CN110950807B - 联芳基类化合物、其制备方法、药物组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种联芳基类化合物、其制备方法、药物组合物及其应用。本发明的联芳基类化合物的结构如式I所示，各取代基的定义如说明书和权利要求书所述。本发明的化合物具有抑制MALT1蛋白酶活性，可用于治疗与MALT1蛋白酶异常表达或活性相关的各种疾病。
Description
技术领域
本发明提供了一类联芳基类化合物、其制备方法、药物组合及其应用，该类化合物具有抑制MALT1蛋白酶活性，可用于治疗与MALT1蛋白酶异常表达或活性相关的各种疾病，如癌症、肿瘤等疾病的药物中的用途。
背景技术
据世界卫生组织(WHO)统计，全球每年因癌症死亡的人口大约有820万，占总的人口死亡数量中13％。该数据还在持续增长，WHO预计在接下来的20年，全球因癌症死亡的人口会增长70％(来自WHO，fact sheet by Cancer,Globocan 2012)。弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma，DLBCL)是成人非霍奇淋巴瘤中最常见的一种类型，其发病多见于中老年人群，在我国患病人口以40-50岁居多。弥漫性大B细胞淋巴瘤主要有三种亚型，分别为生发型(Germinal center B-cell like,GCB)，活化型(activated B-cell-like,ABC)和原发纵膈型(Primary mediastinal B-cell lymphoma,PMBL)。其中的活化型弥漫性大B细胞淋巴瘤，简称ABC-DLBCL，对标准免疫化学疗法强烈耐药，是恶性程度最高，预后最差的一类亚型，目前尚无有效的治疗方法，严重威胁了患者的生命安全。因此，针对ABC-DLBCL开发有效的药物治疗手段具有十分重要的意义。
黏膜相关组织淋巴瘤异位蛋白1(mucosa-associated-lymphoid-tissuelymphoma-translocation1，MALT1)是NF-κB信号通路上游一个重要的蛋白分子，同B细胞慢性淋巴细胞白血病/淋巴瘤蛋白(B-cell chronic lymphocyticleukemia/lymphoma10，BCL10)和含caspase募集结构的膜相关鸟苷酸激1(caspase-recruitmentdomain(CARD)containing membrane-associated guanylatekinase protein1，CARMA1)组成CBM复合物，将近端抗原受体蛋白信号传递给IκB激酶(inhibitor of nuclear factorkappa-B kinase,IKK)，进而激活NF-κB信号通路。通过激活NF-κB信号通路引发ABC-DLBCL的两条主要途径包括慢性活化的BCR转导通路和MYD88转导通路。而MALT1蛋白酶在BCR转导通路发挥关键作用。首先，作为形成CBM复合物的关键部分，MALT1招募并激活IKK；同时，MALT1蛋白酶可以通过水解IKK的两个负向调节剂A20和CYLD，进而激活NF-κB通路。
CBM复合物及其调控的NF-κB信号通路在淋巴瘤细胞的增殖和分化中发挥重要作用，在B细胞淋巴瘤，MALT淋巴瘤中均发现了CBM蛋白的异常表达。MALT淋巴瘤来源于结节外周B细胞，该淋巴瘤的发生与BCL10和MALT1基因的染色体易位有关。MALT1基因参与了复发性t(11；18)(q21；q21)染色体易位，并导致了MALT1-API2融合癌蛋白的生成。该融合蛋白的C端部分是MALT1，N端部分是cIAP2(cellular inhibitor of apoptosis 2,细胞凋亡抑制因子2)，具有激活NF-κB信号通路的能力，导致了淋巴瘤的异常增殖。在DLBCL中，CARMA1、BCL10、MALT1的沉默表达可以导致淋巴瘤细胞生长速度的减慢及诱导细胞的凋亡。加入MALT1抑制剂可以通过阻断NF-κB信号通路的激活而特异性的抑制细胞的生长。CBM蛋白的上调导致NF-κB的组成型活化，在多种癌症中检测到NF-κB活性异常，虽然其原癌基因功能并没有得到明确的阐释，但在白血病、各种淋巴瘤中都发现了CBM蛋白的过表达，因此，CBM蛋白可作为DLBCL等癌症的治疗靶点。根据CBM复合物的结构与功能，治疗策略包括阻断CBM复合物的形成和抑制MALT1蛋白酶活性两方面。鉴于MALT1是CBM复合物中唯一的酶，MALT1已经成为一个新兴的很有潜力的抗肿瘤靶标，已受到学术界和工业界与日俱增的关注，一些MALT1抑制剂已处于临床前研究阶段。
研究表明牵涉到MALT1蛋白酶的癌症类型包括(但不限于)：癌瘤(例如膀胱癌、乳腺癌、子宫颈癌、结肠直肠癌、子宫内膜癌、胃癌、头颈癌、肾癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌)；造血恶性疾病(例如弥漫大B细胞淋巴瘤、MALT淋巴瘤、多发性骨髓瘤、慢性淋巴细胞性淋巴瘤、成人T细胞白血病、急性骨髓性白血病、非霍奇金氏淋巴瘤、骨髓增生型赘生物和瓦尔登特伦氏巨球蛋白血症)；和其他赘生物(例如神经胶母细胞瘤、黑素瘤和横纹肌肉瘤)。
本领域持续需要开发用于治疗癌症和其他疾病的新药物要。
发明内容
本发明提供了一类结构新颖的、有效的联芳基类MALT1小分子抑制剂。
本发明的第一方面，提供一种式(I)所示的化合物，或其药学上可接受的盐，或其立体异构体、其对映异构体、非对映异构体、外消旋体、结晶水或溶剂合物或其混合物：
其中，
X为C1-C12直链或支链的烷基、C2-C12直链或支链的不饱和烃基、或者取代或未取代的C3-C12环烃基；
Y为N或C；优选为N；
R1、R2各自独立为氢、卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、羟甲基、甲氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、羧基、C1–C6直链或支链的烷基、C2-C6直链或支链的不饱和烃基、C1–C6直链或支链的烷氧基、C1–C6直链或支链的烷酰基或C1–C6直链或支链的烷氨基；
R3为-Lx1-Lx2-Lx3-Lx4-Lx5-M取代基；其中，Lx1、Lx2、Lx3、Lx4和Lx5各自独立地为无、羰基(C＝O)、-O-、-C＝S-、-S(O)2-、-CH2-、-CH＝CH-、C3-C8亚环烯基、-C≡C-、-N(R6)-或苯基；M为H、-OH、卤素、氰基、-N(R4)(R5)、-CH3、-C(＝O)CH3、C1-C6烷氧基、3-12元杂环基、C3-C8环烷基、5-12元杂芳基、C3-C8环烯基或6-10元芳基；所述的-Lx1-Lx2-Lx3-Lx4-Lx5-M取代基可以进一步地被一个或多个卤素、C1-C6烷基、Boc、C1-C6烷氧基、氰基、羟基、＝O、＝CH2(即亚甲基通过双键取代基团上的两个氢原子)、乙烯基(-CH＝CH2)、-(CH2)k-N(R4)(R5)、-(CH2)k-(C＝O)-N(R4)(R5)、-(C1-C6烷基)-OR4、-(3-12元杂环基)(C1-C6烷基)、-(CH2)k-(3-12元杂环基)或C3-C8环烷基所取代；k为0、1、2或3；R4和R5各自独立地为氢、卤素、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C3-C8环烷基、取代或未取代的3-12元杂环基，-(C1-C6烷基)-N(C1-C6烷基)(C1-C6烷基)、-(C1-C6烷基)-O-(C1-C6烷基)、或取代或未取代的苯基；R6为氢、C1-C4烷基、C3-C6环烷基、甲酰基、C1-C4烷基羰基、或C1-C4烷氧羰基；
所述取代是指基团上的一个或多个氢原子被选自下组(优选1-5个)的基团取代：羟基、卤素、氰基、硝基、氨基、羧基、-CH2OH、-CONH2、取代或未取代的C1-C6烷氧基、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C1-C6烷胺基、C1-C4烷酰基、C1-C4烷磺酰基、C1-C4烷氧羰基、C1-C4烷磺酰胺基、氧代(＝O)、:CH2、C3-C6环烷基、4-7元杂环基、-NH(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、吡咯烷酮基、哌啶基、C3-C6环烷基羰基、苯基、C2-C4炔基、取代或未取代的5-10元杂芳基；所述C1-C6烷氧基、C1-C6烷基和C1-C6烷胺基的取代基独立地选自1～3个如下基团：氧代、卤素、氰基、环丙基、羟基、氨基、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)；所述5-10元杂芳基上取代基选自1-3个如下基团：C1-C6烷基、-C1-C4亚烷基-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)。
在另一优选例中，X为-CH2-或-CH(CH3)-。
在另一优选例中，Y为N。
在另一优选例中，R1、R2各自独立为氢、卤素、氨基、硝基、羟基、甲氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、C1–C6直链或支链的烷基、C2-C6直链或支链的不饱和烃基、C1–C6直链或支链的烷氧基、C1–C6直链或支链的烷酰基或C1–C6直链或支链的烷氨基。
在另一优选例中，R1、R2各自独立为氢、卤素、氨基、硝基、羟基、甲氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、C1–C6直链或支链的烷基、C2-C6直链或支链的不饱和烃基、C1–C6直链或支链的烷氧基；更优选地，R1、R2各自独立为氢、卤素、氨基、三氟甲基、C1–C6直链或支链的烷基。
在另一优选例中，R1、R2各自独立为氢、氟、氯、氨基、硝基、羟基、甲氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、C1–C6直链或支链的烷基。
在另一优选例中，
为取代或未取代的C6-C10芳基、取代或未取代的C3-C8杂芳基，所述杂芳基含有1-4个选自氧、硫和氮的杂原子，其中所述的取代的芳基或杂芳基包括1～5个取代基，该取代基各自独立地为卤素、C1-C6直链或支链的烷基、C1–C6直链或支链的烷氧基、氰基、氨基、羟基、三氟甲基、三氟甲氧基、羧基、巯基、CONR7R8、NR7SO2R8、NR7R8、NR7COR8；其中任意两个相邻的取代基可以连接成环；
其中，R7、R8各自独立地为氢、C1-C6直链或支链的烷基、C2-C6直链或支链的不饱和烃基、C3-C8环烃基、C5-C12芳基、C3-C8杂芳基、取代或未取代的C3-C8杂环基；所述取代或未取代的C3-C8杂芳基含有1-4个选自氧、硫和氮的杂原子，并且取代的C3-C8杂环基含有一个或多个选自卤素、C1-C6直链或支链的烷基、C2-C6直链或支链的不饱和烃基、C1-C6直链或支链的烷氧基、C3-C8环烃基、C3-C8杂环基、氰基、硝基、氨基、羟基、羟甲基、三氟甲基、三氟甲氧基、羧基、巯基；
R7、R8中的任两个与相同的氮原子相连时可与相连氮原子形成环；R7、R8中的任两个与相同的碳原子相连时与相连碳原子形成环。
在另一优选例中，
选自如下结构片段：
其中环上包括1～3个R9，R9各自独立地为氢、卤素、C1-C12直链或支链的烷基、C1-C12直链或支链的烷氧基、氰基、氨基、羟基、三氟甲基、三氟甲氧基、CONR7R8、NR7SO2R8、NR7R8、NR7COR8中的取代基；其中任意两个相邻的取代基可以连接成环；
其中，R7、R8各自独立地为氢、C1-C12直链或支链的烷基、C3-C12环烃基、C5-C12芳基、C5-C12杂芳基、C3-C12杂环基；所述的C3-C12杂芳基或C3-C12杂环基含有1-4个选自氧、硫和氮的杂原子；
R7、R8中的任两个与相同的氮原子相连时可与相连氮原子形成环；R7、R8中的任两个与相同的碳原子相连时与相连碳原子形成环。
在另一优选例中，R3为-Lx1-Lx2-Lx3-Lx4-Lx5-M取代基；其中，Lx1、Lx2、Lx3、Lx4和Lx5各自独立地为无、羰基(C＝O)、-O-、-C＝S-、-S(O)2-、-CH2-、-CH＝CH-、C3-C6亚环烯基、-C≡C-、-N(R6)-或苯基；M为H、-OH、卤素、氰基、-N(R4)(R5)、-CH3、-C(＝O)CH3、C1-C6烷氧基、3-8元杂环基、C3-C8环烷基、5-8元杂芳基、C3-C8环烯基或6-10元芳基；所述的-Lx1-Lx2-Lx3-Lx4-Lx5-M取代基可以进一步地被一个或多个卤素、C1-C4烷基、Boc、C1-C4烷氧基、氰基、羟基、＝O、＝CH2(即亚甲基通过双键取代基团上的两个氢原子)、乙烯基(-CH＝CH2)、-(CH2)k-N(R4)(R5)、-(CH2)k-(C＝O)-N(R4)(R5)、-(C1-C4烷基)-OR4、-(3-8元杂环基)(C1-C4烷基)、-(CH2)k-(3-8元杂环基)或C3-C8环烷基所取代；k为0、1、2或3；R4和R5各自独立地为氢、卤素、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C3-C8环烷基、取代或未取代的3-12元杂环基，-(C1-C4烷基)-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-(C1-C4烷基)-O-(C1-C4烷基)、或取代或未取代的苯基；R6为氢、C1-C4烷基、C3-C6环烷基、甲酰基、C1-C4烷基羰基、或C1-C4烷氧羰基。
在另一优选例中，R3为取代或未取代的以下基团：-C(＝O)M、C(＝O)CH2OC(＝O)M、C(＝O)(CH2)tM、-S(O)2-苯基-M、C(＝O)NH(C6H4)OM、C(＝O)NH(C6H4)M、
M为-CH3、-OH、-N(R4)(R5)、-(CH2)k-(3-8元杂环基)、C3-C6环烷基、5-8元杂芳基、
取代是指具有选自下组的一个或多个取代基：卤素、羟基、Boc、C1-C4烷基、-N(R4)(R5)、-(CH2)k-(3-8元杂环基)、-(3-8元杂环基)(C1-C4烷基)、-(CH2)k-N(R4)(R5)、(CH2)k-(C＝O)-N(R4)(R5)、
R4和R5各自独立地为氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、-(CH2)k-(3-8元杂环基)、--(CH2)k-(4-8元杂芳基)、(C1-C4烷基)-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、＝CH2、-(CH2)k-苯基、
k为0、1、2或3；
t为1、2或3。
在另一优选例中，化合物为A1-A36中的任一个。
本发明的第二方面，提供了一种如本发明第一方面所述的式(I)化合物的制备方法，所述方法包括步骤：
其中，A，R1，R2，R3，X和Y的定义与上文对应的描述相同；
式(I)-1化合物与不同反应物经缩合反应得到式(I)化合物。
本发明的第三方面，提供一种药物组合物，包含：
第一方面所述的化合物，或其药学上可接受的盐，或其立体异构体；和
药学上可接受的载体。
在另一优选例中，所述的药物组合物包括有效量的式I化合物，所述的有效量是指治疗有效量或抑制有效量，较佳地为0.01～99.9wt％。
在另一优选例中，所述的药物组合物用于抑制MALT1蛋白酶活性。
在另一优选例中，所述药物组合用于治疗与MALT1蛋白酶活性或表达量相关的疾病。
本发明的第四方面，提供第一方面所述的化合物，或其药学上可接受的盐，或其立体异构体或者第三方面所述的药物组合物的用途，用于：
(a)制备治疗与MALT1蛋白酶活性或表达量相关的疾病的药物；
(b)制备MALT1蛋白酶靶向抑制剂；
(c)体外非治疗性地抑制MALT1蛋白酶的活性；
(d)体外非治疗性地抑制肿瘤细胞增殖；和/或
(e)治疗与MALT1蛋白酶活性或表达量相关的疾病。
在另一优选例中，所述与MALT1蛋白酶活性或表达量相关的疾病选自癌瘤、造血恶性疾病、动脉粥样硬化、再狭窄、肾小球膜细胞增殖病症、肾小球病变、糖尿病性肾病变、肾病和良性前列腺增生、眼病、以及颅缝早闭综合征。
在另一优选例中，癌瘤选自下组：膀胱癌、乳腺癌、子宫颈癌、结肠直肠癌、子宫内膜癌、胃癌、头颈癌、肾癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌、食道癌、胆囊癌、胰腺癌、甲状腺癌、皮肤癌、白血病、多发性骨髓瘤、慢性淋巴细胞性淋巴瘤、成人T细胞白血病、B细胞淋巴瘤、急性髓性白血病、霍奇金氏淋巴瘤或非霍奇金氏淋巴瘤、瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症、毛细胞淋巴瘤、博吉特氏淋巴瘤、神经胶母细胞瘤、黑素瘤和横纹肌肉瘤。
在另一优选例中，所述的肿瘤细胞为胃癌细胞株、肺癌细胞株、白血病细胞株、膀胱癌细胞株、肝癌细胞株。
在另一优选例中，所述与MALT1蛋白酶活性或表达量相关的疾病选自下组：膀胱癌、乳腺癌、子宫颈癌、结肠直肠癌、子宫内膜癌、胃癌、头颈癌、肾癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌、多发性骨髓瘤、慢性淋巴细胞性淋巴瘤、成人T细胞白血病、急性骨髓性白血病、非霍奇金氏淋巴瘤、骨髓增生型赘生物和瓦尔登特伦氏巨球蛋白血症。
在另一优选例中，所述专利化合物可用于预防或抑制一般肿瘤的转移。
本发明的第五方面，提供了一种抑制MALT1蛋白酶活性的方法，包括步骤：对抑制对象施用抑制有效量的如本发明第一方面所述的式I化合物或其药学上可接受的盐，或对抑制对象施用抑制有效量的如本发明第三方面所述的药物组合物。
在另一优选例中，所述的抑制是体内抑制或体外抑制。
应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
附图说明
图1为A10和A12对人弥漫大B淋巴瘤TMD8裸小鼠移植瘤的生长抑制作用图。
图2为A10和A12对人弥漫大B淋巴瘤TMD8荷瘤鼠体重的影响图。
具体实施方式
本发明人基于长期而深入的研究，制备了一类具有式I所示结构的化合物，并发现其具有MALT1蛋白酶抑制活性。且所述的化合物在较低浓度下，即对MALT1蛋白酶产生抑制作用，抑制活性相当优异，因而可以用于治疗与MALT1蛋白酶活性或表达量相关的疾病如肿瘤。基于上述发现，发明人完成了本发明。
术语
如本文所用，术语“C1-C6烷基”指具有1-6个碳原子的直链或支链烷基，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、正己基和异己基，或类似基团。所述的“C1-C6烷基”定义中包括“C1-C4烷基”。
术语“C1-C6亚烷基”指C1-C6烷基失去一个氢原子之后形成的基团，例如-CH2-、-CH2-CH2-、-CH2-CH2-CH2-和-CH2-CH(CH3)-CH2-，或类似基团。所述的“C1-C6亚烷基”定义中包括“C1-C4亚烷基”。术语“C2-C6烯基”指具有1-3个双键和2-6个碳原子的直链或支链基团，例如乙烯基、丙烯基、异丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、2-甲基-1-丙烯基、1,3-丁二烯基和1,3,5-己三烯基，或类似基团。所述的“C2-C6烯基”定义中包括“C2-C4烯基”。
术语“C2-C6亚烯基”指C2-C6烯基失去一个氢原子之后形成的基团，例如-CH＝CH-和-CH2CH＝CH-，或类似基团。所述的“C2-C6亚烯基”定义中包括“C2-C4亚烯基”。
术语“C2-C6炔基”指具有1-3个叁键和2-6个碳原子的直链和支链基团，例如乙炔基、丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、1-戊炔基、2-戊炔基、3-甲基-1-丁炔基、1-己炔、1,3-己二炔基和3-己炔基，或类似基团。所述的“C2-C6炔基”定义中包括“C2-C4炔基”。
术语“C2-C6亚炔基”指C2～C6炔基失去一个氢原子之后形成的基团，例如-C≡C-和-CH2C≡C-，或类似基团。所述的“C2-C6亚炔基”定义中包括“C2-C4亚炔基”。
术语“C6-C12芳基”指具有6-12个碳原子的单环或稠合双环，具有共轭的π电子体系的取代基，例如苯基和萘基，或类似基团。所述的“C6-C12芳基”定义中包括“C6-C10芳基”。
术语“C6-C12亚芳基”指C6-C12芳基失去一个氢原子之后形成的基团，包括单环或双环亚芳基，例如亚苯基、亚萘基，或类似基团。所述的“C6-C12亚芳基”定义中包括“C6-C10亚芳基”。
术语“5-12元杂芳基”指具有5-12元的单环或稠合多环且环系上具有一个或多个选自O、S、N或P的杂原子的非饱和环系取代基，优选自5-10元的单环或稠和双环且环系上具有1-5个选自O、S、N或P的杂原子，进一步优选自5-8元单环杂芳基或8-10元双环杂芳基，最优选自5-6元单环杂芳基、苯并5-6元单环杂芳基、5-6元单环杂芳基并5-6元单环杂芳基，例如吡啶基、噻吩基、呋喃基、吡咯基、噻唑基、咪唑基、苯并呋喃基、吲哚基、吲唑基、异吲哚基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、喹啉基、异喹啉基、苯并嘧啶基和苯并吡喃基，或类似基团。
术语“C3-C8环烷基”指具有3-8个碳原子的饱和碳环基，例如环丙基、环丁基、环戊基和环己基，或类似基团。所说的“C3-C8环烷基”定义中包括“C3-C6环烷基”。
术语“C3-C8亚环烷基”指C3-C8环烷基失去一个氢原子之后形成的基团，例如亚环丙基、亚环丁基、亚环戊基和亚环己基，或类似基团。所述的“C3-C8亚环烷基”定义中包括“C3-C6亚环烷基”。
术语“C3-C8环烯基”指具有3-8个碳原子并含有1-3个双键，但不具有完全共轭的π电子系统的碳环基，例如环丙烯基、环丁烯基、环己二烯基和环庚三烯基，或类似基团。所述的“C3-C8环烯基”定义中包括“C3-C6环烯基”。
术语“3-12元杂环基”指具有3-12元的单环或稠合双环且环系上具有一个或多个(优选1-5个)选自O、S、N或P的杂原子的饱和环系取代基，例如哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、四氢呋喃基、吗啉基，或类似基团。所述的“3-12元杂环基”定义中包括“4-7元杂环基”。
术语“卤素”指氟、氯、溴或碘；优选地为氟、氯或溴。
术语“C1-C6烷氧基”指具有1-6个碳原子的直链或支链烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基、或类似基团。所述的“C1-C6烷氧基”定义中包括“C1-C4烷氧基”。
术语“C1-C6亚烷氧基”指C1-C6烷氧基失去一个氢原子之后形成的基团，例如-OCH2-、-OCH2-CH2-、-OCH(CH3)-、-OCH2-CH2-CH2-、-OCH2-CH(CH3)-、和-OCH2-CH(CH3)-CH2-，或类似基团。所述的“C1-C6亚烷氧基”定义中包括“C1-C4亚烷氧基”。
本发明中，术语“含有”、“包含”或“包括”表示各种成分可一起应用于本发明的混合物或组合物中。因此，术语“主要由...组成”和“由...组成”包含在术语“含有”中。
本发明中，术语“药学上可接受的”成分是指适用于人和/或动物而无过度不良副反应(如毒性、刺激和变态反应)，即有合理的效益/风险比的物质。
本发明中，术语“有效量”指治疗剂治疗、缓解或预防目标疾病或状况的量，或是表现出可检测的治疗或预防效果的量。对于某一对象的精确有效量取决于该对象的体型和健康状况、病症的性质和程度、以及选择给予的治疗剂和/或治疗剂的组合。因此，预先指定准确的有效量是没用的。然而，对于某给定的状况而言，可以用常规实验来确定该有效量，临床医师是能够判断出来的。
在本文中，除特别说明之处，术语“取代”指基团上的一个或多个氢原子被选自下组的取代基取代：卤素、未取代或卤代的C1-C6烷基、未取代或卤代的C2-C6酰基、未取代或卤代的C1-C6烷基-羟基。
除非特别说明，本发明中，所有出现的化合物均意在包括所有可能的光学异构体，如单一手性的化合物，或各种不同手性化合物的混合物(即外消旋体)。本发明的所有化合物之中，各手性碳原子可以任选地为R构型或S构型，或R构型和S构型的混合物。
如本文所用，术语“本发明化合物”指式I所示的化合物。该术语还包括及式I化合物的各种晶型形式、药学上可接受的盐、水合物或溶剂合物。
如本文所用，术语“药学上可接受的盐”指本发明化合物与酸或碱所形成的适合用作药物的盐。药学上可接受的盐包括无机盐和有机盐。一类优选的盐是本发明化合物与酸形成的盐。适合形成盐的酸包括但并不限于：盐酸、氢溴酸、氢氟酸、硫酸、硝酸、磷酸等无机酸，甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、苦味酸、甲磺酸、苯甲磺酸，苯磺酸等有机酸；以及天冬氨酸、谷氨酸等酸性氨基酸。
“药学上可接受的载体”指的是：一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，它们适合于人使用，而且必须有足够的纯度和足够低的毒性。“相容性”在此指的是组合物中各组份能和本发明的化合物以及它们之间相互掺和，而不明显降低活性成分的药效。药学上可以接受的载体部分例子有纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素钠、纤维素乙酸酯等)、明胶、滑石、固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁)、硫酸钙、植物油(如豆油、芝麻油、花生油、橄榄油等)、多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)、乳化剂(如
)、润湿剂(如十二烷基硫酸钠)、着色剂、调味剂、稳定剂、抗氧化剂、防腐剂、无热原水等。
式I化合物
本发明提供了一种如下式I所示的化合物：
以及通式(I)化合物中的手性碳原子的构型为R型或S型。
本发明所述的通式(I)类化合物及其对映异构体、非对映异构体、外消旋体及其混合物或其药学上可接受的盐具体优选自下列化合物之一：
本发明还提供了通式(I)化合物的制备方法，本发明所用原料及试剂如无特殊说明，均为商业购买。
本发明的第二方面，提供一种通式(I)所示的联苯类化合物、其对映异构体、非对映异构体、外消旋体、其混合物、其药学上可接受的盐、结晶水或溶剂合物的制备方法，其反应路线如下：
步骤a:将取代的间溴苯酚与
分散在溶剂中，加入三苯基膦和DEAD室温反应，经光延反应，得化合物Ia，所述溶剂为四氢呋喃；
步骤b:将Ib溶解在溶剂中，加入联频那醇硼酸酯、Pd(dppf)2Cl2和醋酸钾，加热反应，得化合物Ib，所述溶剂为DMF；
步骤c:将Ib溶解在溶剂中，加入碘代杂环、Pd(PPh3)2Cl2和碳酸钠，加热反应，得化合物Ic，所述溶剂为乙醇\甲苯\水；
步骤d:将Ic溶解在溶剂中，加入二苯甲酮亚胺、Pd2(dba)3和叔丁醇钠，加热反应，得化合物Id，所述溶剂为甲苯；
步骤e:将Id溶解在溶剂中，加入盐酸，室温反应，得化合物Ie，所述溶剂为四氢呋喃\水；
步骤f:将Ie溶解在溶剂中，加入氯甲酸对硝基苯酚酯，吡啶，取代的胺类化合物，室温反应，得化合物If，所述溶剂为二氯甲烷；或者将将Ie溶解在溶剂中，加入三乙胺、各种酰氯，室温反应得到化合物If，所述溶剂为二氯甲烷。
MALT1抑制剂及其应用
本发明化合物可抑制MALT1蛋白酶的活性。举例而言，本发明化合物可用于抑制需要抑制MALT1蛋白酶的细胞中个体或患者中该酶的活性，其通过将抑制量的本发明化合物施用该细胞、个体或患者而达成。
作为MALT1蛋白酶抑制剂，本发明化合物适用于治疗与MALT1蛋白酶活异常表达或活性相关的各种疾病。所述与MALT1蛋白酶活性或表达量相关的增殖异常疾病包含但不限与以下癌症或肿瘤疾病：哺乳动物癌症或肿瘤(如管道或者小叶肿瘤),呼吸道肿瘤(小细胞肺癌，非小细胞肺癌，小细胞/非小细胞癌症，支气管癌，支气管腺瘤，胸膜肺母细胞瘤)，脑肿瘤(如脑干和下丘脑肿瘤、星形细胞瘤、恶性胶质瘤、成神经管细胞瘤、室管膜细胞瘤、色素性神经外胚瘤、松果体肿瘤)，消化器官肿瘤(食管癌，胃癌，胆囊癌，小肠癌，大肠癌，直肠癌，肛门癌)，肝脏肿瘤(特别指肝细胞癌、胆管细胞癌、混合型肝癌)，头颈部肿瘤(喉癌、咽喉癌、鼻咽癌、口咽癌、眼癌、口腔癌)，皮肤癌(鳞状上皮细胞癌、卡波西肉瘤、恶性黑色素瘤、梅克尔细胞癌、非黑色素瘤皮肤癌)，软组织肿瘤(特别指软组织肉瘤、骨肉瘤、恶性纤维组织细胞瘤、淋巴肉瘤、横纹肌肉瘤)，眼部肿瘤(特别指眼内黑色素瘤、葡萄膜黑素瘤、成视网膜细胞瘤)，内分泌和外分泌腺肿瘤(如甲状腺和甲状旁腺肿瘤、胰腺和唾腺肿瘤)，泌尿道肿瘤(膀胱癌、阴茎肿瘤、肾癌、肾盂和输尿管肿瘤)，生殖器官肿瘤(女性的子宫内膜癌、子宫颈癌、卵巢癌、阴道癌、外阴癌、子宫癌，以及男性的前列腺癌和睾丸癌)，以及这些肿瘤转移肿瘤。
其它示例性癌症还包括在固体形态和血液细胞的增生性血液疾病如淋巴瘤和白血病，骨髓增生性疾病如急性髓系白血病、急性淋巴细胞白血病、慢性骨髓细胞性白血病、慢性粒细胞白血病、毛细胞白血病和AIDS相关的淋巴瘤、霍奇金氏淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、皮肤T细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、以及中枢神经系统淋巴瘤。
可用本发明化合物治疗的其他癌症包括眼肿瘤、神经胶母细胞瘤、黑素瘤、横纹肌肉瘤、淋巴瘤和骨肉瘤。
本发明化合物也可适用于预防或抑制一般肿瘤的转移。
本发明的化合物还可以用于组合疗法，即与一种或多种其它药剂或治疗方法，诸如抗病毒剂、化学治疗剂或其他抗癌剂、免疫增强剂、免疫抑制剂、放射性、抗肿瘤和抗病毒疫苗、细胞介素疗法和/或酪氨酸激酶抑制剂组合用于治疗MALT1蛋白酶相关疾病、病症或病状。所述药剂可与本发明化合物以单一剂型组合，或所述药剂可作为包含核苷和核苷酸逆转录酶抑制剂、非核苷逆转录酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和其他抗病毒药物。
与现有技术相比，本发明的主要优点包括：
1.本发明人发现联苯类化合物具有MALT1蛋白酶抑制活性。本发明报道的联苯类化合物为与MALT1蛋白酶异常表达或活性相关的各种疾病的治疗提供了更多选择，特别是癌症及其它增殖异常的疾病。
2.本发明化合物在动物学实验中，体现出与现有MALT1抑制剂相当乃至更佳的治疗效果。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件(如Sambrook等人，分子克隆：实验室手册(New York:Cold Spring Harbor LaboratoryPress,1989中所述的条件)，或按照制造厂商所建议的条件。实施例中，化学实验的收率百分比按摩尔比计算，药理学实验的试剂溶液百分比按体积计算。
本发明中用到的起始原料未经特别说明，均为商业购买。
如下定义反应式和实施例中所用的某些缩写：
| DEAD | 偶氮二甲酸二乙酯 |
| THF | 四氢呋喃 |
| DMF | N,N-二甲基甲酰胺 |
| BINAP | 1,1'-联萘-2,2'-双二苯膦 |
| Pd<sub>2</sub>(dba)<sub>3</sub> | 三(二亚苄基丙酮)二钯 |
| Et<sub>3</sub>N | 三乙胺 |
| DIPEA | 二异丙基乙胺 |
| Pd(PPh<sub>3</sub>)<sub>2</sub>Cl<sub>2</sub> | 双三苯基膦二氯化钯 |
实施例1 化合物3-{2-[3-(1-(2,6-二氯-3-氟)苯乙氧基)苯基l]嘧啶-5-基}-1,1-二甲基脲(A1)的制备
反应式1.1
步骤1:制备2-[1-(3-溴苯氧基)乙基]-1,3-二氯-4-氟苯(A1a)
将三苯基磷(17.50g,66.73mmol)溶于THF中，氩气保护，在冰浴下注射DEAD(10.57mL,66.73mmol)，加入1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙醇(9.30g,44.49mmol)和间溴苯酚(5.19mL,48.94mmol)的THF溶液，移至室温反应，反应过夜。TLC监测反应完全，减压蒸出溶剂，进行硅胶柱层析分离纯化(石油醚/二氯甲烷＝200:1，v/v)，得透明油状物(8.51g,收率52.84％)。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ7.24-7.29(m,1H),7.00-7.06(m,4H),6.74-6.78(m,1H),5.99(q,J＝6.9Hz,1H),1.77(d,J＝6.9Hz,3H).LRMS(ESI)m/z 363[M+H]+。
反应式1.2
步骤2:制备2-{3-[1-(2，6-二氯-3-氟苯基)苯乙氧基]苯基}-4，4，5，5-四甲基-1，2，3-二氧环戊硼烷(A1b)
将2-[1-(3-溴苯氧基)乙基]-1,3-二氯-4-氟苯(7.8g,21.43mmol)，双联频哪醇基二硼烷(5.5g,23.57mmol)分散于DMF中，依次加入醋酸钾(6.31g,64.28mmol)，1,1'-二(二苯膦基)二茂铁二氯化钯(II)(875mg,1.071mmol)，在氩气保护下，80℃过夜反应。TLC监测反应完全，乙酸乙酯和水萃取三遍，合并有机层，饱和食盐水洗涤有机层，无水硫酸钠干燥.减压蒸出溶剂，进行硅胶柱层析分离(石油醚/二氯甲烷＝2:1，v/v)，得浅黄色固体(7.67g,收率87.12％)。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ7.38(d,J＝2.4Hz,1H),7.32(d,J＝7.2Hz,1H),7.17-7.25(m,2H),6.98(t,J＝8.4Hz,1H),6.90(dd,J＝2.4,8.1Hz,1H),6.05(q,J＝6.3Hz,1H),1.77(d,J＝6.6Hz,3H),1.31(d,J＝3.9Hz,12H).LRMS(ESI)m/z 411[M+H]+。
反应式1.3
步骤3:制备5-溴-2-{3-[1-(2,6-二氯-3-氟苯基)苯乙氧基]苯基}嘧啶(A1c)
将2-{3-[1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基]苯基}-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧环戊硼烷(15g,36.49mmol)和2-碘-5-溴嘧啶(9.9g,34.75mmol)分散于甲苯/乙醇(v/v，1:2)的混合溶剂中，依次加入Pd(PPh3)2Cl2(1.22g,1.74mmol)，1.5M的碳酸钠溶液(46.33mL,69.50mmol)，在氩气保护下80℃过夜反应。TLC监测反应完全，乙酸乙酯和水萃取三遍，合并有机层，饱和食盐水洗涤有机层，无水硫酸钠干燥。减压蒸出溶剂，进行硅胶柱层析分离(石油醚/乙酸乙酯＝50:1，v/v)，得黄色固体(9.53g,收率62.00％)。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ8.80(s,2H),7.98-7.80(m,1H),7.94-7.97(m,1H),7.31(t,J＝7.8Hz,1H),7.22-7.25(m,1H),6.97-7.02(m,2H),6.14(q,J＝6.9Hz,1H),1.82(d,J＝6.6Hz,3H).LRMS(ESI)m/z 442[M+H]+。
反应式1.4
步骤4：制备2-{3-[1-(2,6-二氯-3-氟苯基)苯乙氧基]苯基}-N-(二苯亚甲基)嘧啶-5-胺(A1d)
将5-溴-2-{3-[1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基]苯基}嘧啶(8.20g,18.55mmol)，叔丁醇钠(2.5g,25.97mmol)，BINAP(692.94mg,1.11mmol)，Pd2(dba)3(339.68mg,0.371mmol)分散于无水甲苯中，加入二苯甲酮亚胺(3.77mL,21.33mmol)，在氩气保护下，125℃反应2h，移至室温反应2h。TLC监测反应完全，减压蒸出溶剂，乙酸乙酯和水萃取三遍，合并有机层，饱和食盐水洗涤有机层，无水硫酸钠干燥。减压蒸出溶剂，进行硅胶柱层析分离(石油醚/乙酸乙酯＝2:1)，得黄色油状物(9g,收率89.46％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.22(s,2H),7.94-7.95(m,1H),7.86(d,J＝8.0Hz,1H),7.81(s,1H),7.78(d,J＝1.2Hz,1H),7.51-7.55(m,1H),7.43-7.47(m,2H),7.31-7.36(m,3H),7.26(d,J＝16.0Hz,1H),7.21(dd,J＝4.8,8.8Hz,1H),7.15-7.17(m,2H),6.98(t,J＝8.4Hz,1H),6.90(dd,J＝2.8,8.4Hz,1H),6.12(q,J＝6.4Hz,1H),1.80(d,J＝6.4Hz,3H).LRMS(ESI)m/z 542[M+H]+。
反应式1.5
步骤5：制备2-{3-[1-(2,6-二氯-3-氟苯基)苯乙氧基]苯基}嘧啶-5-胺(A1e)
将2-{3-[1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基]苯基}-N-(二苯亚甲基)嘧啶-5-胺(9.20g,16.96mmol)分散于2.5M盐酸/THF(v/v,1:10)的混合溶液中，室温反应14h。TLC检测反应完全，乙酸乙酯和水萃取三遍，合并有机层，饱和食盐水洗涤有机层，无水硫酸钠干燥。减压蒸出溶剂，进行硅胶柱层析分离(石油醚/乙酸乙酯＝4:1)，得黄色固体(4.75g,收率74.00％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.25(s,2H),7.90(dd,J＝1.2,2.4Hz,1H),7.82-7.84(m,1H),7.26(d,J＝16.0Hz,1H),7.21(dd,J＝4.8,8.8Hz,1H),6.97(dd,J＝8.0,8.8Hz,1H),6.86-6.89(m,1H),6.14(q,J＝6.8Hz,1H),1.80(d,J＝6.8Hz,3H).LRMS(ESI)m/z 391[M+H]+。
反应式1.6
步骤6：制备A1
将2-(3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)苯基)嘧啶-5-胺(200mg,0.529mmol)溶于无水二氯甲烷中，在冰浴下依次加入吡啶(41.83mmL,0.529mmol)，对硝基苯基氯甲酸酯(111.02mg,0.529mmol)，移至室温反应2h，加入二甲胺(69.10mmL,0.793mmol)。TLC监测反应完全。二氯甲烷和碳酸钠水溶液萃取三遍，合并有机层，饱和食盐水洗涤有机层，无水硫酸钠干燥。减压蒸出溶剂，进行硅胶柱层析分离(二氯甲烷/甲醇＝20:1)，得白色固体(95mg,收率36.56％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.89(s,2H),7.97(dd,J＝1.6,2.4Hz,1H),7.90-7.93(m,1H),7.30(t,J＝8.0Hz,1H),7.24(dd,J＝4.8,8.8Hz,1H),6.98(dd,J＝8.0,8.8Hz,1H),6.92-6.95(m,1H),6.41(s,1H),6.15(q,J＝6.8Hz,1H),3.01(s,6H),1.82(d,J＝6.4Hz,3H).
实施例2 化合物N-{2-[3-(1-(2,6-二氯-3-氟)苯乙氧基)苯基]嘧啶-5-基}-4-甲基哌嗪-1-甲酰胺(A2)的制备
除了以N-甲基哌嗪替换二甲胺之外，以与实施例1相同的方式制备化合物A2，最后一步反应产率49.5％。1H NMR(400MHz,CD3OD):δ8.89(s,2H),7.86-7.87(m,1H),7.83-7.85(m,1H),7.35(dd,J＝5.2,9.2Hz,1H),7.23(t,J＝8.0Hz,1H),7.12-7.16(m,1H),6.92(dd,J＝2.4,8.4Hz,1H),6.15(q,J＝6.8Hz,1H),3.67-3.71(m,4H),2.89(t,J＝4.4Hz,4H),2.61(s,3H),1.78(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例3 化合物N-{2-[3-(1-(2,6-二氯-3-氟)苯乙氧基)苯基]嘧啶-5-基}吗啉-4-甲酰胺(A3)的制备
除了以吗啉替换二甲胺之外，以与实施例1相同的方式制备化合物A3，最后一步反应产率55％。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.84(s,2H),7.95(dd,J＝0.8,2.4Hz,1H),7.88-7.90(m,1H),7.29(d,J＝8.0Hz,1H),7.23(dd,J＝4.8,8.8Hz,1H),6.97(dd,J＝8.0,8.8Hz,1H),6.92(dd,J＝2.4,8.0Hz,1H),6.96(s,1H),6.13(q,J＝6.8Hz,1H),3.73(t,J＝4.8Hz，4H),3.50(t,J＝5.2Hz,4H),1.80(d,3H)。
实施例4 化合物N-{2-[3-(1-(2,6-二氯-3-氟)苯乙氧基)苯基]嘧啶-5-基}-4-(二甲氨基)哌啶-1-甲酰胺(A4)的制备
除了以4-二甲基哌啶替换二甲胺之外，以与实施例1相同的方式制备化合物A4，最后一步反应产率67％。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ8.87(s,2H),7.91-7.98(m,1H),7.86(d,J＝7.8Hz,1H),7.18-7.35(m,3H),6.96(t,J＝8.7Hz,1H),6.89(dd,J＝2.1,8.1Hz,1H),6.11(q,J＝6.3Hz,1H),4.13(d,J＝12.9Hz,2H),2.86(t,J＝12.3Hz,2H),2.31-2.42(m,1H),2.20(s,6H),1.84(d,J＝12.0Hz,2H),1.78(d,J＝6.9Hz,3H),1.39-1.51(m,2H)。
实施例5 化合物N-{2-[3-(1-(2,6-二氯-3-氟)苯乙氧基)苯基]嘧啶-5-基}-4-(吡咯烷-1-基)哌啶甲基哌嗪-1-甲酰胺(A5)的制备
除了以4-(1-吡咯烷基)哌啶替换二甲胺之外，以与实施例1相同的方式制备化合物A5，最后一步反应产率23％。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.89(s,2H),7.96(dd,J＝1.6,2.4Hz,1H),7.89-7.92(m,1H),7.29(t,J＝8.0Hz,1H),7.23(dd,J＝4.4,8.4Hz,1H),6.98(dd,J＝8.0,8.8Hz,1H),6.91-6.94(m,1H),6.87(br,1H),6.15(q,J＝6.4Hz,1H),4.09(d,J＝14.0Hz,2H),2.97-3.02(m,2H),2.63-2.66(m,4H),2.27-2.35(m,1H),1.99(dd,J＝3.2,13.6Hz,2H),1.80-1.85(m,7H),1.56-1.66(m,2H)。
实施例6 化合物N-{2-[3-(1-(2,6-二氯-3-氟)苯乙氧基)苯基]嘧啶-5-基}-4-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪-1-甲酰胺(A6)的制备
除了以1-(1-甲基-4-哌啶)哌嗪替换二甲胺之外，以与实施例1相同的方式制备化合物A6，最后一步反应产率44％。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.93(s,2H),7.96-7.97(m,1H),7.89(d,J＝7.2Hz,1H),7.27-7.45(m,1H),7.23(dd,J＝4.8,8.8Hz,1H),6.98(t,J＝9.2Hz,1H),6.91(d,J＝4.4Hz,1H),6.13(q,J＝6.8Hz,1H),3.53(s,4H),3.47(d,J＝3.2Hz,3H),2.98(d,J＝9.6Hz,2H),2.54(d,J＝3.2,4H),2.34(s,3H),2.07(t,J＝10.8Hz,2H),1.80(d,J＝6.8Hz,3H),1.77(s,1H),1.68(t,J＝12.4Hz,2H)。
实施例7 化合物N-{2-[3-(1-(2,6-二氯-3-氟)苯乙氧基)苯基]嘧啶-5-基}-4-[2-(二甲氨基)乙基]哌嗪-1-甲酰胺(A7)的制备
除了以1-(2-二甲基氨基乙基)哌嗪替换二甲胺之外，以与实施例1相同的方式制备化合物A7，最后一步反应产率39％。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ8.96(s,2H),7.94-7.98(m,1H),7.88(d,J＝7.5Hz,1H),7.60(br,1H),7.24-7.29(m,1H),7.19-7.22(m,1H),6.97(t,J＝8.7Hz,1H),6.89(dd,J＝2.1,8.1Hz,1H),6.12(q,J＝6.6Hz,1H),3.58(s,4H),2.57-2.65(m,4H),2.50(s,4H),2.44(s,6H),1.79(d,J＝6.6Hz,3H)。
实施例8 化合物(3S)-N-{2-[3-(1-(2,6-二氯-3-氟)苯乙氧基)苯基]嘧啶-5-基}-3-(-1-吡咯烷亚甲基)吡咯烷-1-甲酰胺(A8)的制备
除了以(S)-(+)-1-(2-吡咯烷甲基)吡咯烷替换二甲胺之外，以与实施例1相同的方式制备化合物A8，最后一步反应产率37％。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.97(s,2H),7.98-7.99(m,1H),7.94(d,J＝8.0Hz,1H),7.32(t,J＝8.4Hz,1H),7.26(dd,J＝5.2,9.2Hz,1H),7.15(br,1H),7.00(t,J＝8.4Hz,1H),6.95(dd,J＝2.0,8.0Hz,1H),6.16(q,J＝7.2Hz,1H),5.20(br,1H),1.83(d,J＝6.8Hz,3H),0.91-0.96(m,2H),0.74-0.77(m,2H)。
实施例9 化合物1-环丙基-3-{2-[3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)苯基]嘧啶-5-基}脲(A9)的制备
除了以环丙胺替换二甲胺之外，以与实施例1相同的方式制备化合物A9，最后一步反应产率75％。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ11.79(s,1H),8.84(s,2H),7.94-7.96(m,1H),7.88(d,J＝8.0Hz,1H),7.26-7.30(m,1H),7.23(dd,J＝4.8,8.8Hz,1H),6.98(t,J＝8.0Hz,1H),6.90(d,J＝8.0Hz,1H),6.15(q,J＝6.4Hz,1H),3.90(d,J＝36.8Hz,2H),3.73-3.43(m,1H),2.52-3.01(m,5H),2.12-2.21(m,1H),2.01(s,1H),1.95(s,4H),1.80-1.85(m,5H),1.66(s,1H)。
实施例10 化合物1-{2-[3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)苯基]嘧啶-5-基}-3-[3-(1-吡咯烷基)乙基]脲(A10)的制备
除了以1-(2-氨基乙基)吡咯烷替换二甲胺之外，以与实施例1相同的方式制备化合物A10，最后一步反应产率56％。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.85(s,2H),7.95-7.96(m,1H),7.88-7.90(m,1H),7.28(t,J＝8.0Hz,1H),7.23(dd,J＝4.8,8.4Hz,1H),6.95-7.00(m,1H),6.90(dd,J＝2.4,8.0Hz,1H),6.14(q,J＝6.8Hz,1H),5.87(br,1H),3.39-3.41(m,2H),2.84(t,J＝4.8Hz,2H),2.76-2.79(m,4H),1.92-1.94(m,4H),1.80(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例11 化合物1-{2-[3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)苯基]嘧啶-5-基}-3-[4-(1-吡咯烷基)丙基]脲(A11)的制备
除了以1-(3-氨基丙基)吡咯烷替换二甲胺之外，以与实施例1相同的方式制备化合物A11，最后一步反应产率40％。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.87(s,2H),7.93-7.95(m,1H),7.88(d,J＝8.0Hz,1H),7.24-7.29(m,1H),7.20(dd,J＝8.0,12.8Hz,1H),6.97(t,J＝8.8Hz,1H),6.90(dd,J＝2.8,8.4Hz,1H),6.13(q,J＝6.4Hz,1H),3.48(d,J＝1.2Hz,1H),3.36(d,J＝4.4Hz,2H),3.13(s,1H),2.60-2.64(m,6H),1.79-1.83(m,7H),1.76(t,J＝6.0Hz,2H)。
实施例12 化合物1-{2-[3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)苯基]嘧啶-5-基}-3-[2-(二乙氨基)乙基]脲(A12)的制备
除了以N,N-二乙基乙二胺替换二甲胺之外，以与实施例1相同的方式制备化合物A12，最后一步反应产率60％。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.89(s,2H),7.94(dd,J＝1.6,2.0Hz,1H),7.87-7.89(m,1H),7.25-7.29(m,1H),7.21(dd,J＝4.4,8.4Hz,1H),6.96(dd,J＝8.0,8.4Hz,1H),6.88-6.91(m,1H),6.12(q,J＝6.8Hz,1H),3.49-3.78(m,2H),3.36-3.41(m,2H),2.76-2.79(m,5H),1.80(d,J＝6.8Hz,3H),1.15(t,J＝7.2Hz,6H)。
实施例13 化合物1-{2-[3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)苯基]嘧啶-5-基}-3-[2-(哌啶基)乙基]脲(A13)的制备
除了以1-(2-氨乙基)哌啶替换二甲胺之外，以与实施例1相同的方式制备化合物A13，最后一步反应产率61％。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.89(s,2H),7.93-7.94(m,1H),7.86(d,J＝7.6Hz,1H),7.24-7.28(m,1H),7.20(dd,J＝4.8,8.8Hz,1H),6.96(t,J＝8.4Hz,1H),6.89(dd,J＝2.4,8.0Hz,1H),6.12(q,J＝6.8Hz,1H),3.31-3.39(m,3H),2.61(t,J＝5.2Hz,2H),2.51-2.57(m,3H),1.79(d,J＝6.4Hz,3H),1.60-1.66(m,4H),1.48-1.49(m,2H)。
实施例14 化合物1-{2-[3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)苯基]嘧啶-5-基}-3-[2-(吗啉基)乙基]脲(A14)的制备
除了以N-(2-氨基乙基)吗啉替换二甲胺之外，以与实施例1相同的方式制备化合物A14，最后一步反应产率33％。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.88(s,2H),7.95(dd,J＝1.6,2.8Hz,1H),7.88-7.90(m,1H),7.27-7.31(m,1H),7.22(dd,J＝4.8,8.8Hz,1H),6.97(dd,J＝8.0,8.8Hz,1H),6.90-6.93(m,1H),6.13(q,J＝6.8Hz,1H),5.70(br,1H),3.70(t,J＝4.8Hz,4H),3.39(q,J＝5.2Hz,2H),2.57(t,J＝5.2Hz,2H),2.52(t,J＝3.6Hz,4H),2.27(br,1H),1.80(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例15 化合物1-{2-[3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)苯基]嘧啶-5-基}-3-(哌啶基-4-亚甲基)脲(A15)的制备
除了以4-氨甲基吡啶替换二甲胺之外，以与实施例1相同的方式制备化合物A15，最后一步反应产率45％。1H NMR(400MHz,CD3OD):δ9.22(s,1H),8.93(s,2H),8.52(dd,J＝1.6,4.0Hz,2H),7.83-7.85(m,2H),7.52(dd,J＝4.8,8.8Hz,1H),7.38-7.43(m 1H),7.31-7.36(m,3H),7.15(t,J＝6.0Hz,1H),6.90-6.93(m,1H),6.12(q,J＝6.4Hz,1H),4.36(d,J＝6.4Hz,2H),1.76(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例16 化合物N-{2-[3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)苯基]嘧啶-5-基}环丙基酰胺(A16)的制备
将2-{3-[1-(2,6-二氯-3-氟苯基)苯乙氧基]苯基}嘧啶-5-胺(150mg,0.397mmol)分散于无水二氯甲烷中，在冰浴下加入Et3N(0.066mL,0.476mmol)，滴加环丙基甲酰氯(0.040mL,0.436mmol)，移至室温反应。TLC检测反应完全，二氯甲烷和水萃取三遍，合并有机层，饱和食盐水洗涤有机层，无水硫酸钠干燥，减压蒸出溶剂，进行硅胶柱层析分离(二氯甲烷/甲醇＝100:1)，的白色固体(164mg，收率92.66％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.74(s,2H),8.05-8.06(m,1H),8.02-8.04(m,1H),7.33(t,J＝8.0,1H),7.23(dd,J＝4.4,8.4Hz,1H),6.96-7.04(m,2H),6.15(q,J＝6.4Hz,1H),3.43-3.44(m,5H),1.81-1.83(d,J＝6.4Hz,3H).
实施例17 化合物2-{2-[3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)苯基]嘧啶-5-胺}-2-氧代乙醇乙酸酯(A17)的制备
除了以乙酰氧基乙酰氯替换环丙基甲酰氯之外，以与实施例16相同的方式制备化合物A17，最后一步反应产率69％。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ9.03(s,2H),7.99(dd,J＝1.6,2.8Hz,1H),7.94-7.97(m,1H),7.92-7.93(m,1H),7.31(t,J＝8.0Hz,1H),7.25(dd,J＝4.8,8.8Hz,1H),6.95-7.02(m,2H),6.15(q,J＝6.4Hz,1H),4.77(s,2H),2.20(s,3H),1.82(d,J＝6.4Hz,3H)。
实施例18 化合物N-{2-[3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)苯基]嘧啶-5-基}-2-羟乙酰胺(A18)的制备
将2-{2-[3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)苯基]嘧啶-5-胺}-2-氧代乙醇乙酸酯(117mg,0.244mmol)分散于甲醇/四氢呋喃/水(v/v/v，2:1:1)的混合溶剂中，加入一水合氢氧化锂(51.32mg,1.22mmol)，室温搅拌。TLC监测反应完全，减压蒸出溶剂，乙酸乙酯和水萃取三遍，合并有机层，饱和食盐水洗涤有机层，无水硫酸钠干燥。减压蒸出溶剂，进行硅胶柱层析分离(石油醚/乙酸乙酯＝2:1)，得白色固体(60mg，收率56.22％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ9.21(s,2H),8.82(br,1H),7.97-8.01(m,2H),7.34(t,J＝8.4Hz,1H),7.24-7.25(m,1H),7.00-7.03(m,2H),6.15(q,J＝9.2Hz,1H),4.38(s,2H),1.83(d,J＝6.4Hz,3H).
实施例19 化合物N-{2-[3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)苯基]嘧啶-5-基}-2-(4-甲基哌嗪)乙酰胺(A19)的制备
反应式2.1
步骤1：制备2-{2-[3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)苯基]嘧啶-5-胺}-2-氧代甲烷磺酸乙酯(A19a)
将N-{2-[3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)苯基]嘧啶-5-基}-2-羟乙酰胺(360mg,0.826mmol)分在于20ml无水二氯甲烷中，在冰浴下加入Et3N(0.127mL,0.908mmol)，甲烷磺酰氯(0.070mL,0.908mmol)，移至室温搅拌。TLC监测反应完全，二氯甲烷和水萃取三遍，合并有机层，饱和食盐水洗涤有机层，无水硫酸钠干燥。减压蒸出溶剂，进行硅胶柱层析分离(石油醚/乙酸乙酯＝2:1)，得黄色固体(410mg，收率96.60％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ9.04(s,2H),8.24(br,1H),7.99(dd,J＝1.2,2.0Hz,1H),7.95-7.97(m,1H),7.31(t,J＝8.4Hz,1H),7.24(dd,J＝4.8,8.8Hz,1H),6.95-7.01(m,1H),6.15(q,J＝9.2Hz,1H),4.86(s,2H),3.23(s,3H),1.82(d,J＝6.8Hz,3H)。
反应式2.2
步骤2：制备A19
将2-{2-[3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)苯基]嘧啶-5-胺}-2-氧代甲烷磺酸乙酯(424mg,0.824mmol)分散于无水THF中，在冰浴下加入DIPEA(0.215mL,1.24mmol)，N-甲基哌嗪(0.137mL,1.24mmol)，移至室温反应。TLC监测反应完全，乙酸乙酯和水萃取三遍，合并有机层，饱和食盐水洗涤有机层，无水硫酸钠干燥。减压蒸出溶剂，进行硅胶柱层析分离(二氯甲烷/甲醇＝50:1)，得白色固体(253mg，收率59.20％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ9.24(br,1H),9.06(s,2H),7.99(dd,J＝1.2,2.4Hz,1H),7.94-7.97(m,1H),7.32(t,J＝8.0Hz,1H),7.25(dd,J＝5.2,8.8Hz,1H),6.99(dd,J＝8.4,8.8Hz,1H),6.95-6.97(m,1H),6.16(q,J＝6.4Hz,1H),3.25(s,2H),2.65-2.77(m,8H),2.43(s,3H),1.81(d,J＝6.8Hz,3H).。
实施例20 化合物N-{2-[3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)苯基]嘧啶-5-基}甲基丙烯酰胺(A20)的制备
除了以甲基丙烯酰氯替换环丙基甲酰氯之外，以与实施例16相同的方式制备化合物A20，最后一步反应产率60％。1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.02(s,2H),8.01–7.85(m,2H),7.78(s,1H),7.32–7.19(m,2H),7.04–6.89(m,2H),6.13(q,J＝6.7Hz,1H),5.88–5.78(m,1H),5.62–5.45(m,1H),2.06(s,3H),1.80(d,J＝6.6Hz,3H)。
实施例21 N-(2-(3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)苯基)嘧啶-5-基)-4-甲基苯磺酰胺(A21)的制备
除了以对甲苯磺酰氯替换环丙基甲酰氯之外，以与实施例16相同的方式制备化合物A21，最后一步反应产率85％。MS(ESI,m/z):533(M+H)+。
实施例22 化合物N-(2-(3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)苯基)嘧啶-5-基)丙烯酰胺(A22)的制备
除了以对丙烯酰氯替换环丙基甲酰氯之外，以与实施例16相同的方式制备化合物A22，最后一步反应产率63％。MS(ESI,m/z):433(M+H)+。
实施例23 化合物4-(4-(3-(2-(3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)苯基)嘧啶-5-基)脲基)苯氧基)-N-甲基吡啶酰胺(A23)的制备
除了以4-(4-氨基苯氧基)-N-甲基-2-吡啶甲酰胺替换二甲胺之外，以与实施例1相同的方式制备化合物A23，最后一步反应产率47％。MS(ESI,m/z):646(M-H)-。
实施例24 化合物1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-3-(2-(3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)苯基)嘧啶-5-基)脲(A24)的制备
除了以2-氯-5-氨基三氟甲苯替换二甲胺之外，以与实施例1相同的方式制备化合物A24，最后一步反应产率60％。MS(ESI,m/z):600(M+H)+。
实施例25 化合物1-(3-氯苯基)-3-(2-(3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)苯基)嘧啶-5-基)脲(A25)的制备
除了以2-(3-氯苯基)乙胺替换二甲胺之外，以与实施例1相同的方式制备化合物A25，最后一步反应产率48％。MS(ESI,m/z):558(M-H)-。
实施例26 1-(2-(3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)苯基)嘧啶-5-基)-3-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)脲(A26)的制备
除了以4-甲基-1-哌嗪乙胺替换二甲胺之外，以与实施例1相同的方式制备化合物A26，最后一步反应产率42％。MS(ESI,m/z):548(M+H)+。
实施例27 1-(2-(3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)苯基)嘧啶-5-基)-3-(2-(吡啶-2-基)乙基)脲(A27)的制备
除了以2-(2-氨乙基)吡啶替换二甲胺之外，以与实施例1相同的方式制备化合物A27，最后一步反应产率77％。MS(ESI,m/z):527(M+H)+。
实施例28 1-(2-(3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)苯基)嘧啶-5-基)-3-(2-羟乙基)脲(A28)的制备
除了以乙醇胺替换二甲胺之外，以与实施例1相同的方式制备化合物A28，最后一步反应产率25％。MS(ESI,m/z):466(M+H)+。
实施例29 1-(2-(3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)-4-氟苯基)嘧啶-5-基)-3-(2-(二乙氨基)乙基)脲(A29)的制备
除了以5-溴-2-氟苯酚替换间溴苯酚之外，以与实施例12相同的方式制备化合物A29，最后一步反应产率55％。MS(ESI,m/z):539(M+H)+。
实施例30 叔丁基3-(3-(2-(3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)-苯基)嘧啶-5-基)脲基)吡咯烷-1-羧酸酯(A30)的制备
除了以3-氨基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯替换二甲胺之外，以与实施例1相同的方式制备化合物A30，最后一步反应产率48％。MS(ESI,m/z):591(M+H)+。
实施例31 1-(2-(3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)-苯基)嘧啶-5-基)-3-(哌啶-3-基)脲(A31)的制备
步骤1：制备叔丁基3-(3-(2-(3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)-苯基)嘧啶-5-基)脲基)哌啶-1-羧酸酯(A31a)
除了以1-叔丁氧羰基-3-氨基哌啶替换二甲胺之外，以与实施例1相同的方式制备化合物A31a，最后一步反应产率39％。MS(ESI,m/z):605(M+H)+。
反应式3.1
步骤2：制备A31
化合物A31a(200mg,0.33mmol)溶于10mL二氯甲烷溶液和2.5mL三氟乙酸，室温反应过夜，有机相依次用3×30mL饱和碳酸氢钠、饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压蒸除溶剂，得黑色油状物质,经柱层析(DCM/MeOH 50/1-10/1,v/v)分离纯化，得130mg淡黄色固体，产率78％。MS(ESI,m/z):505(M+H)+。
实施例32 1-(2-(3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)-苯基)嘧啶-5-基)-3-(吡咯烷-3-基)脲(A32)的制备
除了以3-氨基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯替换1-叔丁氧羰基-3-氨基哌啶之外，以与实施例31相同的方式制备化合物A32，最后一步反应产率80％。MS(ESI,m/z):491(M+H)+。
实施例33 1-(2-(3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)-苯基)嘧啶-5-基)-3-(2-(4,4-二氟哌啶-1-基)乙基)脲(A33)的制备
除了以4,4-二氟氨基乙基哌啶替换二甲胺之外，以与实施例1相同的方式制备化合物A33，最后一步反应产率43％。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ9.08(s,1H),8.90(s,2H),7.89–7.75(m,2H),7.52(dd,J＝9.0,4.9Hz,1H),7.37(dt,J＝28.6,8.4Hz,2H),6.98–6.82(m,1H),6.45(t,J＝5.5Hz,1H),6.12(q,J＝6.6Hz,1H),3.24(q,J＝6.1Hz,2H),2.59–2.42(m,6H),1.96(tt,J＝14.3,11.6,5.5Hz,4H),1.75(d,J＝6.6Hz,3H).MS(ESI,m/z):569(M+H)+。
实施例34 1-(2-(3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)-苯基)嘧啶-5-基)-3-(1-甲基哌啶-3-基)脲(A34)的制备
化合物A31(150mg,0.3mmol)溶于1mL甲醇溶液和0.1mL乙醛水溶液，于室温下加入氰基硼氢化钠(28mg,0.45mmol)，反应过夜，待反应完全，浓缩反应液，用EA萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压蒸除溶剂，经柱层析(DCM/MeOH 50/1-10/1,v/v)分离纯化，得60mg淡黄色固体，产率40％。MS(ESI,m/z):505(M+H)+。
实施例35 1-(2-(3-(苄氧基)苯基)乙氧基)-苯基)嘧啶-5-基)-3-(2-(二乙氨基)乙基)脲(A35)的制备
除了以3-苄氧基溴苯替换间溴苯酚之外，以与实施例12相同的方式制备化合物A35，最后一步反应产率38％。MS(ESI,m/z):420(M+H)+。
实施例36 1-(2-(二乙氨基)乙基)-3-(2-(3-乙氧基苯基)嘧啶-5-基)脲(A36)的制备
除了以3-乙氧基溴苯替换间溴苯酚之外，以与实施例12相同的方式制备化合物A36，最后一步反应产率60％。MS(ESI,m/z):358(M+H)+。
药理学实验
本发明还针对联苯类化合物对MALT1蛋白酶、MALT1依赖性的肿瘤细胞增殖抑制活性，及裸小鼠皮下移植MALT1依赖肿瘤的生长抑制作用进行了药理学实验。药理学实验所需要的实验材料除特殊说明外，均为商业购买。
一、MALT1蛋白酶抑制剂活性实验
仪器：酶标仪Envision TM(PerkinElmer,USA)
材料：384孔黑色板(Greiner Bio One,Wemmel,Belgium,catalogue#784076)
实验步骤大致如下：
1)配制缓冲液A，体系如下：HEPES(20mM，pH 7.5)，KCl(10mM)，MgCl2(1.5mM)，EDTA(1mM)，DTT(1mM)和Triton X-100(0.01％)
2)在缓冲液A中，依次加入LZ-MALT1(100nM)，Ac-LRSR-AMC(200μM)，和待测化合物(12.5μM)，终体积20μL。
3)用酶标仪在360/465nm的激发光/发射光波长条件下测定反应数值。为排除由于化合物自发荧光所造成的假阳性结果，每一个反应检测两个时间点数值。这两个时间点间的荧光差值(T2-T1)反应的是MALT1的活性。使用对照组检测值的平均值来计算百分比抑制率。
使用如下公式计算最终的百分比抑制率：
{[荧光强度待测化合物(T2-T1)-荧光强度阴性对照(T2-T1)]/[荧光强度阳性对照(T2-T1)-荧光强度阴性对照(T2-T1)]}×100
阳性对照为β-lapachone；阴性对照为空白缓冲液。在设定抑制率阈值为40％的条件下，筛选出MALT1的潜在抑制剂。进一步使用量效实验对上述阳性结果进行了验证，在0.122M-62.5M的剂量范围内检测候选化合物的IC50(50％抑制率)。
二、MALT1依赖性肿瘤细胞增殖抑制活性测试
实验步骤为：对数生长期的DLBCL细胞株在含相应培养液的96孔板中培养过夜，第二天向细胞中加入各候选化合物，每个化合物按3.16倍的稀释比例设置浓度梯度。细胞增殖是通过荧光发光法定量检测细胞内ATP的含量来检测细胞数(CellTiter-Glo,Promega,Madison,WI)。DLBCL细胞株在化合物处理0小时和72小时后，用多功能酶标仪(SpectraMaxParadigm,Molecular Devices,USA)检测荧光信号。候选化合物的生长抑制率的计算公式为：如果72小时荧光值(T72)大于0小时荧光值(T0)，生长抑制率＝(T72cpd-T0)/(T72DMSO-T0)*100；如果T72小于T0，生长抑制率＝(T72cpd-T0)/T0*100。用GraphPad Prism 5软件来绘制细胞生长抑制曲线图，并计算抑制50％细胞生长的小分子化合物浓度。每个实验设置3个复孔。
表1：化合物对MALT1蛋白酶及MALT1依赖性肿瘤细胞株增殖抑制活性测定结果
由以上可见，所测试的化合物对MALT1蛋白酶有很好的抑制剂活性，其中,化合物A10、A12表现出较优的酶水平活性，对ABC-DLBCL细胞株(HBL1和TMD8)也有很好的增殖抑制活性。且对GCB-DLBCL细胞株(LY1)表现出一定的选择性。
三、荷瘤小鼠肿瘤生长抑制实验
实验方法雄性NOD-SCID小鼠，体重20±3g，TMD8细胞株接种NOD-SCID小鼠右侧腋窝皮下，细胞接种量为1×107/只，待成瘤后，用游标卡尺测量移植瘤直径，肿瘤长至100-300mm3，将动物按体重和肿瘤体积分为模型对照组和给药组，每组6只，模型对照组则给等量空白溶剂。分组后每天腹腔给药，持续14天，实验过程中，每周2次测量移植瘤直径，并每天称量小鼠体重。
图1为A12和A10对人活化型弥漫性大B淋巴瘤TMD8细胞NOD-SCID小鼠移植瘤的生长抑制作用结果，A为A12及A10化合物对TMD细胞肿瘤的生长曲线，B为14天后三组肿瘤的大小，C为肿瘤的重量比较。
图2为A12和A10对人活化型弥漫性大B淋巴瘤TMD8细胞NOD-SCID小鼠体重的影响图。
实验结果如图1和图2所示。化合物A12 50mg/kg组每天腹腔给药一次，连续给药14天，对人活化型弥漫性大B淋巴瘤TMD8细胞NOD-SCID小鼠移植瘤的生长具有明显抑制作用，且给药期间未出现动物死亡。化合物A10 50mg/kg组，每天腹腔注射给药一次，连续给药14天，对人活化型弥漫性大B淋巴瘤TMD8细胞NOD-SCID小鼠移植瘤的生长具有明显抑制作用，但实验期间出现小鼠死亡。给药组小鼠体重均有微弱下降。
工业实用性
本发明的联苯类化合物毒性低，溶解性好。
本发明的联苯类化合物及其衍生物的制备方法具有反应条件温和、原料丰富易得、操作及后处理简单、对应选择性好等优点。
本发明的联苯类化合物及其衍生物对MALT1蛋白酶及MALT1依赖性的肿瘤细胞株增殖有很好的抑制活性和优良的选择性。
因此，本发明的化合物可用于可用于治疗与MALT1蛋白酶活异常表达或活性相关的各种疾病，如癌症、肿瘤等疾病的药物中的用途。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
Claims (13)
1.一种式(I)所示的化合物，或其药学上可接受的盐或其立体异构体：
其中，
X为-CH(CH3)-；
Y为N；
R1为氢、卤素；
R2为氢；
R3为取代或未取代的以下基团：-C(＝O)M；其中，M为-N(R4)(R5)；取代是指具有选自下组的一个或多个取代基：卤素、Boc、C1-C4烷基；R4和R5各自独立地为氢、-(CH2)k-(3-8元杂环基)、-(C1-C4亚烷基)-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)；k为0、1、2或3；
2.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R1为氢、氟或氯。
3.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，化合物选自下组：
4.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐或其立体异构体的制备方法，其特征在于，所述方法包括步骤：
其中，A，R1，R2，R3，X和Y的定义与权利要求1相同；
式(I)-1化合物与不同反应物经缩合反应得到式(I)化合物。
5.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含：
如权利要求1所述的化合物、或其药学上可接受的盐、或其立体异构体；和
药学上可接受的载体。
6.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐或其立体异构体或者权利要求5所述的药物组合物的用途，用于：
(a)制备治疗与MALT1蛋白酶活性或表达量相关的疾病的药物；
(b)制备MALT1蛋白酶靶向抑制剂；
(c)体外非治疗性地抑制MALT1蛋白酶的活性；和/或
(d)体外非治疗性地抑制肿瘤细胞增殖。
7.如权利要求6所述的用途，其特征在于，所述与MALT1蛋白酶活性或表达量相关的疾病选自癌瘤、造血恶性疾病、动脉粥样硬化、再狭窄、肾小球膜细胞增殖病症、肾小球病变、糖尿病性肾病变、肾病和良性前列腺增生、眼病、以及颅缝早闭综合征。
8.如权利要求7所述的用途，其特征在于，所述癌瘤选自下组：膀胱癌、乳腺癌、子宫颈癌、结肠直肠癌、子宫内膜癌、胃癌、头颈癌、肾癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌、食道癌、胆囊癌、胰腺癌、甲状腺癌、皮肤癌、白血病、多发性骨髓瘤、慢性淋巴细胞性淋巴瘤、成人T细胞白血病、B细胞淋巴瘤、急性髓性白血病、霍奇金氏淋巴瘤或非霍奇金氏淋巴瘤、瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症、毛细胞淋巴瘤、博吉特氏淋巴瘤、神经胶母细胞瘤、黑素瘤和横纹肌肉瘤。
9.如权利要求6所述的用途，其特征在于，所述的肿瘤细胞为胃癌细胞株、肺癌细胞株、白血病细胞株、膀胱癌细胞株、肝癌细胞株。
10.如权利要求6所述的用途，其特征在于，所述与MALT1蛋白酶活性或表达量相关的疾病选自下组：膀胱癌、乳腺癌、子宫颈癌、结肠直肠癌、子宫内膜癌、胃癌、头颈癌、肾癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌、多发性骨髓瘤、慢性淋巴细胞性淋巴瘤、成人T细胞白血病、急性骨髓性白血病、非霍奇金氏淋巴瘤、骨髓增生型赘生物和瓦尔登特伦氏巨球蛋白血症。
11.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐或其立体异构体或者权利要求5所述的药物组合物的用途，其特征在于，用于制备预防或抑制肿瘤转移的药物。
12.如权利要求11所述的用途，其特征在于，所述肿瘤选自下组：膀胱癌、乳腺癌、子宫颈癌、结肠直肠癌、子宫内膜癌、胃癌、头颈癌、肾癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌、食道癌、胆囊癌、胰腺癌、甲状腺癌、皮肤癌、白血病、多发性骨髓瘤、慢性淋巴细胞性淋巴瘤、成人T细胞白血病、B细胞淋巴瘤、急性髓性白血病、霍奇金氏淋巴瘤或非霍奇金氏淋巴瘤、瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症、毛细胞淋巴瘤、博吉特氏淋巴瘤、神经胶母细胞瘤、黑素瘤和横纹肌肉瘤。
13.一种体外非治疗性抑制MALT1蛋白酶活性的方法，其特征在于，包括步骤：对抑制对象施用权利要求1所述的式I化合物或其药学上可接受的盐；或者对抑制对象施用权利要求5所述的药物组合物。
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