CN111286505A

CN111286505A - 水稻抗白叶枯病基因Xa14在改良水稻抗病性中的应用

Info

Publication number: CN111286505A
Application number: CN201910408254.XA
Authority: CN
Inventors: 王石平; 张标明; 张海涛
Original assignee: Huazhong Agricultural University
Current assignee: Huazhong Agricultural University
Priority date: 2019-05-16
Filing date: 2019-05-16
Publication date: 2020-06-16

Abstract

本发明属于植物基因工程技术领域。具体涉及水稻抗白叶枯病基因Xa14在改良水稻抗病性中的应用。本发明提供了一种水稻抗白叶枯病基因Xa14，其具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，该基因的cDNA序列如SEQ ID NO：2所示，其编码的蛋白质序列如SEQ ID NO：3所示。Xa14基因属于BED‑NB‑LRR基因家族，该基因编码的蛋白质与植物抗病性相关。通过遗传转化，将Xa14基因转入宿主普通水稻品种，能够提高水稻对白叶枯病的抗性，从而减轻白叶枯病产生的危害，以达到增产的目的。

Description

水稻抗白叶枯病基因Xa14在改良水稻抗病性中的应用

技术领域

本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及水稻抗白叶枯病基因Xa14在改良水稻抗病性中的应用。本发明Xa14基因属于BED-NB-LRR基因家族，编码的蛋白质与植物抗病性相关。通过遗传转化将Xa14 基因转入普通水稻品种，来提高水稻对白叶枯病的抗性。

背景技术

植物的抗病反应是由多基因调控的复杂信号传递过程。参与抗病反应的基因主要分为两类：主效抗病 (major resistance，MR)基因，它们大多直接参与植物和病原菌的识别反应，介导不同的抗病信号路径；抗病相关基因，它们往往是抗病信号中处于下游的重要成员。根据植物抗病反应的特点和抗病程度，植物的抗性又可分为质量抗性和数量抗性。通常情况下，对于质量抗性，植物仅对病原菌中某些特定致病小种有专化性抗性，而对其他的的致病小种没有抗性。这类抗病反应可以由单个基因调控且抗病程度高，也被称为主效抗病基因调控的抗性。这类抗性的不足是抗病性可能会因为致病小种的进化突变而丢失(Kou和 Wang 2010；Zhang和Wang 2013)。数量抗性的特点是植物与病原菌没有专化性的抗病性，不存在致病小种的特异性。这类抗性一般由多个基因调控且具有广谱和持久抗病性，不足的是抗病水平较低，所以也可以称为数量性状位点(quantitative trait locus，QTL)调控的抗性(Kou和Wang 2010)。

截至目前，水稻中已经有超过41个抗白叶枯病主效基因被鉴定(Zhang等2016)。其中11个基因被克隆，分别是7个显性基因Xa1、Xa3/Xa26、Xa4、Xa10、Xa21、Xa23、Xa27(Song等1995；Yoshimura 等1998；Sun等2004；Gu等2005；Tian等2014；；Wang等2015；Hu等2017)；4个隐性基因xa5、 xa13、xa25、xa41(Iyer和McCouch 2004；Chu等2006；Antony等2010；Liu等2011)。它们编码的蛋白类型不尽相同，只有Xa1编码典型的NB-LRR类抗性蛋白，其它基因的编码产物均是非典型的抗性蛋白 (张海涛和王石平2016)。这些非典型的蛋白通过不同的方式调节水稻的抗病性，其中有多个抗性蛋白与病原菌中的类转录激活效应子(transcription activator like effector，TAL effector)有关(Zhang和Wang 2013)。病原菌中TAL效应子可以靶定在宿主的启动子上，诱导植物抗病基因或感病基因表达，使植物表现出抗病或者感病反应(Zhang等2015)。

水稻是单子叶植物研究的模式植物，同时也是世界上最主要的粮食作物之一。但是水稻在实际生产中却面临着很多挑战，病害和非生物环境的影响常常造成产量和品质的下降，从而对粮食的安全形势造成非常严重的影响。白叶枯病是水稻生产过程中最重要的三大病害之一，其侵染的方式是通过水孔或伤口进入水稻叶片，靠吸取水稻的营养物质供自己繁殖，在维管束细胞传播，最后导致水稻叶片形成长条枯死状病斑的症状。白叶枯病菌侵染水稻，往往会使水稻枯死，从而导致大幅度减产，严重时使水稻减产20％-30％(Kou和Wang 2010)。实践和研究表明，发掘和利用优良抗性基因资源改良水稻是控制病害发生、减少或避免病害所带来的损失最经济有效的措施。

发明内容

本发明的目的是提供一种水稻抗白叶枯病基因Xa14，其具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。

本发明另一目的是提供一种利用抗白叶枯病基因Xa14提高水稻对白叶枯病抗性的应用。

本发明的技术方案如下所述：

本发明采用遗传学的方法，构建水稻抗白叶枯病菌的分离群体，利用图位克隆的方法，分离到水稻抗白叶枯病基因Xa14。通过共分离标记检测表明该基因与白叶枯病抗性是共分离的。通过遗传转化Xa14基因，使原感病水稻品种对白叶枯病菌产生抗性，证实了该基因的功能。

本发明Xa14基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，该基因全长6311bp，具有2个内含子和3个外显子，其CDS分别为199-505bp、601-913bp和1563-5922bp，cDNA全长为4980bp，编码1659个氨基酸，其蛋白质序列如序列表SEQ ID NO:3所示。该蛋白属于BED-NB-LRR家族，活性中心301-592区段为保守的NB-ARC区，包括ATP结合区等。应当理解，在不影响Xa14蛋白活性的前提下，本领域技术人员可对SEQ ID NO:3所示的蛋白质序列进行各种替换、添加或/和缺失一个或几个氨基酸获得具有同等功能的氨基酸序列。

此外，考虑到密码子的简并性，例如可在其编码区或非编码区不影响蛋白表达的条件下，对SEQ ID NO：3所示蛋白质序列进行修改。因此，本发明还包括对编码上述蛋白的基因序列进行的替换、添加或/ 和缺失一个或多个核苷酸，与上述编码蛋白基因具有相同或相似功能的核苷酸序列。本发明还包括基于所述基因的正义或反义序列，包括含有所述核苷酸序列或其片段的克隆载体或表达载体，含有所述载体的宿主细胞以及含有所述核苷酸序列或其片段的转化植物细胞和转基因植物。

附图说明

图1：本发明鉴定和分离克隆水稻抗病基因Xa14以及验证Xa14基因功能的流程图。

图2：感病品种IR24和抗病品种IRBB14杂交F₂群体在孕穗期接种PXO112后病斑长度分布图。

图3：候选基因与Xa1的同源性分析。

图4：.Xa14的定位。A：分子标记下方的数值表示标记与Xa14重组单数，Xa14位于分子标记SNP1 和RM5473之间；B：SNP1和RM5473之间的物理图谱。

图5：本发明起始转化载体pCAMBIA1301的图谱。

图6：本发明所用遗传转化载体D261O的结构示意图。附图标记说明：RB和LB分别表示T-DNA的右边界和左边界，GUS表示β-葡糖苷酸酶基因，Hpt表示潮霉素磷酸转移酶基因，NOS表示胭脂碱合成酶基因的多聚腺苷酸化信号，P_Xa14表示Xa14自身启动子。

图7：T₀代遗传转化植株(D261OIR)中基因型与抗性检测。附图标记说明：图7中的A图为接种白叶枯病菌后叶片的发病情况，图7中的B图为用Xa14基因内部特异引物Xa14-6F/Xa14-6R鉴定T₀代转基因植株(1～20)，图7中的C图为接种白叶枯病菌后叶片的病斑长度调查分析，对照为水稻感病品种IR24 (遗传转化的受体)。星号(**)表示与对照相比，转化植株的病斑长度显著(P＜0.01)减小。

图8：T₁代遗传转化植株(D261OIR)对白叶枯病菌PXO112的抗性增强表型与Xa14基因型共分离。附图标记说明：图7中的A图和图7中的B图为1号遗传转化植株(D261OIR-1)的T₁代接种白叶枯病菌的病斑长度和Xa14基因型，图7中的C图和D图为3号遗传转化植株(D261OIR-3)的T₁代接种白叶枯病菌的病斑长度和Xa14基因型，图7中的E图和F图为8号遗传转化植株(D261OIR-8)的T₁代接种白叶枯病菌的病斑长度和Xa14基因型。对照是遗传转化受体IR24。病斑长度为接种白叶枯病菌两周后的数据，每个数据是平均值(4个重复)±标准差。星号(**)表示与对照相比，转化植株的病斑长度显著 (P＜0.01)减小。

具体实施方式

对序列表的说明：

序列表SEQ ID NO：1是本发明分离克隆的Xa14基因的核苷酸序列。其中该序列的199-5922位核苷酸序列是该基因的编码区。

序列表SEQ ID NO：2是Xa14基因的cDNA序列。

序列表SEQ ID NO：3是Xa14基因编码的蛋白质序列。

以下实施例进一步定义本发明。但不应理解为对本发明的限制。根据以下的描述和这些实施例，本领域技术人员可以确定本发明的基本特征，并且在不偏离本发明精神和范围的情况下，可以对本发明做出各种修改，以使其适用各种用途和条件。

实施例1：Xa14基因的定位克隆

1.精细定位显性基因Xa14

将抗白叶枯病水稻品种IRBB14(国际水稻研究所)和感白叶枯病水稻品种IR24(国际水稻研究所) 杂交，构建了含Xa14的F₂群体。为了鉴定该基因的显、隐性，在大田种植了F₂群体并从中随机选择315 个单株组成随机群体。根据接种后调查的病斑长度，判定Xa14为显性抗病基因(图1)。用PCR和聚丙烯酰胺凝胶电泳，以及SSR和SNP分子标记的方法，检测F2各个单株分子标记的分离情况。根据F₂的分子标记分型，应用JoinMap3.0软件，构建水稻染色体的分子标记遗传连锁图。再根据前期的研究结果，用 PCR和聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法，以RM17487 (5′-CGGAGCATGTGGAGAGGAACTCG-3′/5′-GGAGAGGGCAAGGGCTTCTTCG-3′)和RM17524 (5′-TCCAGCTAGTTTGGTTGCATACG-3′/5′-GGACAATGAACTACAGTAGCACACG-3′)分子标记筛选F₂群体得到了13株重组单株(表1)。在此基础上，通过设计SNP和In/Del分子标记，进一步将Xa14基因定位于SNP1 (5′-ATTTCACGATGCCCCAAGC-3′/5′-GGAGCCCTGTGGGAAGATCT-3′)和RM5473 (5′-GGAGATAAGACACGAGGGAATTATGC-3′/5′-AGATTAACTACGCGCGCTCATCC-3′)之间。在定位期间还用到三个中间分子标记，分别为RM17497 (5′-AGGCTCACAGCAATTAGAGGGAGAGG-3′/5′-CACTTGAAGGTTCAGAGGAGCACACC-3′)、RM17501 (5′-CTGGAGAGGGTGGTTGGGATCG-3′/5′-CAGCAGCAGCACGCGAAACC-3′)、RM3843 (5′-CCAGATCATCCAGGCATAACATCACC-3′/5′-CGGCGCTGGTAAACTCCATTCC-3′)。

表1 从599个单株中筛选到13个重组单株

2.Xa14候选基因的确定

根据Gramene数据库的信息(http://archive.gramene.org/markers/)，分子标记SNP1与RM5473之间的物理距离大约为173kb。根据水稻基因组注释数据库(RICE GenomeAnnotation Project； http://rice.plantbiology.msu.edu/)的信息，在该区域有20个蛋白编码位点，其中7个预测编码NB-LRR类蛋白(表2)。

表2 编码NB-LRR蛋白的7个基因

通过测序，发现RGAb和RGAe编码的蛋白质只包含LRR区域，RGAg因为核苷酸的插入导致翻译提前终止。其余4个基因编码完整的NB-LRR蛋白。RGAa、RGAc和RGAd分别编码了常见的NB-LRR蛋白，而只有RGAf编码了含有锌指结构的蛋白。用生物信息学方法分析这些基因，结果发现RGAf与Xa1基因高度同源，Xa1与RGAf的一致性为86.9％(图2)。因此，将RGAf基因命名为Xa14。

实施例2：Xa14候选基因的结构和编码产物分析

1.基因末端序列分析

按常规方法抽取水稻IRBB14总RNA，随后采用Invitrogen公司的Micro-FastTrack^TM 2.0Kit (Invitrogen K1520-02)抽提mRNA，再采用Invitrogen公司的GeneRacer Core Kit试剂盒，通过 5’-RACE(rapid amplification of cDNA end)和3’-RACE分析方法，确定水稻家系IRBB14中的Xa14候选基因的5’和3’末端序列，操作按Invitrogen公司提供的试剂盒说明书进行。进行5’-RACE第一轮扩增的引物是Xa14-1R(5′-CAAAGCTGATGTCCCGTTCTTAGATGTGC-3′)和UPM(试剂盒自带)；第二轮扩增引物是 Xa14-2R(5′-ATGCCTTGGACCGTTTCTTG-3′)和NUP(试剂盒自带)；进行3’-RACE第一轮扩增的引物是Xa14-1F(5′-CAGGGCTATGAGCTATGCCC-3′)和UPM；第二轮扩增引物是Xa14-2F (5′-GAAATGGAAAGACTAACGGACG-3′)和NUP；然后通过电泳回收目标大小的片段，用pGEM-TVector System I试剂盒(美国Promega公司)对回收片段进行克隆。最后对克隆进行测序分析。

2.基因末端序列分析

采用GenScan(http://genes.mit.edu/GENSCAN.html)软件对包含Xa14基因区段的基因组DNA序列进行分析，预测存在2个内含子和3个外显子，采用跨越内含子的三对PCR引物Xa14-3F (5′-CGAGAAGGTGGATGGGGT-3′)和Xa14-2R、Xa14-4F(5′-ACGGTTTGAGGCTGAAGACAC-3′)和 Xa14-4R(5′-GGGTGCGTGCTAACTGCCTCGTGGTGTG-3′)扩增基因组DNA和RNA反转录产物，RT-PCR 产物Xa14-3F/Xa14-2R和Xa14-4F/Xa14-4R均比从基因组中扩增出的产物小，说明确实存在2个内含子。将RT-PCR产物克隆、测序、与基因组DNA序列比较，确定了各内含子长度及的剪切位点。采用Xa14基因区段的其它引物进行RT-PCR、5’RACE和3’RACE分析，没有再发现其它内含子的存在。

比较分析Xa14基因的基因组序列和cDNA序列，确定Xa14基因由6311个核苷酸组成，包含3个外显子和2个内含子。第一个外显子由505个核苷酸组成，它包括由198个核苷酸组成的5′端非翻译区 (UTR)(位于序列表SEQ ID NO：1的1-198bp处)和由306个核苷酸组成的编码区(位于序列表SEQ ID NO： 1的179-485bp处)；第一个内含子由94个核苷酸组成(位于序列表SEQ ID NO：1的506-600bp处)；第二个外显子(即第二段编码区)由312个核苷酸组成(位于序列表SEQ ID NO：1的601-913bp处)；第二个内含子由648个核苷酸组成(位于序列表SEQ ID NO：1的914-1562bp处)；第三个外显子由4748个核苷酸组成，它包括由4359个核苷酸组成的第四段编码区(位于序列表SEQ ID NO：1的1563-5922bp处)和由388个核苷酸组成的3′端UTR(位于序列表SEQ ID NO：1的5923-6311bp处)。

3.基因编码产物分析

Xa14基因编码一个长度为1659个氨基酸的蛋白质。用Blastp方法分析，推测该基因编码一个 BED-NB-LRR类蛋白质，包含核苷酸结合位点和富亮氨酸拉链结构域。预测显示该蛋白质的氨基末端有一个保守的BED锌指结构域。

实施例3：Xa14基因的功能验证与应用

本发明采用农杆菌介导的遗传转化方法，通过将Xa14基因转入水稻感病品种IR24(国际水稻所)中，进一步验证该基因的功能。

1.遗传转化载体的构建

本发明所用的起始载体是常用载体pCAMBIA1301(图5，Cao等，2007)。根据基因组测序的结果，设计引物(5'-GGTACCGGCATAAGAAATCATAGCAGTGG-3'， 5'-CCAAGCTTGCATGCCTGCAGGTCGACGGTGTAAGGCCTCCATTCTAACAG-3')，其中包括HindIII和 BamHI的接头，扩增抗白叶枯病水稻IRBB14的基因组。PCR反应体系总体积50μl：1μl DNA，10×buffer 5μl，10mMdNTPs 5μl，10μM引物各1μl，高保真Taq酶0.5μl；灭菌的双蒸水37.5μl；反应条件：94℃2min，94℃15s，58℃30s，72℃7min，共30个循环；产物用TAE胶分离，过回收柱纯化。所得序列包括Xa14上游2000bp的启动子、5724bp的基因组序列和下游的460bp的3'非编码区。用限制性内切酶 HindIII和BamHI组合酶切，酶切体系总体积50μl：PCR产物约15μl，10×反应buffer 5μl，酶各2μl，混匀后37℃酶切过夜，试剂盒纯化回收所需片段。pCAMBIA1301载体酶切体系同上，试剂盒纯化回收。连接反应：基因组片段3.8μl，载体0.5μl，T4ligase 0.2μl，10×反应buffer 0.5μl，4℃，连接过夜；连接产物与大肠杆菌DH10B混匀，电转化后涂布于含卡那霉素的LB平板，37℃，过夜培养。挑单克隆，扩大培养，抽质粒，酶切验证。把构建好的载体电转化农杆菌EHA105，抽质粒，PCR验证正确，加入等体积的50％的甘油混匀，置于-70℃冰箱保存。

2.遗传转化水稻和T₀代基因型检测

采用农杆菌EHA105介导的遗传转化方法(Lin和Zhang，2005)将上述Xa14基因组转化载体(D261O) 转入感病水稻品种IR24中。具体的操作步骤在上述参考方法的基础上改良如下：

(1)诱导愈伤组织：将水稻品种IR24的成熟种子去壳后，用0.15％的氯化汞浸泡消毒20分钟，每隔 5分钟剧烈震荡一次。之后在无菌操作台上用灭菌蒸馏水清洗种子5次。将种子放置在诱导培养基上(成分见后)，置于暗室培养一个月，培养温度为25±1℃。

(2)愈伤组织继代：在无菌操作台上挑取亮黄色、质地紧密且干燥的愈伤组织，放置在继代培养基上(成分见后)，置于暗室培养两周，培养温度为25±1℃。

(3)愈伤组织预培养：在无菌操作台上挑取亮黄色、质地紧密且干燥的愈伤组织，放置在预培养基上(成分见后)，置于暗室培养两周，培养温度为25±1℃。

(4)农杆菌培养：在带有对应抗性选择的LA培养基上(成分见后)预培养含有D261O载体的农杆菌EHA105(来源于澳大利亚CAMBIA实验室商用菌株)，培养时间为两天，培养温度为28℃；之后将上述农杆菌转移至悬浮培养基(成分见后)，于28℃摇床上培养2-3小时。

(5)农杆菌侵染愈伤组织：调节农杆菌的悬浮液至OD₆₀₀数值为0.8-1.0，将预培养后的愈伤组织在农杆菌悬浮液中浸泡30分钟，之后转移至无菌滤纸上吸干，然后放置在共培养基(成分见后)上于黑暗处培养3天，培养温度为19℃。

(6)愈伤组织选择培养：用灭菌蒸馏水彻底清洗愈伤，之后转移愈伤至无菌滤纸上吸干，将愈伤转移至选择培养基(成分见后)上培养2-3次，每次2周。

(7)愈伤组织分化：将抗性愈伤转移至预分化培养基(成分见后)上于黑暗处培养5-7天，之后转移至分化培养基上(成分见后)，于光照培养室内培养，温度为26℃。

(8)遗传转化苗生根处理：剪去分化得到的遗传转化苗的一部分根，将其转移至生根培养基中，于光照培养室内培养2-3周，温度为26℃。之后将遗传转化苗移栽在土壤中。

遗传转化中所用的培养基组分及其配方如下：

(1)试剂和溶液的缩写

本发明中培养基所用到的植物激素的缩写表示如下：6-BA(6-BenzylaminoPurine，6-苄基氨基嘌呤)； CN(Carbenicillin，羧苄青霉素)；KT(Kinetin，激动素)；NAA(Napthalene acetic acid，萘乙酸)；IAA (Indole-3-acetic acid，吲哚乙酸)；2,4-D(2,4-Dichlorophenoxyacetic acid，2,4-二氯苯氧乙酸)；AS (Acetosringone，乙酰丁香酮)；CH(Casein Enzymatic Hydrolysate，水解酪蛋白)；HN(Hygromycin B，潮霉素)；DMSO(Dimethyl Sulfoxide，二甲基亚砜)；N6max(N6培养基大量成分溶液)；N6mix(N6培养基微量成分溶液)；MSmax(MS基本培养基大量成分溶液)；MSmix(MS基本培养基微量成分溶液)。

(2)主要溶液配方

1)N6培养基大量元素母液[10倍浓缩液(10X)]的配制：

2)N6培养基微量元素母液[100倍浓缩液(100X)]的配制：

3)铁盐(Fe₂EDTA)贮存液(100X)的配制：

准备800ml的去离子水并加热至70℃，加入3.73克的乙二铵四乙酸二钠(Na₂EDTA·2H₂O)，充分溶解后在70℃水浴中保持2小时，最后定容至1000ml。

4)维生素贮存液(100X)的配制：

5)MS基本培养基大量元素母液(10X)的配制：

6)MS基本培养基微量元素母液(100X)的配制：

7)2,4-D贮存液(1mg/ml)的配制：

称取2,4-D 100mg，用1ml 1N氢氧化钾溶解5分钟，然后加10ml蒸馏水溶解完全后定容至100ml。

8)6-BA贮存液(1mg/ml)的配制：

称取6-BA 100mg，用1ml 1N氢氧化钾溶解5分钟，然后加10ml蒸馏水溶解完全后定容至100ml。

9)萘乙酸(NAA)贮存液(1mg/ml)的配制：

称取NAA 100mg，用1ml 1N氢氧化钾溶解5分钟，然后加10ml蒸馏水溶解完全后定容至100ml。

10)吲哚乙酸(IAA)贮存液(1mg/ml)的配制：

称取IAA 100mg，用1ml 1N氢氧化钾溶解5分钟，然后加10ml蒸馏水溶解完全后定容至100ml。

11)葡萄糖贮存液(0.5g/ml)的配制：

称取葡萄糖125g，然后用蒸馏水溶解定容至250ml，灭菌后4℃保存备用。

12)AS贮存液的配制：

称取AS 0.392g，加入DMSO 10ml，溶解后分装至1.5ml离心管内，4℃保存备用。

13)1N氢氧化钾贮存液的配制：

称取氢氧化钾5.6g，用蒸馏水溶解并定容至100ml，室温保存备用。

(3)用于水稻遗传转化的培养基配方

1)诱导培养基

加蒸馏水至900ml，1N氢氧化钾调节pH值到5.9，煮沸并定容至1000ml，分装到50ml三角瓶(25 ml/瓶)，封口灭菌。

2)继代培养基

加蒸馏水至900ml，1N氢氧化钾调节pH值到5.9，煮沸并定容至1000ml，分装到50ml三角瓶 (25ml/瓶)，封口灭菌。

3)预培养基

加蒸馏水至250ml，1N氢氧化钾调节pH值到5.6，封口灭菌。使用前加热溶解并加入5ml葡萄糖贮存液和250μl AS贮存液，分装倒入培养皿中(25ml/皿)。

4)共培养基

加蒸馏水至250ml，1N氢氧化钾调节pH值到5.6，封口灭菌。使用前加热溶解并加入5ml葡萄糖贮存液和250μl AS贮存液，分装倒入培养皿中(25ml/每皿)。

5)悬浮培养基

加蒸馏水至100ml，调节pH值到5.4，分装到两个100ml的三角瓶中，封口灭菌。使用前加入1ml 葡萄糖贮存液和100μl AS贮存液。

6)选择培养基

加蒸馏水至250ml，调节pH值到6.0，封口灭菌。使用前溶解培养基，加入对应抗生素，分装倒入培养皿中(25ml/皿)。

7)预分化培养基

加蒸馏水至250ml，1N氢氧化钾调节pH值到5.9，封口灭菌。使用前溶解培养基，加入对应抗生素，分装倒入培养皿中(25ml/皿)。

8)分化培养基

加蒸馏水至900ml，1N氢氧化钾调节pH值到6.0。煮沸并定容至1000ml，分装到50ml三角瓶(50 ml/瓶)，封口灭菌。

9)生根培养基

加蒸馏水至900ml，1N氢氧化钾调节pH值到5.8。煮沸并定容至1000ml，分装到生根管中(25ml /管)，封口灭菌。

最终获得的遗传转化植株被命名为D261OIR(其中前面部分为遗传转化载体名称，IR代表水稻品种 IR24)。本发明共获得独立转化植株20株。在抽穗期阶段取植株的剑叶，抽提DNA，采用PCR技术检测转化植株中Xa14基因型。结果显示，与对照IR24相比，所有的阳性遗传转化植株中的DNA带型都是杂合的两条带。

3.T₁代遗传转化植株的抗病性分析

为检测Xa14基因遗传转化植株是否对白叶枯病表现出抗性，申请人选取T₀代3株遗传转化植株 (D261OIR-1，D261OIR-3和D261OIR-8)的T₁代家系进行基因型和抗病性分析。在孕穗期接种白叶枯病菌PXO112，接种两周后调查，同时取样抽提DNA，采用PCR技术检测转化植株的基因型。结果显示， T₁代遗传转化家系中，与对照IR24相比，所有携带Xa14基因的阳性植株对白叶枯病菌PXO112的抗性显著增强(P＜0.01)，而转基因阴性植株对白叶枯病菌的抗性没有变化(图7)。这些结果说明，Xa14基因能够显著增强水稻对白叶枯病的抗性。

参考文献

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序列表

<110> 华中农业大学

<120> 水稻抗白叶枯病基因Xa14在改良水稻抗病性中的应用

<141> 2019-05-10

<160> 3

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 6311

<212> DNA

<213> 水稻(Oryza sativa)

<220>

<221> gene

<222> (1)..(6311)

<220>

<221> 3'UTR

<222> (5923)..(6311)

<220>

<221> exon

<222> (1563)..(5922)

<220>

<221> Intron

<222> (914)..(1562)

<220>

<221> exon

<222> (601)..(913)

<220>

<221> Intron

<222> (506)..(600)

<220>

<221> exon

<222> (199)..(505)

<220>

<221> 5'UTR

<222> (1)..(198)

<400> 1

catcagacga ttaatccacg acgaccagga gcgctgcccc gagccacacg cccacacgca 60

ctggtgaatc ttctcctttc cacctagttt tcactctgca gtctcctctc ctagctacta 120

ctctgccttc ccatcctcgc ttgttgcagc cctcttgcac acgccattgg ccacagtcca 180

aggactgctc ctgttccgat ggaggaggtg gaagccggtt tgctggaggg cgggatcagg 240

tggctggcgg agaccatcct ggataacctg gatgccgaca agctggatga gtggattcgc 300

cagattaggc tcgccgctga caccgagaag ctacgggctg agatcgagaa ggtggatggg 360

gtggtcgctg ccgtgaaggg gagggcgatc gggaacaggt cgctggcccg atctctcggc 420

cgtctcaggg ggttgctgta cgacgccgac gatgcggtcg acgagctcga ctacttcagg 480

ctccagcagc aggtcgaggg aggaggtact gtctttgcat atccgtgcca ttttaattaa 540

gtttgcaagc tgcgtgcctg caacaatggc gtcagtttcc aacccatgct tgtgctacag 600

ttattacacg gtttgaggct gaagacacgg ttggagatgg agcagaggac gaaggcgata 660

ttccgatgga caatactgat gtaccggcgg cggctgcggc aggccgcagc agcaagaaac 720

ggtccaaggc atgggaacac tttactcccg tagagttcac tgctgatggg aaggcttcta 780

aagcacggtg caagtactgc cacaaggacc tatgttgcac atctaagaac gggacatcag 840

ctttgcgcaa ccatctcaat gtttgcaaga ggaaacgtgt aacaagtact gaccaaccgg 900

taaatccatc aaggtaatgc taatggagtt ctgaatttag tgtaaatccg ttgaagtgta 960

aatttggccc gttacatctg cttaagatct cattctgtct ctaatcttct aatagccaac 1020

tcatggtcat tttttttcct aatatatagt accggtgatg gtgcaccaaa tgtaattaga 1080

tgcaaggaaa caaaagtgaa caattgtata tatcaaatat aattatatct aaaacatgag 1140

tagtgtatca aatccaattc tttcaaaaat ctactatgca aaattgagtg acaaaatctg 1200

ctgccttttt tttttacaga aagcaaccaa ttaatataag tcaaatataa aaacgctttg 1260

tagtctccaa taaaatagct cattgtttcg tttatactta tgtttataaa tttaaattta 1320

aaacttaatt ttggagttga ttttgtggtt ttcttttcat cctattttat tttacaacat 1380

ttgattttga atagttaaga atgcgtatat aaaaatttta cccataagtt attttttaaa 1440

ttgttaataa atcgtaagga taatcataag tataagtgaa acgattcgct cttcatctac 1500

ttaagattgc gttatattgc tgacctttct aatcgcctaa ccacgatcac atgctcttcc 1560

agtgccggtg agggtgcatc aaatgcaact ggtaattcag taggcagaaa aaggatgaga 1620

atggatggga cttcaacaca ccacgaggca gttagcacgc acccttggaa caaggctgaa 1680

ctttccaaca ggatccaatg catgactcat cagttagaag aggctgtaaa tgaggttatg 1740

aggctatgtc gatcctcaag ttcaaaccag agtcgacagg gtacatcacc ggccacaaat 1800

gcaacaacat cgtcttatct tccggagccc atagtgtatg ggagggctgc agagatggaa 1860

accatcaaac agctgatcat gagcaataga tctaatggca taaccgtcct gccaattgta 1920

ggcaatggag ggataggaaa aaccactttg gcgcaactgg tctgcaaaga tctggtaatt 1980

aaaagtcagt ttaatgttaa gatatgggtg tatgtatctg ataaatttga tgtagttaag 2040

attacaaggc agattttgga tcatgtctcc aaccagagcc acgaaggaat aagcaacctt 2100

gatacgcttc agcaggatct tgaggaacaa atgaaatcta agaagttcct cattgtctta 2160

gatgatgtgt gggaaatccg tacagatgac tggaaaaaac tactggctcc tttaagacct 2220

aatgatcagg tgaattcgtc acaggaagag gcaacaggta atatgataat tttgacaact 2280

cgtatacaga gtattgccaa aagtcttgga acagtacaat caattaagtt agaagctctg 2340

aaagatgacg atatatggtc actatttaaa gtgcatgctt ttggtaatga taaacatgat 2400

agtagtccag gcttacaggt tcttgggaag caaattgcta gcgagctaaa aggcaaccca 2460

ctggcagcaa aaactgtggg ttcactatta ggaacgaatc ttaccatcga tcattgggat 2520

agcattataa agagtgaaga atggaaatcc ctgcaacaag cttatggcat catgcaagcg 2580

ctgaagttga gctatgatca tctatccaac cccttacagc aatgcgtctc ttattgttct 2640

cttttcccca agggttattc tttcagcaaa gcacaactaa tacaaatatg gattgctcaa 2700

ggatttgtgg aagaatccag tgagaagttg gagcagaaag gatggaaata tctagctgag 2760

ttggtaaatt cgggtttcct tcagcaagtt gaaagcacac ggttttcatc agaatatttt 2820

gttatgcacg atcttatgca tgatttagcg caaaaggttt cacaaacaga atatgcaact 2880

atagatggct cagagtgcac agagttagcc ccaagtatac gccatttgtc aatagtaact 2940

gattctgcat accgcaagga gaaatataga aacatatctc gtaatgaggt gtttgagaaa 3000

aggttgatga aagttaagtc aaggagtaag ttgaggtcac tggtattaat tgggcaatat 3060

gattctcatt tttttaaata tttcaaagat gctttcaagg aagcacaaca tctgcgactg 3120

ctgcagatca ctgcaactta tgctgattct gattcatttc tctccagttt ggtaaattct 3180

acacatctcc ggtatctgaa aattgtgacc gaagaatccg gcagaacttt gccccgatct 3240

ctaaggaagt attaccatct tcaagtacta gatattggct atagatttgg aattccccgt 3300

atatctaatg atataaataa tcttctcagc ctgcggcatc ttgttgcata tgatgaagtg 3360

tgttcttcca ttgctaacat tggtaaaatg acctcacttc aggaactagg caattttatt 3420

gttcagaata atttaagtgg ttttgaggtg acacaattga aatccatgaa caagcttgta 3480

caacttagtg tgtctcaact tggaaatgtt agaactcagg aggaggcatg tggggcaaaa 3540

ctgaaagaca aacaacactt agaaaagcta catttgtcct ggaaggatgc atggaatgga 3600

tatgacagtg acgaaagcta tgaagatgaa tacggcagtg atatgaatat agaaacagaa 3660

ggggaggaac tgtcagttgg tgatgccaat ggtgcccaaa gcttacaaca tcacagtaat 3720

ataagctctg aacttgcttc aagtgaggtg ctcgaaggtc ttgaaccaca tcacggcctc 3780

aagtatctac ggatatctgg gtataatgga tctacctccc caacttggct tccttcttca 3840

cttacctgtc tgcaaacact tcatctagaa aaatgtggaa aatggcaaat acttccttta 3900

gaaaggctag ggttacttgt aaagctcgtg ttgatcaaaa tgaggaatgc aacagaactc 3960

tcaatccctt cactggagga gcttgtgtta attgcattgc caagcttgaa cacatgctcc 4020

tgcacttcca tcaggaactt gaactccagt ttaaaggttc tgaaaattaa gaattgccct 4080

gtactgaagg tatttccctt gtttgagatt tgccagaaat ttgaaatcga gcggacgtcg 4140

tcatggttgc cccatcttag caagcttacc atctataatt gtcctctttc ctgtgtgcac 4200

agttctctgc caccttcatc tattacatat tgctatgatt taacattcta cggcagcaag 4260

gtagatttcg ctggatttac ctcccttgag gagttagtga tttcacgatg ccccaagctg 4320

gtgtcgttct tggcgcataa cgacggaaat gatgaacagt cgaatggaag atggctccta 4380

ccgctatcac ttggaaaact tgagattaac tatgttgatt ccctaaaaac gctgcagctc 4440

tgctttccgg ggaacctcac ccgcctgaaa aaactagtag tgttgggaaa ccaaagttta 4500

acatctctgc agctccattc ctgcacagca ctccaagagt tgataattcg aagctgtgag 4560

tcgcttaatt ctctggaagg cttgcaattg ctcggcaatc tcaggttgct gtgtgcacac 4620

agatgcctca gcggccatga agaagatgga atgtgtatcc ttccgcaatc acttgaggaa 4680

attgacatct gggagtactc tcaagaaacg ctgcagccct gctttccagg gaacctcacc 4740

agcttgaaaa aactagtagt acagggaagc caaaagttaa tatctctgca gctgtattcc 4800

tgcacagcac tccaagagtt gatgattgaa agttgtgtgt cgcttaattc tctggaaggc 4860

ctgcaatggc tcgtcaacct caggttgctg cgggcacaca gatgcctcag tggttatgga 4920

gaaaatggaa ggtgtatcct tccacaatca cttgaggaac tttacatcag agagtattct 4980

caagaaacgc tgcagccctg ctttccaggg aacctcacca gcttgaaaaa actagtagta 5040

cagggaagcc aaaagttaat atctctgcag ctgtattcct gcacagcact ccaagagttg 5100

atgattggaa gttgtgtgtc gcttaattct ctggaaggcc tgcaatggct cgtcaacctc 5160

aggttgctgc gggcacacag atgcctcagt ggttatggag aaaatggaag gtgtatcctt 5220

ccacaatcac ttgagggtct ttacatcaga gagtattctc aagaaattct acagccctgc 5280

ttccagacga atctcacttg cttaaaaaga ttagaggtat caggcactgg aagtttcaaa 5340

tctctgaagt tgcaatcatg cactgcactc gaacatttga ggattgaatg gtgtgcgtcg 5400

cttgctacat tagagggctt gcaattcctc catgccctta agcatttgga agtattcaga 5460

tgccctggct tgcctccata tttggggagt ttatcagggc agggctatga gctatgccca 5520

ctactggaaa ggctcgagat cgatgacccc tctatcctta ccacgtcgtt ttgcaagaac 5580

ctcacctctc tccaatacct agagctttgc agtcacggat tggaaatgga aagactaacg 5640

gacgaggaag agagagcgct tcaactcctc acttccctgc aagagctccg atttaactgt 5700

tgctacaatc tcgtagatct tcccacaggg ctccacaacc ttctctccct caagaggttg 5760

gagatctgga attgcgggag catcgcgagg ccgctggaaa agggtctccc accttcgttg 5820

gaagaactgg atatcctcgg ttgtagtaaa gagctagttc agcagtgcag aactctagca 5880

agcaagctga aggtcgaaat taatggggaa tatgtgaact gattactcgg tggcttgtta 5940

ggcgcacctt tttccacctg tccaactggc gtgggctcgt tcaggcgttc aagctgctgt 6000

aaattccatt gccgcaatga cgaccttcag aaccgttaca caatacaaag gacatatgat 6060

ggctagatca actgtcgcag agctagcttt ggttcacctg aaaacataag gccaaacgcg 6120

tggttctttt aatcagaagt atcaaaaatt ggttttggtt tttaacgaaa agatgttaga 6180

aattggtttt aatgtgccag attctgtacc agaattctgt attttgctcc gtaattctgt 6240

gctacgactg atgttgtatt taactgatag caatcgaccg gcaaaaccaa tccgctccaa 6300

tgcattgtca c 6311

<210> 2

<211> 4980

<212> DNA

<213> 水稻(Oryza sativa)

<220>

<221> gene

<222> (1)..(4980)

<220>

<221> CDS

<222> (1)..(4980)

<400> 2

atg gag gag gtg gaa gcc ggt ttg ctg gag ggc ggg atc agg tgg ctg 48

Met Glu Glu Val Glu Ala Gly Leu Leu Glu Gly Gly Ile Arg Trp Leu

1 5 10 15

gcg gag acc atc ctg gat aac ctg gat gcc gac aag ctg gat gag tgg 96

Ala Glu Thr Ile Leu Asp Asn Leu Asp Ala Asp Lys Leu Asp Glu Trp

20 25 30

att cgc cag att agg ctc gcc gct gac acc gag aag cta cgg gct gag 144

Ile Arg Gln Ile Arg Leu Ala Ala Asp Thr Glu Lys Leu Arg Ala Glu

35 40 45

atc gag aag gtg gat ggg gtg gtc gct gcc gtg aag ggg agg gcg atc 192

Ile Glu Lys Val Asp Gly Val Val Ala Ala Val Lys Gly Arg Ala Ile

50 55 60

ggg aac agg tcg ctg gcc cga tct ctc ggc cgt ctc agg ggg ttg ctg 240

Gly Asn Arg Ser Leu Ala Arg Ser Leu Gly Arg Leu Arg Gly Leu Leu

65 70 75 80

tac gac gcc gac gat gcg gtc gac gag ctc gac tac ttc agg ctc cag 288

Tyr Asp Ala Asp Asp Ala Val Asp Glu Leu Asp Tyr Phe Arg Leu Gln

85 90 95

cag cag gtc gag gga gga gtt att aca cgg ttt gag gct gaa gac acg 336

Gln Gln Val Glu Gly Gly Val Ile Thr Arg Phe Glu Ala Glu Asp Thr

100 105 110

gtt gga gat gga gca gag gac gaa ggc gat att ccg atg gac aat act 384

Val Gly Asp Gly Ala Glu Asp Glu Gly Asp Ile Pro Met Asp Asn Thr

115 120 125

gat gta ccg gcg gcg gct gcg gca ggc cgc agc agc aag aaa cgg tcc 432

Asp Val Pro Ala Ala Ala Ala Ala Gly Arg Ser Ser Lys Lys Arg Ser

130 135 140

aag gca tgg gaa cac ttt act ccc gta gag ttc act gct gat ggg aag 480

Lys Ala Trp Glu His Phe Thr Pro Val Glu Phe Thr Ala Asp Gly Lys

145 150 155 160

gct tct aaa gca cgg tgc aag tac tgc cac aag gac cta tgt tgc aca 528

Ala Ser Lys Ala Arg Cys Lys Tyr Cys His Lys Asp Leu Cys Cys Thr

165 170 175

tct aag aac ggg aca tca gct ttg cgc aac cat ctc aat gtt tgc aag 576

Ser Lys Asn Gly Thr Ser Ala Leu Arg Asn His Leu Asn Val Cys Lys

180 185 190

agg aaa cgt gta aca agt act gac caa ccg gta aat cca tca agt gcc 624

Arg Lys Arg Val Thr Ser Thr Asp Gln Pro Val Asn Pro Ser Ser Ala

195 200 205

ggt gag ggt gca tca aat gca act ggt aat tca gta ggc aga aaa agg 672

Gly Glu Gly Ala Ser Asn Ala Thr Gly Asn Ser Val Gly Arg Lys Arg

210 215 220

atg aga atg gat ggg act tca aca cac cac gag gca gtt agc acg cac 720

Met Arg Met Asp Gly Thr Ser Thr His His Glu Ala Val Ser Thr His

225 230 235 240

cct tgg aac aag gct gaa ctt tcc aac agg atc caa tgc atg act cat 768

Pro Trp Asn Lys Ala Glu Leu Ser Asn Arg Ile Gln Cys Met Thr His

245 250 255

cag tta gaa gag gct gta aat gag gtt atg agg cta tgt cga tcc tca 816

Gln Leu Glu Glu Ala Val Asn Glu Val Met Arg Leu Cys Arg Ser Ser

260 265 270

agt tca aac cag agt cga cag ggt aca tca ccg gcc aca aat gca aca 864

Ser Ser Asn Gln Ser Arg Gln Gly Thr Ser Pro Ala Thr Asn Ala Thr

275 280 285

aca tcg tct tat ctt ccg gag ccc ata gtg tat ggg agg gct gca gag 912

Thr Ser Ser Tyr Leu Pro Glu Pro Ile Val Tyr Gly Arg Ala Ala Glu

290 295 300

atg gaa acc atc aaa cag ctg atc atg agc aat aga tct aat ggc ata 960

Met Glu Thr Ile Lys Gln Leu Ile Met Ser Asn Arg Ser Asn Gly Ile

305 310 315 320

acc gtc ctg cca att gta ggc aat gga ggg ata gga aaa acc act ttg 1008

Thr Val Leu Pro Ile Val Gly Asn Gly Gly Ile Gly Lys Thr Thr Leu

325 330 335

gcg caa ctg gtc tgc aaa gat ctg gta att aaa agt cag ttt aat gtt 1056

Ala Gln Leu Val Cys Lys Asp Leu Val Ile Lys Ser Gln Phe Asn Val

340 345 350

aag ata tgg gtg tat gta tct gat aaa ttt gat gta gtt aag att aca 1104

Lys Ile Trp Val Tyr Val Ser Asp Lys Phe Asp Val Val Lys Ile Thr

355 360 365

agg cag att ttg gat cat gtc tcc aac cag agc cac gaa gga ata agc 1152

Arg Gln Ile Leu Asp His Val Ser Asn Gln Ser His Glu Gly Ile Ser

370 375 380

aac ctt gat acg ctt cag cag gat ctt gag gaa caa atg aaa tct aag 1200

Asn Leu Asp Thr Leu Gln Gln Asp Leu Glu Glu Gln Met Lys Ser Lys

385 390 395 400

aag ttc ctc att gtc tta gat gat gtg tgg gaa atc cgt aca gat gac 1248

Lys Phe Leu Ile Val Leu Asp Asp Val Trp Glu Ile Arg Thr Asp Asp

405 410 415

tgg aaa aaa cta ctg gct cct tta aga cct aat gat cag gtg aat tcg 1296

Trp Lys Lys Leu Leu Ala Pro Leu Arg Pro Asn Asp Gln Val Asn Ser

420 425 430

tca cag gaa gag gca aca ggt aat atg ata att ttg aca act cgt ata 1344

Ser Gln Glu Glu Ala Thr Gly Asn Met Ile Ile Leu Thr Thr Arg Ile

435 440 445

cag agt att gcc aaa agt ctt gga aca gta caa tca att aag tta gaa 1392

Gln Ser Ile Ala Lys Ser Leu Gly Thr Val Gln Ser Ile Lys Leu Glu

450 455 460

gct ctg aaa gat gac gat ata tgg tca cta ttt aaa gtg cat gct ttt 1440

Ala Leu Lys Asp Asp Asp Ile Trp Ser Leu Phe Lys Val His Ala Phe

465 470 475 480

ggt aat gat aaa cat gat agt agt cca ggc tta cag gtt ctt ggg aag 1488

Gly Asn Asp Lys His Asp Ser Ser Pro Gly Leu Gln Val Leu Gly Lys

485 490 495

caa att gct agc gag cta aaa ggc aac cca ctg gca gca aaa act gtg 1536

Gln Ile Ala Ser Glu Leu Lys Gly Asn Pro Leu Ala Ala Lys Thr Val

500 505 510

ggt tca cta tta gga acg aat ctt acc atc gat cat tgg gat agc att 1584

Gly Ser Leu Leu Gly Thr Asn Leu Thr Ile Asp His Trp Asp Ser Ile

515 520 525

ata aag agt gaa gaa tgg aaa tcc ctg caa caa gct tat ggc atc atg 1632

Ile Lys Ser Glu Glu Trp Lys Ser Leu Gln Gln Ala Tyr Gly Ile Met

530 535 540

caa gcg ctg aag ttg agc tat gat cat cta tcc aac ccc tta cag caa 1680

Gln Ala Leu Lys Leu Ser Tyr Asp His Leu Ser Asn Pro Leu Gln Gln

545 550 555 560

tgc gtc tct tat tgt tct ctt ttc ccc aag ggt tat tct ttc agc aaa 1728

Cys Val Ser Tyr Cys Ser Leu Phe Pro Lys Gly Tyr Ser Phe Ser Lys

565 570 575

gca caa cta ata caa ata tgg att gct caa gga ttt gtg gaa gaa tcc 1776

Ala Gln Leu Ile Gln Ile Trp Ile Ala Gln Gly Phe Val Glu Glu Ser

580 585 590

agt gag aag ttg gag cag aaa gga tgg aaa tat cta gct gag ttg gta 1824

Ser Glu Lys Leu Glu Gln Lys Gly Trp Lys Tyr Leu Ala Glu Leu Val

595 600 605

aat tcg ggt ttc ctt cag caa gtt gaa agc aca cgg ttt tca tca gaa 1872

Asn Ser Gly Phe Leu Gln Gln Val Glu Ser Thr Arg Phe Ser Ser Glu

610 615 620

tat ttt gtt atg cac gat ctt atg cat gat tta gcg caa aag gtt tca 1920

Tyr Phe Val Met His Asp Leu Met His Asp Leu Ala Gln Lys Val Ser

625 630 635 640

caa aca gaa tat gca act ata gat ggc tca gag tgc aca gag tta gcc 1968

Gln Thr Glu Tyr Ala Thr Ile Asp Gly Ser Glu Cys Thr Glu Leu Ala

645 650 655

cca agt ata cgc cat ttg tca ata gta act gat tct gca tac cgc aag 2016

Pro Ser Ile Arg His Leu Ser Ile Val Thr Asp Ser Ala Tyr Arg Lys

660 665 670

gag aaa tat aga aac ata tct cgt aat gag gtg ttt gag aaa agg ttg 2064

Glu Lys Tyr Arg Asn Ile Ser Arg Asn Glu Val Phe Glu Lys Arg Leu

675 680 685

atg aaa gtt aag tca agg agt aag ttg agg tca ctg gta tta att ggg 2112

Met Lys Val Lys Ser Arg Ser Lys Leu Arg Ser Leu Val Leu Ile Gly

690 695 700

caa tat gat tct cat ttt ttt aaa tat ttc aaa gat gct ttc aag gaa 2160

Gln Tyr Asp Ser His Phe Phe Lys Tyr Phe Lys Asp Ala Phe Lys Glu

705 710 715 720

gca caa cat ctg cga ctg ctg cag atc act gca act tat gct gat tct 2208

Ala Gln His Leu Arg Leu Leu Gln Ile Thr Ala Thr Tyr Ala Asp Ser

725 730 735

gat tca ttt ctc tcc agt ttg gta aat tct aca cat ctc cgg tat ctg 2256

Asp Ser Phe Leu Ser Ser Leu Val Asn Ser Thr His Leu Arg Tyr Leu

740 745 750

aaa att gtg acc gaa gaa tcc ggc aga act ttg ccc cga tct cta agg 2304

Lys Ile Val Thr Glu Glu Ser Gly Arg Thr Leu Pro Arg Ser Leu Arg

755 760 765

aag tat tac cat ctt caa gta cta gat att ggc tat aga ttt gga att 2352

Lys Tyr Tyr His Leu Gln Val Leu Asp Ile Gly Tyr Arg Phe Gly Ile

770 775 780

ccc cgt ata tct aat gat ata aat aat ctt ctc agc ctg cgg cat ctt 2400

Pro Arg Ile Ser Asn Asp Ile Asn Asn Leu Leu Ser Leu Arg His Leu

785 790 795 800

gtt gca tat gat gaa gtg tgt tct tcc att gct aac att ggt aaa atg 2448

Val Ala Tyr Asp Glu Val Cys Ser Ser Ile Ala Asn Ile Gly Lys Met

805 810 815

acc tca ctt cag gaa cta ggc aat ttt att gtt cag aat aat tta agt 2496

Thr Ser Leu Gln Glu Leu Gly Asn Phe Ile Val Gln Asn Asn Leu Ser

820 825 830

ggt ttt gag gtg aca caa ttg aaa tcc atg aac aag ctt gta caa ctt 2544

Gly Phe Glu Val Thr Gln Leu Lys Ser Met Asn Lys Leu Val Gln Leu

835 840 845

agt gtg tct caa ctt gga aat gtt aga act cag gag gag gca tgt ggg 2592

Ser Val Ser Gln Leu Gly Asn Val Arg Thr Gln Glu Glu Ala Cys Gly

850 855 860

gca aaa ctg aaa gac aaa caa cac tta gaa aag cta cat ttg tcc tgg 2640

Ala Lys Leu Lys Asp Lys Gln His Leu Glu Lys Leu His Leu Ser Trp

865 870 875 880

aag gat gca tgg aat gga tat gac agt gac gaa agc tat gaa gat gaa 2688

Lys Asp Ala Trp Asn Gly Tyr Asp Ser Asp Glu Ser Tyr Glu Asp Glu

885 890 895

tac ggc agt gat atg aat ata gaa aca gaa ggg gag gaa ctg tca gtt 2736

Tyr Gly Ser Asp Met Asn Ile Glu Thr Glu Gly Glu Glu Leu Ser Val

900 905 910

ggt gat gcc aat ggt gcc caa agc tta caa cat cac agt aat ata agc 2784

Gly Asp Ala Asn Gly Ala Gln Ser Leu Gln His His Ser Asn Ile Ser

915 920 925

tct gaa ctt gct tca agt gag gtg ctc gaa ggt ctt gaa cca cat cac 2832

Ser Glu Leu Ala Ser Ser Glu Val Leu Glu Gly Leu Glu Pro His His

930 935 940

ggc ctc aag tat cta cgg ata tct ggg tat aat gga tct acc tcc cca 2880

Gly Leu Lys Tyr Leu Arg Ile Ser Gly Tyr Asn Gly Ser Thr Ser Pro

945 950 955 960

act tgg ctt cct tct tca ctt acc tgt ctg caa aca ctt cat cta gaa 2928

Thr Trp Leu Pro Ser Ser Leu Thr Cys Leu Gln Thr Leu His Leu Glu

965 970 975

aaa tgt gga aaa tgg caa ata ctt cct tta gaa agg cta ggg tta ctt 2976

Lys Cys Gly Lys Trp Gln Ile Leu Pro Leu Glu Arg Leu Gly Leu Leu

980 985 990

gta aag ctc gtg ttg atc aaa atg agg aat gca aca gaa ctc tca atc 3024

Val Lys Leu Val Leu Ile Lys Met Arg Asn Ala Thr Glu Leu Ser Ile

995 1000 1005

cct tca ctg gag gag ctt gtg tta att gca ttg cca agc ttg aac aca 3072

Pro Ser Leu Glu Glu Leu Val Leu Ile Ala Leu Pro Ser Leu Asn Thr

1010 1015 1020

tgc tcc tgc act tcc atc agg aac ttg aac tcc agt tta aag gtt ctg 3120

Cys Ser Cys Thr Ser Ile Arg Asn Leu Asn Ser Ser Leu Lys Val Leu

1025 1030 1035 1040

aaa att aag aat tgc cct gta ctg aag gta ttt ccc ttg ttt gag att 3168

Lys Ile Lys Asn Cys Pro Val Leu Lys Val Phe Pro Leu Phe Glu Ile

1045 1050 1055

tgc cag aaa ttt gaa atc gag cgg acg tcg tca tgg ttg ccc cat ctt 3216

Cys Gln Lys Phe Glu Ile Glu Arg Thr Ser Ser Trp Leu Pro His Leu

1060 1065 1070

agc aag ctt acc atc tat aat tgt cct ctt tcc tgt gtg cac agt tct 3264

Ser Lys Leu Thr Ile Tyr Asn Cys Pro Leu Ser Cys Val His Ser Ser

1075 1080 1085

ctg cca cct tca tct att aca tat tgc tat gat tta aca ttc tac ggc 3312

Leu Pro Pro Ser Ser Ile Thr Tyr Cys Tyr Asp Leu Thr Phe Tyr Gly

1090 1095 1100

agc aag gta gat ttc gct gga ttt acc tcc ctt gag gag tta gtg att 3360

Ser Lys Val Asp Phe Ala Gly Phe Thr Ser Leu Glu Glu Leu Val Ile

1105 1110 1115 1120

tca cga tgc ccc aag ctg gtg tcg ttc ttg gcg cat aac gac gga aat 3408

Ser Arg Cys Pro Lys Leu Val Ser Phe Leu Ala His Asn Asp Gly Asn

1125 1130 1135

gat gaa cag tcg aat gga aga tgg ctc cta ccg cta tca ctt gga aaa 3456

Asp Glu Gln Ser Asn Gly Arg Trp Leu Leu Pro Leu Ser Leu Gly Lys

1140 1145 1150

ctt gag att aac tat gtt gat tcc cta aaa acg ctg cag ctc tgc ttt 3504

Leu Glu Ile Asn Tyr Val Asp Ser Leu Lys Thr Leu Gln Leu Cys Phe

1155 1160 1165

ccg ggg aac ctc acc cgc ctg aaa aaa cta gta gtg ttg gga aac caa 3552

Pro Gly Asn Leu Thr Arg Leu Lys Lys Leu Val Val Leu Gly Asn Gln

1170 1175 1180

agt tta aca tct ctg cag ctc cat tcc tgc aca gca ctc caa gag ttg 3600

Ser Leu Thr Ser Leu Gln Leu His Ser Cys Thr Ala Leu Gln Glu Leu

1185 1190 1195 1200

ata att cga agc tgt gag tcg ctt aat tct ctg gaa ggc ttg caa ttg 3648

Ile Ile Arg Ser Cys Glu Ser Leu Asn Ser Leu Glu Gly Leu Gln Leu

1205 1210 1215

ctc ggc aat ctc agg ttg ctg tgt gca cac aga tgc ctc agc ggc cat 3696

Leu Gly Asn Leu Arg Leu Leu Cys Ala His Arg Cys Leu Ser Gly His

1220 1225 1230

gaa gaa gat gga atg tgt atc ctt ccg caa tca ctt gag gaa att gac 3744

Glu Glu Asp Gly Met Cys Ile Leu Pro Gln Ser Leu Glu Glu Ile Asp

1235 1240 1245

atc tgg gag tac tct caa gaa acg ctg cag ccc tgc ttt cca ggg aac 3792

Ile Trp Glu Tyr Ser Gln Glu Thr Leu Gln Pro Cys Phe Pro Gly Asn

1250 1255 1260

ctc acc agc ttg aaa aaa cta gta gta cag gga agc caa aag tta ata 3840

Leu Thr Ser Leu Lys Lys Leu Val Val Gln Gly Ser Gln Lys Leu Ile

1265 1270 1275 1280

tct ctg cag ctg tat tcc tgc aca gca ctc caa gag ttg atg att gaa 3888

Ser Leu Gln Leu Tyr Ser Cys Thr Ala Leu Gln Glu Leu Met Ile Glu

1285 1290 1295

agt tgt gtg tcg ctt aat tct ctg gaa ggc ctg caa tgg ctc gtc aac 3936

Ser Cys Val Ser Leu Asn Ser Leu Glu Gly Leu Gln Trp Leu Val Asn

1300 1305 1310

ctc agg ttg ctg cgg gca cac aga tgc ctc agt ggt tat gga gaa aat 3984

Leu Arg Leu Leu Arg Ala His Arg Cys Leu Ser Gly Tyr Gly Glu Asn

1315 1320 1325

gga agg tgt atc ctt cca caa tca ctt gag gaa ctt tac atc aga gag 4032

Gly Arg Cys Ile Leu Pro Gln Ser Leu Glu Glu Leu Tyr Ile Arg Glu

1330 1335 1340

tat tct caa gaa acg ctg cag ccc tgc ttt cca ggg aac ctc acc agc 4080

Tyr Ser Gln Glu Thr Leu Gln Pro Cys Phe Pro Gly Asn Leu Thr Ser

1345 1350 1355 1360

ttg aaa aaa cta gta gta cag gga agc caa aag tta ata tct ctg cag 4128

Leu Lys Lys Leu Val Val Gln Gly Ser Gln Lys Leu Ile Ser Leu Gln

1365 1370 1375

ctg tat tcc tgc aca gca ctc caa gag ttg atg att gga agt tgt gtg 4176

Leu Tyr Ser Cys Thr Ala Leu Gln Glu Leu Met Ile Gly Ser Cys Val

1380 1385 1390

tcg ctt aat tct ctg gaa ggc ctg caa tgg ctc gtc aac ctc agg ttg 4224

Ser Leu Asn Ser Leu Glu Gly Leu Gln Trp Leu Val Asn Leu Arg Leu

1395 1400 1405

ctg cgg gca cac aga tgc ctc agt ggt tat gga gaa aat gga agg tgt 4272

Leu Arg Ala His Arg Cys Leu Ser Gly Tyr Gly Glu Asn Gly Arg Cys

1410 1415 1420

atc ctt cca caa tca ctt gag ggt ctt tac atc aga gag tat tct caa 4320

Ile Leu Pro Gln Ser Leu Glu Gly Leu Tyr Ile Arg Glu Tyr Ser Gln

1425 1430 1435 1440

gaa att cta cag ccc tgc ttc cag acg aat ctc act tgc tta aaa aga 4368

Glu Ile Leu Gln Pro Cys Phe Gln Thr Asn Leu Thr Cys Leu Lys Arg

1445 1450 1455

tta gag gta tca ggc act gga agt ttc aaa tct ctg aag ttg caa tca 4416

Leu Glu Val Ser Gly Thr Gly Ser Phe Lys Ser Leu Lys Leu Gln Ser

1460 1465 1470

tgc act gca ctc gaa cat ttg agg att gaa tgg tgt gcg tcg ctt gct 4464

Cys Thr Ala Leu Glu His Leu Arg Ile Glu Trp Cys Ala Ser Leu Ala

1475 1480 1485

aca tta gag ggc ttg caa ttc ctc cat gcc ctt aag cat ttg gaa gta 4512

Thr Leu Glu Gly Leu Gln Phe Leu His Ala Leu Lys His Leu Glu Val

1490 1495 1500

ttc aga tgc cct ggc ttg cct cca tat ttg ggg agt tta tca ggg cag 4560

Phe Arg Cys Pro Gly Leu Pro Pro Tyr Leu Gly Ser Leu Ser Gly Gln

1505 1510 1515 1520

ggc tat gag cta tgc cca cta ctg gaa agg ctc gag atc gat gac ccc 4608

Gly Tyr Glu Leu Cys Pro Leu Leu Glu Arg Leu Glu Ile Asp Asp Pro

1525 1530 1535

tct atc ctt acc acg tcg ttt tgc aag aac ctc acc tct ctc caa tac 4656

Ser Ile Leu Thr Thr Ser Phe Cys Lys Asn Leu Thr Ser Leu Gln Tyr

1540 1545 1550

cta gag ctt tgc agt cac gga ttg gaa atg gaa aga cta acg gac gag 4704

Leu Glu Leu Cys Ser His Gly Leu Glu Met Glu Arg Leu Thr Asp Glu

1555 1560 1565

gaa gag aga gcg ctt caa ctc ctc act tcc ctg caa gag ctc cga ttt 4752

Glu Glu Arg Ala Leu Gln Leu Leu Thr Ser Leu Gln Glu Leu Arg Phe

1570 1575 1580

aac tgt tgc tac aat ctc gta gat ctt ccc aca ggg ctc cac aac ctt 4800

Asn Cys Cys Tyr Asn Leu Val Asp Leu Pro Thr Gly Leu His Asn Leu

1585 1590 1595 1600

ctc tcc ctc aag agg ttg gag atc tgg aat tgc ggg agc atc gcg agg 4848

Leu Ser Leu Lys Arg Leu Glu Ile Trp Asn Cys Gly Ser Ile Ala Arg

1605 1610 1615

ccg ctg gaa aag ggt ctc cca cct tcg ttg gaa gaa ctg gat atc ctc 4896

Pro Leu Glu Lys Gly Leu Pro Pro Ser Leu Glu Glu Leu Asp Ile Leu

1620 1625 1630

ggt tgt agt aaa gag cta gtt cag cag tgc aga act cta gca agc aag 4944

Gly Cys Ser Lys Glu Leu Val Gln Gln Cys Arg Thr Leu Ala Ser Lys

1635 1640 1645

ctg aag gtc gaa att aat ggg gaa tat gtg aac tga 4980

Leu Lys Val Glu Ile Asn Gly Glu Tyr Val Asn

1650 1655

<210> 3

<211> 1659

<212> PRT

<213> 水稻(Oryza sativa)

<400> 3

Met Glu Glu Val Glu Ala Gly Leu Leu Glu Gly Gly Ile Arg Trp Leu

1 5 10 15

Ala Glu Thr Ile Leu Asp Asn Leu Asp Ala Asp Lys Leu Asp Glu Trp

20 25 30

Ile Arg Gln Ile Arg Leu Ala Ala Asp Thr Glu Lys Leu Arg Ala Glu

35 40 45

Ile Glu Lys Val Asp Gly Val Val Ala Ala Val Lys Gly Arg Ala Ile

50 55 60

Gly Asn Arg Ser Leu Ala Arg Ser Leu Gly Arg Leu Arg Gly Leu Leu

65 70 75 80

Tyr Asp Ala Asp Asp Ala Val Asp Glu Leu Asp Tyr Phe Arg Leu Gln

85 90 95

Gln Gln Val Glu Gly Gly Val Ile Thr Arg Phe Glu Ala Glu Asp Thr

100 105 110

Val Gly Asp Gly Ala Glu Asp Glu Gly Asp Ile Pro Met Asp Asn Thr

115 120 125

Asp Val Pro Ala Ala Ala Ala Ala Gly Arg Ser Ser Lys Lys Arg Ser

130 135 140

Lys Ala Trp Glu His Phe Thr Pro Val Glu Phe Thr Ala Asp Gly Lys

145 150 155 160

Ala Ser Lys Ala Arg Cys Lys Tyr Cys His Lys Asp Leu Cys Cys Thr

165 170 175

Ser Lys Asn Gly Thr Ser Ala Leu Arg Asn His Leu Asn Val Cys Lys

180 185 190

Arg Lys Arg Val Thr Ser Thr Asp Gln Pro Val Asn Pro Ser Ser Ala

195 200 205

Gly Glu Gly Ala Ser Asn Ala Thr Gly Asn Ser Val Gly Arg Lys Arg

210 215 220

Met Arg Met Asp Gly Thr Ser Thr His His Glu Ala Val Ser Thr His

225 230 235 240

Pro Trp Asn Lys Ala Glu Leu Ser Asn Arg Ile Gln Cys Met Thr His

245 250 255

Gln Leu Glu Glu Ala Val Asn Glu Val Met Arg Leu Cys Arg Ser Ser

260 265 270

Ser Ser Asn Gln Ser Arg Gln Gly Thr Ser Pro Ala Thr Asn Ala Thr

275 280 285

Thr Ser Ser Tyr Leu Pro Glu Pro Ile Val Tyr Gly Arg Ala Ala Glu

290 295 300

Met Glu Thr Ile Lys Gln Leu Ile Met Ser Asn Arg Ser Asn Gly Ile

305 310 315 320

Thr Val Leu Pro Ile Val Gly Asn Gly Gly Ile Gly Lys Thr Thr Leu

325 330 335

Ala Gln Leu Val Cys Lys Asp Leu Val Ile Lys Ser Gln Phe Asn Val

340 345 350

Lys Ile Trp Val Tyr Val Ser Asp Lys Phe Asp Val Val Lys Ile Thr

355 360 365

Arg Gln Ile Leu Asp His Val Ser Asn Gln Ser His Glu Gly Ile Ser

370 375 380

Asn Leu Asp Thr Leu Gln Gln Asp Leu Glu Glu Gln Met Lys Ser Lys

385 390 395 400

Lys Phe Leu Ile Val Leu Asp Asp Val Trp Glu Ile Arg Thr Asp Asp

405 410 415

Trp Lys Lys Leu Leu Ala Pro Leu Arg Pro Asn Asp Gln Val Asn Ser

420 425 430

Ser Gln Glu Glu Ala Thr Gly Asn Met Ile Ile Leu Thr Thr Arg Ile

435 440 445

Gln Ser Ile Ala Lys Ser Leu Gly Thr Val Gln Ser Ile Lys Leu Glu

450 455 460

Ala Leu Lys Asp Asp Asp Ile Trp Ser Leu Phe Lys Val His Ala Phe

465 470 475 480

Gly Asn Asp Lys His Asp Ser Ser Pro Gly Leu Gln Val Leu Gly Lys

485 490 495

Gln Ile Ala Ser Glu Leu Lys Gly Asn Pro Leu Ala Ala Lys Thr Val

500 505 510

Gly Ser Leu Leu Gly Thr Asn Leu Thr Ile Asp His Trp Asp Ser Ile

515 520 525

Ile Lys Ser Glu Glu Trp Lys Ser Leu Gln Gln Ala Tyr Gly Ile Met

530 535 540

Gln Ala Leu Lys Leu Ser Tyr Asp His Leu Ser Asn Pro Leu Gln Gln

545 550 555 560

Cys Val Ser Tyr Cys Ser Leu Phe Pro Lys Gly Tyr Ser Phe Ser Lys

565 570 575

Ala Gln Leu Ile Gln Ile Trp Ile Ala Gln Gly Phe Val Glu Glu Ser

580 585 590

Ser Glu Lys Leu Glu Gln Lys Gly Trp Lys Tyr Leu Ala Glu Leu Val

595 600 605

Asn Ser Gly Phe Leu Gln Gln Val Glu Ser Thr Arg Phe Ser Ser Glu

610 615 620

Tyr Phe Val Met His Asp Leu Met His Asp Leu Ala Gln Lys Val Ser

625 630 635 640

Gln Thr Glu Tyr Ala Thr Ile Asp Gly Ser Glu Cys Thr Glu Leu Ala

645 650 655

Pro Ser Ile Arg His Leu Ser Ile Val Thr Asp Ser Ala Tyr Arg Lys

660 665 670

Glu Lys Tyr Arg Asn Ile Ser Arg Asn Glu Val Phe Glu Lys Arg Leu

675 680 685

Met Lys Val Lys Ser Arg Ser Lys Leu Arg Ser Leu Val Leu Ile Gly

690 695 700

Gln Tyr Asp Ser His Phe Phe Lys Tyr Phe Lys Asp Ala Phe Lys Glu

705 710 715 720

Ala Gln His Leu Arg Leu Leu Gln Ile Thr Ala Thr Tyr Ala Asp Ser

725 730 735

Asp Ser Phe Leu Ser Ser Leu Val Asn Ser Thr His Leu Arg Tyr Leu

740 745 750

Lys Ile Val Thr Glu Glu Ser Gly Arg Thr Leu Pro Arg Ser Leu Arg

755 760 765

Lys Tyr Tyr His Leu Gln Val Leu Asp Ile Gly Tyr Arg Phe Gly Ile

770 775 780

Pro Arg Ile Ser Asn Asp Ile Asn Asn Leu Leu Ser Leu Arg His Leu

785 790 795 800

Val Ala Tyr Asp Glu Val Cys Ser Ser Ile Ala Asn Ile Gly Lys Met

805 810 815

Thr Ser Leu Gln Glu Leu Gly Asn Phe Ile Val Gln Asn Asn Leu Ser

820 825 830

Gly Phe Glu Val Thr Gln Leu Lys Ser Met Asn Lys Leu Val Gln Leu

835 840 845

Ser Val Ser Gln Leu Gly Asn Val Arg Thr Gln Glu Glu Ala Cys Gly

850 855 860

Ala Lys Leu Lys Asp Lys Gln His Leu Glu Lys Leu His Leu Ser Trp

865 870 875 880

Lys Asp Ala Trp Asn Gly Tyr Asp Ser Asp Glu Ser Tyr Glu Asp Glu

885 890 895

Tyr Gly Ser Asp Met Asn Ile Glu Thr Glu Gly Glu Glu Leu Ser Val

900 905 910

Gly Asp Ala Asn Gly Ala Gln Ser Leu Gln His His Ser Asn Ile Ser

915 920 925

Ser Glu Leu Ala Ser Ser Glu Val Leu Glu Gly Leu Glu Pro His His

930 935 940

Gly Leu Lys Tyr Leu Arg Ile Ser Gly Tyr Asn Gly Ser Thr Ser Pro

945 950 955 960

Thr Trp Leu Pro Ser Ser Leu Thr Cys Leu Gln Thr Leu His Leu Glu

965 970 975

Lys Cys Gly Lys Trp Gln Ile Leu Pro Leu Glu Arg Leu Gly Leu Leu

980 985 990

Val Lys Leu Val Leu Ile Lys Met Arg Asn Ala Thr Glu Leu Ser Ile

995 1000 1005

Pro Ser Leu Glu Glu Leu Val Leu Ile Ala Leu Pro Ser Leu Asn Thr

1010 1015 1020

Cys Ser Cys Thr Ser Ile Arg Asn Leu Asn Ser Ser Leu Lys Val Leu

1025 1030 1035 1040

Lys Ile Lys Asn Cys Pro Val Leu Lys Val Phe Pro Leu Phe Glu Ile

1045 1050 1055

Cys Gln Lys Phe Glu Ile Glu Arg Thr Ser Ser Trp Leu Pro His Leu

1060 1065 1070

Ser Lys Leu Thr Ile Tyr Asn Cys Pro Leu Ser Cys Val His Ser Ser

1075 1080 1085

Leu Pro Pro Ser Ser Ile Thr Tyr Cys Tyr Asp Leu Thr Phe Tyr Gly

1090 1095 1100

Ser Lys Val Asp Phe Ala Gly Phe Thr Ser Leu Glu Glu Leu Val Ile

1105 1110 1115 1120

Ser Arg Cys Pro Lys Leu Val Ser Phe Leu Ala His Asn Asp Gly Asn

1125 1130 1135

Asp Glu Gln Ser Asn Gly Arg Trp Leu Leu Pro Leu Ser Leu Gly Lys

1140 1145 1150

Leu Glu Ile Asn Tyr Val Asp Ser Leu Lys Thr Leu Gln Leu Cys Phe

1155 1160 1165

Pro Gly Asn Leu Thr Arg Leu Lys Lys Leu Val Val Leu Gly Asn Gln

1170 1175 1180

Ser Leu Thr Ser Leu Gln Leu His Ser Cys Thr Ala Leu Gln Glu Leu

1185 1190 1195 1200

Ile Ile Arg Ser Cys Glu Ser Leu Asn Ser Leu Glu Gly Leu Gln Leu

1205 1210 1215

Leu Gly Asn Leu Arg Leu Leu Cys Ala His Arg Cys Leu Ser Gly His

1220 1225 1230

Glu Glu Asp Gly Met Cys Ile Leu Pro Gln Ser Leu Glu Glu Ile Asp

1235 1240 1245

Ile Trp Glu Tyr Ser Gln Glu Thr Leu Gln Pro Cys Phe Pro Gly Asn

1250 1255 1260

Leu Thr Ser Leu Lys Lys Leu Val Val Gln Gly Ser Gln Lys Leu Ile

1265 1270 1275 1280

Ser Leu Gln Leu Tyr Ser Cys Thr Ala Leu Gln Glu Leu Met Ile Glu

1285 1290 1295

Ser Cys Val Ser Leu Asn Ser Leu Glu Gly Leu Gln Trp Leu Val Asn

1300 1305 1310

Leu Arg Leu Leu Arg Ala His Arg Cys Leu Ser Gly Tyr Gly Glu Asn

1315 1320 1325

Gly Arg Cys Ile Leu Pro Gln Ser Leu Glu Glu Leu Tyr Ile Arg Glu

1330 1335 1340

Tyr Ser Gln Glu Thr Leu Gln Pro Cys Phe Pro Gly Asn Leu Thr Ser

1345 1350 1355 1360

Leu Lys Lys Leu Val Val Gln Gly Ser Gln Lys Leu Ile Ser Leu Gln

1365 1370 1375

Leu Tyr Ser Cys Thr Ala Leu Gln Glu Leu Met Ile Gly Ser Cys Val

1380 1385 1390

Ser Leu Asn Ser Leu Glu Gly Leu Gln Trp Leu Val Asn Leu Arg Leu

1395 1400 1405

Leu Arg Ala His Arg Cys Leu Ser Gly Tyr Gly Glu Asn Gly Arg Cys

1410 1415 1420

Ile Leu Pro Gln Ser Leu Glu Gly Leu Tyr Ile Arg Glu Tyr Ser Gln

1425 1430 1435 1440

Glu Ile Leu Gln Pro Cys Phe Gln Thr Asn Leu Thr Cys Leu Lys Arg

1445 1450 1455

Leu Glu Val Ser Gly Thr Gly Ser Phe Lys Ser Leu Lys Leu Gln Ser

1460 1465 1470

Cys Thr Ala Leu Glu His Leu Arg Ile Glu Trp Cys Ala Ser Leu Ala

1475 1480 1485

Thr Leu Glu Gly Leu Gln Phe Leu His Ala Leu Lys His Leu Glu Val

1490 1495 1500

Phe Arg Cys Pro Gly Leu Pro Pro Tyr Leu Gly Ser Leu Ser Gly Gln

1505 1510 1515 1520

Gly Tyr Glu Leu Cys Pro Leu Leu Glu Arg Leu Glu Ile Asp Asp Pro

1525 1530 1535

Ser Ile Leu Thr Thr Ser Phe Cys Lys Asn Leu Thr Ser Leu Gln Tyr

1540 1545 1550

Leu Glu Leu Cys Ser His Gly Leu Glu Met Glu Arg Leu Thr Asp Glu

1555 1560 1565

Glu Glu Arg Ala Leu Gln Leu Leu Thr Ser Leu Gln Glu Leu Arg Phe

1570 1575 1580

Asn Cys Cys Tyr Asn Leu Val Asp Leu Pro Thr Gly Leu His Asn Leu

1585 1590 1595 1600

Leu Ser Leu Lys Arg Leu Glu Ile Trp Asn Cys Gly Ser Ile Ala Arg

1605 1610 1615

Pro Leu Glu Lys Gly Leu Pro Pro Ser Leu Glu Glu Leu Asp Ile Leu

1620 1625 1630

Gly Cys Ser Lys Glu Leu Val Gln Gln Cys Arg Thr Leu Ala Ser Lys

1635 1640 1645

Leu Lys Val Glu Ile Asn Gly Glu Tyr Val Asn

1650 1655

Claims

1.Xa14基因在改良水稻对白叶枯病抗性中的应用，其特征在于，所述的Xa14基因的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示。

2.Xa14基因在改良水稻对白叶枯病抗性中的应用，其特征在于，所述的Xa14基因编码的蛋白质序列如序列表SEQ ID NO：3所示。