CN111328280A - 制备和使用内昔芬的方法 - Google Patents

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Abstract

本公开内容提供了工业上可扩展的制备(Z)‑内昔芬或其盐、内昔芬的晶形，以及包含它们的组合物的方法。本公开内容还提供了治疗激素依赖性乳腺病症和激素依赖性生殖道病症的方法。

Description

制备和使用内昔芬的方法
交叉引用
本申请要求于2017年9月11日提交的美国临时申请号62/556,799；于2017年9月11日提交的美国临时申请号62/556,884；于2018年1月31日提交的美国临时申请号62/624,787；以及于2018年7月3日提交的美国临时申请号62/693,885的权益，每份申请通过引用以其全文并入本文。
背景技术
乳腺癌是迄今为止女性中最常见的癌症形式，并且是人类癌症死亡的第二大主要原因。尽管在乳腺癌诊断和治疗中已取得进展，但是该疾病的发病率从1940年起以每年约1％的速率稳步上升。如今，生活在北美洲的女性在其一生中罹患乳腺癌的可能性为八分之一。除乳腺癌外，影响大量妇女的其他乳腺病症包括良性但往往是癌前的病变，诸如导管增生、小叶增生、非典型导管增生和非典型小叶增生。
目前用于治疗乳腺癌的最佳实践是用乳房X线摄影术(mammography)诊断乳腺癌，然后用手术、放疗和化疗治疗该患者。目前乳房X线摄影术的广泛使用已经导致乳腺癌检测的改善。尽管男性乳腺癌的发病率比女性低100倍，男性一生中患上乳腺癌的风险也有约为千分之一。约2470例新的侵袭性乳腺癌病例将在男性中被诊断出来，并且约460名男性将死于乳腺癌。美国癌症协会估计，在2017年，255,180例新的乳腺癌病例将在男性和女性中诊断出来，并将有41,070名受试者死于乳腺癌。尽管如此，由乳腺癌引起的死亡率仍然相对保持不变，每100,000女性中有21例死亡，每100,000男性中有0.4例死亡。乳腺癌常常是在极晚期的阶段才被发现，此时的治疗选择和存活率已非常有限。
乳腺癌包括乳腺细胞的任何恶性肿瘤。存在几种类型的乳腺癌。示例性的乳腺癌包括但不限于导管原位癌、小叶原位癌、侵袭性(或浸润性)导管癌、侵袭性(或浸润性)小叶癌、炎性乳腺癌、三阴性乳腺癌、ER+乳腺癌、HER2+乳腺癌、腺样囊性(或腺囊性)癌、低级腺鳞癌、髓样癌、粘液(或胶样)癌、乳头状癌、小管癌、化生性癌和微乳头状癌。单个乳腺肿瘤可以是这些类型的组合，或是侵袭性癌和原位癌的混合。
他莫昔芬是一种选择性雌激素受体调节剂，其用于治疗患有内分泌反应性乳腺癌，即，激素依赖性或激素敏感性乳腺癌的女性。已知主要通过他莫昔芬口服递送的辅助疗法具有严重的副作用，如血管舒缩症状，例如潮热和生殖道(妇科)癌症。他莫昔芬疗法还存在患者依从性的问题。此外，大多数接受他莫昔芬辅助疗法的患者对该药无反应，并且30-50％的患者随后死于该疾病。
几种细胞色素P450(CYP)突变已被提出，其引起他莫昔芬向其活性代谢产物内昔芬的转化减少，因此降低他莫昔芬的疗效并增加对该药的耐药性(Dickschen等人,FrontPharmacol.2012；3:92.PMCID:PMC3357105)。到目前为止，已经描述了CYP2D6的超过140个等位基因变体，其中很大一部分与编码酶的活性降低或缺乏有关。根据携带的等位基因组合，每个个体受试者都可以被分为四个表型组之一：血浆内昔芬水平低于30nM的不良代谢者(PM)、中等代谢者(IM)、广泛代谢者(EM)和超快速代谢者(UM)，反映了血清内昔芬水平的变化。然而，CYP基因型的改变不能完全解释他莫昔芬的耐受性和在一些受试者中观察到的降低的内昔芬水平。
因此，正在开发他莫昔芬的几种替代物用于治疗乳腺癌，包括低剂量他莫昔芬(Lazzeroni M等人,Breast Cancer Res.2012年10月29日；14(5):214)和他莫昔芬活性代谢物，阿非昔芬(参见美国专利号7,485,623；7,507,769；7,704,516；7,786,172；7,968,532和8,048,927；Mansel R等人,Breast Cancer Res Treat.2007年12月；106(3):389-97.PubMed PMID:17351746；Rouanet P等人,J ClinOncol.2005年5月1日；23(13):2980-7.PubMed PMID:15860853)，内昔芬(参见US9333190；美国专利号9,220,680；9,090,640和9,200,045；美国公开号2009/0291134和US20100112041)及其衍生物(参见美国专利号8,063,249；美国公开号2015/0080339和2014/0193334)。(Z)-内昔芬是产生他莫昔芬临床疗效的主要活性代谢物，这一观点被广泛接受。
虽然内昔芬的盐酸盐和柠檬酸盐(参见，例如，Fauq等人,Bioorganic&MedicinalChemistry Letters.20(2010)3036–3038；Stearns等人,J.Natl.Cancer Inst.第95卷,第23号,2003；美国公开号2009/0291134和2010/0112041；Clinical Trials Gov.IdentifierNos.NCT01273168和NCT02311933；Goetz等人,2015,San Antonio Cancer Symposium；Ahmad等人,Clinical Pharmacology&Therapeutics.88(6)814-817,2010；和JClin.Oncol.30,2012(suppl；abstr 3089)；Ahmad等人,Breast Cancer Research andTreatment 2010,122,579-584)是本领域已知的，并且目前在对转移性癌症进行评估，但对于新的治疗和/或预防激素依赖性乳腺和生殖道(妇科)病症的组合物和方法的医学需求仍有待满足。
发明内容
本公开内容通过提供治疗和/或预防激素依赖性乳腺和生殖道(妇科)病症的组合物和方法来满足该需求。在某些方面，本公开内容提供了制备Z-内昔芬或其盐，内昔芬的晶形以及包含它们的组合物的新颖的工业可扩展方法。在某些方面，本公开内容提供了新的内昔芬晶形，其可以提供优点，包括相对于其他晶形或无定形形式而言改善的生物利用度和稳定性。
在某些方面，本公开内容提供了包含式(III)化合物的晶形的组合物：
Figure BDA0002485802470000031
在一些实施方案中，所述组合物中至少90重量％的所述式(III)化合物是(Z)-异构体。在一些实施方案中，所述晶形是所述式(III)化合物的形式I。晶形I的特征可以在于X射线粉末衍射图包含2θ在16.8±0.3°、17.1±0.3°和21.8±0.3°的主峰，并且任选地还包含2θ选自16.0±0.3°、18.8±0.3°和26.5±0.3°的至少一个峰。在一些实施方案中，所述X射线粉末衍射图还包含2θ选自12.3±0.3°、28.0±0.3°和29.0±0.3°的至少一个峰。所述X射线粉末衍射图还可以包含2θ在12.3±0.3°、16.0±0.3°、18.8±0.3°、26.5±0.3°、28.0±0.3°和29.0±0.3°的峰。在一些实施方案中，晶形I的特征在于X射线粉末衍射图基本如图9或图10所示。所述组合物中大于90重量％、95重量％或99重量％的所述式(III)化合物可以是晶形I。在一些实施方案中，所述组合物包含0.01mg至200mg的晶形I，如约1mg、2mg、4mg、6mg、10mg或20mg的晶形I。
在一些实施方案中，所述组合物包含所述式(III)化合物的(E)-异构体和(Z)-异构体，其E/Z比为0.9至1.3，如约1.1。在一些实施方案中，所述晶形是所述式(III)化合物的形式II。晶形II的特征可以在于X射线粉末衍射图包含2θ在7.0±0.3°、11.9±0.3°、14.0±0.3°和18.4±0.3°的主峰，并且任选地还包含2θ在22.0±0.3°的峰。在一些实施方案中，所述X射线粉末衍射图还包含2θ选自6.6±0.3°、13.3±0.3°和20.0±0.3°的至少一个峰。所述X射线粉末衍射图还可以包含2θ在6.6±0.3°、13.3±0.3°、20.0±0.3°和22.0±0.3°的峰。在一些实施方案中，晶形II的特征在于X射线粉末衍射图基本如图11或图12所示。所述组合物中大于90重量％、95重量％或99重量％的所述式(III)化合物可以是晶形II。在一些实施方案中，所述组合物包含0.01mg至200mg的晶形II，如约1mg、2mg、4mg、6mg、10mg或20mg的晶形II。
在一些实施方案中，所述组合物包含所述式(III)化合物的(E)-异构体和(Z)-异构体，其E/Z比为0.9至1.3，如约1.1。在一些实施方案中，所述晶形是所述式(III)化合物的形式III。晶形III的特征可以在于X射线粉末衍射图包含2θ在11.9±0.3°、13.9±0.3°、17.1±0.3°和17.7±0.3°的主峰，并且任选地还包含2θ在25.3±0.3°的峰。在一些实施方案中，所述X射线粉末衍射图还包含2θ选自18.2±0.3°、22.5±0.3°和26.8±0.3°的至少一个峰。所述X射线粉末衍射图还可以包含2θ在18.2±0.3°、22.5±0.3°、25.3±0.3°和26.8±0.3°的峰。在一些实施方案中，晶形III的特征在于X射线粉末衍射图基本如图13所示。所述组合物中大于90重量％、95重量％或99重量％的所述式(III)化合物可以是晶形III。在一些实施方案中，所述组合物包含0.01mg至200mg的晶形III，如约1mg、2mg、4mg、6mg、10mg或20mg的晶形III。
在某些方面，本公开内容提供了包含药学上可接受的载体或稀释剂的药物组合物，并且所述组合物包含式(III)化合物的晶形。可以配制本公开内容的组合物用于口服、肠胃外、局部或导管内递送。在一些实施方案中，将所述组合物配制为用于口服递送的片剂、囊片、胶囊或丸剂。在一些实施方案中，在用所述组合物治疗的受试者中，内昔芬的平均半衰期在30小时至60小时之间。可以将包含式(III)化合物的晶形的组合物配制为用于口服递送的肠溶片剂、肠溶囊片、肠溶胶囊、缓释片剂、缓释囊片或缓释胶囊。在一些实施方案中，将所述组合物施用于受试者以对所述受试者的激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症，或两者进行治疗或预防。
在某些方面，本公开内容提供了口服组合物，其包含每单位剂量1mg至200mg的包含式(III)化合物的晶形的所述组合物，用于向有此需要的受试者施用，其中每日施用所述口服组合物在所述受试者体内实现：
在7至21天内的内昔芬稳态血浆水平；
在25nM至300nM范围内的内昔芬稳态血浆水平；
大于30nM的内昔芬稳态血浆水平；
在施用后2至10小时内的内昔芬最大血浆水平；或者
其任何组合。
在一些实施方案中，在用包含式(III)化合物的晶形的所述组合物治疗的受试者中，内昔芬的平均半衰期为40小时至55小时。在一些实施方案中，将所述组合物配制为肠溶片剂、肠溶囊片、肠溶胶囊、缓释片剂、缓释囊片或缓释胶囊。在一些实施方案中，所述组合物中至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％的内昔芬在肠中释放。在一些实施方案中，包含式(III)化合物的晶形的所述组合物表现出内昔芬的外推至时间无穷的曲线下平均面积(AUC0-inf)为200hr*ng/mL至10000hr*ng/mL、300hr*ng/mL至8000hr*ng/mL、400hr*ng/mL至6000hr*ng/mL或700hr*ng/mL至6000hr*ng/mL。
在某些方面，本公开内容提供了一种治疗有此需要的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用包含式(III)化合物的晶形的所述组合物。在一些实施方案中，所述受试者患有激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症或两者，或存在其风险。所述激素依赖性乳腺病症或所述激素依赖性生殖道病症可以是良性乳腺病症、增生、异型、非典型导管增生、非典型小叶增生、乳腺密度增加、男性乳腺发育症、DCIS、LCIS、乳腺癌、性早熟、McCune-Albright综合征、子宫内膜癌、卵巢癌、子宫癌、宫颈癌、阴道癌或外阴癌。在一些实施方案中，所述受试者患有前列腺癌，并且患有男性乳腺发育症或存在其风险。所述受试者可以患有他莫昔芬难治性或他莫昔芬耐受性的激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症。在一些实施方案中，用或将会用选自西酞普兰、依他普仑、氟西汀、帕罗西汀、舍曲林和维拉佐酮的SSRI药物治疗所述受试者。
在实施任何所述主题方法中，所述组合物可以包含0.01mg至200mg的(Z)-内昔芬。在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约1mg、2mg、4mg、6mg、10mg或20mg的(Z)-内昔芬。在一些实施方案中，所述受试者体内的内昔芬稳态血浆水平大于30nM。在首次施用所述组合物的7至21天内可以达到内昔芬的所述稳态血浆水平。在一些实施方案中，到达内昔芬最大血浆水平的时间为在施用所述组合物后的2小时至10小时或4小时至8小时。
在某些方面，本公开内容提供了一种治疗患有激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症或两者或，存在其风险的受试者的方法，所述方法包括施用包含式(III)化合物的晶形的组合物，其中所述组合物的施用实现：
在施用后30小时至60小时范围内的在所述受试者体内的内昔芬平均半衰期；
在施用后4小时至8小时范围内的内昔芬到达最大血浆水平的时间；以及
大于30nM的内昔芬稳态血浆水平。
在一些实施方案中，所述激素依赖性乳腺病症和所述激素依赖性生殖道病症选自良性乳腺病症、增生、异型、非典型导管增生、非典型小叶增生、乳腺密度增加、男性乳腺发育症、DCIS、LCIS、乳腺癌、性早熟、McCune-Albright综合征、子宫内膜癌、卵巢癌、子宫癌、宫颈癌、阴道癌和外阴癌。
在实施任何所述主题方法中，所述组合物可以包含0.01mg至200mg的(Z)-内昔芬。在一些实施方案中，向所述受试者施用约1mg、2mg、4mg、6mg、10mg或20mg的(Z)-内昔芬。内昔芬的外推至时间无穷的曲线下平均面积(AUC0-inf)可以为200hr*ng/mL至10000hr*ng/mL、300hr*ng/mL至8000hr*ng/mL、400hr*ng/mL至6000hr*ng/mL或700hr*ng/mL至6000hr*ng/mL。在一些实施方案中，将所述组合物配制为肠溶片剂、肠溶囊片、肠溶胶囊、缓释片剂、缓释囊片或缓释胶囊。在一些实施方案中，所述组合物中至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％的内昔芬在肠中释放。所述组合物可以每天一次、每天两次、每天三次、每天四次、隔日一次、每周两次、每周一次、每两周一次、每月两次、每月一次、每季度一次、每六个月一次或每年一次施用。
在一方面，本公开内容提供了一种工业上可扩展的制造(Z)-内昔芬或其盐的方法，其包括以下步骤：(a)使如下所示的式(III)化合物——(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的混合物经受从第一溶剂的分级结晶，
Figure BDA0002485802470000081
以形成第一结晶固体和第一结晶母液，其中与(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物的E/Z比相比，所述第一母液的E/Z比具有至少高50％的(Z)-内昔芬；(b)通过浓缩所述第一母液或通过将所述第一母液中的所述第一溶剂与第二溶剂交换一次或多次，使所述第一母液经受从所述第二溶剂的重结晶，以形成第二结晶固体和第二母液，其中所述第二结晶固体为>90％的(Z)-内昔芬；以及(c)任选地，使所述第二结晶固体一次或多次经受从第三溶剂的重结晶或色谱处理，以形成第三结晶固体。在一些实施方案中，将所述第一溶剂、所述第二溶剂和所述第三溶剂中的任何一种或多种预热至40℃至80℃的温度。
在一些方面，本公开内容提供了一种工业上可扩展的制造式(III)化合物的晶形I的方法，其包括以下步骤：(a)使如下所示的式(III)化合物——(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的混合物经受从第一溶剂的分级结晶，
Figure BDA0002485802470000082
以形成第一结晶固体和第一母液，其中与(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物的E/Z比相比，所述第一母液的E/Z比具有至少高50％的(Z)-内昔芬；(b)通过浓缩所述第一母液或通过将所述第一母液中的所述第一溶剂与第二溶剂交换一次或多次，使所述第一母液经受从所述第二溶剂的重结晶，以形成第二结晶固体和第二母液，其中所述第二结晶固体为≥二结％的(Z)-内昔芬；以及(c)使所述第二结晶固体一次或多次经受从第三溶剂的重结晶或色谱处理，以形成第三结晶固体，其中所述第三结晶固体为所述式(III)化合物的晶形I。
在某些方面，本公开内容提供了根据本文所述的方法制备的式(III)化合物的晶形。在一些实施方案中，所述晶形是所述式(III)化合物的形式I。在一些实施方案中，所述晶形是所述式(III)化合物的形式II。在一些实施方案中，所述晶形是所述式(III)化合物的形式III。
在另一方面，本发明提供了在步骤a中，将式(III)化合物——(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物用6N HCl预处理并用8N NaOH中和。
在另一方面，所述工业上可扩展的方法还包括制备(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物，该制备是通过经由在惰性有机溶剂中的钛盐和还原剂，由McMurry反应介导，将式(II)化合物——(4-羟苯基)(4-(2-(甲氨基)乙氧基)苯基)甲酮偶联至苯基乙基酮以形成(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物；并且其中所述式(II)化合物具有如下所示的结构：
Figure BDA0002485802470000091
在另一方面，所述工业上可扩展的方法还包括制备所述式(II)化合物，该制备是通过用在惰性有机溶剂中的脱甲基剂和质子受体将式(I)化合物——[4-[2-(二甲氨基)乙氧基]苯基](4-羟苯基)甲酮脱甲基以形成所述式(II)化合物，其中所述式(I)化合物的结构为
Figure BDA0002485802470000092
本公开内容还提供了一种工业上可扩展的制造(Z)-内昔芬及其盐的方法，其包括以下步骤：(a)使如下所示的(III)式化合物——(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的混合物经受从乙酸乙酯的分级结晶，
Figure BDA0002485802470000101
以形成第一结晶固体和第一结晶母液，其中与(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物的E/Z比相比，所述第一母液的E/Z比具有至少高30％的(Z)-内昔芬；(b)通过浓缩所述第一母液或将所述第一母液中的乙酸乙酯与IPA或IPA/PPW(1:1v/v)交换一次或多次，使所述第一母液经受从IPA或IPA/PPW的重结晶，以形成第二结晶固体和第二母液，其中所述第二结晶固体为>90％的(Z)-内昔芬；以及(b)任选地，使所述第二结晶固体一次或多次经受从乙醇的重结晶或柱色谱处理，以形成第三结晶固体。
在一些实施方案中，由McMurry反应介导，将所述式(II)化合物——(4-羟苯基)(4-(2-(甲氨基)乙氧基)苯基)甲酮偶联至苯基乙基酮来制备式(III)化合物——(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物，这包括以下步骤：(a)使所述式(II)化合物与苯基乙基酮(1:0.01至1.5wt/wt)在惰性有机溶剂(1:1至1:20wt/wt)中反应；(b)制备在惰性有机溶剂(1:1至1:20wt/wt)中的钛盐(1:0.1至1:12wt/wt)和还原剂(1:0.01至1:10wt/wt)；以及(c)使步骤(a)的所述式(II)化合物与步骤(b)的所述在惰性有机溶剂中的钛盐和还原剂反应，以形成(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物；并且其中wt/wt是相对于所述式(II)化合物。
在其他实施方案中，由McMurry反应介导，将所述式(II)化合物——(4-羟苯基)(4-(2-(甲氨基)乙氧基)苯基)甲酮偶联至苯基乙基酮来制备式(III)化合物——(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物，这包括以下步骤：(a)使所述式(II)化合物与苯基乙基酮(1:0.01至1:5wt/wt)在THF(1:1至1:20wt/wt)中反应；(b)制备在THF(1:1至1:20wt/wt)中的TiCl4(0.1至4wt/wt)和Zn(0.01至1:2wt./wt)；以及(c)使步骤(a)的所述式(II)化合物与步骤(b)的所述在THF中的TiCl4和Zn反应，以形成(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物；并且其中wt/wt是相对于所述式(II)化合物。
在一些实施方案中，所述式(II)化合物的产生是通过用在惰性有机溶剂(1:1至1:20wt/wt)中的脱甲基剂(1:0.5至1:10wt/wt)和质子受体(1:0.5至1.0wt/wt)将所述式(I)化合物脱甲基以形成式(II)化合物，其中所述wt/wt是相对于所述式(I)化合物。
在一些实施方案中，所述式(II)化合物的制备是通过用在THF中的氯甲酸1-氯乙酯和DIPEA将所述式(I)化合物脱甲基以形成所述式(II)化合物，其包括以下步骤：(a)使所述式(I)化合物与DIPEA(1:0.5至1:10wt/wt)在THF(1:20wt/wt)中反应；(b)添加氯甲酸1-氯乙酯(1:0.5至1:10wt./wt)；(c)用甲醇蒸馏一次或多次(1:1至1:10wt./wt)；(e)与甲醇(1:1至1:5wt/wt)/HCl(1:1至1:10wt/wt)反应；以及(e)用NaOH(1:1至1:10wt/wt)中和；并且其中wt/wt是相对于所述式(I)化合物。
在另一方面，本公开内容提供了通过使(Z)-内昔芬与D-葡糖酸或L-葡糖酸反应以形成(Z)-内昔芬L-葡糖酸盐或(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐来制备(Z)-内昔芬葡糖酸盐的方法。
在另一方面，本公开内容提供了，通过如本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬、(E)-内昔芬、式(III)化合物、式(II)化合物及其盐是稳定的。在一个特定方面，(Z)-内昔芬游离碱在环境温度下稳定至少9个月。
在某些方面，本公开内容提供了一种工业上可扩展的制造式(III)化合物的晶形II或III的方法，其包括(a)使E/Z比为99:1至40:60的(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的起始混合物与6N HCl(1:1至1:5wt/wt)在乙酸乙酯(1:1至1:20wt/wt)中反应；(b)用8N NaOH(1:1至1:20wt/wt)中和；(c)用乙酸乙酯洗涤一次或多次；(d)用乙酸乙酯和正庚烷的混合物洗涤一次或多次；以及(e)回收所述式(III)化合物的晶形II或III；其中wt/wt是相对于(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述起始混合物。
在另一方面，本公开内容提供了包含根据本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬游离碱或其盐的组合物。将所述组合物配制为用于口服、肠胃外、局部和导管内递送。所述组合物被配制为用于口服递送的片剂、囊片、胶囊或丸剂。在一些实施方案中，将所述组合物配制为用于口服递送的片剂如肠溶片剂、肠溶囊片、肠溶胶囊、缓释片剂、缓释囊片和缓释胶囊。
在某些方面，本公开内容提供了具有某些药代动力学特征的组合物。在一方面，本公开内容提供了，所述组合物中至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％的内昔芬在肠中释放。在另一方面，本公开内容提供了，所述组合物中的内昔芬在受试者中的平均半衰期为施用后30小时至60小时。在一些实施方案中，内昔芬在受试者中的平均半衰期为施用后40小时至55小时。在另一方面，本公开内容提供了，内昔芬的外推至时间无穷的曲线下平均面积(AUC0-inf)为200hr*ng/mL至10000hr*ng/mL、300hr*ng/mL至8000hr*ng/mL、400hr*ng/mL至6000hr*ng/mL或700hr*ng/mL至6000hr*ng/mL。
在另一方面，本公开内容提供了口服组合物，其包含每单位剂量1mg至200mg的(Z)-内昔芬游离碱或其盐，用于向有此需要的受试者施用，其中每日施用所述口服组合物在所述受试者体内实现：(i)在7至21天内的内昔芬稳态血浆水平；或者(ii)在25nM至300nM范围内的内昔芬稳态血浆水平；或者(iii)大于30nM的内昔芬稳态血浆水平；或者(iv)在施用后2至10小时内的内昔芬最大血浆水平；或者(v)其任何组合。本公开内容还提供了将所述组合物施用于有此需要的受试者，以对受试者的激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症或两者进行治疗和预防。
在某些方面，本公开提供了治疗有此需要的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用如本文公开的口服组合物。在一些实施方案中，所述受试者患有激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症或两者，或存在其风险。在各种实施方案中，所述激素依赖性乳腺病症或所述激素依赖性生殖道病症是良性乳腺病症、增生、异型、非典型导管增生、非典型小叶增生、乳腺密度增加、男性乳腺发育症、DCIS、LCIS、乳腺癌、性早熟、McCune-Albright综合征、子宫内膜癌、卵巢癌、子宫癌、宫颈癌、阴道癌或外阴癌。
在一些实施方案中，所述受试者患有前列腺癌，并且其中所述受试者还患有男性乳腺发育症或存在其风险。
在某些方面，本公开内容提供了将从此类治疗方法中受益的某些患者群体。在一些实施方案中，所述患者群体是他莫昔芬难治性或他莫昔芬耐受性群体。在某些实施方案中，所述受试者患有他莫昔芬难治性或他莫昔芬耐受性的激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症。在其他实施方案中，所述患者群体包含用或将会用选自西酞普兰、依他普仑、氟西汀、帕罗西汀、舍曲林和维拉佐酮的SSRI药物治疗的受试者。
在一方面，本公开内容提供了待施用于有此需要的受试者的某些剂量的(Z)-内昔芬。在各个实施方案中，向所述受试者施用0.01mg至200mg的(Z)-内昔芬。在某些实施方案中，每天向所述受试者施用1mg、2mg、4mg、6mg、10mg或20mg的(Z)-内昔芬。
在另一方面，本公开提供了治疗受试者的方法，其中在施用所述组合物后，所述受试者的内昔芬稳态血浆水平大于30nM。在一些实施方案中，在首次施用所述组合物的7至21天内达到这种内昔芬稳态血浆水平。在一些实施方案中，到达内昔芬最大血浆水平的时间为在施用所述组合物后的2小时至10小时或4小时至8小时。
在另一方面，本公开内容提供了治疗患有激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症或两者，或存在其风险的受试者的方法，所述方法包括施用包含(Z)-内昔芬或其盐的口服组合物，其中所述组合物的施用实现：(i)在施用后30小时至60小时范围内的在所述受试者体内的内昔芬平均半衰期；(ii)在施用后4小时至8小时范围内的内昔芬到达最大血浆水平的时间；以及(iii)大于30nM的内昔芬稳态血浆水平。在某些实施方案中，向所述受试者施用1mg、2mg、4mg、6mg、10mg或20mg的(Z)-内昔芬。在其他实施方案中，内昔芬的外推至时间无穷的曲线下平均面积(AUC0-inf)为200hr*ng/mL至10000hr*ng/mL、300hr*ng/mL至8000hr*ng/mL、400hr*ng/mL至6000hr*ng/mL或700hr*ng/mL至6000hr*ng/mL。在一些实施方案中，将所述组合物配制为肠溶片剂、肠溶囊片、肠溶胶囊、缓释片剂、缓释囊片或缓释胶囊。在一些实施方案中，至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％的内昔芬在肠中释放。在一些实施方案中，所述组合物每天一次、每天两次、每天三次、每天四次、隔日一次、每周两次、每周一次、每两周一次、每月两次、每月一次、每季度一次、每六个月一次或每年一次施用。在一些实施方案中，所述激素依赖性乳腺病症和所述激素依赖性生殖道病症选自良性乳腺病症、增生、异型、非典型导管增生、非典型小叶增生、乳腺密度增加、男性乳腺发育症、DCIS、LCIS、乳腺癌、性早熟、McCune-Albright综合征、子宫内膜癌、卵巢癌、子宫癌、宫颈癌、阴道癌和外阴癌。
援引并入
本说明书中提到的所有出版物、专利和专利申请均通过引用并入本文，其程度如同特别地且单独地指出每一个单独的出版物、专利或专利申请均通过引用而并入。
附图说明
本发明的新颖特征在所附的权利要求书中具体阐述。通过参考以下对利用本发明原理的说明性实施方案加以阐述的详细描述和附图，将会获得对本发明的特征和优点的更好的理解，在这些附图中：
图1是描绘他莫昔芬向内昔芬和其他代谢物的代谢途径的示意图。相对于N-脱甲基他莫昔芬的血浆浓度，4-羟基他莫昔芬的血浆浓度较低，这表明母体药物代谢的主要途径是通过细胞色素P450 3A4(CYP3A4)N-脱甲基化为N-脱甲基他莫昔芬，然后通过细胞色素P450 2D6(CYP2D6)羟基化为内昔芬。
图2是使用本文公开的方法制备的(Z)-内昔芬游离碱的代表性红外光谱。
图3示出了在用安慰剂或1mg、2mg或4mg内昔芬胶囊治疗后到达内昔芬的最大血清水平(nM)的时间。
图4示出了在第1天和第21天用安慰剂或1mg、2mg或4mg内昔芬胶囊治疗后内昔芬的最高血清水平的时间。给药后的时间(小时)绘制在X上轴，并且平均血清浓度(ng/mL)绘制在Y轴上。
图5示出了从第0天(第0天是指X轴上的第8天)至第21天，用安慰剂或1mg、2mg或4mg内昔芬胶囊治疗后到达内昔芬稳态血清水平的时间。X轴是以天为单位的时间(第8天至第21天)，并且Y轴是以ng/mL为单位的平均血清浓度。从第0天至临床试验期结束的每一天都抽血。受试者在第1天给药，并测量血浆内昔芬水平，如表17所示。随后从第8天(图5中标记为第8天)开始每天向受试者给药，直到研究期结束。
图6示出了在第1天和第21天用安慰剂或1mg、2mg或4mg内昔芬胶囊治疗后随时间变化的平均血清浓度(ng/mL)(线性)。
图7示出了在第1天和第21天用安慰剂或1mg、2mg或4mg内昔芬胶囊治疗后随时间变化的平均血清浓度(ng/mL)(半对数)。
图8示出了在第1天和第21天用安慰剂或1mg、2mg或4mg内昔芬胶囊治疗后随时间变化的平均血清浓度(nM)(线性)。
图9是从式(III)化合物的形式I的样品获得的XRPD图。
图10是从式(III)化合物的形式I的样品获得的XRPD图。
图11是从式(III)化合物的形式II的样品获得的XRPD图。
图12是从式(III)化合物的形式II的样品获得的XRPD图。
图13是从式(III)化合物的形式III的样品获得的XRPD图。
具体实施方式
化合物使用标准命名法描述。除非另有定义，否则本文中使用的所有技术和科学术语与本发明所属领域的技术人员通常所理解的含义相同。
如本文所用的，除非上下文另有说明，否则术语“一个”、“一种”和“所述”包括复数指代物。
如本文所用的，术语“活性药物成分”、“活性成分”、“API”、“药物”、“活性物(active)”、“活性物(actives)”或“治疗剂”可互换使用，以指药物组合物中的一种或多种药物活性化合物。这与组合物中的其他成分如基本上或完全药学惰性的赋形剂形成对比。根据本公开内容的合适的API是对于治疗某种疾病、病况或病症存在或可能存在患者依从性问题的API。如本文所用的治疗剂包括活性化合物及其盐、前药和代谢物。如本文所用的，术语“药物”意指旨在用于诊断、治愈、减轻、治疗和/或预防人类或其他动物的疾病的化合物。
如本文所用的，“辅助疗法”是指在首选疗法之后并且施用于有复发风险的受试者的疗法。在乳腺癌或生殖道癌的情况下，例如采用他莫昔芬的辅助全身性疗法通常在首选疗法后不久开始，以延迟复发、延长生存期或治愈受试者。
如本文所用的，术语“他莫昔芬”是指(Z)-2-[4-(1,2-二苯基-1-丁烯基)苯氧基]-N,N-二甲基乙胺。他莫昔芬也可以指E-异构体或E-异构体和Z-异构体的组合。
如本文所用的，可互换使用的术语“4-羟基他莫昔芬”、“阿非昔芬”和“4-OHT”是指4-1-[4-[2-(二甲氨基)乙氧基]苯基]-2-苯基丁-1-烯基]苯酚，并组成他莫昔芬的活性代谢物。4-OHT可指Z-异构体、E-异构体或其组合。
如本文所用的，术语“内昔芬(endoxifen)”是指4-羟基-N-脱甲基-他莫昔芬。它是他莫昔芬的次生活性代谢物。
在整个说明书中提及“化合物”如式(I)、式(II)、式(III)和式(IV)的化合物的实施方案包括本文公开的式和/或化合物的多晶型形式、盐形式、游离碱形式、共结晶形式和溶剂化物形式。因此，短语“化合物”、“式(I)化合物”、“式(II)化合物”、“式(III)化合物”和“式(IV)化合物”的出现包括如本文所述的式(IV)化合物的形式I、式(III)化合物的形式II-III、式(IV)化合物的游离碱、式(III)化合物的游离碱，和/或葡糖酸盐。
术语“晶形”、“多晶型物”和“形式”在本文中可以互换使用，并且除非是指特定的晶体或无定形形式，否则意在包括化合物的所有晶形和无定形形式，包括，例如，多晶型物、假多晶型物、盐、溶剂化物、水合物、非溶剂化多晶型物(包括无水物)、构象多晶型物和无定形形式，以及其混合物。本公开内容的化合物包括那些化合物的结晶和无定形形式，包括，例如，化合物的多晶型物、假多晶型物、盐、溶剂化物、水合物、非溶剂化多晶型物(包括无水物)、构象多晶型物和无定形形式，以及其混合物。
本文公开的所有化合物进一步被理解为包括化合物中出现的原子的所有可能的同位素。同位素包括原子序数相同但质量数不同的那些原子。举例而言且非限制性地，氢的同位素包括氚和氘，并且碳的同位素包括11C、13C和14C。
如本文和权利要求中所用的，术语“包含”、“含有”和“包括”是包含性、开放式的，并且不排除另外的未列举的元素、组成部分或方法步骤。因此，术语“包含”和“包括”涵盖更具限制性的术语“由……组成”和“基本由……组成”。
如本文所用，术语“联合疗法”是指本文所述的组合物与一种或多种附加治疗的联合使用。联合疗法中的治疗可以是任何治疗，如任何预防剂、治疗剂(如化疗)、放疗、手术等。联合可以指在与本文公开的组合物相同的组合物中(例如，在同一胶囊、片剂、软膏等中)或在单独的组合物(例如，在两个单独的胶囊中)包含治疗剂或预防剂。单独的组合物可以为不同的剂型。术语“联合疗法”和“与……联合”的使用不限制将本文所述的组合物以及预防性和/或治疗性的药剂和/或治疗施用于有此需要的受试者的顺序。本公开内容的组合物可以在向由此需要的受试者施用一种或多种预防性和/或治疗性的药剂和/或治疗之前(例如，1分钟(min)、5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时(h)、2小时、4小时、6小时、8小时、10小时、12小时、24小时、36小时、48小时、72小时、96小时、1周(wk)、2周、3周、4周、5周、6周、8周、12周、6个月(m)、9个月或1年之前)、同时或之后(例如，1分钟(min)、5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时(h)、2小时、4小时、6小时、8小时、10小时、12小时、24小时、36小时、48小时、72小时、96小时、1周(wk)、2周、3周、4周、5周、6周、8周、12周、6个月(m)、9个月或1年之后)施用。如本文所用的联合疗法还可以指对患有单一疾病或多种疾病例如男性前列腺癌和男性乳腺发育症的受试者的治疗。
如本文所用的，术语“测试样品”是指从受试者获得的血液样品。应理解，当从受试者获得血液样品时，受试者的血液被用于确定受试者的内昔芬水平和/或其他可以被测量或测试的生物标志物。如本文所用的，“血浆内昔芬”用于指受试者的测试样品中的内昔芬水平，无论测试是在全血、血浆还是血清上进行。
如本文所用的，术语“剂型”是指将本公开内容的化合物或组合物递送给患者的形式。
如本文所用的，术语“药学上可接受的”或“药理学上可接受的”是指与制剂的其他成分相容的材料、组合物或媒介物，并且当施用于受试者时，它们基本不产生不良反应，例如毒性、变态反应或免疫反应。它们可以由例如美国联邦或州政府的监管机构批准，或在美国药典或其他公认的药典中列出，用于动物，尤其是人类。
如本文所用的，术语“药学上可接受的载体”或“载体”是指药学上可接受的材料、组合物或媒介物，如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、溶剂或包囊材料，参与将本公开内容的一个或多个化合物从一种组织、器官或身体的一部分或穿过皮肤携带或运输。
如本文所用的，术语“药学上可接受的盐”是指在受试者(例如，哺乳动物，和/或体内、离体、体外的细胞、组织或器官)中生理耐受的本公开内容化合物的任何盐(例如，通过与酸或碱反应获得)。本公开内容的化合物的“盐”可以来自无机或有机的酸和碱。合适的阴离子盐包括：槟榔碱、苯磺酸盐、碳酸氢盐、酒石酸氢盐、丁基溴、柠檬酸盐、樟磺酸盐(camysylate)、葡糖酸盐、谷氨酸盐、乙醇酰阿散酸盐(glycollylarsanilate)、己基间苯二酚盐(hexylresorcinate)、哈胺(hydrabamine)、氢溴酸盐、盐酸盐、羟萘甲酸盐(hydroxynapthanoate)、羟乙磺酸盐、苹果酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基溴、甲基溴、甲酯硝酸盐、甲基硫酸盐、黏酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、巴莫酸盐(pamaoate)(双羟萘酸盐)、泛酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、多聚半乳糖醛酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、硫酸盐、鞣酸盐、茶氯酸盐(teoclate)、脂肪酸阴离子盐和三乙基碘。
合适的阳离子包括苄星、氯咪唑、氯普鲁卡因、胆碱、二乙胺、二乙醇胺、乙二胺、甲葡胺、哌嗪、普鲁卡因、铝、钡、铋、锂、镁、钾和锌。
为了本申请的目的，考虑到本公开内容的化合物的盐对于治疗用途是药学上可接受的。然而，非药学上可接受的酸和碱的盐也可能有用，例如，用于药学上可接受的化合物的制备或纯化。
如本文所用的，术语“药物组合物”是指活性剂(例如，活性药物化合物或成分，API)与惰性或活性的载体(例如，磷脂)的组合，使得组合物特别地适用于体外、体内或离体的诊断或治疗用途。
如本文所用的，“首选疗法”是指在受试者中初次诊断激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症或两者时的一线治疗。示例性的首选疗法可以涉及手术、各种化疗和放疗。
如本文所用的，术语“受试者”、“患者”、“参与者”和“个体”在本文中可以互换使用，并且是指哺乳动物，如人类。哺乳动物还包括宠物动物如狗、猫，实验动物如大鼠、小鼠，以及农场动物如牛和马。除非另有说明，否则哺乳动物可以是任何性别。
如本文所用的，术语“他莫昔芬难治性”是指每天被给予他莫昔芬持续至少2天并且血浆内昔芬水平小于30nM(例如，小于20nM、小于25nM或小于30nM)的受试者。如本文所用的，术语“他莫昔芬耐受性”是指两类耐受性：(a)从头耐受性，即从治疗开始对他莫昔芬治疗的无反应性，或(b)获得性耐受性，即在有初始反应性或他莫昔芬依赖性生长/刺激的生长后对他莫昔芬疗法的无反应性，同时继续表达雌激素受体(MinsunChang.Biomol.Ther.20(3),256-267(2012))。他莫昔芬的获得性耐受性的发展可以早则3个月至1年，晚则5至10年。如本文所用的，术语“参考血浆内昔芬水平”是指30nM的值。
如本文所用的，术语“单位剂型”是指适合于受试者的单位剂量的物理上离散的单位，每个单位含有预定量的活性物质，以及合适的药物赋形剂，该预定量经计算会产生所需的治疗效果。
具体而言，应当理解，本文引用的任何数值均包括从较低值到较高值的所有值，即所列举的最低值和最高值之间的数值的所有可能的组合都将被认为在本申请中明确陈述，并且所有范围的端点都包括在该范围内并且可以独立组合。例如，如果浓度范围或有益范围表示为1％至50％，则意在陈述诸如2％至40％、10％至30％或1％至3％等值均明确列举在本说明书中。还应理解，如果将浓度或剂量表示为特定值，如1mg或10mg，则以在包括10％的变化。作为另一个实例，陈述的20％的浓度意在包括±10％的值。又如，如果陈述1:10至10:1的比值，则意在具体意指如1:9至9:1、1:8至8:1、1:7至7:1、1:6至6:1、1:5至5:1、1:4至4:1、1:3至3:1、1:2至2:1、1:1至2:1或2:5至3:5等比值。其中仅有一些实例被具体意指。除非另有说明，否则组合物的成分或组分的值表示为组分中每种成分的重量百分比。
除非另外指出或与上下文明显矛盾，否则本文所述的所有方法可以以适当的顺序执行。除非另外要求，否则使用任何和所有示例或示例性语言(例如，“如”和“等”)仅用于说明本发明，并不构成对本发明范围的限制。说明书中的任何语言都不应被解释为表示任何未要求保护的元素对于实施本文所使用的发明是必不可少的。
如本文所用的，术语“激素依赖性乳腺病症”、“激素依赖性生殖道病症”、“激素依赖性乳腺和生殖道病症”各自且总体地包括，但不限于，与需要降低的高雌激素水平或正常雌激素水平相关或对之敏感的任何乳腺或生殖道(妇科)病症、雌激素受体阳性(ER+)和/或孕酮受体阳性(PR+)的病症，例如乳房病症、子宫内膜异位、子宫纤维瘤(也称为平滑肌瘤)等。生殖道病症包括子宫内膜癌、卵巢癌、宫颈癌、子宫癌、阴道癌和外阴癌。术语“雌激素相关病症”和“雌激素受体相关病症”可以互换使用，以指代前述激素依赖性病症。所述病症可以主要或次要针对基础疾病，例如，前列腺癌或其他病症，如肝病。激素依赖性乳腺和生殖道病症包括，例如，McCune-Albright综合征，这是由GNAS基因突变影响骨骼、皮肤和几种产生激素(内分泌)的组织而引起的病症，通常导致被称为多骨性纤维异常增殖症的骨中的异常疤痕状(纤维)组织，携带此类突变的个体存在甲亢，并且女孩则经常导致性早熟。
如本文所用的，“乳房病症”意指乳房中的任何畸变或畸变丛。这样的畸变可以是增生性的、非增生性的、良性的或恶性的。乳房病症包括乳房良性病变(例如，增生)、乳房密度增加、男性乳腺发育症、乳痛和乳腺癌。良性乳房病变包括但不限于增生、异型、导管增生、小叶增生、非典型导管增生(ADH)和非典型小叶增生(ALH)。尽管没有癌变，但ADH和ALH可以表明容易患乳腺癌。
乳腺密度是通过视觉技术如乳房X线摄影术识别出的乳腺病症，并且反映出乳房内纤维腺组织的增加，即，乳腺基质和上皮细胞的过度生长。乳腺密度根据密度的严重程度分为4类——A、B、C和D类。它是乳腺癌的独立危险因素。在美国，至少有23个州要求医生告知受试者是否有致密型乳腺。尽管提醒受试者选择健康的生活方式，并定期进行乳房X光检查，以监测乳房的变化，但目前尚没有针对致密型乳腺的治疗方法。
男性乳腺发育症是一种常见的男性乳腺病况，反映出包括上皮增生在内的乳腺组织增生增加，无症状男性乳腺发育症的患病率在新生儿为60％至90％，在青少年中为50％至60％，并且在50至69岁的男性中高达70％(Therapeutics and Clinical RiskManagement 2011:7,145–148)。新生儿男性乳腺发育症通常在出生后4周内自行消退，并且至少一半的青春期男性会经历男性乳腺发育症，典型发病年龄为13至14岁(Tanner 3或4期)。男性乳腺发育症被认为是男性乳腺癌的危险因素。
此外，男性乳腺发育症常继发于基础病症，如前列腺癌、肝硬化和肝病、男性性腺功能减退症、甲状腺功能亢进、肾衰竭并且患者正经历血液透析、I型糖尿病等。此外，据报道，诸如抗雄激素药物或某些抗精神病药物本身可引起高达25％的男性乳腺发育症，并可以按照其类似激素的作用进行分类。例如，一种用于治疗前列腺癌的非甾体类抗雄激素药物——比卡鲁胺的最常见的副作用是男性乳腺发育症和乳房疼痛。
如本文所用的，“乳腺癌”意指乳腺细胞的任何恶性肿瘤。乳腺癌可以处于乳腺癌的任何阶段，包括癌前阶段、早期癌症、非转移性癌症、转移前癌症、局部晚期癌症和转移性癌症的阶段。存在几种类型的乳腺癌。示例性的乳腺癌包括但不限于导管原位癌(DCIS)、小叶原位癌(LCIS)、侵袭性(或侵袭性)小叶癌(ILC)、侵袭性(或侵袭性)导管癌(IDC)、微侵袭性乳腺癌(MIC)、炎性乳腺癌、ER阳性(ER+)乳腺癌、ER阴性(ER-)乳腺癌、HER2+乳腺癌、三阴性乳腺癌(TNBC)、腺样囊性(腺囊性)癌、低级腺鳞癌、髓样癌、粘液(或胶样)癌、乳头状癌、小管癌、化生性癌或微乳头状癌。单个乳腺癌肿瘤可以是这些类型的组合，或是侵袭性癌和原位癌的混合。
DCIS是最常见的非侵袭性乳腺癌。其涉及在乳腺导管内层的细胞。在DCIS中，细胞未扩散越过导管壁进入周围的乳房组织。约五分之一的新乳腺癌病例将会是DCIS。LCIS为癌前瘤形成。其可以指示侵袭性癌症倾向。LCIS仅占原位(导管或小叶)乳腺癌的约15％。
IDC是最具侵袭性的乳腺癌。正如名称所适用的，它是始于乳腺导管然后侵入周围脂肪组织的癌。约8至10种侵袭性乳腺癌为侵袭性导管癌。IDC常常通过手术以切除癌组织和放疗进行治疗。另外，化疗与免疫治疗的组合(例如他莫昔芬和曲妥珠单抗)经常用于治疗IDC。如果肿瘤大于4cm，则可进行根治性乳房切除术。
ILC是发生于乳房的小叶中并侵入周围组织的癌症。约十分之一的侵袭性乳腺癌为ILC。ILC通过手术以切除癌组织和放疗进行治疗。另外，化疗和免疫治疗的组合(例如他莫昔芬和曲妥珠单抗)经常用作治疗ILC的辅助疗法。
炎性乳腺癌占所有乳腺癌的约1％至3％。在炎性乳腺癌中，癌细胞阻塞皮肤中的淋巴管，导致乳房变红并感觉温热。受影响的乳房可变大或变硬、变软或发痒。炎性乳腺癌用化疗、免疫治疗、放疗且在一些情况下用手术进行治疗。
雌激素受体阳性(ER+)乳腺癌的特征为癌细胞表面上存在雌激素受体。ER+癌细胞的生长与雌激素的利用度有关(激素依赖性或激素敏感性乳腺癌)。大约所有乳腺癌中有80％是ER+乳腺癌。ER+乳腺癌的治疗选择包括阻断雌激素的化疗剂(例如他莫昔芬)。
本公开内容涉及制造(Z)-内昔芬游离碱的稳定制剂、(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的混合物(E/Z-混合物)及其盐的方法，以及它们的用途。本公开内容还涉及包含(Z)-内昔芬或其盐的口服组合物以及治疗有此需要的受试者的方法。本公开内容还提供了通过向受试者施用包含(Z)-内昔芬、E/Z-混合物或其盐的口服组合物来治疗患有激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道(妇科)病症或两者，或存在其风险的受试者的方法。
在一方面，本公开内容涉及包含内昔芬或其盐的口服组合物。本公开内容的组合物中包含的内昔芬可以是(Z)-内昔芬、(E)-内昔芬或其组合。在一方面，本公开内容涉及包含稳定的(Z)-内昔芬游离碱的组合物。
在一方面，本公开内容提供了工业上可扩展的制备(Z)-内昔芬游离碱、(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的混合物(E/Z-混合物)及其盐的方法。在一方面，工业上可扩展的方法是制备稳定的(Z)-内昔芬游离碱、E/Z-混合物及其盐的合成方法。在另一方面，本公开内容提供了制备包含稳定的(Z)-内昔芬游离碱、E/Z-混合物及其盐的组合物的方法。
在某些方面，本公开内容提供了(Z)-内昔芬游离碱的晶形和(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的混合物的晶形，以及包含本文所述晶形的内昔芬的药物组合物。
(Z)-内昔芬游离碱的合成
用于合成制备内昔芬的几种方法是本领域已知的。例如，在美国专利号9,333,190(Ahmad,Jina Pharmaceuticals)；WO 2008/070463(Ahmad,Jina Pharmaceuticals)，美国公开号2010/0112041(Ahmad,Jina Pharmaceuticals)，WO 2012/050263(Ahmad,JinaPharmaceuticals)，WO 2014/141292(Desai,Intas Pharmaceuticals)，WO 2017/070651(USA/Alchem Lab.Corp.)；WO 2009/120999A2(Kushner)，美国专利号8,063,249(Kushner,Olema Pharmaceuticals)，美国专利号7,531,578和8,119,695(Forman和Yu)，以及WO2012/050263(Song,CJ Cheiljedang Corp)中描述了内昔芬及其前药和盐的合成制备方法。
内昔芬的合成制备方法也在研究文献中报道。(Gauthier等人,J.Org.Chem,61,3890–3893(1996),Fauq等人,Bioorg Med Chem Lett.2010年5月15日；20(10):3036-3038)；Stearns等人,J.Natl.Cancer Inst.第95卷,第23号,2003；Johnson等人,BreastCancer Research and Treatment.85:151-159,2004；Ogawa,等人Chem.Pharm.Bull.39,911–916,1991)。然而，大规模工业可扩展制造的需求仍未满足。稳定的(Z)-内昔芬游离碱可以根据如下在实施例1至9中进一步描述的图式1制备。
图式1.(Z)-内昔芬游离碱的合成
Figure BDA0002485802470000241
脱甲基
在一方面，本公开内容涉及制备基本纯化的(Z)-内昔芬游离碱、E/Z-混合物或其盐的工业可扩展方法，包括使式(I)化合物——[4-[2-(二甲氨基)乙氧基]苯基](4-羟苯基)甲酮)(可从AstaTech Pharmaceuticals,Inc.,China获得)脱甲基，以形成式(II)化合物。因此，在一些实施方案中，工业方法包括通过用在惰性有机溶剂中的脱甲基剂和质子受体将[4-[2-(二甲氨基)乙氧基]苯基](4-羟苯基)甲酮)脱甲基以形成式(II)化合物来制备式(II)化合物。制备式(II)化合物、(Z)-内昔芬游离碱、E/Z-混合物或其盐的工业可扩展方法包括以每次反应1mg至1000kg的量将式(I)化合物脱甲基。
在一些实施方案中，可以通过使式(I)化合物与脱甲基剂反应而将式(I)化合物脱甲基。脱甲基剂是适合此目的的任何试剂。合适的脱甲基剂的示例包括N-碘代琥珀酰胺(NIS)、氯甲酸乙酯(如氯甲酸1-氯乙酯、氯甲酸二氯乙酯、氯甲酸三氯乙酯、氯甲酸α-氯乙酯(ACE-Cl))、氯甲酸乙烯酯(VO-Cl)、溴化氰(BrCN：冯·布劳恩反应)、偶氮二羧酸二乙酯、氯化吡啶鎓等。
在一些实施方案中，脱甲基剂是氯甲酸酯，其选自氯甲酸1-氯乙酯、氯甲酸二氯乙酯、氯甲酸三氯乙酯、氯甲酸α-氯乙酯(ACE-Cl)和氯甲酸乙烯酯(VO-Cl)。在其他实施方案中，脱甲基剂是氯甲酸乙酯，其选自氯甲酸乙酯，如氯甲酸1-氯乙酯、氯甲酸二氯乙酯、氯甲酸三氯乙酯和氯甲酸α-氯乙酯(ACE-Cl)。在至少一个实施方案中，脱甲基剂是氯甲酸1-氯乙基酯。
在一些实施方案中，将脱甲基剂添加至反应混合物中，其中式(I)化合物与脱甲基剂的wt/wt比为1:0.5至1:10。在其他实施方案中，脱甲基剂以式(I)化合物与脱甲基剂之比(wt/wt)为1:2至1:5的量存在。在至少一个实施方案中，脱甲基剂以式(I)化合物与脱甲基剂之比(wt/wt)为1:2的量存在。在至少一个实施方案中，脱甲基剂以式(I)化合物与脱甲基剂之比(wt/wt)为1:3.3的量存在。在其他实施方案中，脱甲基剂氯甲酸1-氯乙酯以式(I)化合物与脱甲基剂之比(wt/wt)为1:0.5至1:10的量存在。
脱甲基反应可以在质子受体存在下，在适合于脱甲基反应的惰性有机溶剂中进行。此类有机溶剂包括二氯甲烷、二氯乙烷、氯仿、四氯化碳、氯苯、乙醚、1,4-二噁烷、叔丁基甲基醚(TBME)、四氢呋喃(THF)、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、二甘醇二甲醚、硝基甲烷、1,2-二甲氧基乙烷(DME)、吡啶、丙酮、乙腈、苯、邻二甲苯、间二甲苯、对二甲苯、二甲苯、己烷、环己烷、庚烷、辛烷、壬烷和癸烷或其组合。在一方面，工业上可扩展的方法包括一种或多种用于脱甲基的惰性有机溶剂，其中式(I)化合物与惰性有机溶剂之比(wt/wt)为1:1至1:50。在一些实施方案中，脱甲基溶剂为THF，式(I)化合物与THF之比(wt/wt)为1:1至1:50。在其他实施方案中，THF以式(I)化合物与THF之比(wt/wt)为1:1至1:20的量存在。
适用于本公开内容的目的的质子受体包括，但不限于碳酸盐，如碳酸钠和碳酸钾，和碳酸氢盐，如碳酸氢钠和碳酸氢钾，质子海绵和乙基二异丙胺(N’,N-二异丙基乙胺，“DIPEA”)。在一方面，工业上可扩展的方法包括将质子受体添加至反应混合物中，其中式(I)化合物与质子受体的wt/wt比为1:0.5至1:10。在一些实施方案中，质子受体以式(I)化合物与质子受体之比(wt/wt)为1:1:8的量存在。
本领域技术人员将能够容易地确定本领域已知的适合于本公开内容的脱甲基反应的其他溶剂和质子受体。
脱甲基剂、用于脱甲基反应的溶剂和式(I)化合物可以以任何顺序添加。每种试剂可以单次推注或多次推注添加至合适的反应器中并搅拌。
在一些实施方案中，向已添加惰性有机溶剂THF和质子受体DIPEA以进行脱甲基反应的合适反应器中加入式(I)化合物，并冷却至0℃至20℃，随后添加一种或多种脱甲基剂。THF以1:1至1:20的wt/wt比添加，并且质子受体DIPEA以1:0.5至1:10的wt/wt比添加至脱甲基反应混合物中，其中wt/wt是相对于式(I)化合物。在一些实施方案中，将反应混合物冷却至不高于(NMT)15℃，然后缓慢添加一种或多种脱甲基剂。反应可以在惰性条件下进行，如在氮气或氩气下。
在一种或多种惰性有机溶剂中包含式(I)化合物、一种或多种脱甲基剂(例如，氯甲酸1-氯乙酯)的反应混合物可以在20℃至250℃的温度，如40℃至80℃、50℃至230℃、50℃至120℃和150℃至200℃下加热。在一些实施方案中，反应混合物在回流下加热。在其他实施方案中，式(I)化合物与脱甲基剂和质子受体反应不少于(NLT)5小时、NLT 8小时、NLT12小时、NLT 24小时、NLT 36小时、NLT48小时和NLT 72小时。在至少一个实施方案中，反应在回流下加热NLT 12小时。反应可以保持并储存直至进一步使用。在一些实施方案中，反应混合物在搅拌的同时在回流条件下保持不超过(NMT)24小时。
混合物可以在减压下经受一轮或多轮蒸馏。可以在NMT 100℃、NMT 95℃、NMT 90℃、NMT 85℃、NMT 80℃或NMT 70℃下用适合蒸馏的溶剂蒸馏，如乙酸乙酯、低级醇(非限制性示例包括甲醇、乙醇、正丙醇和异丙醇)、苯、丙酮、乙腈、甲苯、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷和氯仿。本领域技术人员将能够容易地确定用于此目的的其他合适的溶剂。
在至少一个实施方案中，用于蒸馏的溶剂为甲醇。作为非限制性示例，甲醇可用于在减压下进行2至5轮蒸馏的溶剂交换。
溶剂，如甲醇，可以用于蒸馏，每轮蒸馏中式(I)化合物与溶剂之比(wt/wt)为1:1至1:10。
然后，可通过在搅拌并加热回流的同时，将酸(式(I)化合物与酸的wt/wt比为1:1至1:10)添加至溶剂中，使混合物与溶剂/酸混合物反应。酸可以是任何合适的酸。HCl是适合于本公开内容目的的酸的示例。合适的溶剂/酸混合物的非限制性示例包括甲醇/HCl、乙醇/HCl、丙醇/HCl、异丙醇/HCl、甲醇/硫酸、甲醇/磷酸、乙醇/硫酸、乙醇/磷酸、丙醇/硫酸、丙醇/磷酸、异丙醇/硫酸、异丙醇/磷酸、甲醇/乙酸、乙醇/乙酸、丙醇/乙酸、异丙醇/乙酸、甲醇/甲酸、乙醇/甲酸、丙醇/甲酸和异丙醇/甲酸。在至少一个实施方案中，溶剂/酸混合物是甲醇/6N HCl。作为非限制性示例，甲醇/HCl混合物中的甲醇可以以式(I)化合物与溶剂/酸混合物中甲醇的wt/wt比为1:3.2的量添加，而甲醇/HCl混合物中的HCl可以是式(I)化合物与溶剂/酸混合物中HCl的wt/wt比为1:4的量。在至少一个实施方案中，以式(I)化合物与甲醇/6N HCl的wt/wt比为1:1至1:10如1:1至1:5的量添加甲醇/6N HCl混合物。
蒸馏可以在减压下进行NLT 5小时、NLT 8小时、NLT 10小时、NLT 12小时、NLT 14小时。蒸馏可以在NMT 70℃、NMT 75℃、NMT 80℃、NMT 85℃、NMT 90℃和NMT 90℃的温度下进行。
可将反应混合物保持并储存直至进一步使用。在一些实施方案中，反应混合物可以在搅拌的同时在回流条件下保持NMT 24小时。
反应混合物可以用中和剂中和，如氢氧化钠(NaOH)、氢氧化铵、氨甲基丙醇等，并过滤。所得的湿饼可以用水和有机溶剂如乙酸乙酯(EtOAc)洗涤，以获得式(II)化合物——(4-羟苯基)(4-(2-(甲氨基)乙氧基)苯基)甲酮。
中和剂可以是式(I)化合物与中和剂的wt/wt比为1:1至1:10的量。在一些实施方案中，中和剂是比例为1:1至1:10的8N氢氧化钠。在其他实施方案中，中和剂是比例为1:2至1:8的8N氢氧化钠。
在另一方面，制备(Z)-内昔芬游离碱、E/Z-混合物或其盐的工业可扩展方法包括用纯化水(1:1至1:5wt/wt)和有机溶剂如乙酸乙酯(EtOAc)(1:0.5至1:10wt/wt)洗涤过滤产物(式(II)化合物)的一个或多个步骤，其中wt/wt是相对于式(I)化合物。将湿饼在减压/真空下干燥。温度范围可为25℃至60℃。在一些实施方案中，干燥在NMT 50℃的温度下进行。
McMurry反应
在另一方面，本公开内容涉及制备(Z)-内昔芬游离碱、E/Z混合物及其盐的工业可扩展方法，包括使式(II)化合物经受McMurry反应，以提供式(III)化合物——E/Z-混合物(即，(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬游离碱的混合物)。
McMurry反应已被用于制备他莫昔芬(欧洲专利申请号168175)。本公开内容涉及一种工业可扩展的方法，其中式(II)化合物——(4-羟苯基)(4-(2-(甲氨基)乙氧基)苯基)甲酮经由在惰性有机溶剂中的钛盐如钛的氯化物盐(例如三氯化钛和四氯化钛(TiCl4))以及还原剂，由McMurry反应介导与苯基乙基酮偶联，以形成式(III)化合物的E/Z混合物。
可用于本公开的钛盐包括卤化钛(如三氯化钛(TiCl3)、四氯化钛(TiCl4)、碘化钛、溴化钛和氟化钛)、异丙氧基三氯化钛(IV)和异丙氧基钛。在一些实施方案中，钛盐是TiCl4。钛盐，如TiCl4，以式(II)化合物与钛盐的wt/wt比为1:0.1至1:12的量添加。
还原剂包括锌、锆、钒、铌、钼、钨、铝、镁、钾、锌铜偶、碱金属和碱土金属、丁基鎓、锂和氢化锂铝。在至少一个实施方案中，还原剂是锌。McMurry合成使用还原剂如锌方便地进行，其中式(II)化合物与还原剂的wt/wt比为1:0.1至1:10。在一些实施方案中，与钛盐相比，还原剂的比例过量。
McMurry合成可以在一种或多种惰性有机溶剂中进行。可用于McMurry反应的惰性有机溶剂包括二氯甲烷、二氯乙烷、氯仿、四氯化碳、氯苯、乙醚、1,4-二噁烷、叔丁基甲基醚(TBME)、四氢呋喃(THF)、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、二甘醇二甲醚、硝基甲烷、1,2-二甲氧基乙烷(DME)、吡啶、丙酮、乙腈、苯、邻二甲苯、间二甲苯、对二甲苯、二甲苯、己烷、环己烷、庚烷、辛烷、壬烷和癸烷或其组合。在一些实施方案中，惰性有机溶剂是式(II)化合物与溶剂的wt/wt比为1:1至1:50的量。在其他实施方案中，惰性有机溶剂是式(II)化合物与溶剂的wt/wt比为1:1至1:20的量。在一些实施方案中，用于McMurry反应的惰性有机溶剂是THF。在一些实施方案中，THF是式(II)化合物与THF的wt/wt比为1:1至1:20的量。
将钛盐和还原剂在惰性有机溶剂中混合以产生预混合物是有利的。将钛盐以一定速率添加至还原剂和惰性有机溶剂中，以使内部温度保持在NMT 75℃，如NMT 65℃、NMT 55℃、NMT 45℃、NMT40℃、NMT 35℃、NMT 30℃、NMT 25℃、NMT 20℃和NMT 15℃。因此，将惰性有机溶剂中的钛盐和还原剂合并，以产生预混合物。在一些实施方案中，将Zn、TiCl4和THF合并，以产生Zn/TiCl4/THF混合物。在至少一个实施方案中，将TiCl4添加到Zn和THF中并混合，将NMT 20℃的内部温度保持NLT 10分钟。
制备在惰性有机溶剂中的钛盐和还原剂还可以包括在惰性有机溶剂中加热钛盐和还原剂至20℃至250℃，如从40℃至80℃、从50℃到230℃、从50℃到120℃，以及从150℃到200℃的温度。在一些实施方案中，将惰性有机溶剂中存在的钛盐和还原剂在NLT60℃下加热。在一些实施方案中，制备在惰性有机溶剂中的钛盐和还原剂还包括在回流下在惰性有机溶剂中加热钛盐和还原剂。将惰性有机溶剂中的钛盐和还原剂在惰性条件下，如在氮气或氩气下，于回流下加热30分钟，如NLT 1小时、NLT 2小时、NLT 4小时、NLT 6小时和NLT8小时。
同样有利的是将式(II)化合物与惰性有机溶剂如THF以及苯基乙基酮预混合，然后使式(II)化合物与预混合的还原剂/钛盐/溶剂混合物如Zn/TiCl4/THF混合物反应，以形成式(III)化合物——(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的混合物。苯基乙基酮可以以式(II)化合物与苯基乙基酮的wt/wt比为1:0.01至1:5的量添加。惰性有机溶剂可以是式(II)化合物与溶剂的wt/wt比为1:1至1:20的量。使步骤(a)的式(II)化合物与钛盐和还原剂在有机溶剂中在回流下反应NLT 0.5小时、NLT 1小时、NLT 2小时、NLT 4小时、NLT 6小时、NLT 8小时、NLT 12小时、NLT 24小时和NLT 48小时。在至少一个实施方案中，将式(II)化合物与THF和苯基乙基酮混合，并与Zn、TiCl4、THF的预混合物反应，并在回流下加热NLT 2小时。在另一个实施方案中，将式(II)化合物与THF和苯基乙基酮混合，并如上所述与Zn/THF/TiCL4混合物反应，并在回流下加热NLT 8小时。然后可以将反应混合物冷却至0℃至35℃。
然后，可以使反应混合物中的(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的混合物经受萃取纯化、蒸馏和结晶，以提供纯化的(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬混合物。通过用惰性有机溶剂如THF和MeTHF萃取，或通过添加盐，如碳酸钾、氯化铵、氯化钠、氢氧化钠至反应混合物中并用惰性有机溶剂如THF和MeTHF萃取，可以使反应混合物中的(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的混合物经受萃取纯化。
在一些实施方案中，将反应混合物用氯化铵，如25％氯化铵(1:1至1:30wt/wt)；二氧化硅
Figure BDA0002485802470000311
床(1:0.01至1:5wt/wt)；和/或溶剂，如THF(1:1至1:10wt/wt)萃取一次或多次。在其他实施方案中，将反应混合物用碳酸钾(K2CO3)如40％K2CO3(1:1至1:10wt/wt)和MeTHF(1:1至1:10wt/wt)萃取一次或多次。在一些实施方案中，E/Z混合物还可以用NaOH萃取，如1N NaOH(1:1至1:20wt/wt)。在至少一个实施方案中，可以将NaCl(1:0.1至1:0.5wt/wt)添加到1N NaOH中以进行萃取步骤。
在一些实施方案中，反应混合物还可以用THF或MeTHF萃取一次或多次。在至少一个实施方案中，反应混合物用MeTHF萃取3次或更多次。申请人发现，MeTHF出乎意料地适合于萃取(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬混合物的步骤，其提供了更高产率的(Z)-内昔芬和(E)-内昔芬的纯化混合物。在至少一个实施方案中，还可以用20％氯化钠(1:1至1:10wt/wt)萃取混合物。
接下来可以使反应混合物经受2至5轮溶剂交换并用合适的溶剂，如乙酸乙酯、IPA和IPA/PPW(相对于式(III)化合物为1:1至1:10wt/wt)进行蒸馏。蒸馏可在减压/真空下于30℃至90℃的温度下进行。在一些实施方案中，可以在NMT 30℃、NMT 35℃、NMT 40℃、NMT45℃、NMT 50℃、NMT 55℃、NMT 60℃、NMT 65℃、NMT 70℃、NMT 75℃、NMT 80℃和NMT 90℃的温度下进行蒸馏，并过滤。过滤的产物可以用溶剂如EtOAc、IPA、IPA/PPW或正庚烷洗涤，然后用结晶体系如EtOAc/正庚烷(1:2v/v)或IPA/正庚烷(1:2.7v/v)结晶，其中式(III)化合物与EtOAc/正庚烷或IPA/正庚烷的wt/wt比为1:1至1:20，并且例如在NMT 60℃下干燥，以提供式(III)化合物——(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬游离碱的结晶固体混合物。
在另一方面，本公开内容涉及一种制造或再平衡E/Z比为约1:1(45:55至55:45)的E/Z混合物的工业可扩展方法。可以在合适的反应器中加入溶解在惰性有机溶剂如乙酸乙酯中的式(III)化合物，该(III)化合物在如上所述的McMurry反应中制备。式(III)化合物可以具有99:1至60:40的E/Z比。混合物可以在40℃至85℃的温度范围内浓缩。在一些实施方案中，混合物在NMT 75℃的温度下浓缩直到体积达到5vol。将混合物加热至回流，然后冷却至40℃至60℃的温度。在一些实施方案中，混合物的温度被冷却至50±5℃。式(III)可以将化合物与正庚烷的比例为1:1至1:20的正庚烷缓慢添加到混合物中，然后将混合物冷却至0±5℃。可以在0±5℃下将混合物搅拌NLT 0.5小时，如NLT 1小时、NLT 2小时、NLT 4小时、NLT 8小时、NLT 12小时或NLT 24小时。可以将混合物过滤并用乙酸乙酯/正庚烷(1:2v/v)洗涤，其中式(III)化合物与乙酸乙酯/正庚烷的wt/wt比为1:1至1:10。湿饼可在减压下干燥，以提供E/Z比为约1:1的E/Z-内昔芬混合物。干燥可以在30℃至70℃的温度下进行。在一些实施方案中，湿饼在NMT 60℃下的减压或真空下干燥，以提供E/Z比为约1:1(45:55至55:45)的E/Z-内昔芬混合物。
在另一方面，式(III)化合物可以进一步纯化或富集或再平衡，以获得如下所述的基本纯的(Z)-内昔芬。
(Z)-内昔芬游离碱的富集纯化
在另一方面，本公开内容涉及通过富集和纯化来制造(Z)-内昔芬游离碱的工业可扩展的方法。如本文所述，可以使用示例性图式1的步骤3的方法，以及如实施例1、2、4和9中进一步所述，进行(Z)-内昔芬的工业可扩展的富集和纯化。用于分级结晶的(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的起始混合物可以具有任何E/Z比，例如，E/Z比为99:1至1:10。在一些实施方案中，起始(E)/(Z)-内昔芬混合物的E/Z比为30:70至70:30。在一些实施方案中，起始(E)/(Z)-内昔芬混合物的E/Z比为99:1至1:99。在一些实施方案中，起始(E)/(Z)-内昔芬混合物的E/Z比为51:1、1:1.8或1:5.6。
E/Z混合物可以是如上所述获得的式(III)化合物，或者它可以来自商业来源(例如，来自Sigma-Aldrich)。使(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的混合物(E/Z-混合物)经受分级结晶，以获得第一结晶固体和富集(Z)-内昔芬游离碱的第一母液(实施例1)。使用能够研磨(triturating)内昔芬及其衍生物的第一溶剂进行分级结晶，使(Z)-内昔芬倾向于留在滤液中。合适的第一溶剂是那些差异地溶解内昔芬异构体的溶剂，并且包括，但不限于，乙酸乙酯、异丙醇、异丙醇/PPW、乙腈、乙腈/PPW和二氯甲烷。在一些实施方案中，第一溶剂是乙酸乙酯。添加第一溶剂，例如乙酸乙酯，其中式(III)化合物与第一溶剂的wt/wt比为1:1至1:20。在一些实施方案中，将式(III)化合物溶解在第一溶剂中，并加热至50℃至80℃的温度，并冷却至NMT 35℃。
令人惊奇的发现是，混合物的酸化增强了(E)-内昔芬向(Z)-内昔芬的转化。因此，在一些实施方案中，式(III)化合物用酸预处理，然后用碱中和。
作为非限制性示例，在合适的反应器中加入其中添加了第一溶剂的式(III)化合物，并冷却至0℃至5℃。接下来，可以缓慢添加酸，如HCl或TFA。在一些实施方案中，将酸以式(III)化合物与酸的wt/wt比为1:1至1:5的量添加至E/Z-内昔芬混合物。然后可以在搅拌的同时将反应混合物在50℃至70℃的温度下加热。在一些实施方案中，反应在回流下进行。反应可以进行NLT 4小时，如NLT 6小时、NLT 12小时、NLT 24小时和NLT 48小时。将反应混合物冷却至0℃–5℃，并用中和剂中和。
在一些实施方案中，中和剂以式(III)化合物与中和剂的wt/wt比为1:1至1:5的量添加至反应混合物。合适的中和剂包括氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、氨甲基丙醇等。在一些实施方案中，中和剂是8N氢氧化钠。反应混合物的pH优选为碱性。在一些实施方案中，pH为≥≥为，如≥≥为或≥≥为。
在一些实施方案中，将(Z)-内昔芬萃取至有机层中并收集，并且用第一溶剂如乙酸乙酯(以1:1至1:10的式(III)化合物与第一溶剂的wt/wt比添加)洗涤水相一次或多次。合并有机层，并用盐水(20％NaCl；以1:1至1:10的式(III)化合物与NaCl的wt/wt比添加)洗涤一次或多次。将有机层用活性炭处理，并在二氧化硅
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床上过滤(以1.01至1:0.1的式(III)化合物与二氧化硅的wt/wt比添加)。用第一溶剂(以1:1至1:10的式(III)化合物与第一溶剂的wt/wt比添加)再次洗涤产物一次或多次，并蒸馏。蒸馏可以在50℃至80℃的温度下进行。在一些实施方案中，温度可以是NMT 75℃。
如实施例1及表2和表3显示，第一母液富集(Z)-内昔芬。在一些实施方案中，与E-内昔芬和Z-内昔芬的混合物的E/Z比相比，第一母液富集至少50％。在其他实施方案中，与E-内昔芬和Z-内昔芬的混合物的E/Z比相比，第一母液的(Z)-内昔芬富集至少70％。
可以通过浓缩第一母液，或者将第一溶剂从第一母液交换一次或多次来使第一母液经受重结晶，以获得第二结晶固体和第二母液(表5)。使用用于交换的第二溶剂进行重结晶。第二溶剂以式(III)化合物与第二溶剂的wt/wt比为1:1至1:10的量添加，以产生浆。合适的第二溶剂包括IPA、IPA/PPW、丙酮、丙酮/MTBE、乙醇、EtOAc、EtOAc/正庚烷。在一些实施方案中，第二溶剂是IPA。出人意料的是，发现IPA将(Z)-内昔芬研磨成固体级分的水平高于EtOAc。因此，在一些实施方案中，当第一溶剂是EtOAc时，第二溶剂是IPA或IPA/PPW。这可用于先将(Z)-内昔芬从EtOAc引入滤液(第一母液)，并且然后从IPA或IPA/PPW引入固体级分。在至少一个实施方案中，第二溶剂是IPA/PPW(表7)。在又一个实施方案中，第二溶剂是丙酮/MTBE。第二结晶固体是(Z)-内昔芬——(Z)-4-(1-(4-(2-(甲氨基)乙氧基)苯基)-2-苯基丁-1-烯基)苯酚，即式(IV)化合物。(分子量373.49；分子式：C25H27NO2；熔点139℃–143℃)。第二结晶固体是>70％的(Z)-内昔芬，如>75％的(Z)-内昔芬、>80％的(Z)-内昔芬或>90％的(Z)-内昔芬。在一些实施方案中，第二结晶固体是>90％的(Z)-内昔芬。
可以任选地使第二结晶固体经受重结晶以获得第三结晶固体，(Z)-内昔芬(表5)。第三结晶固体可以是>90％的(Z)-内昔芬，如>91％的(Z)-内昔芬、>92％的(Z)-内昔芬、>93％的(Z)-内昔芬、>94％的(Z)-内昔芬、>95％的(Z)-内昔芬、>96％的(Z)-内昔芬、>97％的(Z)-内昔芬、>98％的(Z)-内昔芬或>99％的(Z)-内昔芬。在一些实施方案中，第三结晶固体为>90％的(Z)-内昔芬。在一些实施方案中，第三结晶固体为>95％的(Z)-内昔芬。使用第三溶剂进行该任选的重结晶。第三溶剂选自乙醇、甲醇、乙酸乙酯、IPA、IPA/PPW、丙酮、丙酮/MTBE和EtOAc/正庚烷。
在一方面，本公开内容涉及在使用之前预热第一溶剂、第二溶剂和第三溶剂(表2)。在一些实施方案中，第一溶剂、第二溶剂和第三溶剂的一种或多种可以各自独立预热至40℃至80℃的温度。分级结晶和重结晶步骤还可以包括在60℃至80℃下蒸馏和/或将所得溶液冷却至0℃至35℃的温度的步骤。
应理解，在一些实施方案中，可以使如上所述获得的第一、第二和第三结晶固体以及第二母液进一步经受一次或多次的如上所述的分级结晶和重结晶，以获得纯化的(Z)-内昔芬。还应理解，可以任选地使用柱色谱技术对获得的第一、第二和/或第三结晶固体再处理，以获得更多(Z)-内昔芬。
在某些实施方案中，本文所述的工业上可扩展的方法独立地包括如本文示例中详述的其他步骤或程序(例如，除去反应副产物，或后处理(workup)、分离或纯化反应产物)。在一些实施方案中，(Z)-内昔芬游离碱具有＜2％、＜1％和＜0.5％的杂质。在其他实施方案中，式(III)化合物具有＜2％、＜1％和＜0.5％的杂质。
本领域技术人员将认识到可以改变上述过程的几个参数，以获得期望的结果。这些参数包括例如，反应组分和溶剂的纯化方法和手段；所述反应组分和溶剂添加反应混合物的顺序，所述反应组分和溶剂的反应持续时间；以及反应过程中反应组分和溶剂的搅拌、混合或搅动的温度和速度。
据发现，本文方法所体现的过程(还包括特定的过程步骤)满足以下标准中的一个或多个：与已知的制造式(II)、(III)和(IV)化合物的方法相比，更稳定，更安全，更简单，更高产以及更经济。通过以下公开的方法制得的(Z)-内昔芬在5℃和25℃、相对湿度60％(25℃/60％RH)下至少稳定9个月，并且在40℃/75％RH下至少稳定3个月(实施例9)。较高温度下的稳定性表明长期稳定性。因此，通过本公开内容的方法制备的(Z)-内昔芬游离碱稳定至少6个月，如至少9个月、至少12个月或至少18个月。此外，本文所述的方法被认为在多千克操作中可扩展，使其适合于商业生产。
内昔芬盐
在另一方面，本申请提供了内昔芬盐和制备内昔芬盐的方法。本领域已知的内昔芬盐包括内昔芬的盐酸盐(Fauq等人,Bioorg Med Chem Lett.2010年5月15日；20(10):3036-3038)和柠檬酸盐(美国专利号9333190；美国公开号2010/0112041)，并正在评估受试者的口服施用。
在某些实施方案中，本公开内容提供了内昔芬的阴离子盐，选自槟榔碱、苯磺酸盐、碳酸氢盐、酒石酸氢盐、丁基溴、柠檬酸盐、樟磺酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、乙醇酰阿散酸盐、己基间苯二酚盐、哈胺、氢溴酸盐、盐酸盐、羟萘甲酸酯、羟乙磺酸盐、苹果酸、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基溴、甲基溴、甲酯硝酸盐、甲基硫酸盐、黏酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、巴莫酸盐(双羟萘酸盐)、泛酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、多聚半乳糖醛酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、硫酸盐、鞣酸盐、茶氯酸盐和三乙基碘。
在其他实施方案中，本公开内容提供了内昔芬的阳离子盐，选自苄星、氯咪唑、氯普鲁卡因、胆碱、二乙胺、二乙醇胺、乙二胺、甲葡胺、哌嗪、普鲁卡因、铝、钡、铋、锂、镁、钾和锌。
本公开内容的内昔芬盐可以使用如上所述制备的式(I)、(II)、(III)和(IV)的任何化合物制得。
内昔芬葡糖酸盐
在一些实施方案中，本公开内容提供了内昔芬的葡糖酸盐，或其化学等同物。因此，在至少一个实施方案中，包含在本公开内容的组合物中的内昔芬是内昔芬葡糖酸盐或其化学等同物。除非另有说明，否则应理解，当在本文中提及内昔芬葡糖酸盐时，其化学等同物也将包括在内。
为了本公开内容的目的，内昔芬葡糖酸盐的化学等同物包括内昔芬分子与葡糖酸部分之间的所有阴离子、阳离子和非离子反应复合物。此类复合物通常与内昔芬分子的羟基基团反应。葡糖酸部分包括D-葡糖酸、葡糖酸、糖原酸、聚糖-A-内酯等。在一些实施方案中，葡糖酸部分是药学上可接受的葡糖酸盐。这些盐包括葡糖酸钙、葡糖酸钠，以及碱金属和碱土金属的盐，如葡糖酸钾、葡糖酸镁、葡糖酸锂等。
葡糖酸盐的立体异构体，D-型和L-型，均包含在本公开内容中。在一些实施方案中，包含在本公开内容的组合物中的内昔芬葡糖酸盐选自(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐、(Z)-内昔芬L-葡糖酸盐、(E)-内昔芬D-葡糖酸盐、(E)-内昔芬L-葡糖酸盐及其组合。在一些实施方案中，药物组合物包含(Z)-内昔芬L-葡糖酸盐。在某些实施方案中，药物组合物包含(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐。除非另有说明，否则组合物可以以外消旋混合物、纯立体异构体(例如，对映异构体和非对映异构体)、立体异构体富集的混合物等形式存在。当在本文中显示或命名特定的立体异构体时，本领域技术人员将理解，除非另外指明，否则本公开内容的组合物中可以存在少量其他立体异构体，前提条件是此类其他异构体的存在不会消除组合物作为整体的效用。单个异构体可以通过本领域众所周知的多种方法获得，包括使用合适的手性固定相或载体进行手性色谱法，或通过化学方法将其转化为非对映异构体，通过常规方法如色谱法或重结晶分离非对映异构体，然后再生原始的立体异构体。
本公开内容还包括制备内昔芬葡糖酸盐或其化学等同物的方法，包括将内昔芬与葡糖酸部分混合以产生内昔芬葡糖酸盐。制备治疗剂的葡糖酸盐的方法是本领域已知的(例如，美国公开号2002/0127665)。
在一些实施方案中，通过将作为游离碱的内昔芬(如通过上述方法制备的(Z)-内昔芬)的乙醇浆与D-葡糖酸的水溶液混合，可以获得内昔芬D-葡糖酸盐((Z)-内昔芬D-葡糖酸盐)，所述D-葡糖酸的水溶液通过在70℃加热15-30分钟将20％w/v的D-葡糖酸内酯在水中水解而获得。在一些实施方案中，使用最小体积的乙醇，并且每1g内昔芬游离碱添加5mlD-葡糖酸水溶液。然后继续搅拌直至获得澄清溶液。然后将该溶液的所需体积添加至一种或多种其他赋形剂中，以产生“活性成分”是(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐或(Z)-内昔芬L-葡糖酸盐的制剂。该盐可以通过本领域已知的和本文公开的任何方法纯化。
纯化的(Z)-内昔芬游离碱或(E)/(Z)-内昔芬的混合物两者都可用于制备内昔芬葡糖酸盐的目的。(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐或(Z)-内昔芬L-葡糖酸盐的溶液也可以通过分级结晶或重结晶从本文所述的(E)/(Z)-内昔芬葡糖酸盐的混合物纯化(实施例1-3)，以获得固体的纯化(Z)-内昔芬盐。固体盐可在氮气下于-5℃储存，直至进一步使用。
本领域技术人员将理解，其他内昔芬盐也可以用作具有葡糖酸盐部分或葡糖酸盐的起始原料，以产生内昔芬葡糖酸盐或其化学等同物。
可以使用如上所述制备的(Z)-内昔芬或用容易获得的起始反应物制备内昔芬葡糖酸盐或其化学等同物。例如，粗内昔芬盐酸盐(>98％)和葡糖酸钠可以容易地从美国Sigma-Aldrich,USA获得。
在一些实施方案中，将内昔芬盐酸盐和葡糖酸钠溶解在合适的溶剂中，以产生内昔芬葡糖酸盐或其化学等同物。在至少一个实施方案中，包含内昔芬葡糖酸盐的组合物还包含内昔芬盐酸盐。在其他实施方案中，将(E)/(Z)-内昔芬混合物(式(III)化合物)和葡糖酸钠溶解在合适的溶剂中，以提供内昔芬葡糖酸盐或其化学等同物。
用于制备内昔芬葡糖酸盐或其化学等同物的合适的溶剂包括但不限于有机溶剂如醇、丙酮、DMSO、聚乙二醇、脂肪酸和脂肪醇及其衍生物、羟基酸、吡咯烷酮、脲、植物油、动物油如鱼油、精油等或其混合物，以及水混溶性溶剂如水混溶性醇、二甲亚砜、二甲基甲酰胺、水混溶性醚如四氢呋喃、水混溶性腈如丙烯腈、水混溶性酮如丙酮或甲基乙基酮、酰胺如二甲基乙酰胺、丙二醇、甘油、聚乙二醇400、糖原质(glycofurol)、四甘醇等或其混合物。
对于制备内昔芬葡糖酸盐有用的水混溶性溶剂为甘油、乙醇、丙醇、异丙醇、丙二醇、聚乙二醇或其混合物。其他有用的溶剂包括二甘醇单乙醚(transcutol)；亚烷基二醇，如二丙二醇、丙二醇、聚乙二醇如PEG 300、400、3395、4450等；异山梨醇二甲醚；以及脱水醇。在一些实施方案中，溶剂为脱水醇，如无水乙醇。在某些实施方案中，溶剂的量足以溶解内昔芬(游离碱、盐)和葡糖酸盐。溶剂的浓度也可根据需要进行调整。反应可以在室温和大气压下进行。
可用于制备内昔芬葡糖酸盐或其化学等同物的内昔芬游离碱或内昔芬盐(如内昔芬盐酸盐等)和葡糖酸盐(如葡糖酸钠等)的量可以根据所用反应物的量而变化。所得的内昔芬葡糖酸盐将有1:1比例的内昔芬：葡糖酸盐部分。
在一些实施方案中，用于制备内昔芬葡糖酸盐的内昔芬或内昔芬盐的量按总组合物的重量(wt/wt)计为0.01％至40％(例如，从1％至10％，或从3％至5％)。在一些实施方案中，用于制备内昔芬葡糖酸盐的葡糖酸盐为0.01％至40％(wt/wt)(例如，从1％至10％(wt/wt)，或从3％至5％(wt/wt))。本领域的技术人员将以本领域和本公开内容的技术和知识为指导，包括但不限于有效达到期望产率的反应物的量。
晶形
在某些方面，本公开内容提供了内昔芬的晶形，包括(Z)-内昔芬游离碱的晶形以及(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的混合物的晶形。本公开内容还提供了包含本文所述晶形的内昔芬的药物组合物。内昔芬的晶形可以提供生物利用度和稳定性的优点，适合用作药物组合物中的活性成分。制药药物物质或活性成分的晶体结构变化可以影响制药药物产物或活性成分的溶解速率(其可以影响生物利用度等)、可制造性(例如，易于处理，能够持续制备已知强度的剂量)和稳定性(例如，热稳定性、保质期等)。这些变化可以影响不同剂量或递送形式的药物组合物的制备或配制，如固体口服剂型，包括片剂和胶囊。与其他形式如非晶体或无定形形式相比，晶形可以提供所需或合适的吸湿性、粒度控制、溶解速率、溶解度、纯度、物理和化学稳定性、可制造性、产率和/或工艺控制。因此，内昔芬的晶形可以提供一些优势，如：改善活性剂的制造过程，或化合物或活性成分的药物产品形式的稳定性或可储存性，以及/或者作为活性剂具有适当的生物利用度和/或稳定性。
已发现使用某些溶剂和分级结晶方法可以产生内昔芬的不同多晶型形式，包括多晶型形式I、II和III中的任何一种或多种，其可以表现出上述一种或多种有利的特性。下面更详细地描述了本文所述的多晶型物的制备方法以及这些多晶型物的表征。
式III，形式I
在某些方面，本公开内容提供了式(III)化合物的多晶型形式I，其中组合物中至少90重量％的式(III)化合物是(Z)-异构体(即，(Z)-内昔芬)。在一些实施方案中，多晶型形式I表现出基本如图9或图10所示的X射线粉末衍射(XRPD)图。在一些实施方案中，多晶型形式I的XRPD图包含至少两个、至少三个、至少有四个、至少五个或至少六个主峰，基本如图9或图10所示。
当提及例如XRPD图时，术语“基本如……所示”包括不一定与本文所描绘的那些图相同的图，但是当一个本领域普通技术人员考虑时，该图落在实验误差或偏差的范围内。XRPD峰的相对强度可以根据粒径、样品制备技术、样品安装程序和所使用的特定仪器的不同而有所不同。此外，仪器变化和其他因素可能影响2θ(2θ)值。因此，当提供指定的2θ角时，应理解，指定的2θ角可以以指定值±0.5°，如±0.4°、±0.3°、±0.2°或±0.1°变化。如本文所用，“主峰”是指相对强度大于30％如大于35％的XRPD峰。相对强度以感兴趣的峰的峰强度与XRPD图中最大峰的峰强度之比计算。
在某些实施方案中，多晶型形式I的特征在于X射线粉末衍射图包含2θ在16.8±0.3°、17.1±0.3°和21.8±0.3°的主峰。在一些实施方案中，多晶型形式I的特征在于X射线粉末衍射图包含2θ在16.0±0.3°、18.8±0.3°和26.5±0.3°的峰。在一些实施方案中，多晶型形式I的特征在于X射线粉末衍射图包含2θ在16.8±0.3°、17.1±0.3°和21.8±0.3°的主峰，以及2θ选自16.0±0.3°、18.8±0.3°和26.5±0.3°的至少一个峰。在一些实施方案中，多晶型形式I的特征在于X射线粉末衍射图包含2θ在12.3±0.3°、28.0±0.3°和29.0±0.3°的峰。在一些实施方案中，多晶型形式I的特征在于X射线粉末衍射图包含2θ在16.8±0.3°、17.1±0.3°和21.8±0.3°的主峰，以及2θ选自12.3±0.3°、28.0±0.3°和29.0±0.3°的至少一个峰。在一些实施方案中，多晶型形式I的特征在于X射线粉末衍射图包含2θ在16.8±0.3°、17.1±0.3°和21.8±0.3°的主峰，以及2θ选自12.3±0.3°、16.0±0.3°、18.8±0.3°、26.5±0.3°、28.0±0.3°和29.0±0.3°的至少一个峰。在一些实施方案中，多晶型形式I的特征在于X射线粉末衍射图包含2θ在16.8±0.3°、17.1±0.3°和21.8±0.3°的主峰，以及2θ在12.3±0.3°、16.0±0.3°、18.8±0.3°、26.5±0.3°、28.0±0.3°和29.0±0.3°的峰。
在某些实施方案中，本公开内容提供了包含多晶型形式I的组合物。组合物中大于90重量％、95重量％或99重量％的式(III)化合物可以是多晶型形式I。在一些实施方案中，组合物包含0.01mg至200mg的多晶型形式I。在一些实施方案中，组合物包含约1mg、2mg、4mg、6mg、10mg或20mg的多晶型形式I。
式III，形式II
在某些方面，本公开内容提供了式(III)化合物的多晶型形式II，其中组合物包含式(III)化合物的(E)-异构体和(Z)-异构体(即，(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬)，E/Z比在0.9和1.3之间，如约1.1。在一些实施方案中，多晶型形式II表现出基本如图11或图12所示的X射线粉末衍射(XRPD)图。在一些实施方案中，多晶型形式II的XRPD图包含至少两个、至少三个、至少有四个、至少五个或至少六个主峰，基本如图11或图12所示。
在某些实施方案中，多晶型形式II的特征在于X射线粉末衍射图包含2θ在7.0±0.3°、11.9±0.3°、14.0±0.3°和18.4±0.3°的主峰。在一些实施方案中，多晶型形式II的特征在于X射线粉末衍射图包含2θ在22.0±0.3°的峰。在一些实施方案中，多晶型形式II的特征在于X射线粉末衍射图包含2θ在7.0±0.3°、11.9±0.3°、14.0±0.3°和18.4±0.3°的主峰和2θ在22.0±0.3°的峰。在一些实施方案中，多晶型形式II的特征在于X射线粉末衍射图包含2θ选自6.6±0.3°、13.3±0.3°和20.0±0.3°的至少一个峰。在一些实施方案中，多晶型形式II的特征在于X射线粉末衍射图包含2θ在7.0±0.3°、11.9±0.3°、14.0±0.3°和18.4±0.3°的主峰，以及2θ选自6.6±0.3°、13.3±0.3°和20.0±0.3°的至少一个峰。在一些实施方案中，多晶型形式II的特征在于X射线粉末衍射图包含2θ在7.0±0.3°、11.9±0.3°、14.0±0.3°和18.4±0.3°的主峰，以及2θ选自6.6±0.3°、13.3±0.3°、20.0±0.3°和22.0±0.3°的至少一个峰。在一些实施方案中，多晶型形式II的特征在于X射线粉末衍射图包含2θ在7.0±0.3°、11.9±0.3°、14.0±0.3°和18.4±0.3°的主峰和2θ在6.6±0.3°、13.3±0.3°、20.0±0.3°和22.0±0.3°的峰。
在某些实施方案中，本公开内容提供了包含多晶型形式II的组合物。组合物中大于90重量％、95重量％或99重量％的式(III)化合物可以是多晶型形式II。在一些实施方案中，组合物包含0.01mg至200mg的多晶型形式II。在一些实施方案中，组合物包含约1mg、2mg、4mg、6mg、10mg或20mg的多晶型形式II。
式III，形式III
在某些方面，本公开内容提供了式(III)化合物的多晶型形式III，其中组合物包含式(III)化合物的(E)-异构体和(Z)-异构体(即，(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬)，E/Z比在0.9和1.3之间，如约1.1。在一些实施方案中，多晶型形式III表现出基本如图13所示的X射线粉末衍射(XRPD)图。在一些实施方案中，多晶型形式III的XRPD图包含至少两个、至少三个、至少四个、至少有五个或至少六个主峰，基本如图13所示。
在某些实施方案中，多晶型形式III的特征在于X射线粉末衍射图包含2θ在11.9±0.3°、13.9±0.3°、17.1±0.3°和17.7±0.3°的主峰。在一些实施方案中，多晶型形式III的特征在于X射线粉末衍射图包含2θ在25.3±0.3°的峰。在一些实施方案中，多晶型形式III的特征在于X射线粉末衍射图包含2θ在11.9±0.3°、13.9±0.3°、17.1±0.3°和17.7±0.3°的主峰和2θ在25.3±0.3°的峰。在一些实施方案中，多晶型形式III的特征在于X射线粉末衍射图包含2θ选自18.2±0.3°、22.5±0.3°和26.8±0.3°的至少一个峰。在一些实施方案中，多晶型形式III的特征在于X射线粉末衍射图包含2θ在11.9±0.3°、13.9±0.3°、17.1±0.3°和17.7±0.3°的主峰，以及2θ选自18.2±0.3°、22.5±0.3°和26.8±0.3°的至少一个峰。在一些实施方案中，多晶型形式III的特征在于X射线粉末衍射图包含2θ在11.9±0.3°、13.9±0.3°、17.1±0.3°和17.7±0.3°的主峰，以及2θ选自18.2±0.3°、22.5±0.3°、25.3±0.3°和26.8±0.3°的至少一个峰。在一些实施方案中，多晶型形式III的特征在于X射线粉末衍射图包含2θ在11.9±0.3°、13.9±0.3°、17.1±0.3°和17.7±0.3°的主峰和2θ在18.2±0.3°、22.5±0.3°、25.3±0.3°和26.8±0.3°的峰。
在某些实施方案中，本公开内容提供了包含多晶型形式III的组合物。组合物中大于90重量％、95重量％或99重量％的式(III)化合物可以是多晶型形式III。在一些实施方案中，组合物包含0.01mg至200mg的多晶型形式III。在一些实施方案中，组合物包含约1mg、2mg、4mg、6mg、10mg或20mg的多晶型形式III。
内昔芬游离碱组合物
在一方面，本公开内容提供了稳定的(Z)-内昔芬游离碱或其盐，以及包含(Z)-内昔芬游离碱或其盐的组合物。在一些实施方案中，药物组合物包含主要作为(Z)-内昔芬游离碱的内昔芬。
在某些实施方案中，组合物可以包含作为(Z)-内昔芬游离碱的内昔芬，其为组合物中总内昔芬的至少0.1％、至少0.2％、至少0.3％、至少0.4％、至少0.5％、至少1％、至少5％、至少10％、至少20％、至少25％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％、至少99.99％或100％(wt/wt)。在至少一种组合物中，组合物包含为组合物中总内昔芬的>90％(wt/wt)的(Z)-内昔芬游离碱。在另一个实施方案中，组合物包含为组合物中总内昔芬的>95％(wt/wt)的(Z)-内昔芬游离碱。在又一个实施方案中，组合物包含为组合物中总内昔芬的>96％、>97％、>98％、>99％或>99.5％(wt/wt)的(Z)-内昔芬游离碱。
在其他实施方案中，包含内昔芬的组合物包含为组合物的0.01％至20％、0.05％至15％或0.1％至10％(wt/wt或w/v)的(Z)-内昔芬。在至少一个实施方案中，包含内昔芬的组合物包含为组合物的0.01％至20％(wt/wt或w/v)的(Z)-内昔芬。在各种其他实施方案中，包含内昔芬的组合物包含为组合物的0.01％、0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％、0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1％、2％、3％、4％、5％、10％或20％(wt/wt或w/v)的(Z)-内昔芬。
在一方面，包含(Z)-内昔芬的组合物还包含(E)-内昔芬。在一些实施方案中，组合物中的内昔芬的(E)-内昔芬与(Z)-内昔芬之比(E/Z比)为1:99；5:95；10:90、15:85；20:80；25:75；30:70；40:70；45:55；50:50；55:45；60:40；65:45；和70:30。在其他实施方案中，组合物包含E/Z比为10:90至70:30的内昔芬。在其他实施方案中，组合物包含E/Z比为45:55至55:45的内昔芬。
除非前缀(Z)、(E)或(E/Z)特别指明，否则通常不带前缀使用的内昔芬在本文中用于包括任何或所有内昔芬异形体(isoform)。
内昔芬盐组合物
在一些实施方案中，本公开内容提供了包含内昔芬盐的组合物。在一些实施方案中，本公开内容提供了包含内昔芬的药学上可接受的盐的组合物。在某些实施方案中，本文提供了包含1％、5％、10％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％、96％、97％、98％、99％、99.5％、99.99％或100％内昔芬盐的组合物。
在一些实施方案中，盐选自槟榔碱、苯磺酸盐、碳酸氢盐、酒石酸氢盐、丁基溴、柠檬酸盐、樟磺酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、乙醇酰阿散酸盐、己基间苯二酚盐、哈胺、氢溴酸盐、盐酸盐、羟萘甲酸酯、羟乙磺酸盐、苹果酸、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基溴、甲基溴、甲酯硝酸盐、甲基硫酸盐、黏酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、巴莫酸盐(双羟萘酸盐)、泛酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、多聚半乳糖醛酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、硫酸盐、鞣酸盐、茶氯酸盐、三乙基碘、苄星、氯咪唑、氯普鲁卡因、胆碱、二乙胺、二乙醇胺、乙二胺、甲葡胺、哌嗪、普鲁卡因、铝、钡、铋、锂、镁、钾和锌。在一些实施方案中，盐是内昔芬葡糖酸盐。内昔芬葡糖酸盐可以选自(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐、(E)-内昔芬D-葡糖酸盐、(Z)-内昔芬L-葡糖酸盐、(E)-内昔芬L-葡糖酸盐或其组合。
在一些实施方案中，以组合物中总内昔芬葡糖酸盐的wt/wt计，包含内昔芬葡糖酸盐的组合物包含10％至100％的(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐。在一些实施方案中，以组合物中总内昔芬的wt/wt计，包含内昔芬葡糖酸盐的组合物包含10％至100％的(Z)-内昔芬L-葡糖酸盐。
在其他实施方案中，包含内昔芬葡糖酸盐的组合物包含10％、20％、30％、40％、50％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、99.5％、99.75％、99.99％或100％的(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐或(Z)-内昔芬L-葡糖酸盐，该百分比是相对于总内昔芬葡糖酸盐。在一些实施方案中，组合物包含至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％或至少99.99％的(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐、(Z)-内昔芬L-葡糖酸盐或其组合。
在一些实施方案中，本文提供了包含(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐和(E)-内昔芬D-葡糖酸盐的组合物。(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐和(E)-内昔芬D-葡糖酸盐可以分别以10:90至99:1(wt/wt或v/v)的比例存在于组合物中。在一些实施方案中，(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐与(E)-内昔芬D-葡糖酸盐之比分别为10:90至99:1(wt/wt或v/v)(例如，45:55、50:50、60:40、70:30、80:20、90:10；91:9；92:8；93:7；94:8；95:5；96:4；97:3；98:2；99:1；99.5:0.5或99.99:0.01)。在某些实施方案中，(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐与(E)-内昔芬D-葡糖酸盐之比(wt/wt或v/v)为90:10；91:9；92:8；93:7；94:8；95:5、96:4、97:3、98:2、99:1、99.5:0.5或99.99:0.01。本领域的技术人员将认识到，本公开内容涵盖内昔芬葡糖酸盐异构体的其他组合。
在一些实施方案中，包含内昔芬葡糖酸盐的组合物在组合物中包含0.01％、0.05％、0.01％、0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％或20％的内昔芬葡糖酸盐(wt/wt)或(w/v)。在一些实施方案中，包含内昔芬葡糖酸盐的组合物在组合物中包含0.01％、0.05％、0.01％、0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％或20％的(Z)-内昔芬葡糖酸盐(wt/wt)或(w/v)。
本公开内容的化合物和组合物可以通过本领域已知的任何途径施用于有此需要的受试者，包括但不限于口服、肠胃外、局部和导管内递送。因此，本文公开的组合物被配制为与预期的施用途径相容。
在一些实施方案中，包含内昔芬的组合物还包含赋形剂。这种赋形剂可以与预期的施用途径相容。
内昔芬多晶型物组合物
在一方面，本公开内容提供了包含一种或多种多晶型形式的组合物，如本文所述的内昔芬的形式I、形式II或形式III。在一些实施方案中，药物组合物包含主要为多晶型形式I的内昔芬。在一些实施方案中，药物组合物包含主要为多晶型形式II的内昔芬。在一些实施方案中，药物组合物包含主要为多晶型形式III的内昔芬。
在某些实施方案中，组合物包含作为内昔芬的单一多晶型形式(如形式I、形式II或形式III)的内昔芬，其为组合物中总内昔芬的至少0.1％、至少0.2％、至少0.3％、至少0.4％、至少0.5％、至少1％、至少5％、至少10％、至少20％、至少25％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％、至少99.99％或100％(wt/wt)。在至少一种组合物中，组合物包含为组合物中总内昔芬的>90％(wt/wt)的内昔芬单一多晶型形式，如形式I、形式II或形式III。在另一个实施方案中，组合物包含为组合物中总内昔芬的>95％(wt/wt)的内昔芬单一多晶型形式，如形式I、形式II或形式III。在又一个实施方案中，组合物包含为组合物中总内昔芬的>96％、>97％、>98％、>99％或>99.5％(wt/wt)的内昔芬单一多晶型形式，如形式I、形式II或形式III。当特定重量百分比的内昔芬为单一多晶型形式时，组合物中内昔芬的其余部分为无定形内昔芬和/或不包括所述单一多晶型形式的内昔芬的一种或多种多晶型形式的某种组合。当将多晶型内昔芬定义为内昔芬的一种特定形式时，其余部分由无定形内昔芬和/或除指定的特定形式之外的一种或多种多晶型形式组成。单一多晶型形式的示例包括内昔芬的形式I、II和III，以及以本文所述的一种或多种性质为特征的单一多晶型形式的描述。
在其他实施方案中，包含内昔芬的组合物包含为组合物的0.01％至20％、0.05％至15％或0.1％至10％(wt/wt或w/v)的内昔芬单一多晶型形式，如形式I、形式II或形式III。在至少一个实施方案中，包含内昔芬的组合物包含为组合物的0.01％至20％(wt/wt或w/v)的内昔芬单一多晶型形式，如形式I、形式II或形式III。在各种其他实施方案中，包含内昔芬的组合物包含为组合物的0.01％、0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％、0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1％、2％、3％、4％、5％、10％或20％(wt/wt)的内昔芬单一多晶型形式，如形式I、形式II或形式III。在一方面，包含内昔芬的单一多晶型形式如形式I、形式II或形式III的组合物还包含内昔芬的第二多晶型形式。
口服剂型
在一些实施方案中，本公开内容的药物组合物配制用于口服递送。预期用于口服的组合物可以以固体或流体单位剂型制备。在至少一些实施方案中，组合物配制为用于口服递送的片剂、囊片、胶囊、丸剂、粉剂、含片、酏剂、混悬剂、糖浆、糯米纸、口香糖、糖衣丸、锭剂等。
在一些实施方案中，口服剂型是固体口服剂型，如片剂、囊片和胶囊。在一些实施方案中，胶囊为硬胶囊或软胶囊。在其他实施方案中，胶囊是明胶胶囊、无明胶胶囊、“帽中帽”胶囊、藻酸盐胶囊、羟丙基甲基纤维素(HPMC)胶囊、聚乙烯醇(PVA)胶囊、羟丙甲纤维素胶囊或淀粉胶囊。
赋形剂
在一些实施方案中，包含(Z)-内昔芬或其盐的口服组合物还包含一种或多种赋形剂。在一些实施方案中，包含内昔芬或其多晶型物的口服组合物还包含一种或多种赋形剂。因此，设计用于口服施用的组合物可以用本文公开的惰性或活性赋形剂或用可食用载体制备。
在各种实施方案中，本文提供的组合物包含按重量计约1％至约99.99％、约5％至约95％、约5％至约90％、约10％至约80％、约15％至约70％、约20％至约60％、约30％至约95％、约50％至约90％、约60％至约90％、约60％至约80％或约70％至约80％的一种或多种赋形剂。在某些实施方案中，本文提供的组合物包含按重量计约99.99％、约95％、约90％、约85％、约80％、约75％、约70％、约65％、约60％、约55％或约50％的一种或多种赋形剂。在某些实施方案中，本文提供的组合物包含按重量计约99.99％、约99％、约98％、约97％、约96％、约95％、约94％、约93％、约92％、约91％、约90％、约89％、约88％、约87％、约86％或约85％的一种或多种赋形剂。在某些实施方案中，本文提供的组合物包含按重量计约85％、约84％、约83％、约82％、约80％、约79％、约78％、约77％、约76％、约75％、约74％、约73％、约72％、约71％、约70％、约69％、约68％、约67％、约66％或约65％的一种或多种赋形剂。在某些实施方案中，本文提供的组合物包含按重量计约55％、约54％、约53％、约52％、约51％、约50％、约49％、约48％、约47％、约46％或约45％的一种或多种赋形剂。在某些实施方案中，本文提供的组合物包含按重量计约30％、约29％、约28％、约27％、约26％、约25％、约24％、约23％、约22％、约21％或约20％的一种或多种赋形剂。
本文提供了可用于配制口服施用的组合物的赋形剂的示例，该示例并且可以包括，但不限于，一种或多种增量剂、粘合剂、填充剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、控释剂、肠溶包衣、成膜剂、增塑剂、着色剂、甜味剂、调味剂等，或其任何组合。
适用于本文提供的药物组合物的粘合剂包括，但不限于，蔗糖、诸如玉米淀粉、马铃薯淀粉等淀粉，或诸如淀粉糊剂、预胶化淀粉和淀粉1500等淀粉、PEG 6000、甲基纤维素、walocel HM、Luvitec、Luvicaparolactam、Avicel、SMCC、UNIPURE、明胶、天然和合成树胶，如阿拉伯胶、海藻酸钠、海藻酸、其他海藻酸盐、黄蓍胶、瓜尔胶、纤维素及其衍生物(例如，乙基纤维素、醋酸纤维素、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠)、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素(例如，编号2208、2906、2910)、微晶纤维素及其混合物。微晶纤维素的合适形式包括但不限于以AVICEL PH 101、AVICEL PH 103、AVICEL RC581、AVICEL PH 105(可从FMC Corporation,American Viscose Division,Avicel Sales,Marcus Hook,Pa.获得)出售的材料，及其混合物。在一些实施方案中，粘合剂是微晶纤维素和羧甲基纤维素钠的混合物。合适的无水或低水分的赋形剂或添加剂包括AVICEL PH 103和淀粉1500LM。
适用于本文提供的药物组合物的填充剂的示例包括，但不限于，滑石粉、碳酸钙(例如，颗粒或粉末)、糖如葡萄糖、蔗糖、乳糖、盐如碳酸钙、磷酸钙、碳酸钠、磷酸钠、淀粉、微晶纤维素、粉状纤维素、纤维素碱如甲基纤维素、羧甲基纤维素葡萄糖结合剂、高岭土、甘露醇、硅酸、山梨糖醇、淀粉、预胶化淀粉及其混合物。
组合物中的一种或多种粘合剂或填充剂通常以组合物或剂型的约10％至约99％(wt/wt)存在。在一些实施方案中，组合物中的粘合剂和/或填充剂在组合物中占约15％至99％、约20％至60％、约25％至55％、约30％至50％、约35％至60％、约50％至99％(wt/wt)。
崩解剂可用于组合物中，以提供暴露于水环境时崩解的片剂。含有过多崩解剂的片剂在储存中可能崩解，而含有过少崩解剂的片剂可能无法以所需的速率或在所需的条件下崩解。因此，形成固体口服剂型应使用足量的崩解剂，既不过多也不过少而有害地改变活性成分的释放。在一些实施方案中，崩解剂深入口服固体剂型中，以延迟崩解。崩解剂的量根据制剂的类型而变化，并且对于本领域普通技术人员而言是容易辨别的。
典型的组合物包含0.5％至15％(wt/wt)的崩解剂。在一些实施方案中，组合物在组合物中包含1％至5％(wt/wt)的崩解剂。在另一个实施方案中，崩解剂为组合物的1％至25％、2％至20％、5％至15％、8％至12％或约10％(wt/wt)。
可用于本文提供的药物组合物中的崩解剂包括，但不限于，琼脂、海藻酸、碳酸钙、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、波拉克林钾、乙醇酸淀粉钠、马铃薯或木薯淀粉、预胶化淀粉、其他淀粉、粘土、其他藻酸铵、其他纤维素、树胶及其混合物。
可用于本文提供的药物组合物的润滑剂包括，但不限于，硬脂酸钙、硬脂酸镁、矿物油、轻质矿物油、甘油、山梨糖醇、甘露醇、聚乙二醇、其他二醇、硬脂酸、月桂基硫酸钠、滑石粉、氢化植物油(例如，花生油、棉籽油、葵花籽油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油)、硬脂酸锌、硬脂酸镁或硬脂酸钾、油酸乙酯、月桂酸乙酯、琼脂及其混合物。额外的润滑剂包括，例如，syloid硅胶(AEROSIL200，由Baltimore,Md.的WR GraceCo.制造)、凝结的合成二氧化硅气雾剂(由Piano,Tex.的Degussa Co.销售)、CAB O SIL(由Boston,Mass.的CabotCo.销售的热解二氧化硅产品)、Q7-9120(Dow Corning)及其混合物。如果完全使用，润滑剂通常以低于其所掺入的组合物或剂型的1％(wt/wt)的量使用。在又一个实施方案中，润滑剂为组合物的0.1％至3％，如0.5％至1％(wt/wt)。
可添加增塑剂来控制口服剂型如胶囊壳、囊片或片剂的柔软性或柔韧性，并因此可改善口服剂型上的涂层的pH敏感材料的机械性能。合适的增塑剂包括但不限于石油(例如，石蜡加工油、环烷加工油和芳香加工油)、角鲨烯、角鲨烷、植物油(例如，橄榄油、山茶油、蓖麻油、妥尔油和花生油)、硅油、二元酸酯(例如，邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二辛酯)、液体橡胶(例如，聚丁烯和液体异戊二烯橡胶)、液体脂肪酸酯(例如，肉豆蔻酸异丙酯ISM)、月桂酸己酯、癸二酸二乙酯和癸二酸二异丙酯、柠檬酸三乙酯、三醋精、二甘醇、聚乙二醇、聚丙二醇、邻苯二甲酸酯、山梨糖醇、水杨酸乙二醇酯、crotaminton和甘油或其混合物。增塑剂的量可以根据药物制剂的化学组成而变化。在一个实施方案中，至少一种增塑剂是山梨糖醇、异山梨醇二甲醚或甘油。在另一个实施方案中，增塑剂为组合物的1％至10％，如3％至5％(wt/wt)。
助流剂的示例包括，但不限于，胶体二氧化硅、纤维素、磷酸钙、二元或三元碱等。
作为甜味剂或香化剂的示例包括蔗糖、糖精、葡萄糖、麦芽糖、糖替代品、阿斯巴甜、木糖醇、甘露醇、甜蜜素、三氯蔗糖、麦芽糖醇、山梨糖醇、丁磺氨钾等。
调味剂的示例包括薄荷、水杨酸甲酯、薄荷、留兰香、水杨酸甲酯、覆盆子、红莓、草莓、菠萝、橙子、樱桃等。
如本文公开的配制用于口服递送的组合物，例如，片剂、囊片和胶囊，可以用一种或多种肠溶包衣剂、控释剂或成膜剂进行包衣，以控制或延迟包含内昔芬或其盐的组合物在胃肠道中的崩解和吸收，从而在更长的时间内提供持续作用。因此，在一些实施方案中，片剂可以是肠溶片剂，囊片可以是肠溶囊片，或胶囊可以是肠溶胶囊。本公开内容的肠溶片剂、肠溶囊片或肠溶胶囊可以通过本领域已知的技术制备。
本文公开的药物制剂可以包含控释剂。适合使用的控释剂的示例包括，但不限于，pH依赖性聚合物、酸不溶性聚合物、丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸共聚物、邻苯二甲酸乙酸纤维素(CAP)、乙酸琥珀酸纤维素、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、羟丙基甲基纤维素乙酸琥珀酸酯(醋酸琥珀羟丙甲纤维素)、聚醋酸乙烯邻苯二甲酸酯(PVAP)、甲基丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸共聚物、虫胶、偏苯三酸醋酸纤维素、海藻酸钠、玉米蛋白、蜡，包括合成蜡、微晶蜡、石蜡、巴西棕榈蜡和蜂蜡；聚乙氧基蓖麻油衍生物、氢化油、甘油单-、二-、tribenates、单硬脂酸甘油酯、二硬脂酸甘油酯、长链醇，如硬脂醇、鲸蜡醇和聚乙二醇；及其混合物。在一些实施方案中，可以使用延时材料，如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。在其他实施方案中，控释剂是可消化的蜡质物质，如硬石蜡。
在一些实施方案中，组合物可包含一种或多种pH依赖性聚合物，如酸不溶性聚合物。pH依赖性聚合物在pH 5.0以上时，变得更具渗透性，但在pH 5.0以下则不可渗透，而酸不溶性聚合物在中性至弱碱性条件下变得可溶。这种控制释放聚合物靶向上小肠和结肠。酸不溶性聚合物的非限制性实例包括乙酸邻苯二甲酸纤维素、乙酸丁酸纤维素、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、藻酸盐如藻酸钠或藻酸钾、虫胶、果胶、丙烯酸-甲基丙烯酸共聚物(可从Rohm America Inc.，Piscataway，NJ以商品名
Figure BDA0002485802470000521
L和
Figure BDA0002485802470000522
S，作为粉末或30％的水分散体商购获得；或可从Eastman Chemical Co.，Kingsport，TN，以商品名
Figure BDA0002485802470000523
作为30％分散体商购获得)。其他实例包括
Figure BDA0002485802470000524
L100-55、
Figure BDA0002485802470000525
L30D-55、
Figure BDA0002485802470000526
L100、
Figure BDA0002485802470000527
L100 12,5、
Figure BDA0002485802470000528
S100、
Figure BDA0002485802470000529
S12,5、
Figure BDA00024858024700005210
FS 30D、
Figure BDA00024858024700005211
E100、
Figure BDA00024858024700005212
E 12,5和
Figure BDA0002485802470000531
PO。在至少一个实施方案中，组合物包含
Figure BDA0002485802470000532
L100-55。对于本公开内容的目的，
Figure BDA0002485802470000533
RS和RL以及
Figure BDA0002485802470000534
NE和NM也是有用的聚合物。在一些实施方案中，组合物包含
Figure BDA0002485802470000535
L30D 55。在另一个实施方案中，制剂包含
Figure BDA0002485802470000536
FS 30D。本领域技术人员将认识到，本文列出的至少一些酸不溶性聚合物也将是生物可降解的。
对于口服剂型的延时或延迟释放药物制剂，可以使用单硬脂酸甘油酯、二硬脂酸甘油酯和酸不溶性聚合物，例如基于聚甲基丙烯酸酯pH敏感聚合物的包衣(例如，作为包衣材料，即，肠溶包衣，用于胶囊、囊片和片剂的肠溶包衣)。延迟释放口服剂型有许多商业来源，例如来自Capsugel,USA的由羟丙甲纤维素(HPMC)制成的DRCaps。此类延迟释放口服剂型是耐酸的，并且可以抵抗胃中的酸度至少30分钟，如至少1小时、至少1.5小时或至少2小时。这种延迟释放口服剂型可以在肠(小肠、大肠/结肠等)内释放至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％的内昔芬或其盐。
在本公开内容的一个方面，肠溶片剂、肠溶囊片和肠溶胶囊可以是未包衣的。使用固有肠溶胶囊技术(例如，可从Capsugel获得的Entrinsic药物递送)而具有肠溶能力的硬质未包衣胶囊适用于本公开内容的目的。
在各种实施方案中，肠溶片剂是由(Z)-内昔芬或其盐的自由流动粉末制成的硬片剂。在各种实施方案中，肠溶胶囊是由(Z)-内昔芬或其盐的自由流动粉末制成的胶囊。在各种实施方案中，肠溶片剂是由内昔芬或其多晶型物的自由流动粉末制成的硬片剂。在各种实施方案中，肠溶胶囊是由内昔芬或其多晶型物的自由流动粉末制成的胶囊。
在一些实施方案中，肠溶胶囊是基于非动物的胶囊，如羟丙甲纤维素胶囊(例如，市售的自凝胶Vcaps、VCaps Plus、肠溶VCaps，其他使用Xcellodose、ENCODE结肠递送技术和Capsugel的EnTrinsicTM药物递送技术制成的肠溶胶囊)。也可以使用本领域已知的和可商购的其他技术(例如，Qualicaps,USA、Nutrascience,USA,等)来配制口服固体剂型的肠溶形式。在至少一个实施方案中，胶囊是胶囊中API，意味着(Z)-内昔芬游离碱或其盐被整齐地填充到胶囊中。在这种胶囊中API口服剂型中，活性成分(Z)-内昔芬或其盐可以是自由流动的粉末或微粉。当剂型是胶囊时，在至少一个实施方案中，该胶囊可以是无缝胶囊或带状胶囊(banded capsule)。
可以进一步降低癌症生长速率的抗癌治疗剂如内昔芬的快速吸收和生物利用度是非常需要的。在一方面，本公开内容提供了将组合物配制为具有某些药代动力学(PK)性质。
在一方面，快速达到内昔芬的最大和稳态血浆水平是本公开内容的特定方面。本公开内容提供了在施用组合物后的2至30小时内、3至20小时内、2至10小时内或4至8小时内达到内昔芬最大血浆水平的组合物。因此，在一些实施方案中，在施用组合物后，达到内昔芬最大(峰值)血浆水平的时间为2至10小时。在一些实施方案中，在施用本文公开的组合物后，达到内昔芬最大血浆水平的时间为4至8小时。
快速达到内昔芬的稳态血浆水平也非常可取，并且本公开内容的组合物可以在被施用包含内昔芬多晶型形式、(Z)-内昔芬或其盐的组合物的受试者中提供迅速达到稳态的内昔芬血浆水平。稳态血浆水平可以在第7天至第21天达到。在一些实施方案中，稳态血浆水平可以在每天施用本文公开的组合物后的第7天(图5)达到。
在一方面，本公开内容提供了，从本文公开的组合物释放的循环内昔芬可以比他莫昔芬更快地被清除。据称他莫昔芬的最终消除半衰期为5-7天(Jordan C.Steroids.2007年11月；72(13):829–842)，并且他莫昔芬的峰值浓度时间约为给药后5小时。从本文公开的组合物释放的内昔芬可以具有30至60小时的最终消除半衰期，显著低于他莫昔芬。在一些实施方案中，平均半衰期为40至53小时。对于包含1mg至4mg(Z)-内昔芬或其盐的组合物，AUC24hr(第21天)/AUC0-inf(第1天)的平均比值通常为0.7至1.2。因此，从本文公开的组合物释放的内昔芬的积累在持续治疗中没有显著变化。
在另一方面，本文所述的组合物达到了治疗有效的内昔芬吸收。
曲线下面积AUC(0-24hr)(“AUC24hr”)描述了从给药时间(0小时)开始的24小时内受试者对药物的总暴露。在包含1mg至4mg(Z)-内昔芬的组合物的初始(第一)剂量的第1天，包含(Z)-内昔芬或其盐的组合物通常达到150hr*ng/mL至600hr*ng/mL的平均(AUC24hr)。在包含1mg至4mg(Z)-内昔芬的组合物的初始(第一)剂量的第21天，包含(Z)-内昔芬或其盐的组合物通常达到400hr*ng/mL至2500hr*ng/mL的平均AUC24hr。
AUC0-inf(“AUC0-inf”)是所分析的体液(通常为血浆、血液或血清)中循环的药物的时间平均浓度，描述了受试者对药物的总暴露。本公开内容提供了，受试者对内昔芬的暴露(AUC0-inf)可以是与剂量成比例的。在一些实施方案中，AUC0-inf的范围为200hr*ng/mL至10000hr*ng/mL。在其他实施方案中，AUC0-inf的范围为300hr*ng/mL至8000hr*ng/mL。在某些实施方案中，在1mg至4mg的(Z)-内昔芬给药范围内，AUC0-inf的范围为400hr*ng/mL至6000hr*ng/mL(例如，参见表17)。
根据USP 711的现行方法，本文公开的口服剂型的溶解通过溶解测试来测试。在一些实施方案中，本文公开的口服剂型被保护免受胃的酸性环境的影响，并且至少2小时、至少3小时、至少4小时、至少5小时、6小时、至少7小时或至少8小时不溶解。在至少一个实施方案中，口服剂型至少6小时不释放内昔芬。在另一个实施方案中，口服剂型至少2小时不释放内昔芬或其盐。
在其他实施方案中，在施用后2小时，包含本文公开的内昔芬或其盐的组合物中少于10％的(Z)-内昔芬在胃中释放；或其中施用4小时后，少于40％的(Z)-内昔芬在胃中释放；或施用6小时后，少于50％的(Z)-内昔芬在胃中释放，如USP 711的方法所测试的。
在另一个实施方案中，本文公开的组合物在施用后2小时在胃中释放少于10％的(Z)-内昔芬；在施用后4小时在胃中释放少于40％的(Z)-内昔芬；并且在施用后6小时在胃中释放少于50％的(Z)-内昔芬，如USP 711的方法所测试的。
在另一个实施方案中，将组合物配制为在小肠中释放，使得在施用后4小时后释放至少10％的内昔芬；或施用后6小时后释放至少30％的内昔芬；或施用后7小时后释放至少40％的内昔芬；或施用后8小时后释放至少50％的内昔芬，如USP 711的方法所测试的。
在进一步的实施方案中，如通过USP 711的方法确定，将组合物配制为在施用后8小时后在结肠中释放至少50％的内昔芬。
在进一步的实施方案中，将组合物配制为在施用后4小时后在结肠中释放至少20％的内昔芬；施用后6小时后在结肠中释放至少40％的内昔芬；施用后7小时后在结肠中释放至少60％的内昔芬；或施用后8小时后在结肠中释放至少80％的内昔芬。
口服剂型可以是适用于口服施用的任何形状，诸如球形(0.05-5mL)、卵形(0.05-7mL)、椭圆形、梨形(0.3-5mL)、圆柱形、立方形、规则和/或不规则形状。口服剂型可以是适合口服施用的任何大小，例如，0号、2号等。
本领域技术人员将进一步认识到，本文公开的组合物可以以适合于所需制剂或制品的任何组合包含本领域已知的和本文公开的一种或多种赋形剂。其他赋形剂通常可见于Remington’s The Science and Practice of Pharmacy,Meade Publishing Co.,UnitedStates Pharmacopeia/National Formulary。本领域技术人员将能够基于其在本领域的技术和知识以及本文公开的内容，选择制备制剂所需的合适赋形剂和与施用途径相容的合适剂型。在所有情况下，最终剂型在生产和储存条件下均应是无菌且稳定的。
对于本文公开的固体剂型组合物的制剂，由于水活度(Aw)小于0.75，因此通常不需要测试总好氧菌平板计数(TAC)和USP指示生物。出版物“Microbial Bioburden on OralSolid Dosage Form,”Jose E.Martinez著,Pharmaceutical Technology,2002年2月,第58至70页通过引用以其全文并入本文。
此外，由于本文公开的组合物的制剂也具有小于0.75的水活性，因此通常不需要详细的微生物测试。TAC是对原材料、加工中材料或完成品中存在的存活的总好氧微生物的估计。根据最新的USP 39<61>，“非无菌产品的微生物检验：微生物计数测试”对样品进行分析。
在警戒和行动水平下，为本发明组合物的制剂建立用于口服固体剂型(OSDF)的可接受TAC，这分别可以是1000cfu g/mL和10,000cfu g/mL。20,000cfu g/mL的TAC可能被认为是不可接受的。
对于其他制剂，如水活度小于0.75的液体或流体制剂，依照USP指南第62章，针对特定微生物(金黄色葡萄球菌(S.aureus)、铜绿假单胞菌(Ps.aeruginosa)、沙门氏菌(Salmonella)、白色假丝酵母(C.albicans)、梭菌(Clostridia)、大肠杆菌(E.coli)和胆汁耐受革兰氏阴性菌)的测试可以不需要进行。
使用方法
式(I)、(II)、(III)和(IV)的化合物，本文公开的内昔芬盐，本文公开的内昔芬的多晶型形式，以及包含它们的组合物可用于制造用于治疗有此需要的受试者的药物，例如，患有激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症或两者，或存在其风险的受试者。
本公开内容的组合物可以用作首选疗法，作为新辅助疗法的一部分(相对于首选疗法)，或作为辅助疗法方案的一部分，其目的是改善或治愈患有激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症或两者或存在其风险的受试者。
在某些实施方案中，病症是激素依赖性乳腺病症。在其他实施方案中，病症是激素依赖性生殖道病症。在其他实施方案中，受试者患有激素依赖性乳腺病症和激素依赖性生殖道病症。在一些实施方案中，激素依赖性病症是良性乳腺病症、增生、异型、非典型导管增生、非典型小叶增生、乳腺密度增加、男性乳腺发育症、DCIS、LCIS、乳腺癌、子宫内膜癌、卵巢癌、子宫癌、宫颈癌、阴道癌或外阴癌。
在一些实施方案中，乳腺病症是乳腺密度增加。例如，乳腺病症为B级(以前的II级)、C级(以前的III级)或D级(以前的IV级)乳腺密度。
在一些实施方案中，激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症是性早熟。在其他实施方案中，激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症是McCune-Albright综合征。
在一些实施方案中，乳腺病症是男性乳腺发育症。在一些实施方案中，男性乳腺发育症继发于基础疾病。因此，在一些实施方案中，受试者还患有选自前列腺癌、肝硬化和肝病、男性性腺功能减退症、甲状腺功能亢进、肾衰竭并且患者正经历血液透析或I型糖尿病的基础疾病。在某些实施方案中，受试者患有前列腺癌为基础疾病，其中受试者患有男性乳腺发育症或存在其风险。
在某些实施方案中，乳腺癌是DCIS、LCIS、ILC、IDC、MIC、炎性乳腺癌、ER阳性(ER+)乳腺癌、HER2+乳腺癌、腺样囊性(腺囊性)癌、低级腺鳞癌、髓样癌、粘液(或胶样)癌、乳头状癌、小管癌、化生性癌或微乳头状癌。在至少一个实施方案中，单个乳腺癌肿瘤可以是前述的组合或是侵袭性癌和原位癌的混合。
本公开内容考虑了本文公开的化合物和组合物在肿瘤发展和进展的各个阶段的用途，包括治疗晚期和/或侵袭性瘤，即，无法通过局部疗法如手术或放疗治愈的受试者的明显疾病，转移性疾病或局部晚期疾病。因此，在一些实施方案中，乳腺癌是癌前阶段、早期癌症、非转移性癌症、转移前癌症或局部晚期癌症。在至少一个实施方案中，乳腺病症是转移性癌症。在一些实施方案中，受试者还患有前列腺癌。
尽管存在严重的不良反应、较差的患者依从性和由于受试者血浆内昔芬水平低造成的耐药性，当前对这些病症的治疗选择仍是他莫昔芬。这些受试者在被给予他莫昔芬后可能出于多种原因而具有较低的内昔芬水平，如具有例如在CYP2D6、CYP3A4或CYP2C9中的CYP基因突变，使其无法将他莫昔芬代谢为其活性代谢产物——内昔芬，或雌激素受体功能较低或功能紊乱，从而阻止(或降低)他莫昔芬的充分摄取，以及尚未确定的其他原因。在口服他莫昔芬20mg的受试者中，报道的血浆他莫昔芬的治疗水平≥浆他nM(Lyon等人GenetMed.2012年12月；14(12):990-1000)。尽管存在低血浆内昔芬的机制，本公开内容的组合物可用于其中受试者具有低内昔芬或受试者患有激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症或存在其风险的任何病况。因此，本公开内容在治疗他莫昔芬耐受性的激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症中可能尤其重要。
在某些实施方案中，本文提供了药物组合物对其特别有用的患者群体。本公开内容的组合物在治疗患有激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症的他莫昔芬难治性受试者中也特别重要。因此，在一些实施方案中，本文公开的组合物可用于治疗患有激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症或二者或存在其风险的他莫昔芬难治性或他莫昔芬耐受性的受试者。在一些实施方案中，包含内昔芬盐如内昔芬葡糖酸盐的组合物，以本文公开的剂量施用于此类受试者，将是有利的。
此外，Donneyong等人已表明，他莫昔芬与选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRI)药物如Prozac和Paxil(帕罗西汀)之间存在药物相互作用，其并且对乳腺癌受试者有害(Donneyong等人BMJ 2016；354:i5014)。在使用SSRI药物的受试者中，SSRI药物降低或停止他莫昔芬向内昔芬的肝代谢。因此，在某些实施方案中，本文提供了正在或将要用SSRI药物治疗的患者群体，其将通过用本公开内容的组合物治疗而受益。
口服施用的本文公开的组合物使受试者的血浆内昔芬保持在大于30nM的稳态水平，例如，30nM至80nM的水平或30nM至300nM的水平。在一些实施方案中，血浆稳态内昔芬水平保持在＞40nM。保持大于30nM的这种血浆内昔芬稳态水平是有利的，因为在血浆内昔芬水平低于30nM时激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症(尤其是乳腺癌)的再次发生(复发)的可能性降低。对于他莫昔芬代谢不良(血浆内昔芬水平低于16nM)、他莫昔芬代谢能力一般(血浆内昔芬水平低于27nM)的受试者，用本文公开的组合物给药特别有利。对于正在或即将接受抗抑郁药物治疗如SSRI药物，如西酞普兰(Celexa)、依他普仑(Lexapro)、氟西汀(Prozac)、帕罗西汀(Paxil，Pexeva)、舍曲林(Zoloft)、维拉佐酮(Viibryd)等的受试者，例如，患有或可能患有抑郁症的受试者，这也是有利的。
受试者是否为他莫昔芬难治性可以通过向其给予他莫昔芬的初始剂量并确定受试者的血浆内昔芬稳态水平来确定。被给予他莫昔芬的受试者的血浆内昔芬稳态水平用作他莫昔芬难治性受试者的生物标志物。血浆内昔芬水平(急性状态和/或稳态)可以通过从受试者获得测试样品来确定，测试样品可以是血液样品，在向受试者给予他莫昔芬后从受试者采集。血浆或血清可以从血液样品中获得，以测试生物标志物内昔芬的水平。初始剂量可以包含每天施用他莫昔芬至少1天、2天、3天、15天、1周、2周、4周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月或6个月。还可以每天向受试者施用包含他莫昔芬的第一组合物，持续至少1天、2天、3天、15天、1周、2周、4周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、1年、2年、3年、4年、5年或10年。
受试者的血浆内昔芬稳态水平可以通过测量测试样品中的内昔芬来确定。将受试者的血浆内昔芬稳态水平与参考血浆内昔芬水平进行比较。对于本公开内容的目的，参考血浆水平为30nM。如果确定受试者的血浆内昔芬水平低于30nM，则将受试者定义为他莫昔芬难治性。患有激素依赖型乳腺疾病或激素依赖型生殖道疾病或可能存在其风险的此类他莫昔芬难治性受试者通过向该受试者施用包含本文公开的(Z)-内昔芬或其盐的口服组合物或本文公开的内昔芬的多晶型形式进行治疗。在一些实施方案中，施用于此类受试者的组合物包含(Z)-内昔芬游离碱。在一些实施方案中，施用于此类受试者的组合物包含多晶型形式，如内昔芬的形式I、形式II或形式III。在其他实施方案中，施用于此类受试者的组合物包含选自(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐、(Z)-内昔芬L-葡糖酸盐、(E)-内昔芬D-葡糖酸盐、(E)-内昔芬L-葡糖酸盐或其组合的内昔芬葡糖酸盐。在其他实施方案中，包含内昔芬的组合物是内昔芬盐酸盐或内昔芬柠檬酸盐。本公开内容还考虑定期或根据需要跟踪或监测受试者的血浆内昔芬水平。如有必要，已被施用他莫昔芬初始剂量的受试者可以根据测试结果，通过持续施用包含内昔芬的组合物来调整其血浆内昔芬稳态水平。
在一些实施方案中，受试者的他莫昔芬难治性状态可以通过确定受试者的他莫昔芬-代谢物谱，将其与对照或正常受试者中观察到的参考他莫昔芬-代谢物谱进行比较来确定。与参考他莫昔芬-代谢物谱相比，在受试者的他莫昔芬-代谢物谱中的血浆内昔芬水平较低的受试者被施用包含内昔芬或其盐的口服组合物。这样的组合物可以包含合成制备的内昔芬。
血浆内昔芬可以通过本领域已知的任何方法测量。基于受试者的基因、DNA、RNA、蛋白质、他莫昔芬-代谢物谱或其组合可以确定测试样品中血浆内昔芬的水平。他莫昔芬-代谢物谱可以至少包括他莫昔芬、4-OHT、N-脱甲基他莫昔芬和/或内昔芬。在一些实施方案中，通过高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱质谱法(GC-MS)、液相色谱质谱法(LC-MS)、液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)、免疫组织化学(IHC)、聚合酶链反应(PCR)、定量PCR(qPCR)等来测量测试样品中血浆内昔芬和/或他莫昔芬-代谢物谱的水平。在一些实施方案中，基于受试者的基因组成预测他莫昔芬-代谢物谱。在一些实施方案中，受试者的CYP基因型包括，但不限于，对CYP2D6、CYP3A4、CYP2C9基因的分析。在一些实施方案中，可以分析受试者的雌激素受体水平。在其他实施方案中，血浆内昔芬的测定可以由第三方实验室进行。
因此，本文提供了通过向受试者施用包含内昔芬或其盐的组合物在有此需要的受试者体内保持血浆内昔芬水平大于30nM的方法。在一些实施方案中，受试者的血浆内昔芬水平保持在大于30nM的稳态水平。在一些实施方案中，受试者的血浆内昔芬水平保持在30nM至300nM(例如，30nM至200nM，或30nm至80nM)的稳态水平。在一些实施方案中，受试者的血浆内昔芬水平保持在>40nM的稳态水平。
在另一方面，受试者可以对其测试样品中的生物标志物谱进行测试，生物标志物谱可以指示或监测激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症，或两者。此类生物标记是本领域已知的，并且作为非限制性示例包括，生物标志物，如CYP2D6、BRCA-1、BRCA-2、ER、PR、Her2、uPA、PAI、Tf、p53、Ki67、细胞角蛋白、癌症肿瘤抗原和通过Mammaprint、OncotypeDx、PAM50、EndoxPredict、MammoStrat以及其他诊断和预测测试来测量的其他生物标志物。具有表明该受试者患有激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症或两者或存在其风险的生物标志物谱的受试者可以被施用本文公开的组合物。在一方面，本公开提供了一种治疗患有激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症或两者或存在其风险的受试者的方法，其包含确定受试者的他莫昔芬难治性或他莫昔芬耐受性状态以及向受试者施用本文所述的组合物。
在一些方面，本文提供了治疗他莫昔芬难治性或他莫昔芬耐受性的受试者的方法，该方法包括向受试者施用包含内昔芬或其盐或多晶型物的组合物。
在本文公开的一些实施方案中是治疗患有激素敏感性乳腺病症，激素敏感性生殖道病症或两者或存在其风险的他莫昔芬难治性受试者的方法，该方法包括向受试者施用包含内昔芬或其盐的口服组合物，其中受试者的血浆内昔芬水平小于30nM、小于25nM、小于20nM、小于15nM、小于10nM、小于5nM或小于1nM。在某些实施方案中，包含内昔芬盐的组合物是内昔芬葡糖酸盐、内昔芬盐酸盐或内昔芬柠檬酸盐。在其他实施方案中，施用包含至少90％(Z)-内昔芬或其盐的口服固体剂型。在其他实施方案中，施用包含至少90％的内昔芬的多晶型形式I、形式II或形式III的口服固体剂型。
本文还提供了治疗他莫昔芬难治性受试者的方法，该方法包括：(a)确定或已确定获自受试者的测试样品中的血浆内昔芬水平；(b)比较或已比较或已确定测试样品中的血浆内昔芬水平与参考血浆内昔芬水平；(c)确定或已确定测试样品中的血浆内昔芬水平低于参考血浆内昔芬水平；以及(d)将包含内昔芬或其盐或多晶型物的组合物施用于受试者。包含内昔芬或其盐或多晶型物的组合物的施用将受试者体内血浆内昔芬水平保持在大于30nM的稳态水平。在一些实施方案中，受试者体内的血浆内昔芬水平保持在30nM至80nM的稳态水平。
本文提供了治疗患有激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症或存在其风险的受试者的方法，该方法包括：(a)向受试者施用包含他莫昔芬的第一组合物；(b)确定或已确定从受试者获得的测试样品中血浆内昔芬的水平；(c)确定或已确定测试样品中的血浆内昔芬水平低于参考血浆内昔芬水平；以及(d)向受试者施用本文公开的口服组合物。可以每天向受试者施用包含他莫昔芬的第一组合物，持续至少1天、2天、3天、15天、1周、2周、4周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、1年、2年、3年、4年、5年或10年。在一些实施方案中，包含内昔芬或其盐或多晶型物的口服组合物的施用将受试者的血浆内昔芬保持在大于30nM的水平。在其他实施方案中，包含内昔芬或其盐或多晶型物的口服组合物的施用将受试者的血浆内昔芬保持在30nM至300nM(例如，30nM至200nM，或30nM至80nM)的水平。在一些实施方案中，向受试者施用口服组合物，其包含(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐、(Z)-内昔芬L-葡糖酸盐、(E)-内昔芬D-葡糖酸盐、(E)-内昔芬L-葡糖酸盐或其组合。在其他实施方案中，包含内昔芬盐的口服组合物是内昔芬盐酸盐或内昔芬柠檬酸盐。在一些实施方案中，向受试者施用包含本文公开的内昔芬的多晶型形式I、形式II或形式III的口服组合物。
本文提供了治疗患有激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症的受试者的方法，该方法包括：(a)向受试者给予包含他莫昔芬的第一组合物；(b)确定或已确定从受试者获得的测试样品中受试者的他莫昔芬-代谢物谱；(c)基于受试者的他莫昔芬-代谢物谱，确定受试者的血浆内昔芬水平与他莫昔芬-代谢物谱中的参考血浆内昔芬水平相比降低；以及(d)向受试者施用包含内昔芬或其盐或多晶型物的口服组合物。在某些实施方案中，包含内昔芬的组合物是内昔芬葡萄糖盐酸、内昔芬盐酸盐或内昔芬柠檬酸盐。在一些实施方案中，组合物包含内昔芬的多晶型形式I、形式II或形式III。
本文提供了在正在针对激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症进行治疗的受试者体内调节血浆内昔芬水平的方法，该受试者具有一种或多种CYP2D6或CYP3A4突变或先前已被施用他莫昔芬的初始剂量，并且其血浆内昔芬水平低于参考血浆内昔芬水平，该方法包括：(a)在他莫昔芬初始剂量后测量受试者的血浆内昔芬水平；(b)将受试者的血浆内昔芬水平与参考血浆内昔芬水平进行比较；(c)向受试者施用包含内昔芬或其盐或多晶型物的口服组合物，以将受试者的血浆内昔芬水平保持在大于30nM的水平。在一些实施方案中，包含内昔芬或其盐或多晶型物的口服组合物的施用将受试者的血浆内昔芬保持在30nM至300nM(例如，30nM至200nM，或30nM至80nM)的水平。在一些实施方案中，受试者的血浆内昔芬水平保持在稳态水平。可以每天向受试者施用他莫昔芬的初始剂量，持续至少1天、2天、3天、15天、1周、2周、4周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月或6个月。
本文提供了在正在针对激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症进行治疗的受试者体内调节血浆内昔芬水平的方法，该受试者先前已被施用他莫昔芬的初始剂量并且血浆内昔芬的水平小于30nM，该方法包括：(a)在他莫昔芬的初始剂量后测量受试者的血浆他莫昔芬-代谢物内昔芬的水平；(b)将他莫昔芬-代谢物内昔芬的血浆水平与正常他莫昔芬-代谢物内昔芬水平的参考水平进行比较；(c)施用调节剂量的包含合成制备的内昔芬的组合物，其中合成制备的内昔芬的剂量足以将受试者的血浆内昔芬保持在大于30nM的水平。在一些实施方案中，包含合成制备的内昔芬的第二组合物的施用将受试者的血浆内昔芬保持在30nM至300nM(例如，30nM至200nM，30nM至80nM)的水平。在一些实施方案中，可以重复步骤(a)至(c)，直到受试者表现出所需的内昔芬血浆水平。
在一方面，本公开内容考虑了一种治疗患有激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症或两者或存在其风险的受试者的方法，该方法包括切除该受试者的乳房组织或对该受试者施用放疗，并施用包含本文公开的内昔芬或其盐或多晶型物的口服组合物。在另一方面，本公开内容考虑了一种治疗患有激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症或两者或存在其风险的受试者的方法，该方法包括在切除受试者的乳房组织或对受试者施用放疗之前施用本文公开的口服组合物。
待施用于受试者的剂量通常将为单位剂型。每种剂量单位形式的内昔芬范围的示例为0.01mg至200mg。剂量通常应是有效剂量，并且以摩尔计，由剂量制剂在活性游离药物代谢释放时产生的药理活性(Z)游离形式是等同的，以达到其所需的药理和生理效果。在一些实施方案中，以0.01mg至200.0mg的剂量向受试者施用包含内昔芬或内昔芬盐或多晶型物的组合物。在其他实施方案中，以1mg至200.0mg的剂量向受试者施用包含内昔芬或内昔芬盐或多晶型物的口服组合物。在一些实施方案中，以每单位剂量0.01mg、0.05mg、0.1mg、0.25mg、0.5mg、0.75mg、1.0mg、1.5mg、2.0mg、4.0mg、6mg、8mg、10mg、20mg、40mg、50mg、100mg或200mg的剂量向受试者施用包含内昔芬或内昔芬盐或多晶型物的口服组合物。在某些实施方案中，以每单位剂量1mg、2.0mg、4.0mg、6mg、8mg、10mg、20mg、40mg、50、100mg或200mg的剂量施用包含至少90％(Z)-内昔芬(wt/wt)的内昔芬的口服组合物。在一些实施方案中，包含内昔芬葡糖酸盐的组合物以0.01至20mg的剂量施用。在一些实施方案中，以每单位剂量0.5mg、1mg、2mg、4.0mg、6mg、8mg、10mg、20mg、40mg、50mg、100mg和200mg施用包含(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐的组合物。在一些实施方案中，施用包含1mg(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐的组合物。在其他实施方案中，施用包含1mg(Z)-内昔芬L-葡糖酸盐的组合物。在其他实施方案中，施用包含2mg(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐和(E)-内昔芬D-葡糖酸盐的组合物。在某些实施方案中，以每单位剂量1mg、2.0mg、4.0mg、6mg、8mg、10mg、20mg、40mg、50、100mg或200mg的剂量施用包含至少90％(wt/wt)的内昔芬多晶型物，如多晶型形式I型、形式II或形式III的口服组合物。在一些实施方案中，以0.01至20mg的剂量施用包含内昔芬的多晶型形式，如形式I、形式II或形式III的组合物。
乳腺癌生长率研究表明，通过对乳腺癌受试者进行乳房X线摄影术筛查，年龄在50至59岁的女性中，25th百分位数的乳腺癌生长率表明对于受试者快速暴露于治疗剂的需求未得到满足(Weeden-Fekjaer等人.Breast Cancer Research200810:R41)。能够进一步降低癌症生长率的抗癌治疗剂如内昔芬的快速吸收和生物利用度是非常需要的。
在一方面，快速达到内昔芬的最大和稳态血浆水平是本公开内容的特定方面。本公开内容提供了，本文公开的组合物向受试者的施用在施用组合物后的2至30小时内、3至20小时内、2至10小时内或4至8小时内达到内昔芬的最大血浆水平。因此，在一些实施方案中，在施用组合物后到达内昔芬最大(峰值)血浆水平的时间为2至10小时。在一些实施方案中，在施用本文公开的组合物后，到达内昔芬的最大血浆水平的时间为4至8小时。
快速达到内昔芬的稳态血浆水平也是非常可取。被施用本文公开的包含(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物的受试者中的内昔芬血浆水平迅速达到稳态。稳态血浆水平可以在第7天至第21天达到。在一些实施方案中，稳态血浆水平可以在每天施用本文公开的组合物后的第7天(图5)达到。
在一方面，本公开内容提供了，从本文公开的组合物释放的循环内昔芬可以比他莫昔芬更快地被清除。据称他莫昔芬的最终消除半衰期为5-7天(Jordan C.Steroids.2007年11月；72(13):829–842)，并且他莫昔芬的峰值浓缩时间约为给药后5小时。从本文公开的组合物释放的内昔芬可以具有30至60小时的最终消除半衰期，显著低于他莫昔芬。在一些实施方案中，平均半衰期为40至53小时。对于包含1mg至4mg(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，AUC24hr(第21天)/AUC0-inf(第1天)的平均比值通常为0.7至1.2。因此，从本文公开的组合物释放的内昔芬的积累在持续治疗中没有显著变化。
在另一方面，本公开内容提供了，本文公开的组合物的施用达到了治疗有效的内昔芬吸收。
曲线下面积AUC(0-24hr)(“AUC24hr”)描述了从给药时间(0小时)开始的24小时内受试者对药物的总暴露。在包含1mg至4mg(Z)-内昔芬的组合物的初始(第一)剂量的第1天，包含(Z)-内昔芬或其盐的组合物通常达到150hr*ng/mL至600hr*ng/mL的平均(AUC24hr)。在包含1mg至4mg(Z)-内昔芬的组合物的初始(第一)剂量的第21天，包含(Z)-内昔芬或其盐的组合物通常达到400hr*ng/mL至2500hr*ng/mL的平均AUC24hr。
AUC(0-inf)(“AUC0-inf”)是所分析的体液(通常为血浆、血液或血清)中循环的药物的时间平均浓度，描述了受试者对药物的总暴露。本公开内容提供了，受试者对内昔芬的暴露(AUC0-inf)可以是与剂量成比例的。在一些实施方案中，AUC0-inf的范围为200hr*ng/mL至10000hr*ng/mL。在其他实施方案中，AUC0-inf的范围为300hr*ng/mL至8000hr*ng/mL。在某些实施方案中，在1mg至4mg的(Z)-内昔芬给药范围内，AUC0-inf的范围为400hr*ng/mL至6000hr*ng/mL(例如，参见表17)。
医疗保健专业人员，如主治医师，可以基于受试者体内组合物的药代动力学特征来调整给药方案。
在一方面，本公开内容的组合物可以单独使用，或在联合疗法中使用。例如，本文公开的组合物可以与一种或多种治疗剂联合使用，作为首选疗法、新辅助疗法或辅助疗法的一部分。本公开内容的一个方面是，本公开内容的组合物可以与其他疗法如手术和放疗联合使用，作为新辅助疗法或辅助疗法。组合物的联合可以起到改善治疗剂疗效的作用，并且因此可以用于改善标准的癌症疗法。例如，当受试者患有前列腺癌并且正在接受比卡鲁胺或恩杂鲁胺疗法来治疗前列腺癌时，该受试者可能由于该疗法而发展出男性乳腺发育症。可以将本文公开的组合物作为联合疗法施用于患有前列腺癌的受试者，以预防和/或治疗男性乳腺发育症。作为另一个示例，患有ER+/Her2+阳性乳腺癌的受试者将接受与曲妥珠单抗或其他肿瘤药物如抗肿瘤药或免疫疗法的联合疗法，并且本文公开的组合物可用于治疗患有ER+/Her2+阳性乳腺癌的这种受试者。因此，在一些实施方案中，组合物还包含比卡鲁胺、恩杂鲁胺或抗癌药物如曲妥珠单抗，抗肿瘤药如卡培他滨(Xeloda)、卡铂(Paraplatin)、顺铂(Platinol)、环磷酰胺(Neosar)、多西他赛(Docefrez，Taxotere)、多柔比星(阿霉素)、聚乙二醇化脂质体多柔比星(Doxil)、表柔比星(Ellence)、氟尿嘧啶(5-FU，Adrucil)、吉西他滨(Gemzar)、甲氨蝶呤(多个品牌)、紫杉醇(Taxol)、蛋白质结合的紫杉醇(Abraxane)、长春瑞滨(Navelbine)、艾日布林(Halaven)、伊沙匹隆(Ixempra)和ATP结合盒蛋白抑制剂。
在另一方面，本文公开的组合物可以包含增加内昔芬在受试者中的生物利用度的治疗剂。P-糖蛋白(P-gp，ABCB1)是在脑、肝和小肠中，以及癌细胞中表达的高效药物外排泵，它影响药代动力学并对许多抗癌药物产生治疗耐受性。因此，在一些实施方案中，组合物还包含ATP结合盒(ABC家族)转运蛋白的抑制剂，如乳腺癌耐受性蛋白(BCRP蛋白)和P-gp的抑制剂。BCRP蛋白和P-Gp的几种抑制剂是本领域已知的。例如，BCRP蛋白的抑制剂包括环孢菌素、奥美拉唑、泮托拉唑、沙奎那韦和他克莫司。
P-gp抑制剂的非限制性示例包括第一代抑制剂，如维拉帕米、环孢菌素A、利血平、奎尼丁、育亨宾、他莫昔芬和托瑞米芬，第二代抑制剂，如右维拉帕米、右尼古地平、伐司朴达(PSC 833)和Dofequidar fumarate(MS-209)，第三代P-gp抑制剂，如Cyclopropyldibenzosuberane zosuquidar(LY335979)、拉尼喹达(R101933)、米托坦(NSC-38721)、比立考达(VX-710)、依克立达(GF120918/GG918)、ONT-093、他立喹达(XR9576)和HM30181以及抗P-gp单克隆抗体，如MRK-16。
本公开内容另外提供了包含一种或多种组合物的治疗试剂盒，用于治疗患有激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症或两者或存在其风险的受试者。本公开内容的试剂盒可以包含本文公开的口服组合物、用于容纳该组合物的密封容器以及口服施用的组合物的使用说明。在一方面，本公开内容的试剂盒可以包含第二治疗剂。这种第二治疗剂可以是比卡鲁胺、恩杂鲁胺或抗癌药物如曲妥珠单抗，抗肿瘤药如卡培他滨(Xeloda)、卡铂(Paraplatin)、顺铂(Platinol)、环磷酰胺(Neosar)、多西他赛(Docefrez，Taxotere)、多柔比星(阿霉素)、聚乙二醇化脂质体多柔比星(Doxil)、表柔比星(Ellence)、氟尿嘧啶(5-FU，Adrucil)、吉西他滨(Gemzar)、甲氨蝶呤(多个品牌)、紫杉醇(Taxol)、蛋白质结合的紫杉醇(Abraxane)、长春瑞滨(Navelbine)、艾日布林(Halaven)、伊沙匹隆(Ixempra)和ATP结合盒(ABC转运蛋白)抑制剂，如P-gp抑制剂。
示例性组合物
以下提供了示例性的非限制性组合物。如上所述，百分比(％)是指基于组合物的总重量按重量计的量(wt/wt)。组合物的不同组分之和总计占总组合物的100％(wt/wt)。至少90％(>90％)的(Z)-内昔芬游离碱是指(Z)-内昔芬异构体相对于任何组合物中内昔芬总重量的百分比。
在一方面，本公开内容涉及工业上可扩展的制造(Z)-内昔芬、式(III)化合物、式(II)化合物及其盐和多晶型物的方法。
在一方面，本公开内容涉及工业上可扩展的制造(Z)-内昔芬的方法，包括以下步骤：(a)使式(III)化合物——(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的混合物在与EtOAc(1:1至1:20wt/wt)中的6N HCl(1:1至1:5wt/wt)反应，(b)用8N NaOH(1:1至1:20wt/wt)中和；(c)用EtOAc(1:1至1:10wt/wt)洗涤一次或多次；(d)用20％NaCl(1:1至1:5wt/wt)萃取；(e)与活性炭(1:0.01至1:1)反应；(f)用IPA(1:1至1:10wt/wt)洗涤一次或多次，并用MeOH/PPW(1:1至1:10wt/wt)萃取；其中wt/wt是相对于(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的混合物，例如，式(III)化合物。
在一方面，本公开内容涉及工业上可扩展的制造(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的混合物(式(III)化合物)的方法，包括：(a)使式(II)化合物与苯基乙基酮在THF(4.4wt/wt)中反应；(b)制备在THF(8.9wt/wt)中的TiCl4(1.4wt/wt)和Zn(0.9wt/wt)的溶液；以及(c)使步骤(a)的式(II)化合物与步骤(b)的在THF中的TiCl4和Zn反应，以形成(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的混合物，其中wt/wt是相对于式(II)化合物。
在一方面，本公开内容涉及工业上可扩展的制造式(III)化合物——(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的混合物的方法，包括以下一个或多个步骤：(a)用25％氯化铵(1:20wt/wt)和二氧化硅(Celite)(1:1wt/wt)萃取；(b)用THF(1:1至1:5wt/wt)洗涤一次或多次；(c)用20％氯化钠(1:3wt/wt)洗涤一次或多次；(c)用EtOAc(1:4.5wt/wt)蒸馏；以及(d)用(1:2v/v)EtOAc/正庚烷(1:3.8wt/wt)结晶，其中wt/wt是相对于式(II)化合物。
在一方面，本公开内容涉及工业上可扩展的式(III)化合物——制造(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的混合物的方法，还包括以下一个或多个步骤：(a)用40％K2CO3(1:2wt/wt)萃取一次或多次；(b)用1N NaOH(1:10wt/wt)和MeTHF(1:1至1:10wt/wt)萃取；(c)用MeTHF(1:1至1:20wt/wt)再萃取两次；(d)用20％氯化钠(1:5wt/wt)萃取；(e)用IPA(1:4.5wt/wt)蒸馏；以及(f)用(1:2.7v/v)IPA/正庚烷(1:3.4wt/wt)结晶；其中wt/wt是相对于式(II)化合物。
一方面，本公开内容涉及工业上可扩展的制造式(II)化合物的方法，其包括以下步骤：(a)使式(I)化合物(1当量)与DIPEA(3wt/wt)在THF(4.9wt/wt)中反应；(b)添加氯甲酸1-氯乙酯(3.3wt/wt)；(c)用甲醇(4.0wt/wt)蒸馏1至5次；(d)用甲醇(3.2wt/wt)蒸馏；(e)与甲醇(3.2wt/wt)/6N HCl(4wt/wt)反应；以及(f)用8N NaOH(5wt/wt)中和；并且其中wt/wt是相对于式(I)化合物。
在一方面，本公开内容涉及根据本文所述的方法制备的(Z)-内昔芬、(E)-内昔芬、式(III)化合物和式(II)化合物及其盐。在一方面，本公开内容涉及根据本文公开的方法制备的(Z)-内昔芬，其中(Z)-内昔芬在环境温度下稳定至少6个月、至少9个月、至少12个月或至少18个月。
在另一方面，根据本文公开的方法制备的(Z)-内昔芬游离碱具有＜1％的杂质。在另一方面，根据本文公开的方法制备的(E)/(Z)-内昔芬游离碱具有＜1％的杂质。
在一方面，本公开内容涉及包含根据本文公开的任何方法制备的(Z)-内昔芬游离碱或其盐的组合物。
在另一方面，本公开内容涉及包含根据本文公开的任何方法制备的(Z)-内昔芬游离碱或其盐的组合物，其中(Z)-内昔芬为组合物中总内昔芬的至少90％(wt/wt)的(Z)-内昔芬游离碱。
在另一方面，组合物还包含(E)-内昔芬，其中(E)-内昔芬与(Z)-内昔芬之比(E/Z-比)为1:99；5:95；10:90；15:85；20:80；25:75；30:70；40:70；45:55；50:50；55:45；60:40；65:45；或70:30。
在另一方面，组合物还包含(E)-内昔芬，其中E/Z比为45:55至55:45或约1:1。
在一方面，组合物包含根据本文公开的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物，其中(Z)-内昔芬在环境温度下稳定至少6个月、至少9个月、至少12个月或至少18个月；
在另一方面，组合物包含根据本文公开的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐，
a.其中组合物的好氧菌平板计数不超过20,000g/mL；
b.其中通过USP 921的方法Ic测试，组合物的水含量不大于1.0％；
c.其中组合物的水活度(Aw)小于0.9，
d.其中通过USP 281的方法测试，灼烧残留物不超过0.1％；
e.其中通过USP 231的方法II测试，重金属不超过20ppm；或者
f.其中通过经验证的HPLC方法测试，甲醇为NMT 3000ppm，四氢呋喃为NMT 720ppm，异丙醇为NMT 5000ppm，乙酸乙酯为NMT 5000ppm；正庚烷为NMT 5000ppm，并且乙醇为NMT5000ppm。
在另一方面，包含根据本文公开的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐的组合物每单位剂量包含0.01mg至200mg的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物。
在另一方面，包含根据本文公开的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐的组合物每单位剂量包含1mg至20mg的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物。
在另一方面，包含根据本文公开的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐的组合物包含0.01％至20％(wt/wt)的内昔芬或其盐或多晶型物。
在另一方面，本公开内容涉及包含根据本文公开的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐的组合物，其中该组合物包含0.1％至10％(wt/wt)的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物。
在另一方面，本公开内容涉及包含根据本文公开的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐的组合物，其还包含一种或多种赋形剂。
在另一方面，本公开内容涉及包含根据本文公开的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐的组合物，其还包含一种或多种赋形剂，其中该赋形剂为粘合剂、填充剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、控释剂、肠溶包衣剂、成膜剂、增塑剂、香化剂、调味剂或其组合。
在另一方面，本公开内容涉及包含根据本文公开的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐的组合物，其还包含一种或多种赋形剂，其中该赋形剂为组合物的约0.1％至约99％wt/wt。
在另一方面，本公开内容涉及包含根据本文公开的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐的组合物，其中该组合物包含一种或多种控释剂，该控释剂选自酸不溶性聚合物、丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸共聚物、邻苯二甲酸乙酸纤维素(CAP)、乙酸琥珀酸酯纤维素、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、羟丙基甲基纤维素乙酸琥珀酸酯(醋酸琥珀羟丙甲纤维素)、聚醋酸乙烯邻苯二甲酸酯(PVAP)、甲基丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸共聚物、虫胶、偏苯三酸醋酸纤维素、海藻酸钠、玉米蛋白、蜡，包括合成蜡、微晶蜡、石蜡、巴西棕榈蜡和蜂蜡、聚乙氧基蓖麻油衍生物、氢化油、甘油单-、二-、tribenates、单硬脂酸甘油酯、二硬脂酸甘油酯、长链醇，如硬脂醇、鲸蜡醇、聚乙二醇及其混合物。
在一方面，本公开内容涉及包含根据本文公开的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐的组合物，其中该组合物被配制用于口服、肠胃外、局部和导管内递送。
在另一方面，本公开内容涉及包含根据本文公开的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐的组合物，其中配制用于口服递送的组合物为片剂、囊片、胶囊、丸剂、粉剂、含片、酏剂、混悬剂、糖浆、糯米纸、口香糖、糖衣丸和锭剂。
在另一方面，本公开内容涉及包含根据本文公开的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐的组合物，其中配制用于口服递送的组合物为配制为肠溶片剂的片剂，配制为肠溶囊片的囊片，以及配制为肠溶胶囊的胶囊。
在另一方面，本公开内容涉及包含根据本文公开的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐的组合物，其中配制用于口服递送的组合物为配制为缓释片剂的片剂，配制为缓释囊片的囊片，或配制为缓释胶囊的胶囊。
在另一方面，本公开内容涉及包含根据本文公开的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐的组合物，其中将该组合物配制为用于口服递送，并且其中通过USP 711或701的方法测试，该组合物在胃中的释放为：
a.施用后2小时内少于10％的内昔芬；
b.施用后2小时内少于20％的内昔芬；
c.施用后2小时内少于30％的内昔芬；
d.施用后4小时内少于40％的内昔芬；或者
e.施用后6小时内少于50％的内昔芬。
在另一方面，本公开内容涉及包含根据本文公开的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐的组合物，其中将该组合物配制为用于口服递送，并且其中通过USP 711或701的方法测试，该组合物在胃中的释放为：
a.施用后2小时内少于10％的(Z)内昔芬；
b.施用后2小时内少于20％的(Z)内昔芬；
c.施用后4小时内少于40％的(Z)内昔芬；或者
d.施用后6小时内少于50％的(Z)内昔芬。
在另一方面，本公开内容涉及包含根据本文公开的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐的组合物，其中将该组合物配制为用于口服递送，并且其中通过USP 711或701方法测试，该组合物在肠中释放至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％的内昔芬。
在另一方面，本公开内容涉及包含根据本文公开的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐的组合物，其中将该组合物配制为用于口服递送，并且其中通过USP 711或701方法测试，该组合物在施用后2小时内在肠中释放至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％的内昔芬。
在另一方面，本公开内容涉及包含根据本文公开的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐的组合物，其中将该组合物配制为用于口服递送，并且其中通过USP 711或701方法测试，该组合物在施用后3小时内在肠中释放至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％的内昔芬。
在另一方面，本公开内容涉及包含根据本文公开的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐的组合物，其中将该组合物配制为用于口服递送，并且其中通过USP 711或701方法测试，该组合物在施用后4小时内在肠中释放至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％的内昔芬。
在另一方面，本公开内容涉及包含根据本文公开的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐的组合物，其中将该组合物配制为用于口服递送，并且其中通过USP 711或701方法测试，该组合物在小肠中的释放为：
a.施用后4小时后至少10％的内昔芬；
b.施用后6小时后至少30％的内昔芬；
c.施用后7小时后至少40％的内昔芬；
d.施用后8小时后至少50％的内昔芬；
e.施用后2小时后至少50％的内昔芬；
f.施用后2小时后至少60％的内昔芬；
g.施用后2小时后至少70％的内昔芬；
h.施用后2小时后至少80％的内昔芬；或者
i.施用后2小时后至少90％的内昔芬。
在另一方面，本公开内容涉及包含根据本文公开的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐的组合物，其中将该组合物配制为用于口服递送，并且其中通过USP 711方法测试，该组合物被配制为在施用后8小时后在结肠中释放至少50％的内昔芬。
在另一方面，本公开内容涉及配制用于口服施用的组合物，其包含：每单位剂量1mg至200mg的内昔芬；并且其中组合物稳定至少6个月。
在另一方面，本公开内容涉及配制用于口服施用的组合物，其包含：每单位剂量1mg至200mg的内昔芬；
其中该内昔芬为至少90％的(Z)-内昔芬游离碱；并且
其中：
该组合物的好氧菌平板计数不超过20,000g/mL；
根据USP 921的方法Ic确定，(Z)-内昔芬的水含量不超过1％；
通过USP 281的方法测试，(Z)-内昔芬的灼烧残留物不超过0.10％；或者
通过USP 231的方法II测试，重金属不超过20ppm。
在另一方面，本公开内容涉及配制用于口服施用的组合物，其包含：每单位剂量1mg至200mg的内昔芬，
其中该组合物被配制为肠溶片剂、肠溶囊片和肠溶胶囊；
其中通过USP 711的方法确定，该组合物被配制成在小肠中的释放为：
施用后4小时后至少25％的内昔芬；
施用后6小时后至少30％的内昔芬；
施用后7小时后至少40％的内昔芬；或者
施用后8小时后至少50％的内昔芬；或者
其中通过USP 711的方法确定，组合物被配制为在结肠中释放至少50％的内昔芬。
在另一方面，本公开内容涉及口服固体剂型组合物，其包含：每单位剂量1mg至200mg的内昔芬；
其中该内昔芬为至少90％的(Z)-内昔芬游离碱；并且
其中
该组合物的好氧菌平板计数不超过20,000g/mL；
根据USP 921的方法Ic确定，(Z)-内昔芬的水含量不超过1％；
通过USP 281的方法测试，(Z)-内昔芬的灼烧残留物不超过0.10％；或者
通过USP 231的方法II测试，重金属不超过20ppm；并且
其中该组合物被配制为肠溶片剂、肠溶囊片和肠溶胶囊；并且
其中该内昔芬是纯净的；或者
其中该组合物还包含赋形剂，该赋形剂选自粘合剂、填充剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、控释剂、肠溶包衣剂、成膜剂、增塑剂、着色剂、香化剂和调味剂或其组合。
在另一方面，本公开内容涉及肠溶胶囊，其包含通过本文所述的方法制备的(Z)-内昔芬游离碱。
在另一方面，本公开内容涉及肠溶胶囊，其包含每单位剂量1mg至200mg的纯净的内昔芬：
其中该内昔芬为至少90％的(Z)-内昔芬游离碱；并且
其中
该组合物的好氧菌平板计数不超过20,000g/mL；
根据USP 921的方法Ic确定，(Z)-内昔芬的水含量不超过1％；
通过USP 281的方法测试，(Z)-内昔芬的灼烧残留物不超过0.10％；并且
通过USP 231的方法II测试，重金属不超过20ppm。
在另一个方面，本公开内容涉及包含通过本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该内昔芬盐选自槟榔碱、苯磺酸盐、碳酸氢盐、酒石酸氢盐、丁基溴、柠檬酸盐、樟磺酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、乙醇酰阿散酸盐、己基间苯二酚盐、哈胺、氢溴酸盐、盐酸盐、羟萘甲酸酯、羟乙磺酸盐、苹果酸、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基溴、甲基溴、甲酯硝酸盐、甲基硫酸盐、黏酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、巴莫酸盐(双羟萘酸盐)、泛酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、多聚半乳糖醛酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、硫酸盐、鞣酸盐、茶氯酸盐、三乙基碘、苄星、氯咪唑、氯普鲁卡因、胆碱、二乙胺、二乙醇胺、乙二胺、甲葡胺、哌嗪、普鲁卡因、铝、钡、铋、锂、镁、钾和锌。
在另一方面，本公开内容涉及包含通过本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该内昔芬盐是内昔芬葡糖酸盐。
在另一方面，本公开内容涉及包含通过本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该内昔芬盐是选自(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐、(E)-内昔芬D-葡糖酸盐、(Z)-内昔芬L-葡糖酸盐和(E)-内昔芬L-葡糖酸盐或其组合的内昔芬葡糖酸盐。
在另一方面，本公开内容涉及包含通过本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该内昔芬盐是内昔芬葡糖酸盐，并且其中该内昔芬葡糖酸盐包含1％、5％、10％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％、96％、97％、98％、99％、99.5％、99.99％或100％(wt/wt)的(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐或(Z)-内昔芬L-葡糖酸盐。
在另一方面，本公开内容涉及包含通过本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该内昔芬盐是内昔芬葡糖酸盐，并且其中该内昔芬葡糖酸盐包含(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐和(E)-内昔芬D-葡糖酸盐，Z/E比为10:90、20:80；30:70；40:60；50:50、60:40；70:30；80:20、90:10；91:9；92:8；93:7；94:8；95:5；96:4、97:3；98:2；99:1；99.5:0.5；或99.99:0.01(wt/wt)。
在另一方面，本公开内容涉及包含通过本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，用于治疗和预防激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症，或两者。
在另一方面，本公开内容涉及包含通过本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，用于治疗和预防激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症，或两者，其中该激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症是良性乳腺病症、增生、异型、非典型导管增生、非典型小叶增生、乳腺密度增加、男性乳腺发育症、DCIS、LCIS、乳腺癌、性早熟、McCune-Albright综合征、子宫内膜癌、卵巢癌、子宫癌、宫颈癌、阴道癌或外阴癌。
在另一方面，本公开内容涉及包含通过本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，用于治疗和预防激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症，或两者，其中该激素依赖性乳腺病症是乳腺癌。
在另一方面，本公开内容涉及包含通过本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，用于治疗和预防激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症，或两者，其中该激素依赖性乳腺病症是乳腺癌，并且其中该乳腺癌是癌前阶段、早期癌症、非转移性癌症、转移前癌症、局部晚期癌症或转移性癌症。
在另一方面，本公开内容涉及包含通过本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，用于治疗和预防激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症，或两者，其中该激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症是他莫昔芬难治性或他莫昔芬耐受性的。
在另一方面，本公开内容涉及包含通过本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该组合物被施用于有此需要的受试者。
在另一方面，本公开内容涉及包含通过本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该组合物被施用于有此需要的受试者，并且其中该受试者患有激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症或两者，或存在其风险。
在另一方面，本公开内容涉及包含通过本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该组合物被施用于有此需要的受试者，其中该受试者的激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症是良性乳腺病症、增生、异型、非典型导管增生、非典型小叶增生、乳腺密度增加、男性乳腺发育症、DCIS、LCIS、乳腺癌、性早熟、McCune-Albright综合征、子宫内膜癌、卵巢癌、子宫癌、宫颈癌、阴道癌或外阴癌。
在另一方面，本公开内容涉及包含通过本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该组合物被施用于有此需要的受试者，其中该受试者患有乳腺癌，并且其中该乳腺癌是癌前阶段、早期癌症、非转移性癌症、转移前癌症、局部晚期癌症或转移性癌症。
在另一方面，本公开内容涉及包含通过本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该组合物被施用于有此需要的受试者，其中该受试者患有前列腺癌，并且其中该受试者已经或将要开始前列腺癌治疗。
在另一方面，本公开内容涉及包含通过本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该组合物被施用于有此需要的受试者，其中该受试者患有前列腺癌，并且其中该受试者患有男性乳腺发育症或存在其风险。
在另一方面，本公开内容涉及包含通过本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该组合物被施用于患有激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症或两者或存在其风险的受试者，并且其中该受试者的激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症是他莫昔芬难治性或他莫昔芬耐受性的。
在另一方面，本公开内容涉及包含通过本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该组合物以0.01mg、0.05mg、0.1mg、0.25mg、0.5mg、0.75mg、1.0mg、1.5mg、2.0mg、4mg、5mg、10mg、20mg、25mg、50mg或200mg(Z)-内昔芬的单位剂量施用于受试者。
在另一方面，本公开内容涉及包含通过本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该组合物以0.01mg、0.05mg、0.1mg、0.25mg、0.5mg、0.75mg、1.0mg、1.5mg、2.0mg、4mg、5mg、10mg、20mg、25mg、50mg或200mg(Z)-内昔芬的剂量施用于受试者。
在另一方面，本公开内容涉及包含通过本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该组合物每天一次、每天两次、每天三次、每天四次、隔日一次、每周两次、每周一次、每两周一次、每月两次、每月一次、每季度一次、每六个月一次或每年一次施用于受试者。
在另一方面，本公开内容涉及包含通过本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该组合物的口服施用将受试者的血浆内昔芬保持在大于30nM的水平。
在另一方面，本公开内容涉及包含通过本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该组合物作为联合疗法施用于受试者。
在另一方面，本公开内容涉及包含通过本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该组合物作为首选疗法、新辅助疗法或辅助疗法施用。
在另一方面，本公开内容涉及包含通过本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该组合物单独施用于受试者或与第二治疗剂联合施用于受试者。
在另一方面，本公开内容涉及包含通过本文所述的任何方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该组合物单独施用于受试者或与第二治疗剂联合施用于受试者，并且其中该第二治疗剂是比卡鲁胺、恩杂鲁胺或抗癌药物如曲妥珠单抗，抗肿瘤药如卡培他滨(Xeloda)、卡铂(Paraplatin)、顺铂(Platinol)、环磷酰胺(Neosar)、多西他赛(Docefrez，Taxotere)、多柔比星(阿霉素)、聚乙二醇化脂质体多柔比星(Doxil)、表柔比星(Ellence)、氟尿嘧啶(5-FU，Adrucil)、吉西他滨(Gemzar)、甲氨蝶呤(多个品牌)、紫杉醇(Taxol)、蛋白质结合的紫杉醇(Abraxane)、长春瑞滨(Navelbine)、艾日布林(Halaven)、伊沙匹隆(Ixempra)或ATP结合盒转运蛋白的抑制剂。
在另一方面，本公开内容涉及治疗有此需要的受试者的方法，该方法包括施用根据本文公开的任一方法制备的组合物。
在另一方面，本公开内容涉及治疗有此需要的受试者的方法，该方法包括施用包含根据本文公开的任一方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物。
在另一方面，本公开内容涉及治疗有此需要的受试者的方法，该方法包括施用包含根据本文公开的任一方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该受试者患有激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症或两者，或存在其风险。
在另一方面，本公开内容涉及治疗有此需要的受试者的方法，该方法包括施用包含根据本文公开的任一方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该受试者患有激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症或两者，或存在其风险，其中该激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症是良性乳腺病症、增生、异型、非典型导管增生、非典型小叶增生、乳腺密度增加、男性乳腺发育症、DCIS、LCIS、乳腺癌、性早熟、McCune-Albright综合征、子宫内膜癌、卵巢癌、子宫癌、宫颈癌、阴道癌或外阴癌。
在另一方面，本公开内容涉及治疗有此需要的受试者的方法，该方法包括施用包含根据本文公开的任一方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该受试者患有乳腺癌。
在另一方面，本公开内容涉及治疗有此需要的受试者的方法，该方法包括施用包含根据本文公开的任一方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该受试者患有乳腺癌，并且其中该乳腺癌是癌前阶段、早期癌症、非转移性癌症、转移前癌症、局部晚期癌症或转移性癌症。
在另一方面，本公开内容涉及治疗有此需要的受试者的方法，该方法包括施用包含根据本文公开的任一方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该受试者患有前列腺癌，并且其中该受试者还患有男性乳腺发育症或存在其风险。
在另一方面，本公开内容涉及治疗有此需要的受试者的方法，该方法包括施用包含根据本文公开的任一方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该受试者患有他莫昔芬难治性或他莫昔芬耐受性的激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症。
在另一方面，本公开内容涉及治疗有此需要的受试者的方法，该方法包括施用包含根据本文公开的任一方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该组合物以单位剂量0.01mg、0.05mg、0.1mg、0.25mg、0.5mg、0.75mg、1.0mg、1.5mg、2.0mg、4mg、5mg、6mg、8mg、10mg、20mg、25mg、50mg、100mg或200mg施用于受试者。
在另一方面，本公开内容涉及治疗有此需要的受试者的方法，该方法包括施用包含根据本文公开的任一方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该组合物每天一次、每天两次、每天三次、每天四次、隔日一次、每周两次、每周一次、每两周一次、每月两次、每月一次、每季度一次、每六个月一次或每年一次施用。
在另一方面，本公开内容涉及治疗有此需要的受试者的方法，该方法包括施用包含根据本文公开的任一方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该组合物的口服施用将受试者的血浆内昔芬保持在大于30nM的稳态水平。
在另一方面，本公开内容涉及治疗有此需要的受试者的方法，该方法包括施用包含根据本文公开的任一方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该组合物的口服施用在第一剂量(第1天)施用后的第14天使受试者的血浆内昔芬实现大于30nM的稳态水平。
在另一方面，本公开内容涉及治疗有此需要的受试者的方法，该方法包括施用包含(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该组合物的口服施用在第一剂量(第1天)施用后的第14天使受试者的血浆内昔芬实现大于30nM的稳态水平。
在另一方面，本公开内容涉及治疗有此需要的受试者的方法，该方法包括施用包含根据本文公开的任一方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该组合物的口服施用实现在施用后(给药后)2至10小时的在受试者体内到达内昔芬最大血浆水平的时间。
在另一方面，本公开内容涉及治疗有此需要的受试者的方法，该方法包括施用包含(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该组合物的口服施用实现在施用后(给药后)2至10小时的在受试者体内到达内昔芬最大血浆水平的时间。
在另一方面，本公开内容涉及治疗有此需要的受试者的方法，该方法包括施用包含(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中内昔芬在受试者体内的平均最终消除半衰期为给药后30到60小时。
在另一方面，本公开内容涉及治疗有此需要的受试者的方法，该方法包括施用包含(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中内昔芬在受试者体内的平均最终消除半衰期为给药后40到55小时。
在另一方面，本公开内容涉及治疗患有激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症或两者，或存在其风险的受试者的方法，该方法包括施用包含(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的口服组合物，其中该组合物的施用实现：
a.在施用后30小时至60小时范围内的在受试者体内的内昔芬平均半衰期；
b.在施用后2小时至10小时范围内的到达内昔芬最大血浆水平的时间；以及
c.大于30nM的内昔芬稳态血浆水平。
在另一方面，本公开内容涉及治疗患有激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症，或存在其风险的受试者的方法，该激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症选自良性乳腺病症、增生、异型、非典型导管增生、非典型小叶增生、乳腺密度增加、男性乳腺发育症、DCIS、LCIS、乳腺癌、性早熟、McCune-Albright综合征、子宫内膜癌、卵巢癌、子宫癌、宫颈癌、阴道癌和外阴癌，该方法包括施用包含(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的口服组合物，其中该组合物的施用实现：
a.在施用后30小时至60小时范围内的在受试者体内的内昔芬平均半衰期；
b.在施用后2小时至10小时范围内的到达内昔芬最大血浆水平的时间；以及
c.大于30nM的内昔芬稳态血浆水平。
在另一方面，本公开内容涉及治疗患有激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症，或存在其风险的受试者的方法，该激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症选自良性乳腺病症、增生、异型、非典型导管增生、非典型小叶增生、乳腺密度增加、男性乳腺发育症、DCIS、LCIS、乳腺癌、性早熟、McCune-Albright综合征、子宫内膜癌、卵巢癌、子宫癌、宫颈癌、阴道癌和外阴癌，该方法包括施用包含(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的口服组合物，该组合物被配制为肠溶片剂、肠溶囊片、肠溶胶囊、缓释片剂、缓释囊片或缓释胶囊，其中该组合物的施用实现：
a.在施用后30小时至60小时范围内的在受试者体内的内昔芬平均半衰期；
b.在施用后2小时至10小时范围内的到达内昔芬最大血浆水平的时间；以及
c.大于30nM的内昔芬稳态血浆水平。
在另一方面，本公开内容涉及治疗患有激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症，或存在其风险的受试者的方法，该激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症选自良性乳腺病症、增生、异型、非典型导管增生、非典型小叶增生、乳腺密度增加、男性乳腺发育症、DCIS、LCIS、乳腺癌、性早熟、McCune-Albright综合征、子宫内膜癌、卵巢癌、子宫癌、宫颈癌、阴道癌和外阴癌，该方法包括施用包含(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的口服组合物，该组合物被配制为肠溶片剂、肠溶囊片、肠溶胶囊、缓释片剂、缓释囊片或缓释胶囊，其中该组合物的施用实现：
a.在施用后30小时至60小时范围内的在受试者体内的内昔芬平均半衰期；
b.在施用后2小时至10小时范围内的到达内昔芬最大血浆水平的时间；以及
c.大于30nM的内昔芬稳态血浆水平；并且
其中至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％的内昔芬在肠中释放。
在另一方面，本公开内容涉及治疗患有激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症，或存在其风险的受试者的方法，该激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症选自良性乳腺病症、增生、异型、非典型导管增生、非典型小叶增生、乳腺密度增加、男性乳腺发育症、DCIS、LCIS、乳腺癌、性早熟、McCune-Albright综合征、子宫内膜癌、卵巢癌、子宫癌、宫颈癌、阴道癌和外阴癌，该方法包括施用包含0.01mg至200mg的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的口服组合物，该组合物被配制为肠溶片剂、肠溶囊片、肠溶胶囊、缓释片剂、缓释囊片或缓释胶囊，其中该组合物的施用实现：
a.在施用后30小时至60小时范围内的在受试者体内的内昔芬平均半衰期；
b.在施用后2小时至10小时范围内的到达内昔芬最大血浆水平的时间；以及
c.大于30nM的内昔芬稳态血浆水平；并且
其中至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％的内昔芬在肠中释放。
在另一方面，本公开内容涉及治疗患有激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症或存在其风险的受试者的方法，该激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症选自良性乳腺病症、增生、异型、非典型导管增生、非典型小叶增生、乳腺密度增加、男性乳腺发育症、DCIS、LCIS、乳腺癌、性早熟、McCune-Albright综合征、子宫内膜癌、卵巢癌、子宫癌、宫颈癌、阴道癌和外阴癌，该方法包括每天施用包含0.01mg至200mg的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的口服组合物，配制为肠溶片剂、肠溶囊片、肠溶胶囊、缓释片剂、缓释囊片或缓释胶囊，其中该组合物的施用实现：
a.在施用后30小时至60小时范围内的在受试者体内的内昔芬平均半衰期；
b.在施用后2小时至10小时范围内的到达内昔芬最大血浆水平的时间；以及
c.大于30nM的内昔芬稳态血浆水平。
在另一方面，本公开内容涉及治疗患有激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症，或存在其风险的受试者的方法，该激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症选自良性乳腺病症、增生、异型、非典型导管增生、非典型小叶增生、乳腺密度增加、男性乳腺发育症、DCIS、LCIS、乳腺癌、性早熟、McCune-Albright综合征、子宫内膜癌、卵巢癌、子宫癌、宫颈癌、阴道癌和外阴癌，该方法包括每天施用包含0.01mg至200mg的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的口服组合物，该组合物被配制为肠溶片剂、肠溶囊片、肠溶胶囊、缓释片剂、缓释囊片或缓释胶囊，其中该组合物的施用实现：
a.在施用后30小时至60小时范围内的在受试者体内的内昔芬平均半衰期；
b.在施用后2小时至10小时范围内的到达内昔芬最大血浆水平的时间；以及
c.大于30nM的内昔芬稳态血浆水平；并且
其中至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％的内昔芬在肠中释放。
在另一方面，本公开内容涉及治疗患有激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症，或存在其风险的受试者的方法，该激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症选自良性乳腺病症、增生、异型、非典型导管增生、非典型小叶增生、乳腺密度增加、男性乳腺发育症、DCIS、LCIS、乳腺癌、性早熟、McCune-Albright综合征、子宫内膜癌、卵巢癌、子宫癌、宫颈癌、阴道癌和外阴癌，该方法包括每天施用包含0.01mg至200mg的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的口服组合物，该组合物被配制为肠溶片剂、肠溶囊片、肠溶胶囊、缓释片剂、缓释囊片或缓释胶囊，其中该组合物的施用实现：
a.在施用后30小时至60小时范围内的在受试者体内的内昔芬平均半衰期；
b.在施用后2小时至10小时范围内的到达内昔芬最大血浆水平的时间；以及
c.大于30nM的内昔芬稳态血浆水平；
其中外推至时间无穷的曲线下平均面积(AUC0-inf)为200hr*ng/mL至10000hr*ng/mL、300hr*ng/mL至8000hr*ng/mL、400hr*ng/mL至6000hr*ng/mL或700hr*ng/mL至6000hr*ng/mL；并且
其中至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％的内昔芬在肠中释放。
在另一方面，本公开内容涉及治疗有此需要的受试者的方法，该方法包括施用包含根据本文公开的任一方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该方法是首选疗法、新辅助疗法或辅助疗法。
在另一方面，本公开内容涉及治疗有此需要的受试者的方法，该方法包括施用包含根据本文公开的任一方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中将该组合物作为联合疗法施用于受试者。
在另一方面，本公开内容涉及治疗有此需要的受试者的方法，该方法包括施用包含根据本文公开的任一方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中该组合物单独施用于受试者或与第二治疗剂联合施用于受试者。
在另一方面，本公开内容涉及治疗有此需要的受试者的方法，该方法包括施用包含根据本文公开的任一方法制备的(Z)-内昔芬或其盐或多晶型物的组合物，其中将组合物与第二治疗剂一起施用于受试者，该第二治疗剂选自比卡鲁胺、恩杂鲁胺或抗癌药物如曲妥珠单抗，抗肿瘤药如卡培他滨(Xeloda)、卡铂(Paraplatin)、顺铂(Platinol)、环磷酰胺(Neosar)、多西他赛(Docefrez，Taxotere)、多柔比星(阿霉素)、聚乙二醇化脂质体多柔比星(Doxil)、表柔比星(Ellence)、氟尿嘧啶(5-FU，Adrucil)、吉西他滨(Gemzar)、甲氨蝶呤(多个品牌)、紫杉醇(Taxol)、蛋白质结合的紫杉醇(Abraxane)、长春瑞滨(Navelbine)、艾日布林(Halaven)、伊沙匹隆(Ixempra)和ATP结合盒蛋白转运抑制剂。
在另一方面，本公开内容涉及在受试者中治疗和预防激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症或两者的使用，该使用包含：
向受试者给予包含他莫昔芬的第一组合物；
确定从受试者获得的测试样品中受试者的他莫昔芬-代谢物谱；
基于受试者的他莫昔芬-代谢物谱，确定受试者的血浆内昔芬水平与参考他莫昔芬-代谢物谱中的血浆内昔芬水平相比降低；以及
向受试者施用本公开内容的组合物。
在另一方面，本公开内容涉及在受试者中治疗和预防激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症或两者的使用，该使用包含：
向受试者给予包含他莫昔芬的第一组合物；
确定从受试者获得的测试样品中受试者的他莫昔芬-代谢物谱；
基于受试者的他莫昔芬-代谢物谱，确定受试者的血浆内昔芬水平与参考他莫昔芬-代谢物谱中的血浆内昔芬水平相比降低；以及
向受试者施用本公开内容的组合物；
其中该组合物以足以使受试者的血浆内昔芬保持在大于30nM的稳态水平的剂量口服施用；
其中该他莫昔芬-代谢物谱包含至少他莫昔芬、4-羟基他莫昔芬、n-脱甲基他莫昔芬或内昔芬的组；
其中该激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症是良性乳腺病症、增生、异型、非典型导管增生、非典型小叶增生、乳腺密度增加、男性乳腺发育症、DCIS、LCIS、乳腺癌、性早熟、McCune-Albright综合征、子宫内膜癌、卵巢癌、子宫癌、宫颈癌、阴道癌或外阴癌；
其中该激素依赖性乳腺病症是癌前阶段、早期癌症、非转移性癌症、转移前癌症、局部晚期癌症或转移性癌症；
其中该激素依赖性乳腺病症是非转移性癌症；
其中该受试者患有前列腺癌，并且其中该受试者还患有男性乳腺发育症或存在其风险；或者
其中该激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症是他莫昔芬难治性或他莫昔芬耐受性的。
在另一方面，本公开内容涉及用于在有此需要的受试者中治疗患有激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症，或存在其风险的受试者的试剂盒，包含：(a)本公开内容的组合物；和(b)用于容纳该组合物的密封容器；以及c)口服施用组合物的使用说明。
在另一方面，本公开内容涉及用于在有此需要的受试者中治疗患有激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症，或存在其风险的受试者的试剂盒，包含：(a)本公开内容的组合物；和(b)用于容纳该组合物的密封容器；以及c)口服施用组合物的使用说明，其中该试剂盒包含第二治疗剂，该第二治疗剂选自比卡鲁胺、恩杂鲁胺和抗癌药物如曲妥珠单抗，抗肿瘤药如卡培他滨(Xeloda)、卡铂(Paraplatin)、顺铂(Platinol)、环磷酰胺(Neosar)、多西他赛(Docefrez，Taxotere)、多柔比星(阿霉素)、聚乙二醇化脂质体多柔比星(Doxil)、表柔比星(Ellence)、氟尿嘧啶(5-FU，Adrucil)、吉西他滨(Gemzar)、甲氨蝶呤(多个品牌)、紫杉醇(Taxol)、蛋白质结合的紫杉醇(Abraxane)、长春瑞滨(Navelbine)、艾日布林(Halaven)、伊沙匹隆(Ixempra)和ATP结合盒蛋白转运抑制剂。
在另一方面，本公开内容涉及将根据本文所述的任何方法制备的组合物施用于有此需要的受试者的方法，该施用是根据包含在包含该组合物的试剂盒中的使用说明。
实施例
本文使用的缩写
ACN/PPW＝乙腈/过程纯化水
NaHCO3＝碳酸氢钠
HCl＝盐酸
THF＝四氢呋喃
MeTHF＝2-甲基四氢呋喃
CH2Cl2＝二氯甲烷
EtOH＝乙醇
MeOH＝甲醇
EtOAc＝乙酸乙酯
IPA＝2-丙醇；异丙醇
TFA＝三氟乙酸
TCA＝三氯乙酸
PPW＝过程纯化水
IPA/PPW＝异丙醇/过程纯化水
实施例1：(Z)-内昔芬游离碱的富集和制备
A.分级结晶
(Z)-内昔芬游离碱(药物物质)可以通过本文所述的分级结晶由(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的混合物制备。简言之，将可商购的(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬异形体的粗制内昔芬混合物(Astatech Ltd.China)用作起始原料，以制备作为游离碱的(Z)-内昔芬。
i.通过将1g具有比例(E/Z比)为51/1、1/1.8和1/5.8的(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的内昔芬各自悬浮在10倍体积的溶剂异丙醇(IPA)中，制备E/Z-内昔芬溶液。通过将1g E/Z比为51/1、1/1.8和1/5.8的内昔芬各自悬浮在10倍体积的溶剂EtOAc中来制备第二组溶液。将溶液加热至50℃的第一温度，从而产生热浆，并在50℃下搅拌过夜。使用孔径为0.5μm的纤维素过滤器过滤热浆样品。然后将混合物冷却至第二温度——室温23℃，同时搅拌12小时以进行结晶。使用孔径为0.5μm的纤维素过滤器过滤冷却样品的等分试样。分别取在50℃和23℃的温度下的固体和滤液的等分试样，并通过HPLC-UV监测以测定它们的E/Z-内昔芬比。将富集(Z)-内昔芬的滤液和富集E-内昔芬的滤液加回到它们各自的母液中。
使用Luna苯基己基柱(4.6mm×150mm×3μm粒径)进行样品的HPLC-UV分析。柱温为40℃，并且样品室的温度保持在环境温度。通过将固体和滤液以0.2mg样品/ml溶解在甲醇中作为样品缓冲液来制备样品。然后将样品以20μl的进样量注入柱中。同样，使用流动相中的弱酸性(pH 4.3)的甲酸铵缓冲液/甲醇，梯度洗脱。流动相系统组成如下：流动相A(MPA)缓冲液为在水中的10mM HCOONH4以及0.03％HCOOH缓冲液，流动相B(MBP)缓冲液为在甲醇中的10mM HCOONH4，使用梯度程序。
表1：梯度程序
时间(m) MPA(％) MPB(％)
0 50 50
15 30 70
25 5 95
30 50 50
运行时间为30m，流速为1.0mL/m，并且延迟时间为5m。样品在243nm处进行UV检测。(E)-内昔芬的保留时间通常为12.95至13.20m，并且(Z)-内昔芬的保留时间通常为14.0至14.33m。(E)-内昔芬的相对保留时间(RRT)为0.4至0.9，并且(Z)-内昔芬的相对保留时间为1.0。
表2：在IPA和EtOAc中从E/Z-内昔芬混合物的热浆富集内昔芬(Z)-和(E)-异构体。
Figure BDA0002485802470000921
结果(表2)表明，可以使用商用的粗制E/Z-内昔芬起始原料从由IPA和EtOAc制成的内昔芬混合物热浆中富集Z-内昔芬。可以从E/Z为1:1的E/Z-内昔芬混合物，以及在混合物中Z-内昔芬水平更高的情况下(例如1:8和1:5.8)纯化Z-内昔芬。使用分级结晶方法，在单个步骤中实现了Z-内昔芬的大量富集，例如本文实施例1A所述的E/Z比1:90。观察到(Z)-内昔芬比(E)-内昔芬更易溶于EtOAc。与在IPA中相比，在EtOAc中时，(Z)-内昔芬还趋于在滤液中以更大的量残留。固体和滤液都可用于(Z)-内昔芬游离碱的制备。通过将滤液加回至第一滤液(第一母液)，也可以进行Z-内昔芬的连续富集。
类似地，可以从在E/Z混合物中具有较高E-内昔芬水平的E/Z-内昔芬混合物纯化E-内昔芬。
ii.在实验中获得了相似的结果，其中将E/Z-内昔芬混合物悬浮在由IPA/PPW(1:1v/v)混合物制备的热浆中，并用预冷的IPA/PPW(1:1)萃取和洗涤，以形成具有富集的(Z)-内昔芬的结晶固体和滤液。
B.从固体部分重结晶
可以通过使E/Z-内昔芬比为51:1、1:1.8和1:5.6的内昔芬混合物，以及由分级结晶获得的固体和母液经受一轮或多轮重结晶来进行(Z)-内昔芬的连续富集。
通过在本文所述的条件下，用溶剂如乙醇、乙酸乙酯/正庚烷、丙酮/MTBE、IPA、IPA/PPW等重结晶，可以从粗制E/Z-内昔芬混合物、(Z)-富集的结晶固体和(Z)-富集的母液以基本纯化的形式富集(Z)-内昔芬。
乙醇。使用从上述E/Z-内昔芬热IPA浆混合物获得的结晶固体来获得进一步纯化的Z-内昔芬。冷却至23℃后，将上述表2的样品2(80g)和样品3(79g)的固体部分结合，并使用1000mL(1L)EtOH重结晶。将乙醇混合物加热至回流。溶解点为75℃。使用纤维素过滤器(孔径0.5μm)过滤加热的溶液，以通过精过滤除去外来杂质，如棉纤维。然后首先将滤液溶液在70℃搅拌30分钟。然后将溶液冷却至0℃-5℃，并在0℃-5℃连续搅拌5h。再次过滤溶液。过滤器上的晶体用200mL的EtOH洗涤。
结果表明，当用EtOH重结晶时，内昔芬的固体晶体的E/Z比>1/100(0.22％/99.48％)，并且滤液中内昔芬的E/Z比为1/5.9(13.93％/82.48％)。通过此方法进行的至少3个不同实验的HPLC分析表明，(Z)内昔芬的保留时间为14.00m，E-内昔芬的保留时间为13.14m。(Z)-内昔芬的水平为97％至99.48％，而(E)-内昔芬的水平为0.22％至2.14％。其他杂质＜1％。
乙酸乙酯/正庚烷。研究了用EtOAc/正庚烷重结晶的可行性，如下所述。
将5g内昔芬(E/Z比1/5.8)添加至EtOAc/正庚烷(140mL，1/1v/v)并加热至回流(约82℃)，同时搅拌过夜，以获得澄清的溶液。混合物的浊点为30℃。然后将混合物冷却至室温以沉淀产物，并过滤。如上所述分离后，通过HPLC测定，固体产物的内昔芬的E/Z比为1/8.1(10.9％:88.60％)，产物产率为66％(3.3g)。滤液中的(Z)-内昔芬被富集，E/Z比为1:3(23.94％:74.47％)。使用EtOAc/正庚烷重结晶也可以提供纯化的Z-内昔芬，其E/Z比类似于热IPA浆的E/Z比，如表3所示。
表3：使用EtOAc/正庚烷溶剂从E/Z-内昔芬混合物重结晶(Z)-内昔芬。
Figure BDA0002485802470000941
丙酮/MTBE。将0.5g内昔芬(E/Z比1/1.8)添加至丙酮(10v；5mL)溶剂，并将抗溶剂MTBE(9mL)添加至溶液并加热至回流(约82℃)，同时搅拌过夜，以获得澄清的溶液。混合物的浊点为约22℃。然后将混合物冷却至室温以沉淀产物，并过滤。通过HPLC测定，固体产物中的内昔芬的E/Z比为39/1，同时滤液富集(Z)-内昔芬，E/Z比为1:2.6。丙酮/MTBE溶剂体系可用于将E-内昔芬分离至固体而(Z)-内昔芬在滤液中。
C.从母液重结晶
纯化的(Z)-内昔芬可从富集(Z)-内昔芬的母液回收，如下表4和表5所示。
i.可以将粗制E/Z-内昔芬混合物的起始原料溶于第一溶剂乙酸乙酯中，以形成第一母液，(Z)-内昔芬可以从该母液通过第二步——添加第二溶剂如正庚烷或乙醇进行回收，如表4所示。
表4.Z-内昔芬的重结晶
Figure BDA0002485802470000951
ii.(Z)-内昔芬通过以下方法制备：第一步——将粗制E/Z-内昔芬混合物溶于第一溶剂乙酸乙酯中，使(Z)-内昔芬富集至第一母液；第二步——添加第二溶剂IPA，以形成结晶(Z)-内昔芬和第二母液；以及添加第三溶剂乙醇以重结晶并从第二母液回收(Z)-内昔芬的步骤。
简要地，将内昔芬(E/Z＝1/1.8，30g)和(E/Z＝1.2/1，50g非-GMP)分别溶解于EtOAc 300mL和500mL中，加热至溶解(约70℃)。然后将混合物冷却至25℃，同时搅拌过夜以进行沉淀。过滤悬浮液，并通过HPLC测定固体和滤液的E/Z比。
接下来，将滤液浓缩至干燥，并分别添加IPA 230mL和900mL，以在搅拌下形成热浆(50℃)。将热浆在50℃连续搅拌过夜。然后将浆冷却至25℃分别持续0.5h和1h，并且过滤。再次测定固体中的Z-内昔芬和滤液。
通过在NMT 70℃下加热至溶解并冷却至25℃分别持续0.5h和1h，将每个样品的固体(14.8g和21.6g)进一步从148mL和220mL EtOH重结晶。将样品进一步冷却至0℃–5℃持续1h并过滤。再次通过HPLC测定固体和滤液的E/Z比。以下表5提供了每个样品的E/Z比和纯度。
表5：从富集(Z)-内昔芬的母液回收(Z)-内昔芬
Figure BDA0002485802470000961
结果表明，通过使E/Z-内昔芬混合物经受用第一溶剂乙酸乙酯的分级结晶以形成结晶固体和第一母液，使第一母液经受用第二溶剂如热IPA的结晶以形成第二结晶固体和第二母液，然后使固体从第三溶剂如乙醇重结晶，可以获得大于90％的纯化的结晶(Z)-内昔芬。大于95％的(Z)-内昔芬产率也是可行的。(E)/(Z)-内昔芬之比可以从约1.2:1和1:1.8提高至1:51至1:118以上。如上所述，通过HPLC方法分析了(Z)-内昔芬的杂质谱，发现其小于＜2％。(Z)-内昔芬和(E)-内昔芬的保留时间分别为14.19m和13.2m。
实施例2：富集(E)-内昔芬的E/Z混合物的再平衡
富集(E)-内昔芬的E/Z-内昔芬混合物也可用于制备Z-内昔芬游离碱(除了用于制备纯化的(E)-内昔芬之外)。富集(E)-内昔芬的E/Z-内昔芬混合物从E/Z比≥/Z从:1(例如，E/Z比为51:1)再平衡成约约1:1的混合物。本公开内容包含这样的想法，即可以用具有任何E/Z比如99:1至1:99的起始E/Z-内昔芬混合物进行再平衡。这种再平衡可用于制备稳定的(E)/(Z)-内昔芬约1:1混合物，以及进一步富集和纯化Z-内昔芬游离碱，如上述实施例1所述。
简要地，通过将粗制E/Z-内昔芬在酸如乙酸、盐酸、三氯乙酸或三氟乙酸的存在下，在惰性溶剂如乙腈/水(8:1)或二氯甲烷中溶解，将(E)-内昔芬转化为(Z)-内昔芬。将具有ACN/PPW的反应混合物在60℃搅拌1小时，同时将具有二氯甲烷和TFA的反应混合物在室温搅拌1小时。如表6所述进行后处理后，测定产物的E/Z比为E/Z-内昔芬(比例约为1:1)，纯度大于90％。
表6：E/Z-内昔芬(E/Z比51/1)再平衡至E/Z比约1:1
Figure BDA0002485802470000971
实施例3：(E)-内昔芬的纯化
通过将反应混合物加热至NMT 70℃以得到澄清溶液，冷却至0℃–5℃以沉淀产物，经由在EtOH(500mL)中重结晶而类似地纯化(E)-内昔芬。通过本文所述的方法纯化后，以76％的产率得到38.1g的(E)-内昔芬，纯度为97.6％。
实施例4：扩大规模
本文公开的合成和纯化方法也可用于(Z)-内昔芬的大规模制备，以制备工业药物产品剂型，例如，口服、透皮/局部、鼻腔、导管内胃肠外剂型，供受试者临床使用。使用5g、100g和110g的E/Z比为1/5.8的式(III)化合物——E/Z-内昔芬混合物进行结晶的可行性研究是通过将E/Z-内昔芬混合物悬浮在10倍体积的IPA中，并加热至50℃并在50℃搅拌4h。使用孔径为0.5μm的纤维素过滤器过滤样品，并测定固体中的E/Z比。过滤后，将样品冷却至23℃，并在23℃连续搅拌4h。再次过滤样品。如上所述，通过HPLC监测固体和滤液的(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬水平，并且结果如下表7所示。
表7.(Z)-内昔芬的大规模制备
Figure BDA0002485802470000981
结果表明，Z-内昔芬可以从IPA溶剂中的E/Z-内昔芬混合物以≥90％的浓度作为结晶固体获得，并且滤液中的(Z)-内昔芬游离碱的含量≥≥碱％。因此，IPA可用作第一溶剂或第二溶剂或两者。
实施例5：工业上可扩展的[4-[2-(甲氨基)乙氧基]苯基](4-羟苯基)甲酮)的制备
Figure BDA0002485802470000991
在氮气气氛下，在合适的10L反应器中加入起始原料式(I)化合物——[4-[2-(二甲氨基)乙氧基]苯基](4-羟苯基)甲酮(0.5kg，1.0当量)、DIPEA(1.5kg，6.65当量，3.0wt./wt.)和四氢呋喃(5L，10vol./wt.，8.9wt./wt.)。缓慢添加氯甲酸1-氯乙酯(1.7kg，6.65当量，3.3wt./wt.)，同时将内部温度保持在NMT 20℃。将混合物加热至回流，并在回流下搅拌NLT 12hr。将混合物在NMT 75℃下减压蒸发，直至体积达到最低可搅拌体积。缓慢添加甲醇(2.5L，5vol./wt.，4.0wt./wt.)，并将混合物在NMT 75℃减压蒸馏，直至体积达到最低可搅拌体积。添加甲醇(2.5L，5vol./wt.，4.0wt./wt.)，并将混合物在NMT 75℃减压蒸馏，直至体积达到最低可搅拌体积。再次添加甲醇(2.5L，5vol./wt.，4.0wt./wt.)，并将混合物在NMT 75℃进一步减压蒸馏，直至体积再次达到最低可搅拌体积。将甲醇(2L，4vol./wt.，3.2wt./wt.)和6N HCl(2L，4vol./wt.，4.0wt./wt.)添加至混合物，并将混合物加热回流。将混合物在回流下搅拌NLT 12hr。反应完成后，将混合物在NMT 75℃减压蒸发，直至除去大部分MeOH。将混合物冷却至25±5℃，并缓慢添加8N NaOH(2.5L，5vol./wt.，5.0wt./wt.)，直至混合物的pH为11-12。将混合物在0-5℃搅拌NLT 2hr。将混合物过滤并用H2O(1L，2vol./wt.)和乙酸乙酯(1L，2vol./wt.，1.8wt./wt.)洗涤。将湿饼在NMT 50℃减压干燥，以提供式(II)化合物——(4-羟苯基)(4-(2-(甲氨基)乙氧基)苯基)甲酮。产率：297gm，63％；纯度：100％(预期产率–60–90％)。
实施例6：工业上可扩展的[4-[2-(甲氨基)乙氧基]苯基](4-羟苯基)甲酮)的制备
Figure BDA0002485802470001001
在氮气气氛下，在合适的2L反应器中加入起始原料式(I)化合物——[4-[2-(二甲氨基)乙氧基]苯基](4-羟苯基)甲酮(70gm，1.0当量)、N-乙基二异丙胺(126gm，4.0当量，1.8wt.)和四氢呋喃(700mL，10.0vol.，8.9wt.)。将混合物加热至NLT 60℃，并添加氯甲酸1-氯乙酯(140gm，4.0当量，2.0wt.)。将混合物加热至回流并搅拌NLT 12hr。浓缩混合物直至体积达到3vol。缓慢添加甲醇(350mL，5.0vol.，4.0wt.)，并将混合物浓缩直至体积达到3vol.(210mL)。接下来，添加甲醇(350mL，5.0vol.，4.0wt.)，并将混合物浓缩直至体积达到4vol.(280mL)。添加6N HCl(280mL，4.0vol.，4.0wt.)，并将混合物加热至回流。将混合物在回流下搅拌NLT 12hr。反应完成后，将混合物浓缩直至体积达到约4vol.(280mL)。将混合物冷却至环境温度，并缓慢添加8N NaOH(NLT 350mL，5.0vol.，5.0wt.)，直至混合物的pH为NLT 13。将乙酸乙酯(280mL，4.0vol.，3.6wt.)添加至混合物以进行萃取。相分离后，向水层添加6N HCl(NLT 42mL，0.6vol.，0.6wt.)，直至pH为8-10。将混合物冷却至0±5℃，并搅拌NLT 2hr。将混合物过滤并用纯化水(NLT 140mL，2.0vol.，2.0wt.)和乙酸乙酯(NLT 140mL，2vol.，1.8wt.)洗涤。将湿饼在NMT 60℃减压干燥，以提供式(II)化合物——(4-羟苯基)(4-(2-(甲氨基)乙氧基)苯基)甲酮。产率：55.2gm，83％；纯度：100％(预期产率–NLT70％)。
实施例7：工业上可扩展的E/Z-内昔芬混合物在McMurry反应中的制备
Figure BDA0002485802470001002
在氮气气氛下，在合适的10L反应器中加入Zn粉(0.27kg，4.0当量，0.9wt./wt.)和四氢呋喃(1.5L，5vol./wt.，4.4wt./wt.)。缓慢添加TiCl4(0.42kg，2.0当量，1.4wt./wt.)，同时将内部温度保持在NMT 15℃。将反应加热至回流，并在回流下搅拌NLT 2hr。添加由步骤1获得的式(II)化合物——(4-羟苯基)(4-(2-(甲氨基)乙氧基)苯基)甲酮(0.297kg，1.0当量)和苯基乙基酮(0.21kg，1.5当量，0.7wt./wt.)在四氢呋喃(3.0L，10vol./wt.，8.9wt./wt.)中的悬浮液，并继续回流NLT 8hr。将混合物冷却至20-30℃，并添加到25％氯化铵(5.9L，20vol./wt.，20wt./wt.)/可从Sigma Aldrich获得的二氧化硅(硅藻土/二氧化硅；商品名
Figure BDA0002485802470001011
S)(0.3kg，1.0wt./wt.)混合物中。将混合物过滤并用四氢呋喃(0.9L，3vol./wt.，2.7wt./wt.)洗涤。
将混合物沉降以进行相分离。收集有机层，并用四氢呋喃(0.9L，3vol./wt.，2.7wt./wt.)洗涤水层。再次收集有机层，并与第一有机层结合。结合的有机层用40％K2CO3(1.2L，4vol./wt.，5.6wt./wt.)洗涤。将有机层在NMT 75℃减压浓缩，直至体积达到最低可搅拌体积。添加乙酸乙酯(1.5L，5vol./wt.，4.5wt./wt.)，并将混合物在NMT75℃减压蒸馏，直至体积达到最低可搅拌体积。添加乙酸乙酯(1.5L，5vol./wt.，4.5wt./wt.)，并将混合物在NMT 75℃减压蒸馏，直至体积达到5vol.(1.5L)。将混合物加热至溶解，并添加正庚烷(3.0L，10vol./wt.，6.8wt./wt.)。将混合物冷却至0±5℃，并在0±5℃搅拌NLT 2hr。过滤混合物，并将残余物用乙酸乙酯/正庚烷＝1/2(v/v，1.5L，5vol./wt.，3.7wt./wt.)洗涤。将残余的湿饼在NMT 60℃减压干燥，以提供(Z)-内昔芬和(E)-内昔芬的混合物，(E/Z)-4-[1-[4-[2-(甲氨基)乙氧基]苯基]-2-苯基-1-丁烯-1-基]酚，即式(III)化合物。产率：176g，42％；纯度：81.96％。E/Z比：3.1:1(预期产率–40–60％)。
在合适的10L反应器中加入上述(E/Z)-内昔芬(0.250kg，1.0wt.)、异丙醇(1.25L，5vol./wt.，3.9wt./wt.)和纯化水(1.25L，5vol./wt.，5.0wt./wt.)。将混合物加热至70±5℃，并在70±5℃搅拌NLT 2hr。将混合物冷却至0±5℃，并在0-5℃搅拌NLT 2hr。将混合物过滤并用预冷的异丙醇/纯化水＝1/1(0.5L，2vol./wt.，3.6wt./wt.)洗涤。将残余的湿饼在NMT 60℃干燥，以提供(Z)-内昔芬和(E)-内昔芬的混合物，(E/Z)-4-[1-[4-[2-(甲氨基)乙氧基]苯基]-2-苯基-1-丁烯-1-基]酚，即式(III)化合物。产率：105g，41％；纯度：96.79％。E/Z比：48.6:1(预期产率–40–60％)。
实施例8：工业上可扩展的E/Z-内昔芬混合物在McMurry反应中的制备
Figure BDA0002485802470001021
在氮气气氛下，向合适的反应器中加入锌粉(10gm，4.0当量，1.0wt.)和四氢呋喃(50mL，5.0vol.，4.3wt.)。缓慢添加氯化钛(IV)(14gm，2.0当量，1.4wt.)，同时将内部温度保持在NMT 45℃。将反应加热至65±5℃并搅拌NLT 2hr。将由实施例5获得的式(II)化合物——(4-羟苯基)(4-(2-(甲氨基)乙氧基)苯基)甲酮(10gm，1.0当量)和苯基乙基酮(5gm，1.0当量，0.5wt.)在四氢呋喃(100mL，10.0vol.，8.5wt.)中的悬浮液添加到上述混合物，并在65±5℃搅拌NLT 8hr。将混合物冷却至NMT 30℃，并添加40％K2CO3(20mL，2.0vol.，2.0wt.)。将混合物搅拌NLT 1hr。将混合物过滤并用Me-THF(40mL，4.0vol.，3.5wt.)洗涤。向滤液添加40％K2CO3(30mL，3.0vol.，3.0wt.)，并搅拌NLT 30min。将混合物过滤并用Me-THF(20mL，2.0vol.，1.7wt.)洗涤。使滤液沉降以进行相分离，并将有机层浓缩直至体积达到3vol.(30mL)。用1N NaOH(100mL，10.0vol.，10.0wt.)萃取混合物，并弃去有机层。向水层添加氯化钠(1gm，0.10wt.)，然后用Me-THF(50mL，5.0vol.，4.3wt.)萃取4次。组合4个有机层并浓缩直至体积达到5vol。将混合物用20％NaCl(50mL，5.0vol.，5.0wt.)萃取。向有机层添加异丙醇(50mL，5.0vol.，3.9wt.)，并将混合物浓缩直至体积达到3vol。添加异丙醇(50mL，5.0vol.，4.5wt.)，并将混合物浓缩直至体积达到3vol。(30mL)。将混合物加热至65±5℃，并添加正庚烷(120mL，12.0vol.，8.2wt.)。将混合物冷却至NMT 5℃，并在NMT 5℃搅拌NLT2hr。将混合物过滤并用正庚烷(50mL，5vol.，3.4wt.)洗涤。将湿饼在NMT 70℃减压干燥，以提供(Z)-内昔芬和(E)-内昔芬的混合物，(E/Z)-4-[1-[4-[2-(甲氨基)乙氧基]苯基]-2-苯基-1-丁烯-1-基]酚，即式(III)化合物。产率：6.7g，45％；纯度：96.79％。E/Z比：48.6:1(预期产率–NLT 30％)。
实施例9：工业上可扩展的Z-内昔芬的富集
Figure BDA0002485802470001031
在合适的反应器中加入式III的化合物——(Z)-内昔芬和(E)-内昔芬的混合物(0.105kg，1.0wt.)和第一溶剂乙酸乙酯(1.1L，10vol./wt.，9.0wt./wt.)。将混合物冷却至0-5℃，并向混合物中缓慢添加6N HCl(0.3L，3vol./wt.，3.0wt./wt.)。将混合物加热至60±5℃，并在60±5℃搅拌NLT 6hr。将混合物冷却至0±5℃，并缓慢添加8N NaOH(0.3L，3.0vol./wt.，3.0wt./wt.)，直至混合物的pH物的w。
将混合物沉降以进行相分离，收集有机层，并将水层用第一溶剂乙酸乙酯(0.5L，5vol./wt.，4.5wt./wt.)洗涤。收集有机层。将结合的有机层用20％NaCl(0.3L，3vol./wt.，3.0wt./wt.)洗涤。将有机层用活性炭(木炭)(0.005kg，0.05wt.)处理，并在50±5℃搅拌NLT 1hr。将混合物通过硅藻土/二氧化硅床过滤(
Figure BDA0002485802470001032
S)，并用乙酸乙酯(0.5L，5vol./wt.，4.5wt./wt.)洗涤。将滤液在NMT 75℃浓缩直至体积达到10vol.(1.1L)。将混合物冷却至0-5℃，并在0-5℃搅拌NLT 2hr。过滤混合物，并收集滤液。将滤液在NMT 75℃浓缩直至体积达到最低可搅拌体积。
添加第二溶剂异丙醇(1.1L，10vol./wt.，7.9wt./wt.)，并将混合物在NMT 75℃浓缩直至体积达到最低可搅拌体积。再次添加异丙醇(1.1L，10vol./wt.，7.9wt./wt.)，并将混合物在NMT 75℃浓缩直至体积达到最低可搅拌体积。添加异丙醇(1.1L，10vol./wt.，7.9wt./wt.)，并将混合物在NMT 75℃浓缩直至体积达到5vol.(0.5L)。将悬浮液在50±5℃搅拌NLT 6hr。将混合物冷却至20±5℃，并在20±5℃搅拌NLT 4hr。将混合物过滤并用异丙醇(0.2L，2vol./wt.，1.6wt./wt.)洗涤。将湿饼在NMT 60℃干燥，以提供呈米黄色固体的纯化的(Z-内昔芬)固体式(IV)化合物。产率：39.5g，36％，(E)/(Z)比：1/12.2；通过HPLC确定的纯度(Z)：89.59％，预期产率(20-40％)。
在合适的1L反应器中加入上述式(IV)的Z-内昔芬(39g)固体化合物和第三溶剂异丙醇(390mL，10vol./wt.)。将悬浮液在50±5℃搅拌NLT 6hr。将混合物冷却至20±5℃，并在20±5℃搅拌NLT 4hr。将混合物过滤并用异丙醇(78mL，2vol./wt.)洗涤。将湿饼在NMT60℃干燥，以提供呈米黄色固体的纯化的(Z-内昔芬)固体式(IV)化合物。产率：25g，61％，(E)/(Z)比：1/55.1；纯度(Z)：95.81％，预期产率(50-70％)。
以这种方式，制备了内昔芬的多晶型形式I。图9和图10提供了两批所得多晶型物的XRPD图。图9和图10的XRPD峰在表8中提供。
表8：图9和图10的XRPD峰。
Figure BDA0002485802470001041
Figure BDA0002485802470001051
实施例10：工业上可扩展的约1:1的E/内昔芬/Z-内昔芬混合物的富集
在合适的反应器中加入式III化合物——(Z)-内昔芬和(E)-内昔芬的混合物(0.420kg，1.0wt.)和乙酸乙酯(4.2L，10vol./wt.，9.0wt./wt.)。将混合物冷却至0-5℃，并缓慢添加6N HCl(1.3L，3vol./wt.，3.0wt./wt.)。将混合物加热至60±5℃，并在60±5℃搅拌NLT 6hr。将混合物冷却至0±5℃，并缓慢添加8N NaOH(1.3L，3.0vol./wt.，3.0wt./wt.)，直至混合物的pH物的w。
将混合物沉降以进行相分离，收集有机层，并将水层用乙酸乙酯(2.0L，5vol./wt.，4.5wt./wt.)洗涤。收集有机层。将结合的有机层用20％NaCl(1.3L，3vol./wt.，3.0wt./wt.)洗涤。将有机层用活性炭(木炭)(0.02kg，0.05wt.)处理，并在50±5℃搅拌NLT1hr。将混合物通过硅藻土/二氧化硅(
Figure BDA0002485802470001052
S)床过滤，并用乙酸乙酯(2.0L，5vol./wt.，4.5wt./wt.)洗涤。将滤液在NMT 75℃浓缩直至体积达到5vol.(2.0L)。将混合物加热至回流，并且然后冷却至50±5℃。在50±5℃缓慢添加正庚烷。将混合物冷却至0±5℃，并在0±5℃搅拌NLT 2hr。将混合物过滤并用EtOAc/正庚烷＝1/2(v/v)洗涤。将湿饼在NMT 60℃减压干燥，以提供基本纯的约1:1E/Z-内昔芬。[产率：106g，25％；(E)/(Z)比：1.1/1；纯度(E/Z)：97.94％，预期产率(20-40％)]。
以这种方式，制备了内昔芬的多晶型形式II和III。表9中提供了用于制备多晶型形式II和III的详细参数，并且图11-图13提供了XRPD图。图11-图13的XRPD峰在表10中提供。
表9：用于分离多晶型形式II和形式III的参数
Figure BDA0002485802470001061
表10：图11、图12和图13的XRPD峰。
Figure BDA0002485802470001062
Figure BDA0002485802470001071
实施例11：Z-内昔芬游离碱的稳定性
商业上，内昔芬可以作为E/Z异构体游离碱混合物，以及>98％的(Z)-内昔芬盐酸盐和(Z)-内昔芬柠檬酸盐获得。Z-内昔芬盐酸盐在水溶液和固体形式中的稳定性先前已发表(Elkins等人J Pharm Biomed Anal.2014年1月；88:174–179)。Elkins等人提供，在固态中(Z)-内昔芬盐酸盐向(E)-内昔芬的10％转化的预测t90值在25℃/60％RH下为53个月，而在40℃/75％RH下为4.3个月。在溶液环境中，转化有望更迅速。在水介质中，Elkins等人提供(Z)-内昔芬盐酸盐的t90值在室温下为149天，而在45℃下为9天。仍然需要足够稳定的(Z)-内昔芬游离碱制剂，以制备适合于，例如，在环境温度以及更高的温度和湿度下施用于受试者的药物组合物。
在本公开内容提供的是内昔芬游离碱的制剂，其为基本是纯的、至少90％的(Z)-内昔芬游离碱，并且在环境以及高温和高湿条件下稳定至少9个月。为了本公开内容的目的，稳定性被定义为在组合物中至少90％的(Z)-内昔芬持续存在至少6个月，并且可以通过(Z)-内昔芬从合成之日开始向(E)-内昔芬的转化来衡量。
A.(Z)-内昔芬游离碱的加速10天稳定性研究
研究了表11的(Z)-内昔芬游离碱样品1在各种温度下以固体形式和乙醇(EtOH)溶液存储时的稳定性。在干燥的氮气下，将纯化的(Z)-内昔芬游离碱的1g等分试样置于180mLHDPE瓶中，然后将该瓶置于双LDPE袋中，在此之后的第2、7和10天测量(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的水平。将含有每个样品的双袋装的HDPE瓶分别包装在铝箔袋中并热封，直至将其打开以测试样品的稳定性。如上公开的，通过HPLC监测内昔芬的(E)-和(Z)-异构体。固体形式的(Z)-内昔芬纯度在40℃、60℃和80℃下长达10天保持在约97％。加速10天研究的结果表明，在长达10天的测试温度下，固体形式的(Z)-内昔芬不会转化为(E)-内昔芬。
表11：固体(Z)-内昔芬游离碱的加速稳定性测试
Figure BDA0002485802470001081
表12：(Z)-内昔芬游离碱溶液在乙醇中的加速稳定性研究
Figure BDA0002485802470001082
结果表明，(Z)-内昔芬游离碱在醇(例如乙醇和异丙醇(数据未显示))溶液中具有令人惊讶的稳定性，即使在高温(40℃)、较高的浓度下也稳定持续10天。通常认为，高温下的加速稳定性可以预测环境温度下的长期(至少18m)稳定性。
B.原料药稳定性研究
通过本文公开的方法制备的本公开内容的(Z)-内昔芬游离碱在原料形式下是令人惊讶地稳定。为了进行原料稳定性研究，将(Z)-内昔芬游离碱的约1g等分试样单独放入双LDPE袋中，用尼龙扎带捆扎。然后将LDPE袋放入铝箔袋中并热封。将测试稳定性的样品在惰性条件(干燥氮气)下在5℃和25℃/60％RH下于密封的180mL HDPE瓶中放置12个月，并且在40℃/75％RH下放置3个月。通过Karl Fischer滴定，好氧细菌菌落形成单位和在第0天、10天、1m和3m时间点的外观，来测试样品的(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬浓度和杂质，水分或水含量。以下表13提供了在不同储存条件下内昔芬游离碱在9m时的原料药稳定性数据。
表13：(Z)-内昔芬游离碱的原料药稳定性
Figure BDA0002485802470001091
结果表明，固体Z-内昔芬游离碱在5℃和25℃/60％RH下稳定至少9个月。高温下的加速稳定性被认为是对环境温度下的长期(至少18m)稳定性有预测意义。在研究的储存条件下，(Z)-至-(E)内昔芬相互转化最小，含水量不超过1％，好氧细菌平板计数TAC(cfu)小于20,000cfu g/mL。在每个时间点测定了最大单个杂质，其范围为0.10％至0.11％。
实施例12：纯化的固体Z-内昔芬游离碱的特性
通过本文公开的方法生产的(Z)-内昔芬游离碱是白色至米黄色粉末。使用USP921的方法1c(Karl Fischer滴定法)测定，这种粉末的水含量不超过1％。测量了残留溶剂。甲醇不超过(NMT)3000ppm，四氢呋喃NMT 720ppm，异丙醇、乙酸乙酯、正庚烷和乙醇各为NMT5000ppm。
通过USP 281的方法II测定，(Z)-内昔芬的灼烧残留物不超过0.1％。(Z)-内昔芬的灼烧残留物为0.02％至0.099％。在一些实施方案中，灼烧残留物不超过0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％和0.1％。在另一方面，通过USP 231的方法II测试，重金属为NMT 20ppm。
使用USP 232和USP 40的测试方法测试了固体(Z)-内昔芬游离碱中的元素水平。
因此，本文所述的方法和使用这些方法制备的内昔芬适用于临床和商用级(Z)-内昔芬的制造。
Z-内昔芬的FTIR光谱
使用具有标准光源和TGS检测器的傅里叶变换红外光谱仪(仪器类型：FT/IR4600A型；Jasco：S/N比25,000:1，最大分辨率0.7cm-1)分析了(Z)-内昔芬。使用AgBr窗，在配备有三甘氨酸硫酸盐(TGS)检测器和KBr分束器的FTIR光谱仪(型号FT/IR 4600A型；制造商Jasco)上记录了红外光谱。将约10mg的(Z)-内昔芬游离碱置于ATR晶体上，用尖端施加压力，并收集样品光谱。使用水合薄膜以2mm/sec的扫描速度收集了光谱。干涉图在4000–650cm-1的光谱范围内累积，标称分辨率为0.4cm-1，并且扫描32次。图2示出了(Z)-内昔芬游离碱的代表性IR光谱。
图2显示，纯化的(Z)-内昔芬的峰在702.0、730.9、794.5、825.4、907.3、1027.9、1167.7、1238.1、1278.6、1508.1、1575.6、1607.4、3310.2波长cm-1+/-0.4cm-1处。先前发表的游离内昔芬的FT/IR光谱示出了在706、831、1053、1171、1240、1465、1507和1604波长cm-1处的峰(Agudelo等人PLoS ONE 8(3):e60250.doi:10.1371/journal.pone.0060250)。
表14：(Z)-内昔芬游离碱的IR光谱的光谱归属
Figure BDA0002485802470001111
实施例13：Z-内昔芬的口服组合物
胶囊中API。如上所述制备了>90％的Z-内昔芬游离碱。干燥的白色至米黄色粉末被配制为稳定的自由流动的粉末，并以胶囊中药物(DIC，也称为胶囊中API，AIC)口服固体剂型整齐地填充至胶囊中。使用Xcellodose技术(Capsugel)将1mg、2mg和4mg为至少90％(Z)-内昔芬的内昔芬整齐地填充在
Figure BDA0002485802470001112
Plus肠溶胶囊中。AIC的大小为0，颜色为瑞典橙色。
Figure BDA0002485802470001113
Plus肠溶胶囊(Capsugel)由无麸质、非动物自凝产品羟丙甲纤维素(纤维素的甲基和羟丙基混合醚)制成，水分含量低，适用于对水分敏感的成分，如(Z)-内昔芬。通过Cole等人的方法(Cole等人,Int.Journal of Pharmaceutics Vol.231 83–95,2002)，为胶囊包上设计用于实现肠靶向(GI和结肠上部)的肠溶包衣。将Eudragit FS D30用作用于结肠靶向释放的肠溶包衣，并且将Eudragit L30D55用作用于上消化道靶向释放的肠溶包衣。
AIC中的(Z)-内昔芬游离碱主要在肠(GI和结肠上部)释放，并且被保护免受胃中酸环境的影响达至少6小时。根据USP 711的方法测试，胶囊的肠溶包衣在至少6个小时内防止(Z)-内昔芬在胃中的释放。
本文公开的肠溶性AIC稳定至少6个月。
本公开内容的口服固体剂型的微生物污染的标准和测试。对于本文公开的固体剂型组合物的制剂，由于水含量为NMT 1％，并且水活度(Aw)小于0.75，因此不需要测试TAC和USP指示生物。出版物“Microbial Bioburden on Oral Solid Dosage Form,”JoseE.Martinez著,Pharmaceutical Technology,2002年2月,第58至70页通过引用以其全文并入本文
此外，由于本文公开的组合物的制剂还具有小于0.75的水活度，因此不需要对其进行详细的微生物测试。总好氧菌平板计数(TAC)是对原材料、加工中材料或完成品中存在的存活的总好氧细菌的估计。样品根据最新的USP指南第61章(微生物限度测试)进行分析。
在警戒和行动水平下，为本发明组合物的制剂建立用于口服固体剂型(OSDF)的可接受TAC，这分别可以是1000cfu g/mL和10,000cfu g/mL。20,000cfu g/mL的TAC被认为是不可接受的。
实施例14：(Z)-内昔芬盐的制备
(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐是通过将作为游离碱的(Z)-内昔芬的乙醇浆与D-葡糖酸的水溶液混合，然后在水中水解20％w/v的D-葡糖酸内酯溶液并在70℃加热15至30分钟来制备的。使用最小体积的乙醇，并且每1g内昔芬游离碱添加5ml D-葡糖酸水溶液。然后持续搅拌直至获得澄清溶液。使用以上实施例1-4中公开的方法，将(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐结晶，以提供(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐。
如上所述制备1mg、2mg、5mg、10mg、20mg和40mg AIC肠溶胶囊。类似地，使用具有肠溶包衣
Figure BDA0002485802470001121
FS D30和
Figure BDA0002485802470001131
L30D 55以靶向小肠和结肠的(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐制备1mg至50mg片剂。
表15：示例性片剂
Figure BDA0002485802470001132
实施例15：口服(Z)-内昔芬的安慰剂对照的剂量递增安全性和药代动力学研究
本研究的目标是评估当以局部应用施用于乳腺或作为胶囊口服施用于健康女性志愿者时，口服(Z)-内昔芬的安全性和耐受性。次要目标是评估受试者中多剂量口服(Z)-内昔芬的药代动力学。
通常，招募年龄≥常，岁且≤且≤岁的健康女性志愿者。24名参与者被招募在3个队列，并口服研究药物。在3个队列中研究了口服(Z)-内昔芬的三种剂量水平。在每个队列中，参与者以盲法随机接受口服(Z)-内昔芬或安慰剂。研究中使用的抗肠溶胶囊设计为延迟释放胶囊，以抵抗破裂至少30分钟，但通常在胃条件下抵抗2小时，随后在肠液中完全打开(DRCaps；Capsugel,a Lonza Company,USA)。使用按照GMP要求手动填充1、2或4mg纯净的(Z)-内昔芬的抗肠溶(Swedish Orange size Zero(0)；Capsugel,USA)DRCaps胶囊。安慰剂胶囊含有微晶纤维素，惰性普通胶囊和片剂赋形剂。
每个队列招募了8名参与者，其中6名参与者以1mg(队列1)，2mg(队列2)或4mg(队列3)的剂量接受口服(Z)-内昔芬1mg胶囊，并且2名参与者接受匹配的安慰剂胶囊。在队列1(剂量水平＝1mg)中，两名参与者(前哨)在其余参与者之前24小时服用。一名前哨服用(Z)-内昔芬，另一名服用安慰剂。由于在前哨参与者中未发现安全隐患，因此对队列1的其余六名参与者进行了给药。队列1的非前哨参与者比前哨至少晚一天进入临床研究设施。队列2和队列3中没有前哨。
参与者参与这项研究持续56天。其中包括28天的筛选期和药代动力学(PK)采样的治疗后7天时期。有两个限制期，一个在给药期开始时，一个在给药期结束时。从第-1天到第2天以及第21天和第22天，参与者被限制在临床设施。如果参与者在研究期间遇到任何临床上重大的不良事件，则他们可能被要求留在临床设施中以进行进一步观察，这由首席研究员(PI)决定。
在开始给药前28天内对健康的女性志愿者进行了筛选。参与者在第-1天进入临床设施，持续至多3天。在第1天施用第一剂量(Z)-内昔芬或安慰剂胶囊。完成所有安全性评估并取样进行PK分析后，在第2天将参与者放出临床设施。在第1天进行第一给药后为6天的无治疗期(第2-7天)。在研究的第4天和第6天，在无治疗期中，每名参与者均返回临床设施进行PK抽血和安全性评估。在第8天，参与者开始每天施用(Z)-内昔芬胶囊或安慰剂胶囊，连续14天(第8-21天)。为参与者提供研究药物胶囊，并要求他们每天自我施用。在第11、14和17天，参与者在给药前访问临床设施，以抽血和评估安全性。在第21天的早晨，每名参与者均在给药前返回临床设施，并被限制在设施中直至第22天，以收集PK抽血和安全性评估。第21天的给药是研究药物的最后一次施用。参与者在第22天被放出临床设施，并在研究的第24、26和28天返回进行PK抽血和安全性评估。
研究评估包括记录受试者的医疗史，包括评估任何研究中的不良事件和伴随的药物使用；身高和体重；身体检查；周期性生命体征(体温、心率、呼吸频率、血压)；周期性12导联心电图。实验室测试包括血液学、凝血、尿液分析、血清化学和生物标志物分析(例如，CYP2D6、BRCA1/2、Ki67、他莫昔芬代谢物等)。评估治疗安全性的具体评估包括以下：不良事件的频率和类型、临床实验室测试、12导联心电图和生命体征。使用修改后的
Figure BDA0002485802470001141
评分问卷来评估症状学。
在第1天和第21天，在给药前(10分钟内)和在研究药物施用后0.5、1、2、3、4、6、8、10、12和24小时收集用于PK分析的抽血。在给药前10分钟内收集所有其他研究日的PK样品。在第4天和第6天的无治疗期获得PK样品。此外，在第8、11、14和17天的每天给药期中(给药前10分钟内)收集PK样品。完成治疗后的PK样品将在第24、26和28天收集。对第1天的抽血样品测量AUC(inf)。从第8天开始(作为该测定的第0天)测定稳态血浆水平。
安全性和耐受性
通过剂量队列以及在各队列间汇总安慰剂来总结安全性终点。根据系统器官分类(SOC)和首选术语(从逐字术语分类)，使用最新版本的MedDRA对治疗中出现的AE进行编码。AE和SAE的发生率和频率按队列根据SOC和首选术语来总结，以及按严重程度和关系来总结。测定了AE的持续时间，并将其与所采取的措施和结果一起包括在清单中。使用描述性统计学，在每个计划时间点总结生命体征、心电图和安全实验室参数。给药后的评估与基线测量进行比较。总结实验室异常的发生率。体检结果列在清单中。
在接受(Z)-内昔芬的18名受试者中有15名(83％，41件AE)而在接受安慰剂的6名受试者中有4名(67％，20件AE)报道了被认为与研究药物相关(很可能或可能)的治疗中出现的AE。大多数与治疗有关的AE在严重程度上为轻度，在接受(Z)-内昔芬的18名受试者中有5名(28％，6件AE)而在接受安慰剂的6名受试者中有2名(33％，2件AE)报道了与治疗有关的严重程度为中度的AE。
所有AE在严重程度上被分类为轻度(84件AE中75件)或中度(84件AE中9件)，没有分类为严重的AE。接受口服(Z)-内昔芬的受试者和接受安慰剂的受试者中均报道了紧张性头痛、头痛、腹痛、恶心、痛经和疲劳的常见不良事件。仅在接受(Z)-内昔芬的受试者中报道了上呼吸道感染、潮热、腹胀、口干和月经推迟。
通过临床实验室测试、生命体征、ECG评估、FACT-ES响应评估的安全性在接受局部或口服(Z)-内昔芬的受试者与接受安慰剂的受试者之间没有明显差异，并且在接受(Z)-内昔芬的受试者中，这些安全性评估中没有与剂量相关的趋势。
药代动力学
绘制每个剂量队列的平均和个体(Z)-内昔芬血清浓度-时间曲线，并以线性和对数刻度显示浓度的方式图形呈现。测定每名参与者的药代动力学参数，并使用描述性统计学(算术平均值、标准差、变异系数、样品大小、最小、最大和中值)按队列总结。此外，计算了AUC和Cmax的几何平均值。使用线性模型进行分析，以评估剂量比例性(在单剂量和多给药后)、时间依赖性和累积(口服多剂量)，以及稳态的达到(多剂量)。
为第一剂量和最后剂量(第1天和第21天)测定的参数包括到达最大浓度的时间(Tmax)，最大浓度(Cmax)，药物施用后0至24小时的浓度-时间曲线下的面积(AUC0-24h)，最终消除速率常数(kel)，最终半衰期(t1/2)，最终清除率(CL/F)和分布容积(Vd/F)。在第1天，还测定了第一剂量从时间0至无穷的浓度-时间曲线下的面积(AUC0-inf)。
使用非房室方法测定药代动力学参数。药代动力学参数的描述性统计学包括平均值、标准差(SD)和变异系数(CV)、最小值(min)和最大值(max)。评估了药代动力学参数的剂量相关趋势。
绘制每个剂量队列的平均和个体内昔芬血清浓度-时间曲线。测定每个参与者的药代动力学参数，并使用描述性统计学(算术平均值、SD、CV、样品大小[N]、最小值、最大值和中值)按队列总结。此外，计算了AUC和Cmax的几何平均值。使用线性模型进行分析，以评估剂量比例性(单剂量(口服)和多剂量(局部和口服)后)。使用SAS v9.3和PhoenixWinNonLin 7.0或更高版本对药代动力学参数进行统计分析。
使用的缩写：
CV 方差系数
Tmax 到达最大浓度的时间
Cmax 最大浓度
AUC0-24h (“AUC24hr”)药物施用后0至24小时的浓度-时间曲线下的面积
kel 最终消除速率常数，和体积
t1/2 最终半衰期
CL/F 最终清除率
Vd/F 分布(distribution)
AUC0-inf (“AUC0-inf”)在第1天，还测定了第一剂量从时间0至无穷的浓度-时间曲线下的面积。
以下表16提供了具有(Z)-内昔芬的最终半衰期、最终消除半衰期、Tmax、Cmax和AUC的血清药代动力学参数的总结。
表16：模型血清药代动力学参数
Figure BDA0002485802470001171
对于缓释(耐酸)(Z)-内昔芬胶囊的每天一次口服施用，在研究中使用的三个剂量水平下，内昔芬的Cmax和AUC24hr呈剂量比例性(线性剂量响应)。在第1天，对于1mg至4mg剂量，Cmax从9.6ng/mL增加至32.5ng/mL，而在第21天从24.6ng/mL增加至115.0ng/mL。在第1天和第21天，按剂量水平的中值Tmax为4至8小时。按剂量水平的表观最终半衰期(t1/2)在42至53小时之间，并且在约7天后达到稳态(图5–第8天给药，并且Css在第14天)。到达最高血液水平的时间为4到8小时(图4)。
表17：模型AUC(0-inf)：1mg、2mg和4mg(Z)-内昔芬
Figure BDA0002485802470001181
表18A：通过治疗随时间变化的模型血清浓度(nM)，剂量：1mg(Z)-内昔芬
Figure BDA0002485802470001182
表18B：通过治疗的模型药代动力学参数；剂量2mg(Z)-内昔芬(n＝6)。
Figure BDA0002485802470001183
表18C：通过治疗的模型药代动力学参数；剂量4mg(Z)-内昔芬(n＝6)
Figure BDA0002485802470001184
表19A：第1天通过治疗的模型药代动力学参数；剂量1mg(Z)-内昔芬。N＝5
Figure BDA0002485802470001191
表19B：第1天通过治疗的模型药代动力学参数；剂量2mg
Figure BDA0002485802470001192
表19C：第1天通过治疗的模型药代动力学参数；剂量4mg
Figure BDA0002485802470001193
表19D：第21天通过治疗的模型药代动力学参数；剂量1mg(Z)-内昔芬。N＝5
Figure BDA0002485802470001194
表19E：第21天通过治疗的模型药代动力学参数；剂量2mg(Z)-内昔芬。
Figure BDA0002485802470001201
表19F：第21天通过治疗的模型药代动力学参数；剂量4mg(Z)-内昔芬。
Figure BDA0002485802470001202
表20：药代动力学参数的平均比率(第21天)/(第1天)
Figure BDA0002485802470001203
对于第21天与第1天的参数比率，Cmax的平均累积比率为2.74至3.56，AUC24hr的平均累积率比为3.04至3.47。对于第1天和第21天的清除率(Cl/F)和分布容积(Vd/F)，无明显的剂量水平趋势。
在约10小时达到最大血清内昔芬水平，并且血清内昔芬水平与剂量相关地增加(图3和图4)。血清内昔芬水平为约25nM至约80nM。
第8天至第21天的给药前波谷浓度的药代动力学评估(图4)显示，在第14天后达到直线。在每天给药的第7天，血清内昔芬的稳态水平似乎已经达到。对于4mg(Z)-内昔芬，给药前血清浓度表明在17天后几乎没有累积。
表21：内昔芬的剂量线性的参数估计
Figure BDA0002485802470001211
表22.(Z)-内昔芬浓度(口服)与公开文献的比较。
Figure BDA0002485802470001212
Css＝稳态的平均浓度(AUCtau/tau)
公开的文献
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因此，本研究的数据表明，口服内昔芬的安全性和耐受性与口服他莫昔芬大体相当，并且被施用(Z)-内昔芬组合物的受试者的血浆内昔芬水平落在已证明作为辅佐疗法对乳腺癌女性有治疗效果的范围内。(Z)-内昔芬被迅速吸收并且可以全身使用，并且在1mg-4.0mg的剂量范围内，它显示了血清中药物峰值浓度(C(max))和从0外推至无穷的浓度-时间曲线下面积(AUC0-inf)的剂量比例性。
实施例16：口服施用Z-内昔芬游离碱治疗他莫昔芬难治性乳腺癌
该研究的目的是证明通过向他莫昔芬补充(Z)-内昔芬，可以使他莫昔芬难治性患者达到稳定和治疗性的(Z)-内昔芬水平。血浆内昔芬水平将用作替代终点，以预测在该群体中的临床益处以及复发率，并确认(Z)-内昔芬施用与他莫昔芬相比的安全性和耐受性。
通常，将招募接受他莫昔芬辅助疗法至少30天的患有早期雌激素受体阳性乳腺癌的健康受试者进行该研究长达6个月。该研究将招募至少75名他莫昔芬难治性乳腺癌受试者，以确保达到由至少25名他莫昔芬受试者和25名(Z)-内昔芬受试者组成的可评估群体。可以招募额外的受试者以达到他莫昔芬难治性受试者的预期群体。这些受试者需被诊断为患有乳腺癌并经历了乳房切除术或肿块切除术。
口服他莫昔芬至少30天后，测量内昔芬血浆水平。如果内昔芬水平低于30或40nM，则将1mg口服(Z)-内昔芬添加至口服他莫昔芬辅助治疗方案中。添加额外的(Z)-内昔芬剂量，直至达到至少40nM但不超过80nM的稳定的内昔芬。终点是在他莫昔芬+内昔芬组中建立治疗稳定的内昔芬水平达至少6个月。
实施例17：通过口服施用Z-内昔芬-D-葡糖酸盐进行的雌激素受体阳性乳腺癌的手术前治疗
目的是确定Z-内昔芬-D-葡糖酸盐是否降低手术前雌激素受体阳性乳腺癌患者的肿瘤活性。初步诊断为ER+乳腺癌后，将8位患者分配至3组之一中，每位患者在手术前21天将接受1、2或4mg(Z)-内昔芬-D-葡糖酸盐。
将从初始活检时比较肿瘤的生物标志物KI-67水平，并且比较手术样品以确定3种剂量中的一种是否导致肿瘤活性降低。
实施例18：口服施用(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐治疗乳腺癌
该研究的目的是证明在开始辅助乳腺癌疗法的他莫昔芬难治性患者中，可以在受试者血浆中达到治疗性的(Z)-内昔芬水平。血浆内昔芬水平将用作替代终点以预测在该群体中的临床益处以及复发率，并确认口服(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐与他莫昔芬相比的安全性和耐受性。
通常，将招募他莫昔芬被指示为其完整治疗方案的一部分的患有雌激素受体阳性乳腺癌的健康受试者进行该研究长达6个月。该研究将招募至少75名他莫昔芬难治性乳腺癌受试者，以确保达到由至少25名他莫昔芬受试者和25名(Z)-内昔芬受试者组成的可评估群体。可以招募额外的受试者以达到他莫昔芬难治性受试者的预期群体。这些受试者需被诊断为患有乳腺癌并经历了乳房切除术或肿块切除术。
乳房切除术或肿块切除术后，立即将25名受试者分配到他莫昔芬组，并每天口服20mg他莫昔芬，持续3个月。将额外25名受试者分配到(Z)-内昔芬组，并每天口服10mg(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐片剂，持续3个月。在第0天(基线)，以及第7天、第14天、第21天、第28天、第60天和第90天从每个受试者抽血。在第0天(基线测量)，以及第7天、第14天、第21天、第28天、第60天和90天，取得两个治疗组的血浆(Z)-内昔芬水平、血液学、化学和凝血参数。
将两个治疗组的血浆(Z)-内昔芬水平彼此进行比较。如果他莫昔芬治疗的受试者的血浆内昔芬水平低于30nM，则这些受试者将被转移至(Z)-内昔芬疗法组，并且治疗将再持续6个月。如果他莫昔芬治疗的受试者的血浆内昔芬水平高于30nM，则他们将继续用他莫昔芬治疗。继续每周抽取血液样品一次，直至研究结束，以监测受试者的血浆(Z)-内昔芬水平、血液学、化学和凝血参数。监控受试者中癌症的复发并在治疗组之间进行比较。安全性和有效性将每3个月评估一次，直至研究结束。
尽管本文中已经示出并描述了本发明的优选实施方案，但对于本领域技术人员显而易见的是，这些实施方案仅以示例的方式提供。本领域技术人员在不脱离本发明的情况下现将想到多种变化、改变和替代。应当理解，本文中所述的本发明实施方案的各种替代方案可用于实施本发明。以下权利要求旨在限定本发明的范围，并由此涵盖这些权利要求范围内的方法和结构及其等同项。

Claims (157)

1.一种组合物，其包含式(III)化合物的晶形：
Figure FDA0002485802460000011
2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物中至少90重量％的所述式(III)化合物是(Z)-异构体。
3.根据权利要求2所述的组合物，其中所述晶形是所述式(III)化合物的形式I。
4.根据权利要求3所述的组合物，其中所述晶形的特征在于X射线粉末衍射图包含2θ在16.8±0.3°、17.1±0.3°和21.8±0.3°的主峰。
5.根据权利要求4所述的组合物，其中所述X射线粉末衍射图还包含2θ选自16.0±0.3°、18.8±0.3°和26.5±0.3°的至少一个峰。
6.根据权利要求4或5所述的组合物，其中所述X射线粉末衍射图还包含2θ选自12.3±0.3°、28.0±0.3°和29.0±0.3°的至少一个峰。
7.根据权利要求4所述的组合物，其中所述X射线粉末衍射图还包含2θ在12.3±0.3°、16.0±0.3°、18.8±0.3°、26.5±0.3°、28.0±0.3°和29.0±0.3°的峰。
8.根据权利要求3至7中任一项所述的组合物，其中所述晶形的特征在于X射线粉末衍射图基本如图9或图10所示。
9.根据权利要求3至8中任一项所述的组合物，其中所述组合物中大于90重量％、95重量％或99重量％的所述式(III)化合物为晶形I。
10.根据权利要求3至9中任一项所述的组合物，其中所述组合物包含0.01mg至200mg的晶形I。
11.根据权利要求10所述的组合物，其中所述组合物包含约1mg、2mg、4mg、6mg、10mg或20mg的晶形I。
12.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物包含所述式(III)化合物的(E)-异构体和(Z)-异构体，其E/Z比为0.9至1.3。
13.根据权利要求12所述的组合物，其中所述E/Z比为约1.1。
14.根据权利要求12或13所述的组合物，其中所述晶形是所述式(III)化合物的形式II。
15.根据权利要求14所述的组合物，其中所述晶形的特征在于X射线粉末衍射图包含2θ在7.0±0.3°、11.9±0.3°、14.0±0.3°和18.4±0.3°的主峰。
16.根据权利要求15所述的组合物，其中所述X射线粉末衍射图还包含2θ在22.0±0.3°的峰。
17.根据权利要求15或16所述的组合物，其中所述X射线粉末衍射图还包含2θ选自6.6±0.3°、13.3±0.3°和20.0±0.3°的至少一个峰。
18.根据权利要求15所述的组合物，其中所述X射线粉末衍射图还包含2θ在6.6±0.3°、13.3±0.3°、20.0±0.3°和22.0±0.3°的峰。
19.根据权利要求14至18中任一项所述的组合物，其中所述晶形的特征在于X射线粉末衍射图基本如图11或图12所示。
20.根据权利要求14至19中任一项所述的组合物，其中所述组合物中大于90重量％、95重量％或99重量％的所述式(III)化合物为晶形II。
21.根据权利要求14至20中任一项所述的组合物，其中所述组合物包含0.01mg至200mg的晶形II。
22.根据权利要求21所述的组合物，其中所述组合物包含约1mg、2mg、4mg、6mg、10mg或20mg的晶形II。
23.根据权利要求12或13所述的组合物，其中所述晶形是所述式(III)化合物的形式III。
24.根据权利要求23所述的组合物，其中所述晶形的特征在于X射线粉末衍射图包含2θ在11.9±0.3°、13.9±0.3°、17.1±0.3°和17.7±0.3°的主峰。
25.根据权利要求24所述的组合物，其中所述X射线粉末衍射图还包含2θ在25.3±0.3°的峰。
26.根据权利要求24或25所述的组合物，其中所述X射线粉末衍射图还包含2θ选自18.2±0.3°、22.5±0.3°和26.8±0.3°的至少一个峰。
27.根据权利要求24所述的组合物，其中所述X射线粉末衍射图还包含2θ在18.2±0.3°、22.5±0.3°、25.3±0.3°和26.8±0.3°的峰。
28.根据权利要求23至27中任一项所述的组合物，其中所述晶形的特征在于X射线粉末衍射图基本如图13所示。
29.根据权利要求23至28中任一项所述的组合物，其中所述组合物中大于90重量％、95重量％或99重量％的所述式(III)化合物为晶形III。
30.根据权利要求23至29中任一项所述的组合物，其中所述组合物包含0.01mg至200mg的晶形III。
31.根据权利要求30所述的组合物，其中所述组合物包含约1mg、2mg、4mg、6mg、10mg或20mg的晶形III。
32.一种药物组合物，其包含药学上可接受的载体或稀释剂以及前述权利要求中任一项所述的组合物。
33.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中将所述组合物配制为用于口服、肠胃外、局部或导管内递送。
34.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中将所述组合物配制为用于口服递送的片剂、囊片、胶囊或丸剂。
35.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中在用所述组合物治疗的受试者中，内昔芬的平均半衰期在30小时至60小时之间。
36.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中将所述组合物配制为用于口服递送的肠溶片剂、肠溶囊片、肠溶胶囊、缓释片剂、缓释囊片或缓释胶囊。
37.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中将所述组合物施用于受试者以对所述受试者的激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症，或两者进行治疗或预防。
38.一种口服组合物，其包含每单位剂量1mg至200mg的前述权利要求中任一项所述的组合物，用于向有此需要的受试者施用，其中每日施用所述口服组合物在所述受试者体内实现：
在7至21天内的内昔芬稳态血浆水平；
在25nM至300nM范围内的内昔芬稳态血浆水平；
大于30nM的内昔芬稳态血浆水平；
在施用后2至10小时内的内昔芬最大血浆水平；或者
其任何组合。
39.根据权利要求38所述的口服组合物，其中在用所述组合物治疗的受试者中，内昔芬的平均半衰期为40小时至55小时。
40.根据权利要求38或39所述的口服组合物，其中将所述组合物配制为肠溶片剂、肠溶囊片、肠溶胶囊、缓释片剂、缓释囊片或缓释胶囊。
41.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述组合物中至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％的内昔芬在肠中释放。
42.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中内昔芬的外推至时间无穷的曲线下平均面积(AUC0-inf)为200hr*ng/mL至10000hr*ng/mL、300hr*ng/mL至8000hr*ng/mL、400hr*ng/mL至6000hr*ng/mL或700hr*ng/mL至6000hr*ng/mL。
43.一种治疗有此需要的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用权利要求1-42中任一项所述的组合物。
44.根据权利要求43所述的方法，其中所述受试者患有激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症或两者，或存在其风险。
45.根据权利要求44所述的方法，其中所述激素依赖性乳腺病症或所述激素依赖性生殖道病症是良性乳腺病症、增生、异型(atypia)、非典型导管增生、非典型小叶增生、乳腺密度增加、男性乳腺发育症、DCIS、LCIS、乳腺癌、性早熟、McCune-Albright综合征、子宫内膜癌、卵巢癌、子宫癌、宫颈癌、阴道癌或外阴癌。
46.根据权利要求43至45中任一项所述的方法，其中所述受试者患有前列腺癌，并且其中所述受试者还患有男性乳腺发育症或存在其风险。
47.根据权利要求43至46中任一项所述的方法，其中所述受试者患有他莫昔芬难治性或他莫昔芬耐受性的激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症。
48.根据权利要求43至47中任一项所述的方法，其中用或将会用选自西酞普兰、依他普仑、氟西汀、帕罗西汀、舍曲林和维拉佐酮的SSRI药物治疗所述受试者。
49.根据权利要求43至48中任一项所述的方法，其中所述组合物包含0.01mg至200mg的(Z)-内昔芬。
50.根据权利要求43至49中任一项所述的方法，其中每天向所述受试者施用约1mg、2mg、4mg、6mg、10mg或20mg的(Z)-内昔芬。
51.根据权利要求43至50中任一项所述的方法，其中所述受试者体内的内昔芬稳态血浆水平大于30nM。
52.根据权利要求43至51中任一项所述的方法，其中在首次施用所述组合物的7至21天内达到内昔芬的稳态血浆水平。
53.根据权利要求43至52中任一项所述的方法，其中到达内昔芬最大血浆水平的时间为在施用所述组合物后的2小时至10小时或4小时至8小时。
54.一种治疗患有激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症或两者，或存在其风险的受试者的方法，所述方法包括施用权利要求1-42中任一项的所述组合物，其中所述组合物的施用实现：
在施用后30小时至60小时范围内的在所述受试者体内的内昔芬平均半衰期；
在施用后4小时至8小时范围内的内昔芬到达最大血浆水平的时间；以及
大于30nM的内昔芬稳态血浆水平。
55.根据权利要求54所述的方法，其中所述激素依赖性乳腺病症和所述激素依赖性生殖道病症选自良性乳腺病症、增生、异型、非典型导管增生、非典型小叶增生、乳腺密度增加、男性乳腺发育症、DCIS、LCIS、乳腺癌、性早熟、McCune-Albright综合征、子宫内膜癌、卵巢癌、子宫癌、宫颈癌、阴道癌和外阴癌。
56.根据权利要求54或55所述的方法，其中所述组合物包含0.01mg至200mg的(Z)-内昔芬。
57.根据权利要求56所述的方法，其中向所述受试者施用约1mg、2mg、4mg、6mg、10mg或20mg的(Z)-内昔芬。
58.根据权利要求43至57中任一项所述的方法，其中内昔芬的外推至时间无穷的曲线下平均面积(AUC0-inf)为200hr*ng/mL至10000hr*ng/mL、300hr*ng/mL至8000hr*ng/mL、400hr*ng/mL至6000hr*ng/mL或700hr*ng/mL至6000hr*ng/mL。
59.根据权利要求43至58中任一项所述的方法，其中将所述组合物配制为肠溶片剂、肠溶囊片、肠溶胶囊、缓释片剂、缓释囊片或缓释胶囊。
60.根据权利要求43至59中任一项所述的方法，其中所述组合物中至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％的内昔芬在肠中释放。
61.根据权利要求43至60中任一项所述的方法，其中所述组合物每天一次、每天两次、每天三次、每天四次、隔日一次、每周两次、每周一次、每两周一次、每月两次、每月一次、每季度一次、每六个月一次或每年一次施用。
62.一种工业上可扩展的制造(Z)-内昔芬的方法，其包括以下步骤：
(a)使如下所示的式(III)化合物——(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的混合物经受从第一溶剂的分级结晶，
Figure FDA0002485802460000061
以形成第一结晶固体和第一母液，其中与(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物的E/Z比相比，所述第一母液的E/Z比具有至少高50％的(Z)-内昔芬；
(b)通过浓缩所述第一母液或通过将所述第一母液中的所述第一溶剂与第二溶剂交换一次或多次，使所述第一母液经受从所述第二溶剂的重结晶，以形成第二结晶固体和第二母液，其中所述第二结晶固体为≥以形成的(Z)-内昔芬；以及
(c)任选地，使所述第二结晶固体一次或多次经受从第三溶剂的重结晶或色谱处理，以形成第三结晶固体。
63.一种工业上可扩展的制造权利要求1至11中任一项所述的晶形的方法，其包括以下步骤：
(a)使如下所示的式(III)化合物——(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的混合物经受从第一溶剂的分级结晶，
Figure FDA0002485802460000071
以形成第一结晶固体和第一母液，其中与(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物的E/Z比相比，所述第一母液的E/Z比具有至少高50％的(Z)-内昔芬；
(b)通过浓缩所述第一母液或通过将所述第一母液中的所述第一溶剂与第二溶剂交换一次或多次，使所述第一母液经受从所述第二溶剂的重结晶，以形成第二结晶固体和第二母液，其中所述第二结晶固体为≥90％的(Z)-内昔芬；以及
(c)使所述第二结晶固体一次或多次经受从第三溶剂的重结晶或色谱处理，以形成第三结晶固体，其中所述第三结晶固体是权利要求1-11中任一项所述的晶形。
64.根据权利要求62或63所述的方法，其中(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物的制备是通过经由在惰性有机溶剂中的钛盐和还原剂，由McMurry反应介导，将式(II)化合物——(4-羟苯基)(4-(2-(甲氨基)乙氧基)苯基)甲酮偶联至苯基乙基酮以形成(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物；并且其中所述式(II)化合物的结构如下所示：
Figure FDA0002485802460000081
65.根据权利要求64所述的方法，还包括制备所述式(II)化合物，该制备是通过用在惰性有机溶剂中的脱甲基剂和质子受体将式(I)化合物——[4-[2-(二甲氨基)乙氧基]苯基](4-羟苯基)甲酮脱甲基以形成所述式(II)化合物，其中所述式(I)化合物的结构为：
Figure FDA0002485802460000082
66.根据权利要求62至65中任一项所述的方法，其中所述第一溶剂是乙酸乙酯、IPA、IPA/PPW、ACN、ACN/PPW或丙酮。
67.根据权利要求62至66中任一项所述的方法，其中所述第二溶剂是IPA、IPA/PPW、丙酮、乙醇、乙酸乙酯或丙酮/MTBE。
68.根据权利要求62至67中任一项所述的方法，其中所述第三溶剂是乙醇、甲醇、乙酸乙酯、IPA、IPA/PPW、正庚烷或丙酮。
69.根据权利要求62至68中任一项所述的方法，还包括将所述第一溶剂、所述第二溶剂和所述第三溶剂中的任何一种或多种预热至40℃至80℃的温度。
70.根据权利要求62至69中任一项所述的方法，其中每个分级结晶和重结晶步骤独立地包含在50℃至80℃下蒸馏的步骤；以及将所述溶液冷却至0℃至NMT 35℃的温度。
71.根据权利要求64至70中任一项所述的方法，还包括以下步骤：
(a)使所述式(II)化合物与苯基乙基酮在惰性有机溶剂中反应；
(b)制备在惰性有机溶剂中的钛盐和还原剂；以及
(c)使步骤(a)的所述式(II)化合物与步骤(b)的所述在惰性有机溶剂中的钛盐和还原剂反应，以形成(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物。
72.根据权利要求64至71中任一项所述的方法，还包括以下步骤：
(a)使所述式(II)化合物与苯基乙基酮(1:0.01至1:5wt/wt)在惰性有机溶剂(1:1至1:20wt/wt)中反应；
(b)制备在惰性有机溶剂(1:1至1:20wt/wt)中的钛盐(1:0.1至1:12wt/wt)和还原剂(1:0.01至1:10wt/wt)；以及
(c)使步骤(a)的所述式(II)化合物与步骤(b)的所述在惰性有机溶剂中的钛盐和还原剂反应，以形成(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物；
其中wt/wt是相对于式(II)化合物。
73.根据权利要求64至72中任一项所述的方法，其中所述钛盐选自卤化钛(如三氯化钛(TiCl3)、四氯化钛(TiCl4)、碘化钛、溴化钛和氟化钛)、异丙氧基三氯化钛(IV)和异丙氧基钛。
74.根据权利要求64至73中任一项所述的方法，其中所述还原剂选自锌、锆、钒、铌、钼、钨、铝、镁、钾、锌铜偶、碱金属和碱土金属、丁基鎓、锂和氢化锂铝。
75.根据权利要求64至74中任一项所述的方法，其中所述惰性有机溶剂选自二氯甲烷、二氯乙烷、氯仿、四氯化碳、氯苯、乙醚、1,4-二噁烷、叔丁基甲基醚、四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甘醇二甲醚、硝基甲烷、1,2-二甲氧基乙烷、吡啶、丙酮、乙腈、苯、邻二甲苯、间二甲苯、对二甲苯、二甲苯、己烷、环己烷、庚烷、辛烷、壬烷和癸烷或其组合。
76.根据权利要求64至75中任一项所述的方法，其中步骤(b)中的所述在惰性有机溶剂中的钛盐和还原剂的制备还包括当所述钛盐添加至所述还原剂和所述惰性有机溶剂中时，将所述反应的温度保持在NMT 75℃、NMT 65℃、NMT 55℃、NMT 50℃、NMT 45℃、NMT 40℃、NMT 35℃、NMT 30℃、NMT 25℃、NMT 20℃或NMT 15℃的温度。
77.根据权利要求64至76中任一项所述的方法，其中所述在惰性有机溶剂中的钛盐和还原剂的制备还包括当所述钛盐添加至所述还原剂和所述惰性有机溶剂中时，将所述反应的温度保持在NMT 75℃、NMT 70℃、NMT 65℃、NMT 60℃、NMT 55℃、NMT 50℃或NMT 45℃的温度。
78.根据权利要求64至77中任一项所述的方法，其中步骤(b)中的所述在惰性有机溶剂中的钛盐和还原剂的制备还包括将所述钛盐和所述还原剂在所述惰性有机溶剂中加热至从20℃至250℃、从40℃至70℃、从50℃至230℃、从50℃至120℃或从150℃至200℃的温度。
79.根据权利要求64至78中任一项所述的方法，其中步骤(b)中的所述在惰性有机溶剂中的钛盐和还原剂的制备还包括在氮气或氩气以及回流下将所述钛盐和所述还原剂在所述惰性有机溶剂中加热NLT 30分钟、NLT 1小时、NLT 2小时、NLT 4小时、NLT 6小时或NLT 8小时。
80.根据权利要求64至79中任一项所述的方法，其中使步骤(a)的所述式(II)化合物与步骤(b)的在惰性有机溶剂中的钛盐和还原剂在回流下反应，以形成(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物。
81.根据权利要求64至80中任一项所述的方法，其中使步骤(a)的所述式(II)化合物与步骤(b)的在惰性有机溶剂中的钛盐和还原剂在40℃至80℃的温度下反应NLT 4小时、NLT6小时、NLT 8小时、NLT 12小时、NLT 24小时或NLT 48小时，以形成(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物。
82.根据权利要求64至81中任一项所述的方法，还包括将(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物冷却至0℃至30℃的温度的步骤。
83.根据权利要求64至82中任一项所述的方法，还包括以下一个或多个步骤：
(a)萃取(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物；
(b)洗涤(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物；
(c)蒸馏(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物；以及
(d)结晶，以提供(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的结晶固体混合物。
84.根据权利要求83所述的方法，其中所述萃取在MeTHF或THF中进行一次或多次。
85.根据权利要求65至84中任一项所述的方法，还包括产生所述式(II)化合物，该产生是通过用在惰性有机溶剂(1:1至1:20wt/wt)中的脱甲基剂(1:0.5至1:10wt/wt)和质子受体(1:0.5至1:10wt/wt)将所述式(I)化合物脱甲基以形成所述式(II)化合物，其中所述wt/wt比是相对于所述式(I)化合物。
86.根据权利要求65至85中任一项所述的方法，其中所述质子受体选自诸如碳酸钠和碳酸钾等碳酸盐，和诸如碳酸氢钠和碳酸氢钾等碳酸氢盐，质子海绵和DIPEA。
87.根据权利要求65至86中任一项所述的方法，其中所述脱甲基剂选自N-碘代琥珀酰胺、氯甲酸乙酯(如氯甲酸1-氯乙酯、氯甲酸二氯乙酯、氯甲酸三氯乙酯、氯甲酸α-氯乙酯)、氯甲酸乙烯酯、溴化氰、偶氮二羧酸二乙酯和氯化吡啶鎓。
88.根据权利要求65至87中任一项所述的方法，其中所述式(I)化合物与所述脱甲基剂和所述质子受体在20℃至250℃、40℃至80℃、50℃至230℃、50℃至120℃和150℃至200℃的温度下反应。
89.根据权利要求65至88中任一项所述的方法，其中所述式(I)化合物在回流下与所述脱甲基剂和所述质子受体反应。
90.根据权利要求65至89中任一项所述的方法，其中所述式(I)化合物与所述脱甲基剂和所述质子受体反应NLT 5小时、NLT 8小时、NLT 12小时、NLT 24小时、NLT 36小时、NLT 48小时或NLT 72小时。
91.根据权利要求3或85至90中任一项所述的方法，还包括以下一个或多个步骤：
(a)蒸馏；
(b)与溶剂/酸混合物反应；
(c)用中和剂中和；以及
(d)减压干燥。
92.根据权利要求91所述的方法，其中所述蒸馏步骤包含与有机蒸馏溶剂的一次或多次溶剂交换，所述有机蒸馏溶剂选自乙酸乙酯、诸如甲醇、乙醇、正丙醇和异丙醇等醇、苯、丙酮、乙腈、甲苯、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷和氯仿。
93.根据权利要求91或92所述的方法，其中所述溶剂/酸混合物选自甲醇/HCl、乙醇/HCl、丙醇/HCl、异丙醇/HCl、甲醇/硫酸、甲醇/磷酸、乙醇/硫酸、乙醇/磷酸、丙醇/硫酸、丙醇/磷酸、异丙醇/硫酸、异丙醇/磷酸、甲醇/乙酸、乙醇/乙酸、丙醇/乙酸、异丙醇/乙酸、甲醇/甲酸、乙醇/甲酸、丙醇/甲酸和异丙醇/甲酸。
94.根据权利要求91至93中任一项所述的方法，其中中和剂是氢氧化钠、氢氧化铵、氢氧化钾或氨甲基丙醇。
95.根据权利要求62至94中任一项所述的方法，还包括通过使(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的混合物与酸(1:1至1:5wt/wt)在溶剂(1:1至1:20wt/wt)中反应，将(E)-内昔芬转化为(Z)-内昔芬，其中所述wt/wt比是相对于式(III)化合物。
96.根据权利要求95所述的方法，其中所述酸是HCl、TCA或TFA。
97.根据权利要求95或96所述的方法，其中所述溶剂是乙腈、乙腈/PPW、IPA、IPA/PPW、二氯甲烷或乙酸乙酯。
98.根据权利要求95至97中任一项所述的方法，其中将(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物与所述酸在所述溶剂中于回流下加热，并搅拌NLT 4小时、NLT 6小时、NLT 12小时、NLT 24小时或NLT 48小时。
99.根据权利要求95至98中任一项所述的方法，还包括以下一个或多个步骤：
(a)用中和剂中和；
(b)萃取；
(c)一次或多次洗涤；以及
(d)用活性炭处理。
100.一种工业上可扩展的制造(Z)-内昔芬的方法，其包括以下步骤：
(a)使如下所示的(III)式化合物——(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的混合物经受从乙酸乙酯的分级结晶，
Figure FDA0002485802460000131
以形成第一结晶固体和第一结晶母液，其中与(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物的E/Z比相比，所述第一母液的E/Z比具有至少高50％的(Z)-内昔芬；
(b)通过浓缩所述第一母液或将所述第一母液中的乙酸乙酯与IPA或IPA/PPW(1:1v/v)交换一次或多次，使所述第一母液经受从所述IPA或IPA/PPW的重结晶，以形成第二结晶固体和第二母液，其中所述第二结晶固体为≥结晶，的(Z)-内昔芬；以及
(c)任选地，使所述第二结晶固体一次或多次经受从乙醇的重结晶或柱色谱处理，以形成第三结晶固体。
101.根据权利要求99或100所述的方法，其中将步骤a中的式(III)化合物——(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物用6N HCl预处理并用8N NaOH中和。
102.根据权利要求99至101中任一项所述的方法，其中式(III)化合物——(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物的制备是通过经由在THF中的TiCl4和Zn在McMurry反应中催化，将式(II)化合物——(4-羟苯基)(4-(2-(甲氨基)乙氧基)苯基)甲酮偶联至苯基乙基酮以形成(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物；并且其中所述式(II)化合物具有如下所示的结构：
Figure FDA0002485802460000141
103.根据权利要求102所述的方法，还包括以下步骤：
(a)使所述式(II)化合物与苯基乙基酮在THF中反应；
(b)制备在THF中的TiCl4和Zn；以及
(c)使步骤(a)的所述式(II)化合物与步骤(b)的所述在THF中的TiCl4和Zn反应，以形成(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物。
104.根据权利要求102或103所述的方法，其包括以下步骤：
(a)使所述式(II)化合物与苯基乙基酮在THF(1:1至1:20wt/wt)中反应；
(b)制备在THF(1:1至1:20wt/wt)中的TiCl4(0.1至12wt/wt)和Zn(0.01至1:10wt./wt)；以及
(c)使步骤(a)的所述式(II)化合物与步骤(b)的所述在THF中的TiCl4和Zn反应，以形成(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物，
其中wt/wt是相对于所述式(II)化合物。
105.根据权利要求102至104中任一项所述的方法，其中在THF中的TiCl4和Zn的制备还包括在氮气和回流下加热NLT 2小时。
106.根据权利要求102至105中任一项所述的方法，还包括萃取纯化、蒸馏和结晶的步骤。
107.根据权利要求102至106中任一项所述的方法，其中使(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物经受萃取纯化，所述萃取纯化包括以下步骤：
(a)用氯化铵、二氧化硅、40％K2CO3和THF萃取一次或多次；
(b)用K2CO3和MeTHF萃取一次或多次；
(c)用NaOH、NaCl和MeTHF萃取一次或多次；
(d)用MeTHF或THF萃取一次或多次；
(e)用20％NaCl萃取一次或多次；或
(f)其组合。
108.根据权利要求102至107中任一项所述的方法，其中使(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物经受萃取纯化，所述萃取纯化包括以下步骤：
(a)用40％K2CO3(1:1至1:10wt/wt)和MeTHF(1:1至1:10wt/wt)萃取一次或多次；
(b)用1N NaOH(1:1至1:20wt/wt)、NaCl(1:0.01至1:0.5wt/wt)和MeTHF(1:1至1:10wt/wt)萃取一次或多次；
(c)用MeTHF(1:1至1:5wt/wt)萃取一次或多次；以及
(d)用20％NaCl(1:1至1:10wt/wt)萃取；
其中所述wt/wt是相对于所述式(II)化合物。
109.根据权利要求102至108中任一项所述的方法，其中使(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物经受萃取纯化，所述萃取纯化包括以下步骤：
(a)用25％氯化铵(1:10至1:30wt/wt)、二氧化硅(1:0.01至1:5wt/wt)和THF(1:1至1:5wt/wt)萃取；
(b)用THF(1:1至1:5wt/wt)洗涤一次或多次；以及
(c)用40％K2CO3(1:1至1:10wt/wt)洗涤一次或多次；
其中所述wt/wt是相对于所述式(II)化合物。
110.根据权利要求108或109所述的方法，其中所述蒸馏步骤用EtOAc(1:1至1:10wt/wt)或IPA(1:1至1:10wt/wt)进行1至5次。
111.根据权利要求106至110中任一项所述的方法，其中所述蒸馏步骤在30℃至90℃的温度下进行。
112.根据权利要求106至111中任一项所述的方法，其中所述蒸馏在NMT 75℃下进行。
113.根据权利要求102至112中任一项所述的方法，其中所述式(II)化合物的制备是通过用在THF中的氯甲酸1-氯乙酯和DIPEA将式(I)化合物——[4-[2-(二甲氨基)乙氧基]苯基](4-羟苯基)甲酮脱甲基以形成所述式(II)化合物，其中所述式(I)化合物的结构为：
Figure FDA0002485802460000161
114.根据权利要求113所述的方法，其包括以下步骤：
(a)使所述式(I)化合物与DIPEA在四氢呋喃中反应；
(b)添加氯甲酸1-氯乙酯；
(c)用甲醇蒸馏；
(d)与甲醇/6N HCl反应；以及
(e)用8N NaOH中和。
115.根据权利要求113或114所述的方法，其包括以下步骤：
(a)使所述式(I)化合物与DIPEA(1:1至1:10wt/wt)在THF(1:20wt/wt)中反应；
(b)添加氯甲酸1-氯乙酯(1:1至1:10wt./wt)；
(c)用甲醇蒸馏一次或多次(1:1至1:10wt./wt)；
(d)与甲醇(1:1至1:5wt/wt)/6N HCl(1:1至1:10wt/wt)反应；以及
(e)用8N NaOH(1:1至1:10wt/wt)中和；
其中wt/wt是相对于所述式(I)化合物。
116.根据权利要求113至115中任一项所述的方法，还包括以下一个或多个步骤：
(a)用纯化水(1:1至1:5vol/wt)洗涤所述式(II)化合物；
(b)用乙酸乙酯(1:1至1:5wt/wt)洗涤所述式(II)化合物；以及
(c)在NMT 50℃下减压干燥所述式(II)化合物；
其中wt/wt是相对于所述式(I)化合物。
117.根据权利要求62至116中任一项所述的方法，还包括通过使(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的混合物与6N HCl(1:1至1:5wt/wt)在EtOAc(1:1至1:20wt/wt)中反应，将(E)-内昔芬转化为(Z)-内昔芬，其中wt/wt是相对于(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述混合物。
118.根据权利要求117所述的方法，还包括以下步骤：
(a)用8N NaOH(1:1至1:20wt/wt)中和；
(b)用乙酸乙酯(1:1至1:10wt/wt)萃取；
(c)用20％NaCl(1:1至1:10wt/wt)洗涤一次或多次；以及
(d)用活性炭(1:0.01至1:0.1wt/wt)处理；
其中wt/wt是相对于所述式(III)化合物。
119.根据权利要求62至118中任一项所述的方法产生的式(III)化合物的晶形。
120.根据权利要求119所述的晶形，其中所述晶形是所述式(III)化合物的形式I。
121.一种工业上可扩展的再平衡E/Z比为45:55至55:45的(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的混合物的方法，其包括以下步骤：
(a)使E/Z比为99:1至60:40的(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的起始混合物在乙酸乙酯(1:1至1:20wt/wt)中与6N HCl(1:1至1:5wt/wt)反应；
(b)用8N NaOH(1:1至1:20wt/wt)中和；
(c)用乙酸乙酯洗涤一次或多次；以及
(d)用IPA洗涤一次或多次；
其中wt/wt是相对于(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述起始混合物。
122.一种工业上可扩展的制造权利要求12至31中任一项所述的晶形的方法，其包括:
(a)在E/Z比为99:1至40:60的(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的起始混合物在乙酸乙酯(1:1至1:20wt/wt)中与6N HCl(1:1至1:5wt/wt)反应；
(b)用8N NaOH(1:1至1:20wt/wt)中和；
(c)用乙酸乙酯洗涤一次或多次；
(d)用乙酸乙酯和正庚烷的混合物洗涤一次或多次；以及
(e)回收权利要求12至31中任一项所述的晶形；
其中wt/wt是相对于(E)-内昔芬和(Z)-内昔芬的所述起始混合物。
123.根据权利要求121或122所述的方法产生的式(III)化合物的晶形。
124.根据权利要求123所述的晶形，其中所述晶形是所述式(III)化合物的形式II或形式III。
125.根据权利要求62至122中任一项所述的方法，其中所述(Z)-内昔芬与D-葡糖酸或L-葡糖酸反应以形成(Z)-内昔芬L-葡糖酸盐或(Z)-内昔芬D-葡糖酸盐。
126.根据权利要求62至125中任一项所述的方法，其中(Z)-内昔芬游离碱具有＜1％的杂质。
127.根据权利要求62至126中任一项所述的方法，其中所述(Z)-内昔芬游离碱在环境温度下稳定至少9个月。
128.通过权利要求62至127中任一项所述的方法制备的(Z)-内昔芬、(E)-内昔芬、式(III)化合物、式(II)化合物或其盐。
129.一种组合物，其包含通过权利要求62至127中任一项所述的方法制备的(Z)-内昔芬游离碱或其盐。
130.根据权利要求129所述的组合物，其中将所述组合物配制为用于口服、肠胃外、局部或导管内递送。
131.根据权利要求129或130所述的组合物，其中将所述组合物配制为用于口服递送的片剂、囊片、胶囊或丸剂。
132.根据权利要求131所述的组合物，其中受试者体内的内昔芬平均半衰期为施用后30小时至60小时。
133.根据权利要求129至132中任一项所述的组合物，其中将所述组合物配制为用于口服递送的肠溶片剂、肠溶囊片、肠溶胶囊、缓释片剂、缓释囊片或缓释胶囊。
134.根据权利要求129至133中任一项所述的组合物，其中将所述组合物施用于受试者以对所述受试者的激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症，或两者进行治疗或预防。
135.一种口服组合物，其包含每单位剂量1mg至200mg的(Z)-内昔芬游离碱或其盐，用于向有此需要的受试者施用，其中每日施用所述口服组合物在所述受试者体内实现：
(a)在7至21天内的内昔芬稳态血浆水平；
(b)在25nM至300nM范围内的内昔芬稳态血浆水平；
(c)大于30nM的内昔芬稳态血浆水平；
(d)在施用后2至10小时内的内昔芬最大血浆水平；或者
(e)其任何组合。
136.根据权利要求135所述的口服组合物，其中受试者体内的内昔芬平均半衰期为施用后40小时至55小时。
137.根据权利要求135或136所述的口服组合物，其中将所述组合物配制为肠溶片剂、肠溶囊片、肠溶胶囊、缓释片剂、缓释囊片或缓释胶囊。
138.根据权利要求133或137所述的口服组合物，其中至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％的内昔芬在肠内释放。
139.根据权利要求129至138中任一项所述的组合物或口服组合物，其外推至时间无穷的曲线下平均面积(AUC0-inf)为200hr*ng/mL至10000hr*ng/mL、300hr*ng/mL至8000hr*ng/mL、400hr*ng/mL至6000hr*ng/mL或700hr*ng/mL至6000hr*ng/mL。
140.一种治疗有此需要的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用权利要求129至139中任一项的口服组合物。
141.根据权利要求140所述的方法，其中所述受试者患有激素依赖性乳腺病症、激素依赖性生殖道病症或两者，或存在其风险。
142.根据权利要求141所述的方法，其中所述激素依赖性乳腺病症或所述激素依赖性生殖道病症是良性乳腺病症、增生、异型、非典型导管增生、非典型小叶增生、乳腺密度增加、男性乳腺发育症、DCIS、LCIS、乳腺癌、性早熟、McCune-Albright综合征、子宫内膜癌、卵巢癌、子宫癌、宫颈癌、阴道癌或外阴癌。
143.根据权利要求141或142所述的方法，其中所述受试者患有前列腺癌，并且其中所述受试者还患有男性乳腺发育症或存在其风险。
144.根据权利要求141至143中任一项所述的方法，其中所述受试者患有他莫昔芬难治性或他莫昔芬耐受性的激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症。
145.根据权利要求141至144中任一项所述的方法，其中用或将会用选自西酞普兰、依他普仑、氟西汀、帕罗西汀、舍曲林和维拉佐酮的SSRI药物治疗所述受试者。
146.根据权利要求141至145中任一项所述的方法，其中向所述受试者施用0.01mg至200mg的(Z)-内昔芬。
147.根据权利要求141至146中任一项所述的方法，其中每天向所述受试者施用1mg、2mg、4mg、6mg、10mg或20mg的(Z)-内昔芬。
148.根据权利要求141至147中任一项所述的方法，其中所述受试者体内的内昔芬稳态血浆水平大于30nM。
149.根据权利要求141至148中任一项所述的方法，其中在首次施用所述组合物的7至21天内达到内昔芬的稳态血浆水平。
150.根据权利要求141至149中任一项所述的方法，其中到达内昔芬最大血浆水平的时间为在施用所述组合物后的2小时至10小时或4小时至8小时。
151.一种治疗患有激素依赖性乳腺病症或激素依赖性生殖道病症或两者，或存在其风险的受试者的方法，所述方法包括施用包含(Z)-内昔芬或其盐的口服组合物，其中所述组合物的施用实现：
(a)在施用后30小时至60小时范围内的在所述受试者体内的内昔芬平均半衰期；
(b)在施用后4小时至8小时范围内的内昔芬到达最大血浆水平的时间；以及
(c)大于30nM的内昔芬稳态血浆水平。
152.根据权利要求151所述的方法，其中向所述受试者施用1mg、2mg、4mg、6mg、10mg或20mg的(Z)-内昔芬。
153.根据权利要求151或152所述的方法，其中外推至时间无穷的曲线下平均面积(AUC0-inf)为200hr*ng/mL至10000hr*ng/mL、300hr*ng/mL至8000hr*ng/mL、400hr*ng/mL至6000hr*ng/mL或700hr*ng/mL至6000hr*ng/mL。
154.根据权利要求151至153中任一项所述的方法，其中将所述组合物配制为肠溶片剂、肠溶囊片、肠溶胶囊、缓释片剂、缓释囊片或缓释胶囊。
155.根据权利要求151至154中任一项所述的方法，其中至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％的内昔芬在肠内释放。
156.根据权利要求151或155所述的方法，其中所述组合物每天一次、每天两次、每天三次、每天四次、隔日一次、每周两次、每周一次、每两周一次、每月两次、每月一次、每季度一次、每六个月一次或每年一次施用。
157.根据权利要求151至156中任一项所述的方法，其中所述激素依赖性乳腺病症和所述激素依赖性生殖道病症选自良性乳腺病症、增生、异型、非典型导管增生、非典型小叶增生、乳腺密度增加、男性乳腺发育症、DCIS、LCIS、乳腺癌、性早熟、McCune-Albright综合征、子宫内膜癌、卵巢癌、子宫癌、宫颈癌、阴道癌和外阴癌。
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