CN111035797B - 一种同时具备抗菌和止血功能的软组织用粘合剂 - Google Patents

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Abstract

本发明提出了一种同时具备抗菌和止血功能的软组织用粘合剂，由以下质量百分比的原料组成：氧化羧甲基纤维素25％和超支化多肽聚乙二醇接枝共聚物25％，余量为磷酸盐缓冲盐水；一种同时具备抗菌和止血功能的软组织用粘合剂的制备方法，包括以下步骤：(1)在室温下将氧化羧甲基纤维素和超支化多肽聚乙二醇接枝共聚物分别溶解在pH 7.2‑7.5的磷酸盐缓冲盐水中，配成25g/L的溶液；(2)将步骤(1)得到的氧化羧甲基纤维素和超支化多肽聚乙二醇接枝共聚物溶液分别装入双管注射器，以质量比为1：1和1：2均匀混合后涂覆到伤口处，通过席夫碱反应，室温下几十秒内就能得到基于多糖和超支化多肽的双组分高强度快速组织粘合剂。

Description

一种同时具备抗菌和止血功能的软组织用粘合剂
技术领域
本发明属于医用生物材料技术领域，涉及一种软组织用粘合剂，具体涉及一种同时具备抗菌和止血功能的软组织用粘合剂。
背景技术
医用组织粘合剂主要用于整容和各种创伤伤口缝合等外科手术中，对人体生物组织具有快速粘合、促进伤口愈合等作用，可以辅助或部分代替缝合线。医用粘合剂的使用历史悠久，在临床中有十分重要的作用，具体可分为软组织用粘合剂、牙科用粘合剂、骨用粘合剂和皮肤用粘合剂等。其中，生物体软组织由于其布满丰富毛细血管的实质性结构，缝合线不能对伤口达到立即的止血作用，且缝合过程可能会造成组织损坏甚至干扰组织功能复原。相对于缝合线，高效安全的软组织用粘合剂操作更加简便，甚至不必麻醉，具有立即的止血、密封作用，手术耗时短。因此，对于各类软组织用粘合剂的开发成为了近些年国内外的研究热点，但真正符合临床要求的理想的医用粘合剂还没有出现，目前的各类粘合剂都或多或少的存在着自身的不足，如粘合强度不足、功能单一等。
超支化多肽可以为制备性能优异、高度可控的医用组织粘合剂材料提供新思路。超支化多肽生物相容性良好，并且在人体内可以完全被降解。这种化合物具有单分散结构，制备中可以精确控制其分子量、代数和外围功能性端基的类型，所以在各类生物材料的研究制备中，超支化大分子已经成为了线性聚合物热门的替代材料。此外，超支化大分子独特的刚性树枝状结构大大降低了其溶液粘度，可以在低聚合物浓度下形成交联度高、同质性高的水凝胶网络，同时为组织粘合剂提供了更好的流动性，避免了粘合剂在注射管道中的堵塞，能够更精确地涂抹在创伤区域。除此之外，基于赖氨酸的超支化多肽还具有广谱的抗菌性。在生理pH下，赖氨酸超支化多肽外围的大量氨基会质子化为铵根离子，因此可以通过接触而捕获细胞膜带负电荷的细菌，达到抗菌作用。而羧甲基纤维素这种多糖大分子不仅生物相容性好，还具有内在的止血功能，被大量用于止血敷料的制备。只需对这两种材料进行简单改性，就有可能获得一种理想的同时具备抗炎杀菌和止血功效的医用软组织粘合剂。
发明内容
未解决现有技术中存在的问题，本发明提供了一种同时具备抗菌和止血功能的软组织用粘合剂，制备方法简单，可行性强，可控性高，具有易调节的化学和物理性质，能够快速牢固的粘附到组织上，提供完全的伤口闭合，同时具有足够的粘弹性和机械强度，可以吸收一定量的血液和组织渗出液达到迅速止血的功效，并具有广谱的抗菌性能以防止伤口感染，加速伤口的愈合。
为实现上述目的，本发明的技术方案是：
一种同时具备抗菌和止血功能的软组织用粘合剂，由以下质量百分比的原料组成：氧化羧甲基纤维素25％和超支化多肽聚乙二醇接枝共聚物25％，余量为磷酸盐缓冲盐水。
进一步的，所述氧化羧甲基纤维素和超支化多肽聚乙二醇接枝共聚物的质量比例为1：1或1：2。
进一步的，所述的氧化羧甲基纤维素分子量为25万；脱乙酰度为90％，按照以下步骤制备：将高碘酸钠水溶液避光逐滴加入到羧甲基纤维素水溶液中进行醛基化反应，然后透析冷冻干燥，得到氧化羧甲基纤维素，其中高碘酸钠与羧甲基纤维素的摩尔比为1：1。
进一步的，所述超支化多肽聚乙二醇接枝共聚物中的超支化多肽为赖氨酸三代肽类树状分子，两端氨基封端的聚乙二醇分子量为2000，按照以下步骤制备：
(1)甲酯保护的赖氨酸二代肽类树状分子的制备：将甲酯保护的赖氨酸、Boc保护的赖氨酸、EDCI和HOBT加入反应容器中，抽真空-氮气循环三次，然后加入无水二氯甲烷搅拌溶解，接着在冰浴条件下加入DIEA，在室温下反应24小时，收集反应溶液，旋蒸除去溶剂，并加入氯仿溶解产物，再依次用HC1、NaOH水溶液和饱和NaCl溶液洗洚，收集有机相，加入无水硫酸镁干燥，旋蒸浓缩，纯化，得甲酯保护的赖氨酸肽类二代树状分子；其中甲酯保护的赖氨酸、Boc保护的赖氨酸、EDCI，HOBT和DIEA的摩尔比为1:2-3:2-3:2-3:6-9，将上述产物置于反应容器中，抽真空-氮气循环三次，在氮气状态下加入二氯甲烷搅拌溶解，在冰浴条件下加入三氟乙酸，之后在室温下搅拌反应6-8小时，减压除去溶剂及三氟乙酸，得到的产物在冰无水乙醚中沉淀，干燥后得脱Boc保护后的赖氨酸二代肽类树状分子；
(2)甲酯保护的赖氨酸三代肽类树状分子的制备：将(1)得到的产物、Boc保护的赖氨酸、EDCI和HOBT加入反应容器中，抽真空-氮气循环三次，然后加入无水二氯甲烷搅拌溶解，接着在冰浴条件下加入DIEA，在室温下反应48小时，收集反应溶液，旋蒸除去溶剂，并加入氯仿溶解产物，再依次用HC1、NaOH水溶液和饱和NaCl溶液洗洚，收集有机相，加入无水硫酸镁干燥，旋蒸浓缩，纯化，得甲酯、Boc保护的赖氨酸肽类三代树状分子；其中脱Boc保护后的赖氨酸二代肽类树状分子、Boc保护的赖氨酸、EDCI，HOBT和DIEA的摩尔比为1:6-8:6-8:6-8:15-18；
(3)脱甲酯保护：将(2)得到的产物溶解于NaOH/MeOH溶液中，室温下搅拌反应6-7小时后，旋蒸除去混合物中的MeOH，加入氯仿溶解残余物，在搅拌状态下滴加HC1调节溶液pH值至2-3，收集有机相，加入无水硫酸镁，干燥过夜，过滤后旋蒸除去溶剂，减压浓缩后得脱甲酯后的Boc保护赖氨酸肽类三代树状分子；
(4)连接氨基聚乙二醇：将(3)得到的产物、氨基聚乙二醇、HBTu和HOBT置于反应容器中，抽真空-氮气循环三次，在氮气状态下加入二氯甲烷搅拌溶解，在冰浴条件下加入DIEA，在室温下反应24-48小时，收集反应溶液，旋蒸除去溶剂，并加入乙醚沉淀产物，干燥后得Boc保护的赖氨酸三代肽类树状分子与聚乙二醇接枝共聚物。其中脱甲酯后的Boc保护赖氨酸肽类三代树状分子，氨基聚乙二醇、HBTu，HOBT和DIEA的摩尔比为2-3:1-1.5:2-4:2-4:6-9；将上述产物置于反应容器中，抽真空-氮气循环三次，在氮气状态下加入二氯甲烷搅拌溶解，在冰浴条件下加入三氟乙酸，之后在室温下搅拌反应6-8小时，减压除去溶剂及三氟乙酸，得到的产物在冰无水乙醚中沉淀，干燥后得脱Boc保护后的赖氨酸三代肽类树状分子与聚乙二醇接枝共聚物。
进一步的，该粘合剂使用的工艺参数为：反应温度为室温，pH为7.2-7.5，固化时间为5-120秒。
一种同时具备抗菌和止血功能的软组织用粘合剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)在室温下将氧化羧甲基纤维素和超支化多肽聚乙二醇接枝共聚物分别溶解在pH 7.2-7.5的磷酸盐缓冲盐水中，配成25g/L的溶液；
(2)将步骤(1)得到的氧化羧甲基纤维素和超支化多肽聚乙二醇接枝共聚物溶液分别装入双管注射器，以质量比为1：1和1：2均匀混合即得到一种同时具备抗菌和止血功能的软组织用粘合剂。
本发明的有益效果是：
(1)本发明的软组织用粘合剂所选原料分别为天然多糖和超支化多肽，模仿人体细胞外基质的多糖/多肽结构，生物相容性良好，可以完全被人体吸收降解。
(2)本发明的软组织用粘合剂选用羧甲基纤维素为原料，具有内在的快速的止血功能。
(3)本发明的软组织用粘合剂选用赖氨酸超支化多肽为原料，具有高度可控的单分散结构，制备中可以精确控制其分子量、代数和外围功能性端基的类型。其独特的刚性树枝状结构可以大大降低了成胶前液的粘度，可以在低聚合物浓度下形成交联度高、同质性高的水凝胶网络，同时为组织粘合剂提供了更好的流动性，避免了粘合剂在注射管道中的堵塞，能够更精确地涂抹在创伤区域。除此之外，基于赖氨酸肽类树状分子还具有广谱的抗菌性。在生理pH下，赖氨酸肽类树状分子外围的大量氨基会质子化为铵根离子，因此可以通过接触而捕获细胞膜带负电荷的细菌，达到抗菌作用。
(4)本发明的软组织用粘合剂是基于醛基和氨基的席夫碱反应固化粘合在组织表面的，凝胶、粘合过程温和且安全。
(5)本发明的软组织用粘合剂具有非常简单并且易控制的凝胶化步骤，两组分可以通过双管注射器涂抹在伤口表面，应用便捷安全。
(6)本发明的软组织用粘合剂具有易调节的化学和物理性质，能够快速牢固的粘附到组织上，提供完全的伤口闭合，同时具有足够的粘弹性和机械强度，可以吸收一定量的血液和组织渗出液达到迅速的止血功效，并具有广谱的抗菌性能以防止伤口感染，加速伤口的愈合。制备这种性能优异同时可控程度高的医用组织粘合剂对于外科手术效率的提高，病人承受痛苦的减轻是非常有价值的，易于广泛推广使用。
(7)本发明的软组织用粘合剂可作为一种医用组织粘合剂、密封剂或止血剂广泛用于临床创伤修复。可适用于心血管、普外科、整形科、神经外科、眼科手术过程中的伤口组织粘合，也适用于创面渗血和小静脉出血过程中的立即止血，还可用于疝气补片的固定，牢固持久地密封缺损组织，防止组织粘连，促进伤口愈合。
附图说明
图1为本发明实施例中抗菌性能测试结果图；
图2为本发明实施例中止血性能测试结果图，其中(a)是经过不同处理的SD大鼠出血情况图，(b)是30s内经过不同处理的SD大鼠出血量柱状图，(c)是不同时间点不同处理的SD大鼠出血量折线图；
图3为本发明实施例中动物活体伤口粘合性能测试结果图。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明的实质性内容作进一步详细的描述，但这些实施例并不用来限制本发明。
实施例1
一种基于多糖和超支化多肽的同时具备抗菌和止血功效的软组织用粘合剂，由以下质量百分比的原料组成：氧化羧甲基纤维素25％和超支化多肽聚乙二醇接枝共聚物25％，余量为磷酸盐缓冲盐水。
所述的氧化羧甲基纤维素分子量为25万，脱乙酰度为90％。
所述超支化多肽聚乙二醇接枝共聚物中的超支化多肽为赖氨酸三代肽类树状分子，两端氨基封端的聚乙二醇分子量为2000。
所述氧化羧甲基纤维素和超支化多肽聚乙二醇接枝共聚物的质量比例为1：1。
该软组织用粘合剂的使用温度为室温，使用pH为7.2-7.5。
实施例2
一种基于多糖和超支化多肽的同时具备抗菌和止血功效的软组织用粘合剂，由以下质量百分比的原料组成：氧化羧甲基纤维素25％和超支化多肽聚乙二醇接枝共聚物25％，余量为磷酸盐缓冲盐水。
所述的氧化羧甲基纤维素分子量为25万，脱乙酰度为90％。
所述超支化多肽聚乙二醇接枝共聚物中的超支化多肽为赖氨酸三代肽类树状分子，两端氨基封端的聚乙二醇分子量为2000。
所述氧化羧甲基纤维素和超支化多肽聚乙二醇接枝共聚物的质量比例为1：2。
该软组织用粘合剂的使用温度为室温，使用pH为7.2-7.5。
实施例3
本实施例为实施例1的软组织用粘合剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)在室温下将氧化羧甲基纤维素和超支化多肽聚乙二醇接枝共聚物分别溶解在pH 7.2-7.5的磷酸盐缓冲盐水中，配成25g/L的溶液；
(2)将步骤(1)得到的氧化羧甲基纤维素和超支化多肽聚乙二醇接枝共聚物溶液分别装入双管注射器，以质量比为1：1均匀混合后涂覆到伤口处，通过席夫碱反应，室温下得到同时具备抗菌和止血功效的软组织用粘合剂，牢固持久地粘附于伤口表面。
实施例4
本实施例为实施例2的组织粘合剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)在室温下将氧化羧甲基纤维素和超支化多肽聚乙二醇接枝共聚物分别溶解在pH 7.2-7.5的磷酸盐缓冲盐水中，配成25g/L的溶液；
(2)将步骤(1)得到的氧化羧甲基纤维素和超支化多肽聚乙二醇接枝共聚物溶液分别装入双管注射器，以质量比为1：2均匀混合后涂覆到伤口处，通过席夫碱反应，室温下得到同时具备抗菌和止血功效的软组织用粘合剂，牢固持久地粘附于伤口表面。
以上对本发明做了示例性的描述，应该说明的是，在不脱离本发明的核心的情况下，任何简单的变形、修改或者其他本领域技术人员能够不花费创造性劳动的等同替换均落入本发明的保护范围。
性能评估
将实施例1和实施例2所得粘合剂进行性能测试。
1.抗菌性能测试
将100μL浓度为104CFU ml-1的革兰氏阴性大肠杆菌和革兰氏阳性金黄色葡萄球菌接种到实施例1和实施例2的软组织用粘合剂表面，37℃下孵育过夜，通过检测OD625nm来评估本发明的软组织用粘合剂的抗菌能力。使用线型聚赖氨酸EPL为阳性对照组，培养皿表面为阴性对照组。如图1所示，本发明的软组织用粘合剂显示出优异的杀菌能力，且赖氨酸超支化多肽质量比越高，杀菌能力越高，且均优于线型赖氨酸的抗菌性能。
2.止血性能测试
通过腹膜内注射水合氯醛镇静SD大鼠，打开胸腔，将称重的干燥滤纸垫在大鼠的肝脏下方，使用18G注射器针头在肝脏上刺穿出血，然后立即在出血部位涂抹本发明组织粘合剂和Coseal作为止血剂。在两分钟内每隔30秒测量带血液的滤纸的重量，并拍照。未经任何处理的大鼠出血肝脏作为对照组。如图2所示，其中(a)是经过不同处理的SD大鼠出血情况图，(b)是30s内经过不同处理的SD大鼠出血量柱状图，(c)是不同时间点不同处理的SD大鼠出血量柱状图，本发明的软组织用粘合剂处理的肝脏在30秒内出血停止，显示出明显优于Coseal的止血能力。
3.动物活体伤口粘合性能测试
通过腹膜内注射水合氯醛镇静SD大鼠，然后建立皮肤切口模型。将大鼠背部切口区域剃毛后用75％乙醇棉球灭菌，接着在大鼠的背部制作六个全厚度伤口(长1.5cm，深0.5cm)。将本发明的软组织用粘合剂和Coseal分别涂抹在其中四个伤口上，并用手指夹住约2分钟保证伤口完全闭合，同时通过常规尼龙缝合线缝合剩下的两个伤口。在制作切口模型后的第7天和第14天，拍照，分别处死两组大鼠，并切除伤口部位的皮肤组织用于组织学分析。如图3所示，用本发明的粘合剂处理的皮肤伤口在2周后完全愈合，且没有留下疤痕。与常规缝合线处理的和Coseal粘合的伤口相比，本发明的粘合剂处理的伤口部位周围长出了浓密毛发，表明其良好的生物相容性，优异的伤口粘合能力和加速伤口愈合的性能。
综上所述，本发明提供了一种基于多糖和超支化多肽的双组分高强度快速组织粘合剂，具有易调节的化学和物理性质，能够快速牢固的粘附到组织上，提供完全的伤口闭合，同时具有足够的粘弹性和机械强度，可以吸收一定量的血液和组织渗出液达到迅速止血的功效，并具有广谱的抗菌性能以防止伤口感染，加速伤口的愈合。这种组织粘合剂制备方法简单，可行性强，可控性高，具有巨大的临床应用潜力。

Claims (4)

1.一种同时具备抗菌和止血、促进愈合和毛发生长功能的软组织用粘合剂，其特征在于，由以下质量百分比的原料组成：氧化羧甲基纤维素25%和超支化多肽聚乙二醇接枝共聚物，余量为磷酸盐缓冲盐水；
所述氧化羧甲基纤维素和超支化多肽聚乙二醇接枝共聚物的质量比例为1：1或1：2；
所述的氧化羧甲基纤维素分子量为25万，脱乙酰度为90%；
所述超支化多肽聚乙二醇接枝共聚物中的超支化多肽为赖氨酸三代肽类树状分子，两端氨基封端的聚乙二醇分子量为2000；
所述超支化多肽聚乙二醇接枝共聚物按照以下步骤制备：
（1）甲酯保护的赖氨酸二代肽类树状分子的制备：将甲酯保护的赖氨酸、Boc保护的赖氨酸、EDCI和HOBT加入反应容器中，抽真空-氮气循环三次，然后加入无水二氯甲烷搅拌溶解，接着在冰浴条件下加入DIEA，在室温下反应24小时，收集反应溶液，旋蒸除去溶剂，并加入氯仿溶解产物，再依次用HCl、NaOH水溶液和饱和NaCl溶液洗洚，收集有机相，加入无水硫酸镁干燥，旋蒸浓缩，纯化，得甲酯保护的赖氨酸肽类二代树状分子；其中甲酯保护的赖氨酸、Boc保护的赖氨酸、EDCI，HOBT和DIEA的摩尔比为1:2-3:2-3:2-3:6-9，将上述产物置于反应容器中，抽真空-氮气循环三次，在氮气状态下加入二氯甲烷搅拌溶解，在冰浴条件下加入三氟乙酸，之后在室温下搅拌反应6-8小时，减压除去溶剂及三氟乙酸，得到的产物在冰无水乙醚中沉淀，干燥后得脱Boc保护后的赖氨酸二代肽类树状分子；
（2）甲酯保护的赖氨酸三代肽类树状分子的制备：将（1）得到的产物、Boc保护的赖氨酸、EDCI和HOBT加入反应容器中，抽真空-氮气循环三次，然后加入无水二氯甲烷搅拌溶解，接着在冰浴条件下加入DIEA，在室温下反应48小时，收集反应溶液，旋蒸除去溶剂，并加入氯仿溶解产物，再依次用HC1、NaOH水溶液和饱和NaCl溶液洗洚，收集有机相，加入无水硫酸镁干燥，旋蒸浓缩，纯化，得甲酯、Boc保护的赖氨酸肽类三代树状分子；其中脱Boc保护后的赖氨酸二代肽类树状分子、Boc保护的赖氨酸、EDCI，HOBT和DIEA的摩尔比为1:6-8:6-8:6-8:15-18；
（3）脱甲酯保护：将（2）得到的产物溶解于NaOH/MeOH溶液中，室温下搅拌反应6-7小时后，旋蒸除去混合物中的MeOH，加入氯仿溶解残余物，在搅拌状态下滴加HC1调节溶液pH值至2-3，收集有机相，加入无水硫酸镁，干燥过夜，过滤后旋蒸除去溶剂，减压浓缩后得脱甲酯后的Boc保护赖氨酸肽类三代树状分子；
（4）连接氨基聚乙二醇：将（3）得到的产物、氨基聚乙二醇、HBTu和HOBT置于反应容器中，抽真空-氮气循环三次，在氮气状态下加入二氯甲烷搅拌溶解，在冰浴条件下加入DIEA，在室温下反应24-48小时，收集反应溶液，旋蒸除去溶剂，并加入乙醚沉淀产物，干燥后得Boc保护的赖氨酸三代肽类树状分子与聚乙二醇接枝共聚物；其中脱甲酯后的Boc保护赖氨酸肽类三代树状分子，氨基聚乙二醇、HBTu，HOBT和DIEA的摩尔比为2-3:1-1.5:2-4:2-4:6-9；将上述产物置于反应容器中，抽真空-氮气循环三次，在氮气状态下加入二氯甲烷搅拌溶解，在冰浴条件下加入三氟乙酸，之后在室温下搅拌反应6-8小时，减压除去溶剂及三氟乙酸，得到的产物在冰无水乙醚中沉淀，干燥后得脱Boc保护后的赖氨酸三代肽类树状分子与聚乙二醇接枝共聚物。
2.根据权利要求1所述软组织用粘合剂，其特征在于，所述的氧化羧甲基纤维素按照以下步骤制备：将高碘酸钠水溶液避光逐滴加入到羧甲基纤维素水溶液中进行醛基化反应，然后透析冷冻干燥，得到氧化羧甲基纤维素，其中高碘酸钠与羧甲基纤维素的摩尔比为1：1。
3.根据权利要求1所述软组织用粘合剂，其特征在于，该粘合剂使用的工艺参数为：反应温度为室温，pH为7.2-7.5，固化时间为5-120秒。
4.根据权利要求1-3任意一项所述软组织用粘合剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）在室温下将氧化羧甲基纤维素和超支化多肽聚乙二醇接枝共聚物分别溶解在pH7.2-7.5的磷酸盐缓冲盐水中，配成25 g/L的溶液；
（2）将步骤（1）得到的氧化羧甲基纤维素和超支化多肽聚乙二醇接枝共聚物溶液分别装入双管注射器，以质量比为1：1和1：2均匀混合即得。
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JP2002515932A (ja) * 1997-04-18 2002-05-28 カリフォルニア インスティチュート オブ テクノロジー 多機能性ポリマー性組織コーティング
DE102005056592A1 (de) * 2005-11-25 2007-05-31 Basf Ag Herstellung und Verwendung von hochfunktionellen, hoch-oder hyperverzweigten Polylysinen
CN103755965A (zh) * 2013-12-25 2014-04-30 南京工业大学 一种ε-聚赖氨酸水凝胶及其制备方法和应用
CN105126157B (zh) * 2015-09-17 2018-02-09 爱美客技术发展股份有限公司 医用可注射粘合凝胶及其制备方法
CN105770981A (zh) * 2016-03-09 2016-07-20 四川大学 氧化羧甲基纤维素钠-多巴胺生物医用胶及其制备方法
CN106589391B (zh) * 2016-12-16 2019-05-17 天津商业大学 壳聚糖/聚赖氨酸树状大分子核壳纳米粒及其制备方法
CN106620825B (zh) * 2016-12-26 2019-11-12 浙江大学 一种双组分快速止血凝胶及其应用

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