CN111264302A - 一种食用菌生长促进剂及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

一种食用菌生长促进剂及其制备方法和应用，以木醋液为原料，静置一段时间，取木醋液上清液，用乙酸乙酯进行萃取，合并乙酸乙酯萃取液，减压浓缩，得到乙酸乙酯萃取液，再与沸石粉混合均匀，过筛，制得所述的食用菌生长促进剂。本发明所述的食用菌生长促进剂，采用乙酸乙酯萃取法可以有效分离木醋液生长促进因子和生长抑制因子，乙酸乙酯萃取液能够促进菌丝体生长和提高子实体产量，采用拌入培养料（基）的形式施用，价格低廉、添加量少、安全无公害，能够促进菌丝体生长，增加子实体产量。

Description

一种食用菌生长促进剂及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于食用菌栽培技术领域，具体涉及一种食用菌生长促进剂及其制备方法和应用。

背景技术

随着人民生活水平提高，对健康食品的要求越来越高，加之当今人们各种疾病率逐年增加，素有“山中之珍”的食用菌营养丰富、绿色有机、味道鲜美，能预防和治疗多种疾病，兼具食用和药疗保健的独特优点，符合当下人们的饮食要求和趋势，具有巨大的市场潜力。

食用菌是一种腐生型真菌，不能利用太阳能进行光合作用，完全依靠栽培基质中的营养物质进行生长发育。食用菌所需的营养物质包括碳源、氮源、矿物元素和生长因子等，其中碳源主要来自木屑、棉籽壳、玉米芯等农林副产品，氮源主要来自于麦麸、米糠、豆粉等各类谷物。随着食用菌栽培种类不断增多，栽培规模不断扩大，导致食用菌原材料价格不断上涨，食用菌生产成本大幅提高。另外，我国食用菌生产还存在着基质利用率低导致生产成本高和生物转化效率低，与国外先进生产技术水平相比差距较大的问题。食用菌增产剂、促进剂或增效剂的研究应用越来越受到人们的重视，也是实现食用菌丰产增效的重要途径。

木醋液是木材、竹材及加工剩余物在碳化或干馏过程中产生的烟气经冷凝回流和再分离得到的有机混合物，具有使用安全、无污染、无残留等优点，已在农业生产上作为植物生长促进剂、土壤改良剂、抗菌剂、杀虫剂、驱避剂、消臭剂、饲料添加剂等。

木醋液具有抑菌性和杀菌性，被广泛地应用于医药领域中。如鲁京兰等以木醋液分别去除酸类、酚类及醛酮类的剩余液，木醋液原液及经柱层析而得的分离液作为试验样品，利用药敏纸片法测定其对葡萄球菌、大肠杆菌、炭疽杆菌以及病蛙分离菌的抑制能力。结果表明：木醋液原液的抑菌效果好于经处理的剩余液和分离液，推测木醋液的抑菌效果是木醋液多种成分的综合效果(木醋液的提取及其抑菌效果.延边大学农学学报,2002年,24(1):30-33)。

多年来，食用菌产业致力于寻找一种既能防治病虫害、又能促进食用菌生长，同时环境友好、价格低廉的增产剂。木醋液作为一种广谱多效、廉价易得的天然绿色产品，近年来得到了业内人士的广泛关注。但是，木醋液对食用菌生长发育的影响，不同的研究得出了不同的结论。如Yoshimura等将滑菇、鳞伞、荷叶离褶伞、杨树菇、平菇等菌丝培养于添加0.001％、0.01％、0.1％和0.2％木醋液的马铃薯葡萄糖营养液内，结果表明：除0.2％木醋液表现抑制荷叶离褶伞生长外，对其它菌丝均表现促进作用(Acceleration effect ofwood vinegar from Quercus crispulaon the mycelial growth of some basidiomycetes.Trans.Mycol.Soc.Japan,1991,32:55-64)；村尾胜将平菇、香菇、粘菌、灵芝、离褶伞、野生柳杉侧耳菇分别培养在添加0.01％、0.1％、0.2％、0.4％、1.0％、3.0％木醋液的琼脂培养基及添加0.1％、0.5％木醋液的锯木屑培养基上，结果表明：锯木屑培养基上仅平菇表现促进作用，琼脂培养基上平菇和粘菌表现促进作用，其它菌类表现抑制或无效果(きのこ菌系の生育に及ぼす木酢液の影響.近畿大學豐崗短期大學紀要,2002,30:1-5)；王稳等通过在金针菇液体培养基中添加不同浓度木醋液，结果表明：低浓度木醋液对金针菇生长有促进作用，高浓度木醋液有抑制作用(木醋液对金针菇液体发酵菌丝体生长的影响.江苏农业科学,2005,3:117-118)。因此，木醋液作为食用菌增产剂的有效性和稳定性有待于进一步提高。

木醋液一般含有3～8％乙酸、0.5％甲酸、1％甲醇、1％甲醛和丙酮、0.1～0.5％愈疮木酚等酚类化合物及近300种其他微量成分。汪子明等利用一级蒸馏、液液萃取、二级蒸馏三者结合方法，即取木醋液一级蒸馏，收集98℃的馏分二级蒸馏，二级蒸馏中收集96℃和97℃的组分；将一级蒸馏后的残余物，用乙酸乙酯萃取三次，合并三次的乙酸乙酯相，为一级提取液，将一级提取液用NaOH水溶液萃取两次，合并两次的水相，此为二级提取液，二级提取液用盐酸酸化至pH到2-6，用乙酸乙酯/正已烷体积比为3/7-7/3进一步纯化二级提取液三次，保留有机相，弃去水相，得到抗氧化、抗菌、抗皮炎和食品级木醋液(一种木醋液多功效组分分离及全利用方法,CN108530288A,2018-09-14)。该发明提高了木醋液的商业价值和经济效益，但在分离和利用中没有注意开发促进食用菌生长发育的木醋液组分。

发明内容

解决的技术问题：本发明提供一种食用菌生长促进剂及其制备方法和应用，使用乙酸乙酯对木醋液进行萃取，得到乙酸乙酯萃取液，再与沸石粉混合均匀，过筛，制得所述的食用菌生长促进剂。采用拌入培养料(基)的形式施用，能够促进菌丝体生长，缩短食用菌栽培周期，增加子实体产量。

技术方案：木醋液上清液的乙酸乙酯萃取液在促进食用菌生长中的应用。

木醋液上清液的乙酸乙酯萃取液在制备食用菌生长促进剂中的应用。

上述食用菌生长促进剂的制备方法为木醋液静置后取木醋液上清液，用乙酸乙酯进行萃取，合并乙酸乙酯萃取液，加入去离子水，减压浓缩，回收乙酸乙酯，得到萃取的木醋液，再与沸石粉混合均匀过筛，得食用菌生长促进剂。

优选的，上述木醋液静置的时间为至少30天。

上述萃取条件为：用1/3～2倍木醋液上清体积的乙酸乙酯萃取3～5次；所述的减压浓缩条件为：将合并的乙酸乙酯萃取液减压浓缩至木醋液原液体积1.5～1/5。

上述萃取的木醋液与沸石粉的质量体积比为(2～8)g:100mL。

上述食用菌为香菇、杏鲍菇、蟹味菇、海鲜菇、金针菇、茶树菇、平菇或秀珍菇。

上述食用菌生长促进剂的应用，采用拌入培养料(基)的形式施用，按质量比计，占培养料(基)干料的1％～5％，培养料(基)的含水量控制在55％～70％。

有益效果：1、本发明的食用菌试验研究证实，木醋液中同时存在生长促进因子与生长抑制因子，这一发现可以解释以往研究之间的矛盾(即木醋液对食用菌生长发育的影响，不同的研究得出了不同的结论)，而且采用乙酸乙酯萃取法可以有效分离生长促进因子和生长抑制因子，乙酸乙酯萃取液能够促进菌丝体生长和提高子实体产量。2、本发明的食用菌生长促进剂由木醋液的乙酸乙酯萃取液和沸石粉组成，沸石粉不仅能够提供食用菌所需的矿物质和微量元素，而且沸石粉具有较强吸附能力，能够有效地控制养分的缓慢释放，延长刺激成分的药效性和持效期，提高培养料(基)的生物转化效率。3、本发明的食用菌生长促进剂采用拌入培养料(基)的形式施用，使用方法十分简便，而且价格低廉、添加量少、安全无公害，能够促进菌丝体生长，缩短食用菌栽培周期，增加子实体产量，在生产上具有应用和推广前景。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，但它们并不是对本发明的限制。

实施例1：食用菌生长促进剂的制备方法

市场购买的木醋液静置至少30天，取上层澄清的木醋液500mL，加入300mL乙酸乙酯进行萃取，重复萃取3次，合并乙酸乙酯萃取液，加入500mL去离子水，减压浓缩，回收乙酸乙酯，得到500mL萃取的木醋液。取120目沸石粉12kg置于拌料机中，加入500mL萃取的木醋液，搅拌均匀，在55℃温度下干燥至含水率为6.0％，过40目筛，出料，即得所述的食用菌生长促进剂。

比较例：利用蒸馏法制备木醋液不同馏分

取实施例1清澄的木醋液100mL进行减压蒸馏，收集沸点低于97℃的馏分、沸点97～100℃的馏分和沸点100～105℃的馏分，分别加去离子水至100mL，得到97℃、100℃和105℃三个馏分木醋液。

实施例2：木醋液对菌丝体生长的影响

以糙皮侧耳为实验菌株，在察氏培养基25℃培养7天，10mL去离子水洗脱后匀浆过40目筛，即得糙皮侧耳菌丝接种物。取120只100mL烧瓶，每只烧瓶分别加入10mL察氏培养基溶液，分为6组，分别加入去离子水及去离子水稀释10倍的实施例1木醋液的上清液和萃取的木醋液，比较例2的97℃、100℃和105℃馏分木醋液各10μL，再加入0.2mL糙皮侧耳菌丝接种物，在25℃暗室培养9天后，过140目筛，在8000rmp下离心两次，每次5分钟，再在50℃下干燥16小时，称重和换算进行比较见下表。结果表明：木醋液的上清液对菌丝生长的影响不如预期，甚至表现出轻度抑制；三个不同馏分的木醋液对菌丝生长有促进作用，蒸馏温度越高，促进作用越明显，推断木醋液上清液中同时存在生长促进因子和生长抑制因子；乙酸乙酯萃取的木醋液对菌丝生长促进作用非常显著，说明可以通过乙酸乙酯萃取分离生长促进因子和生长抑制因子。

处理	菌丝体重量(mg/瓶)	生长速度比较(％)
			去离子水(对照)	25.2	100
木醋液的上清液	23.9	95
			97℃馏分木醋液	25.9	103
100℃馏分木醋液	33.5	133
			105℃馏分木醋液	46.6	185
萃取的木醋液	60.2	239

实施例3：在杏鲍菇生产上的应用

杏鲍菇培养料配方为(干料)：杨木屑25％、玉米芯22％、甘蔗渣12％、麸皮20％、玉米粉9％、豆粕10％、石灰1％、轻钙1％。在培养料中加入2％(w/w)实施例1的食用菌生长促进剂，加水搅拌均匀，调节含水量至65％左右，分装于聚乙烯栽培袋中，每袋装湿料1.35kg。高温高压灭菌，冷却后于无菌接种室内接种，然后运到培养室内培养。待杏鲍菇完成生理成熟后，移至出菇房进行出菇管理。以培养料中不添加食用菌生长促进剂为对照组，杏鲍菇菌丝满袋天数、整个栽培周期和子实体产量见下表。结果表明，食用菌生长促进剂能够缩短杏鲍菇栽培周期，与对照组相比，杏鲍菇单包增产15.1％。

实施例4：在蟹味菇生产上的应用

蟹味菇培养料的配方为(干料)：棉籽壳30％、玉米芯25％、桉木屑15％、麦麸15％、米糖7％、玉米粉3％、豆粕3％、轻钙1％、石灰1％。培养料中加入4％(w/w)实施例1的食用菌生长促进剂，加水搅拌均匀，调节含水量至65％左右，分装于聚乙烯栽培袋中，每袋装湿料1.0kg。高温高压灭菌，冷却后于无菌接种室内接种，然后运到培养室内培养。待蟹味菇完成生理成熟后，移至出菇房进行出菇管理。以培养料中不添加食用菌生长促进剂为对照组，蟹味菇菌丝满袋天数、整个栽培周期和子实体产量见下表。结果表明，食用菌生长促进剂能够缩短蟹味菇栽培周期，与对照组相比，蟹味菇单包增产13.6％。

实施例5：在黄色金针菇生产上的应用

黄色金针菇培养料的配方为(干料)：杨木屑59％、棉籽壳10％、玉米芯10％、麦麸16％、玉米粉3％、轻钙1％、石灰1％。培养料中分别加入1％(w/w)实施例1的食用菌生长促进剂，加水搅拌均匀，调节含水量至65％左右，分装于聚乙烯栽培袋中，每袋装湿料1.0kg。高温高压灭菌，冷却后于无菌接种室内接种，然后运到培养室内培养。待菌丝满袋后，移至出菇房进行出菇管理。以培养料中不添加食用菌生长促进剂为对照组，黄色金针菇菌丝满袋天数、整个栽培周期和子实体产量见下表。结果表明，食用菌生长促进剂能够缩短黄色金针菇栽培周期，与对照组相比，黄色金针菇单包增产14.1％。

实施例6：在香菇生产上的应用

香菇培养料的配方为(干料)：杂木屑80％、麦麸18％、轻钙1％、石灰1％。培养料中加入2％(w/w)实施例1的食用菌生长促进剂，加水搅拌均匀，调节含水量至60％左右，分装于聚乙烯栽培袋中，每支菌棒湿料2.0kg。常压灭菌，冷却后于无菌接种室内接种，然后运到培养室内培养，菌棒表面转成棕褐色时移入大棚进行出菇管理。以培养料中不添加食用菌生长促进剂为对照组，香菇菌丝满袋天数、整个栽培周期和子实体产量见下表。结果表明，食用菌生长促进剂能够缩短香菇栽培周期，与对照组相比，香菇单包增产11.7％。

Claims (8)

1.木醋液上清液的乙酸乙酯萃取液在促进食用菌生长中的应用。

2.木醋液上清液的乙酸乙酯萃取液在制备食用菌生长促进剂中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于所述食用菌生长促进剂的制备方法为木醋液静置后取木醋液上清液，用乙酸乙酯进行萃取，合并乙酸乙酯萃取液，加入去离子水，减压浓缩，回收乙酸乙酯，得到萃取的木醋液，再与沸石粉混合均匀过筛，得食用菌生长促进剂。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于所述木醋液静置的时间为至少30天。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于所述萃取条件为：用1/3～2倍木醋液上清体积的乙酸乙酯萃取3～5次；所述的减压浓缩条件为：将合并的乙酸乙酯萃取液减压浓缩至木醋液原液体积1.5～1/5。

6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于所述萃取的木醋液与沸石粉的质量体积比为（2～8）g:100mL。

7.根据权利要求2所述的应用，其特征在于所述食用菌为香菇、杏鲍菇、蟹味菇、海鲜菇、金针菇、茶树菇、平菇或秀珍菇。

8.权利要求2所述食用菌生长促进剂的应用，其特征在于采用拌入培养料（基）的形式施用，按质量比计，占培养料（基）干料的1%～5%，培养料（基）的含水量控制在55%～70%。