CN111943827B - 一种辅酶q10的提纯方法 - Google Patents

一种辅酶q10的提纯方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种提纯方法，具体涉及一种从辅酶Q10菌体中提取纯化出高品质辅酶Q10的方法。本发明的目的是解决现有辅酶Q10的提纯方法存在有机溶剂使用较多，环境污染大，混合溶剂不易汇兑，工艺路线较长，需要柱层析和皂化，操作繁琐费时，不适合大规模生产，并且皂化时碱会对辅酶Q10产生一定影响的技术问题，提供一种辅酶Q10的提纯方法。该方法包括以下步骤：1)亚临界萃取获取粗提取物；2)甲醇漂洗除杂；3)环己烷溶解、N,N‑二甲基甲酰胺萃取；4)无水乙醇精制。上述方法操作简单，方便快捷，产品纯度高，回收率高，适合于工业化生产。

Description

一种辅酶Q10的提纯方法
技术领域
本发明涉及一种提纯方法，具体涉及一种从辅酶Q10菌体中提取纯化出高品质辅酶Q10的方法。
背景技术
辅酶Q10又称泛醌，是一种存在于自然界的脂溶性醌类化合物，其结构与维生素K、维生素E及质体醌相似。辅酶Q10在人类身体细胞内参与能量制造及活化，是预防动脉硬化最有效的抗氧化成份，能激活人体细胞和细胞能量的营养，具有提高人体免疫力、增强抗氧化性、延缓衰老和增强人体活力等功能，医学上将其广泛用于心血管系统疾病的治疗，此外，辅酶Q10还可广泛应用于食品、膳食补充剂、营养保健品和化妆品等行业。
公开号为CN108863746A的专利“辅酶Q10的提取纯化方法及由其制备的辅酶Q10”，对辅酶Q10提取纯化的方法主要包括利用混合溶剂萃取除杂、吸附剂吸附或结晶脱色、以及柱层析精制步骤。该方法的缺点是：萃取和柱层析中有机溶剂使用较多，环境污染大，萃取时由于需掺混的溶剂极性相近，不利于溶剂的汇兑，需进行柱层析，操作繁琐费时，不适合大规模生产。
公开号为CN104694613A的专利“一种辅酶Q10提取新工艺”，以辅酶Q10发酵液为原料，通过有机溶剂萃取、碱醇皂化、硅胶柱层析、结晶、抽滤、真空干燥步骤得到了辅酶Q10。该方法的缺点是：工艺路线较长，采用了皂化以及柱层析等，操作繁琐、时间长，不适合大规模生产，并且在皂化过程中用到了碱，会对辅酶Q10产生一定的影响。
发明内容
本发明的目的是解决现有辅酶Q10的提纯方法存在有机溶剂使用较多，环境污染大，混合溶剂不易汇兑，工艺路线较长，需要柱层析和皂化，操作繁琐费时，不适合大规模生产，并且皂化时碱会对辅酶Q10产生一定影响的技术问题，提供一种辅酶Q10的提纯方法。
为解决上述技术问题，本发明提供的技术解决方案如下：
一种辅酶Q10的提纯方法，其特殊之处在于，包括以下步骤：
1)获取粗提取物
取干燥的辅酶Q10菌渣投入萃取罐中，将萃取罐内抽至真空状态后，加入萃取剂进行亚临界萃取，萃取结束后，将萃取所得含脂溶性成分的亚临界流体从萃取罐倒入脱溶罐中，进行加热减压蒸发，待溶剂脱除完毕，得到的暗红色油膏状物A为辅酶Q10粗提取物；
2)除杂
向步骤1)所得暗红色油膏状物A中加入甲醇，进行搅拌漂洗以溶解杂质，抽滤，将抽滤所得沉淀真空干燥，得到暗黄色的干燥物B并将其粉碎；
3)初步纯化
将步骤2)所得粉碎后的暗黄色干燥物B用环己烷或石油醚搅拌溶解后，抽滤，再用N,N-二甲基甲酰胺对抽滤所得滤液进行萃取，取萃取后分液所得环己烷相或石油醚相放置结晶，结晶结束后抽滤，将抽滤所得晶体真空干燥，得到暗黄色晶体C；
4)精制
将步骤3)所得暗黄色晶体C用无水乙醇溶解至完全后，放置结晶，结晶结束后抽滤，将抽滤所得晶体用无水乙醇漂洗，然后真空干燥，得到的浅黄色结晶D即为辅酶Q10精品。
进一步地，步骤1)中亚临界萃取操作具体为：
称取干燥的辅酶Q10菌渣投入萃取罐中，将萃取罐内抽至真空度为0.08Mpa-0.1Mpa后，加入正己烷进行亚临界萃取，辅酶Q10菌渣与正己烷的用量比为1kg:1.3L～1kg:1.5L，萃取压力为0.4MPa～0.6MPa，萃取温度为38℃～42℃，萃取2-4次，每次时长30min～60min，萃取结束后。
进一步地，步骤1)中溶剂脱除操作具体为：
将萃取所得含脂溶性成分的亚临界流体从萃取罐倒入脱溶罐中，在压强为-0.08Mpa～-0.05Mpa、温度为48℃～52℃的条件下，进行加热减压蒸发，待溶剂脱除完毕，得到的暗红色油膏状物A为辅酶Q10粗提取物。
进一步地，步骤2)具体为：
向步骤1)所得暗红色油膏状物A中加入8～12倍质量的甲醇，甲醇醇度为95％～100％，在20℃～30℃下搅拌漂洗40min～90min，以溶解杂质，抽滤，重复搅拌漂洗抽滤3～5次后，将所得暗黄色沉淀真空干燥，干燥温度为30℃～42℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，得到暗黄色的干燥物B并将其粉碎。
进一步地，步骤3)中萃取分液操作具体为：
将步骤2)所得粉碎后的暗黄色干燥物B用3～5倍质量的环己烷或石油醚搅拌溶解40min～90min后，抽滤，向抽滤所得滤液中加入0.8～1.2倍质量的N，N-二甲基甲酰胺搅拌20min～40min进行萃取分液，萃取分液2～4次。
进一步地，步骤3)中结晶操作具体为：
取分液所得环己烷相或石油醚相放置结晶，结晶温度为20℃～30℃，结晶时间为22h～26h。
进一步地，步骤3)中真空干燥操作具体为：
结晶结束后抽滤，将抽滤所得晶体真空干燥，干燥温度为30℃～38℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，得到暗黄色晶体C。
进一步地，步骤4)具体为：
将步骤3)所得得到暗黄色晶体C用15～20倍质量的无水乙醇在50℃～70℃下溶解至完全后，在20℃-30℃下放置结晶10h～14h，结晶结束后抽滤，将抽滤所得晶体用无水乙醇漂洗，然后真空干燥，干燥温度为30℃～38℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，得到的浅黄色结晶D即为辅酶Q10精品。
进一步地，1)称取干燥的辅酶Q10菌渣投入萃取罐内，将萃取罐内抽至真空度为0.08Mpa-0.1Mpa后，加入正己烷进行亚临界萃取，辅酶Q10菌渣与正己烷的用量比为1kg:1.4L，萃取压力为0.5MPa，萃取温度为40℃，萃取时长40min，萃取3次，萃取结束后，将萃取所得含脂溶性成分的亚临界流体从萃取罐倒入脱溶罐中，在压强为-0.07Mpa～-0.06Mpa、温度为50℃的条件下，进行加热减压蒸发，待溶剂脱除完毕，得到的暗红色油膏状物A为辅酶Q10粗提取物；
2)向步骤1)所得暗红色油膏状物A中加入10倍质量的甲醇，甲醇醇度为98％，在25℃下搅拌漂洗60min，以溶解杂质，抽滤，重复搅拌漂洗抽滤4次后，将所得暗黄色沉淀真空干燥，干燥温度为40℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，得到暗黄色的干燥物B并将其粉碎；
3)将步骤2)所得粉碎后的暗黄色干燥物B用4倍质量的环己烷或石油醚搅拌溶解60min后，抽滤，向抽滤所得滤液中加入1倍质量的N，N-二甲基甲酰胺(DMF)搅拌30min进行萃取分液，萃取分液3次后，取分液所得环己烷相或石油醚相放置结晶，结晶温度为25℃，结晶时间为24h，结晶结束后抽滤，将抽滤所得晶体真空干燥，干燥温度为35℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，得到暗黄色结晶物C；
4)将步骤3)所得暗黄色晶体C用18倍质量的无水乙醇在60℃下溶解至完全后，在25℃下放置结晶12h，结晶结束后抽滤，将抽滤所得晶体用无水乙醇漂洗，然后真空干燥，干燥温度为35℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，得到的浅黄色结晶D即为辅酶Q10精品。
本发明相比现有技术具有的有益效果如下：
1、本发明提供的辅酶Q10的提纯方法，步骤1)中采用萃取剂正己烷对辅酶Q10菌渣进行亚临界萃取，将萃取所得含脂溶性成分的亚临界流体从萃取罐倒入脱溶罐中脱除溶剂，由于萃取剂正己烷为单一成分，正己烷也容易与辅酶Q10产品分离，并且正己烷沸点低，使得萃取和脱溶均可在较低温度下进行，能够很好地保留辅酶Q10粗提取物中的辅酶Q10成分；步骤2)中，选用几乎不溶解辅酶Q10且沸点较低的甲醇进行除杂，在充分去除杂质的同时，避免了辅酶Q10的损失，也不会影响得到的辅酶Q10性质；步骤3)中，选用低极性的环己烷或石油醚将步骤2)所得产物进行溶解，溶解液用N,N-二甲基甲酰胺进行萃取除杂，环己烷相结晶以初步纯化；步骤4)中，选用高极性的无水乙醇精制(重结晶)。上述方法中，未使用高温，不会影响到辅酶Q10的性质，溶剂选择以不损失辅酶Q10成分为原则，并且用于溶解辅酶Q10的溶剂环己烷和石油醚与无水乙醇极性相差较大，利于去除不同杂质，依次完成各个步骤后，有利于提高产品辅酶Q10的纯度和回收率。上述方法操作简单，方便快捷，产品纯度高，回收率高，适合于工业化生产。
2、本发明提供的辅酶Q10的提纯方法，与超临界萃取法相比，亚临界萃取法使得的所需压强低、设备简单、产能大，可以进行规模化生产。
3、本发明提供的辅酶Q10的提纯方法，简化了现有辅酶Q10的提纯方法，不再需要现有技术中的皂化、柱层析、混合溶剂结晶等纯化步骤，就能够得到纯度98％以上的辅酶Q10产品，还能够避免皂化中碱等化学药品对辅酶Q10产品的影响。
4、本发明提出的辅酶Q10菌渣中辅酶Q10的提纯方法，节约辅料及试剂，是一种较为环保的纯化工艺。
附图说明
图1为本发明实施例1中辅酶Q10菌渣中辅酶Q10的含量谱图；
图2为本发明实施例1所得辅酶Q10精品的含量谱图；
图3为本发明实施例2所得辅酶Q10精品的含量谱图；
图4为本发明实施例3所得辅酶Q10精品的含量谱图；
图5为本发明实施例4所得辅酶Q10精品的含量谱图；
图6为本发明实施例5所得辅酶Q10精品的含量谱图；
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步地说明。
实施例1
1)称取干燥的辅酶Q10菌渣4.5kg(辅酶Q10含量为1.917％)投入萃取罐内，将萃取罐内抽至真空度为0.08Mpa-0.1Mpa后，加入正己烷进行亚临界萃取，辅酶Q10菌渣与正己烷的用量比为1kg:1.4L，萃取压力为0.5MPa，萃取温度为40℃(用循环水加热至40℃)，萃取时长40min，萃取3次，萃取结束后，将萃取所得含脂溶性成分的亚临界流体从萃取罐倒入脱溶罐中，在压强为-0.08Mpa～-0.06Mpa、温度为50℃的条件下，进行加热减压蒸发，待溶剂脱除完毕，得到的暗红色油膏状物A为辅酶Q10粗提取物；
2)向步骤1)所得暗红色油膏状物A中加入10倍质量的甲醇，甲醇醇度为98％，在25℃下搅拌漂洗60min，以溶解杂质，抽滤，重复搅拌漂洗抽滤4次后，将所得暗黄色沉淀真空干燥，干燥温度为35℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，得到暗黄色的干燥物B并将其粉碎；
3)将步骤2)所得粉碎后的暗黄色的干燥物B用4倍质量的环己烷搅拌溶解60min后，抽滤，向抽滤所得滤液中加入1倍质量的N，N-二甲基甲酰胺搅拌30min进行萃取分液，萃取分液3次后，取分液所得环己烷相放置结晶，结晶温度为25℃，结晶时间为24h，结晶结束后抽滤，将抽滤所得晶体真空干燥，干燥温度为35℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，24h后得到暗黄色结晶物C；
4)将步骤3)所得暗黄色晶体C用18倍质量的无水乙醇在60℃下溶解至完全后，在25℃下放置结晶12h，结晶结束后抽滤，将抽滤所得晶体用无水乙醇漂洗，然后真空干燥，干燥温度为35℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，得到78g的浅黄色结晶D即为辅酶Q10精品。
通过HPLC检测得：辅酶Q10菌渣中辅酶Q10的含量为1.917％，具体见表1和图1；辅酶Q10精品的纯度为99.27％，回收率为89.8％，具体见表2和图2。
表1
成分 保留时间/min 峰面积/AU*s 峰高/AU 含量/％
辅酶Q10 8.469 200415 14887 1.917
表2
成分 保留时间/min 峰面积/AU*s 峰高/AU 含量/％
辅酶Q10 8.479 1680717 131990 99.27
实施例2
1)称取干燥的辅酶Q10菌渣4.5kg(辅酶Q10含量为1.917％)投入萃取罐内，将萃取罐内抽至真空度为0.08Mpa-0.1Mpa后，加入正己烷进行亚临界萃取，辅酶Q10菌渣与正己烷的用量比为1kg∶1.4L，萃取压力为0.5MPa，萃取温度为40℃(用循环水加热至40℃)，萃取时长40min，萃取4次，萃取结束后，将萃取所得含脂溶性成分的亚临界流体从萃取罐倒入脱溶罐中，在压强为-0.08Mpa～-0.06Mpa、温度为50℃的条件下，进行加热减压蒸发，待溶剂脱除完毕，得到的暗红色油膏状物A为辅酶Q10粗提取物；
2)向步骤1)所得暗红色油膏状物A中加入10倍质量的甲醇，甲醇醇度为98％，在25℃下搅拌漂洗60min，以溶解杂质，抽滤，重复搅拌漂洗抽滤4次后，将所得暗黄色沉淀真空干燥，干燥温度为35℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，得到暗黄色的干燥物B并将其粉碎；
3)将步骤2)所得粉碎后的暗黄色的干燥物B用5倍质量的环己烷搅拌溶解60min后，抽滤，向抽滤所得滤液中加入1.2倍质量的N，N-二甲基甲酰胺搅拌30min进行萃取分液，萃取分液2次后，取分液所得环己烷相放置结晶，结晶温度为25℃，结晶时间为24h，结晶结束后抽滤，将抽滤所得晶体真空干燥，干燥温度为35℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，26h后得到暗黄色结晶物C；
4)将步骤3)所得暗黄色晶体C用20倍质量的无水乙醇在60℃下溶解至完全后，在25℃下放置结晶10h，结晶结束后抽滤，将抽滤所得晶体用无水乙醇漂洗，然后真空干燥，干燥温度为38℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，得到73g的浅黄色结晶D即为辅酶Q10精品。
通过HPLC检测得：辅酶Q10精品的纯度为98.69％，结晶回收率为83.5％，具体见表3和图3。
表3
成分 保留时间/min 峰面积/AU*s 峰高/AU 含量/％
辅酶Q10 8.492 1945285 150123 98.69
实施例3
1)称取干燥的辅酶Q10菌渣4.5kg(辅酶Q10含量为1.917％)投入萃取罐内，将萃取罐内抽至真空度为0.08Mpa-0.1Mpa后，加入正己烷进行亚临界萃取，辅酶Q10菌渣与正己烷的用量比为1kg∶1.4L，萃取压力为0.5MPa，萃取温度为40℃(用循环水加热至40℃)，萃取时长30min，萃取2次，萃取结束后，将萃取所得含脂溶性成分的亚临界流体从萃取罐倒入脱溶罐中，在压强为-0.08Mpa～-0.06Mpa、温度为50℃的条件下，进行加热减压蒸发，待溶剂脱除完毕，得到的暗红色油膏状物A为辅酶Q10粗提取物；
2)向步骤1)所得暗红色油膏状物A中加入10倍质量的甲醇，甲醇醇度为98％，在25℃下搅拌漂洗60min，以溶解杂质，抽滤，重复搅拌漂洗抽滤3次后，将所得暗黄色沉淀真空干燥，干燥温度为35℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，得到暗黄色的干燥物B并将其粉碎；
3)将步骤2)所得粉碎后的暗黄色的干燥物B用4倍质量的环己烷搅拌溶解40min后，抽滤，向抽滤所得滤液中加入0.8倍质量的N，N-二甲基甲酰胺搅拌30min进行萃取分液，萃取分液2次后，取分液所得环己烷相放置结晶，结晶温度为25℃，结晶时间为24h，结晶结束后抽滤，将抽滤所得晶体真空干燥，干燥温度为35℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，24h后得到暗黄色结晶物C；
4)将步骤3)所得暗黄色晶体C用15倍质量的无水乙醇在60℃下溶解至完全后，在25℃下放置结晶14h，结晶结束后抽滤，将抽滤所得晶体用无水乙醇漂洗，然后真空干燥，干燥温度为35℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，得到76g的浅黄色结晶D即为辅酶Q10精品。
通过HPLC检测得：辅酶Q10精品的纯度为98.06％，结晶回收率为86.4％，具体见表4和图4。
表4
成分 保留时间/min 峰面积/AU*s 峰高/AU 含量/％
辅酶Q10 8.279 2582597 180052 98.06
实施例4
1)称取干燥的辅酶Q10菌渣4.5kg(辅酶Q10含量为1.917％)投入萃取罐内，将萃取罐内抽至真空度为0.08Mpa-0.1Mpa后，加入6.7L正己烷进行亚临界萃取，辅酶Q10菌渣与正己烷的用量比为1kg∶1.3L，萃取压力为0.4MPa，萃取温度为38℃(用循环水加热至40℃)，萃取时长50min，萃取3次，萃取结束后，将萃取所得含脂溶性成分的亚临界流体从萃取罐倒入脱溶罐中，在压强为-0.08Mpa～-0.06Mpa、温度为48℃的条件下，进行加热减压蒸发，待溶剂脱除完毕，得到的暗红色油膏状物A为辅酶Q10粗提取物；
2)向步骤1)所得暗红色油膏状物A中加入12倍质量的甲醇，甲醇醇度为95％，在20℃下搅拌漂洗40min，以溶解杂质，抽滤，重复搅拌漂洗抽滤3次后，将所得暗黄色沉淀真空干燥，干燥温度为30℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，得到暗黄色的干燥物B并将其粉碎；
3)将步骤2)所得粉碎后的暗黄色的干燥物B用3倍质量的石油醚搅拌溶解40min后，抽滤，向抽滤所得滤液中加入0.8倍质量的N，N-二甲基甲酰胺搅拌40min进行萃取分液，萃取分液2次后，取分液所得石油醚相放置结晶，结晶温度为20℃，结晶时间为22h，结晶结束后抽滤，将抽滤所得晶体真空干燥，干燥温度为30℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，24h后得到暗黄色结晶物C；
4)将步骤3)所得暗黄色晶体C用15倍质量的无水乙醇在70℃下溶解至完全后，在20℃下放置结晶12h，结晶结束后抽滤，将抽滤所得晶体用无水乙醇漂洗，然后真空干燥，干燥温度为30℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，得到72g的浅黄色结晶D即为辅酶Q10精品。
通过HPLC检测得：辅酶Q10精品的纯度为98.51％，结晶回收率为82.2％，具体见表5和图5。
表5
成分 保留时间/min 峰面积/AU*s 峰高/AU 含量/％
辅酶Q10 8.276 2385052 163833 98.51
实施例5
1)称取干燥的辅酶Q10菌渣4.5kg(辅酶Q10含量为1.917％)投入萃取罐内，将萃取罐内抽至真空度为0.08Mpa-0.1Mpa后，加入6L正己烷进行亚临界萃取，辅酶Q10菌渣与正己烷的用量比为1kg∶1.5L，萃取压力为0.6MPa，萃取温度为42℃(用循环水加热至40℃)，萃取4次，每次萃取时长60min，萃取结束后，将萃取所得含脂溶性成分的亚临界流体从萃取罐倒入脱溶罐中，在压强为-0.08Mpa～-0.06Mpa、温度为52℃的条件下，进行加热减压蒸发，待溶剂脱除完毕，得到的暗红色油膏状物A为辅酶Q10粗提取物；
2)向步骤1)所得暗红色油膏状物A中加入12倍质量的甲醇，甲醇醇度为99％，在30℃下搅拌漂洗90min，以溶解杂质，抽滤，重复搅拌漂洗抽滤5次后，将所得暗黄色沉淀真空干燥，干燥温度为42℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，得到暗黄色的干燥物B并将其粉碎；
3)将步骤2)所得粉碎后的暗黄色的干燥物B用4倍质量的环己烷搅拌溶解90min后，抽滤，向抽滤所得滤液中加入1.2倍质量的N，N-二甲基甲酰胺搅拌40min进行萃取分液，萃取分液4次后，取分液所得环己烷相放置结晶，结晶温度为30℃，结晶时间为26h，结晶结束后抽滤，将抽滤所得晶体真空干燥，干燥温度为38℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，得到暗黄色结晶物C；
4)将步骤3)所得暗黄色晶体C用18倍质量的无水乙醇在50℃下溶解至完全后，在30℃下放置结晶12h，结晶结束后抽滤，将抽滤所得晶体用无水乙醇漂洗，然后真空干燥，干燥温度为35℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，得到75g的浅黄色结晶D即为辅酶Q10精品。
通过HPLC检测得：辅酶Q10精品的纯度为98.16％，结晶回收率为85.3％，具体见表6和图6。
表6
成分 保留时间/min 峰面积/AU*s 峰高/AU 含量/％
辅酶Q10 8.485 2381316 184284 98.16
最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制，对于本领域的普通专业技术人员来说，可以对前述各实施例所记载的具体技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换，而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明所保护技术方案的范围。

Claims (4)

1.一种辅酶Q10的提纯方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)获取粗提取物
称取干燥的辅酶Q10菌渣投入萃取罐中，将萃取罐内抽至真空度为0.08Mpa-0.1Mpa后，加入正己烷进行亚临界萃取，辅酶Q10菌渣与正己烷的用量比为1kg:1.3L～1kg:1.5L，萃取压力为0.4MPa～0.6MPa，萃取温度为38℃～42℃，萃取2-4次，每次时长30min～60min，萃取结束后，将萃取所得含脂溶性成分的亚临界流体从萃取罐倒入脱溶罐中，在压强为-0.08Mpa～-0.05Mpa、温度为48℃～52℃的条件下，进行加热减压蒸发，待溶剂脱除完毕，得到的暗红色油膏状物A为辅酶Q10粗提取物；
2)除杂
向步骤1)所得暗红色油膏状物A中加入8～12倍质量的甲醇，甲醇醇度为95％～100％，在20℃～30℃下搅拌漂洗40min～90min，以溶解杂质，抽滤，重复搅拌漂洗抽滤3～5次后，将所得暗黄色沉淀真空干燥，干燥温度为30℃～42℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，得到暗黄色的干燥物B并将其粉碎；
3)初步纯化
将步骤2)所得粉碎后的暗黄色干燥物B用3～5倍质量的环己烷搅拌溶解40min～90min后，抽滤，向抽滤所得滤液中加入0.8～1.2倍质量的N,N-二甲基甲酰胺搅拌20min～40min进行萃取分液，萃取分液2～4次，取萃取后分液所得环己烷相放置结晶，结晶温度为20℃～30℃，结晶时间为22h～26h，结晶结束后抽滤，将抽滤所得晶体真空干燥，得到暗黄色结晶C；
4)精制
将步骤3)所得暗黄色结晶C用无水乙醇溶解至完全后，放置结晶，结晶结束后抽滤，将抽滤所得晶体用无水乙醇漂洗，然后真空干燥，得到的浅黄色结晶D即为辅酶Q10精品。
2.根据权利要求1所述的辅酶Q10的提纯方法，其特征在于，步骤3)中真空干燥操作具体为：
结晶结束后抽滤，将抽滤所得晶体真空干燥，干燥温度为30℃～38℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，得到暗黄色晶体C。
3.根据权利要求2所述的辅酶Q10的提纯方法，其特征在于，步骤4)具体为：
将步骤3)所得得到暗黄色晶体C用15～20倍质量的无水乙醇在50℃～70℃下溶解至完全后，在20℃-30℃下放置结晶10h～14h，结晶结束后抽滤，将抽滤所得晶体用无水乙醇漂洗，然后真空干燥，干燥温度为30℃～38℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，得到的浅黄色结晶D即为辅酶Q10精品。
4.根据权利要求3所述的辅酶Q10的提纯方法，其特征在于：
1)称取干燥的辅酶Q10菌渣投入萃取罐内，将萃取罐内抽至真空度为0.08Mpa-0.1Mpa后，加入正己烷进行亚临界萃取，辅酶Q10菌渣与正己烷的用量比为1kg:1.4L，萃取压力为0.5MPa，萃取温度为40℃，萃取时长40min，萃取3次，萃取结束后，将萃取所得含脂溶性成分的亚临界流体从萃取罐倒入脱溶罐中，在压强为-0.07Mpa～-0.06Mpa、温度为50℃的条件下，进行加热减压蒸发，待溶剂脱除完毕，得到的暗红色油膏状物A为辅酶Q10粗提取物；
2)向步骤1)所得暗红色油膏状物A中加入10倍质量的甲醇，甲醇醇度为98％，在25℃下搅拌漂洗60min，以溶解杂质，抽滤，重复搅拌漂洗抽滤4次后，将所得暗黄色沉淀真空干燥，干燥温度为40℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，得到暗黄色的干燥物B并将其粉碎；
3)将步骤2)所得粉碎后的暗黄色干燥物B用4倍质量的环己烷搅拌溶解60min后，抽滤，向抽滤所得滤液中加入1倍质量的N，N-二甲基甲酰胺搅拌30min进行萃取分液，萃取分液3次后，取分液所得环己烷相相放置结晶，结晶温度为25℃，结晶时间为24h，结晶结束后抽滤，将抽滤所得晶体真空干燥，干燥温度为35℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，得到暗黄色结晶物C；
4)将步骤3)所得暗黄色晶体C用18倍质量的无水乙醇在60℃下溶解至完全后，在25℃下放置结晶12h，结晶结束后抽滤，将抽滤所得晶体用无水乙醇漂洗，然后真空干燥，干燥温度为35℃，真空度为-0.08Mpa～-0.06Mpa，得到的浅黄色结晶D即为辅酶Q10精品。
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