CN111321134A - 一种固定化多酶体系及其制备方法 - Google Patents

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黄奇萍
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Abstract

本发明公开了一种固定化多酶体系及其制备方法，该制备方法包括以下步骤：将硝酸镍溶液和硝酸铁溶液加入混合液中，然后调节pH值，超声分散后进行水热反应，再降至室温得中间产物；将中间产物溶于有机溶剂中，依次抽滤、冲洗、真空干燥，得金属有机骨架化合物；配制混合酶溶液；将金属有机骨架化合物加入混合酶溶液中，紫外线照射得固定化多酶体系。本发明还包括通过上述固定化多酶体系的制备方法制得的固定化多酶体系。本发明将紫外线辐照与金属有机框架相结合，操作简便，固化反应条件温和，具有较高的固化效率，有效解决了有机物降解率低、固载量小和稳定性较差等问题，适用于大规模生产，能加强污泥溶胞调理或有机废水的处理效果。

Description

一种固定化多酶体系及其制备方法
技术领域
本发明涉及酶固定化技术领域，具体涉及一种固定化多酶体系及其制备方法。
背景技术
近年来，随着工农业的发展，环境污染日趋严重，污染治理尤其是绿色节能的生物治理与修复的研究方兴未艾。作为生物催化剂的酶在污染治理领域的应用已引起广泛关注。比如，溶菌酶(Lysozyme，LZM)可用于污水厂污泥的溶菌调理。某些难降解废水的BOD5/COD较低，即可生化性较低，常规厌氧和好氧生物处理难度较高，酶对于这些废水的处理已引起广泛关注。例如，辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase，HRP)和更为廉价的大豆种皮过氧化物酶(Soybean hull peroxidase，SHP)可用于酚类和苯胺类难降解废水的处理；漆酶(Laccase，LAC)可用于造纸及印染废水处理；酪氨酸酶(Tyrosinase，TYR)可用于医院污水中苯酚及胺类等污染物的处理；有机磷水解酶(Organophosphorus hydrolase，OPH)、甲基对硫磷水解酶(Methylparathionhydrolase，MPH)及有机磷酸酐水解酶(organophosphorus acid anhydrolase，OPAA)等三种有机磷降解酶可用于农药废水的处理；石油降解酶(Hydrocarbon-degrading enzymes，HDEs)可用于污水中石油类污染物的降解；谷胱甘肽-S转移酶(Glutathione S-transferase，GST)可用于废水中多环芳烃的降解等。
酶作为生物催化剂时化学稳定性及热稳定性差、容易流失或失活、分离纯化困难、成本高、普适性差。而单独使用酶的过程中，酶容易流失，使用成本很高，限制其实际应用。因此，目前工业级的酶催化多采用固定化酶系催化技术。这种催化技术高度可控，体外代谢途径构建方法多样，甚至能够完成许多体内代谢途径无法完成的工作，其技术关键在于构建体外多酶催化体系并进行共固定化，模拟生物细胞内的多酶体系，在体外反应系统中加入能进行顺序反应的多种酶，使底物经过顺序的多步协同反应，并借助底物通道效应一次得到最终产物，大幅度提高反应效率。为酶系找到合适的生物相容性载体成为关键，在保护酶系不失活且保证酶系可重复回收利用的同时，还能不损害酶系多步协同的高催化活性和高选择性，且能保证底物通道效应的发挥。但目前多采用化学方法制备固定化载体材料，该方法操作复杂，反应条件较为剧烈，加热、冷却时间长，对酶的结构和活性影响较大，使得固载量较小，结合强度较低，稳定性较差，有机物降解率低，不适用于大规模生产。
发明内容
针对现有技术中的上述不足，本发明提供了一种固定化多酶体系及其制备方法，将紫外线辐照与金属有机框架相结合，操作简便，固化反应条件温和，具有较高的固化效率，有效解决了有机物降解率低、固载量小和稳定性较差等问题，适用于大规模生产，能加强污泥溶胞调理或有机废水的处理效果。
为实现上述目的，本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：提供一种固定化多酶体系的制备方法，包括以下步骤：
(1)将0.005～0.4mol/L的硝酸镍溶液和0.005～0.4mol/L的硝酸铁溶液加入0.005～0.3mol/L对苯二甲酸溶液和0.005～0.3mol/L二甲基甲酰胺溶液按摩尔比1:1混合而成的混合液中，然后调节溶液pH值至2.5±0.5后进行超声分散，接着在120～140℃温度下水热反应72～90h，降温至室温再依次经抽滤、冲洗、真空干燥，得中间产物；其中，硝酸镍溶液、硝酸铁溶液和对苯二甲酸溶液体积比为1～2:1～3:1；
(2)将步骤(1)所得中间产物溶于有机溶剂中，在140～160℃温度下纯化24～36h，然后依次经抽滤、冲洗、真空干燥后，再溶于二氯甲烷中，在50～70℃温度下纯化24～36h，最后在150～170℃温度下真空干燥20～25h，得金属有机骨架化合物；
(3)配制混合酶溶液，然后加入光固化引发剂1.0～3.0vt％TPO；
(4)将步骤(2)所得金属有机骨架化合物加入1～5mg/L步骤(3)所得混合酶溶液中，在25～35℃和100～200rpm条件下，经波长为365nm的紫外线照射5～30min，得固定化多酶体系；其中，所述金属有机骨架化合物和混合酶溶液质量体积比为0.001～0.003:50g/mL。
进一步，硝酸镍溶液、硝酸铁溶液和对苯二甲酸溶液体积比为0.8:1.3:1。
进一步，金属有机骨架化合物和混合酶溶液质量体积比为0.0025:50g/mL。
进一步，步骤(1)中，混合液为0.005～0.3mol/L对苯二甲酸溶液和0.005～0.3mol/L二甲基甲酰胺溶液按摩尔比1:1混合而成的混合液。
进一步，步骤(1)中，混合液加入速度为2～5mL/min，加入氢氟酸调节pH值，在100～200W功率下超声分散混合30～60min。
进一步，有机溶剂为N，N-二甲基甲酰胺溶液。
进一步，纯化时，每12h更换一次纯化溶剂。
进一步，步骤(1)和(2)中，在室温下抽滤，采用N，N-二甲基甲酰胺溶液冲洗2～4次，在60℃温度下真空干燥12h。
进一步，混合酶为唾液溶菌酶(LZM)、胃蛋白水解酶、辣根过氧化物酶(HRP)、受体酪氨酸磷酯酶(SHP)、乳糖酶(LAC)、酪氨酸酶(TYR)、有机磷水解酶(OPH)、甲基对硫磷水解酶(MPH)、有机磷酸酐水解酶(OPAA)、脂肪酶(HDEs)和谷胱甘肽巯基转移酶(GST)中的至少两种。
进一步，步骤(3)中的混合酶溶液为用于城市污泥二次消化处理的混合酶溶液，其包括唾液溶菌酶和胃蛋白水解酶。
进一步，唾液溶菌酶和胃蛋白水解酶酶活性单位比例为1:0.25～1。
进一步，步骤(3)中的混合酶溶液为用于农药废水处理的混合酶溶液，其包括有机磷水解酶、甲基对硫磷水解酶和/或有机磷酸酐水解酶。
进一步，有机磷水解酶、甲基对硫磷水解酶和有机磷酸酐水解酶酶活性单位比例为1:0.5～2:0.25～2。
进一步，步骤(4)中，光固化引发剂为TPO、ITX或二苯甲酮。其中，TPO为2,4,6-三甲基苯甲酰基-二苯基氧化膦，ITX为异丙基硫杂蒽酮。
进一步，步骤(4)中，采用250W的高压汞灯进行紫外线照射，照射时高压汞灯距离液面5～10cm。
上述固定化多酶体系的制备方法制得的固定化多酶体系。
综上所述，本发明具有以下特点：
1、本发明的制备方法中将紫外线辐照与金属有机框架相结合，操作简便，反应条件温和，反应时间短，具有较高的固化效率，有效解决了有机物降解率低、固载量小和稳定性较差等问题，适用于大规模生产，可以制备得到具有较大固载量的、稳定性更好的固定化多酶体系，加强污泥溶胞调理或有机废水的处理效果。与传统的紫外线固化相比，无需乙烯基单体和多官能团单体等；与化学固化相比，可在室温条件下进行固化，对酶活性影响较小。
2、将紫外线辐照技术同金属有机框架材料酶固定化技术相结合，工艺简单，处理时间短，成本低，固化效率较高，生成的固定化多酶体系固载量更大，稳定性更好；各种不同的酶在磁力搅拌器搅拌下在溶液中被金属有机框架材料高效固定，不参与任何化学反应，因此对酶的种类及其组成没有特殊要求；采用Cu和Fe双中心的氨基化Cu-Fe-N-MOF材料，大大增加酶固载量的同时，可以实现多种酶的高效固定，酶结合强度更高，能够有效降解有机物，提高有机物降解率。
3、以金属有机框架作为载体，金属有机框架(Metal-Organic Frameworks，MOFs)是由有机配体和金属离子或团簇通过配位键自组装形成的具有分子内孔隙的有机-无机杂化材料，例如在本方法中，对苯二甲酸溶液和二甲基甲酰胺溶液与硝酸镍溶液和硝酸钾溶液反应制得微孔结构的Cu-Fe-N-MOF材料粉末。金属有机框架作为发展迅猛的高结晶性多孔材料，特别是水溶液稳定的金属有机框架可作为酶的载体，其结构可控，特别是能控制孔道尺寸，可设计出能吸附更大的酶，以及酶与辅酶更易于识别的载体，同时也有利于底物与辅酶的扩散。
4、本方法采用紫外线辐照有机单体引发聚合与交联的方式制备固定化酶，工艺简单，易于操作，固定化时间短，材料性能显著提高，可在室温和大气条件下进行固化，经济可行，紫外线对酶的结构及酶活性的影响也很小，适于大规模工业生产，在环境治理等领域具有较为广阔的应用前景。相对于传统的化学固化方法，对酶活性的影响较小；相对于电子束或伽马射线固化方法，辐照成本低廉，辐射防护要求低。
具体实施方式
实施例1
一种固定化多酶体系的制备方法，包括以下步骤：
(1)将0.0075mol/L的硝酸镍溶液和0.025mol/L的硝酸铁溶液加入0.02mol/L对苯二甲酸溶液和0.02mol/L二甲基甲酰胺溶液按摩尔比1:1混合而成的混合液中，加入速度为3.5mL/min，然后加入氢氟酸调节溶液pH值至2.5±0.5后进行超声分散，在200W功率下超声分散混合30min后，接着在130℃温度下水热反应72h，再降温至室温在室温下抽滤，采用N，N-二甲基甲酰胺溶液冲洗3次，在60℃温度下真空干燥12h，得中间产物；其中，硝酸镍溶液、硝酸铁溶液和对苯二甲酸溶液体积比为0.75:1.25:1；
(2)将步骤(1)所得中间产物溶于N，N-二甲基甲酰胺溶液中，在150℃温度下纯化36h，然后依次在室温下抽滤，采用N，N-二甲基甲酰胺溶液冲洗3次，在60℃温度下真空干燥12h，再溶于二氯甲烷中，在60℃温度下纯化36h，最后在160℃温度下真空干燥24h，得金属有机骨架化合物；
(3)以唾液溶菌酶和胃蛋白水解酶配制250mL用于废水中污泥处理的混合酶溶液，然后加入1.5vt％的TPO，唾液溶菌酶和胃蛋白水解酶酶活性单位比例为1:0.5；
(4)将步骤(2)所得金属有机骨架化合物0.002g加入50mL、2.5mg/L步骤(3)所得混合酶溶液中，在30℃和150rpm条件下，经波长为365nm的紫外线照射15min，照射时高压汞灯距离液面8cm，得固定化多酶体系。
将上述制备得到的固定化多酶体系用于城市污泥二次消化处理，并设置空白对照组，结果表明，消化污泥含固率降低40％以上，减少40％以上污泥量，使污泥厌氧消化的有机物降解率提高65％以上，城市污泥得到了有效消化降解。
实施例2
一种固定化多酶体系的制备方法，包括以下步骤：
(1)将0.0065mol/L的硝酸镍溶液和0.038mol/L的硝酸铁溶液加入0.025mol/L对苯二甲酸溶液和0.025mol/L二甲基甲酰胺溶液按摩尔比1:1混合而成的混合液中，加入速度为3.2mL/min，然后加入氢氟酸调节溶液pH值至2.5±0.5后进行超声分散，在200W功率下超声分散混合48min后，接着在130℃温度下水热反应80h，再降温至室温在室温下抽滤，采用N，N-二甲基甲酰胺溶液冲洗3次，在60℃温度下真空干燥12h，得中间产物；其中，硝酸镍溶液、硝酸铁溶液和对苯二甲酸溶液体积比为0.8:1.3:1；
(2)将步骤(1)所得中间产物溶于N，N-二甲基甲酰胺溶液中，在150℃温度下纯化36h，然后依次在室温下抽滤，采用N，N-二甲基甲酰胺溶液冲洗3次，在60℃温度下真空干燥12h，再溶于二氯甲烷中，在60℃温度下纯化36h，最后在160℃温度下真空干燥24h，得金属有机骨架化合物；
(3)以有机磷水解酶、甲基对硫磷水解酶配制250mL用于有机磷农药废水处理的混合酶溶液，然后加入1.5vt％的TPO，有机磷水解酶、甲基对硫磷水解酶酶活性单位比例为1:1；
(4)将步骤(2)所得金属有机骨架化合物0.0025g加入50mL、2.5mg/L步骤(3)所得混合酶溶液中，在30℃和150rpm条件下，经波长为365nm的紫外线照射15min，照射时高压汞灯距离液面8cm，得固定化多酶体系。
将上述制备得到的固定化多酶体系用于有机磷农药废水处理，并设置空白对照组，结果表明，有机磷去除率由空白对照的38.6％提高到87.5％。
实施例3
一种固定化多酶体系的制备方法，包括以下步骤：
(1)将0.007mol/L的硝酸镍溶液和0.036mol/L的硝酸铁溶液加入0.02mol/L对苯二甲酸溶液和0.02mol/L二甲基甲酰胺溶液按摩尔比1:1混合而成的混合液中，加入速度为3.3mL/min，然后加入氢氟酸调节溶液pH值至2.5±0.5后进行超声分散，在200W功率下超声分散混合48min后，接着在130℃温度下水热反应80h，再降温至室温在室温下抽滤，采用N，N-二甲基甲酰胺溶液冲洗3次，在60℃温度下真空干燥12h，得中间产物；其中，硝酸镍溶液、硝酸铁溶液和对苯二甲酸溶液体积比为0.8:1.28:1；
(2)将步骤(1)所得中间产物溶于N，N-二甲基甲酰胺溶液中，在150℃温度下纯化36h，然后依次在室温下抽滤，采用N，N-二甲基甲酰胺溶液冲洗3次，在60℃温度下真空干燥12h，再溶于二氯甲烷中，在60℃温度下纯化36h，最后在160℃温度下真空干燥24h，得金属有机骨架化合物；
(3)以有机磷水解酶、有机磷酸酐水解酶配制250mL用于有机磷农药废水处理的混合酶溶液，然后加入1.5vt％的ITX，有机磷水解酶、有机磷酸酐水解酶酶活性单位比例为1:0.5；
(4)将步骤(2)所得金属有机骨架化合物0.0025g加入50mL、2.5mg/L步骤(3)所得混合酶溶液中，在30℃和150rpm条件下，经波长为365nm的紫外线照射15min，照射时高压汞灯距离液面8cm，得固定化多酶体系。
将上述制备得到的固定化多酶体系用于有机磷农药废水处理，并设置空白对照组，结果表明，有机磷去除率由空白对照的35.2％提高到92.7％。
实施例4
一种固定化多酶体系的制备方法，包括以下步骤：
(1)将0.008mol/L的硝酸镍溶液和0.04mol/L的硝酸铁溶液加入0.035mol/L对苯二甲酸溶液和0.035mol/L二甲基甲酰胺溶液按摩尔比1:1混合而成的混合液中，加入速度为3.25mL/min，然后加入氢氟酸调节溶液pH值至2.5±0.5后进行超声分散，在180W功率下超声分散混合48min后，接着在130℃温度下水热反应80h，再降温至室温在室温下抽滤，采用N，N-二甲基甲酰胺溶液冲洗3次，在60℃温度下真空干燥12h，得中间产物；其中，硝酸镍溶液、硝酸铁溶液和对苯二甲酸溶液体积比为0.82:1.92:1；
(2)将步骤(1)所得中间产物溶于N，N-二甲基甲酰胺溶液中，在150℃温度下纯化36h，然后依次在室温下抽滤，采用N，N-二甲基甲酰胺溶液冲洗2～4次，在60℃温度下真空干燥12h，再溶于二氯甲烷中，在60℃温度下纯化36h，最后在160℃温度下真空干燥24h，得金属有机骨架化合物；
(3)以有机磷水解酶、甲基对硫磷水解酶和有机磷酸酐水解酶配制250mL用于有机磷农药废水处理的混合酶溶液，然后加入1.75vt％的IPO，有机磷水解酶、甲基对硫磷水解酶和有机磷酸酐水解酶酶活性单位比例为1:2:2；
(4)将步骤(2)所得金属有机骨架化合物0.0025g加入50mL、2.5mg/L步骤(3)所得混合酶溶液中，在30℃和150rpm条件下，经波长为365nm的紫外线照射15min，照射时高压汞灯距离液面8cm，得固定化多酶体系。
将上述制备得到的固定化多酶体系用于有机磷农药废水处理，并设置空白对照组，结果表明，有机磷去除率由空白对照的30.3％提高到95.2％。
虽然本发明的具体实施方式对本发明进行了详细的描述，但不应理解为对本专利的保护范围的限定。在权利要求书所描述的范围内，本领域技术人员不经创造性劳动即可作出的各种修改和变形仍属本专利的保护范围。

Claims (10)

1.一种固定化多酶体系的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将0.005～0.4mol/L的硝酸镍溶液和0.005～0.4mol/L的硝酸铁溶液加入0.005～0.3mol/L对苯二甲酸溶液和0.005～0.3mol/L二甲基甲酰胺溶液按摩尔比1:1混合而成的混合液中，然后调节溶液pH值至2.5±0.5后进行超声分散，接着在120～140℃温度下水热反应72～90h，降温至室温再依次经抽滤、冲洗、真空干燥，得中间产物；其中，所述硝酸镍溶液、硝酸铁溶液和对苯二甲酸溶液体积比为1～2:1～3:1；
(2)将步骤(1)所得中间产物溶于有机溶剂中，在140～160℃温度下纯化24～36h，然后依次经抽滤、冲洗、真空干燥后，再溶于二氯甲烷中，在50～70℃温度下纯化24～36h，最后在150～170℃温度下真空干燥20～25h，得金属有机骨架化合物；
(3)配制混合酶溶液，然后加入光固化引发剂1.0～3.0vt％TPO；
(4)将步骤(2)所得金属有机骨架化合物加入1～5mg/L步骤(3)所得混合酶溶液中，在25～35℃和100～200rpm条件下，经波长为365nm的紫外线照射5～30min，得固定化多酶体系；其中，所述金属有机骨架化合物和混合酶溶液质量体积比为0.001～0.003:50g/mL。
2.如权利要求1所述的固定化多酶体系的制备方法，其特征在于，所述硝酸镍溶液、硝酸铁溶液和对苯二甲酸溶液体积比为0.8:1.3:1。
3.如权利要求1所述的固定化多酶体系的制备方法，其特征在于，所述金属有机骨架化合物和混合酶溶液质量体积比为0.0025:50g/mL。
4.如权利要求1所述的固定化多酶体系的制备方法，其特征在于，所述混合酶为唾液溶菌酶、胃蛋白水解酶、辣根过氧化物酶、受体酪氨酸磷酯酶、乳糖酶、酪氨酸酶、有机磷水解酶、甲基对硫磷水解酶、有机磷酸酐水解酶、脂肪酶和谷胱甘肽巯基转移酶中的至少两种。
5.如权利要求1或4所述的固定化多酶体系的制备方法，其特征在于，步骤(3)中的混合酶溶液为用于城市污泥二次消化处理的混合酶溶液，其包括唾液溶菌酶和胃蛋白水解酶。
6.如权利要求5所述的固定化多酶体系的制备方法，其特征在于，所述唾液溶菌酶和胃蛋白水解酶酶活性单位比例为1:0.25～1。
7.如权利要求1或4所述的固定化多酶体系的制备方法，其特征在于，步骤(3)中的混合酶溶液为用于农药废水处理的混合酶溶液，其包括有机磷水解酶、甲基对硫磷水解酶和/或有机磷酸酐水解酶。
8.如权利要求7所述的固定化多酶体系的制备方法，其特征在于，所述有机磷水解酶、甲基对硫磷水解酶和有机磷酸酐水解酶酶活性单位比例为1:0.5～2:0.25～2。
9.如权利要求1所述的固定化多酶体系的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，光固化引发剂为TPO、ITX或二苯甲酮。
10.权利要求1～9任一项所述的固定化多酶体系的制备方法制得的固定化多酶体系。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112725324A (zh) * 2020-12-31 2021-04-30 东莞市汇林包装有限公司 一种酶基复合催化剂、其制备方法及使用方法

Citations (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1766103A (zh) * 2005-09-21 2006-05-03 浙江大学 高稳定性固定化酶的制备方法
CN103756646A (zh) * 2014-02-11 2014-04-30 北京科技大学 一种金属有机骨架基复合相变材料的制备方法
US20150087044A1 (en) * 2011-06-16 2015-03-26 Shengqian Ma Polyhedral cage-containing mesoporous metal-organic frameworks as platform for biocatalysis, methods of making these frameworks, and methods of using these frameworks
CN104624160A (zh) * 2015-01-21 2015-05-20 北京科技大学 一种导热增强型金属有机框架气体存储材料的制备方法
CN104741088A (zh) * 2015-04-09 2015-07-01 云南大学 含氟废水脱氟剂Fe-Al双金属有机骨架化合物的制备方法
CN104745149A (zh) * 2015-03-05 2015-07-01 北京科技大学 一种含碳材料金属有机骨架基复合相变材料的制备方法
CN105293465A (zh) * 2015-11-25 2016-02-03 西南科技大学 一种高聚合度聚磷酸铵及其制备方法
CN107828770A (zh) * 2017-10-30 2018-03-23 北京化工大学 一种在无纺布上光固化有机磷水解酶方法
US20180228209A1 (en) * 2015-08-09 2018-08-16 Jinan Shengquan Group Share Holding Co., Ltd. Graphene adsorbing material, preparation method therefor and application thereof, and cigarette filter tip and cigarette
CN108862992A (zh) * 2018-07-06 2018-11-23 沈阳航空航天大学 一种蛋白酶联合热压力对污泥脱水的方法
CN109082420A (zh) * 2018-08-21 2018-12-25 江苏大学 金属有机框架材料固定化β-葡萄糖苷酶及其制备方法和应用
EP3424594A1 (en) * 2017-07-06 2019-01-09 Ecole Polytechnique Federale De Lausanne (Epfl) Photocatalytic system comprising a titanium-based mof
CN110129290A (zh) * 2019-04-03 2019-08-16 江苏大学 金属有机框架材料固定化漆酶及其制备方法和应用
CN110229807A (zh) * 2019-05-10 2019-09-13 河北工业大学 有机磷固定化酶催化剂的制备方法和有机磷固定化酶催化剂与其应用
CN110256683A (zh) * 2019-04-19 2019-09-20 武汉理工大学 一种多级孔结构金属有机骨架材料的制备方法及其应用
CN110438114A (zh) * 2019-07-27 2019-11-12 华南理工大学 一种纳米纤维素/光固化树脂制备固定化酶的方法及制得的固定化酶与应用
CN110484529A (zh) * 2019-07-10 2019-11-22 杭州师范大学 一种金属有机框架-腈水合酶复合物及其制备方法和应用
CN110819617A (zh) * 2019-10-21 2020-02-21 深圳大学 一种用酶固定化技术合成多酚类化合物的制备方法

Patent Citations (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1766103A (zh) * 2005-09-21 2006-05-03 浙江大学 高稳定性固定化酶的制备方法
US20150087044A1 (en) * 2011-06-16 2015-03-26 Shengqian Ma Polyhedral cage-containing mesoporous metal-organic frameworks as platform for biocatalysis, methods of making these frameworks, and methods of using these frameworks
CN103756646A (zh) * 2014-02-11 2014-04-30 北京科技大学 一种金属有机骨架基复合相变材料的制备方法
CN104624160A (zh) * 2015-01-21 2015-05-20 北京科技大学 一种导热增强型金属有机框架气体存储材料的制备方法
CN104745149A (zh) * 2015-03-05 2015-07-01 北京科技大学 一种含碳材料金属有机骨架基复合相变材料的制备方法
CN104741088A (zh) * 2015-04-09 2015-07-01 云南大学 含氟废水脱氟剂Fe-Al双金属有机骨架化合物的制备方法
US20180228209A1 (en) * 2015-08-09 2018-08-16 Jinan Shengquan Group Share Holding Co., Ltd. Graphene adsorbing material, preparation method therefor and application thereof, and cigarette filter tip and cigarette
CN105293465A (zh) * 2015-11-25 2016-02-03 西南科技大学 一种高聚合度聚磷酸铵及其制备方法
EP3424594A1 (en) * 2017-07-06 2019-01-09 Ecole Polytechnique Federale De Lausanne (Epfl) Photocatalytic system comprising a titanium-based mof
CN107828770A (zh) * 2017-10-30 2018-03-23 北京化工大学 一种在无纺布上光固化有机磷水解酶方法
CN108862992A (zh) * 2018-07-06 2018-11-23 沈阳航空航天大学 一种蛋白酶联合热压力对污泥脱水的方法
CN109082420A (zh) * 2018-08-21 2018-12-25 江苏大学 金属有机框架材料固定化β-葡萄糖苷酶及其制备方法和应用
CN110129290A (zh) * 2019-04-03 2019-08-16 江苏大学 金属有机框架材料固定化漆酶及其制备方法和应用
CN110256683A (zh) * 2019-04-19 2019-09-20 武汉理工大学 一种多级孔结构金属有机骨架材料的制备方法及其应用
CN110229807A (zh) * 2019-05-10 2019-09-13 河北工业大学 有机磷固定化酶催化剂的制备方法和有机磷固定化酶催化剂与其应用
CN110484529A (zh) * 2019-07-10 2019-11-22 杭州师范大学 一种金属有机框架-腈水合酶复合物及其制备方法和应用
CN110438114A (zh) * 2019-07-27 2019-11-12 华南理工大学 一种纳米纤维素/光固化树脂制备固定化酶的方法及制得的固定化酶与应用
CN110819617A (zh) * 2019-10-21 2020-02-21 深圳大学 一种用酶固定化技术合成多酚类化合物的制备方法

Non-Patent Citations (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CAO Y等: "Immobilization of Bacillus subtilis lipase on a Cu-BTC based hierarchically porous metal-organic framework material: a biocatalyst for esterification", 《DALTON TRANS》 *
KIM Y等: "Hydrolytic Transformation of Microporous Metal-Organic Frameworks to Hierarchical Micro- and Mesoporous MOFs", 《ANGEW.CHEM.INT.ED》 *
LI P: "Encapsulation of a Nerve Agent Detoxifying Enzyme by a Mesoporous Zirconium Metal-Organic Framework Engenders Thermal and Long-Term Stability", 《J.AM.CHEM.SOC》 *
元宁等: "双金属金属有机骨架材料的制备及性能研究进展", 《应用化学》 *
刘娜等: "酪氨酸酶固定化碳材料对苯酚的生物降解性能", 《吉林大学学报(地球科学版)》 *
周丽亚等: "有机磷降解酶在重组大肠杆菌中的表达及一步纯化固定化", 《微生物学通报》 *
张延红等: "甲醛处理对壳聚糖固定化酪氨酸酶稳定性的影响", 《食品工业科技》 *
李天佑: "金属有机骨架材料(MOFs)优化方法综述", 《广州化工》 *
梁贺等: "铁铜双金属有机骨架MIL-101(Fe,Cu)活化双氧水降解染料性能", 《环境科学》 *
秦凤祥: "基于介孔MIL101新型负载型催化剂制备及性能研究", 《中国博士学位论文全文数据库（电子期刊）工程科技I辑》 *
范小雨等: "铁氨基黏土纳米结构脂肪酶的构筑及催化特性", 《高等学校化学学报》 *
谢柏盛等: "金属框架结构材料MOF-199对漆酶的固定化及其性质", 《生物加工过程》 *
邱健豪等: "金属有机骨架材料制备双金属或多金属催化材料及其应用", 《化学进展》 *
高霞等: "Cu-MOFs固定化酶制备及染料降解应用研究", 《商洛学院学报》 *
高霞等: "基于多级孔金属有机骨架构筑HRP固定化酶反应器及其染料降解应用", 《高等学校化学学报》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112725324A (zh) * 2020-12-31 2021-04-30 东莞市汇林包装有限公司 一种酶基复合催化剂、其制备方法及使用方法
CN112725324B (zh) * 2020-12-31 2023-10-20 广东省汇林包装科技集团有限公司 一种酶基复合催化剂、其制备方法及使用方法

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