CN110954637A - 色谱仪及色谱分析的定量方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供色谱仪及色谱分析的定量方法，既使用基于内部标准法的检量线，又不需要在未知试样中添加标准物质的作业，在简化测定的同时抑制了定量精度的降低。色谱仪具备控制部和存储部，对规定的测定对象进行定量，存储部存储基于内部标准法的检量线数据，该检量线数据是通过对测定对象添加规定浓度的内部标准而求出的，具有测定对象的强度和内部标准的强度之间的强度比，当测定了包含规定浓度的内部标准的QC样品的色谱、以及包含浓度未知的测定对象且不包含内部标准的未知试样的色谱时，控制部根据QC样品的内部标准的强度和未知试样的测定对象的强度计算出强度比，根据检量线对未知试样的测定对象进行定量。
Description
技术领域
本发明涉及液体色谱仪、气体色谱仪等色谱仪及色谱分析的定量方法。
背景技术
以往，作为液体色谱仪(HPLC)等的色谱的定量分析，已知有外部标准法和内部标准法。其中，内部标准法防止由于色谱仪的灵敏度和状态的日常变化、样品注入量的变动、溶剂的挥发等引起的误差，定量精度高于外部标准法。
另外，在JISK0214：2013中规定了与色谱分析相关的用语。
在该内部标准法中，以对测定物质的浓度进行各种改变的方式来测定含有浓度已知的测定物质和一定浓度的(内)标准物质的试样，得到用一次式来表示测定物质的强度和内部标准的强度之间的强度比与测定物质的浓度的关系的检量线，利用检量线对未知试样进行定量(专利文献1)。
在先技术文献
专利文献
专利文献1：日本特许第6152301号公报
但是，在内部标准法中，在测定未知试样时也需要向试样中添加一定浓度的标准物质，但是存在这样的问题：称量一定浓度的标准物质的操作繁杂且需要熟练，并且，如果标准物质的称量不正确，则反而定量精度会降低。
因此，本发明是为了解决所述课题而完成的，其目的在于提供色谱仪以及色谱分析的定量方法，既使用基于内部标准法的检量线，又不需要在未知试样中添加标准物质的作业，在简化测定的同时抑制了定量精度的降低。
发明内容
为了实现上述目的，本发明的色谱仪具备控制部和存储部，对规定的测定对象进行定量，其中，所述存储部存储有基于内部标准法的检量线数据，所述检量线数据是通过对所述测定对象添加规定浓度的内部标准而求出的，具有所述测定对象的强度和所述内部标准的强度之间的强度比，在测定了包含所述规定浓度的所述内部标准的QC样品的色谱、以及包含浓度未知的所述测定对象且不包含所述内部标准的未知试样的色谱时，所述控制部根据所述QC样品的所述内部标准的强度和所述未知试样的所述测定对象的强度计算出所述强度比，根据所述检量线对所述未知试样的所述测定对象进行定量。
根据该色谱仪，既使用基于内部标准法的检量线，又能够在不向未知试样添加标准物质的情况下进行定量。因此，不需要对未知试样称量一定浓度的标准物质的繁杂且要求熟练的操作，能够抑制标准物质的称量变得不正确而导致定量精度降低的情况。其结果是，不需要在未知试样中添加标准物质的作业，能够简化测定并抑制定量精度的降低。
在本发明的色谱仪中，也可以是，所述存储部存储有基于包含所述规定浓度的所述内部标准的标准色谱的波形或强度的诊断基准，所述控制部针对所述QC样品的色谱的波形或强度，根据所述诊断基准来判断可否测定所述未知试样。
在不向未知试样添加标准物质的情况下进行定量的前提是：只要进行通常的管理/维护，就能够使测定的偏差收敛于较小的范围内。因此，在未知试样的测定之前，测定QC样品的色谱，视为其内部标准的强度与假设在未知试样中添加了内部标准的情况下的未知试样中的内部标准的强度相同。因此，当在色谱仪的状态恶化、测定的偏差变大的情况下使用本方法时，会导致错误的测定结果。
因此，根据该色谱仪，通过预先诊断色谱仪的状态，在视为装置状态正常时进行未知试样的定量，从而能够防止误测定。
在本发明的色谱仪中，也可以是，所述存储部存储有如下检量线数据：该检量线数据是基于内部标准法的追加的检量线数据，该追加的检量线数据是通过对与所述测定对象不同的追加的测定对象添加所述规定浓度的所述内部标准来求出的，具有所述追加的测定对象的强度和所述内部标准的强度之间的强度比，并且，该检量线数据是以内部标准强度比对所述追加的检量线数据中的所述内部标准的强度进行校正后的检量线数据，其中，所述内部标准强度比是所述追加的测定对象共存时的所述规定浓度的所述内部标准的强度A2和与所述追加的测定对象相同浓度的所述测定对象共存时的所述规定浓度的所述内部标准的强度A1之间的内部标准强度比、即A2/A1，所述QC样品还包含浓度已知的所述测定对象，在对所述追加的测定对象进行定量的情况下，测定所述QC样品的色谱，当所述控制部根据所述诊断基准允许所述未知试样的测定时，所述控制部根据所述校正后的检量线数据，对包含浓度未知的所述追加的测定对象且不包含所述内部标准的第2未知试样中的所述追加的测定对象进行定量。
在对与测定对象不同的追加的测定对象进行定量的情况下，通常，如果预先存储有与测定对象相同的检量线，则只要测定QC样品的色谱和未知试样的色谱，就能够同样地进行。
另一方面，作为QC样品，只要使用包含测定对象的QC样品对测定对象进行定量，色谱仪的诊断精度就会提高，但是如果将该QC样品还兼用于追加的测定对象的定量，则存在追加的测定对象的测定精度降低的担忧。但是，若对每个追加的测定对象准备QC样品，则作业性降低，因此，希望将包含测定对象的QC样品兼用于全部测定(追加的测定对象的测定)中。
因此，作为针对追加的测定对象的基于内部标准法的追加的检量线数据，预先存储以内部标准强度比(A2/A1)进行校正后的检量线数据。然后，通过使用该校正后的检量线数据对追加的测定对象进行定量，既能够将包含测定对象的QC样品兼用于追加的测定对象的定量，又能够高精度地对追加的测定对象进行定量。
在本发明的色谱仪中，也可以是，所述内部标准包含在所述测定对象的色谱仪的波峰前后的时间分别出现波峰的至少第1内部标准和第2内部标准这2种，所述检量线数据至少包含分别与所述第1内部标准和所述第2内部标准对应的第1检量线数据和第2检量线数据，所述控制部在对所述未知试样的所述测定对象进行定量时，根据第1强度比和第2强度比，分别参照所述第1检量线数据和所述第2检量线数据，分别对所述测定对象进行定量，并对其定量值进行平均，其中，所述第1强度比和第2强度比是分别根据所述QC样品的所述第1内部标准和所述第2内部标准各自的强度、以及所述未知试样的所述测定对象的强度计算出的。
根据该色谱仪，内部标准包含在测定对象的色谱的波峰前后的时间分别出现波峰的至少第1内部标准和第2内部标准这2种，因此，测定精度提高。
在本发明的色谱仪中，也可以是，所述诊断基准包含所述标准色谱仪的波形的宽度的第1阈值，在所述QC样品的色谱仪的波形的宽度超过所述第1阈值的情况下，所述控制部判断为不可进行所述未知试样的测定。
根据该色谱仪，能够根据QC样品的色谱的波形的宽度来更高精度地判断可否测定未知试样。
在本发明的色谱仪中，也可以是，所述诊断基准包含标准色谱仪的强度的第2阈值，在所述QC样品的色谱仪的强度小于所述第2阈值的情况下，所述控制部判断为不可进行所述未知试样的测定。
根据该色谱仪，能够根据标准色谱仪的强度来更高精度地判断可否测定未知试样。
本发明的色谱分析的定量方法用于对规定的测定对象进行定量，其中，预先存储基于内部标准法的检量线数据，所述检量线数据是通过对所述测定对象添加规定浓度的内部标准而求出的，具有所述测定对象的强度和所述内部标准的强度之间的强度比，当测定了包含所述规定浓度的所述内部标准的QC样品的色谱、以及包含浓度未知的所述测定对象且不包含所述内部标准的未知试样的色谱时，根据所述QC样品的所述内部标准的强度和所述未知试样的所述测定对象的强度计算出所述强度比，根据所述检量线对所述未知试样的所述测定对象进行定量。
发明效果
根据本发明，在色谱分析的定量中，既使用基于内部标准法的检量线，又不需要在未知试样中添加标准物质的作业，在简化测定的同时能够抑制定量精度的降低。
附图说明
图1是示出本发明的实施方式的液体色谱仪(装置)的结构的图。
图2是示出基于内部标准法的检量线数据的制作方法的图。
图3是示出基于内部标准法的检量线数据的图。
图4是示出包含内部标准的QC样品的色谱、以及包含浓度未知的测定对象且不包含内部标准的未知试样的色谱的图。
图5是示出根据检量线数据对未知试样的测量对象进行定量的方法的图。
图6是示出作为诊断基准的标准色谱、以及QC样品的色谱的图。
图7是示出诊断基准(表)的图。
图8是示出测定对象Y与内部标准共存时、内部标准的波峰强度变化的状态的图。
图9是示出根据内部标准强度比校正后的检量线数据的图。
标号说明
8：存储部；9控制部；10：存储部；100：(液体)色谱仪；CR：标准色谱仪；CR1～Cr3：QC样品的色谱仪；J1：诊断基准；W0～W2：标准色谱仪的波形；A0～A2：标准色谱仪的强度；W0a、W0c～W2c：QC样品的色谱仪的波形；A0b～A2b：QC样品的色谱仪的强度；Wx～Wz：第1阈值；Ax～Az：第2阈值；X、Xn：测定对象；a：第1内部标准；b：第2内部标准；CAL1：第1检量线数据；CAL2：第2检量线数据；CR：标准色谱；CRa、CRb、CRc：QC样品的色谱；Y：追加的测定对象；CAL5，CAL6：校正后的检量线数据；Xn/a：第1强度比；Xn/b：第2强度比
具体实施方式
以下，参照附图对本发明的实施方式进行说明。图1是示出本发明的实施方式的液体色谱仪100的结构的图。
液体色谱仪100对规定的测定对象进行定量，具备控制整体的数据处理装置(控制部)7、流动相(洗脱液与溶剂的混合溶液)1、输送流动相1的泵2、注入试样的自动取样器3、分离成分的柱4、使柱4恒温的柱烘箱5、检测被分离的成分的检测器6以及显示部10。
数据处理装置7由计算机构成，所述计算机具有执行分析并解析分析结果的控制部(CPU)9、以及保存分析结果或解析结果的存储部(硬盘等)8。显示部(监视器)10显示分析结果或解析结果。
检测器6是具有多个检测信号强度的元件、能够在多个波长同时取得相对于时间的信号强度的三维检测器。
试样从自动取样器3的喷射器(未图示)注入，与从泵2输送的流动相1一起通过柱4，被分离为试样中的各种成分。
被分离为成分的试样由检测器6进行检测。检测器6的信号被发送给数据处理装置7，进行数据处理。
柱4是通常用作分离存在于流动相1中的试样的成分的分离部的装置。作为柱4，有填充型柱或单片式柱等。作为柱4的柱填充剂，可以使用吸附型、分配型、离子交换型等各种类型的填充剂。柱4优选设置在柱烘箱5内，以便使柱4保持恒温，能够再现性良好地进行试样的分离。
为了对测定对象进行定量，存储部8存储具有测定对象的强度和内部标准的强度之间的强度比的基于内部标准法的检量线数据。检量线数据只要是基于一般的内部标准法的数据即可，例如可以如图2～图3所示那样得到。
首先，如图2所示，设测定对象为X时，用STD-X(标准试样)来表示浓度已知的测定对象。然后，对STD-X加入规定浓度的内部标准a、b来取得色谱。该色谱是通过对测定对象X的浓度如X1、X2、X3那样进行各种改变而分别测定的。
此外，内部标准a、b在测定对象X的色谱的波峰前后的时间分别出现波峰。内部标准a、b分别相当于权利要求书的“第1内部标准”、“第2内部标准”。
接下来，如图3的(a)所示，关于内部标准a，在纵轴标绘浓度已知的测定对象STD-X1、STD-X2、STD-X3的各强度和内部标准a的强度之间的强度比(STD/a)，在横轴标绘测定对象STD-X1、STD-X2、STD-X3的各浓度Conc，得到表示强度比和测定对象X的浓度之间的关系的一次式的第1检量线数据CAL1。
同样，关于内部标准b，也如图3的(b)所示，在纵轴标绘浓度已知的测定对象STD-X1、STD-X2、STD-X3的各强度和内部标准b的强度之间的强度比(STD/b)，在横轴标绘测定对象STD-X1、STD-X2、STD-X3的各浓度Conc，得到表示强度比和测定对象X的浓度之间的关系的一次式的第2检量线数据CAL2。
另外，检量线数据只要是表示强度比和测定对象的浓度之间的关系的数据即可，不限于一次式，还可以是表、近似曲线等。
接下来，参照图4～图5，对测定包含浓度未知的测定对象的未知试样的色谱并对测定对象进行定量的方法进行说明。
首先，如图4的(a)所示，测定包含与在图2、图3中制作检量线数据(第1检量线数据CAL1、第2检量线数据CAL2)时的各内部标准a、b相同浓度的内部标准a、b的QC样品的色谱。
接下来，如图4的(b)所示，测定包含浓度未知的测定对象Xn且不包含内部标准a、b的未知试样的色谱。
于是，如图5所示，控制部9根据QC样品的第1内部标准a的强度、以及未知试样的测定对象Xn的强度计算出第1强度比Xn/a，从第1强度比Xn/a根据第1检量线数据CAL1求出测定对象Xn的浓度Conc1。同样地，控制部9根据QC样品的第2内部标准b的强度、以及未知试样的测定对象Xn的强度计算出第2强度比Xn/b，从第2强度比Xn/b根据第2检量线数据CAL2求出测定对象Xn的浓度Conc2。
接下来，控制部9求出对浓度Conc1、Conc2进行平均后得到的Conc Xn＝(Conc1+Conc2)/2，作为测定对象Xn的浓度。这样，控制部9对未知试样的测定对象Xn进行定量。
另外，理想的情况是Conc1＝Conc2，但是由于各种夹杂物的影响等，有时利用检量线计算出的Conc1和Conc2不相等，因此，如果求出对它们进行平均后得到的Conc Xn，则定量精度进一步提高。
此外，采用平均值Conc Xn是在内部标准为2个以上的情况下，在内部标准为1个的情况下不需要平均化，只要参照单一的检量线即可。
这样，既使用基于内部标准法的检量线，又能够在不向未知试样中添加标准物质的情况下进行定量。因此，不需要对未知试样称量一定浓度的标准物质的繁杂且要求熟练的操作，能够抑制标准物质的称量变得不正确而导致定量精度降低的情况。其结果，不需要在未知试样中添加标准物质的作业，能够简化测定并抑制定量精度的降低。
另外，在未知试样中不添加标准物质的情况下进行定量的前提是：由于液体色谱仪的进步，只要进行通常的管理/维护，就能够使测定的偏差收敛于较小的范围内。因此，在未知试样的测定之前，测定图4的(a)所示的QC样品的色谱，视为其内部标准的强度与假设对未知试样加入内部标准的情况下的未知试样中的内部标准的强度相同。
因此，当在液体色谱仪的状态恶化、测定的偏差变大的情况下使用本方法时，会成为错误的测定结果。
因此，优选的是，预先诊断液体色谱仪100的状态，在视为装置状态正常时进行未知试样的定量。
该诊断例如能够如图6～图7所示那样来进行。首先，存储部8存储基于至少包含与QC样品相同浓度的内部标准的标准色谱仪的波形或强度的诊断基准。
关于该诊断基准，例如可以举出图6所示的包含已知的浓度X1的测定对象X和内部标准a、b的色谱(标准色谱)CR的波形的数据。在本例中，标准色谱CR与图2所示的测定对象X的浓度X1的检量线制作用的色谱相同。
但是，诊断基准只要是基于包含与QC样品相同浓度的内部标准a、b的色谱的波形或强度的基准，则也可以不包含测定对象X的波峰。
然后，控制部9针对QC样品的色谱的波形或强度，根据诊断基准来判断可否测定未知试样。
QC样品也可以如图4的(a)所示仅包含内部标准a、b，但是，当如图6的色谱CRa、CRb、CRc所示，使QC样品包含内部标准a、b以及浓度已知的测定对象X时，也可以使用测定对象X的波峰来进行诊断，因此诊断精度提高。
另外，在以下说明中，设诊断基准和QC样品也包含已知的浓度X1的测定对象X，但是，诊断诊断基准和QC样品当然也可以不包含测定对象X。
图6示出标准色谱CR、以及QC样品的色谱CRa、CRb、CRc。
如图6所示，标准色谱CR具有分别在测定对象X的波峰S0、波峰S0前后的保持时间出现的第1内部标准a、b的波峰S1、S2。
关于各波峰S0、S1、S2，分别用W0、W1、W2表示半值宽度(波形的宽度)，用A0、A1、A2表示强度(例如波峰面积)。
图7示出存储在存储部8中的诊断基准(表)J1的一例。该诊断基准J1基于标准色谱CR，针对各波峰S0、S1、S2，分别存储半值宽度的第1阈值Wx、Wy、Wz、以及强度(波峰面积)的第2阈值Ax、Ay、Az。
控制部9根据诊断基准J1进行诊断，判断可否测定未知试样。
例如，如图6所示，设得到了QC样品的色谱CRa。控制部9从QC样品的色谱CRa取得各波峰S0～S2的半值宽度和强度，例如在波峰S0、S2的半值宽度W0a、W2a分别超过第1阈值Wx、Wz的情况下，判断为不可进行未知试样的测定。
另外，假定半值宽度W0a、W1分别超过第1阈值Wx、Wz的情况是指固定相(柱4)的不良情况。
此外，如图6所示，设得到了另一QC样品的色谱CRb。控制部9从QC样品的色谱CRb取得各波峰S0～S2的半值宽度和强度，例如，在波峰S1的强度A1b小于第2阈值Ay的情况下，判断为不可进行未知试样的测定。
另外，假定强度A1b小于第2阈值Ay的情况是指检测器的不良情况(例如，需要更换检测器的灯)。
此外，如图6所示，设得到了又一QC样品的色谱CRc。控制部9从QC样品的色谱CRc取得各波峰S0～S2的半值宽度和强度，例如，在波峰S1或S2的半值宽度W1c、W2c中的至少一方超过第1阈值Wy或Wz的情况下，判断为不可进行未知试样的测定。
另外，假定半值宽度W1c、W2c中的至少一方超过第1阈值Wy或Wz的情况是指流动相的不良情况。
另外，在图6的QC样品的色谱CRb的示例中，在波峰S1的强度A1b小于第2阈值Ay的情况下判断为不可进行未知试样的测定，但是，在波峰S0～S2的强度A0b～A2b全部分别小于第2阈值的情况下、在这些强度v中的2个以上小于第2阈值的情况下、或在强度A0b～A2b中的任意一个小于第2阈值的情况下，也可以判断为不可进行未知试样的测定。
此外，在图6的QC样品的色谱CRc的示例中，在半值宽度W1c、W2c中的至少一方超过第1阈值Wy或Wz的情况下判断为不可进行未知试样的测定，但是，也可以是，在波峰S0～S2的半值宽度W0c～W2c全部分别超过第1阈值的情况下、在这些半值宽度W0c～W2c中的2个以上超过第1阈值的情况下、或在半值宽度W0c～W2c中的任意一个超过第1阈值的情况下，判断为不可进行未知试样的测定。
此外，控制部9在判断为不可进行未知试样的测定时，可以将不可的意思显示在显示部10上、或者鸣响语音来唤起作业员的注意，也可以进行不能进行液体色谱仪100的测定的控制。该控制可以在物理上阻止测定，但是在软件上控制成执行测定的计算机程序停止这一做法比较简便。
此外，控制部9在允许未知试样的测定时，可以将该意思显示在显示部10上、或者鸣响语音告知作业员，也可以进行使得液体色谱仪100的测定被进行的控制。该控制例如使执行测定的计算机程序自动地执行，在软件上进行控制是简便的。
但是，在对与测定对象X不同的追加的测定对象Y进行定量的情况下，通常，如果预先存储有与测定对象X相同的检量线，则与图4所示的同样地，只要测定QC样品的色谱和未知试样的色谱，就能够同样地进行。
另一方面，作为QC样品，在如所述图6那样使用包含测定对象X的QC样品对测定对象X进行定量的情况下，液体色谱仪100的诊断精度提高，但是如果将该QC样品还兼用于测定对象Y的定量，则存在测定对象Y的测定精度降低的担忧。
这是因为，如图8所示，即使QC样品中的内部标准a、b为同一物质、同一浓度，当测定对象Y与内部标准a、b共存时，也存在内部标准a、b的波峰强度等发生变化，与包含测定对象X的QC样品的内部标准a、b的波峰强度不同的情况。另外，在图8的示例中，在包含测定对象Y的情况下，内部标准a、b的波峰强度变高。
另一方面，当对每个追加的测定对象Y准备包含测定对象Y的QC样品时，作业性降低，因此，希望将包含测定对象X的QC样品兼用于全部测定中。
因此，作为测定对象Y的基于内部标准法的追加的检量线数据，在存储部8中，预先存储以以下的内部标准强度比(A2/A1)校正后的检量线数据。
然后，通过使用该校正后的检量线数据对测定对象Y进行定量，既能够将包含测定对象X的QC样品兼用于测定对象Y的定量，又能够高精度地对测定对象Y进行定量。
具体而言，首先，如图9所示，与图2、图3的测定对象X的情况同样，针对测定对象Y制作第1检量线CAL3、第2检量线CAL4的数据。
关于第1检量线CAL3，如图9的(a)所示，针对内部标准a，在纵轴标绘浓度已知的测定对象STD-Y1、STD-Y2、STD-Y3的各强度和内部标准a的强度之间的强度比(STD/a)，在横轴标绘测定对象STD-Y1、STD-Y2、STD-Y3的各浓度Conc，得到表示强度比和测定对象X的浓度之间的关系的一次式。
关于第2检量线CAL4，同样，针对内部标准b，如图9的(b)所示，在纵轴标绘浓度已知的测定对象STD-Y1、STD-Y2、STD-Y3的各强度和内部标准b的强度之间的强度比(STD/b)，在横轴标绘测定对象STD-Y1、STD-Y2、STD-Y3的各浓度Conc，得到表示强度比和测定对象X的浓度之间的关系的一次式。
接下来，如图8所示，求出测定对象Y共存时的与QC样品相同浓度的内部标准a、b的强度A2和与测定对象Y相同浓度的测定对象X共存时的与QC样品相同浓度的内部标准a、b的强度A1之间的内部标准强度比(A2/A1)。
内部标准强度比(A2/A1)是按照各内部标准a、b计算出的，例如，对于内部标准a，(A2/A1)＝(ay/ax)，对于内部标准b，(A2/A1)＝(by/bx)。
如图9所示，存储部8存储以内部标准强度比(A2/A1)对第1检量线CAL3的数据以及第2检量线CAL4中的内部标准的强度进行校正后的检量线数据CAL5、CAL6。
该校正是对第1检量线CAL3的纵轴上的测定对象STD-Y1、STD-Y2、STD-Y3的各强度和内部标准a的强度之间的强度比(STD/a)的分母a的值乘以(ay/ax)。即，校正后的强度比＝STD/{a×(ay/ax)}。
如图8所示，在本例中，由于ay＞ax，因此校正后的强度比变小，如图9所示，校正后的检量线数据CAL5的倾斜度小于第1检量线CAL3。校正后的检量线数据CAL6也同样，倾斜度小于第2检量线CAL4。
检量线数据CAL5、CAL6分别相当于权利要求书的“校正后的(追加的)检量线数据”。
另外，检量线数据CAL5、CAL6只要是表示强度比和测定对象的浓度之间的关系的数据，不限于一次式，还可以是表、近似曲线等。
接下来，如上所述，测定浓度未知的测定对象X以及包含规定浓度的内部标准a、b的QC样品的色谱。
于是，控制部9根据所述诊断基准和QC样品的色谱，如上所述来判断可否测定未知试样。然后，在允许测定的情况下，控制部9参照校正后的检量线数据CAL5、CAL6，对未知试样的测定对象Y进行定量。定量的方法与测定对象X相同，与图5同样地，根据检量线数据CAL5、CAL6分别求出测定对象Y的浓度，并对其进行平均。
这样，通过使用校正后的检量线数据CAL5、CAL6，既能够将包含测定对象X的QC样品兼用于测定对象Y的定量，又能够在不向未知试样添加标准物质的情况下高精度地对测定对象Y进行定量。
本发明不限于所述实施方式，当然还涉及本发明的思想和范围中包含的各种变形及等同物。
内部标准不限于多个，也可以是一个。但是，当内部标准包含在测定对象的色谱的波峰前后的时间分别出现波峰的至少第1内部标准和第2内部标准这2种时，测定精度提高，因此是优选的。
校正后的(追加的)检量线数据CAL5、CAL6可以在色谱仪100出厂时预先存储在存储部8中，也可以之后由作业员制作一次包含测定对象Y和内部标准a、b的QC样品来求出内部标准强度比(A2/A1)，之后存储在存储部8中。
Claims (7)
1.一种色谱仪，该色谱仪具备控制部和存储部，对规定的测定对象进行定量，其中，
所述存储部存储有基于内部标准法的检量线数据，所述检量线数据是通过对所述测定对象添加规定浓度的内部标准而求出的，具有所述测定对象的强度和所述内部标准的强度之间的强度比，
在测定了包含所述规定浓度的所述内部标准的QC样品的色谱、以及包含浓度未知的所述测定对象且不包含所述内部标准的未知试样的色谱时，所述控制部根据所述QC样品的所述内部标准的强度和所述未知试样的所述测定对象的强度计算出所述强度比，根据所述检量线对所述未知试样的所述测定对象进行定量。
2.根据权利要求1所述的色谱仪，其中，
所述存储部存储有基于包含所述规定浓度的所述内部标准的标准色谱的波形或强度的诊断基准，
所述控制部针对所述QC样品的色谱的波形或强度，根据所述诊断基准来判断可否测定所述未知试样。
3.根据权利要求2所述的色谱仪，其中，
所述存储部存储有如下检量线数据：该检量线数据是基于内部标准法的追加的检量线数据，该追加的检量线数据是通过对与所述测定对象不同的追加的测定对象添加所述规定浓度的所述内部标准来求出的，具有所述追加的测定对象的强度和所述内部标准的强度之间的强度比，并且，该检量线数据是以内部标准强度比对所述追加的检量线数据中的所述内部标准的强度进行校正后的检量线数据，其中，所述内部标准强度比是所述追加的测定对象共存时的所述规定浓度的所述内部标准的强度A2、和与所述追加的测定对象相同浓度的所述测定对象共存时的所述规定浓度的所述内部标准的强度A1之间的内部标准强度比、即A2/A1，
所述QC样品还包含浓度已知的所述测定对象，
在对所述追加的测定对象进行定量的情况下，测定所述QC样品的色谱，当所述控制部根据所述诊断基准允许所述未知试样的测定时，
所述控制部根据所述校正后的检量线数据，对包含浓度未知的所述追加的测定对象且不包含所述内部标准的第2未知试样中的所述追加的测定对象进行定量。
4.根据权利要求1至3中的任一项所述的色谱仪，其中，
所述内部标准包含在所述测定对象的色谱的波峰前后的时间分别出现波峰的至少第1内部标准和第2内部标准这2种，
所述检量线数据至少包含分别与所述第1内部标准和所述第2内部标准对应的第1检量线数据和第2检量线数据，
所述控制部在对所述未知试样的所述测定对象进行定量时，根据第1强度比和第2强度比，分别参照所述第1检量线数据和所述第2检量线数据，分别对所述测定对象进行定量，并对其定量值进行平均，其中，所述第1强度比和第2强度比是分别根据所述QC样品的所述第1内部标准和所述第2内部标准各自的强度、以及所述未知试样的所述测定对象的强度计算出的。
5.根据权利要求1至4中的任一项所述的色谱仪，其中，
所述诊断基准包含所述标准色谱的波形的宽度的第1阈值，
所述控制部在所述QC样品的色谱的波形的宽度超过所述第1阈值的情况下，判断为不可进行所述未知试样的测定。
6.根据权利要求1至5中的任一项所述的色谱仪，其中，
所述诊断基准包含所述标准色谱的强度的第2阈值，
在所述QC样品的色谱的强度小于所述第2阈值的情况下，所述控制部判断为不可进行所述未知试样的测定。
7.一种色谱分析的定量方法，该色谱分析的定量方法用于对规定的测定对象进行定量，其中，
预先存储基于内部标准法的检量线数据，所述检量线数据是通过对所述测定对象添加规定浓度的内部标准而求出的，具有所述测定对象的强度和所述内部标准的强度之间的强度比，
当测定了包含所述规定浓度的所述内部标准的QC样品的色谱、以及包含浓度未知的所述测定对象且不包含所述内部标准的未知试样的色谱时，根据所述QC样品的所述内部标准的强度和所述未知试样的所述测定对象的强度计算出所述强度比，根据所述检量线对所述未知试样的所述测定对象进行定量。
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| JP2018179797A JP7246680B2 (ja) | 2018-09-26 | 2018-09-26 | クロマトグラフ及びクロマトグラフィの定量方法 |
| JP2018-179797 | 2018-09-26 |
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| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
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| CN110954637B CN110954637B (zh) | 2024-04-26 |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| CN111624288A (zh) * | 2019-02-27 | 2020-09-04 | 日本株式会社日立高新技术科学 | 色谱装置和色谱装置的管理方法 |
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| JP2014235088A (ja) * | 2013-06-03 | 2014-12-15 | 国立医薬品食品衛生研究所長 | 定量方法およびプログラム |
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| JP2020051827A (ja) | 2020-04-02 |
| DE102019214130A1 (de) | 2020-03-26 |
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