CN111187369A - 一种模拟移动床色谱分离提纯海参硫酸软骨素的方法 - Google Patents

一种模拟移动床色谱分离提纯海参硫酸软骨素的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111187369A
CN111187369A CN202010137513.2A CN202010137513A CN111187369A CN 111187369 A CN111187369 A CN 111187369A CN 202010137513 A CN202010137513 A CN 202010137513A CN 111187369 A CN111187369 A CN 111187369A
Authority
CN
China
Prior art keywords
sea cucumber
chondroitin sulfate
moving bed
simulated moving
separating
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202010137513.2A
Other languages
English (en)
Inventor
周丹
张春才
王丽娜
汪静
白亚乡
唐茂勇
葛胜旭
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Dalian Ocean University
Original Assignee
Dalian Ocean University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Dalian Ocean University filed Critical Dalian Ocean University
Priority to CN202010137513.2A priority Critical patent/CN111187369A/zh
Publication of CN111187369A publication Critical patent/CN111187369A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/0003—General processes for their isolation or fractionation, e.g. purification or extraction from biomass
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
    • C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
    • C08B37/0069—Chondroitin-4-sulfate, i.e. chondroitin sulfate A; Dermatan sulfate, i.e. chondroitin sulfate B or beta-heparin; Chondroitin-6-sulfate, i.e. chondroitin sulfate C; Derivatives thereof

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)

Abstract

本发明公开一种模拟移动床色谱分离提纯海参硫酸软骨素的方法,所述的方法按照以下步骤依次进行：清洗破碎，水煮预提取，大孔树脂精制，制备进样液并将进样液注入模拟移动床，最终干燥，获得海参硫酸软骨素粉。本种方法，其生产自动化程度高、工作效率高，生产环境安全环保，适合工业化生产，制备所得的海参硫酸软骨素粉纯度较现有技术有了较大幅度的提高，可达80%以上,可以大规模的用于药品制备与生产。因此可以说该方法具备了多种优点，特别适合于在本领域中推广应用，其市场前景十分广阔。

Description

一种模拟移动床色谱分离提纯海参硫酸软骨素的方法
技术领域
本发明涉及海参硫酸软骨素的分离提纯方法，特别是一种模拟移动床色谱分离提纯海参硫酸软骨素的方法。
背景技术
海参因具有缓解疲劳、抗血栓、消炎、抗癌、保护神经组织等功能，常被用作营养滋补品和民间医药品。海参多糖是海参的主要营养成分，而硫酸软骨素（FucCS）又是海参多糖的主要部分，经提纯处理后的FucCS可完整保留海参的活性成分。目前市场上FucCS浓度在30%左右的海参口服液售价在50-100元/ml之间，纯度超过60%的售价一般超过200元/ml。在这样的背景下，寻求一种能规模化提取FucCS的方法将会经济效益和社会效益二者兼收。所以提取海参多糖中的FucCS，并将其应用于医药、食品等领域具有很重要的现实意义。
目前针对多糖的分离与提纯主要采取色谱和膜分离等方法，色谱法依据被分离多糖组分间的理化性质差异及其在固相载体和流动相之间分布和流动速度的差异而达到分离的目的。其优点是分离效率高、设备简单、操作方便且不含强烈的操作条件（如加热、搅拌等），特别适用于分离不稳定大分子有机化合物。但仍然存在着难以实现自动化操作，成本较高，制备效率相对较低，制备量相对较小等缺点。因此现在需要一种能够解决上述问题的方法或装置。
发明内容
本发明是为了解决现有技术所存在的上述不足，提出一种分离纯度高，制备成本低，有利于实现规模化生产的模拟移动床色谱技术分离提纯海参硫酸软骨素的方法。
本发明的技术解决方案是：一种模拟移动床色谱分离提纯海参硫酸软骨素的方法,其特征在于:所述的方法按照以下步骤依次进行：
a、清洗破碎:将海参用清水冲洗并剖开，去除内脏及泥沙后，放入绞肉机中绞碎，
b、水煮预提取:将备好的海参于80-90℃恒温下，加入含20-60%乙醇溶液回流提取3次，提取时间3-5h，0.2Mpa压力下离心微滤，3次提取滤液合并，然后将乙醇提取液在40-50℃，-0.1MPa的条件下减压浓缩,得到海参粗提物，
c、大孔树脂精制:将海参粗提物制成滤液进大孔树脂柱,洗脱溶液为50-80%乙醇溶液,得到低浓度的海参硫酸软骨素液体，
d、将低浓度的海参硫酸软骨素液体制备成进样液，并让进样液进入模拟移动床，经分离纯化得到海参硫酸软骨素液体，其中吸附剂为大孔吸附树脂,吸附区原料流量为5-15BV/h；解析剂为30份90%的乙醇溶液，解析剂流量为5-25BV/h；冲洗剂为去离子水，冲洗剂流量为5-25BV/h；所述的BV为吸附剂的柱床体积，上述过程中，温度控制在25-70℃，全程压力控制在0.2-1.0MPa，
e、将海参硫酸软骨素液体在蠕动泵进料量50-150ml/h、进风口温度120-140℃、出风口温度50-90℃、气流式雾化的条件下进行喷雾干燥,最终制成海参硫酸软骨素粉。
所述的大孔吸附树脂为AB-8弱极性大孔吸附树脂、ADS-8弱极性大孔吸附树脂、NKA-9极性大孔吸附树脂、X-5非极性大孔吸附树脂、DM301中极性大孔吸附树脂或ADs-7强极性大孔吸附树脂中的任何一种。
所述的c步骤中，得到的低浓度的海参硫酸软骨素液体的质量百分比浓度为5-20%,纯度为70-80%。
本发明同现有技术相比，具有如下优点：
本种分离提纯海参硫酸软骨素的方法，其生产自动化程度高、工作效率高，生产环境安全环保，适合工业化生产，制备所得的海参硫酸软骨素粉纯度较现有技术有了较大幅度的提高，可达80%以上,可以大规模的用于药品制备与生产。因此可以说该方法具备了多种优点，特别适合于在本领域中推广应用，其市场前景十分广阔。
下面将说明本发明的具体实施方式。
一种模拟移动床色谱分离提纯海参硫酸软骨素的方法,按照以下步骤依次进行：
a、清洗破碎:将海参用清水冲洗并剖开，去除内脏及泥沙后，放入绞肉机中绞碎，
b、水煮预提取:将备好的海参于80-90℃恒温下，加入含20-60%乙醇溶液回流提取3次，提取时间3-5h，0.2Mpa压力下离心微滤，3次提取滤液合并，然后将乙醇提取液在40-50℃，-0.1MPa的条件下减压浓缩,得到海参粗提物，
c、大孔树脂精制:将海参粗提物制成滤液进大孔树脂柱,洗脱溶液为50-80%乙醇溶液,得到低浓度的海参硫酸软骨素液体，
d、将低浓度的海参硫酸软骨素液体制备成进样液，并让进样液进入模拟移动床，经分离纯化得到海参硫酸软骨素液体，其中吸附剂为大孔吸附树脂,吸附区原料流量为5-15BV/h；解析剂为30份90%的乙醇溶液，解析剂流量为5-25BV/h；冲洗剂为去离子水，冲洗剂流量为5-25BV/h；所述的BV为吸附剂的柱床体积，上述过程中，温度控制在25-70℃，全程压力控制在0.2-1.0MPa，
e、将海参硫酸软骨素液体在蠕动泵进料量50-150ml/h、进风口温度120-140℃、出风口温度50-90℃、气流式雾化的条件下进行喷雾干燥,最终制成海参硫酸软骨素粉。
所述的大孔吸附树脂为AB-8弱极性大孔吸附树脂、ADS-8弱极性大孔吸附树脂、NKA-9极性大孔吸附树脂、X-5非极性大孔吸附树脂、DM301中极性大孔吸附树脂或ADs-7强极性大孔吸附树脂中的任何一种。
所述的c步骤中，得到的低浓度的海参硫酸软骨素液体的质量百分比浓度为5-20%,纯度为70-80%。
实施例1
一种模拟移动床色谱分离提纯海参硫酸软骨素的方法,按照以下步骤依次进行：
a、清洗破碎:称取海参200g,用清水冲洗并剖开,去除内脏及泥沙后,放入绞肉机中绞碎。
b、水煮预提取:加入2000ml含40%乙醇溶液,80℃煮3次,每次4小时；然后进行离心微滤，离心微滤时的工作压力0.2MPa,微滤膜用水洗滤3次,收集滤液。
c、大孔树脂精制:将滤液进大孔树脂柱,洗脱溶液为50%乙醇溶液,可以得到低浓度的海参硫酸软骨素液体。
d、将低浓度的海参硫酸软骨素液体制备成进样液，进入模拟移动床分离纯化得海参硫酸软骨素液体，其中吸附剂为大孔吸附树脂,吸附区原料流量为5BV/h；解析剂为30份90%的乙醇溶液，解析剂流量为10BV/h；冲洗剂为去离子水，冲洗剂流量为10BV/h；所述的BV为吸附剂的柱床体积；上述过程中，温度控制在30℃；全程压力控制范围为0.3MPa;
e、将海参硫酸软骨素液体在蠕动泵进料量100ml/h、进风口温度120℃、出风口温度50℃、气流式雾化条件下进行喷雾干燥,即制成海参硫酸软骨素粉，经检测，纯度为70-80%。
实施例2
一种模拟移动床色谱分离提纯海参硫酸软骨素的方法,按照以下步骤依次进行：
a、清洗破碎:称取海参200g,用清水冲洗并剖开,去除内脏及泥沙后,放入绞肉机中绞碎。
b、水煮预提取:加入1000ml含20%乙醇溶液,80℃煮3次,每次5小时；然后进行离心微滤，离心微滤时的工作压力0.2MPa,微滤膜用水洗滤3次,收集滤液。
c、大孔树脂精制:将滤液进大孔树脂柱,洗脱溶液为50%乙醇溶液,可以得到低浓度的海参硫酸软骨素液体。
d、将低浓度的海参硫酸软骨素液体制备成进样液，进入模拟移动床分离纯化得海参硫酸软骨素液体，其中吸附剂为大孔吸附树脂,吸附区原料流量为10BV/h；解析剂为30份90%的乙醇溶液，解析剂流量为20BV/h；冲洗剂为去离子水，冲洗剂流量为20BV/h；所述的BV为吸附剂的柱床体积；上述过程中，温度控制在40℃；全程压力控制范围为0.3MPa;
e、将海参硫酸软骨素液体在蠕动泵进料量80ml/h、进风口温度130℃、出风口温度60℃、气流式雾化条件下进行喷雾干燥,即制成海参硫酸软骨素粉，经检测，纯度为70-80%。
实施例3
一种模拟移动床色谱分离提纯海参硫酸软骨素的方法,按照以下步骤依次进行：
a、清洗破碎:称取海参200g,用清水冲洗并剖开,去除内脏及泥沙后,放入绞肉机中绞碎。
b、水煮预提取:加入3000ml含60%乙醇溶液,90℃煮3次,每次3小时；然后进行离心微滤，离心微滤时的工作压力0.2MPa,微滤膜用水洗滤3次,收集滤液。
c、大孔树脂精制:将滤液进大孔树脂柱,洗脱溶液为50%乙醇溶液,可以得到低浓度的海参硫酸软骨素液体。
d、将低浓度的海参硫酸软骨素液体制备成进样液，进入模拟移动床分离纯化得海参硫酸软骨素液体，其中吸附剂为大孔吸附树脂,吸附区原料流量为15BV/h；解析剂为30份90%的乙醇溶液，解析剂流量为25BV/h；冲洗剂为去离子水，冲洗剂流量为25BV/h；所述的BV为吸附剂的柱床体积；上述过程中，温度控制在40℃；全程压力控制范围为0.3MPa;
e、将海参硫酸软骨素液体在蠕动泵进料量100ml/h、进风口温度140℃、出风口温度80℃、气流式雾化条件下进行喷雾干燥,即制成海参硫酸软骨素粉，经检测，纯度为70-80%。
对比例1
a、清洗破碎:称取海参200g,用清水冲洗,并剖开,去除内脏及泥沙,放入绞肉机中绞碎。
b、水煮预提取:加入2000ml含40%乙醇溶液,80℃煮3次,每次4小时。
c、离心微滤:工作压力0.2MPa,微滤膜用水洗滤3次,收集滤液。
d、大孔树脂精制:将滤液进HZ-841大孔树脂柱,洗脱溶液为50%乙醇溶液,可以得到海参硫酸软骨素产品。
经检测，洗脱液中海参硫酸软骨素产品的纯度仅为45%。
对比例1是在实施例1的基础上去掉了模拟移动床色谱的步骤。经过对比可得,引入模拟移动床色谱法,可以大大提高制得的海参硫酸软骨素的纯度,较普通方法有了大幅度的提高,本发明的技术方案可以广泛适用于制药应用。

Claims (3)

1.一种模拟移动床色谱分离提纯海参硫酸软骨素的方法,其特征在于:所述的方法按照以下步骤依次进行：
a、清洗破碎:将海参用清水冲洗并剖开，去除内脏及泥沙后，放入绞肉机中绞碎，
b、水煮预提取:将备好的海参于80-90℃恒温下，加入含20-60%乙醇溶液回流提取3次，提取时间3-5h，0.2Mpa压力下离心微滤，3次提取滤液合并，然后将乙醇提取液在40-50℃，-0.1MPa的条件下减压浓缩,得到海参粗提物，
c、大孔树脂精制:将海参粗提物制成滤液进大孔树脂柱,洗脱溶液为50-80%乙醇溶液,得到低浓度的海参硫酸软骨素液体，
d、将低浓度的海参硫酸软骨素液体制备成进样液，并让进样液进入模拟移动床，经分离纯化得到海参硫酸软骨素液体，其中吸附剂为大孔吸附树脂,吸附区原料流量为5-15BV/h；解析剂为30份90%的乙醇溶液，解析剂流量为5-25BV/h；冲洗剂为去离子水，冲洗剂流量为5-25BV/h；所述的BV为吸附剂的柱床体积，上述过程中，温度控制在25-70℃，全程压力控制在0.2-1.0MPa，
e、将海参硫酸软骨素液体在蠕动泵进料量50-150ml/h、进风口温度120-140℃、出风口温度50-90℃、气流式雾化的条件下进行喷雾干燥,最终制成海参硫酸软骨素粉。
2.根据权利要求1所述的模拟移动床色谱分离提纯海参硫酸软骨素的方法,其特征在于:所述的大孔吸附树脂为AB-8弱极性大孔吸附树脂、ADS-8弱极性大孔吸附树脂、NKA-9极性大孔吸附树脂、X-5非极性大孔吸附树脂、DM301中极性大孔吸附树脂或ADs-7强极性大孔吸附树脂中的任何一种。
3.根据权利要求1所述的模拟移动床色谱分离提纯海参硫酸软骨素的方法,其特征在于:所述的c步骤中，得到的低浓度的海参硫酸软骨素液体的质量百分比浓度为5-20%,纯度为70-80%。
CN202010137513.2A 2020-03-03 2020-03-03 一种模拟移动床色谱分离提纯海参硫酸软骨素的方法 Pending CN111187369A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010137513.2A CN111187369A (zh) 2020-03-03 2020-03-03 一种模拟移动床色谱分离提纯海参硫酸软骨素的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010137513.2A CN111187369A (zh) 2020-03-03 2020-03-03 一种模拟移动床色谱分离提纯海参硫酸软骨素的方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN111187369A true CN111187369A (zh) 2020-05-22

Family

ID=70706738

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010137513.2A Pending CN111187369A (zh) 2020-03-03 2020-03-03 一种模拟移动床色谱分离提纯海参硫酸软骨素的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111187369A (zh)

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101343332A (zh) * 2008-08-20 2009-01-14 山东省科学院生物研究所 利用海参加工废液提取海参多糖的方法
CN102367285A (zh) * 2011-11-06 2012-03-07 浙江大学 菲律宾刺参硫酸软骨素多糖及其提取方法和用途
CN102532340A (zh) * 2012-02-14 2012-07-04 中国海洋大学 海参多糖的分离纯化方法及双水相萃取方法在其中的应用
CN102688266A (zh) * 2012-06-15 2012-09-26 通化师范学院 一种模拟移动床色谱分离提纯藤梨根黄酮的方法
CN104013647A (zh) * 2014-06-18 2014-09-03 中国科学院过程工程研究所 一种海参皂苷的提取方法
CN104130334A (zh) * 2014-07-18 2014-11-05 冯群力 一种海参多糖的提取方法
US20150374605A1 (en) * 2013-02-11 2015-12-31 Laboratoires Expanscience Use of a composition comprising avocado perseose in the protection of epidermal stem cells

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101343332A (zh) * 2008-08-20 2009-01-14 山东省科学院生物研究所 利用海参加工废液提取海参多糖的方法
CN102367285A (zh) * 2011-11-06 2012-03-07 浙江大学 菲律宾刺参硫酸软骨素多糖及其提取方法和用途
CN102532340A (zh) * 2012-02-14 2012-07-04 中国海洋大学 海参多糖的分离纯化方法及双水相萃取方法在其中的应用
CN102688266A (zh) * 2012-06-15 2012-09-26 通化师范学院 一种模拟移动床色谱分离提纯藤梨根黄酮的方法
US20150374605A1 (en) * 2013-02-11 2015-12-31 Laboratoires Expanscience Use of a composition comprising avocado perseose in the protection of epidermal stem cells
CN104013647A (zh) * 2014-06-18 2014-09-03 中国科学院过程工程研究所 一种海参皂苷的提取方法
CN104130334A (zh) * 2014-07-18 2014-11-05 冯群力 一种海参多糖的提取方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
王振宇等: "《天然产物分离技术》", 31 January 2012, 中国轻工业出版社 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104372045B (zh) 一种高纯度萝卜硫素的制备方法
CN102219866B (zh) 一种从灵芝子实体中提取分离灵芝多糖的方法
CN103254064B (zh) 一种阿魏酸的制备方法
CN106220748B (zh) 一种海芦笋总黄酮及多糖综合提取方法
CN101613390A (zh) 一种高纯度虫草菌素分离纯化的方法
CN104059163A (zh) 青海柴达木枸杞多糖提取分离制备新方法
CN107722132B (zh) 一种从海藻中联产海藻多糖和海藻蛋白的方法
CN104961839A (zh) 一种特异性茯苓多糖配方颗粒的制备方法
CN110882285A (zh) 桑黄中活性物质的高效制备方法
CN109160935B (zh) 一种提取剑麻皂素及纤维素的方法
CN112661767B (zh) 一种芝麻饼粕同步制取芝麻浓缩蛋白、芝麻油和芝麻素的方法
AU2017416080B2 (en) Method for preparing betanin
CN109320576A (zh) 一种高含量罗汉果苷v的生产方法
CN107286270A (zh) 一种利用酶解法制备肝素钠的方法
CN110484587B (zh) 一种提高萝卜花青素抗氧化性能的方法
CN110256597B (zh) 一种膜法降低灵芝多糖中重金属残留的方法
CN108997359B (zh) 一种从甜菊糖生产废渣中提取叶绿素的方法
CN114539132B (zh) 一种水热酸控醇提桑叶中dnj方法
CN111187369A (zh) 一种模拟移动床色谱分离提纯海参硫酸软骨素的方法
CN103789092B (zh) 一种燕麦麸皮中精油分离纯化方法
CN107988280B (zh) 从十字花科蔬菜种子中提制异硫氰酸酯高纯品的方法
CN114807258B (zh) 一种从海红米糠中提取神经酰胺的方法
CN107382943B (zh) 一种亚临界水萃取高粱麸皮中二氢槲皮素的方法
CN105585599A (zh) 一种由亚麻饼制取亚麻木酚素的方法
CN115626958A (zh) 一种基于碳化硅陶瓷膜技术分离食用菌多糖、方法和应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20200522

RJ01 Rejection of invention patent application after publication