CN111214433A

CN111214433A - 一种用于治疗妊娠纹和疤痕的组合物及其制备方法

Info

Publication number: CN111214433A
Application number: CN202010212259.8A
Authority: CN
Inventors: 刘明录; 刘媛媛; 张传鹏; 王立新; 王成斌; 金海锋; 李希鹏; 许淼; 马洪华
Original assignee: Shandong Xinrui Biotechnology Co ltd
Current assignee: Shandong Xinrui Biotechnology Co ltd
Priority date: 2020-03-24
Filing date: 2020-03-24
Publication date: 2020-06-02

Abstract

本发明提供一种用于治疗妊娠纹和疤痕的组合物，所述组合物中包括以下活性成分：阿拉伯半乳聚糖、葡萄糖酸锌、葡萄糖酸铜、抗坏血酸钠、干细胞培养上清液。本发明中制备的修复妊娠纹和疤痕的组合物，缩短了单独使用间充质干细胞培养上清的见效时间，促进了皮肤疤痕的快速修复。另外添加的几种活性成分，都有利于妊娠纹的修复。本发明中的组合物，连续使用5周，60‑68%以上的受试者妊娠纹有明显改善，连续使用8周，92‑98%以上的受试者妊娠纹有明显改善，妊娠纹长度和宽度明显缩短，周围皮肤保湿能力提高；只使用含间充质干细胞培养上清的组合物进行试验，连续使用8周，只有54‑60%的受试者妊娠纹有明显改善。

Description

一种用于治疗妊娠纹和疤痕的组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种用于治疗妊娠纹和疤痕的组合物及制备方法，属于生物与新医药技术领域。

背景技术

妊娠纹是皮肤过度扩张（体重增加）和荷尔蒙变化后出现的皮肤细纹或条带。这些皮肤线或带是平行且细长的，长度为5-15厘米，宽度为0.2-1厘米。它们可能很稀薄，几乎不显眼，但有时会形成小的凹陷，使皮肤褶皱。妊娠纹在开始时会有所不同，从浅粉红色到紫红色（未成熟或炎性妊娠纹），它们会随着时间的流逝而改变颜色，并变成珍珠白色（成熟的妊娠纹）。然后它们变得不那么明显，但疤痕依然存在。怀孕相关的妊娠纹发生在前表面或腹部，但有的也出现在乳房、大腿和臀部。

妊娠纹的产生是由于皮肤过快或突然的拉伸，实际上是真皮组织被改变，这种损伤的靶细胞是成纤维细胞。成纤维细胞在通过机械性扩张转化为成肌纤维细胞时经历表型变化，其激素环境也改变了其代谢。在怀孕期间，激素的增加会导致皮质激素的自然升高，从而通过抗有丝分裂作用抑制成纤维细胞的活性。因此，这些细胞的代谢减慢。此外，皮质类固醇通过限制胶原蛋白和弹性蛋白的合成来作用于结膜组织的新陈代谢，同时在怀孕期间激活它们的降解作用时，皮肤特别脆弱。另外，该过程伴有炎症期。因此，真皮组织退化导致萎缩性皮肤瘢痕形成，这与疤痕的形成原理相同。

目前市面上有预防和治疗妊娠纹的护肤霜，但这些护肤霜的配方不足以促进容易或有效地吸收到皮肤中。当前的许多护肤霜不能渗透死皮层至皮肤的最外层。此外，许多护肤霜使用的成分虽然本身可能有助于减少妊娠纹，但这种组合可能相互作用，导致各个成分无效。市场上针对妊娠纹主要有几种治疗方法，包括整容手术，激光治疗和维甲酸或果酸的局部治疗，这些方法只是治标不治本。

目前市面上修复妊娠纹的护肤膏大部分是植物成分或中药制剂，利用间充质干细胞因子制备护肤霜的比较少。CN108670935A提供了一种修复妊娠纹的间充质干细胞复合细胞因子冻干粉，它是直接利用脂肪颗粒分离出脂肪间充质干细胞，进行扩大培养，收集上清液，制备成冻干粉。该专利中只是简单的将脂肪间充质干细胞的上清液进行浓缩、冻干，需要连续使用12周有效率才能达到83.3%。

CN108721606A提供一种基于干细胞生长因子的妊娠纹修复产品及其制备方法，该专利中利用的是脐带间充质干细胞上清液和胎盘组织提取液； CN110075050A提供一种用于消除妊娠纹的间充质干细胞培养上清中细胞因子冻干粉的制备方法，主要利用的是脐带间充质干细胞上清液和脂肪间充质干细胞上清液混合制备的冻干粉。

上述专利用于治疗妊娠纹，存在见效慢、有效率低的缺陷。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明提供一种用于治疗妊娠纹和疤痕的组合物及其制备方法，实现以下发明目的：

（1）见效时间短；

（2）有效率高。

为解决上述技术问题，本发明采取以下技术方案：

一种用于治疗妊娠纹和疤痕的组合物，所述组合物中包括以下活性成分：

阿拉伯半乳聚糖、葡萄糖酸锌、葡萄糖酸铜、抗坏血酸钠、干细胞培养上清液。

以下是对上述技术方案的进一步改进：

所述阿拉伯半乳聚糖、葡萄糖酸锌、葡萄糖酸铜、抗坏血酸钠、干细胞培养上清液的质量比为：1-3：1-2：1-2：0.1-2：20-30；所述活性成分的占比为23-40%。

所述组合物，以质量百分比计，包括以下组分：1-3%的阿拉伯半乳聚糖、1-2％的葡萄糖酸锌、1-2％的葡萄糖酸铜、0.1-2％的抗坏血酸钠、20-30%的干细胞培养上清液，助剂补足100%。

所述组合物，以质量百分比计，包括以下组分：

2%的阿拉伯半乳聚糖、2％的葡萄糖酸锌、2％的葡萄糖酸铜、0.5％的抗坏血酸钠、20%的干细胞培养上清液，助剂补足100%。

本发明中所述的干细胞培养上清液为人源脐带间充质干细胞培养3-4代时收集的上清液。干细胞培养上清液中包括各种细胞因子和趋化因子，例如IGF-1、EGF、PDGF、FGF-2、VEGF、GCSF、GM-CSF、bFGF、HGF、IL-10、TGF-β、EPO、TPO等。这些细胞因子和趋化因子可刺激细胞增殖，增强胶原蛋白和弹性蛋白的产生，还具有抗炎作用。

所述干细胞培养上清液为各种细胞因子和趋化因子的UltraCULTURE培养基，其中EGF因子浓度为68-72ng/ml，FGF因子浓度为88-92ng/ml，VEGF因子浓度为79-81ng/ml，IL-10因子浓度为83-87ng/ml。

所述助剂为乳液、霜、喷雾所需的常规助剂成分。

所述组合物为喷雾时，助剂为水。

按照常规方法将组合物各组分制备成化妆品的各种制剂。

本发明中用于治疗妊娠纹和疤痕的组合物还包括其他添加剂，如用于增强的调味剂、香水、爽肤水。此外，组合物可以添加一个或多个其他活性成分，进一步提高功效，或增加配方的灵活性，只要其他活性成分对包含在内的主要活性成分效果没有不利影响。

除了该主要成分，其余的成分可以添加化妆品中常用的各种添加剂。

与现有技术相比，本发明的有益效果：

（1）本发明中制备的修复妊娠纹和疤痕的组合物，缩短了单独使用间充质干细胞培养上清的见效时间，促进了皮肤疤痕的快速修复。另外添加的几种活性成分，都有利于妊娠纹的修复。本发明中的组合物，连续使用5周，60-68%以上的受试者妊娠纹有明显改善，连续使用8周，92-98%以上的受试者妊娠纹有明显改善，妊娠纹长度和宽度明显缩短，周围皮肤保湿能力提高；只使用含间充质干细胞培养上清的组合物进行试验，连续使用8周，只有54-60%的受试者妊娠纹有明显改善。

（2）本发明中制备的修复妊娠纹和疤痕的组合物，60%的人群疤痕颜色变淡，20%的人群恢复到与正常皮肤颜色类似，55%的人群观察到疤痕长度缩短了。而使用只含有20%的间充质干细胞培养上清的受试者，只有30%的人群疤痕颜色变淡和35%的人群疤痕长度缩短，且无人恢复到与正常颜色类似。

（3）该组合物还可以预防妊娠纹的形成。

附图说明

图1为间充质干细胞表面标志物CD105的表达量的流式图；

图2为间充质干细胞表面标志物CD90的表达量的流式图；

图3为间充质干细胞表面标志物CD73的表达量的流式图；

图4为间充质干细胞表面标志物CD34的表达量的流式图；

图5为间充质干细胞表面标志物HLA-DR的表达量的流式图。

具体实施方式：

下面结合具体的实施例对本发明进一步说明。但这些例举性实施方式的用途和目的仅用来例举本发明，并非对本发明的实际保护范围构成任何形式的任何限定，更非将本发明的保护范围局限于此。

实施例1 制备干细胞培养上清液

取医院捐献的新生儿脐带，在超净工作台中先用75%酒精消毒两次，放在培养皿中，用镊子剥离出其中的华氏胶组织，用剪刀剪碎至0.5mm²大小的小块。将剪碎的华氏胶组织转移到培养瓶中，加入含有血浆替代物的UltraCULTURE培养基培养，每天用显微镜观察。长出的干细胞铺满瓶底的80%时，进行传代，传代后细胞生长速度加快，每2-3天传一代，传至P3、P4代时收集培养上清，以备后用。取其4×10⁶个细胞进行流式检测，验证其为间充质干细胞，CD105、CD73、CD90的高表达和CD34、HLA-DR的低表达均显示鉴定的细胞为间充质干细胞。流式检测结果为：CD105的表达率为99.1%，CD73的表达率为98.1%，CD90的表达率为98.7%，CD34的表达率为0.6%，HLA-DR的表达率为0，阳性标志物的高表达和阴性标志物的低表达说明此细胞为间充质干细胞。

收集第3代和第4代的培养上清混匀后，利用ELISA定量试剂盒测定上清中的主要因子含量，其中EGF因子浓度为70ng/ml，FGF因子浓度为90ng/ml，VEGF因子浓度为80ng/ml，IL-10因子浓度为85ng/ml。

实施例2 一种用于治疗妊娠纹和疤痕的组合物

所述组合物为喷雾；

所述组合物包括活性成分和助剂；

所述活性成分包括阿拉伯半乳聚糖、葡萄糖酸锌、葡萄糖酸铜、抗坏血酸钠、干细胞培养上清液；所述助剂为蒸馏水。

所述组合物，以质量百分含量计算，包括以下组分：

2%的阿拉伯半乳聚糖、2％的葡萄糖酸锌、2％的葡萄糖酸铜、0.5％的抗坏血酸钠、20%的干细胞培养上清液，蒸馏水补足100%。

所述干细胞培养上清液，为含有各种细胞因子和趋化因子的UltraCULTURE培养基，其中EGF因子浓度为70ng/ml，FGF因子浓度为90ng/ml，VEGF因子浓度为80ng/ml，IL-10因子浓度为85ng/ml。

将上述各组分按照常规方法，配成喷雾。

实施例3

采用实施例2制备的组合物进行功效测试，并与只含有20%的间充质干细胞培养上清进行比较，具体方案如下：

随机地挑选100个产后妇女，分为两组，一组使用上述制备的组合物，另一组使用只含有20%的间充质干细胞培养上清（余下80%为蒸馏水）。在他们大腿或腹部有对称或类似的妊娠纹，选择其中一个大腿，将喷雾喷在此处，柔和地进行顺时针按摩，一天两次。另一条腿作为对照组。每条大腿每隔一周通过临床检查和仪器测量进行评估。这些妇女还将这种喷雾涂在所有妊娠纹有关部位，以获得对效果的全面评估。

从以下几个方面对效果进行评估：妊娠纹的轮廓、妊辰纹的颜色、妊辰纹的宽度、妊辰纹周围皮肤粗糙、妊辰纹整体耐受。在使用前后对妊娠纹的整体情况进行记录，其轮廓和宽度减少1mm以上即为有效，小于1mm即为无效；对其颜色进行拍照分析，肉眼观察颜色比使用前变淡即为有效，没有变化即为无效；周围皮肤粗糙程度，使用伊丽美多功能皮肤分析仪ES-3100进行皮肤测试分析，含水量增高3%以上即为有效，含水量小于3%或减少或不变即为无效。

表1：实施例2的组合物的妊娠纹治疗效果

表2：只含有20%间充质干细胞培养上清的治疗效果

由上述结果可知，使用该组合物4周时，约有50%的受试者妊娠纹有改善；使用该组合物8周时，90%以上的受试者妊娠纹均有改善，而使用只含有20%的间充质干细胞培养上清的受试者，见效所需时间长且效率低，使用8周后，只有55%左右的受试者妊娠纹有改善。该组合物中的其他成分促进间充质干细胞因子发挥作用，达到见效快且效率高的优点。

该组合物对治疗妊娠纹有明显作用，主要体现在明显改善皮肤的整体质量和妊娠纹，妊娠纹严重的人群具有显著改善，使用该产品后的妊娠纹尺寸（宽度和长度）显著降低，整体红斑明显减少，良好的耐受性和安全性。

实施例4

对实施例2制备得到的组合物进行治疗疤痕的功效测试，并与只含有20%的间充质干细胞培养上清进行比较，具体方案如下：

随机地挑选40个剖腹产的妇女，分为两组，一组使用实施例2制备的组合物，另一组使用只含有20%的间充质干细胞培养上清（其余为蒸馏水）。剖腹产伤口长好后，将喷雾喷在此处，柔和地进行顺时针按摩，一天两次，连续使用8周。观察剖腹产留下的疤痕情况。使用前后观察记录疤痕的颜色和长度，肉眼观察疤痕颜色比使用之前变淡即为有效，观察不到疤痕即为恢复到与周围皮肤类似。疤痕长度的标准为缩短5mm及以上。

表3：剖腹产伤口使用实施例2制备的组合物的效果

表4：剖腹产伤口使用只含有20%的间充质干细胞培养上清的效果

结果显示，使用该组合物后有60%的人群疤痕颜色变淡，20%的人群恢复到与正常皮肤颜色类似，55%的人群观察到疤痕长度缩短了。而使用只含有20%的间充质干细胞培养上清的受试者，只有30%的人群疤痕颜色变淡和35%的人群疤痕长度缩短，且无人恢复到与正常颜色类似。说明该组合物中其它成分对去除疤痕有明显的促进作用，主要表现为起效时间短，效率高。使用本发明组合物后，疤痕颜色有明显改善，疤痕长度也缩短了，持续使用该产品，效果更明显，且不具有副作用，安全性高。

本发明的组合物也可以采用实施例2所述活性成分和其他常规助剂复配，比如调味剂、香水、甘油、丙二醇、透明质酸等制备成霜、乳液等产品形式，不同的产品形式对组合物的治疗妊娠物和疤痕的效果基本没有影响。

Claims

1.一种用于治疗妊娠纹和疤痕的组合物，其特征在于：所述组合物中包括以下活性成分：

2.根据权利要求1所述的一种用于治疗妊娠纹和疤痕的组合物，其特征在于：

3.根据权利要求1所述的一种用于治疗妊娠纹和疤痕的组合物，其特征在于：所述组合物，以质量百分比计，包括以下组分：1-3%的阿拉伯半乳聚糖、1-2％的葡萄糖酸锌、1-2％的葡萄糖酸铜、0.1-2％的抗坏血酸钠、20-30%的干细胞培养上清液，助剂补足100%。

4.根据权利要求1所述的一种用于治疗妊娠纹和疤痕的组合物，其特征在于：所述组合物，以质量百分比计，包括以下组分：

5.根据权利要求1所述的一种用于治疗妊娠纹和疤痕的组合物，其特征在于：

所述干细胞培养上清液为人源脐带间充质干细胞培养3-4代时收集的上清液。

6.根据权利要求1所述的一种用于治疗妊娠纹和疤痕的组合物，其特征在于：

所述干细胞培养上清液为含有各种细胞因子和趋化因子的UltraCULTURE培养基，其中主要的细胞因子浓度如下：EGF因子浓度为68-72ng/ml，FGF因子浓度为88-92ng/ml，VEGF因子浓度为79-81ng/ml，IL-10因子浓度为83-87ng/ml。

7.根据权利要求3或4所述的一种用于治疗妊娠纹和疤痕的组合物，其特征在于：所述助剂为乳液、霜、喷雾所需的常规助剂成分。

8.根据权利要求1所述的一种用于治疗妊娠纹和疤痕的组合物，其特征在于：所述组合物为喷雾时，助剂为水。

9.根据权利要求1所述的一种用于治疗妊娠纹和疤痕的组合物的制备方法，其特征在于：按照常规方法将组合物各组分制备成化妆品的各种制剂。