CN111024633A - 一种亚硝酸钠含量的检测方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种亚硝酸钠含量的检测方法，涉及食品安全监测技术领域。其包括如下步骤：S1，预处理：取100g的腌红剁椒，用食物粉碎机制成匀浆备用；S2，提取：称取5g的匀浆样品，置于50mL烧杯中，加入12.5mL、50g/L的硼砂溶液，搅拌均匀，以300mL、60‑80℃的蒸馏水，将样品洗入容量瓶中，于沸水浴中加热15min，取出并置25℃冷水中冷却，得到提取液；S3，提取液净化：往提取液中加入5mL亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5mL乙酸锌溶液，用于沉淀蛋白质，加水至500mL，静置30min，除去上层脂肪，上清液用滤纸过滤，弃去初滤液30mL，滤液备用；S4，检测：采用分光光度法对滤液进行测定。本发明中的检测方法操作简单，效率高，且检测结果准确。

Description

一种亚硝酸钠含量的检测方法
技术领域
本发明涉及食品安全检测技术领域，更具体地说，它涉及一种亚硝酸钠含量的检测方法。
背景技术
亚硝酸钠是工业用盐，他是一种白色不透明晶体，形状很像食盐。亚硝酸钠对人体有害，可使血液中的低铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白，失去运输氧的能力而引起组织缺氧性损害。亚硝酸钠不仅是致癌物质，而且摄入0.2-0.5g即可引起食物中毒，3g可致死。而亚硝酸钠是食品添加剂的一种，其着色、防腐作用，广泛用于熟食类、灌肠类和罐头等动物性食品。鉴于亚硝酸钠对肉类腌制具有多种有益的功能。现在世界各国仍允许用它来腌制肉类，但用量严加限制。因此，为了保障消费者身体健康，有必要对食品中亚硝酸盐含量进行严格的检测和控制。
在申请公布号为CN101893575A的中国发明申请专利中公开了一种快速检测鲜奶中含亚硝酸盐的方法，可以快速检测鲜奶中的亚硝酸盐含量，这种方法可以用来直接检测其他液态食品，然而这种方法只能检测是否含有亚硝酸盐，却不能精确的确定其含量。
因此，需要提出一种新的方案来解决上述问题。
发明内容
针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种亚硝酸钠含量的检测方法，其具有操作方便、检测速度快的优点。
为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：
一种亚硝酸钠含量的检测方法，包括如下步骤：
S1，预处理：取100g的腌红剁椒，用食物粉碎机制成匀浆备用；
S2，提取：称取5g的匀浆样品，置于50mL烧杯中，加入12.5mL、50g/L的硼砂溶液，搅拌均匀，以300mL、60-80℃的蒸馏水，将样品洗入容量瓶中，于沸水浴中加热15min，取出并置25℃冷水中冷却，得到提取液；
S3，提取液净化：往提取液中加入5mL亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5mL乙酸锌溶液，用于沉淀蛋白质，加水至500mL，静置30min，除去上层脂肪，上清液用滤纸过滤，弃去初滤液30mL，滤液备用；
S4，检测：采用分光光度法对滤液进行测定。
通过采用上述技术方案，亚硝酸盐在食品中的添加不仅可以改变食品的感官性状，而且可以有效的抑制肉毒梭菌的生长和繁殖，从而可以防止肉毒毒素中毒，但亚硝酸盐可以与食物或胃中的仲胺类物质反应生成确认为致癌物的亚硝酸胺，对人体产生危害。本发明在检测前，先对腌红剁椒进行预处理，使其粉碎形成匀浆，便于亚硝酸钠的分散与提取。然后对匀浆进行提取处理，提取过程中加入硼砂溶液，起到吸收亚硝酸钠分解的NO2的作用，使得亚硝酸钠的总量不会因后期加热而分解减少，此外硼砂溶于水后分解为等量的硼酸与硼酸二氢钠，起到缓冲的作用。并对提取液进行净化处理，以除去脂肪和蛋白质，防止这些杂质存在而影响亚硝酸钠的检测结果，最后采用分光光度法对其进行检测。采用本发明中的检测方法，既可以对本身带有色素的腌制蔬菜进行检测，也可以对加工过程中而引入外加色素(例如酱油)的肉制品进行检测，适用范围广，检测结果较为准确且检测效率较高。
进一步优选为，步骤S2中，所述腌红剁椒采用超临界萃取工艺进行提取。
通过采用上述技术方案，控制压力和温度对超临界流体溶解能力的影响，在超临界状态下，将超临界流体与待分离的物质接触，并选择性的分离出来。本发明采用超临界萃取工艺对匀浆进行处理，可破碎胡萝卜细胞等组织，并将其中的多种成分萃取出来，以方便后续的处理，以保证检测结果准确性。
进一步优选为，所述超临界萃取工艺中，提取压力为28MPa，温度为50℃，提取时间为2-3h。
通过采用上述技术方案，通过控制压力为28MPa，温度为50℃，可选择性的将胡萝卜组织中的色素萃取出来，方便后续进行处理，避免对检测产生影响，以保证检测结果准确性。
进一步优选为，步骤S4，所述滤液在检测前还经过除色素处理。
通过采用上述技术方案，前期的超临界萃取，通过控制压力和温度可将胡萝卜组织间和细胞内的色素萃取出并溶解到提取液中，然后再将其除去，可减小后期亚硝酸钠在检测过程中的影响。
进一步优选为，所述滤液除色素具体步骤为：加入丙酮，微波处理15-18min，微波波长控制在46-48cm之间。
通过采用上述技术方案，色素等物质在丙酮中溶解度要远远大于色素在水中的溶解度，通过这种原理，可在水中加入丙酮，用丙酮来提取色素，达到分离色素的目的，从而避免色素在后期检测过程中对实验结果产生影响，以提高检测准确度。
进一步优选为，所述亚铁氰化钾溶液的浓度为106g/L，乙酸锌溶液的浓度为220g/L。
通过采用上述技术方案，亚铁氰化钾溶液和乙酸锌溶液与蛋白质发生共沉淀现象，以除去蛋白质。
进一步优选为，步骤S4中，所述检测的具体操作步骤为：吸取40mL滤液于50mL带塞比色管中，另吸取0.00mL，0.20mL，0.40mL，0.60mL，0.80mL，1.00mL，1.50mL，2.00mL，2.50mL浓度为5ug/mL的亚硝酸钠标准使用液，相当于0.0ug，1.0ug，2.0ug，3.0ug，4.0ug，5.0ug，7.5ug，L0.0ug，12.5ug，分别置于50mL带塞比色管中，于标准管与试样管中分别加入2mL、4g/L对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置3-5min后加入1mL、2g/L的盐酸奈乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置15min，用2cm比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度绘制出标准曲线，同时做试剂空白，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，回归曲线Y＝0.044420X+0.035520，R＝0.999909。
通过采用上述技术方案，以标准溶液制定出回归曲线，并确定亚硝酸钠的波长，然后采用分光度计测出滤液的分光光度值，将其代入到回归曲线中，继而可得出亚硝酸钠的含量，检测结果较为准确。
综上所述，与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
(1)本发明在检测前，先预处理，除去蛋白质等杂质，并加入以避免亚硝酸钠分解消散的硼砂溶液，使得检测结果更加准确；
(2)本发明还提供了一种超临界萃取工艺，可对腌红剁椒进行粉碎，并加入丙酮对其进行除色素等杂质处理，增加亚硝酸钠的纯度和减少干扰物质的存在，其方法较为新颖，且操作较为简单，准确结果更高；
(3)本发明采用分光光度法对亚硝酸钠含量进行检测，以标准溶液制定出回归曲线，并确定亚硝酸钠的波长，然后采用分光度计测出滤液的分光光度值，将其代入到回归曲线中，继而可得出亚硝酸钠的含量，检测结果较为准确；
(4)采用本发明中的检测方法适用范围将较广，既可以对本身带有色素的腌制蔬菜进行检测，也可以对加工过程中而引入外加色素(例如酱油)的肉制品进行检测，检测结果较为准确且检测效率较高。
附图说明
图1为本发明中实施例1的工艺流程图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例，对本发明进行详细描述。值得说明的是，其中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件下进行，所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
实施例1：一种亚硝酸钠含量的检测方法，具体操作步骤如下：
S1，预处理：取100g的腌红剁椒，用食物粉碎机制成匀浆备用；
S2，提取：称取5g的匀浆样品，置于50mL烧杯中，加入12.5mL、50g/L的硼砂溶液，搅拌均匀，以300mL、60℃的蒸馏水，将样品洗入容量瓶中，于沸水浴中加热15min，取出并置25℃冷水中冷却，得到提取液；
S3，提取液净化：往提取液中加入5mL、106g/L的亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5mL、220g/L的乙酸锌溶液，用于沉淀蛋白质，加水至500mL，静置30min，除去上层脂肪，上清液用滤纸过滤，弃去初滤液30mL，滤液备用；
S4，检测：吸取40mL滤液于50mL带塞比色管中，另吸取0.00mL，0.20mL，0.40mL，0.60mL，0.80mL，1.00mL，1.50mL，2.00mL，2.50mL浓度为5ug/mL的亚硝酸钠标准使用液，相当于0.0ug，1.0ug，2.0ug，3.0ug，4.0ug，5.0ug，7.5ug，L0.0ug，12.5ug，分别置于50mL带塞比色管中，于标准管与试样管中分别加入2mL、4g/L对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置3min后加入1mL、2g/L的盐酸奈乙二胺溶液，加水至刻度，用手振荡1min，混匀，静置15min，用2cm比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度绘制出标准曲线，同时做试剂空白，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，回归曲线Y＝0.044420X+0.035520，R＝0.999909。
实施例2：一种亚硝酸钠含量的检测方法，具体操作步骤如下：
S1，预处理：取100g的腌红剁椒，用食物粉碎机制成匀浆备用；
S2，提取：称取5g的匀浆样品，置于50mL烧杯中，加入12.5mL、50g/L的硼砂溶液，搅拌均匀，以300mL、80℃的蒸馏水，将样品洗入容量瓶中，于沸水浴中加热15min，取出并置25℃冷水中冷却，得到提取液；
S3，提取液净化：往提取液中加入5mL、106g/L的亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5mL、220g/L的乙酸锌溶液，用于沉淀蛋白质，加水至500mL，静置30min，除去上层脂肪，上清液用滤纸过滤，弃去初滤液30mL，滤液备用；
S4，检测：吸取40mL滤液于50mL带塞比色管中，另吸取0.00mL，0.20mL，0.40mL，0.60mL，0.80mL，1.00mL，1.50mL，2.00mL，2.50mL浓度为5ug/mL的亚硝酸钠标准使用液，相当于0.0ug，1.0ug，2.0ug，3.0ug，4.0ug，5.0ug，7.5ug，L0.0ug，12.5ug，分别置于50mL带塞比色管中，于标准管与试样管中分别加入2mL、4g/L对氨基苯磺酸溶液，用手振荡1min，混匀，静置5min后加入1mL、2g/L的盐酸奈乙二胺溶液，加水至刻度，用手振荡1min，混匀，静置15min，用2cm比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度绘制出标准曲线，同时做试剂空白，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，回归曲线Y＝0.044420X+0.035520，R＝0.999909。
实施例3：一种亚硝酸钠含量的检测方法，具体操作步骤如下：
S1，预处理：取100g的腌红剁椒，用食物粉碎机制成匀浆备用；
S2，提取：称取5g的匀浆样品，置于50mL烧杯中，采用超临界萃取工艺进行处理，提取压力为28MPa，温度为50℃，提取时间2h，得到提取液；
S3，提取液净化：往提取液中加入5mL、106g/L的亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5mL、220g/L的乙酸锌溶液，用于沉淀蛋白质，加水至500mL，静置30min，除去上层脂肪，上清液用滤纸过滤，弃去初滤液30mL，滤液备用；
S4，检测：吸取40mL滤液于50mL带塞比色管中，另吸取0.00mL，0.20mL，0.40mL，0.60mL，0.80mL，1.00mL，1.50mL，2.00mL，2.50mL浓度为5ug/mL的亚硝酸钠标准使用液，相当于0.0ug，1.0ug，2.0ug，3.0ug，4.0ug，5.0ug，7.5ug，L0.0ug，12.5ug，分别置于50mL带塞比色管中，于标准管与试样管中分别加入2mL、4g/L对氨基苯磺酸溶液，用手振荡1min，混匀，静置3min后加入1mL、2g/L的盐酸奈乙二胺溶液，加水至刻度，用手振荡1min，混匀，静置15min，用2cm比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度绘制出标准曲线，同时做试剂空白，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，回归曲线Y＝0.044420X+0.035520，R＝0.999909。
实施例4：一种亚硝酸钠含量的检测方法，与实施例1的不同之处在于，步骤S2中，匀浆提取时间为3h。
实施例5：一种亚硝酸钠含量的检测方法，具体操作步骤如下：
S1，预处理：取100g的腌红剁椒，用食物粉碎机制成匀浆备用；
S2，提取：称取5g的匀浆样品，置于50mL烧杯中，采用超临界萃取工艺进行处理，提取压力为28MPa，温度为50℃，提取时间2h，得到提取液；
S3，提取液净化：往提取液中加入5mL、106g/L的亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5mL、220g/L的乙酸锌溶液，用于沉淀蛋白质，加水至500mL，静置30min，除去上层脂肪，上清液用滤纸过滤，弃去初滤液30mL，滤液备用；
S4，除色素：在滤液中加入3倍质量的丙酮，微波处理16min，微波波长控制在47cm，处理后将水相与有机相分离，收集水相，调节pH＝6，得到待检测液。
S5，检测：吸取40mL待检测液于50mL带塞比色管中，另吸取0.00mL，0.20mL，0.40mL，0.60mL，0.80mL，1.00mL，1.50mL，2.00mL，2.50mL浓度为5ug/mL的亚硝酸钠标准使用液，相当于0.0ug，1.0ug，2.0ug，3.0ug，4.0ug，5.0ug，7.5ug，L0.0ug，12.5ug，分别置于50mL带塞比色管中，于标准管与试样管中分别加入2mL、4g/L对氨基苯磺酸溶液，用手振荡1min，混匀，静置3min后加入1mL、2g/L的盐酸奈乙二胺溶液，加水至刻度，用手振荡1min，混匀，静置15min，用2cm比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度绘制出标准曲线，同时做试剂空白，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，回归曲线Y＝0.044420X+0.035520，R＝0.999909。
亚硝酸钠含量检测
按照实施例1-5中的检测方法对同一批腌红剁椒进行亚硝酸钠含量检测，将检测结果计入表1中。此外，每个实施例均重复测试7次，计算相对标准偏差，计入表1中。
由表1中测试数据可知，采用本发明检测方法检测亚硝酸钠含量，五个实施例的相对以标准偏差均小于2％，实施例5的相对标准偏差达到1.2％，精密度高且稳定性好，具有重现性。且经过试验，采用本发明检测方法检测亚硝酸钠含量，检出限为0.01ppm。
表1亚硝酸钠含量检测结果
项目 实施例1 实施例2 实施例3 实施例4 实施例5
亚硝酸钠含量(ppm) 6.56 6.66 6.62 6.70 6.81
相对标准偏差(％) 1.7 1.7 1.6 1.4 1.2
以上所述仅是本发明的优选实施方式，本发明的保护范围并不仅局限于上述实施例，凡属于本发明思路下的技术方案均属于本发明的保护范围。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理前提下的若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (7)

1.一种亚硝酸钠含量的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1，预处理：取100g的腌红剁椒，用食物粉碎机制成匀浆备用；
S2，提取：称取5g的匀浆样品，置于50mL烧杯中，加入12.5mL、50g/L的硼砂溶液，搅拌均匀，以300mL、60-80℃的蒸馏水，将样品洗入容量瓶中，于沸水浴中加热15min，取出并置25℃冷水中冷却，得到提取液；
S3，提取液净化：往提取液中加入5mL亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5mL乙酸锌溶液，用于沉淀蛋白质，加水至500mL，静置30min，除去上层脂肪，上清液用滤纸过滤，弃去初滤液30mL，滤液备用；
S4，检测：采用分光光度法对滤液进行测定。
2.根据权利要求1所述的亚硝酸钠含量的检测方法，其特征在于，步骤S2中，所述腌红剁椒采用超临界萃取工艺进行提取。
3.根据权利要求2所述的亚硝酸钠含量的检测方法，其特征在于，所述超临界萃取工艺中，提取压力为28MPa，温度为50℃，提取时间为2-3h。
4.根据权利要求1所述的亚硝酸钠含量的检测方法，其特征在于，步骤S4，所述滤液在检测前还经过除色素处理。
5.根据权利要求4所述的亚硝酸钠含量的检测方法，其特征在于，所述滤液除色素的具体步骤为：加入丙酮，微波处理15-18min，微波波长控制在46-48cm之间。
6.根据权利要求1所述的亚硝酸钠含量的检测方法，其特征在于，所述亚铁氰化钾溶液的浓度为106g/L，乙酸锌溶液的浓度为220g/L。
7.根据权利要求1所述的亚硝酸钠含量的检测方法，其特征在于，步骤S4中，所述检测的具体操作步骤为：吸取40mL滤液于50mL带塞比色管中，另吸取0.00mL，0.20mL，0.40mL，0.60mL，0.80mL，1.00mL，1.50mL，2.00mL，2.50mL浓度为5ug/mL的亚硝酸钠标准使用液，相当于0.0ug，1.0ug，2.0ug，3.0ug，4.0ug，5.0ug，7.5ug，L0.0ug，12.5ug，分别置于50mL带塞比色管中，于标准管与试样管中分别加入2mL、4g/L对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置3-5min后加入1mL、2g/L的盐酸奈乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置15min，用2cm比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度绘制出标准曲线，同时做试剂空白，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，回归曲线Y= 0.044420X+0.035520，R=0.999909。
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