。
对所得聚羟基脂肪酸酯的重均分子量、收率和纯度进行测定,结果如表1所示。
对比例3
按照对比例2的方法提取聚羟基脂肪酸酯,不同的是,步骤(5)中蒸煮破碎的条件为:菌悬液温度为100℃、压力为常压、蒸煮时间为30min。
对所得聚羟基脂肪酸酯的重均分子量、收率和纯度进行测定,结果如表1所示。
表1
编号 | 收率(%) | 纯度(%) | PHA的重均分子量 |
实施例1 | 89 | 96 | 360KDa |
实施例2 | 89 | 96 | 350KDa |
实施例3 | 88 | 95 | 350KDa |
实施例4 | 86 | 94 | 330KDa |
实施例5 | 85 | 95 | 340KDa |
实施例6 | 84 | 94 | 310KDa |
实施例7 | 82 | 93 | 300KDa |
实施例8 | 81 | 94 | 300KDa |
实施例9 | 81 | 90 | 310KDa |
实施例10 | 80 | 91 | 310KDa |
对比例1 | 77 | 85 | 260KDa |
对比例2 | 75 | 90 | 320KDa |
对比例3 | 68 | 85 | 240KDa |
通过表1的结果可以看出,采用本发明技术方案提取到的聚羟基脂肪酸酯具有较高的收率和纯度,以及较高的聚合度,而较高的PHA收率和纯度也间接地降低了成本,采用本发明最优选技术方案的实施例1-3具有明显更好的效果。
以上详细描述了本发明的优选实施方式,但是,本发明并不限于此。在本发明的技术构思范围内,可以对本发明的技术方案进行多种简单变型,包括各个技术特征以任何其它的合适方式进行组合,这些简单变型和组合同样应当视为本发明所公开的内容,均属于本发明的保护范围。
Claims (43)
1.一种提取聚羟基脂肪酸酯的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
(1)将聚羟基脂肪酸酯的发酵液进行固液分离,得到含聚羟基脂肪酸酯的菌体细胞;
(2)将所述菌体细胞进行重悬,得到菌悬液,然后在超声以及加热和加压的条件下破碎所述菌体细胞,得到含聚羟基脂肪酸酯的浆液;
(3)将所述浆液进行第二板框过滤,得到聚羟基脂肪酸酯;
其中,所述第二板框过滤的滤布的表面预涂覆有聚羟基脂肪酸酯层;
其中,所述超声的功率为200-2000W/m3菌悬液;加热的温度为90-135℃;加压的压力为0.1-0.3MPa。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,预涂覆在所述滤布上的聚羟基脂肪酸酯的平均粒径大于所述浆液中的聚羟基脂肪酸酯的平均粒径。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其中,预涂覆在所述滤布上的聚羟基脂肪酸酯的粒径为1-200μm。
4.根据权利要求1或2所述的方法,其中,所述聚羟基脂肪酸酯层的厚度为1-20mm。
5.根据权利要求4所述的方法,其中,所述聚羟基脂肪酸酯层的厚度为5-10mm。
6.根据权利要求1、2和5中任意一项所述的方法,其中,预涂覆有聚羟基脂肪酸酯层的滤布的孔径为1-25μm。
7.根据权利要求1、2和5中任意一项所述的方法,其中,所述固液分离的条件使得所得菌体细胞的水含量为70-90重量%。
8.根据权利要求7所述的方法,其中,所述固液分离的条件使得所得菌体细胞的水含量为75-85重量%。
9.根据权利要求1、2、5和8中任意一项所述的方法,其中,将所述聚羟基脂肪酸酯的发酵液进行固液分离的方法包括:
(a)将聚羟基脂肪酸酯的发酵液进行第一固液分离,得到含聚羟基脂肪酸酯的第一菌体细胞和第一发酵残液;
(b)将所得的第一菌体细胞进行第二固液分离,得到含聚羟基脂肪酸酯的第二菌体细胞和第二发酵残液。
10.根据权利要求9所述的方法,其中,在进行所述第二固液分离之前,先将所得第一菌体细胞进行洗涤。
11.根据权利要求9所述的方法,其中,所述第一固液分离为第一碟片式离心分离。
12.根据权利要求9所述的方法,其中,所述第二固液分离为真空过滤分离。
13.根据权利要求9所述的方法,其中,该方法还包括:将所得的第一发酵残液和所得的第二发酵残液进行第三固液分离,得到含聚羟基脂肪酸酯的第三菌体细胞和第三发酵残液,然后将所得第三菌体细胞与所得的第二菌体细胞混合作为所述含聚羟基脂肪酸酯的菌体细胞。
14.根据权利要求13所述的方法,其中,所述第三固液分离为第一板框过滤分离。
15.根据权利要求1、2、5、8和10-14中任意一项所述的方法,其中,在进行步骤(2)之前,该方法还包括对所述菌体细胞进行洗涤的步骤。
16.根据权利要求1、2、5、8和10-14中任意一项所述的方法,其中,重悬所述菌体细胞使用的水的用量与所述菌体细胞的体积比为0.5-5:1。
17.根据权利要求16所述的方法,其中,重悬所述菌体细胞使用的水的用量与所述菌体细胞的体积比为0.8-2:1。
18.根据权利要求1、2、5、8、10-14和17中任意一项所述的方法,其中,破碎所述菌体细胞在搅拌的条件下进行,搅拌转速为50-450rpm。
19.根据权利要求1、2、5、8、10-14和17中任意一项所述的方法,其中,破碎所述菌体细胞的条件包括:压力为0.15-0.25MPa。
20.根据权利要求1、2、5、8、10-14和17中任意一项所述的方法,其中,破碎所述菌体细胞的条件包括:温度为110-125℃。
21.根据权利要求1、2、5、8、10-14和17中任意一项所述的方法,其中,破碎所述菌体细胞的条件包括:时间为20-40min。
22.根据权利要求1、2、5、8、10-14和17中任意一项所述的方法,其中,破碎所述菌体细胞的条件包括:超声的功率为300-1000W/m3菌悬液。
23.根据权利要求18所述的方法,其中,所述搅拌转速为200-400rpm。
24.根据权利要求1、2、5、8、10-14、17和23中任意一项所述的方法,其中,所述超声的控制方式包括:先进行10-20min的第一超声,然后再进行第二超声,其中所述第二超声的功率比所述第一超声的功率高100-200W/m3菌悬液。
25.根据权利要求24所述的方法,其中,所述第一超声的功率为300-800W/m3菌悬液。
26.根据权利要求1、2、5、8、10-14、17、23和25中任意一项所述的方法,其中,所述第二板框过滤的条件包括:温度为0-40℃,压力为0.1-0.6MPa,时间为0.5-5小时。
27.根据权利要求26所述的方法,其中,所述第二板框过滤的条件包括:温度为10-30℃,压力为0.15-0.55MPa,时间为1-4小时。
28.根据权利要求27所述的方法,其中,所述第二板框过滤的条件包括:温度为15-25℃,压力为0.2-0.5MPa,时间为2-3h。
29.根据权利要求1、2、5、8、10-14、17、23、25、27和28中任意一项所述的方法,其中,在将所述浆液进行第二板框过滤之前,该方法还包括对所述浆液进行除杂处理。
30.根据权利要求29所述的方法,其中,所述除杂的方法包括:将所述浆液进行离心分离处理,所述离心分离的条件使得杂质在上层,聚羟基脂肪酸酯在下层。
31.根据权利要求30所述的方法,其中,所述除杂的方法还包括将下层中的聚羟基脂肪酸酯进行洗涤。
32.一种提取聚羟基脂肪酸酯的系统,其特征在于,该系统包括第一固液分离单元(1),细胞破碎单元(2)和第二固液分离单元(3);
所述第一固液分离单元(1)用于将含聚羟基脂肪酸酯的发酵液进行固液分离,得到含聚羟基脂肪酸酯的菌体细胞;
所述细胞破碎单元(2)用于将第一固液分离单元(1)得到的菌体细胞在加热和加压的条件下进行超声破碎,得到含聚羟基脂肪酸酯的浆液;所述细胞破碎单元(2)中设置有超声装置;
所述第二固液分离单元(3)用于将细胞破碎单元(2)中得到的含聚羟基脂肪酸酯的浆液进行第二板框过滤,得到所述的聚羟基脂肪酸酯;所述第二固液分离单元(3)中设置有板框过滤设备Ⅱ(321);所述板框过滤设备Ⅱ(321)的滤布的表面预涂覆有聚羟基脂肪酸酯层;
其中,所述超声的功率为200-2000W/m3菌悬液;加热的温度为90-135℃;加压的压力为0.1-0.3MPa。
33.根据权利要求32所述的系统,其中,所述聚羟基脂肪酸酯层的厚度为1-20mm。
34.根据权利要求33所述的系统,其中,所述聚羟基脂肪酸酯层的厚度为5-10mm。
35.根据权利要求32-34中任意一项所述的系统,其中,预涂覆有聚羟基脂肪酸酯层的滤布的孔径为1-25μm。
36.根据权利要求32-34中任意一项所述的系统,其中,所述第一固液分离单元(1)包括依次连通的第一固液分离区Ⅰ(11)和第一固液分离区Ⅱ(12);
其中,所述第一固液分离区Ⅰ(11)用于将所述聚羟基脂肪酸酯的发酵液进行第一次第一固液分离,得到含聚羟基脂肪酸酯的第一菌体细胞和第一发酵残液;所述第一固液分离区Ⅱ(12)用于将在第一固液分离区Ⅰ(11)得到的第一菌体细胞进行第二次第一固液分离,得到含聚羟基脂肪酸酯的第二菌体细胞和第二发酵残液,并将所得的第二菌体细胞输送进入细胞破碎单元(2)。
37.根据权利要求36所述的系统,其中,所述第一固液分离区Ⅰ(11)中设置有碟片离心设备Ⅰ(111)。
38.根据权利要求36所述的系统,其中,所述第一固液分离区Ⅱ(12)中设置有带式真空过滤设备(121)。
39.根据权利要求36所述的系统,其中,所述第一固液分离单元(1)中还设置有第一固液分离区Ⅲ(13),所述第一固液分离区Ⅲ(13)用于将在第一固液分离区Ⅰ(11)得到的第一发酵残液和在第一固液分离区Ⅱ(12)得到的第二发酵残液并进行第三次第一固液分离,得到含聚羟基脂肪酸酯的第三菌体细胞和第三发酵残液,并将所得的第三菌体细胞输送进入细胞破碎单元(2)。
40.根据权利要求39所述的系统,其中,所述第一固液分离区Ⅲ(13)中设置有板框过滤设备Ⅰ(131)。
41.根据权利要求32-34和37-40中任意一项所述的系统,其中,所述细胞破碎单元(2)中设置有加热装置、加压装置和搅拌装置。
42.根据权利要求32-34和37-40中任意一项所述的系统,其中,所述第二固液分离单元(3)中板框过滤设备Ⅱ(321)的上游设置有固液分离区(31);
所述固液分离区(31)用于将在细胞破碎单元(2)中得到的含聚羟基脂肪酸酯的浆液进行固液分离,得到含聚羟基脂肪酸酯的物料;
所述板框过滤设备Ⅱ(321)用于将在细胞破碎单元(2)中得到的含聚羟基脂肪酸酯的浆液或者固液分离区(31)中得到的含聚羟基脂肪酸酯的物料进行板框过滤分离。
43.根据权利要求42所述的系统,其中,所述固液分离区(31)中设置有碟片离心设备Ⅱ(311)。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202010359273.0A CN111346580B (zh) | 2020-04-29 | 2020-04-29 | 高温高压下结合超声提取聚羟基脂肪酸酯的方法和系统 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202010359273.0A CN111346580B (zh) | 2020-04-29 | 2020-04-29 | 高温高压下结合超声提取聚羟基脂肪酸酯的方法和系统 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN111346580A CN111346580A (zh) | 2020-06-30 |
CN111346580B true CN111346580B (zh) | 2020-12-11 |
Family
ID=71189872
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202010359273.0A Active CN111346580B (zh) | 2020-04-29 | 2020-04-29 | 高温高压下结合超声提取聚羟基脂肪酸酯的方法和系统 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN111346580B (zh) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN111349218B (zh) * | 2020-04-29 | 2021-02-09 | 吉林中粮生化有限公司 | 聚羟基脂肪酸酯的分离方法及其制备的聚羟基脂肪酸酯 |
CN114308409A (zh) * | 2021-11-19 | 2022-04-12 | 中粮生物科技股份有限公司 | 利用卧螺离心分离聚羟基脂肪酸酯的方法和系统 |
CN114294905B (zh) * | 2021-11-19 | 2023-04-25 | 中粮生物科技股份有限公司 | 利用红外或微波干燥聚羟基脂肪酸酯的方法 |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1257982C (zh) * | 2002-06-25 | 2006-05-31 | 宁波天安生物材料有限公司 | 从细菌发酵液中直接分离提纯胞内聚羟基脂肪酸酯的方法 |
US7582456B2 (en) * | 2003-12-19 | 2009-09-01 | Tianan Biologic Material Co., Ltd. Ningbo | Method for separating, extracting and purifying poly-β-hydroxyalkanoates (PHAs) directly from bacterial fermentation broth |
CA2579721C (en) * | 2004-09-13 | 2012-11-27 | Metabolix, Inc. | Single solvent polymer extraction methods |
CN102133511B (zh) * | 2011-01-14 | 2013-09-04 | 清华大学 | 两亲性蛋白—聚羟基脂肪酸酯颗粒结合蛋白PhaP的新用途 |
CN102492737A (zh) * | 2011-11-29 | 2012-06-13 | 宁波蓝鼎电子科技有限公司 | 从微生物胞内分离提纯聚羟基烷酸酯的方法 |
CN103074386B (zh) * | 2012-12-28 | 2015-01-28 | 陕西科技大学 | 一种在离子液体中酶催化回收脂肪族聚酯及其再聚合方法 |
CN108587990B (zh) * | 2018-04-12 | 2020-10-09 | 中国科学院南海海洋研究所 | 一种有机磷降解活性纳米颗粒及其制备方法与应用 |
-
2020
- 2020-04-29 CN CN202010359273.0A patent/CN111346580B/zh active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN111346580A (zh) | 2020-06-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN111346580B (zh) | 高温高压下结合超声提取聚羟基脂肪酸酯的方法和系统 | |
CN111333822B (zh) | 氨水结合超声提取聚羟基脂肪酸酯的方法和系统 | |
CN111500650B (zh) | 一种高效生产pha的方法 | |
CN111393625B (zh) | 溶菌酶结合sds下利用超声提取聚羟基脂肪酸酯的方法和系统 | |
CN111349218B (zh) | 聚羟基脂肪酸酯的分离方法及其制备的聚羟基脂肪酸酯 | |
CN113307983B (zh) | 一种绿色溶剂快速、高得率分离木质素的方法 | |
CN103641928B (zh) | 一种卡拉胶寡糖的制备方法 | |
JP6174569B2 (ja) | エタノールの生産方法 | |
CN108793426A (zh) | 一种微生物絮凝剂复合物制备方法及其在水处理领域中的应用 | |
CN111362445B (zh) | 利用吸附剂对聚羟基脂肪酸酯发酵液进行处理的方法和系统以及所得发酵废液的应用 | |
CN114044832B (zh) | 一种桑黄子实体多糖的提取方法 | |
CN113278085B (zh) | 一种非乙醇沉淀的高分子量银耳多糖及其制备方法 | |
WO2014103183A1 (ja) | 糖化液の雑菌除去方法及び発酵システム | |
CN105062697B (zh) | 一种利用预处理提高餐厨油脂酶法制备生物柴油产量的方法 | |
CN111348766B (zh) | 利用膜过滤对聚羟基脂肪酸酯发酵液进行处理的方法和处理系统以及所得发酵废液的应用 | |
CN111377564B (zh) | 利用氧化法对聚羟基脂肪酸酯发酵液进行处理的方法和系统以及所得发酵废液的应用 | |
CN111448298B (zh) | 微生物油脂的分离方法 | |
CN102373251B (zh) | 一种添加分子印迹聚合物的埃博霉素d发酵生产方法 | |
CN113881066A (zh) | 一种采用超声波协同酸水解从杜仲中提取杜仲胶的方法 | |
CN111518847B (zh) | 利用色谱吸附法对聚羟基脂肪酸酯发酵液处理的方法和处理系统以及所得发酵废液的应用 | |
CN114262724A (zh) | 喷射液化连续破壁法提取分离聚羟基脂肪酸脂的方法和系统 | |
CN107141365B (zh) | 一种反复加减压高效提纯桑黄多糖的方法 | |
CN111363001A (zh) | 一种花椒籽蛋白的连续制备工艺 | |
JP5910427B2 (ja) | リグノセルロース含有バイオマスからのエタノール製造方法 | |
JP2015167480A (ja) | リグノセルロース含有バイオマスの酵素糖化処理方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |