CN111035810A - 一种多通道神经导管及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种多通道神经导管的制备方法，包括：对形状记忆材料的纺丝溶液进行静电纺丝，得到无规则纤维层和取向纤维层依次叠加的双层纤维膜；将双层纤维膜裁剪成长条，并收卷在玻璃棒上，使取向纤维层与玻璃棒接触，然后对其高温处理以赋予管状形状；之后于室温下展平，使其保持平面膜形状；先将平面膜形状的小尺寸双层纤维膜置于形变响应温度下，使其变成小直径导管；再在平面膜形状的大尺寸双层纤维膜放置多个小直径导管，置于形变响应温度下变成大直径导管，得到多通道神经导管。该制备方法工艺简单，利用形状记忆材料的形状记忆实现三维多通道导管的快速自成型，且其结构完整性好。本发明还提供了一种多通道神经导管。

Description

一种多通道神经导管及其制备方法
技术领域
本发明涉及生物医用材料技术领域，具体涉及一种多通道神经导管及其制备方法。
背景技术
周围神经长距离缺损的修复是现代临床医学面临的一大难题。周围神经损伤常引起支配区域的感觉和运动功能障碍，致残率较高，影响患者生活质量，给个人和社会带来沉重的负担。组织工程化神经导管为周围神经再生提供了新的手段。利用神经导管替代自体或异体神经移植来修复神经缺损得到广泛的关注。近年来，各种具有复杂内部结构的神经导管相继被报道，其中多通道神经导管在结构上更能仿生天然神经，得到了广泛的研究和关注。
目前，多通道神经导管的制备方法主要是利用模具将细铁丝插入实心神经导管内部，然后待神经导管成型后将细铁丝除去，最终得到多通道结构的神经导管。然而，该制备方法较繁琐，模具的去除过程往往会造成导管结构的损坏，神经导管的管径相对较小，不适用于直径相对较粗的神经缺损的修复。
因此，开发简单高效的方法来快速构建多通道神经导管以修复周围粗神经的长距离缺损是非常有必要的。
发明内容
鉴于此，本发明提供了一种多通道神经导管的制备方法，该制备方法工艺简单，利用形状记忆材料借助静电纺丝技术构建双层纤维膜，通过其形状记忆实现三维导管的快速自成型，多通道导管的成型过程不会因为模具的去除而结构破坏，且所得导管内壁为取向排列的纤维，为神经再生提供取向引导。
第一方面，本发明提供了一种多通道神经导管的制备方法，包括以下步骤：
将形状记忆材料溶于溶剂，得到纺丝溶液；对所述纺丝溶液进行静电纺丝，控制静电纺丝接收装置的旋转速度，得到无规则纤维层和取向纤维层依次叠加的双层纤维膜；
将所述双层纤维膜裁剪成一定尺寸的长条，并收卷在玻璃棒上，使所述取向纤维层与所述玻璃棒接触，且所述玻璃棒的轴向方向和所述取向纤维层的纤维取向方向一致，然后对其进行高温处理以赋予初始管状形状；将所述高温处理后的双层纤维膜取下，于室温下展平，使其保持平面膜形状；
将所述保持平面膜形状的小尺寸双层纤维膜置于形变响应温度下，使其恢复成初始管状形状，得到小直径导管；
将多个所述小直径导管平行放置在所述保持平面膜形状的大尺寸双层纤维膜上，置于形变响应温度下，使所述平面膜形状的大尺寸双层纤维膜恢复成大直径导管，得到多通道神经导管；其中，所述大直径导管包裹多个小直径导管其中，所述纺丝溶液中，所述形状记忆材料的质量浓度为10-15％。
其中，所述形状记忆材料的特性黏度为1-2dL/g。
其中，所述形状记忆材料为聚乳酸-聚碳酸酯共聚物(PLATMC)、聚右旋乳酸-聚碳酸酯共聚物(PDLLATMC)、形状记忆聚氨酯(SMPU)和聚乳酸-聚己内酯共聚物(PLLA-CL)中的一种或多种，但不限于此。
在本发明一实施方式中，所述形状记忆材料为PLATMC，其中，所述聚乳酸(PLA)和聚碳酸酯(TMC)的共聚比为60:40至80:20。所述PLATMC的特性黏度为1-2dL/g。
在本发明另一实施方式中，所述形状记忆材料为共聚比为PDLLATMC，聚右旋乳酸-聚碳酸酯的共聚比为80：20。
其中，所述溶剂为六氟异丙醇、氯仿、二氯甲烷、四氢呋喃、丙酮、二甲基甲酰胺和二甲基亚砜中的一种或多种，但不限于此。
本发明中，所述接收装置在低转速下旋转，得到所述无规则纤维层，所述接收装置在高转速下旋转，得到所述取向纤维层。其中，在所述静电纺丝过程中，形成所述无规则纤维层时，所述静电纺丝接收装置的第一旋转速度为100-500rpm；形成所述取向纤维层时，所述静电纺丝接收装置的第二旋转速度为2000-4000rpm。
其中，所述第一旋转速度下所述纺丝溶液的进样体积为10-15mL；所述第二旋转速度下所述纺丝溶液的进样体积为5-10mL。
进一步地，所述静电纺丝参数还包括：纺丝电压为14-17kV，所述纺丝溶液的推进速度为1.0-1.8mL/h；装载所述纺丝溶液的注射器针头到所述静电纺丝接收装置的距离为10-15cm。
其中，所述双层纤维膜的厚度为0.2-0.3mm；所述无规则纤维层的厚度范围为0.15-0.22mm，所述取向纤维层的厚度为0.05-0.15mm。
其中，在将保持平面膜形状的小尺寸双层纤维膜置于形变响应温度之前，还包括：在保持平面膜形状的小尺寸双层纤维膜的取向纤维层表面接种功能细胞。所述功能细胞可以选自雪旺细胞、神经干细胞、骨髓间充质干细胞中的一种或多种。
其中，在将多个所述小直径导管平行放置在保持平面膜形状的大尺寸双层纤维膜之前，还包括：在保持平面膜形状的大尺寸双层纤维膜的取向纤维层表面接种功能细胞。
本发明能在所述多通道神经导管的成型过程中，实现活的功能细胞在其中的均匀分布和高密度负载，进一步得到负载细胞的生物活性多通道神经导管。在本发明的其他实施方式中，还可以在所述多通道神经导管成型之后，再接种功能细胞。
其中，多个所述小直径导管的放置方向与所述大尺寸双层纤维膜的长度方向平行。也就是，多个小直径导管的所述取向纤维层的纤维取向方向平行于所述大尺寸双层纤维膜的所述取向纤维层的纤维取向方向。
本发明中，在将所述双层纤维膜收卷在玻璃棒上时，所述玻璃棒的轴向方向和所述取向纤维层的纤维取向方向一致。这里，“取向纤维层的纤维取向”也即是所述双层纤维膜的长度方向。所述小尺寸双层纤维膜、大尺寸双层纤维膜是以它们在垂直纤维取向方向上的尺寸来论，也即是，以它们最终形成的导管的直径大小来论。其中，所述大直径导管、小直径导管的直径可以通过收卷时所用玻璃棒的直径来控制。可选地，所述双层纤维膜裁剪成的长条的宽度大于最终形成的导管的周长。
其中，所述高温处理的温度为60-80℃。所述高温处理可以将形状记忆材料形成的双层纤维膜进行塑形，赋予其初始形状。可选地，所述高温处理的时间为20-40min。
本发明中，所述形状记忆材料的形变响应温度(即玻璃化转变温度)高于室温，而不超过机体体温。优选地，所述形变响应温度为30-37℃。进一步优选为32-37℃，更优选为35-37℃。其中，所述接种功能细胞时的温度低于所述形变响应温度。优选为室温。所述室温为20-27℃，优选为20-25℃。
本发明中，所述形状记忆材料的形变转变温度接近机体体温37℃，这样后续在形状记忆材料的纤维膜上接种功能细胞后再让其响应温度刺激时，可以将功能细胞很好地负载到各导管中，又不影响所述功能细胞的活性。
本发明提供的多通道神经导管的制备方法，该制备方法利用温度响应的形状记忆材料借助静电纺丝技术构建双层纤维膜，先赋予其初始管状形状，再使其保持平面膜状，而后通过形状记忆材料的形状记忆特性使在接近机体体温的条件下实现从二维平面膜到三维导管的快速自成型，导管的成型过程不会因为模具玻璃棒的去除而结构破坏，且所得导管内壁为取向排列的纤维，可以为神经再生提供取向引导。此外，本发明还能在多通道神经导管的成型过程中，实现活细胞在保持平面膜形状的双层纤维膜上的负载，进一步得到细胞均匀且高密度负载的生物活性神经导管。
所述制备方法可以简便快速地构建多通道神经导管，并能很好地控制各导管的直径及多通道个数，可以用于不同部位、不同直径的周围神经缺损的桥接修复，尤其适用于粗神经长距离缺损的修复。
第二方面，本发明提供了一种多通道神经导管，包括大直径导管和多个小直径导管，所述大直径导管包裹平行放置的多个小直径导管，其中，所述小直径导管和所述大直径导管为形状记忆材料的双层纤维膜，沿所述小直径导管的管壁向管中心的方向，所述小直径导管包括依次叠加的无规则纤维层和取向纤维层，沿所述大直径导管的管壁向管中心的方向，所述大直径导管包括依次叠加的无规则纤维层和取向纤维层。
本发明中，所述多通道神经导管中，小直径导管的个数即代表所述多通道神经导管的通道数。可选地，所述大直径导管的直径在2-9mm。优选为3-9mm。本发明中所述大直径导管的直径较大，较适用于直降相对较粗的周围神经损伤。例如，所述大直径导管的直径可达9mm。
可选地，所述小直径导管的直径范围在0.5-3mm。
其中，所述小直径导管和所述大直径导管中的至少一种的取向纤维层上粘附有功能细胞。所述功能细胞可以选自雪旺细胞、神经干细胞、骨髓间充质干细胞中的一种或多种。
本发明第二方面提供的所述多通道神经导管，大直径导管、小直径导管的内壁为取向排列的纤维，可为神经再生提供定向引导，所述多通道神经导管的多通道结构可以为功能细胞提供更多生长空间，防止纤维束分散，应用于周围粗神经的长距离缺损，具有良好的应用前景。
本发明的优点将会在下面的说明书中部分阐明，一部分根据说明书是显而易见的，或者可以通过本发明实施例的实施而获知。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对本发明实施例中所需要使用的附图进行说明。
图1为本发明实施例1中形状记忆材料的双层纤维膜的制备流程示意图；
图2为本发明实施例1中双层纤维膜的形貌和DSC测试曲线；
图3为本发明实施例2中保持平面膜形状的双层纤维膜在37℃下响应温度自成型为多通道神经导管的过程；
图4为雪旺细胞在实施例3中的多通道神经导管中培养3天和5天后的细胞形态图；
图5为雪旺细胞在实施例4中的多通道神经导管中的分布图。
具体实施方式
以下是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也视为本发明的保护范围。
实施案例1：形状记忆材料的双层纤维膜的制备
(1)称取聚合比例70:30的聚乳酸-聚碳酸酯共聚物(PLATMC)1.2g，PLATMC的特性粘度为1.37dL/g；将其溶解于10mL的六氟异丙醇中，置于磁力搅拌器上搅拌至其完全溶解，得到PLATMC质量浓度为12％的纺丝溶液；
(2)用10mL的注射器抽取上述纺丝溶液，并固定在推进泵上；然后将高压电源的正极接到所述注射器的针头上，负极连接到接收装置(接收装置为转速可控的接收滚轴)；启动所述推进泵，对所述纺丝溶液进行静电纺丝，在高压静电的作用下，纺丝溶液形成纤维，调节接收滚轴的旋转速度可以控制纤维的取向性。先将滚轴低转速旋转形成无规则纤维层，再在高转速下旋转，形成取向纤维层，最终得到无规则纤维层和取向纤维层依次叠加的双层纤维膜。
其中，所述静电纺丝的参数包括：纺丝电压为16kV，纺丝溶液的推进速度范围为1.8mL/h；所用注射器的针头为22G不锈钢针头，注射器的针头到接收滚轴的距离范围为12cm；接收滚轴的低转速为200rpm，低转速下所述纺丝溶液的进样体积为15mL；接收滚轴的高转速为2600rpm，高转速下纺丝溶液的进样体积为5mL。
本实施例1制得的双层纤维膜的厚度为0.2mm；其中，无规则纤维层的厚度为0.15mm，取向纤维层的厚度为0.05mm。
通过扫描电子显微镜观察双层纤维膜的形貌并利用差示扫描量热仪(DSC)测定双层纤维膜的玻璃化转变温度，即形变响应温度。所制纤维的形貌和DSC测试曲线如图2所示。由图2可以看出，PLATMC纤维膜的形貌良好，直径均一，无串珠形成；该双层纤维膜的玻璃化转变温度Tg(即形变的响应温度)为36.18℃，非常接近机体体温。
实施例2
一种多通道神经导管的制备方法，包括：
(1)制备无规则纤维层和取向纤维层依次叠加的PLATMC双层纤维膜：具体步骤同实施例1；
(2)将上述制备的双层纤维膜裁剪成一定大小的长方形条带，纤维取向方向为条带的长边。裁减四个小的条带，其长宽分别为10mm和2.2mm；一个大的条带，其长宽分别为10mm和8.2mm。将小尺寸的条带卷曲在直径为0.6mm的玻璃棒上，将大尺寸的条带卷曲在直径为2mm的玻璃棒上，注意使它们的取向纤维层与玻璃棒接触，且纤维取向方向与玻璃棒的轴向方向一致；
然后将它们分别置于80℃的烘箱中进行高温塑形处理20min，以赋予初始管状形状；之后将高温处理后的双层纤维膜从玻璃棒上取下，并于室温(25℃)下展平，使其保持平面膜形状。
(3)将四个小尺寸的纤维膜条带置于37℃的水中，纤维膜会响应温度变化发生形状记忆，恢复初始管状结构，变成小直径导管；
将得到的四个小直径导管平行放置于大尺寸的纤维膜条带上，再转移至37℃条件下进行温度刺激，底层的平面膜形状的大尺寸纤维膜响应温度变化，发生形状记忆，卷曲恢复成初始管状形状，并将其上的四个小直径导管包裹于管腔中，得到一个大管套四个小管的结构，即制得四通道神经导管。
该多通道神经导管的自成型过程见图3。从图3中可以看出，暂时保持平面膜形状的纤维膜能很好地响应温度变化发生形状记忆，快速实现从二维平面膜到三维导管的自成型。
实施例3
一种多通道神经导管的制备方法，包括：
(1)称取聚合比例80:20的聚乳酸-聚碳酸酯共聚物(PLATMC)1.0g，PLATMC的特性粘度为1.2dL/g，将其溶解于10mL的四氢呋喃中，置于磁力搅拌器上搅拌至其完全溶解，得到PLATMC质量浓度为10％的纺丝溶液；
用10mL的注射器抽取上述纺丝溶液，并固定在推进泵上，设置推进速度为1.5mL/h，纺丝电压为14kV，利用旋转的滚轴作接收装置，注射器的针头到接收滚轴的距离范围为10cm，先调节滚轴的转速为300rpm，制备出一层无规则纤维层，再调节滚轴的转速至3000rpm，制备出一层取向纤维层，最终得到无规则纤维层(厚度0.12mm)和取向纤维层(厚度0.08mm)依次叠加的双层纤维膜。
(2)将上述制备的双层纤维膜裁剪成一定大小的长方形条带，纤维取向方向为条带的长边。裁减四个小的条带，其长宽分别为10mm和2.2mm；一个大的条带，其长宽分别为10mm和8.2mm。将小尺寸的条带卷曲在直径为0.6mm的玻璃棒上，将大尺寸的条带卷曲在直径为2mm的玻璃棒上，注意使它们的取向纤维层与玻璃棒接触，且纤维取向方向与玻璃棒的轴向方向一致；
然后将它们分别置于75℃的烘箱中进行高温塑形处理20min，以赋予初始管状形状；之后将高温处理后的双层纤维膜从玻璃棒上取下，并于室温(25℃)下展平，使其保持平面膜形状。
(3)将上述展平的纤维膜条带于75％的乙醇溶液中浸泡6小时，以灭菌处理，之后用PBS清洗3次，去除残留的乙醇。于室温(25℃)条件下，在四个小尺寸和一个大尺寸的纤维膜上分别接种雪旺细胞，小尺寸纤维膜的细胞接种量为每张膜0.5万个细胞，大尺寸纤维膜的细胞接种量为每张膜1万个细胞。室温下(25℃)放置24小时，使细胞在纤维膜表面充分粘附。
将载有雪旺细胞四个小尺寸的纤维膜条带转移至37℃细胞培养箱中，纤维膜会响应温度变化发生形状记忆，自动恢复初始管状结构，得到载有雪旺细胞的小直径导管；
将得到的四个小直径导管平行放置于载有雪旺细胞的大尺寸的纤维膜条带上，同样转移至37℃的细胞培养箱中进行温度刺激，底层的大尺寸纤维膜响应温度变化，发生形状记忆，卷曲恢复成初始管状形状，并将其上的四个小直径导管包裹于管腔中，得到一个大管套四个小管的结构，即制得负载雪旺细胞的四通道神经导管。
为观察雪旺细胞在四通道神经导管中的细胞形态，将负载雪旺细胞的四通道神经导管分别体外培养3天和5天后，用4wt％的多聚甲醛溶液对细胞固定2小时，之后用PBS清洗3次，再用稀释500倍的Triton-X100处理10min，再用PBS清洗3次后加入罗丹明鬼笔环肽(1:200稀释)避光处理40min，对细胞骨架染色(罗丹明鬼笔环肽可将细胞骨架染成绿色)；之后用PBS清洗3次，加入4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI，稀释100倍)进行避光处理5-10min，对细胞核进行染色。染色结束后，用PBS清洗3次，并将导管剖开，在荧光显微镜下观察细胞形态，结果见附图4。
从图4可以看出，雪旺细胞表现出较好的生长状态，细胞沿导管内壁的纤维取向方向呈定向延伸，这表明取向的导管内壁对细胞的生长具有定向引导作用。
实施例4
一种多通道神经导管的制备方法，包括：
(1)称取聚合比例80:20的聚乳酸-聚碳酸酯共聚物(PDLLATMC)1.5g，将其溶解于10mL的二甲基甲酰胺中，置于磁力搅拌器上搅拌至其完全溶解，得到PLATMC质量浓度为15％的纺丝溶液；为了后续观察细胞在导管中的分布，在该纺丝溶液中会添加尼罗红染料；
用10mL的注射器抽取上述纺丝溶液，并固定在推进泵上，设置推进速度为1.3mL/h，纺丝电压为15kV，利用旋转的滚轴作接收装置，注射器的针头到接收滚轴的距离范围为11cm，先调节滚轴的转速为320rpm，制备出一层无规则纤维层，再调节滚轴的转速至3500rpm，制备出一层取向纤维层，最终得到无规则纤维层(厚度0.2mm)和取向纤维层(厚度0.1mm)依次叠加的双层纤维膜。
(2)将上述制备的双层纤维膜裁剪成一定大小的长方形条带，纤维取向方向为条带的长边。裁减四个小的条带，其长宽分别为12mm和4mm；一个大的条带，其长宽分别为12mm和30mm。将小尺寸的条带卷曲在直径为1mm的玻璃棒上，将大尺寸的条带卷曲在直径为9mm的玻璃棒上，注意使它们的取向纤维层与玻璃棒接触，且纤维取向方向与玻璃棒的轴向方向一致；
然后将它们分别置于70℃的烘箱中进行高温塑形处理30min，以赋予初始管状形状；之后将高温处理后的双层纤维膜从玻璃棒上取下，并于室温(25℃)下展平，使其保持平面膜形状。
(3)将上述展平的纤维膜条带于75％的乙醇溶液中浸泡6小时，以灭菌处理，之后用PBS清洗3次，去除残留的乙醇。于室温(25℃)条件下，在四个小尺寸和一个大尺寸的纤维膜上分别接种雪旺细胞，小尺寸纤维膜的细胞接种量为每张膜0.5万个细胞，大尺寸纤维膜的细胞接种量为每张膜1万个细胞。室温下(25℃)放置24小时，使细胞在纤维膜表面充分粘附。
将载有雪旺细胞四个小尺寸的纤维膜条带转移至37℃细胞培养箱中，纤维膜会响应温度变化发生形状记忆，自动恢复初始管状结构，得到载有雪旺细胞的小直径导管；
将得到的四个小直径导管平行放置于载有雪旺细胞的大尺寸的纤维膜条带上，同样转移至37℃的细胞培养箱中进行温度刺激，底层的大尺寸纤维膜响应温度变化，发生形状记忆，卷曲恢复成初始管状形状，并将其上的四个小直径导管包裹于管腔中，得到一个大管套四个小管的结构，即制得负载雪旺细胞的四通道神经导管。
为观察雪旺细胞在四通道神经导管中的分布，将本实施例4负载雪旺细胞的四通道神经导管体外培养5天后，用4wt％的多聚甲醛溶液对细胞固定2小时，之后用PBS清洗3次，再用稀释500倍的Triton-X100处理10min，用PBS清洗3次后，加入罗丹明鬼笔环肽(1:200稀释)避光处理40min，对细胞骨架染色(罗丹明鬼笔环肽可将细胞骨架染成绿色)，染色结束后用PBS清洗3次。将染色后的负载细胞的神经导管用30％(w/v)的蔗糖溶液脱水处理24小时。用冷冻切片包埋剂(OCT)在-80℃下进行冷冻包埋24小时，再用冷冻切片机对包埋好的导管进行冷冻切片(横切和纵切)，用荧光显微镜观察细胞在导管中的分布，结果如图5所示。
从图5中可以看出，多通道神经导管的各导管是呈红色，细胞是呈绿色，在二者的合并通道，无论是对该多通道神经导管横切还是竖切，均能观察到雪旺细胞在该神经导管的各个通道中均匀分布生长。
以上所述是本发明的示例性实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对其做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也视为本发明的保护范围。此外，尽管本说明书中使用了一些特定的术语，但这些术语只是为了方便说明，并不对本发明构成任何限制。

Claims (13)

1.一种多通道神经导管的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将形状记忆材料溶于溶剂，得到纺丝溶液；对所述纺丝溶液进行静电纺丝，控制静电纺丝接收装置的旋转速度，得到无规则纤维层和取向纤维层依次叠加的双层纤维膜；
将所述双层纤维膜裁剪成一定尺寸的长条，并收卷在玻璃棒上，使所述取向纤维层与所述玻璃棒接触，且所述玻璃棒的轴向方向和所述取向纤维层的纤维取向方向一致，然后对其进行高温处理以赋予初始管状形状；将所述高温处理后的双层纤维膜取下，于室温下展平，使其保持平面膜形状；
先将保持平面膜形状的小尺寸双层纤维膜置于形变响应温度下，使其恢复成初始管状形状，得到小直径导管；再将多个所述小直径导管平行放置在保持平面膜形状的大尺寸双层纤维膜上，置于形变响应温度下，使所述平面膜形状的大尺寸双层纤维膜恢复成大直径导管，得到多通道神经导管；其中，所述大直径导管包裹多个小直径导管。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在所述静电纺丝过程中，形成所述无规则纤维层时，所述静电纺丝接收装置的第一旋转速度为100-500rpm；形成所述取向纤维层时，所述静电纺丝接收装置的第二旋转速度为2000-4000rpm。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述静电纺丝的参数包括：纺丝电压为14-17kV，所述纺丝溶液的推进速度为1.0-1.8mL/h；所述第一旋转速度下所述纺丝溶液的进样体积为10-15mL；所述第二旋转速度下所述纺丝溶液的进样体积为5-10mL。
4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述双层纤维膜的厚度为0.2-0.3mm；所述无规则纤维层的厚度范围为0.15-0.22mm，所述取向纤维层的厚度为0.05-0.15mm。
5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述形状记忆材料在所述纺丝溶液中的质量浓度为10-15％。
6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述形变响应温度为30-37℃。
7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述高温处理的温度为60-80℃。
8.如权利要求1-7任一项所述的制备方法，其特征在于，在将保持平面膜形状的小尺寸双层纤维膜置于形变响应温度之前，还包括：在保持平面膜形状的小尺寸双层纤维膜的取向纤维层表面接种功能细胞，其中，所述功能细胞为雪旺细胞、神经干细胞和骨髓间充质干细胞中的一种或多种。
9.如权利要求1-7任一项所述的制备方法，其特征在于，在将多个所述小直径导管平行放置在保持平面膜形状的大尺寸双层纤维膜之前，还包括：在保持平面膜形状的大尺寸双层纤维膜的取向纤维层表面接种功能细胞，其中，所述功能细胞为雪旺细胞、神经干细胞和骨髓间充质干细胞中的一种或多种。
10.一种多通道神经导管，其特征在于，包括大直径导管和多个小直径导管，所述大直径导管包裹平行放置的多个小直径导管，其中，所述小直径导管和所述大直径导管为形状记忆材料的双层纤维膜，沿所述小直径导管的管壁向管中心的方向，所述小直径导管包括依次叠加的无规则纤维层和取向纤维层，沿所述大直径导管的管壁向管中心的方向，所述大直径导管包括依次叠加的无规则纤维层和取向纤维层。
11.如权利要求10所述的多通道神经导管，其特征在于，所述双层纤维膜的厚度为0.2-0.3mm；所述无规则纤维层的厚度范围为0.15-0.22mm，所述取向纤维层的厚度为0.05-0.15mm。
12.如权利要求10所述的多通道神经导管，其特征在于，所述大直径导管的直径在2-9mm。
13.如权利要求10所述的多通道神经导管，其特征在于，所述小直径导管和所述大直径导管中的至少一种的取向纤维层上粘附有功能细胞。
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