CN111257488A - 一种以液相色谱串联四级杆质谱同时检测血浆中硝酸异山梨醇酯及其代谢产物的方法 - Google Patents

一种以液相色谱串联四级杆质谱同时检测血浆中硝酸异山梨醇酯及其代谢产物的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种以液相色谱串联四级杆质谱同时检测血浆中硝酸异山梨醇酯及其代谢产物的方法。包括如下步骤：血浆样本进行抗凝处理；加入内标品，采用有机试剂进行液液萃取；萃取后转移上清液，将试剂吹干；适量流动相进行复溶，过滤或高速离心后，进样液相色谱串联四级杆质谱仪进行分析；分别以混合标准样本(硝酸异山梨醇酯及其代谢产物5‑单硝酸异山梨醇酯和2‑单硝酸异山梨醇酯)的检测结果作为参比曲线，用常规算法对待测样本的待测物进行定量。本发明可同时准确检测血浆样本中硝酸异山梨醇酯、5‑单硝酸异山梨醇酯和2‑单硝酸异山梨醇酯的浓度。

Description

一种以液相色谱串联四级杆质谱同时检测血浆中硝酸异山梨 醇酯及其代谢产物的方法
技术领域
本发明涉及一种以液相色谱串联四级杆质谱同时检测血浆中硝酸异山梨醇酯及其代谢产物的方法，属于生化检测技术领域。
背景技术
硝酸异山梨醇酯是常用的一种抗心绞痛药，口服后30分钟见效，舌下含服2～3分钟见效。国内外对于血浆样本中硝酸异山梨醇酯(ISDN)、5-单硝酸异山梨醇酯(5-ISMN)和2-单硝酸异山梨醇酯(2-ISMN)的检测，大部分采用液液萃取生物样本，GC-ECD或GC-MS方法进行检测，但硝酸异山梨醇酯存在热不稳定的现象，而GC方法要求化合物热稳定。
近年来由于液相色谱串联四极杆质谱(LC-MS/MS)的高灵敏度和高选择性，已经广泛用于血药浓度的检测，已有LC-MS/MS方法进行检测硝酸异山梨醇酯及其代谢产物的检测，但硝酸异山梨醇酯、5-单硝酸异山梨醇酯和2-单硝酸异山梨醇酯均为难以电离的中性分子，质谱响应不高，而硝酸异山梨醇酯口服有很高的首过效应，2-单硝酸异山梨醇酯为次要代谢产物，所以硝酸异山梨醇酯和2-单硝酸异山梨醇酯在血浆中浓度不高，对检测方法的灵敏度有很高的要求。虽然质谱检测器有很高的选择性，5-单硝酸异山梨醇酯和2-单硝酸异山梨醇酯互为同分异构体，质谱检测的定量离子对相同，需要达到较好的分离度，才不会互相干扰检测，所以建立LC-MS/MS检测方法也具有很高的难度。因此需要提供一种同时检测血浆样本中的硝酸异山梨醇酯、5-单硝酸异山梨醇酯和2-单硝酸异山梨醇酯的LC-MS/MS方法，以期为硝酸异山梨醇酯的药动学研究和生物等效性研究提供一种快速、简便和准确的检测方法。
发明内容
本发明的目的是提供一种可同时准确检测血浆样本中硝酸异山梨醇酯、5-单硝酸异山梨醇酯和2-单硝酸异山梨醇酯的方法。
本发明提供的血浆中硝酸异山梨醇酯、5-硝酸异山梨醇酯和2-硝酸异山梨醇酯的定量检测方法，包括如下步骤：
(1)配制不同浓度的硝酸异山梨醇酯、5-硝酸异山梨醇酯和2-硝酸异山梨醇酯的混合标准溶液；
配制硝酸异山梨醇酯-13C6和5-硝酸异山梨醇酯-13C6的混合内标工作液；
(2)分别向离体空白血浆中加入不同浓度的所述混合标准溶液，配制成一系列浓度的标准曲线样品，所述标准曲线样品中分别加入所述混合内标工作液，经前处理后，分别进行LC-MS/MS检测，分别以相对应的所述标准曲线样品中所述硝酸异山梨醇酯、所述5-硝酸异山梨醇酯和所述2-硝酸异山梨醇酯的浓度作为横坐标，以所述硝酸异山梨醇酯与所述硝酸异山梨醇酯-13C6的色谱峰面积比值、所述5-硝酸异山梨醇酯与所述5-硝酸异山梨醇酯-13C6的色谱峰面积比值和所述2-硝酸异山梨醇酯与所述5-硝酸异山梨醇酯-13C6的色谱峰面积比值作为纵坐标，制作参比曲线；
(3)向待测离体血浆中加入所述混合内标工作液，经前处理后，进行LC-MS/MS检测，得到待测离体血浆中硝酸异山梨醇酯与所述硝酸异山梨醇酯-13C6的色谱峰面积比值、5-硝酸异山梨醇酯与所述5-硝酸异山梨醇酯-13C6的色谱峰面积比值和2-硝酸异山梨醇酯与所述5-硝酸异山梨醇酯-13C6的色谱峰面积比值，根据所述参比曲线，即得到待测离体血浆中硝酸异山梨醇酯、5-硝酸异山梨醇酯和2-硝酸异山梨醇酯的含量；
所述LC-MS/MS检测的条件如下：
液相条件为：
色谱柱：Ultimate XS-C18；
流动相A：乙酸铵水溶液，所述乙酸铵的摩尔浓度为0～1mM，但不为零，优选0.5mM；
流动相B：甲醇；
柱温箱温度：30～50℃，优选40℃；
流速：0.2～0.8mL/min，优选0.3mL/min；
洗脱梯度的程序为：
0～0.50min，流动相A的体积分数为70％；
0.50～3.00min，流动相A的体积分数由70％下降至3％；
3.00～4.00min，流动相A的体积分数由3％上升至5％；
4.00～4.10min，流动相A的体积分数由5％上升至70％；
4.10～6.00min，流动相A的体积分数保持为70％；
质谱条件为：
离子化模式：负离子电喷雾离子化源；
扫描模式：多反应监测检测模式；
电喷雾电压：-4500～-5500eV，优选-5500eV；
离子源温度：300～600℃，优选450℃；
气帘气：20～40psi，优选30psi；
碰撞池气体：4～8psi，优选7psi；
雾化气Gas1：50～90psi，优选55psi；
辅助加热气：50～90psi，优选50psi；
数据采集时间：5～20min。
上述的定量检测方法中，所述前处理的步骤如下：
向血浆样本中加入乙酸乙酯进行萃取，离心后的上清液进行浓缩，采用甲醇水溶液进行复溶，进行所述LC-MS/MS检测。
上述的定量检测方法中，所述LC-MS/MS测定过程中，所述硝酸异山梨醇酯的反应监测离子对为m/z 295.3→m/z 59.0；所述5-硝酸异山梨醇酯和所述2-硝酸异山梨醇酯的反应监测离子为对m/z 250.1→m/z 59.0；
所述硝酸异山梨醇酯-13C6的反应监测离子对为m/z 300.9→m/z 59.0，所述5-单硝酸异山梨醇酯-13C6的反应监测离子对为m/z 256.4→m/z 59.0。
上述的定量检测方法中，所述混合标准溶液中，所述硝酸异山梨醇酯、所述5-硝酸异山梨醇酯和所述2-硝酸异山梨醇酯的浓度均为0～10000ng/mL，但不为零；
所述混合内标工作液中，所述硝酸异山梨醇酯-13C6和所述5-硝酸异山梨醇酯-13C6的浓度均为10～50ng/mL。
上述的定量检测方法中，所述血浆可为人血浆或大鼠、比格犬等实验动物血浆。
本发明检测方法具有如下有益效果：
1.液液萃取方法，无基质干扰测定；
2.专属性强，5-单硝酸异山梨醇酯和2-单硝酸异山梨醇酯达到了基线分离，无化合物之间影响测定；
3.灵敏度高：血浆中硝酸异山梨醇酯、5-单硝酸异山梨醇酯和2-单硝酸异山梨醇酯最低定量限分别可达到了1ng/mL、0.1ng/mL、1ng/mL；
4.检测快速，6min可以完成一次样本测定。
附图说明
图1为空白血浆中加入硝酸异山梨酯、5-单硝酸异山梨醇酯、2-单硝酸异山梨醇酯及其相应内标的色谱图。
图2为硝酸异山梨醇酯的标准曲线图。
图3为5-单硝酸异山梨醇酯的标准曲线图。
图4为2-单硝酸异山梨醇酯的标准曲线图。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实验材料与仪器：
硝酸异山梨醇酯，纯度98％；5-单硝酸异山梨醇酯，纯度>98％；2-单硝酸异山梨醇酯，纯度95％；甲醇、乙酸乙酯、乙酸铵均为色谱纯，Fisher scientific；离心机：3-18KS型离心机，Sigma供应商；色谱仪：LC-30AD液相色谱系统，日本岛津公司。质谱仪：TRIPLE QUAD5500型三重四级杆质谱仪，配有电喷雾离子化源(ESI)，加拿大Sciex公司；数据采集处理系统：Analyst(version 1.6.3)系统，加拿大Sciex公司。冷冻离心浓缩仪Centrivap，LABCONCO公司；离心机：白洋BY-600C低俗平衡离心机，北京白洋医疗器械有限公司；涡旋混合仪。
实施例1、人血浆中硝酸异山梨醇酯、5-单硝酸异山梨醇酯和2-单硝酸异山梨醇酯的测定
1、硝酸异山梨醇酯(ISDN)、5-硝酸异山梨醇酯(5-ISMN)、2-硝酸异山梨醇酯(2-ISMN)标准溶液的配制
精密称取ISDN标准品少量，适量甲醇溶解配制成1mg/mL ISDN储备液。精密称取5-ISMN标准品少量，适量甲醇溶解配制成1mg/mL 5-ISMN储备液。精密称取2-ISMN标准品少量，适量甲醇溶解配制成1mg/mL 2-ISMN储备液。
精密吸取适量储备液，用50％甲醇水溶液依次稀释，配制成ISDN浓度分别为20、40、100、200、500、700、900、1000ng/mL，2-ISMN浓度分别为20、40、100、200、500、700、900、1000ng/mL，5-ISMN浓度分别为80、160、400、800、2000、2800、3600、4000ng/mL的混合标准溶液，放于2～8℃冰箱备用；
相同的配制方法配制质控工作溶液，ISDN浓度为60、150、800ng/mL，2-ISMN浓度为60、150、800ng/mL，5-ISMN浓度为240、600、3200ng/mL。
2、内标工作液的配制
精密称取适量同位素内标硝酸异山梨醇酯-13C6(ISDN-13C6)，适量甲醇溶解成mg/mL ISDN-13C6储备液，精密称取适量同位素内标5-单硝酸异山梨醇酯-13C6(5-ISMN-13C6)，适量甲醇溶解成1mg/mL 5-单硝酸异山梨醇酯-13C6储备液；移取适量储备液，加入50％甲醇水溶液稀释至5-ISMN-13C6浓度为20ng/mL、ISDN-13C6浓度为20ng/mL的混合内标工作液。
3、血浆样品配制：
取空白血浆950μL，加入50μL标准工作液，配制成ISDN浓度分别为1、2、5、10、20、25、35、45、50ng/mL，2-ISMN浓度分别为1、2、5、10、20、25、35、45、50ng/mL，5-ISMN浓度分别为4、8、10、40、80、100、120、180、200ng/mL的血浆样品，LC-MS/MS分析。
4、样品的处理
取血浆样品200μL，涡旋混匀后加入混合内标工作液50μL和2mL乙酸乙酯，涡旋5min后1200r/min离心6min，转移上清液至离心浓缩仪，60℃挥干溶剂后，用100μL50％甲醇水复溶，LC-MS/MS分析。
5、LC-MS/MS测定过程工作条件
液相条件：
色谱柱：Welth，Ultimate XS-C18(2.1×100mm，3μm)；
流动相A：水(含0.5mM乙酸铵)溶液，流动相B：甲醇；
自动进样器清洗溶液：体积比1:1的甲醇水溶液；
柱温箱温度：40℃；
流速：0.4mL/min；
自动进样器温度：10℃；
自动进样器进样体积：10μL。
流动相洗脱梯度如表1中所示：
表1梯度洗脱程序
时间(min) ％A ％B 流速(mL/min)
0.00 70 30 0.3
0.50 70 30 0.3
3.00 3 95 0.3
4.00 5 95 0.3
4.10 70 30 0.3
6.00 70 30 0.3
质谱条件：
离子化模式：为负离子电喷雾离子化源(ESI)；
扫描模式：多反应监测(MRM)检测模式；
电喷雾电压：-5000eV；
离子源温度：450℃；
气帘气：30psi；
碰撞池气体：7psi；
雾化气Gas1：55psi；
辅助加热气：50psi；
质谱多重反应检测参数如表2所示：
表2质谱多重反应检测参数
Figure BDA0002375752050000061
6、分析结果
2-ISMN和5-ISMN是同分异构体，多反应检测模式使用同一离子通道，2-ISMN和5-ISMN达到基线分离，ISDN、2-ISMN和5-ISMN色谱上均无基质干扰，如图1所示(血浆样本中硝酸异山梨酯、5-单硝酸异山梨醇酯、2-单硝酸异山梨醇酯及其相应内标的色谱图)。
以待测物和同位素内标物的色谱峰面积比为纵坐标，用加权(W＝1/X2)最小二乘法以血浆中待测物的浓度(X)与峰面积比(Y)进行线性回归。
所得的ISDN标准曲线Y＝0.231X-0.00354，相关系数R＝0.9977(如图2和表3所示)，结果表明ISDN在1～50ng/mL范围内线性良好；5-ISMN标准曲线Y＝0.352X+0.231，相关系数R＝0.9976(如图3和表3所示)，结果表明ISDN在4～200ng/mL范围内线性良好；2-ISMN标准曲线Y＝0.0693X+0.0491，相关系数R＝0.9958(如图4和表3所示)，说明2-ISMN在1～50ng/mL范围内线性良好。LLOQ的信噪比都大于20，满足定量要求。
表3检测方法线性考察结果
Figure BDA0002375752050000062
回收率通过处理两组样品，一组为处理前加入质控工作液，一组为处理后加入相同浓度水平质控工作液，通过两组同一浓度水平样品LC-MS/MS检测的峰面积比值来计算提取回收率，回收率结果见表4。
表4回收率考察结果
Figure BDA0002375752050000063
Figure BDA0002375752050000071
由表4可以看出，液液萃取前处理方法的回收率稳定，可以满足检测的要求。
以上对本发明实施例所提供的一种同时测定人血浆中硝酸异山梨醇酯、5-单硝酸异山梨醇酯和2-单硝酸异山梨醇酯的方法，进行了详细描述，本文应用了具体个例对本发明实施例的原理和实施方式进行了阐述，尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims (5)

1.一种离体血浆中硝酸异山梨醇酯、5-硝酸异山梨醇酯和2-硝酸异山梨醇酯的定量检测方法，包括如下步骤：
(1)配制不同浓度的硝酸异山梨醇酯、5-硝酸异山梨醇酯和2-硝酸异山梨醇酯的混合标准溶液；
配制硝酸异山梨醇酯-13C6和5-硝酸异山梨醇酯-13C6的混合内标工作液；
(2)分别向离体空白血浆中加入不同浓度的所述混合标准溶液，配制成一系列浓度的标准曲线样品，所述标准曲线样品中分别加入所述混合内标工作液，经前处理后，分别进行LC-MS/MS检测，分别以相对应的所述标准曲线样品中所述硝酸异山梨醇酯、所述5-硝酸异山梨醇酯和所述2-硝酸异山梨醇酯的浓度作为横坐标，以所述硝酸异山梨醇酯与所述硝酸异山梨醇酯-13C6的色谱峰面积比值、所述5-硝酸异山梨醇酯与所述5-硝酸异山梨醇酯-13C6的色谱峰面积比值和所述2-硝酸异山梨醇酯与所述5-硝酸异山梨醇酯-13C6的色谱峰面积比值作为纵坐标，制作参比曲线；
(3)向待测离体血浆中加入所述混合内标工作液，经前处理后，进行LC-MS/MS检测，得到待测离体血浆中硝酸异山梨醇酯与所述硝酸异山梨醇酯-13C6的色谱峰面积比值、5-硝酸异山梨醇酯与所述5-硝酸异山梨醇酯-13C6的色谱峰面积比值和2-硝酸异山梨醇酯与所述5-硝酸异山梨醇酯-13C6的色谱峰面积比值，根据所述参比曲线，即得到待测离体血浆中硝酸异山梨醇酯、5-硝酸异山梨醇酯和2-硝酸异山梨醇酯的含量；
所述LC-MS/MS检测的条件如下：
液相条件为：
色谱柱：Ultimate XS-C18；
流动相A：乙酸铵水溶液，所述乙酸铵的摩尔浓度为0～1mM，但不为零；
流动相B：甲醇；
柱温箱温度：30～50℃；
流速：0.2～0.8mL/min；
洗脱梯度的程序为：
0～0.50min，流动相A的体积分数为70％；
0.50～3.00min，流动相A的体积分数由70％下降至3％；
3.00～4.00min，流动相A的体积分数由3％上升至5％；
4.00～4.10min，流动相A的体积分数由5％上升至70％；
4.10～6.00min，流动相A的体积分数保持为70％；
质谱条件为：
离子化模式：为负离子电喷雾离子化源；
扫描模式：多反应监测检测模式；
电喷雾电压：-4500～-5500eV；
离子源温度：300～600℃；
气帘气：20～40psi；
碰撞池气体：4～8psi；
雾化气：50～90psi；
辅助加热气：50～90psi；
数据采集时间：5～20min。
2.根据权利要求1所述的定量检测方法，其特征在于：所述前处理的步骤如下：
向血浆样本中加入乙酸乙酯进行萃取，离心后的上清液进行浓缩，采用甲醇水溶液进行复溶，进行所述LC-MS/MS检测。
3.根据权利要求1或2所述的定量检测方法，其特征在于：所述LC-MS/MS测定过程中，所述硝酸异山梨醇酯的反应监测离子对为m/z 295.3→m/z 59.0；所述5-硝酸异山梨醇酯和所述2-硝酸异山梨醇酯的反应监测离子为对m/z 250.1→m/z 59.0；
所述硝酸异山梨醇酯-13C6的反应监测离子对为m/z 300.9→m/z 59.0，所述5-单硝酸异山梨醇酯-13C6的反应监测离子对为m/z 256.4→m/z 59.0。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的定量检测方法，其特征在于：所述混合标准溶液中，所述硝酸异山梨醇酯、所述5-硝酸异山梨醇酯和所述2-硝酸异山梨醇酯的浓度均为0～10000ng/mL，但不为零；
所述混合内标工作液中，所述硝酸异山梨醇酯-13C6和所述5-硝酸异山梨醇酯-13C6的浓度均为10～50ng/mL。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的定量检测方法，其特征在于：所述血浆为人血浆或实验动物血浆。
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Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102241687A (zh) * 2011-05-23 2011-11-16 中国人民解放军第四军医大学 抗缺血/再灌注损伤的药物
CN109374767A (zh) * 2018-01-31 2019-02-22 合肥合源药业有限公司 一种检测单硝酸异山梨酯及其组合物中异山梨醇的方法
CN110559269A (zh) * 2019-08-15 2019-12-13 仁和堂药业有限公司 一种单硝酸异山梨酯片剂及其质量检测方法
CN110658281A (zh) * 2019-10-28 2020-01-07 湖南恒兴医药科技有限公司 血浆中硝酸异山梨酯、5-单硝酸异山梨酯和2-单硝酸异山梨酯的检测方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102241687A (zh) * 2011-05-23 2011-11-16 中国人民解放军第四军医大学 抗缺血/再灌注损伤的药物
CN109374767A (zh) * 2018-01-31 2019-02-22 合肥合源药业有限公司 一种检测单硝酸异山梨酯及其组合物中异山梨醇的方法
CN110559269A (zh) * 2019-08-15 2019-12-13 仁和堂药业有限公司 一种单硝酸异山梨酯片剂及其质量检测方法
CN110658281A (zh) * 2019-10-28 2020-01-07 湖南恒兴医药科技有限公司 血浆中硝酸异山梨酯、5-单硝酸异山梨酯和2-单硝酸异山梨酯的检测方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
NOBUYASU MIZUNO ET AL.: "Determination of isosorbide nitrates by high-performance liquid chromatography and their stability in aqueous solution", 《JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY》 *
刘文英: "反相高效液相色谱梯度洗脱测定制剂中的硝酸异山梨酯及其降解产物", 《药学学报》 *
李鹏飞 等: "LC-MS/MS法测定人血浆中单硝酸异山梨酯的浓度", 《药物分析杂志》 *
高永宝 等: "高效液相色谱法检查单硝酸异山梨酯缓释片中的有关物质", 《辽宁大学学报（自然科学版）》 *

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