CN111057117B - 一种枳实的综合利用方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及天然产物制备领域，涉及一种枳实的综合利用方法。本法通过加入酶解预处理的步骤，增加了橙皮苷提取效率，降低了提取时间和提取溶剂的量，避免了长时间的提取过程对功效成分的损害，可实现枳实的综合利用。本法可以应用于橙皮苷的提取的生产实践中，提高橙皮苷的提取率和纯度，并进一步保证原材料枳实的综合利用率。

Description

一种枳实的综合利用方法

技术领域

本发明涉及天然产物制备领域，涉及一种枳实的综合利用方法。

背景技术

枳实为芸香科植物酸橙(Citrus aurantium L.)的幼果，具有降气消积的作用,其药用价值较高。枳实中含有橙皮甙(hesperidin)、新橙皮甙(neohesperidin)、油皮甙(naringin)、辛弗林(synephrine)和N-甲基酪胺(N-methyltyramine)等成分，其中以橙皮苷的含量最高。橙皮苷又称川陈皮素、二氢黄酮甙，可作为维生素类药，能降低毛细管的脆性，保护毛细血管，防止微血管破裂出血，可用于高血压病的辅助治疗。由于枳实中橙皮苷的含量较大，所以枳实经常被作为橙皮苷提取的原材料。

中国专利CN103467546A(一种橙皮苷的生产工艺)提供了一种从枳实中提取橙皮苷的方法：将枳实粉碎后，加入甲醇和碱的混合溶剂进行循环浸泡提取，通过过滤得到枳实滤渣；再调节pH值至5-6，静置析晶；收集结晶体，水洗，烘干，即得橙皮苷。虽然该工艺简单，但是采用甲醇和碱的混合溶液进行提取所需提取时间较长，所需溶剂量较大，提取效率不高。另外，枳实药材长时间接触甲醇和碱的混合溶液，药材(药渣)中的功效成分或有利用价值的成分被破坏，提取完之后的药渣不能够再次利用，只能废弃处理。而大量的废弃处理的带有大量溶剂的药渣，会对环境造成非常严重的污染。亟需一种科学环保的提取方法，从而增加枳实的提取效率并增加枳实的综合利用率。

发明内容

本发明主要解决的技术问题是提供一种枳实的综合利用方法，本法通过加入酶解预处理的步骤，增加了橙皮苷提取效率，降低了提取时间和提取溶剂的量，避免了长时间的提取过程对药材(药渣)中的功效成分的损害，可实现枳实的综合利用。

为达到上述目的，本发明提出了以下技术方案：

一种枳实的综合利用方法，包括以下步骤，

(1)第一次酶解处理：使用复合酶Ⅰ酶解处理枳实原料，获得酶解枳实原料Ⅰ，所述复合酶Ⅰ为纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶组成的混合物；

(2)第二次酶解处理：使用复合酶Ⅱ酶解处理(1)中的酶解枳实原料Ⅰ，获得酶解枳实原料Ⅱ，所述复合酶Ⅱ为淀粉酶和蛋白酶组成的混合物；

(3)提取：使用碱性醇溶液为溶剂对(2)中的酶解枳实原料Ⅱ进行提取，获得提取液；

(4)结晶：对(3)中的提取液进行结晶处理，获得橙皮苷结晶。

采用上述技术方案，技术原理为：在第一次酶解处理中，使用纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶处理枳实原料，使得枳实细胞的细胞壁崩解，更有利于有效成分的溶出。在第二次酶解处理中，使用淀粉酶和蛋白酶继续处理枳实细胞中的大分子蛋白质和淀粉类物质，避免了大分子物质对后续提取过程的影响。经过前两个预处理步骤之后，再对酶解枳实原料Ⅱ进行提取，在碱性溶液中，橙皮苷处于可溶状态，可以被溶剂充分浸提。由于阻碍橙皮苷提取的杂质已经被两次酶解过程所除去，在对酶解枳实原料Ⅱ进行提取的过程中，使用的提取溶剂的量更少，提取时间更短，对药材(药渣)中的功效成分的破坏也越少，更有利于对枳实进行综合利用(药渣可以进一步被利用，进行进一步提取或者制备肥料或者动物饲料等)。完成提取之后，再通过酸沉结晶步骤，使橙皮苷结晶析出。

本方案的有益效果在于：

(1)加入除杂过程(即两次酶解过程)，提高了提取效率，减少了溶剂用量和提取时间，从而降低了生产成本。

(2)发明人通过大量研究发现，枳实中影响提取效率的因素除了纤维素、半纤维素和果胶等形成的细胞壁结构外，枳实细胞中含有的大分子淀粉和大分子蛋白质均会影响橙皮苷的提取效率。使用酶处理破坏细胞壁结构，并将淀粉和蛋白质降解为小分子，可以大大提高橙皮苷的提取效率。

(3)采用了两步酶解法对枳实进行处理，第一步酶解使得细胞崩解，内容物更容易溢出，然后采用第二步酶解，使得细胞中的淀粉和蛋白质得到充分降解。上述的处理方法可以充分的除去影响橙皮苷提取和结晶的杂质。

(4)由于提取溶剂的用量和提取时间的减少，使得枳实内的功效成分的活性得以更好的维持，完成橙皮苷提取之后的药渣可以用于后续的产品开发中，例如生物有机肥料的制作以及其他功效成分的提取，实现对枳实的综合利用。

进一步，在(1)中，酶解处理枳实原料的方法为：在枳实原料中加入水，枳实原料和水的用量比为1kg：(1-2)L；然后在水中加入复合酶Ⅰ，复合酶Ⅰ的浓度为0.6-1.2g/L；使用复合酶Ⅰ酶解处理枳实原料，获得酶解枳实原料Ⅰ。

采用上述技术方案，采用上述浓度的复合酶Ⅰ可充分破坏枳实细胞结构，有利于后续的酶解和提取步骤。

进一步，使用复合酶Ⅰ酶解处理枳实原料的时长为2-3h，温度为35-45℃，pH值为6.5-7.5。

采用上述技术方案，可将枳实细胞壁充分瓦解，使得细胞内容物更容易被后续的提取步骤提取，也使得后续的酶解过程的底物(淀粉和蛋白质)充分暴露。

进一步，在复合酶Ⅰ中，纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶的质量比为1：(1-2)：(3-4)。

采用上述技术方案，可充分将枳实细胞壁上的纤维素、半纤维素和果胶降解。

进一步，在(2)中，酶解处理酶解枳实原料Ⅰ的方法为：在酶解枳实原料Ⅰ中加入复合酶Ⅱ，复合酶Ⅱ的浓度为1.0-1.5g/L，使用复合酶Ⅱ酶解处理酶解枳实原料Ⅰ，获得酶解枳实原料Ⅱ。

采用上述技术方案，采用上述浓度的复合酶Ⅱ可以充分降解影响橙皮苷提取和结晶的大分子物质。

进一步，使用复合酶Ⅱ酶解处理酶解枳实原料Ⅰ的时长为2-3h，温度为35-37℃，pH值为6.5-7.5。

采用上述技术方案，采用上述的温度、时间和pH值，可将淀粉和蛋白质充分降解，增加橙皮苷提取和结晶的效率。

进一步，在复合酶Ⅱ中，淀粉酶和蛋白酶的质量比为1：(1-2)。

采用上述技术方案，可充分降解细胞内的淀粉和蛋白质，除去影响橙皮苷提取和结晶的杂质。

进一步，在(1)中，枳实原料为经过粉碎处理的枳实的幼果。

采用上述技术方案，粉碎处理之后，使得物料和酶液以及溶剂充分接触，提高提取效率；幼果中橙皮苷的含量高，可增加橙皮苷的得率。

进一步，在(3)中，使用连续逆流法对酶解枳实原料Ⅱ进行提取，枳实原料与碱性醇溶液的用量比为1kg：(3-4)L，提取时间为0.7-1.2h；在碱性醇溶液中，碱的质量分数为1％-3％，醇的体积分数为60％-80％；所述碱为氢氧化钠或者氢氧化钾，所述醇为甲醇或者乙醇。

采用上述技术方案，使用碱性的醇溶液可以将枳实中的橙皮苷充分溶出，实现橙皮苷的提取。

进一步，在(4)中，结晶处理的pH值为5.5-6.5，温度为20-25℃，时长为6-8h。

采用上述技术方案，在酸性条件下，橙皮苷发生结晶，可实现对橙皮苷的富集和初步纯化。

具体实施方式

实施例1：橙皮苷提取实例

取新鲜枳实，粉碎后过15目筛，获得枳实原料，枳实原料的重量为100kg。

(1)第一次酶解处理：将枳实原料放入酶解罐，在枳实原料中加入水，枳实原料和水的用量比为1kg：1L，然后在水中加入复合酶Ⅰ，复合酶Ⅰ的浓度为0.6g/L。复合酶Ⅰ酶解处理枳实原料的时长为2h，温度为35℃，pH值为6.5。在复合酶Ⅰ中，纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶的质量比为1：1：3。完成酶解后获得，酶解枳实原料Ⅰ。

(2)第二次酶解处理：在酶解枳实原料Ⅰ(含有固体物料和水)中加入复合酶Ⅱ，复合酶Ⅱ的浓度为1.0g/L。使用复合酶Ⅱ酶解处理酶解枳实原料Ⅰ的时长为2h，温度为35℃，pH值为6.5。在复合酶Ⅱ中，淀粉酶和蛋白酶的质量比为1：1。完成酶解后获得，获得酶解枳实原料Ⅱ(含有固体物料和水)。

(3)提取：使用连续逆流机进行提取，使用碱性醇溶液作为溶剂进行提取。碱为氢氧化钾，醇为乙醇，碱的质量分数为1％，醇的体积分数为60％。将酶解枳实原料Ⅱ从进料口中进料，枳实原料与碱性醇溶液的用量比为1kg：3L，物料和提取溶剂在提取机中停留提取时间为0.7h，提取结束后获得含有橙皮苷的提取液。

(4)结晶：对提取液进行精滤处理，然后输送进入结晶罐，用盐酸调pH至5.5，20℃结晶6h。结晶结束之后，通过离心和过滤获得结晶体(橙皮苷结晶)，水洗结晶体之后烘干，获得橙皮苷成品。

实施例2：橙皮苷提取实例

取新鲜枳实，粉碎后过15目筛，获得枳实原料，枳实原料的重量为200kg。

(1)第一次酶解处理：将枳实原料放入酶解罐，在枳实原料中加入水，枳实原料和水的用量比为1kg：1L，然后在水中加入复合酶Ⅰ，复合酶Ⅰ的浓度为1.0g/L。复合酶Ⅰ酶解处理枳实原料的时长为2h，温度为37℃，pH值为7.0。在复合酶Ⅰ中，纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶的质量比为1：1：3。完成酶解后获得，酶解枳实原料Ⅰ。

(2)第二次酶解处理：在酶解枳实原料Ⅰ(含有固体物料和水)中加入复合酶Ⅱ，复合酶Ⅱ的浓度为1.3g/L。使用复合酶Ⅱ酶解处理酶解枳实原料Ⅰ的时长为2h，温度为36℃，pH值为7.0。在复合酶Ⅱ中，淀粉酶和蛋白酶的质量比为1：1。完成酶解后获得，获得酶解枳实原料Ⅱ(含有固体物料和水)。

(3)提取：使用连续逆流机进行提取，使用碱性醇溶液作为溶剂进行提取。碱为氢氧化钠，醇为甲醇，碱的质量分数为2％，醇的体积分数为70％。将酶解枳实原料Ⅱ从进料口中进料，枳实原料与碱性醇溶液的用量比为1kg：3.5L，物料和提取溶剂在提取机中停留提取时间为1.0h，提取结束后获得含有橙皮苷的提取液。

(4)结晶：对提取液进行精滤处理，然后输送进入结晶罐，用盐酸调pH至6.0，23℃结晶6h。结晶结束之后，通过离心和过滤获得结晶体(橙皮苷结晶)，水洗结晶体之后烘干，获得橙皮苷成品。

实施例3：橙皮苷提取实例

取新鲜枳实，粉碎后过15目筛，获得枳实原料，枳实原料的重量为350kg。

(1)第一次酶解处理：将枳实原料放入酶解罐，在枳实原料中加入水，枳实原料和水的用量比为1kg：2L，然后在水中加入复合酶Ⅰ，复合酶Ⅰ的浓度为1.2g/L。复合酶Ⅰ酶解处理枳实原料的时长为3h，温度为45℃，pH值为7.5。在复合酶Ⅰ中，纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶的质量比为1：2：4。完成酶解后获得，酶解枳实原料Ⅰ。

(2)第二次酶解处理：在酶解枳实原料Ⅰ(含有固体物料和水)中加入复合酶Ⅱ，复合酶Ⅱ的浓度为1.5g/L。使用复合酶Ⅱ酶解处理酶解枳实原料Ⅰ的时长为3h，温度为37℃，pH值为7.5。在复合酶Ⅱ中，淀粉酶和蛋白酶的质量比为1：2。完成酶解后获得，获得酶解枳实原料Ⅱ(含有固体物料和水)。

(3)提取：使用连续逆流机进行提取，使用碱性醇溶液作为溶剂进行提取。碱为氢氧化钠，醇为乙醇，碱的质量分数为3％，醇的体积分数为80％。将酶解枳实原料Ⅱ从进料口中进料，枳实原料与碱性醇溶液的用量比为1kg：4L，物料和提取溶剂在提取机中停留提取时间为1.2h，提取结束后获得含有橙皮苷的提取液。

(4)结晶：对提取液进行精滤处理，然后输送进入结晶罐，用盐酸调pH至6.5，25℃结晶8h。结晶结束之后，通过离心和过滤获得结晶体(橙皮苷结晶)，水洗结晶体之后烘干，获得橙皮苷成品。

实施例4：橙皮苷提取实例

本实施例基本同实施例3，不同点在于，在(3)提取中，提取溶剂碱性醇溶液中还含有质量分数为0.01‰的氯化锌，氢氧化钠的质量分数为0.2％。

在(4)结晶中，精滤处理之后，在提取液中加入EDTA，保持EDTA在提取液中的质量分数为0.01‰。搅拌均匀后，将含有EDTA的提取液放入结晶罐，进行结晶处理。

强碱对橙皮苷的生物活性有一定影响，橙皮苷在高温及碱性或酸性条件下会快速分解成为橙皮素，影响橙皮苷品质。橙皮苷可以与锌离子络合，增加其溶解性，不用使用大量的强碱来增加黄酮类物质的溶解性。所以在碱性醇溶液中加入氯化锌可以增加橙皮苷的溶解度降低碱的用量，对橙皮苷的活性具有一定的保护作用。0.01‰的氯化锌可以将氢氧化钠在碱性醇溶液中的质量分数降至0.1-1％，仍然能够对枳实中的橙皮苷进行高效提取。发明人分析了锌离子促进橙皮苷溶解的原因，具有完整的大π键共轭体系，可与金属离子成稳定的环状络合物。含金属离子的橙皮苷环状络合物的溶解性各异，发明人发现镁离子和橙皮苷形成的络合物的溶解性较差，和锌离子与橙皮苷形成的络合物相比，在溶解度上存在较大的差异。

在后续的结晶过程之前，使用EDTA将锌-橙皮苷络合物中的锌离子鳌合，使得橙皮苷结构恢复原状，再进行结晶步骤，使得橙皮苷结晶析出，完成橙皮苷的富集和初步纯化。

对比例1

本对比例基本同实施例2，不同点在于，本对比例中没有酶解步骤，使用碱性醇溶液浸润枳实原料(料液比1:1)，浸润时间30min，然后直接在连续逆流提取机上进料进行提取步骤。

对比例2

本对比例基本同实施例2，不同点在于，本对比例中没有酶解步骤，使用碱性醇溶液浸润枳实原料(料液比1:1)，浸润过程在带有超声波发生器的连续浸润器中进行，超声功率300W，浸润时间30min。然后在连续逆流提取机上进料进行提取步骤。

对比例3

本对比例基本同实施例2，不同点在于，本对比例中没有第二次酶解处理步骤，将酶解枳实原料Ⅰ在连续逆流提取机上进料进行提取步骤。

对比例4

本对比例基本同实施例2，不同点在于，本对比例中没有第一次酶解处理步骤，直接使用复合酶Ⅱ对枳实原料进行酶解处理，获得酶解枳实原料Ⅱ，将酶解枳实原料Ⅱ在连续逆流提取机上进料进行提取步骤。

对比例5

本对比例基本同实施例2，不同点在于，复合酶Ⅱ中只含有淀粉酶。

对比例6

本对比例基本同实施例2，不同点在于，复合酶Ⅱ中只含有蛋白酶。

对比例7

本对比例基本同实施例2，不同点在于，在(3)中，提取时间为3h。

对比例8

本对比例基本同对比例1，不同点在于，在(3)中的提取时间为5h。

对比例9

本对比例基本同对比例1，不同点在于，在(3)中，枳实原料与碱性醇溶液的用量比为1kg：8L。

对比例10

本对比例基本同对比例1，不同点在于，在(3)中，提取时间为5h，枳实原料与碱性醇溶液的用量比为1kg：8L。

对比例11

本对比例基本同实施例2，不同点在于，同时加入复合酶Ⅰ和复合酶Ⅱ进行酶解反应，不进行分步酶解反应。同时使用复合酶Ⅰ和复合酶Ⅱ酶解处理酶解枳实原料Ⅰ的时长为2h，温度为35℃，pH值为6.5。在枳实原料中加入水，枳实原料和水的用量比为1kg：1L，复合酶Ⅰ的浓度为0.6g/L，复合酶Ⅱ的浓度为1.0g/L(纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶的质量比为1：1：3；淀粉酶和蛋白酶的质量比为1：1)。

对比例12

本对比例基本同实施例2，不同点在于，在(3)中，枳实原料与碱性醇溶液的用量比为1kg：8L。

实验例

对实施例1-4和对比例1-10中的橙皮苷成品进行含量检测，含量检测方法参见《中国药典(一部)》(2005)中的HPLC法测量橙皮苷含量的方法，并使用橙皮苷标准品绘制标准曲线，计算橙皮苷的提取率和含量，结果如表1所示,提取率(得率)用质量百分数表示(单位质量的枳实原料(kg)提取获得的橙皮苷成品的质量(kg))，含量(纯度)用质量百分数表示(橙皮苷成品中橙皮苷的含量)。

表1：实施例1-4和对比例1-10中的橙皮苷成品的质量检测结果

	提取率(％)	含量(％)	提取时间(h)	料液比(kg：L)
					实施例1	28.14	95.17	0.7	1：3
实施例2	27.68	94.67	1	1：3.5
					实施例3	27.14	94.01	1.2	1：4
实施例4	28.01	95.67	1.2	1：4
					对比例1	1.69	36.47	1	1：3.5
对比例2	10.09	51.47	1	1：3.5
					对比例3	25.39	86.10	1	1：3.5
对比例4	10.37	79.17	1	1：3.5
					对比例5	21.54	82.19	1	1：3.5
对比例6	19.47	80.33	1	1：3.5
					对比例7	28.13	94.03	3	1：3.5
对比例8	5.17	42.03	5	1：3.5
					对比例9	10.60	39.47	1	1：8.0
对比例10	21.48	82.11	5	1：8.0
					对比例11	23.87	90.17	1	1：3.5
对比例12	27.07	93.87	1	1：8.0

由表1的结果可知，实施例1-4中，采用了两步酶解的步骤，橙皮苷的提取率和纯度(含量)均较为理想。实施例4中，加入了氯化锌，大大降低了提取溶剂中碱的用量，减少了橙皮苷分解成橙皮素的风险。并且采用实施例4的方法橙皮苷的提取率没有因为碱的浓度的降低而降低(提取原理为碱液可溶解橙皮苷)，反而提高了橙皮苷的纯度。对比例1中没有进行任何酶解处理，并且提取时间过短，导致提取过程中不能将橙皮苷提取出来，提取率和纯度均低。对比例2中使用了超声辅助提取，但是超声处理之后对提取率的提升并没有很好的效果。根据对比例8-对比例10的结果，如果不进行酶解预处理除杂质，只能通过增加提取时间和增加提取溶剂的方式，来提高橙皮苷的提取率。但是，提取时间和溶剂使用量的增加会增加制备成本，降低生产效率，并且会对功效成分的活性造成负面影响，不利于枳实原料的综合利用。对比例3中没有将大分子的淀粉类物质和蛋白质类物质除去，导致影响橙皮苷提取和结晶的因素没有除去，橙皮苷的得率有所降低，纯度降低较多。对比例4当中没有采用第一次酶解步骤，导致第二次酶解不能充分进行，橙皮苷的得率和纯度均较差。对比例11中，将第一次酶解和第二次酶解合并处理，几种酶在同一体系中相互影响，降低了酶解作用效果，杂质没有被充分除去，导致橙皮苷得率和纯度均有所下降。对比例5中未使用淀粉酶，导致橙皮苷得率和纯度不佳，说明大分子的淀粉物质会影响橙皮苷的提取和结晶过程。对比例6中未使用蛋白酶，导致橙皮苷得率和纯度不佳，说明大分子的蛋白质会影响橙皮苷的提取和结晶过程。对比例7较实施例延长了提取时间，橙皮苷的得率和纯度没有得到较大的提升，说明1h的提取时间对于本发明的方法已经可以获得较高的得率和纯度，进一步说明了本法可节约提取时间，增加制备效率。对比例12相对于实施例1-4增加了溶剂用量，橙皮苷的得率和纯度没有得到较大的提升，说明1:3.5的料液比对于本发明的方法已经可以获得较高的得率和纯度，进一步说明了本法可节约溶剂，降低生产成本。

以上所述的仅是本发明的实施例，方案中公知的具体结构及特性等常识在此未作过多描述。应当指出，对于本领域的技术人员来说，在不脱离本发明结构的前提下，还可以作出若干变形和改进，这些也应该视为本发明的保护范围，这些都不会影响本发明实施的效果和专利的实用性。本申请要求的保护范围应当以其权利要求的内容为准，说明书中的具体实施方式等记载可以用于解释权利要求的内容。

Claims (6)

1.一种枳实的综合利用方法，其特征在于，包括以下步骤，

(1)第一次酶解处理：使用复合酶Ⅰ酶解处理枳实原料，获得酶解枳实原料Ⅰ，所述复合酶Ⅰ为质量比为1：(1-2)：(3-4)的纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶组成的混合物；

酶解处理枳实原料的方法为：在枳实原料中加入水，枳实原料和水的用量比为1kg：(1-2)L；然后在水中加入复合酶Ⅰ，复合酶Ⅰ的浓度为0.6-1.2g/L；使用复合酶Ⅰ酶解处理枳实原料，获得酶解枳实原料Ⅰ；

(2)第二次酶解处理：使用复合酶Ⅱ酶解处理(1)中的酶解枳实原料Ⅰ，获得酶解枳实原料Ⅱ，所述复合酶Ⅱ为质量比为1：(1-2)的淀粉酶和蛋白酶组成的混合物；

酶解处理酶解枳实原料Ⅰ的方法为：在酶解枳实原料Ⅰ中加入复合酶Ⅱ，复合酶Ⅱ的浓度为1.0-1.5g/L，使用复合酶Ⅱ酶解处理酶解枳实原料Ⅰ，获得酶解枳实原料Ⅱ；

(3)提取：使用碱性醇溶液为溶剂对(2)中的酶解枳实原料Ⅱ进行提取，获得提取液；

(4)结晶：对(3)中的提取液进行结晶处理，获得橙皮苷结晶。

2.根据权利要求1所述的一种枳实的综合利用方法，其特征在于，使用复合酶Ⅰ酶解处理枳实原料的时长为2-3h，温度为35-45℃，pH值为6.5-7.5。

3.根据权利要求2所述的一种枳实的综合利用方法，其特征在于，使用复合酶Ⅱ酶解处理酶解枳实原料Ⅰ的时长为2-3h，温度为35-37℃，pH值为6.5-7.5。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的一种枳实的综合利用方法，其特征在于，在(1)中，枳实原料为经过粉碎处理的枳实的幼果。

5.根据权利要求4所述的一种枳实的综合利用方法，其特征在于，在(3)中，使用连续逆流法对酶解枳实原料Ⅱ进行提取，枳实原料与碱性醇溶液的用量比为1kg：(3-4)L，提取时间为0.7-1.2h；在碱性醇溶液中，碱的质量分数为1％-3％，醇的体积分数为60％-80％；所述碱为氢氧化钠或者氢氧化钾，所述醇为甲醇或者乙醇。

6.根据权利要求5所述的一种枳实的综合利用方法，其特征在于，在(4)中，结晶处理的pH值为5.5-6.5，温度为20-25℃，时长为6-8h。