CN111217787B - 葛根中大豆甙元的提纯方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种提纯大豆甙元的方法，尤其涉及从葛根中提取纯化出高含量、高品质大豆甙元产品的方法。本发明的目的是解决现有从葛根中提取高纯度大豆甙元方法中存在费时、废料、步骤繁琐、成本高的技术问题，提供一种葛根中大豆甙元的提纯方法。该方法包括以下步骤：1)获取葛根提取物；2)配制壳聚糖澄清剂；3)葛根提取物澄清除杂；4)获取大豆甙元粗品；5)获取大豆甙元精品，5‑1)结晶，5‑2)重结晶。

Description

葛根中大豆甙元的提纯方法
技术领域
本发明涉及一种提纯大豆甙元的方法，尤其涉及一种从葛根中提取纯化出高含量、高品质大豆甙元产品的方法。
背景技术
大豆甙元是一种不溶于水的固态物质，属于黄酮类化合物异黄酮的一种，并且被分类为植物雌激素的一种，是一种从植物中提取出来的具有类似雌激素功能的非甾类化合物。研究发现大豆甙元具有微弱的雌激素和微弱的反雌激素作用。
大豆甙元具有扩张血管、增加冠脉流量、降低血压、减慢心律和降低心肌耗氧量以及抗心律失常的作用，并且对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有显著的抑菌作用。大豆甙元还可以有效地防止骨质疏松、防治前列腺癌、降低对酒精的依赖度、增强西药它莫西芬治疗乳腺癌的功效、抑制白血病细胞和黑素瘤细胞的生长等。
目前，对葛根中大豆异黄酮大豆甙元的纯化方法一般是先用吸附树脂纯化，再选用聚酰胺柱、硅胶柱、发酵、酶解等纯化方法，其纯度最高只能达到90％以上，且辅料聚酰胺、硅胶、柱纯化过程中所用的溶剂及酶解和发酵过程中所需的各种生物酶等消耗较多，还比较费时；要想纯度达到98％以上，需要进一步进行碱醇、丙酮等溶剂的纯化，由于用到了碱、丙酮等多数化学药品和溶剂，对产品质量会有一定的影响，并且需要进行中和碱的操作等，步骤繁琐，成本较高，且丙酮是一种易燃、易爆的化药药品，同时具有毒性，不安全。
发明内容
本发明的目的是解决现有从葛根中提取高纯度大豆甙元方法中存在产品纯度较低、费时、废料、步骤繁琐、成本高的技术问题，提供一种葛根中大豆甙元的提纯方法。
为解决上述技术问题，本发明提供的技术解决方案如下：
一种葛根中大豆甙元的提纯方法，其特殊之处在于，包括以下步骤：
1)获取葛根提取物
取干燥、粉碎后的葛根原料，向其中加入乙醇并搅拌、加热，进行提取，将所得提取液抽滤，收集第一滤液，将第一滤液浓缩至无醇，得到葛根提取物；
2)配制壳聚糖澄清剂
向纯化水中加入冰醋酸配制乙酸水溶液，向乙酸水溶液中加入壳聚糖，配制壳聚糖澄清剂；
3)葛根提取物澄清除杂
向步骤1)所得葛根提取物用纯化水稀释后加入步骤2)所得壳聚糖澄清剂并搅拌、加热，进行澄清除杂，抽滤并收集第二滤液，第二滤液为葛根提取物澄清液；
4)获取大豆甙元粗品
将步骤3)所得葛根提取物澄清液加入大孔吸附树脂进行吸附，先用纯化水洗去前杂，再用乙醇解吸至色淡并收集乙醇解吸液，将乙醇解吸液浓缩至无醇、干燥，得大豆甙元粗品；
5)获取大豆甙元精品
5-1)结晶
取步骤4)乙醇解吸得到的大豆甙元粗品，加入N,N-二甲基甲酰胺并搅拌、加热，直至大豆甙元粗品完全溶解，加入活性炭进行脱色，抽滤并收集第三滤液，将其放置进行结晶，抽滤并用浓度≥95％的乙醇对结晶进行搅拌漂洗，得结晶A；
5-2)重结晶
向步骤5-1)所得结晶A中加入N,N-二甲基甲酰胺并搅拌、加热，直至结晶A完全溶解后，将其放置重结晶，抽滤并用浓度≥95％的乙醇对结晶进行搅拌漂洗、干燥，得结晶B，即大豆甙元精品。
进一步地，为了尽可能多地将大豆甙元从葛根原料中提取出来，步骤1)中，提取2-4次，每次1.5h-3h，合并提取所得提取液，每次提取时，乙醇浓度为50％-70％，葛根原料与乙醇的固液质量体积比为1：8-1：12，提取温度为70℃-90℃；
第一滤液浓缩时,真空度为-0.08MPa～-0.06MPa、温度为75℃-85℃。
进一步地，步骤2)中，冰醋酸用量为纯化水体积的2％-4％，壳聚糖澄清剂的质量浓度为0.8％-1.2％。
进一步地，为了获得更好的澄清除杂效果，步骤3)中，稀释葛根提取物的纯化水用量为葛根提取物质量的4-6倍量，壳聚糖澄清剂的体积为葛根原料质量的4％-6％，搅拌时间为15min-30min、加热温度为65℃-75℃。
进一步地，为了使得到的大豆甙元粗品纯度更高，步骤4)中，大孔吸附树脂为大孔吸附树脂AB-8、大孔吸附树脂XDA-6或大孔吸附树脂DM130，大孔吸附树脂与葛根原料的质量比为1：1-1：3，纯化水用量为2-4柱体积，乙醇浓度为60％-80％；
乙醇解吸液浓缩、干燥时，真空度为-0.08MPa～-0.06MPa、温度为75℃-85℃。
进一步地，为了充分溶解乙醇解吸得到的大豆甙元粗品，步骤5-1)中，乙醇解吸得到的大豆甙元粗品与N,N-二甲基甲酰胺的固液质量体积比为1：4-1：6，加热温度为60℃-80℃；
活性炭为320活性炭、767活性炭或KF03活性炭，活性炭用量为大豆甙元粗品质量的5％～12％，脱色温度为60℃-80℃、时间为40min-90min；
结晶温度为20℃-30℃、时间为18h-26h。
进一步地，为了充分溶解结晶A，步骤5-2)中，结晶A与N,N-二甲基甲酰胺的固液质量体积比为1：3-1：5，加热温度为60℃-80℃；
重结晶温度为20℃-30℃、时间为10h-16h。
进一步地，步骤1)中，提取3次，每次2h，合并提取所得提取液，每次提取时，乙醇浓度为60％，葛根原料与乙醇的固液质量体积比为1：10，提取温度为80℃；第一滤液浓缩时,真空度为-0.08MPa～-0.06MPa、温度为80℃；
步骤2)中，冰醋酸用量为纯化水体积的3％，壳聚糖澄清剂的质量浓度为1％；
步骤3)中，稀释葛根提取物的纯化水用量为葛根提取物质量的5倍量，壳聚糖澄清剂的体积为葛根原料质量的5％，搅拌时间为20min、加热温度为70℃；
步骤4)中，大孔吸附树脂为大孔吸附树脂AB-8，大孔吸附树脂与葛根原料的质量比为1：2，纯化水用量为3柱体积，乙醇浓度为70％；乙醇解吸液浓缩、干燥时，真空度为-0.08MPa～-0.06MPa、温度为80℃；
步骤5-1)中，为了使乙醇解吸得到的大豆甙元粗品充分溶解，乙醇解吸得到的大豆甙元粗品与N,N-二甲基甲酰胺的固液质量体积比为1：5，若N,N-二甲基甲酰胺用量过少，则不足以将大豆甙元粗品完全溶解，过多则浪费溶剂，增加成本，加热温度为70℃；活性炭为767活性炭，活性炭用量为大豆甙元粗品质量的10％，脱色温度为70℃、时间为60min；结晶温度为20℃、时间为24h；
步骤5-2)中，为了使结晶A充分溶解，结晶A与N,N-二甲基甲酰胺的固液质量体积比为1：4，N,N-二甲基甲酰胺用量过少则不足以将结晶A完全溶解，过多则浪费溶剂，增加成本，加热温度为70℃；重结晶温度为20℃、时间为12h。
本发明相比现有技术具有的有益效果如下：
1、本发明提出的葛根中大豆甙元的提纯方法是一种应用乙醇、大孔吸附树脂、DMF(N，N-二甲基甲酰胺)溶剂以及活性炭对葛根中的大豆甙元进行提取分离纯化的方法，该方法将现有的步骤繁琐、成本较高的聚酰胺柱、硅胶柱、发酵、酶解等纯化步骤，替换为DMF(N，N-二甲基甲酰胺)溶剂的结晶、重结晶纯化，结晶纯化法相比于柱纯化法、发酵、酶解法等极大程度地节约了纯化时间、降低了操作难度，简单、高效地提取分离纯化出纯品的大豆甙元，同时节约了聚酰胺、硅胶、醇、柱纯化过程中所用的溶剂及酶解和发酵过程中各种生物酶等辅料，大大降低了成本。
2、本发明提出的葛根中大豆甙元的提纯方法，操作简单，产品纯度高，回收率高，适合于工业化生产。
3、本发明提出的葛根中大豆甙元的提纯方法，不再需要现有的碱醇和丙酮等的纯化步骤，就能够得到纯度98％以上的大豆甙元产品，避免了碱等化学药品对大豆甙元产品的影响，进一步简化了纯化操作，同样适用于其他中草药中大豆甙元的提取纯化。
4、本发明提出的葛根中大豆甙元的提纯方法，方便快捷、节约辅料，是一种环保的纯化工艺。
5、本发明提出的葛根中大豆甙元的提纯方法，不再需要现有技术中用到的易燃、易爆且具有毒性的丙酮等溶剂，安全性较好。
附图说明
图1为本发明实施例1所得大豆甙元精品(含量为98.17％)的HPLC色谱图；
图2为图1对应的HPLC色谱检测数据。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步地说明。
实施例1
1)获取葛根提取物
取干燥、粉碎后的葛根原料(大豆甙元含量约0.38％)1kg，向其中加入浓度为60％的乙醇10kg，搅拌、加热，加热温度为80℃，进行提取，提取3次，每次2h，合并提取所得提取液，抽滤，收集第一滤液，将第一滤液在真空度-0.08MPa～-0.06MPa、温度80℃下浓缩至无醇，得到葛根提取物；
2)配制壳聚糖澄清剂
向纯化水中加入纯化水体积3％的冰醋酸配制乙酸水溶液，向乙酸水溶液中加入壳聚糖，配制质量浓度为1％的壳聚糖澄清剂；
3)葛根提取物澄清除杂
向步骤1)所得葛根提取物中加入葛根提取物质量的5倍量的纯化水稀释后加入50mL步骤2)所得壳聚糖澄清剂，搅拌20min、加热温度为70℃，进行澄清除杂，抽滤并收集第二滤液，第二滤液为葛根提取物澄清液；
4)获取大豆甙元粗品
将步骤3)所得葛根提取物澄清液加入0.5kg的大孔吸附树脂AB-8进行吸附，用3柱体积的纯化水洗去前杂，再用浓度为70％的乙醇解吸至色淡并收集乙醇解吸液，将乙醇解吸液在真空度-0.08MPa～-0.06MPa、温度80℃下浓缩至无醇、干燥，得大豆甙元粗品；
5)获取大豆甙元精品
5-1)结晶
取步骤4)乙醇解吸得到的大豆甙元粗品，加入N,N-二甲基甲酰胺并搅拌，加热温度为70℃，大豆甙元粗品与N,N-二甲基甲酰胺的固液质量体积比为1：5，直至大豆甙元粗品完全溶解，加入大豆甙元粗品质量10％的767活性炭进行脱色，脱色温度为70℃、时间为60min，抽滤并收集第三滤液，将其放置进行结晶，结晶温度为20℃、时间为24h，抽滤并用浓度≥95％的乙醇对结晶进行少量多次搅拌漂洗，得结晶A；
5-2)重结晶
向步骤5-1)所得结晶A中加入的N,N-二甲基甲酰胺并搅拌、加热，加热温度为70℃，结晶A与N,N-二甲基甲酰胺的固液质量体积比为1：4，直至结晶A完全溶解后，将其放置重结晶，重结晶温度为20℃、时间为12h，抽滤并用浓度≥95％的乙醇对结晶进行少量多次搅拌漂洗、干燥，得结晶B，即大豆甙元精品。
通过HPLC检测得：大豆甙元粗品中大豆甙元的含量为30.02％，结晶A纯度为92.06％，结晶B纯度为98.17％，结晶B收率为0.24％。
实施例2
1)获取葛根提取物
取干燥、粉碎后的葛根原料(大豆甙元含量约0.38％)1kg，向其中加入浓度为70％的乙醇12kg，搅拌、加热，加热温度为90℃，进行提取，提取4次，每次3h，合并提取所得提取液，抽滤，收集第一滤液，将第一滤液在真空度-0.08MPa～-0.06MPa、温度85℃下浓缩至无醇，得到葛根提取物；
2)配制壳聚糖澄清剂
向纯化水中加入纯化水体积4％的冰醋酸配制乙酸水溶液，向乙酸水溶液中加入壳聚糖，配制质量浓度为1.2％的壳聚糖澄清剂；
3)葛根提取物澄清除杂
向步骤1)所得葛根提取物中加入葛根提取物质量的4倍量的纯化水稀释后加入60mL步骤2)所得壳聚糖澄清剂，搅拌30min、加热温度为75℃，进行澄清除杂，抽滤并收集第二滤液，第二滤液为葛根提取物澄清液；
4)获取大豆甙元粗品
将步骤3)所得葛根提取物澄清液加入1kg的大孔吸附树脂DM130进行吸附，用4柱体积的纯化水洗去前杂，再用浓度为80％的乙醇解吸至色淡并收集乙醇解吸液，将乙醇解吸液在真空度-0.08MPa～-0.06MPa、温度75℃下浓缩至无醇、干燥，得大豆甙元粗品；
5)获取大豆甙元精品
5-1)结晶
取步骤4)乙醇解吸得到的大豆甙元粗品，加入N,N-二甲基甲酰胺并搅拌，加热温度为80℃，大豆甙元粗品与N,N-二甲基甲酰胺的固液质量体积比为1：6，直至大豆甙元粗品完全溶解，加入大豆甙元粗品质量12％的KF03活性炭进行脱色，脱色温度为80℃、时间为90min，抽滤并收集第三滤液，将其放置进行结晶，结晶温度为30℃、时间为26h，抽滤并用浓度≥95％的乙醇对结晶进行少量多次搅拌漂洗，得结晶A；
5-2)重结晶
向步骤5-1)所得结晶A中加入的N,N-二甲基甲酰胺并搅拌、加热，加热温度为80℃，结晶A与N,N-二甲基甲酰胺的固液质量体积比为1：5，直至结晶A完全溶解后，将其放置重结晶，重结晶温度为30℃、时间为16h，抽滤并用浓度≥95％的乙醇对结晶进行少量多次搅拌漂洗、干燥，得结晶B，即大豆甙元精品。
通过HPLC检测得：大豆甙元粗品中大豆甙元的含量为29.32％，结晶A纯度为87.93％，结晶B纯度为98.12％，结晶B收率为0.20％。
实施例3
1)获取葛根提取物
取干燥、粉碎后的葛根原料(大豆甙元含量约0.38％)1kg，向其中加入浓度为60％的乙醇9kg，搅拌、加热，加热温度为75℃，进行提取，提取3次，每次2.5h，合并提取所得提取液，抽滤，收集第一滤液，将第一滤液在真空度-0.08MPa～-0.06MPa、温度80℃下浓缩至无醇，得到葛根提取物；
2)配制壳聚糖澄清剂
向纯化水中加入纯化水体积3％的冰醋酸配制乙酸水溶液，向乙酸水溶液中加入壳聚糖，配制质量浓度为0.9％的壳聚糖澄清剂；
3)葛根提取物澄清除杂
向步骤1)所得葛根提取物中加入葛根提取物质量的6倍量的纯化水稀释后加入45mL步骤2)所得壳聚糖澄清剂，搅拌20min、加热温度为70℃，进行澄清除杂，抽滤并收集第二滤液，第二滤液为葛根提取物澄清液；
4)获取大豆甙元粗品
将步骤3)所得葛根提取物澄清液加入0.6kg的大孔吸附树脂AB-8进行吸附，用3柱体积的纯化水洗去前杂，再用浓度为60％的乙醇解吸至色淡并收集乙醇解吸液，将乙醇解吸液在真空度-0.08MPa～-0.06MPa、温度75℃下浓缩至无醇、干燥，得大豆甙元粗品；
5)获取大豆甙元精品
5-1)结晶
取步骤4)乙醇解吸得到的大豆甙元粗品，加入N,N-二甲基甲酰胺并搅拌，加热温度为65℃，大豆甙元粗品与N,N-二甲基甲酰胺的固液质量体积比为1：5，直至大豆甙元粗品完全溶解，加入大豆甙元粗品质量8％的767活性炭进行脱色，脱色温度为65℃、时间为50min，抽滤并收集第三滤液，将其放置进行结晶，结晶温度为25℃、时间为20h，抽滤并用浓度≥95％的乙醇对结晶进行少量多次搅拌漂洗，得结晶A；
5-2)重结晶
向步骤5-1)所得结晶A中加入的N,N-二甲基甲酰胺并搅拌、加热，加热温度为65℃，结晶A与N,N-二甲基甲酰胺的固液质量体积比为1：4，直至结晶A完全溶解后，将其放置重结晶，重结晶温度为25℃、时间为10h，抽滤并用浓度≥95％的乙醇对结晶进行少量多次搅拌漂洗、干燥，得结晶B，即大豆甙元精品。
通过HPLC检测得：大豆甙元粗品中大豆甙元的含量为29.67％，结晶A纯度为90.42％，结晶B纯度为98.11％，结晶B收率为0.21％。
实施例4
1)获取葛根提取物
取干燥、粉碎后的葛根原料(大豆甙元含量约0.38％)1kg，向其中加入浓度为70％的乙醇11kg，搅拌、加热，加热温度为85℃，进行提取，提取3次，每次2.5h，合并提取所得提取液，抽滤，收集第一滤液，将第一滤液在真空度-0.08MPa～-0.06MPa、温度80℃下浓缩至无醇，得到葛根提取物；
2)配制壳聚糖澄清剂
向纯化水中加入纯化水体积4％的冰醋酸配制乙酸水溶液，向乙酸水溶液中加入壳聚糖，配制质量浓度为1.1％的壳聚糖澄清剂；
3)葛根提取物澄清除杂
向步骤1)所得葛根提取物中加入葛根提取物质量的5倍量的纯化水稀释后加入55mL步骤2)所得壳聚糖澄清剂，搅拌25min、加热温度为75℃，进行澄清除杂，抽滤并收集第二滤液，第二滤液为葛根提取物澄清液；
4)获取大豆甙元粗品
将步骤3)所得葛根提取物澄清液加入0.8kg的大孔吸附树脂AB-8进行吸附，用3柱体积的纯化水洗去前杂，再用浓度为80％的乙醇解吸至色淡并收集乙醇解吸液，将乙醇解吸液在真空度-0.08MPa～-0.06MPa、温度80℃下浓缩至无醇、干燥，得大豆甙元粗品；
5)获取大豆甙元精品
5-1)结晶
取步骤4)乙醇解吸得到的大豆甙元粗品，加入N,N-二甲基甲酰胺并搅拌，加热温度为75℃，大豆甙元粗品与N,N-二甲基甲酰胺的固液质量体积比为1：6，直至大豆甙元粗品完全溶解，加入大豆甙元粗品质量11％的767活性炭进行脱色，脱色温度为75℃、时间为80min，抽滤并收集第三滤液，将其放置进行结晶，结晶温度为25℃、时间为22h，抽滤并用浓度≥95％的乙醇对结晶进行少量多次搅拌漂洗，得结晶A；
5-2)重结晶
向步骤5-1)所得结晶A中加入的N,N-二甲基甲酰胺并搅拌、加热，加热温度为75℃，结晶A与N,N-二甲基甲酰胺的固液质量体积比为1：5，直至结晶A完全溶解后，将其放置重结晶，重结晶温度为25℃、时间为14h，抽滤并用浓度≥95％的乙醇对结晶进行少量多次搅拌漂洗、干燥，得结晶B，即大豆甙元精品。
通过HPLC检测得：大豆甙元粗品中大豆甙元的含量为30.08％，结晶A纯度为90.46％，结晶B纯度为98.02％，结晶B收率为0.23％。
实施例5
1)获取葛根提取物
取干燥、粉碎后的葛根原料(大豆甙元含量约0.38％)1kg，向其中加入浓度为50％的乙醇8kg，搅拌、加热，加热温度为70℃，进行提取，提取2次，每次1.5h，合并提取所得提取液，抽滤，收集第一滤液，将第一滤液在真空度-0.08MPa～-0.06MPa、温度75℃下浓缩至无醇，得到葛根提取物；
2)配制壳聚糖澄清剂
向纯化水中加入纯化水体积2％的冰醋酸配制乙酸水溶液，向乙酸水溶液中加入壳聚糖，配制质量浓度为0.8％的壳聚糖澄清剂；
3)葛根提取物澄清除杂
向步骤1)所得葛根提取物中加入葛根提取物质量的4倍量的纯化水稀释后加入40mL步骤2)所得壳聚糖澄清剂，搅拌15min、加热温度为65℃，进行澄清除杂，抽滤并收集第二滤液，第二滤液为葛根提取物澄清液；
4)获取大豆甙元粗品
将步骤3)所得葛根提取物澄清液加入0.35kg的大孔吸附树脂XDA-6进行吸附，用2柱体积的纯化水洗去前杂，再用浓度为60％的乙醇解吸至色淡并收集乙醇解吸液，将乙醇解吸液在真空度-0.08MPa～-0.06MPa、温度75℃下浓缩至无醇、干燥，得大豆甙元粗品；
5)获取大豆甙元精品
5-1)结晶
取步骤4)乙醇解吸得到的大豆甙元粗品，加入N,N-二甲基甲酰胺并搅拌，加热温度为60℃，大豆甙元粗品与N,N-二甲基甲酰胺的固液质量体积比为1：4，直至大豆甙元粗品完全溶解，加入大豆甙元粗品质量5％的320活性炭进行脱色，脱色温度为70℃、时间为40min，抽滤并收集第三滤液，将其放置进行结晶，结晶温度为20℃、时间为18h，抽滤并用浓度≥95％的乙醇对结晶进行少量多次搅拌漂洗，得结晶A；
5-2)重结晶
向步骤5-1)所得结晶A中加入的N,N-二甲基甲酰胺并搅拌、加热，加热温度为60℃，结晶A与N,N-二甲基甲酰胺的固液质量体积比为1：3，直至结晶A完全溶解后，将其放置重结晶，重结晶温度为20℃、时间为10h，抽滤并用浓度≥95％的乙醇对结晶进行少量多次搅拌漂洗、干燥，得结晶B，即大豆甙元精品。
通过HPLC检测得：大豆甙元粗品中大豆甙元的含量为29.96％，结晶A纯度为89.04％，结晶B纯度为98.06％，结晶B收率为0.22％。
HPLC色谱检测谱图和数据以实施例1为例，图1、图2给出了实施例1所得大豆甙元精品(含量为98.17％)的HPLC色谱图及检测数据。
最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制，对于本领域的普通专业技术人员来说，可以对前述各实施例所记载的具体技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换，而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明所保护技术方案的范围。

Claims (8)

1.一种葛根中大豆甙元的提纯方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)获取葛根提取物
取干燥、粉碎后的葛根原料，向其中加入乙醇并搅拌、加热，进行提取，将所得提取液抽滤，收集第一滤液，将第一滤液浓缩至无醇，得到葛根提取物；
2)配制壳聚糖澄清剂
向纯化水中加入冰醋酸配制乙酸水溶液，向乙酸水溶液中加入壳聚糖，配制壳聚糖澄清剂；
3)葛根提取物澄清除杂
将步骤1)所得葛根提取物用纯化水稀释后加入步骤2)所得壳聚糖澄清剂并搅拌、加热，进行澄清除杂，抽滤并收集第二滤液，第二滤液为葛根提取物澄清液；
4)获取大豆甙元粗品
将步骤3)所得葛根提取物澄清液加入大孔吸附树脂进行吸附，先用纯化水洗去前杂，再用乙醇解吸至色淡并收集乙醇解吸液，将乙醇解吸液浓缩至无醇、干燥，得大豆甙元粗品；
5)获取大豆甙元精品
5-1)结晶
取步骤4)所得大豆甙元粗品，加入N,N-二甲基甲酰胺并搅拌、加热，直至大豆甙元粗品完全溶解，加入活性炭进行脱色，抽滤并收集第三滤液，将其放置进行结晶，抽滤并用浓度≥95％的乙醇对结晶进行搅拌漂洗，得结晶A；
5-2)重结晶
向步骤5-1)所得结晶A中加入N,N-二甲基甲酰胺并搅拌、加热，直至结晶A完全溶解后，将其放置重结晶，抽滤并用浓度≥95％的乙醇对结晶进行搅拌漂洗、干燥，得结晶B，即大豆甙元精品。
2.根据权利要求1所述的葛根中大豆甙元的提纯方法，其特征在于：步骤1)中，提取2-4次，每次1.5h-3h，合并提取所得提取液，每次提取时，乙醇浓度为50％-70％，葛根原料与乙醇的固液质量体积比为1：8-1：12，提取温度为70℃-90℃；
第一滤液浓缩时,真空度为-0.08MPa～-0.06MPa、温度为75℃-85℃。
3.根据权利要求2所述的葛根中大豆甙元的提纯方法，其特征在于：步骤2)中，冰醋酸用量为纯化水体积的2％-4％，壳聚糖澄清剂的质量浓度为0.8％-1.2％。
4.根据权利要求3所述的葛根中大豆甙元的提纯方法，其特征在于：步骤3)中，稀释葛根提取物的纯化水用量为葛根提取物质量的4-6倍量，壳聚糖澄清剂的体积为葛根原料质量的4％-6％，搅拌时间为15min-30min、加热温度为65℃-75℃。
5.根据权利要求4所述的葛根中大豆甙元的提纯方法，其特征在于：步骤4)中，大孔吸附树脂为大孔吸附树脂AB-8、大孔吸附树脂XDA-6或大孔吸附树脂DM130，大孔吸附树脂与葛根原料的质量比为1：1-1：3，纯化水用量为2-4柱体积，乙醇浓度为60％-80％；
乙醇解吸液浓缩、干燥时，真空度为-0.08MPa～-0.06MPa、温度为75℃-85℃。
6.根据权利要求5所述的葛根中大豆甙元的提纯方法，其特征在于：步骤5-1)中，乙醇解吸得到的大豆甙元粗品与N,N-二甲基甲酰胺的固液质量体积比为1：4-1：6，加热温度为60℃-80℃；
活性炭为320活性炭、767活性炭或KF03活性炭，活性炭用量为大豆甙元粗品质量的5％～12％，脱色温度为60℃-80℃、时间为40min-90min；
结晶温度为20℃-30℃、时间为18h-26h。
7.根据权利要求6所述的葛根中大豆甙元的提纯方法，其特征在于：步骤5-2)中，结晶A与N,N-二甲基甲酰胺的固液质量体积比为1：3-1：5，加热温度为60℃-80℃；
重结晶温度为20℃-30℃、时间为10h-16h。
8.根据权利要求7所述的葛根中大豆甙元的提纯方法，其特征在于：
步骤1)中，提取3次，每次2h，合并提取所得提取液，每次提取时，乙醇浓度为60％，葛根原料与乙醇的固液质量体积比为1：10，提取温度为80℃；第一滤液浓缩时,真空度为-0.08MPa～-0.06MPa、温度为80℃；
步骤2)中，冰醋酸用量为纯化水体积的3％，壳聚糖澄清剂的质量浓度为1％；
步骤3)中，稀释葛根提取物的纯化水用量为葛根提取物质量的5倍量，壳聚糖澄清剂的体积为葛根原料质量的5％，搅拌时间为20min、加热温度为70℃；
步骤4)中，大孔吸附树脂为大孔吸附树脂AB-8，大孔吸附树脂与葛根原料的质量比为1：2，纯化水用量为3柱体积，乙醇浓度为70％；乙醇解吸液浓缩、干燥时，真空度为-0.08MPa～-0.06MPa、温度为80℃；
步骤5-1)中，乙醇解吸得到的大豆甙元粗品与N,N-二甲基甲酰胺的固液质量体积比为1：5，加热温度为70℃；活性炭为767活性炭，活性炭用量为大豆甙元粗品质量的10％，脱色温度为70℃、时间为60min；结晶温度为20℃、时间为24h；
步骤5-2)中，结晶A与N,N-二甲基甲酰胺的固液质量体积比为1：4，加热温度为70℃；重结晶温度为20℃、时间为12h。
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