CN111303099B - 含笑内酯二甲基胺富马酸盐晶型f及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供含笑内酯二甲基胺富马酸盐晶型F及其制备方法，45‑50℃下将含笑内酯二甲基胺富马酸盐溶解于醇类良溶剂中，加入溶析剂进行溶析结晶，晶浆经过滤、洗涤、干燥，得到含笑内酯二甲基胺富马酸盐F晶型产品。以X射线粉末衍射2θ表示在12.1±0.2°、16.5±0.2°、17.7±0.2°、20.6±0.2°、22.0±0.2°、22.9±0.2°、24.7±0.2°、24.9±0.2°、25.3±0.2°、27.9±0.2°、29.9±0.2°、33.4±0.2°、35.5±0.2°、36.3±0.2°、38.0±0.2°、38.6±0.2°处有特征峰。本发明制备产品结晶度高，不易吸湿，稳定性好，工艺条件温和、简单易操作、耗时短、耗能少，易于实现规模化生产。

Description

含笑内酯二甲基胺富马酸盐晶型F及其制备方法

技术领域

本发明属于医药结晶技术领域，具体涉及含笑内酯二甲基胺富马酸盐晶型F及其制备方法。

背景技术

癌症一直被公认为一种主要的全球健康问题，其发病率和死亡率每年都在上升。天然产物作为一种重要的药物来源，早在古代便已被广泛用于治疗和控制疾病，近年来从天然产物中寻找抗癌活性化合物也已经成为抗癌药物的研发热点。

小白菊内酯是一种从菊科植物草药野甘菊和艾菊中提取的主要活性成分，是一种天然的倍半萜内酯类化合物，传统上的小白菊主要用于发热、类风湿关节炎和偏头痛及牙痛等疾病的治疗，近年来国内、国外研究发现小白菊内酯也具有抗肿瘤作用。含笑内酯也属于倍半萜内酯类化合物，中国专利CN101978959A公开了包含含笑内酯二甲基胺在内的含笑内酯衍生物、药物组合物在制备抗癌药物中的应用，目前已有文献报道含笑内酯二甲基胺能够选择性抑制急性骨髓性白血干细胞以及神经胶质瘤细胞的生长，专利WO2011/131103A1公开了包含含笑内酯二甲基胺富马酸盐在内的含笑内酯衍生物或其盐、其药物组合物的制备方法及在用于制备治疗癌症药物的用途。

含笑内酯二甲基胺富马酸盐具有良好的抗癌症干细胞作用，体内抗癌效果颇为显著，其分子式C₂₁H₃₁NO₇，相对分子质量409，为白色结晶性粉末，无味无臭，溶于水、甲醇、乙醇、四氢呋喃、1,4-二氧六环、丙酮、乙腈、乙酸异丙酯，几乎不溶于环己烷、正己烷、正庚烷、二氯甲烷、异丙醚、甲苯。化学结构式如下：

多晶型是指同一物质在其晶格中存在不同的分子排列或者是构象，从而导致形成的晶体结构不同，据统计市售80％的药物中存在多晶型现象。同一药物不同的晶型在颜色、溶解度、熔点、密度、硬度、晶体形态等理化性质方面有显著差异，进而造成药物的稳定性、溶出度、生物利用度等的质量差异，影响产品后续加工和处理，并且在一定程度上影响药物的疗效和安全性。在药品质量控制及新药剂型的设计过程中，药物多晶型的研究已经成为不可缺少的重要组成部分。

中国专利CN103724307B公开了含笑内酯二甲基胺富马酸盐晶型A及其制备方法，通过使用XRPD来表征晶型A，用2θ表示在7.10°、7.58°、11.72°、12.26°、13.30°、14.24°、15.70°、16.38°、17.04°、19.02°、19.86°、20.14°、20.66°、21.20°、21.78°、22.64°、23.58°、23.8°、24.48°、25.08°、26.24°、27.08°、27.60°、28.40°、28.94°、34.48°、34.82°、36.12°、38.72°、45°处有特征峰。专利中采用自然冷却在在乙酸乙酯溶剂中重结晶制备晶型A，结晶条件受环境影响波动大，降温速率难以控制，晶体产品结晶度在不同批次之间差异性较大。晶型A稳定性较差，在丙酮、乙腈、四氢呋喃、乙酸乙酯、乙酸异丙酯、1,4-二氧六环、甲基异丁基甲酮等多种单一溶剂中室温或者高温悬浮24h，都会发生晶型转化，对湿度敏感影响储存和运输，会对后期的加工和处理带来很多问题。所以开发一种结晶度高、不易吸湿、稳定性好的含笑内酯二甲胺富马酸盐新晶型显得尤其重要。

发明内容

本发明提供了一种含笑内酯二甲基胺富马酸盐的新晶型及制备方法，采用溶析结晶的方法制备得到一种结晶度高、稳定性好且不易吸湿的含笑内酯二甲基胺富马酸盐晶体产品，该制备工艺条件温和、简单易操作、耗时短、耗能少，易于实现规模化生产。

本发明提供的含笑内酯二甲基胺富马酸盐晶型F，其特征在于，其X射线粉末衍射图谱见附图1，以衍射角2θ表示在12.1±0.2°、16.5±0.2°、17.7±0.2°、20.6±0.2°、22.0±0.2°、22.9±0.2°、24.7±0.2°、24.9±0.2°、25.3±0.2°、27.9±0.2°、29.9±0.2°、33.4±0.2°、35.5±0.2°、36.3±0.2°、38.0±0.2°、38.6±0.2°处有特征峰。XRD图谱是在X-射线粉末衍射仪(D/max-2500，日本理学Rigaku)上收集，其发射靶为Cu/Kα，电源设置为40kV/100mA，扫描速率为2°/分，扫描步长为0.02°，2θ扫描范围为2°到40°。

所述的含笑内酯二甲基胺富马酸盐晶型F，其特征在于，所述晶体为无溶剂化合物，在分解温度前没有失重，热失重分析见附图2，该晶体的差示扫描量热分析图谱在153±2℃有一个特征吸热峰，在163±2℃有一个特征放热峰，如附图3所示。DSC数据由差式扫描量热仪(DSC1/500，瑞士MettlerToledo公司)分析得到，分析条件为：将样品5-10mg置于铝坩埚内，在高纯N2保护下，以10℃/min的速率将样品温度由25℃升至180℃。

本发明提供了含笑内酯二甲基胺富马酸盐晶型F的制备方法，通过溶析结晶实现，步骤如下：

温度在45-50℃下，将含笑内酯二甲基胺富马酸盐加入到醇类溶剂中，配制成0.02-0.04g/mL的悬浮液，搅拌作用下使固体原料完全溶解，然后向溶液中滴加溶析剂进行溶析结晶，溶析剂用量是醇类溶剂体积的2-5倍，抽滤所形成的悬浮液，干燥后得到含笑内酯二甲基胺富马酸盐F晶型产品。

所述的醇类溶剂选自甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、仲丁醇、正戊醇或异戊醇中的任意一种或两种。

所述的溶析剂选自环己烷、正庚烷、正己烷、正辛烷、甲基叔丁基醚、异丙醚或正丁醚中的任意一种或两种。

所述的溶析剂的加入速率为溶析剂体积的0.2-5.0％/min。

所述的干燥条件是30-50℃，常压条件下进行，干燥时间为5-10h。

按照现有专利CN103724307B中报道的通过在乙酸乙酯中自然冷却结晶制备出含笑内酯二甲基胺富马酸盐A晶型的方法，得到A晶型产品，电镜扫描照片如附图4所示，从扫描电镜图片可以看出产品粒度较小，聚结现象严重，粒度为35.8μm。本发明提供的溶析结晶方法制备的含笑内酯二甲基胺富马酸盐晶型F，晶体的形貌在扫描电镜图中表现为规则的片状，如附图5所示，相比于晶型A产品，本发明提供的F晶型产品，颗粒尺寸增加，粒度为65μm，并且产品表面光洁，在一定程度上减小了聚结。晶体形貌SEM照片由扫描电镜(日立X650)，在操作电压为15kV，氮气保护条件下喷金进行观察并记录得到。

本发明提供的溶析结晶方法制备含笑内酯二甲基胺富马酸盐晶型F，XRD图谱衍射峰强，晶体产品结晶度高。药物的引湿性是会影响药物稳定性、有效性和安全性的一项重要特性。所以本发明对晶型F进行引湿性考察，动态蒸汽吸附测试表明25℃下，当相对湿度达到80％，样品质量增加小于0.2％，参照2005版药典对于引湿性的界定，晶型F基本不具有引湿性，具体图谱见附图6，此外，晶型F经过在25℃下经过一个相对湿度0％-95％-0％连续变化的水蒸气吸附-脱附循环后，样品的晶型没有发生变化，参见附图7，证明该晶型F对湿度不敏感，有助于成药，更加适合储存和运输。然而专利CN103724307B报道的A晶型产品对湿度敏感，不稳定，不利于成药，在后处理后加工过程中极容易发生转晶，进而影响药效。F晶型解决了A晶型的引湿性问题。

本发明对含笑内酯二甲基胺富马酸盐F晶型的稳定性进行了考察，将所述化合物产品均匀分摊在敞口的培养皿中，在40℃，75％恒温恒湿条件下，样品厚度小于5mm，密封置于干燥器内放置30天，然后对放置7天、14天、30天的样品分别进行XRPD检测，并与第0天的检测结果进行对比。具体图谱见附图8，结果显示XRPD图谱并没有明显变化，同时，对放置7天、14天、30天的样品分别进行纯度分析，和第0天的纯度检测结果对比，发现第7天的样品纯度只变化了0.03％，第14天的样品纯度只变化了0.15％，第30天的样品纯度只变化了0.28％，显示样品的纯度没有发生明显变化。综合XRD图谱和纯度分析结果，证明含笑内酯二甲基胺富马酸盐F晶型稳定性较好，具有很好的应用前景。

附图说明

图1本发明含笑内酯二甲基胺富马酸盐F晶型的X-射线衍射图。

图2本发明含笑内酯二甲基胺富马酸盐F晶型的热重分析图。

图3本发明含笑内酯二甲基胺富马酸盐F晶型的差式扫描量热分析图。

图4按照专利CN103724307B报道方法制备出的A晶型产品的扫描电镜图(放大200倍)。

图5本发明含笑内酯二甲基胺富马酸盐F晶型扫描电镜图(放大600倍)。

图6本发明含笑内酯二甲基胺富马酸盐F晶型在25℃下的动态水蒸汽吸附图。

图7本发明含笑内酯二甲基胺富马酸盐F晶型在25℃经过水蒸汽吸附-脱附循环前后样品的XRD叠图。

图8本发明含笑内酯二甲基胺富马酸盐F晶型的稳定性试验图谱比较，其中从下到上依次为放置0天、7天、14天、30天的样品的XRD谱图。

具体实施方式

以下将通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明，但不应该将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

实施例1

将1g含笑内酯二甲基胺富马酸盐加入到50mL异丙醇中，45℃下恒温搅拌，直到固体原料完全溶解，然后以0.2mL/min的滴加速率加入100mL环己烷溶析剂，得到悬浮液，进行抽滤洗涤，将产物在30℃、常压下干燥6小时至恒重，得到含笑内酯二甲基胺富马酸盐F晶型产品。产品的X射线粉末衍射图谱和附图1一致，以衍射角2θ表示在12.1°、16.5°、17.7°、20.6°、22.0°、22.9°、24.7°、24.9°、25.3°、27.9°、29.9°、33.4°、35.5°、36.3°、38.0°、38.6°处有特征峰，TGA分析图和附图2一致，在分解温度前没有失重，证明晶型F为无溶剂化合物，DSC分析图在在153±2℃有一个特征吸热峰，在163±2℃有一个特征放热峰，和附图3一致，晶体形貌SEM照片和附图5一致。在40℃，75％恒温恒湿条件下放置30天，产品晶型、颜色没有发生明显变化，产品纯度只变化了0.282％。

实施例2

将1g含笑内酯二甲基胺富马酸盐加入到25mL正丙醇中，50℃下恒温搅拌，直到固体原料完全溶解，然后以5mL/min的滴加速率加入100mL正己烷溶析剂，得到悬浮液，进行抽滤洗涤，将产物在50℃、常压下干燥5小时至恒重，得到含笑内酯二甲基胺富马酸盐F晶型产品。产品的X射线粉末衍射图谱和附图1一致，以衍射角2θ表示在12.0°、16.4°、17.7°、20.4°、22.0°、22.7°、24.7°、24.9°、25.3°、27.9°、29.9°、33.4°、35.5°、36.3°、38.0°、38.6°处有特征峰，TGA分析图和附图2一致，在分解温度前没有失重，证明晶型F为无溶剂化合物，DSC分析图在在153±2℃有一个特征吸热峰，在163±2℃有一个特征放热峰，和附图3一致，晶体形貌SEM照片和附图5一致。在40℃，75％恒温恒湿条件下放置30天，产品晶型、颜色没有发生明显变化，产品纯度只变化了0.280％。

实施例3

将1.5g含笑内酯二甲基胺富马酸盐加入到50mL正丁醇中，48℃下恒温搅拌，直到固体原料完全溶解，然后以6mL/min的滴加速率加入200mL异丙醚溶析剂，得到悬浮液，进行抽滤洗涤，将产物在40℃、常压下干燥10小时至恒重，得到含笑内酯二甲基胺富马酸盐F晶型产品。产品的X射线粉末衍射图谱和附图1一致，以衍射角2θ表示在12.1°、16.3°、17.7°、20.6°、22.0°、22.7°、24.7°、24.8°、25.1°、27.8°、29.9°、33.3°、35.4°、36.2、38.0°、38.6°处有特征峰，TGA分析图和附图2一致，在分解温度前没有失重，证明晶型F为无溶剂化合物，DSC分析图在在153±2℃有一个特征吸热峰，在163±2℃有一个特征放热峰，和附图3一致，晶体形貌SEM照片和附图5一致。在40℃，75％恒温恒湿条件下放置30天，产品晶型、颜色没有发生明显变化，产品纯度只变化了0.279％。

实施例4

将0.5g含笑内酯二甲基胺富马酸盐加入到5mL乙醇和10mL异丁醇的混合溶剂中，50℃下恒温搅拌，直到固体原料完全溶解，然后以0.15mL/min的滴加速率加入75mL甲基叔丁基醚，得到悬浮液，进行抽滤洗涤，将产物在30℃、常压下干燥6小时至恒重，得到含笑内酯二甲基胺富马酸盐F晶型产品。产品的X射线粉末衍射图谱和附图1一致，以衍射角2θ表示在12.1°、16.5°、17.7°、20.6°、22.0°、22.9°、24.7°、24.9°、25.3°、27.9°、29.9°、33.4°、35.5°、36.3°、38.0°、38.6°处有特征峰，TGA分析图和附图2一致，在分解温度前没有失重，证明晶型F为无溶剂化合物，DSC分析图在在153±2℃有一个特征吸热峰，在163±2℃有一个特征放热峰，和附图3一致，晶体形貌SEM照片和附图5一致。在40℃，75％恒温恒湿条件下放置30天，产品晶型、颜色没有发生明显变化，产品纯度只变化了0.278％。

实施例5

将2g含笑内酯二甲基胺富马酸盐加入到30mL甲醇和20mL正戊醇的混合溶剂中，40℃下恒温搅拌，直到固体原料完全溶解，然后以10mL/min的滴加速率加入100mL正己烷和100mL正辛烷的混合溶剂作为溶析剂，得到悬浮液，进行抽滤洗涤，将产物在50℃、常压下干燥10小时至恒重，得到含笑内酯二甲基胺富马酸盐F晶型产品。产品的X射线粉末衍射图谱和附图1一致，以衍射角2θ表示在12.1°、16.5°、17.7°、20.6°、22.0°、22.9°、24.7°、24.9°、25.3°、27.9°、29.9°、33.4°、35.3°、36.2°、38.0°、38.6°处有特征峰，TGA分析图和附图2一致，在分解温度前没有失重，证明晶型F为无溶剂化合物，DSC分析图在在153±2℃有一个特征吸热峰，在163±2℃有一个特征放热峰，和附图3一致，晶体形貌SEM照片和附图5一致。在40℃，75％恒温恒湿条件下放置30天，产品晶型、颜色没有发生明显变化，产品纯度只变化了0.280％。

实施例6

将1g含笑内酯二甲基胺富马酸盐加入到25mL仲丁醇和5mL异戊醇的混合溶剂中，45℃下恒温搅拌，直到固体原料完全溶解，然后以5mL/min的滴加速率加入90mL正丁醚溶析剂，得到悬浮液，进行抽滤洗涤，将产物在50℃、常压下干燥5小时至恒重，得到含笑内酯二甲基胺富马酸盐F晶型产品。产品的X射线粉末衍射图谱和附图1一致，以衍射角2θ表示在12.0°、16.4°、17.7°、20.5°、22.0°、22.7°、24.5°、24.9°、25.3°、27.9°、29.9°、33.4°、35.5°、36.3°、38.0°、38.6°处有特征峰，TGA分析图和附图2一致，在分解温度前没有失重，证明晶型F为无溶剂化合物，DSC分析图在在153±2℃有一个特征吸热峰，在163±2℃有一个特征放热峰，和附图3一致，晶体形貌SEM照片和附图5一致。在40℃，75％恒温恒湿条件下放置30天，产品晶型、颜色没有发生明显变化，产品纯度只变化了0.283％。

Claims (5)

1.含笑内酯二甲基胺富马酸盐晶型F，其特征在于，其X射线粉末衍射图谱以衍射角2θ表示在12.1±0.2°、16.5±0.2°、17.7±0.2°、20.6±0.2°、22.0±0.2°、22.9±0.2°、24.7±0.2°、24.9±0.2°、25.3±0.2°、27.9±0.2°、29.9±0.2°、33.4±0.2°、35.5±0.2°、36.3±0.2°、38.0±0.2°、38.6±0.2°处有特征峰。

2.根据权利要求1所述的含笑内酯二甲基胺富马酸盐晶型F，其特征在于，所述晶体为无溶剂化合物，在分解温度前没有失重，差示扫描量热分析图谱在153±2℃有一个特征吸热峰，在163±2℃有一个特征放热峰。

3.权利要求1或2所述的含笑内酯二甲基胺富马酸盐的晶型F的制备方法，其特征在于，温度在45-50℃下，将含笑内酯二甲基胺富马酸盐加入到醇类溶剂中，配制成0.02-0.04g/mL的悬浮液，搅拌作用下使固体原料完全溶解，然后向溶液中滴加溶析剂进行溶析结晶，溶析剂用量是醇类溶剂体积的2-5倍，抽滤所形成的悬浮液，干燥后得到含笑内酯二甲基胺富马酸盐晶型F产品，晶体为片状晶习；

所述的醇类溶剂选自甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、仲丁醇、正戊醇或异戊醇中的一种或两种；

所述的溶析剂选自环己烷、正庚烷、正己烷、正辛烷、甲基叔丁基醚、异丙醚或正丁醚或中的一种或两种。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的溶析剂的加入速率为溶析剂体积的0.2-5.0％/min。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的干燥条件是30-50℃，常压条件下进行，干燥时间为5-10h。

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